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荧光标识水处理剂的研究进展 被引量:18
1
作者 蔡超 吴大成 郭睿威 《工业水处理》 CAS CSCD 2003年第11期5-8,共4页
利用荧光示踪技术检测水处理剂的残留量是一种有效的方法。作者讨论了荧光标识水处理剂的技术优势和应用前景,较全面地综述了国内外关于荧光标识水处理剂的合成、应用等方面的研究,依据其合成方法的不同分别对物理共混、聚合物改性、荧... 利用荧光示踪技术检测水处理剂的残留量是一种有效的方法。作者讨论了荧光标识水处理剂的技术优势和应用前景,较全面地综述了国内外关于荧光标识水处理剂的合成、应用等方面的研究,依据其合成方法的不同分别对物理共混、聚合物改性、荧光单体共聚三个方面进行阐述,尤其是对荧光单体共聚制备荧光标识水处理剂作了重点介绍。并对荧光标识水处理剂在实现水处理系统在线监测和实时控制中的应用作了简要的介绍。 展开更多
关键词 水处理剂 荧光示踪 在线监测 实时控制
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RAFT聚合制备结构明确的荧光标识聚甲基丙烯酸甲酯 被引量:5
2
作者 张建华 郭睿威 +2 位作者 戚桂村 刘梅 董岸杰 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第6期691-698,共8页
以铁氰化钾为氧化剂,通过N-咔唑二硫代甲酸钠的水相氧化制备了高纯度的中间体二硫化双(N-咔唑硫代甲酰)(DTCD),DTCD以晶体的形式从水中析出,提纯简单,性质稳定.通过DTCD与偶氮二异丁腈(AIBN)或偶氮二氰基戊酸(ACVA)的反应合成了2种性能... 以铁氰化钾为氧化剂,通过N-咔唑二硫代甲酸钠的水相氧化制备了高纯度的中间体二硫化双(N-咔唑硫代甲酰)(DTCD),DTCD以晶体的形式从水中析出,提纯简单,性质稳定.通过DTCD与偶氮二异丁腈(AIBN)或偶氮二氰基戊酸(ACVA)的反应合成了2种性能优异的叔丁腈酯基RAFT试剂,N-咔唑二硫代甲酸异丁腈酯(CYCBD)和N-咔唑二硫代甲酸氰基戊酸(CVCBD),新合成工艺的副反应和杂质被大量减少,最终产物的收率可达80%以上.以CYCBD和CVCBD为可逆加成断裂链转移(RAFT)试剂,研究了它们对甲基丙烯酸甲酯(MMA)RAFT聚合的控制能力,结果表明CYCBD和CVCBD是性能优异的RAFT试剂,可以很好地用于制备结构明确、分子量分布窄的链末端咔唑标记的聚甲基丙烯酸甲酯(CPMMA),由它们所制得的CPMMA的PDI小于1.2.研究结果还表明CYCBD和CVCBD及由其合成的CPMMA在四氢呋喃(THF)溶液中具有显著的荧光特性,CPMMA在358nm处有很强的荧光发射峰,而且,在浓度范围为0.1~20μmol/L的THF溶液中,CPMMA的荧光发射强度与其浓度具有良好的线性关系.通过CYCBD和CVCBD可以方便地制备结构明确且具荧光标识的功能聚合物。 展开更多
关键词 RAFT聚合 RAFT试剂 咔唑 偶氮化合物 甲基丙烯酸甲酯 荧光标识
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RAFT试剂N-咔唑二硫代甲酸1,4-对二甲基苯双酯的合成及应用 被引量:4
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作者 张建华 郭睿威 +1 位作者 李彬 董岸杰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1668-1673,共6页
以咔唑和对二氯甲基苯为原料,合成了以咔唑为Z基团的双功能团RAFT聚合链转移试剂N-咔唑二硫代甲酸1,4-对二甲基苯双酯(PXCBD).以PXCBD为链转移试剂,以苯乙烯、丙烯酸甲酯及N,N-二丁基丙烯酰胺为单体,考察了PXCBD在RAFT聚合中合成多嵌段... 以咔唑和对二氯甲基苯为原料,合成了以咔唑为Z基团的双功能团RAFT聚合链转移试剂N-咔唑二硫代甲酸1,4-对二甲基苯双酯(PXCBD).以PXCBD为链转移试剂,以苯乙烯、丙烯酸甲酯及N,N-二丁基丙烯酰胺为单体,考察了PXCBD在RAFT聚合中合成多嵌段共聚物上的应用,并研究了PXCBD及由其合成的聚合物的荧光特性.研究结果表明,PXCBD是一种性能优异的双功能团RAFT聚合链转移试剂,可用于合成特殊结构并且带有荧光标识的功能高分子材料. 展开更多
关键词 N-咔唑二硫代甲酸1 4-对二甲基苯双酯 可逆加成-断裂链转移聚合(RAFT)试剂 嵌段共聚物 荧光标识
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应用荧光标记PCR对散发性结直肠癌进行微卫星不稳定性检测 被引量:1
4
作者 甘嘉亮 高枫 +3 位作者 唐卫中 刘小健 郭云 张小龙 《广西医学》 CAS 2011年第12期1557-1560,共4页
目的检测散发性结直肠癌微卫星情况并探讨其临床意义。方法对41例散发性结直肠癌患者,应用荧光标记PCR检测国际通用的5个微卫星位点,分析微卫星不稳定性(MSI)与临床病理参数的关系。结果 MSI检出率为24.39%(10/41),其中MSI-H为9.76%(4/4... 目的检测散发性结直肠癌微卫星情况并探讨其临床意义。方法对41例散发性结直肠癌患者,应用荧光标记PCR检测国际通用的5个微卫星位点,分析微卫星不稳定性(MSI)与临床病理参数的关系。结果 MSI检出率为24.39%(10/41),其中MSI-H为9.76%(4/41),荧光标记PCR与多重荧光PCR检出率接近;散发性结直肠癌MSI与TNM分期、性别、年龄、肿瘤部位、CEA状态无关(P>0.05)。结论荧光标记PCR是检测MSI有效快速的方法之一;散发性结直肠癌MSI与临床病理因素无关,但与预后的关系还不明确。 展开更多
关键词 结直肠癌 微卫星不稳定 荧光标记PCR
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The Preliminary Report on Rumen Protozoa Grazing Rate on Bacteria with a Fluorescence-Labeled Technique 被引量:7
5
作者 WANG Meng-zhi WANG Hong-rong +2 位作者 LI Guo-xiang CAO Heng-chun LU Zhan-jun 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2008年第6期768-774,共7页
Studies on the bacterial predation rate by rumen protozoa were carried out under laboratory conditions using a technique of fluorescence-labeled bacteria (FLB). Four Xuhuai goats were used in this experiment to obta... Studies on the bacterial predation rate by rumen protozoa were carried out under laboratory conditions using a technique of fluorescence-labeled bacteria (FLB). Four Xuhuai goats were used in this experiment to obtain rumen protozoa and bacteria. Two groups were designed as follows: One group was the whole bacteria which were labeled using fluorescence through removing free bacteria from rumen fluid (WFLB); the other group was the bacteria which were labeled using fluorescence without removing free bacteria from rumen fluid (FLB). The result indicated that the bacterial predation rates of rumen protozoa was 398.4 cells/(cell h) for the group WFLB, 230.4 cells/(cell h) for the group FLB, when the corresponding values expressed as bacteria-N, they were 2.15 pg N/(cell h) for the group WFLB, and 1.24 pg N/(cell h) for the group FLB, respectively. Extrapolating the assimilation quantity of nitrogen by ciliates on bacteria of Xuhuai goat, there were 103.2 mg N/(d capita) for the group WFLB, and 59.5 mg N/(d capita) for the group FLB, respectively. It was estimated that protein losses due to microbial recycling were 0.645 g pro/(d capita) for the group WFLB and 0.372 g pro/(d capita) for the group FLB, respectively. In addition, the fluorescence-labeled technique would be a potential assay for the determination of bacterial predation rate by rumen protozoa. 展开更多
关键词 rumen protozoa grazing rate bacteria-N fluorescence-labeled technique
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FITC标记胰岛素的合成、纯化及表征 被引量:7
6
作者 李铮 褚丽芸 郑爱萍 《中国医药指南》 2011年第16期8-10,共3页
目的以异硫氰酸荧光素(FITC)标记胰岛素(INS)制备荧光探针FITC-INS,并对FITC-INS进行纯化、结构鉴定及活性分析。方法 FITC通过共价结合标记INS分子,投料比为3∶1,采用Sephadex G-25凝胶滤过色谱柱分离和纯化FITC-INS,质谱法进行结构鉴... 目的以异硫氰酸荧光素(FITC)标记胰岛素(INS)制备荧光探针FITC-INS,并对FITC-INS进行纯化、结构鉴定及活性分析。方法 FITC通过共价结合标记INS分子,投料比为3∶1,采用Sephadex G-25凝胶滤过色谱柱分离和纯化FITC-INS,质谱法进行结构鉴定,通过测定血糖值评价FITC-INS的生物活性。结果荧光标志物FITC-INS纯度较高,与游离INS相比,FITC-INS降血糖效果无显著性差异,保留了INS的生物活性。结论本研究所制备的荧光探针FITC-INS纯度高且生物活性良好。 展开更多
关键词 胰岛素 异硫氰酸荧光素 荧光标记
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壳聚糖-海藻酸钙微球荧光标记反应对微球膜强度影响的研究 被引量:3
7
作者 范妮 薛伟明 《四川师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期231-235,共5页
以壳聚糖-海藻酸钙载药微球给药后的体内检测为研究背景,探讨不同反应条件下壳聚糖-海藻酸钙微球荧光标记反应对微球膜在模拟体液中的强度影响.以壳聚糖、海藻酸钠为微球制备载体材料,以异硫氰酸酯(FITC)为荧光标记物对微球进行荧光标记... 以壳聚糖-海藻酸钙载药微球给药后的体内检测为研究背景,探讨不同反应条件下壳聚糖-海藻酸钙微球荧光标记反应对微球膜在模拟体液中的强度影响.以壳聚糖、海藻酸钠为微球制备载体材料,以异硫氰酸酯(FITC)为荧光标记物对微球进行荧光标记.采用标记了FITC的微球在模拟体液中的膨胀率来表征微球膜的相对强度.采用相对分子质量为50 000、脱乙酰度85%、荧光标记浓度0.01 g/mL的壳聚糖,成膜液浓度0.015 g/mL,成膜时间30 min制备出的荧光微球在模拟胃、肠液中表现出良好的膜强度及稳定性.为研究壳聚糖-海藻酸钙载药微球在体内的分布、吸收、降解特性提供了适宜的入体实验条件. 展开更多
关键词 壳聚糖 海藻酸钙 微球 荧光标记 膜强度
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桂花品种SSR荧光指纹图谱的构建 被引量:16
8
作者 段一凡 王贤荣 +2 位作者 梁丽丽 李雪霞 向其柏 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第S1期1-6,共6页
利用SSR荧光标记技术筛选出的11对SSR荧光标记引物,构建了64个桂花品种的SSR指纹图谱。11对SSR引物共扩增出143个等位基因,平均每个位点13个等位基因。群体平均的观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、Shannon's信息指数(I)、观察等位... 利用SSR荧光标记技术筛选出的11对SSR荧光标记引物,构建了64个桂花品种的SSR指纹图谱。11对SSR引物共扩增出143个等位基因,平均每个位点13个等位基因。群体平均的观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、Shannon's信息指数(I)、观察等位基因数(Na)和有效等位基因数(Ne)分别为0.619 7、0.848 3、2.323 7、17.833 3和8.228 2。四季桂与秋桂(金桂、银桂和丹桂)的遗传距离较远。利用引物OF002、OF019、OSM63和OSM63中的任意2对可区分所有供试品种。64个桂花品种的SSR指纹图谱互不相同,可以作为各品种特定的图谱,为品种鉴别提供依据。 展开更多
关键词 桂花 品种 SSR荧光标记 指纹图谱
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体外法研究不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环的影响 被引量:12
9
作者 王梦芝 程欣 +3 位作者 谢文文 张柏松 刘翔 王洪荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期3831-3837,共7页
【目的】研究体外培养条件下,不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环及微生物群体的影响。【方法】3头瘤胃瘘管山羊提供瘤胃液,分别以菜籽油(A)、豆油(B)、玉米油(C)和花生油(D)为底物培养瘤胃微生物,同时设空白对照组,培养10h时用荧光标记... 【目的】研究体外培养条件下,不同油脂对瘤胃原虫吞噬细菌微循环及微生物群体的影响。【方法】3头瘤胃瘘管山羊提供瘤胃液,分别以菜籽油(A)、豆油(B)、玉米油(C)和花生油(D)为底物培养瘤胃微生物,同时设空白对照组,培养10h时用荧光标记瘤胃细菌法进行原虫吞噬细菌试验。【结果】原虫密度以对照组最高,显著高于A、B、C组(P<0.05);细菌密度以B组最高,为4.906×109cells·mL-1,显著高于对照组(P<0.05);原虫蛋白在组间差异不显著(P>0.05),细菌蛋白组以B组最高,B、C、D均高于对照组(P<0.05)。各组原虫的吞噬速率分别为:267.6(对照组)、196.2(A组)、244.4(B组)、274.4(C组)、285.4(D组)cells/(cell·h),组间差异显著(P<0.05)。吞噬细菌N的速率分别为1.445、1.059、0.320、1.482、1.541pgN·(cell·h)-1。【结论】估算每天每头山羊细菌蛋白循环量分别为121.64(对照组)、56.64(A组)、78.39(B组)、87.04(C组)和95.06(D组)mg蛋白·(d·头)-1,B组较低,仅为对照组的64.45%,且该组微生物量最大。在本试验的基础上认为4%的豆油对微循环的调控效应最好。 展开更多
关键词 油脂 瘤胃原虫 荧光标记 细菌蛋白 循环
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利用荧光标记SSR鉴别21个茶花新品种 被引量:12
10
作者 陶乃奇 张斌 +6 位作者 刘信凯 周和达 钟乃盛 严丹峰 张敏 高继银 张文驹 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期37-45,共9页
利用杜鹃红山茶(Camellia azalea)转录组数据和前人研究中获得的12个高多态性的SSR位点,采用荧光毛细管电泳分析了21个茶花杂交新品种的基因型。结果显示,12对SSR引物都能获得稳定清晰的扩增产物,且上述12个SSR位点的基因型能够完全区... 利用杜鹃红山茶(Camellia azalea)转录组数据和前人研究中获得的12个高多态性的SSR位点,采用荧光毛细管电泳分析了21个茶花杂交新品种的基因型。结果显示,12对SSR引物都能获得稳定清晰的扩增产物,且上述12个SSR位点的基因型能够完全区分上述21个茶花新品种。其中,来自同一杂交组合后代的多个品种,基因型间有差异的位点数为2–10个,来自不同杂交组合后代的品种间,其基因型有差异的位点数为5–12个。研究结果表明,上述21个茶花新品种均获得了独特的基因型标记,能准确地进行品种身份鉴定,这对以扦插或嫁接扩大生产的茶花品种的鉴定和品种权保护具有重要意义。 展开更多
关键词 山茶属 荧光标记SSR 新品种保护 品种鉴定
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用荧光染色法研究山羊瘤胃原虫对细菌吞噬速率的初报 被引量:8
11
作者 王梦芝 王洪荣 +2 位作者 李国祥 曹恒春 卢占军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期1476-1481,共6页
【目的】采用荧光染色标记细菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。【方法】利用4只装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采集瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌。试验设置清洗原虫祛除瘤胃自由细菌的荧... 【目的】采用荧光染色标记细菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。【方法】利用4只装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采集瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌。试验设置清洗原虫祛除瘤胃自由细菌的荧光全标组(WFLB)及未清洗原虫保留瘤胃自由细菌荧光标记组(FLB)。【结果】WFLB组和FLB组的吞噬速率分别为398.4cells/(cell·h)和230.4cells/(cell·h),换算为细菌N为:2.15pgN/(cell·h)/和1.24pgN/(cell·h)。【结论】每天每头羊由原虫在瘤胃内循环中带出的细菌N损失在WFLB组和FLB组分别估计为103.2mgN/(d·头)、59.5mgN/(d·头),或者细菌蛋白损失为0.645g/(d·头)和0.372g/(d·头)。结果同时表明,荧光染色标记技术可以应用于瘤胃原虫对细菌吞噬速率的研究。 展开更多
关键词 瘤胃原虫 吞噬速率 细菌N 荧光染色法
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用荧光标记细菌法研究丝兰提取物对瘤胃原虫对细菌吞噬的影响 被引量:6
12
作者 曹恒春 王洪荣 +2 位作者 王梦芝 李国祥 徐爱秋 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期417-422,共6页
采用荧光染色标记细菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。试验选用3头装有永久瘘管的徐淮山羊作为瘤胃液供体,采用体外培养法研究在精粗比为1:9的情况下,探讨不同丝兰提取物水平(A组0 mg/L... 采用荧光染色标记细菌(fluorescence labeled bacteria,FLB)技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。试验选用3头装有永久瘘管的徐淮山羊作为瘤胃液供体,采用体外培养法研究在精粗比为1:9的情况下,探讨不同丝兰提取物水平(A组0 mg/L、B组35 mg/L、C组70 mg/L)对瘤胃原虫吞噬细菌速率的影响。荧光镜检与回归分析结果表明:原虫吞噬细菌的速率:A组:339.9 cells/(cell·h);B组:314.7 cells/(cell·h);C组:339.9 cells/(cell·h)。结果表明荧光标记细菌技术能够应用于瘤胃原虫吞噬细菌速率的研究。 展开更多
关键词 荧光染色标记细菌 吞噬速率 细菌N
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干露胁迫对长牡蛎基因组DNA甲基化的影响 被引量:4
13
作者 张鑫 李琪 +1 位作者 于红 孔令锋 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期690-697,共8页
为探讨干露胁迫对海产贝类基因组DNA甲基化的影响,应用荧光标记甲基化敏感扩增多态性(fluorescencelabeled methylation sensitive amplified polymorphism,F-MSAP)技术,比较了不同干露条件下(0 d、0.5 d、1 d、3 d、5 d、7 d、9 d和11... 为探讨干露胁迫对海产贝类基因组DNA甲基化的影响,应用荧光标记甲基化敏感扩增多态性(fluorescencelabeled methylation sensitive amplified polymorphism,F-MSAP)技术,比较了不同干露条件下(0 d、0.5 d、1 d、3 d、5 d、7 d、9 d和11 d)长牡蛎(Crassostrea gigas)基因组DNA甲基化的变化。结果表明,对照组(干露处理0 d)闭壳肌与鳃组织的总体甲基化水平分别为29.76%和29.82%;干露处理0.5 d、1 d、3 d、5 d、7 d、9 d和11 d的长牡蛎全基因组甲基化水平呈现先增高后降低的趋势,其中,闭壳肌组织的总体甲基化水平分别为36.59%、38.86%、43.02%、39.30%、51.13%、46.79%和35.06%,鳃组织总体甲基化水平分别为39.39%、42.13%、39.36%、43.54%、56.19%、38.57%和28.99%;干露处理7 d的长牡蛎甲基化水平明显高于其他时期(P<0.05),11 d时甲基化水平基本恢复至初始状态。甲基化变异模式分析发现,闭壳肌与鳃组织DNA甲基化变异位点存在差异,甲基化升高位点变化程度较大(P<0.05)。以上结果表明,长牡蛎通过改变DNA甲基化模式来应答干露胁迫,发生了不同程度的甲基化与去甲基化反应,DNA甲基化与长牡蛎的抗逆性状密切相关。 展开更多
关键词 长牡蛎 干露胁迫 DNA甲基化 荧光标记甲基化敏感扩增多态性(F-MSAP)
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热休克蛋白90(Hsp90)抑制剂荧光标记探针化合物的设计合成 被引量:1
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作者 李永强 袁霞 +3 位作者 周玉美 罗志刚 陈晓光 俞晓明 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期170-173,180,共5页
目的寻找新型Hsp90抑制剂荧光标记探针化合物,用于建立高通量荧光偏振筛选模型。方法选择高活性的小分子Hsp90抑制剂(化合物1),以氟硼二吡咯为荧光标记物质,对小分子化合物进行标记,并进行荧光偏振测试窗口测定,确定正确的标记位置。结... 目的寻找新型Hsp90抑制剂荧光标记探针化合物,用于建立高通量荧光偏振筛选模型。方法选择高活性的小分子Hsp90抑制剂(化合物1),以氟硼二吡咯为荧光标记物质,对小分子化合物进行标记,并进行荧光偏振测试窗口测定,确定正确的标记位置。结果与结论设计合成了两个未见文献报道的全新探针化合物,化合物结构经IR、1H-NMR、MS和HR-MS谱确证。初步测试结果表明,当Hsp90的浓度为50nmol.L-1时,探针Ⅱ的测试窗口达到了96mp,能初步满足筛选方法建立的要求,为进一步的优化筛选打下了一定的基础。 展开更多
关键词 HSP90抑制剂 荧光标记探针 荧光偏振 高通量筛选
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荧光标记法研究鱼类GABA受体与Ro7-1986/1和Fipronil的相互作用 被引量:1
15
作者 杨姗 张博 +1 位作者 张元 任天瑞 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第3期456-462,共7页
以苯二氮卓类化合物Ro7-1986/1和氟虫腈(Fipronil)分别与异硫氰酸荧光素(FITC)反应合成了2种γ-氨基丁酸(GABA)受体的配体荧光复合物,即FITC-Ro7-1986/1(简称FITC-Ro7)和FITC-Fipronil;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振氢谱(1H N... 以苯二氮卓类化合物Ro7-1986/1和氟虫腈(Fipronil)分别与异硫氰酸荧光素(FITC)反应合成了2种γ-氨基丁酸(GABA)受体的配体荧光复合物,即FITC-Ro7-1986/1(简称FITC-Ro7)和FITC-Fipronil;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振氢谱(1H NMR)等手段对其结构进行了表征.以2种荧光配体为探针,采用荧光标记法研究了Ro7-1986/1和Fipronil与鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)脑内GABA受体的相互作用,得到了亲和常数Kd和最大结合量[RT].同时考察了GABA对Ro7-1986/1与受体相互作用的影响.研究结果表明,Ro7-1986/1和Fipronil与受体的亲和常数Kd分别为(67±5)nmol/L和(346±6)nmol/L;最大结合量[RT]分别为(13.8±1.8)pmol/mg protein和(40.6±3.5)pmol/mg protein;GABA促进了Ro7-1986/1与受体的结合,进一步的研究结果表明,鱼类与哺乳动物脑中GABA受体结构相似;相对于哺乳动物,苯吡唑类杀虫剂Fipronil对鱼类GABA的亲和力较高. 展开更多
关键词 Ro7-1986/1 氟虫腈 荧光标记法 γ-氨基丁酸(GABA)受体
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通过荧光标记的凝胶阻滞技术分析Opaque2蛋白与ZmGRAS11启动子的结合位点
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作者 朱佳梦 江海洋 +1 位作者 陈茹梅 周晓今 《生物技术进展》 2022年第6期880-887,共8页
凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是研究蛋白质与核酸结合的一种关键实验技术。EMSA技术兴起以来,使用放射性同位素、生物素标记核酸探针的手段已经非常成熟,但这两种传统的标记技术分别具有放射性探针稳定性... 凝胶阻滞实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是研究蛋白质与核酸结合的一种关键实验技术。EMSA技术兴起以来,使用放射性同位素、生物素标记核酸探针的手段已经非常成熟,但这两种传统的标记技术分别具有放射性探针稳定性差和生物素检测步骤复杂等缺点。近年来,尽管荧光标记探针逐渐被应用于EMSA中,但是对于利用荧光标记探针的EMSA仍缺乏系统的报道。对荧光标记的EMSA技术流程进行了优化和系统总结;利用6-羧基荧光素(6-carboxy-fluoroscine,FAM)标记ZmGRAS11启动子探针,通过EMSA检测其与Opaque2蛋白的结合,明确了蛋白和探针的适宜比例为8∶1。对GCN4 motif序列碱基进行突变并利用EMSA分析Opaque2与ZmGRAS11启动子之间的结合位点,结果表明GCN4 motif的“TGAC”核心基序在ZmGRAS11启动子与Opaque2蛋白的结合中可能起到了关键作用。研究结果为进一步探究Opaque2-ZmGRAS11转录调控模块在玉米籽粒发育中的作用机理提供了数据支撑。 展开更多
关键词 凝胶阻滞实验 荧光标记探针 ZmGRAS11启动子 Opaque2蛋白
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石胆酸诱导的LO2细胞胰岛素抵抗模型及其应用
17
作者 吕秋月 项佳媚 +4 位作者 乐亮 姜保平 陈四保 许利嘉 肖培根 《中南药学》 CAS 2019年第3期371-376,共6页
目的利用石胆酸刺激人正常肝细胞(LO2)建立胰岛素抵抗模型,并用于筛选具有改善胰岛素抵抗降血糖活性的化合物。方法用不同浓度石胆酸(LCA)处理LO2细胞不同时间。通过MTT法检测细胞活性,并用不同浓度胰岛素刺激细胞,采用荧光标记2-脱氧... 目的利用石胆酸刺激人正常肝细胞(LO2)建立胰岛素抵抗模型,并用于筛选具有改善胰岛素抵抗降血糖活性的化合物。方法用不同浓度石胆酸(LCA)处理LO2细胞不同时间。通过MTT法检测细胞活性,并用不同浓度胰岛素刺激细胞,采用荧光标记2-脱氧葡萄糖(2-NBDG)作为光学探针检测细胞的葡萄糖摄取能力,明确建立稳定的LO2细胞胰岛素抵抗模型所需LCA的最适浓度及时间。Western blot检测LCA对胰岛素信号通路关键蛋白:磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)、胰岛素受体底物1(IRS1)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和蛋白激酶B(AKT)表达的影响。模型建立后,以二甲双胍为阳性药,对5种黄酮类化合物奥卡宁、异奥卡宁、马里苷、黄诺马苷、紫铆因及1种环烯醚萜类化合物梓醇,进行改善胰岛素抵抗降血糖活性筛选,以2-NBDG荧光标记葡萄糖法评估细胞糖摄取情况,以MTT法评估细胞存活率。结果 LCA作用于LO2细胞可显著降低细胞糖吸收,并产生明显的胰岛素耐受,而25μmol·L^(-1) LCA作用于LO2细胞24 h,模型稳定性最好。与对照组相比,12.5和25μmol·L^(-1) LCA组IRS1的蛋白磷酸化水平显著降低(P <0.05),且12.5和50μmol·L^(-1) LCA能明显减少AKT蛋白的磷酸化水平(P <0.01)。活性筛选发现,奥卡宁、异奥卡宁及紫铆因均能显著提高细胞糖摄取能力,并且其改善细胞胰岛素抵抗降血糖活性显著优于阳性药二甲双胍。结论 LCA可诱导LO2细胞建立稳定、可靠的胰岛素抵抗模型并用于药物筛选。 展开更多
关键词 石胆酸 胰岛素抵抗 2-脫氧葡萄糖 LO2细胞
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四色荧光标记二硫键可逆终端的合成及在DNA合成测序中的应用
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作者 汤道年 江敏 +6 位作者 李小卫 康亚妮 伍新燕 龚兵 邵志峰 赵小东 沈玉梅 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2014年第11期2346-2352,共7页
分别以5-碘-2'-脱氧尿苷、5-碘-2'-脱氧胞苷、7-去氮-7-碘-2'-脱氧腺苷及7-去氮-7-碘-2'-脱氧鸟苷为原料,以二硫键为可裂解连接单元,通过多步反应合成了四色荧光标记不同碱基的脱氧核糖核苷酸;研究了该类荧光标记核苷... 分别以5-碘-2'-脱氧尿苷、5-碘-2'-脱氧胞苷、7-去氮-7-碘-2'-脱氧腺苷及7-去氮-7-碘-2'-脱氧鸟苷为原料,以二硫键为可裂解连接单元,通过多步反应合成了四色荧光标记不同碱基的脱氧核糖核苷酸;研究了该类荧光标记核苷酸作为可逆终端在DNA合成测序中的应用.所得产物结构经1H NMR,31P NMR及HRMS表征,并对其进行了DNA高通量测序的测试.结果表明,该类荧光标记核苷酸作为DNA合成测序的可逆终端能够满足高通量测序的生化反应要求,具有较好的应用前景. 展开更多
关键词 DNA合成测序 可逆终端 可裂解连接单元 四色荧光标记
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山羊下颌骨三焦点牵张成骨的超微结构观察
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作者 何志良 王承阳 +5 位作者 梁冬青 梁振刚 李石岩 李春佳 宫林利 曹雷 《临床口腔医学杂志》 2011年第10期602-604,共3页
目的:为探索三焦点牵张成骨的成骨方式及新骨改建过程提供实验依据。方法:取6只山羊下颌骨牵张成骨形成的新生骨组织及其邻近原骨组织,硬组织磨片,扫描电镜观察骨组织断面的超微结构,同时用硬组织磨片四环素荧光双标记技术分析。结果:... 目的:为探索三焦点牵张成骨的成骨方式及新骨改建过程提供实验依据。方法:取6只山羊下颌骨牵张成骨形成的新生骨组织及其邻近原骨组织,硬组织磨片,扫描电镜观察骨组织断面的超微结构,同时用硬组织磨片四环素荧光双标记技术分析。结果:牵张间隙超微结构观察显示大量新生骨小梁,骨质密度好,中央区新生类骨质沿牵张方向排列,新骨与原骨边界呈骨性融合,在牵张区内有大量的荧光结合,并与周围原有组织有明显的界限。结论:山羊下颌骨三焦点牵张成骨形成的新生骨段可逐渐改建为具有正常结构的骨组织。 展开更多
关键词 牵张成骨 三焦点牵张成骨 扫描电镜 四环素荧光双标记
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II-VI族半导体量子点的发光特性及其应用研究进展 被引量:15
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作者 唐爱伟 滕枫 +2 位作者 王元敏 周庆成 王永生 《液晶与显示》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期302-308,共7页
半导体量子点由于具有独特的发光特性而具有极高的应用价值。结合本实验室的工作介绍了半导体量子点的发光原理和发光特性,在实验中发现核壳结构的CdSe/CdS半导体量子点比没有包覆的CdSe半导体量子点的发光稳定性提高,吸收光谱和发射光... 半导体量子点由于具有独特的发光特性而具有极高的应用价值。结合本实验室的工作介绍了半导体量子点的发光原理和发光特性,在实验中发现核壳结构的CdSe/CdS半导体量子点比没有包覆的CdSe半导体量子点的发光稳定性提高,吸收光谱和发射光谱均发生红移,而且粒径不同,半导体量子点所呈现的颜色也不同,随着粒径的增加吸收光谱和发射光谱向长波方向红移。介绍了半导体量子点在光电子器件和生物医学方面的应用,并对其发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 半导体量子点 发光特性 生物荧光标记 电致发光器件
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