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调气汤对大鼠类风湿性关节炎的治疗作用和机制研究 被引量：2
1
作者 陈李泽成 李金凤 乔锋 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2023年第2期6-11,共6页
目的:研究调气汤对类风湿性关节炎的治疗作用和机制。方法:体外培养胶原诱导型关节炎大鼠成纤维样滑膜(CIA-FLS)细胞,将细胞分为对照组、TNF-α组、调气汤40,50和60μg/mL组,TNF-α(10 ng/mL)处理细胞30 min,然后用调气汤处理细胞48 h... 目的:研究调气汤对类风湿性关节炎的治疗作用和机制。方法:体外培养胶原诱导型关节炎大鼠成纤维样滑膜(CIA-FLS)细胞,将细胞分为对照组、TNF-α组、调气汤40,50和60μg/mL组,TNF-α(10 ng/mL)处理细胞30 min,然后用调气汤处理细胞48 h。检测细胞活力、细胞凋亡和细胞中Atg5、Beclin-1、LC3-Ⅰ/Ⅱ、PI3K、p-AKT、AKT、p-mTOR的蛋白表达,以及细胞上清中TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-17、IFN-γ和IL-10含量。SPF级SD大鼠(雄性,30只)随机分为对照组、模型组、低剂量组(25 mg/kg调气汤的佐剂诱导型关节炎(AIA)大鼠)、中剂量组(50 mg/kg调气汤的AIA大鼠)、高剂量组(100 mg/kg调气汤的AIA大鼠),建立胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型。采用苏木精-伊红染色观察AIA大鼠的组织病理变化,采用ELISA法测量大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量。结果:与TNF-α组比较,调气汤各剂量组细胞活力下降、细胞凋亡增加,且细胞中Atg5、Beclin-1、LC3-Ⅰ/Ⅱ、PI3K、p-mTOR蛋白表达下调,同时细胞上清中TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-17、IFN-γ含量减少,IL-10含量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,调气汤低剂量组的组织病理图像中观察到轻度骨侵蚀;调气汤中剂量和高剂量组的组织病理图像显示为正常的关节腔,没有骨侵蚀和滑膜增生;血清上清中TNF-α、IL-6和IL-1β含量均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:调气汤通过下调PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制CIA-FLS细胞增殖和自噬,并促进细胞凋亡和发挥抗炎活性,对类风湿性关节炎具有潜在的治疗活性。 展开更多
关键词 调气汤 类风湿性关节炎 成纤维滑膜细胞 自噬 肿瘤坏死因子
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人参皂苷Rg1对IL-1β诱导的人膝软骨细胞降解保护作用机制研究 被引量：4
2
作者 谷远洋 严培军 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期357-360,共4页
目的研究人参皂苷Rg1对IL-1β诱导的人膝软骨降解的保护作用及其分子机制。方法收集OA病人滑膜及软骨组织,培养成纤维滑膜细胞(FLS),采用IL-1β激发FLS细胞并与软骨骨片共培养,设空白对照组,IL-1β组(20ng/mL)为阳性对照组,不同浓度Rg1(... 目的研究人参皂苷Rg1对IL-1β诱导的人膝软骨降解的保护作用及其分子机制。方法收集OA病人滑膜及软骨组织,培养成纤维滑膜细胞(FLS),采用IL-1β激发FLS细胞并与软骨骨片共培养,设空白对照组,IL-1β组(20ng/mL)为阳性对照组,不同浓度Rg1(0、5、50μmol/L)+IL-1β(20ng/mL)为实验组。用番红O染色观察软骨降解情况,qPCR分析MMPs相关基因表达情况,ELISA法检测上清液中MMP-3表达情况,Western blot分析Rg1对OA-FLS细胞中NF-κB通路中相关蛋白的调控。结果 Rg1可以显著抑制IL-1β诱导的软骨降解,发挥软骨保护作用。Rg1对软骨保护作用主要通过抑制成纤维滑膜细胞中MMPs表达,其中主要抑制MMP-3基因和蛋白表达,且该作用可能与Rg1调控NF-κB通路有关。结论人参皂苷Rg1可以抑制IL-1β诱导的软骨降解,发挥软骨保护作用,主要通过抑制FLS中MMP-3基因和蛋白表达。 展开更多
关键词 人参皂苷RG1 IL-1Β 软骨保护 成纤维滑膜细胞
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关节滑膜炎性微环境对类风湿关节炎发生发展作用的研究进展 被引量：45
3
作者 王言 吴虹 +2 位作者 邓然 戴学静 占翔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期754-759,共6页
类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性自身免疫性疾病,其主要伴有炎症反应、滑膜增生、血管新生、血管翳形成、关节软骨和骨损坏等病理特征。近期研究发现,关节滑膜炎性微环境与RA的发生发展密切相关。本综述主要从巨噬细... 类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性自身免疫性疾病,其主要伴有炎症反应、滑膜增生、血管新生、血管翳形成、关节软骨和骨损坏等病理特征。近期研究发现,关节滑膜炎性微环境与RA的发生发展密切相关。本综述主要从巨噬细胞的极化、成纤维样滑膜细胞的异常增殖、血管内皮细胞的血管新生、以及炎症细胞因子四个方面对RA相关信号通路进行概述,通过阐明关节滑膜炎性微环境与RA发生发展的具体联系,为RA的防治治疗提供参考。 展开更多
关键词 RA 炎性微环境 巨噬细胞 成纤维样滑膜细胞 血管内皮细胞 炎症因子
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大黄素对TNF-α诱导的成纤维样滑膜细胞株MH7A细胞ERK1/2和p38MAPK的影响 被引量：34
4
作者 罗素 荣晓凤 彭菲菲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期113-117,共5页
目的观察大黄素(emodin)对TNF-α诱导的类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞ERK1/2和p38MAPK表达的影响,探讨大黄素治疗RA的作用机制。方法将体外培养的RA成纤维样滑膜细胞株MH7A分组培养、空白对照组、模型组(TNF-α,10 ng/ml)、药物组... 目的观察大黄素(emodin)对TNF-α诱导的类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞ERK1/2和p38MAPK表达的影响,探讨大黄素治疗RA的作用机制。方法将体外培养的RA成纤维样滑膜细胞株MH7A分组培养、空白对照组、模型组(TNF-α,10 ng/ml)、药物组[TNF-α(10 ng/ml)+emodin(20、40、80μmol/L)]。用免疫荧光、Western blot和RT-PCR分别测定细胞中ERK1/2、p38MAPK及mRNA的表达。结果免疫荧光示,TNF-α促进ERK1/2、p38MAPK的表达,大黄素处理后,抑制ERK1/2转核及p38MAPK的表达。模型组中,Western blot和RT-PCR测定ERK1/2、p38MAPK及mRNA表达均明显上调(P0.05);与模型组比较,大黄素各剂量组中,ERK1/2、p38MAPK及mRNA表达明显减少(P<0.05),且具有剂量依赖性。结论抑制ERK1/2和p38MAPK在成纤维样滑膜细胞中的表达是大黄素治疗类风湿性关节炎的作用机制之一。 展开更多
关键词 大黄素 类风湿性关节炎 成纤维样滑膜细胞 ERK1/2 P38MAPK
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青藤碱对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞体外增殖及凋亡的影响 被引量：31
5
作者 张莹 方勇飞 +2 位作者 王勇 李景怡 黄小鲁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1179-1182,共4页
目的观察青藤碱(sinomenine,SN)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者成纤维样滑膜细胞(fi-broblast-like synoviocytes,FLS)凋亡及增殖的影响,为青藤碱在临床上的应用提供实验依据。方法光镜和荧光显微镜观察FLS形态的变化,流... 目的观察青藤碱(sinomenine,SN)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者成纤维样滑膜细胞(fi-broblast-like synoviocytes,FLS)凋亡及增殖的影响,为青藤碱在临床上的应用提供实验依据。方法光镜和荧光显微镜观察FLS形态的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT比色法检测SN对FLS生长的抑制作用。结果光镜及荧光显微镜下可见核固缩,变圆,荧光染色增强等凋亡形态学变化。流式细胞仪结果显示,随着SN浓度及作用时间的增加,被处理的FLS的凋亡率增加,未处理组与各处理组比较差异具有显著性(P<0·05),其中3.2mmol/L浓度的SN作用48h对FLS凋亡影响最为显著。MTT结果显示,加入不同浓度SN(2.8～3.2mmol/L),培养的FLS24h、48h后对增殖的抑制水平显著高于未处理组,与凋亡率呈现正相关(r=0.787,P<0·05)。结论SN在一定浓度及作用时间内可抑制RA患者FLS增殖,诱导凋亡,这可能是SN治疗RA机制之一。 展开更多
关键词 青藤碱 滑膜细胞 增殖 凋亡
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新风胶囊含药血清对TNF-α诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡和炎症的影响 被引量：31
6
作者 文建庭 刘健 +1 位作者 王馨 王杰 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期436-443,共8页
观察新风胶囊(XFC)含药血清对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡和炎症的影响,探讨XFC治疗RA的作用机制。建立RA-FLS永生化细胞系,制备XFC含药血清,用cell counting kit-8(CCK-8)、酶联免疫吸附法(... 观察新风胶囊(XFC)含药血清对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡和炎症的影响,探讨XFC治疗RA的作用机制。建立RA-FLS永生化细胞系,制备XFC含药血清,用cell counting kit-8(CCK-8)、酶联免疫吸附法(ELISA)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫荧光、原位末端转移酶标记(TUNEL)法观察XFC含药血清对RA-FLS凋亡和炎症指标的影响。CCK-8结果显示,TNF-α对RA-FLS最佳干预浓度和时间分别为10 ng·mL-1和48 h,XFC对RA-FLS的最佳干预浓度和时间分别为6.48 mg·g^(-1)和72 h。ELISA结果表明,与RA-FLS组相比,TNF-α+RA-FLS组TNF-α,白细胞介素(IL)-1β,IL-6,IL-8的表达均显著升高,IL-4和IL-10的表达均显著降低(P<0.01);经XFC含药血清干预后,TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8的表达均显著下降,IL-4和IL-10的表达均显著升高(P<0.01)。RT-qPCR结果表明,与RA-FLS组相比,TNF-α+RA-FLS组Fas、FasL、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、caspase-8、Bax、Bcl-X1 mRNA的表达均显著降低,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)mRNA的表达显著升高(P<0.001);经XFC含药血清干预后,Fas,FasL,caspase-3,caspase-8,Bax,Bcl-X1 mRNA的表达均显著升高,Bcl-2 mRNA的表达显著下降(P<0.01)。免疫荧光结果表明,与RA-FLS组相比,TNF-α+RA-FLS组caspase-3和Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05);经XFC含药血清干预后,caspase-3和Bax蛋白表达显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。TUNEL结果表明,与RA-FLS组相比,TNF-α+RA-FLS组细胞凋亡减少(P<0.05);经XFC含药血清干预后,细胞凋亡显著增多(P<0.05)。促进RA-FLS凋亡、抑制其炎症反应是XFC治疗RA的作用机制之一。 展开更多
关键词 新风胶囊 滑膜成纤维细胞 凋亡 炎症反应
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雷公藤甲素对TNF-α诱导的滑膜细胞增殖的影响及对Ras-MAPKs信号转导通路的调控作用 被引量：29
7
作者 王建竹 连金饶 +1 位作者 孔祥英 林娜 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期888-891,共4页
目的:探讨雷公藤甲素(TP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-HFLS)增殖的影响及对Ras-MAPKs信号转导通路的调控作用。方法:不同浓度的TP(0.28,2.8,28,140 nmol.L-1)与RA-HFLS共孵育,采用MTS比色法检测... 目的:探讨雷公藤甲素(TP)对肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导的类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞(RA-HFLS)增殖的影响及对Ras-MAPKs信号转导通路的调控作用。方法:不同浓度的TP(0.28,2.8,28,140 nmol.L-1)与RA-HFLS共孵育,采用MTS比色法检测细胞增殖活性,并通过Western blot检测不同浓度的TP对TNF-α诱导的RA-HFLS Ras-MAPKs信号转导通路相关蛋白(Ras,p-P38,p-ERK,p-JNK)表达水平的影响。结果:MTS结果显示,TP可以剂量依赖性抑制RA-HFLS的增殖,其抑制率分别为0.28%,5.05%,30.83%,43.77%;Western blot结果提示TP可剂量依赖性抑制Ras-MAPKs信号转导通路相关蛋白的表达。结论:TP能抑制RA-HFLS增殖、减轻滑膜炎症,其分子机制可能与调控了Ras-MAPKs信号转导通路的异常活化有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 雷公藤甲素 MAPKS
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穿山龙总皂苷对痛风性关节炎大鼠关节炎滑膜IL-1β及其信号转导通路的影响 被引量：28
8
作者 周琦 张宁 +1 位作者 卢芳 刘树民 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期52-57,共6页
目的:考察穿山龙总皂苷(total saponins from rhizoma Dioscoreae nipponicae,RDN)对痛风性关节炎大鼠关节炎滑膜IL-1β及其介导的信号转导通路的影响。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为四组,分别为正常组、模型组、穿山龙总皂苷低(40mg... 目的:考察穿山龙总皂苷(total saponins from rhizoma Dioscoreae nipponicae,RDN)对痛风性关节炎大鼠关节炎滑膜IL-1β及其介导的信号转导通路的影响。方法:40只雄性Wistar大鼠随机分为四组,分别为正常组、模型组、穿山龙总皂苷低(40mg/kg)、高剂量组(160mg/kg),连续灌胃穿山龙总皂苷5天。第3d灌胃穿山龙总皂苷1h后,膝关节上方髌上韧带进针,注射0.2ml浓度为25mg/ml的微晶尿酸钠结晶混悬液到关节腔,造成实验性痛风性关节炎模型。采用HE和伊红染色观察关节滑膜组织病理学变化,免疫组化法检测穿山龙总皂苷对大鼠膝关节滑膜组织中IL-1β、SDF-1、CXCR4、PI3K、PKC和NF-κB表达的影响。结果:与正常组比较,模型组大鼠膝关节滑膜组织中IL-1β、SDF-1、CXCR4、PI3K、PKC和NF-κB表达水平显著升高(0.087±0.021,0.064±0.017,0.146±0.042,0.139±0.057,0.088±0.021,0.079±0.018),穿山龙总皂苷低剂量组能显著降低CXCR4表达水平(0.081±0.006)。穿山龙总皂苷高剂量组能显著降低IL-1β、CXCR4、PI3K、PKC和NF-κB表达水平(0.035±0.007,0.104±0.011,0.077±0.017,0.039±0.011,0.030±0.009)。结论:穿山龙总皂苷可抑制IL-1β及其介导的信号转导通路;穿山龙总皂苷具有治疗痛风性关节炎(Gouty Arthritis,GA)的潜在价值。 展开更多
关键词 穿山龙总皂苷 痛风性关节炎 IL-1Β SDF-1 CXCR4 PI3K PKC NF-κB
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汉黄芩素通过激活活性氧簇介导的p38MAPK信号通路诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡 被引量：26
9
作者 王慧莲 孟庆良 +1 位作者 李松伟 王济华 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期890-895,共6页
目的探讨汉黄芩素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)凋亡的影响以及作用机制。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养,应用3~5代传代的成纤维样滑膜细胞。按照不同方法处理... 目的探讨汉黄芩素对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(rheumatoid arthritis fibroblast-like synoviocytes,RA-FLS)凋亡的影响以及作用机制。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养,应用3~5代传代的成纤维样滑膜细胞。按照不同方法处理分为6组:空白对照组、低剂量汉黄芩素组(终浓度为20μg/mL)、中剂量汉黄芩素组(终浓度为50μg/mL)、高剂量汉黄芩素组(终浓度为100μg/mL)、100μg/mL汉黄芩素+NAC组、100μg/mL汉黄芩素+SB203580组。MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),DCFH-DA染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot法检测p38MAPK通路相关蛋白的表达。结果与正常对照组相比,各剂量汉黄芩素均能够抑制RA-FLS细胞的增殖,增加其凋亡,降低MMP以及增加ROS水平,激活p38MAPK信号通路,并且呈现剂量依赖性关系。ROS清除剂NAC和p38抑制剂SB203580可以明显降低汉黄芩素诱导的RA-FLS细胞的凋亡,并且5 mmol/L NAC下调汉黄芩素引起的p38MAPK磷酸化。结论汉黄芩素能够诱导RA-FLS细胞凋亡,ROS/p38MAPK信号通路参与了其凋亡的过程。 展开更多
关键词 汉黄芩素 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 细胞凋亡 中医中药
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青藤碱对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及基质金属蛋白酶-3表达的影响 被引量：22
10
作者 张娟 李娟 +1 位作者 赵毅 余克强 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2008年第3期23-25,共3页
目的观察青藤碱对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖以及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)mRNA含量的影响。方法培养人成纤维样滑膜细胞,分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组,经青藤碱干预后,用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞增殖情... 目的观察青藤碱对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖以及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)mRNA含量的影响。方法培养人成纤维样滑膜细胞,分为青藤碱高、中、低剂量组和空白对照组,经青藤碱干预后,用四甲基偶氮唑蓝法测定细胞增殖情况,用半定量RT-PCR方法检测成纤维细胞中MMP-3mRNA的表达。结果经青藤碱干预后的人成纤维样滑膜细胞的增殖率受到显著抑制(P<0.05),其中高剂量组的改变差异尤为显著(P<0.01)。MMP-3的mRNA表达水平较之空白对照组有显著下降(P<0.05),且高剂量组的差异尤为显著(P<0.01)。结论青藤碱可以抑制类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞的增殖并下调MMP-3的表达,推断这可能是青藤碱治疗类风湿关节炎的一种机理。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 青藤碱 成纤维样滑膜细胞 基质金属蛋白酶-3
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中药及其有效成分影响类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖和凋亡的研究进展 被引量：25
11
作者 刘维 杨会军 +2 位作者 吴沅皞 张磊 薛斌 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期844-850,共7页
成纤维样滑膜细胞是类风湿关节炎滑膜组织中最主要的细胞,在类风湿关节炎发病中起关键作用,是进行类风湿关节炎病理机制及治疗药物的相关药理研究的主要载体之一。近年来,针对中药及其有效成分对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡的影响开展... 成纤维样滑膜细胞是类风湿关节炎滑膜组织中最主要的细胞,在类风湿关节炎发病中起关键作用,是进行类风湿关节炎病理机制及治疗药物的相关药理研究的主要载体之一。近年来,针对中药及其有效成分对成纤维样滑膜细胞增殖、凋亡的影响开展了大量研究,部分研究并对抑制增殖和诱导凋亡的相关作用机制进行了探讨。通过综述近年研究的成果,以期为类风湿关节炎的基础研究、新药开发及临床治疗提供思路和借鉴。 展开更多
关键词 中药 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 增殖 凋亡 信号通路
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青藤碱对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MyD88、TRAF-6表达的影响 被引量：24
12
作者 张洪长 刘明昕 +3 位作者 张莹 王恩鹏 陈港 姜鸿远 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期485-489,共5页
目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类... 目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)增生导致RA软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形的作用机制。方法:体外培养RA-FLS细胞,分为对照组与(0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)SIN组,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测0.5 mmol/L SIN组的细胞增殖率;荧光定量PCR法测定对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6基因表达;Western blot法检测对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6蛋白表达。结果:SIN各组ALP活性均低于对照组,其中以0.5 mmol/L SIN组的ALP活性为最低(P<0.01)。CCK-8法检测,0.5 mmol/L SIN组RA-FLS细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01),SIN诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期,之后细胞的增殖率开始下降。荧光定量PCR和Western blot法检测,0.5 mmol/L SIN组的My D88和TRAF-6基因及蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:SIN通过对TLR信号转导通路的影响有效地抑制RA-FLS细胞内My D88和TRAF-6的表达,这可能是其治疗RA防止软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形发生的重要分子机制之一。 展开更多
关键词 青藤碱 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 髓样分化因子88 肿瘤坏死因子受体相关因子6
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苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位对人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响 被引量：22
13
作者 王霞 杨健 +5 位作者 宋菲 董莉 刘亭 郑林 马雪 李勇军 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第28期3949-3952,共4页
目的:研究苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位(CADF)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响,探讨CADF抗RA的作用机制。方法:将MH7A细胞分为空白组、TNF-α模型组、甲氨蝶呤组... 目的:研究苗药黑骨藤中咖啡酰基奎宁酸类部位(CADF)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞MH7A增殖及炎症因子分泌的影响,探讨CADF抗RA的作用机制。方法:将MH7A细胞分为空白组、TNF-α模型组、甲氨蝶呤组(阳性对照,20 mg/L)和CADF不同质量浓度组(50、100、200、400 mg/L),除空白组外,其余各组均以50μg/L TNF-α刺激活化MH7A细胞。以TNF-α与相应药物的混合液共同作用24 h后,检测细胞的增殖情况和培养液中一氧化氮(NO)、前列腺素E_2(PGE_2)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的含量。结果:与空白组比较,TNF-α模型组细胞增殖活性显著增强(P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量显著增加(P<0.01);与TNF-α模型组比较,各给药组细胞的增殖均受到显著抑制(P<0.05或P<0.01),培养液中NO、PGE2、IL-1β、IL-6含量均显著减少(P<0.01),且与CADF具有一定的量效关系。结论:CADF可通过抑制TNF-α诱导的MH7A细胞增殖,减少炎症因子NO、PGE2、IL-1β、IL-6的分泌,从而发挥其抗RA的作用。 展开更多
关键词 苗药 黑骨藤 咖啡酰基奎宁酸类部位 人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞MH7A 炎症因子
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马钱子生物碱组分对类风湿性关节炎滑膜细胞增殖作用的比较研究 被引量：21
14
作者 方芳 陈海波 +3 位作者 马凤森 张静若 池细绿 方剑乔 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第1期1-4,共4页
[目的]比较观察马钱子总生物碱不同组分对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖的影响。[方法]体外培养人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),加入不同浓度的马钱子总生物碱、马钱子碱和士的宁,采用溴脱氧尿苷(br... [目的]比较观察马钱子总生物碱不同组分对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖的影响。[方法]体外培养人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA),加入不同浓度的马钱子总生物碱、马钱子碱和士的宁,采用溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,BRDU)比色法观察马钱子不同生物碱组分对细胞增殖的影响。[结果]不同浓度的马钱子总生物碱对HFLS-RA细胞增殖表现出良好的抑制作用。同浓度水平组比较,仅在浓度水平为0.22mg.mL-1时,马钱子碱组对细胞增殖的抑制率明显低于士的宁组(P<0.05),其余各浓度水平时均高于士的宁组。以马钱子总生物碱对细胞增殖的抑制率减去士的宁的抑制率,间接反应非士的宁生物碱对该细胞增殖的抑制率,在士的宁和马钱子碱浓度水平均为0.22mg.mL-1或0.11mg.mL-1时,明显低于士的宁组(P<0.01,P<0.05)与马钱子碱组(P<0.01,P<0.01),其余浓度水平时,均高于士的宁组的抑制率(P<0.01),低于马钱子碱组的抑制率但无显著性差异。[结论]马钱子总生物碱、士的宁、马钱子碱对类风湿性关节炎滑膜细胞的增殖均有良好的抑制作用;随着浓度的降低,马钱子碱对滑膜细胞增殖的抑制作用优于士的宁;在马钱子总生物碱中存在的非马钱子碱、非士的宁的生物碱组分未表现出对HFLS-RA细胞增殖的抑制作用。 展开更多
关键词 人类风湿性关节炎滑膜细胞 细胞增殖 马钱子总生物碱 马钱子碱 士的宁
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大黄素对类风湿关节炎滑膜细胞增殖及转移的抑制作用 被引量：20
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作者 彭菲菲 徐艳明 +2 位作者 谭洪发 罗素 荣晓凤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期34-39,共6页
目的探讨大黄素对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及转移的影响。方法采用组织块提取法和酶消化法体外培养类风湿关节炎滑膜细胞,分别加入不同浓度大黄素培养6、12、24 h,CCK-8法检测增殖能力的变化及时效关系,Transwell... 目的探讨大黄素对体外培养类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞增殖及转移的影响。方法采用组织块提取法和酶消化法体外培养类风湿关节炎滑膜细胞,分别加入不同浓度大黄素培养6、12、24 h,CCK-8法检测增殖能力的变化及时效关系,Transwell法检测处理前后转移能力的变化。结果酶消化法和组织块法分别于14 d和21 d得到原代RA成纤维样滑膜细胞,扩大培养3代后用大黄素处理,CCK-8检测6 h处理后20、40、60、80、100μmol/L大黄素的抑制率依次为0.39±0.11、0.51±0.04、0.55±0.07、0.72±0.18、0.98±0.11。且随着处理时间延长,抑制率增加(P<0.05)。Transwell法检测浓度为20、40、80μmol/L大黄素处理后,处理组穿过小室膜的细胞数明显少于对照组,迁移试验表明,抑制率分别为39.48%、54.76%、82.99%。侵袭试验表明,抑制率分别为25.38%、60.41%、81.73%。与对照组比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论不同浓度的大黄素对体外培养RA-FLSs的转移及增殖能力具有抑制作用,且具有一定的量效和时效关系,为进一步研究大黄素在类风湿关节炎的治疗提供一定的实验室依据。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 大黄素 增殖 转移
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当归拈痛汤调控Fas/caspase-8通路促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞凋亡 被引量：18
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作者 赵帆 李佳钰 +2 位作者 陆麒瑾 陈恩生 袁立霞 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1119-1126,共8页
目的探究当归拈痛汤(DGNTD)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及TNF受体超族成员6(Fas)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)通路的影响。方法收集临床RA患者的滑膜组织,无菌条件下采用酶解法分离并培养出FLS细胞。采用免疫荧光... 目的探究当归拈痛汤(DGNTD)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(FLS)凋亡及TNF受体超族成员6(Fas)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-8(caspase-8)通路的影响。方法收集临床RA患者的滑膜组织,无菌条件下采用酶解法分离并培养出FLS细胞。采用免疫荧光染色法对细胞进行鉴定。FLS细胞分为空白组(NC组)、DGNTD低剂量组、DGNTD中剂量组、DGNTD高剂量组、Fas抑制剂联合DGNTD组(KR-33493+DGNTD组)。NC组:10%空白血清干预FLS细胞;DGNTD低剂量组:10%DGNTD低剂量含药血清干预FLS细胞;DGNTD中剂量组:10%DGNTD中剂量含药血清干预FLS细胞;DGNTD高剂量组:10%DGNTD高剂量含药血清干预FLS细胞;KR-33493+DGNTD组:20μmol/mL KR-33493+10%DGNTD高剂量含药血清干预FLS细胞。通过MTT法检测不同剂量DGNTD对FLS细胞增殖的影响;Hoechst 33342法和Annexin V-FITC/PI流式细胞术分别检测FLS细胞凋亡特性和凋亡率;qPCR和Western blot分别检测FLS细胞Fas、Fas相关蛋白(FADD)、caspase-8、caspase-3的mRNA和蛋白表达量。结果免疫荧光实验证明本实验提取出的细胞为FLS细胞;MTT结果显示DGNTD含药血清随着剂量和干预时间的增加可显著抑制FLS的增殖(P<0.05);Hoechst33342和流式细胞术结果显示不同剂量的DGNTD含药血清可以显著促进FLS细胞凋亡(P<0.05);qPCR和Western blot均显示不同剂量的DGNTD含药血清可以显著提高Fas、FADD、caspase-8、caspase-3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05);进一步发现,Fas蛋白抑制剂(KR-33493)可以逆转DGNTD对FLS细胞的上述作用(P<0.05)。结论当归拈痛汤可能通过激活Fas/caspase-8通路来诱导FLS细胞凋亡。 展开更多
关键词 当归拈痛汤 Fas/caspase-8通路 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 细胞凋亡
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IL-1α对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞功能的影响及木瓜苷的作用 被引量：17
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作者 唐丽琴 魏伟 王晓玉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期44-47,共4页
目的探讨rIL-1α对佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜细胞功能的影响及木瓜苷（GCS）的作用。方法采用弗氏完全佐剂（FCA）诱导大鼠AA模型，分离培养大鼠成纤维样滑膜细胞（FLS），用MTT法检测FLS的增殖能力，放射免疫法（RIA）测定FLS产生PGE... 目的探讨rIL-1α对佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜细胞功能的影响及木瓜苷（GCS）的作用。方法采用弗氏完全佐剂（FCA）诱导大鼠AA模型，分离培养大鼠成纤维样滑膜细胞（FLS），用MTT法检测FLS的增殖能力，放射免疫法（RIA）测定FLS产生PGE2和cAMP的水平。结果在10μg·L-1的rIL-1α（1、2、4、8、24h）体外刺激下，AA大鼠FLS产生的PGE，水平升高，cAMP水平在1～8h升高，24h反而下降。GCS（100、50、25、12．5mg·L-1）体外给药可不同程度的抑制FLS的增殖反应和PGE2的产生，升高cAMP水平。结论rIL-1α可以促进AA大鼠FLS的增殖，降低cAMP，升高PGE2，GCS能明显逆转rIL-1α对FLS的影响。 展开更多
关键词 佐剂性关节炎 成纤维样滑膜细胞 木瓜苷 rIL-1α
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红景天苷对TNF-α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的抑制作用及其意义 被引量：17
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作者 郑洋洋 代东雪 +2 位作者 潘志 唐成芳 王颖航 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期485-490,共6页
目的:探讨红景天苷对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的抑制作用,阐明其控制类风湿关节炎(RA)的分子机制。方法:体外培养HFLS-RA,采用TNF-α及不同浓度红景天苷处理细胞,分为正常对照组(0.0μ... 目的:探讨红景天苷对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的抑制作用,阐明其控制类风湿关节炎(RA)的分子机制。方法:体外培养HFLS-RA,采用TNF-α及不同浓度红景天苷处理细胞,分为正常对照组(0.0μg·L^(-1) TNF-α)、模型对照组(10.0μg·L^(-1)TNF-α)及12.5、25.0、50.0、100.0μmol·L^(-1)红景天苷组(10.0μg·L^(-1) TNF-α+相应浓度红景天苷)。MTT法检测HFLS-RA的增殖活力,ELISA法检测细胞上清液中β-catenin、基质金属蛋白酶7(MMP-7)和Cyclin-D1表达水平,Western blotting法检测细胞中β-catenin蛋白表达水平。结果:与正常对照组比较,模型对照组HFLS-RA增殖活力明显升高(P<0.05)。与模型对照组比较,12.5和25.0μmol·L^(-1)红景天苷组HFLSRA增殖活力虽降低,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);50.0和100.0μmol·L^(-1)红景天苷组HFLSRA增殖活力降低(P<0.05)。与正常对照组比较,模型对照组细胞上清液中β-catenin、MMP-7和Cyclin-D1表达水平明显升高(P<0.05)。与模型对照组比较,12.5和25.0μmol·L^(-1)红景天苷组细胞上清液中β-catenin、MMP-7和Cyclin-D1表达水平虽降低,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);50和100μmol·L^(-1)红景天苷组细胞上清液中β-catenin、MMP-7和Cyclin-D1表达水平明显降低(P<0.05)。Western blotting法检测,模型对照组细胞中β-catenin蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.01);12.5和25.0μmol·L^(-1)红景天苷组细胞中β-catenin蛋白表达水平虽低于模型对照组,但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);50.0和100.0μmol·L^(-1)红景天苷组细胞中β-catenin蛋白表达水平低于模型对照组(P<0.05)。结论:红景天苷可抑制HFLS-RA的增殖,其控制RA的机制可能与Wnt/β-catenin信号通路的调控有关联。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 红景天苷 成纤维样滑膜细胞 肿瘤坏死因子Α WNT/Β-CATENIN信号通路
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断藤益母汤抑制PI3K/AKT通路诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡 被引量：17
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作者 潘东梅 王强 +8 位作者 蔡叙东 郭添枫 魏赈权 韩隆胤 姜玉宝 刘敏莹 刘小宝 郭文杰 林昌松 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期2051-2055,共5页
目的:探讨PI3K/AKT通路在断藤益母汤诱导人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡中的作用。方法:收集RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA FLSs;用不同浓度的断藤益母汤处理细胞后,CCK-8法检测RA FLSs活力;Annexin V-FITC/PI检测RA ... 目的:探讨PI3K/AKT通路在断藤益母汤诱导人类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLSs)凋亡中的作用。方法:收集RA患者的滑膜组织,组织块法培养RA FLSs;用不同浓度的断藤益母汤处理细胞后,CCK-8法检测RA FLSs活力;Annexin V-FITC/PI检测RA FLSs凋亡率;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2,PI3K/AKT通路相关蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,随着断藤益母汤浓度的增加可显著抑制RA FLSs活力(P<0.05,P<0.01),诱导RA FLSs发生凋亡(P<0.05,P<0.01);Bcl-2及PI3K和AKT蛋白磷酸化表达水平明显降低(P<0.05),Bax表达水平上升(P<0.05),呈现剂量依赖性。PI3K蛋白抑制剂(LY294002)干扰后增强了断藤益母汤对RA FLSs的作用:与断藤益母汤组比较,LY294002联合断藤益母汤组细胞活力显著下降(P<0.05),凋亡率显著升高(P<0.05);Bcl-2及AKT蛋白磷酸化表达水平明显降低(P<0.05),Bax表达水平上升(P<0.05)。结论:断藤益母汤可能通过抑制PI3K/AKT通路诱导RA FLSs凋亡。 展开更多
关键词 断藤益母汤 类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞 凋亡 PI3K/AKT通路
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PDCD5在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡中表达上调 被引量：15
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作者 陈占昆 吕厚山 王宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期563-568,共6页
为了研究程序化细胞死亡因子5(PDCD5)在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡中的作用,在不同的时间加入有效剂量100nmol/L雷公藤内醇酯(triptolide)后,采用实时定量PCR、RT-PCR、Western印迹和直接免疫荧光染色方法检测体外分离培养的类... 为了研究程序化细胞死亡因子5(PDCD5)在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡中的作用,在不同的时间加入有效剂量100nmol/L雷公藤内醇酯(triptolide)后,采用实时定量PCR、RT-PCR、Western印迹和直接免疫荧光染色方法检测体外分离培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中PDCD5在mRNA和蛋白水平的表达及蛋白表达特征.在雷公藤内醇酯诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的过程中,PDCD5 mRNA表达水平明显地渐次增加,呈现一种明确的时间依赖性递增表达模式,而PDCD5蛋白有时间依赖性表达上调持续16h,并维持在相对恒定水平.直接免疫荧光染色结果显示,在正常体外培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中,PDCD5蛋白的表达较弱,且主要分布在细胞浆.经雷公藤内醇酯处理4 h后,大多数细胞有PDCD5蛋白的聚集,直至12h,细胞核周围PDCD5蛋白聚集显著增强.36h后,PDCD5蛋白以核固缩的形式存在于凋亡的RA FLS中,细胞核染色质明显浓缩,片段化并出现了凋亡小体.上述结果表明,在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的过程中,PDCD5表达上调并在凋亡早期出现核转位,PDCD5蛋白核转位要早于凋亡小体形成.PDCD5蛋白核转位是类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的早期事件,PDCD5不仅参与了类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的凋亡过程,而且在类风湿关节炎滑膜增生的凋亡调节中起到重要调节作用. 展开更多
关键词 程序化细胞死亡因子5 成纤维样滑膜细胞 细胞凋亡 类风湿关节炎
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