人巨细胞病毒先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立 被引量：20

1

作者 王明丽 唐久来 +4 位作者 胡闻 史百芬 胡勇 毕克菊 李京培 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 2000年第2期167-174,共8页

将人巨细胞病毒 (HCMV)接种至 8～ 12周龄Balb/c雌雄小鼠腹腔后 ,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层 ,进行病毒分离、病理学检测及用地高辛标记的HCMV寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结... 将人巨细胞病毒 (HCMV)接种至 8～ 12周龄Balb/c雌雄小鼠腹腔后 ,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层 ,进行病毒分离、病理学检测及用地高辛标记的HCMV寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。病理学研究结果证实 ,鼠脑为侵袭性脑膜脑炎性病理改变 ,并在神经细胞内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体 ;原位杂交结果显示 ,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内 ;在鼠脑组织上清液中分离出HCMV。且感染组雌鼠血清特异性IgM抗体阳性率为73 9% ,IgG抗体阳性率为 95 7% ;而对照组雌鼠阳性率分别为 4 2 %和 12 5 %。两组间差异高度显著 (P <0 0 1)。感染组雌鼠所生子鼠死胎率及出生后一周内病死率均明显高于正常对照组 (P <0 0 1)。证明 :该病毒能侵袭Balb/c小鼠 ,并通过胎盘感染其子代的中枢神经系统 (CNS)。这种模拟人类HCMV先天性CNS感染的小鼠模型的建立所显示的许多相似的感染和病理过程 。 展开更多

关键词 人巨细胞病毒 先天性感染 动物模型 小鼠 CNSe

下载PDF 职称材料

人巨细胞病毒体内外先天性感染胎鼠脑神经元的研究 被引量：11

2

作者 王明丽 唐久来 +6 位作者 史百芬 胡勇 李京培 毕克菊 胡闻 黄升海 吴建军 《现代康复》 CSCD 1999年第9期1069-1073,共5页

目的：研究确定人巨细胞病毒（ Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ） 体内外先天性感染胎鼠大脑皮质神经元及其感染特征。方法：分别建立体内外模拟 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ 先天性感染小鼠脑神经元模型。采用病毒分离、病理学检测及核酸原位杂交技术等观察研究病毒的增... 目的：研究确定人巨细胞病毒（ Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ） 体内外先天性感染胎鼠大脑皮质神经元及其感染特征。方法：分别建立体内外模拟 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ 先天性感染小鼠脑神经元模型。采用病毒分离、病理学检测及核酸原位杂交技术等观察研究病毒的增殖，受染细胞的形态特征以及病毒核酸在细胞内的定位和分布。结果：体内模型显示： 脑组织上清液中分离出 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ； 大脑皮质发生侵袭性脑膜脑炎性病理改变； 神经元核内出现病毒特征性大的嗜碱性包涵体；病毒特异性核酸存在于受染神经元核内及胞浆内。体外模型亦证实：受染神经元胞体明显肿胀并可见核内嗜酸性包涵体； 原位杂交法检出 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ特异性核酸。结论： Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ 可在体内外致胎鼠大脑皮质神经元发生类似于人类先天性中枢神经系统感染的病理改变； 建立的体内外感染模型可用于 Ｈ Ｃ Ｍ Ｖ 中枢神经系统先天性感染的发生机制研究。 展开更多

关键词 巨细胞病毒 大脑皮质神经元 胎鼠 先天性感染

下载PDF 职称材料

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯对小鼠胎鼠睾丸及睾丸引带的影响 被引量：4

3

作者 宋晓峰 邓永继 +3 位作者 张德迎 刘星 吴盛德 魏光辉 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期195-199,共5页

目的:研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对小鼠胎鼠睾丸与睾丸引带形态结构及功能的影响,探讨隐睾发生的可能机制。方法:30只健康KM孕鼠随机均分为3组:空白对照组、玉米油对照组、DEHP组。DEHP组以剂量500mg/(kg.d)的DEHP灌胃作用于怀... 目的:研究邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对小鼠胎鼠睾丸与睾丸引带形态结构及功能的影响,探讨隐睾发生的可能机制。方法:30只健康KM孕鼠随机均分为3组:空白对照组、玉米油对照组、DEHP组。DEHP组以剂量500mg/(kg.d)的DEHP灌胃作用于怀孕12～19d(GD12～GD19)的KM母鼠,观察DEHP对每胎胎鼠数、雌雄性胎鼠比例、雄性胎鼠体重、睾丸重量、睾丸引带形态结构、位置、睾丸到膀胱颈之间的相对距离(TBD)、颅侧悬韧带残留情况、引带内雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)、肌动蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平的影响。结果:DEHP对每胎胎鼠数、雌雄性胎鼠比例、雄性胎鼠体重无明显影响;DEHP可影响胎鼠睾丸重量及TBD;DEHP组睾丸均有一定程度的下降不全,睾丸引带形态结构无明显差异;光镜下见DEHP组睾丸生精小管、支持细胞存在明显的发育障碍,睾丸Leydig细胞明显增生;DEHP组睾丸引带AR阳性表达率降低(P<0.01)。结论:DEHP可通过抗雄激素效应导致睾丸引带功能障碍,使睾丸下降发生异常而诱导小鼠隐睾;同时造成睾丸Ser-toli细胞、睾丸Leydig细胞和生精细胞的发育障碍和功能改变。 展开更多

关键词 环境内分泌干扰物 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 隐睾 抗雄激素效应 睾丸引带 胎鼠

下载PDF 职称材料

模拟人类巨细胞病毒(HCMV)先天性中枢神经系统感染小鼠模型的建立 被引量：3

4

作者 王明丽 唐久来 +4 位作者 胡闻 史百芬 胡勇 毕克菊 李京培 《热带病与寄生虫学》 1999年第3期151-154,共4页

目的寻找适合的研究 HCMV 先天性 CNS 感染是过程的动物模型。方法将人巨细胞病毒(HCMV)接种至6～8周龄 Balb/c 雌雄小鼠腹腔后,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层,进行病毒分离,病理学检测及用地高辛标记的 HCMV 寡核苷酸... 目的寻找适合的研究 HCMV 先天性 CNS 感染是过程的动物模型。方法将人巨细胞病毒(HCMV)接种至6～8周龄 Balb/c 雌雄小鼠腹腔后,交配。待雌鼠临产时剖腹取出胎鼠脑双侧大脑皮层,进行病毒分离,病理学检测及用地高辛标记的 HCMV 寡核苷酸探针对大脑皮层细胞压印片进行原位分子杂交检测。结果病理学结果证实,鼠脑为侵袭性脑膜脑炎性病理改变,并在神经细咆内发现病毒特征性的大的核内嗜碱性包涵体;原位杂交结果显示,病毒核酸存在于受染神经细胞及神经胶质细胞核内及胞浆内;在鼠脑组织上清液中分离出 HCMV。且感染雌鼠所生子鼠死胎率及出生后一周内病死率明显高于正常对照组(P<0.005)。证明该病毒能侵袭Balb/c 小鼠,并通过胎盘感染其子代的中枢神经系统(CNS)。结论这种模拟人类 HCMV 先天性 CNS 感染的小鼠模型的建立所显示的许多相似的感染和病理过程,为进一步研究 HCMV 先天性 CNS 感染的病理过程和疫苗的应用提供了可能。 展开更多

关键词 人巨细胞病毒 小鼠先天性感染模型 大脑皮层 胎鼠

下载PDF 职称材料

低剂量甲基汞促进鼠胚肠上皮细胞凋亡及相关机制的体内实验 被引量：3

5

作者 林雪梅 张海英 +1 位作者 姜蓉 汪维伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期410-412,共3页

目的探讨低剂量氯化甲基汞(methyl-mercury chloride,MMC)对小鼠胚胎肠上皮细胞凋亡的影响及相关机制。方法给E12.5d、E13.5d孕鼠一次性腹腔注射MMC液(0、1、2、4mg/kg),48h后取十二指肠、结肠。所获标本均制成石蜡切片,部分经HE染色,... 目的探讨低剂量氯化甲基汞(methyl-mercury chloride,MMC)对小鼠胚胎肠上皮细胞凋亡的影响及相关机制。方法给E12.5d、E13.5d孕鼠一次性腹腔注射MMC液(0、1、2、4mg/kg),48h后取十二指肠、结肠。所获标本均制成石蜡切片,部分经HE染色,体视学法计数肠上皮凋亡小体;其余切片用于免疫组化染色,半定量分析凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及即刻早期基因c-fos的表达。结果①各实验组凋亡小体数均高于对照组(P<0.05),与MMC剂量呈正相关(P<0.01)。②Bcl-2在各组上皮中的表达均低于对照组(P<0.05),与MMC的剂量呈负相关(P<0.01);而Bax及c-fos的表达均强于对照组(P<0.05),与MMC的剂量呈正相关(P<0.01)。结论低剂量MMC在体内可促进胎鼠肠上皮细胞凋亡,可能是一种通过下调Bcl-2表达,上调Bax及c-fos表达的机制。 展开更多

关键词 氯化甲基汞 胎鼠 肠上皮 凋亡

下载PDF 职称材料

内皮型一氧化氮合酶在胚胎小鼠肾脏发育中的表达 被引量：3

6

作者 包翠芬 刘霞 +1 位作者 王晓梅 穆长征 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期196-199,共4页

目的观察妊娠不同时期胚胎小鼠肾脏发育不同阶段内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,探讨eNOS在胚胎小鼠肾脏早期发育中的意义。方法分别取胚龄13d(E13)、14d(E14)、15d(E15)、16d(E16)、18d(E18)组及新生组(P0)小鼠各10只,共6组。分别用... 目的观察妊娠不同时期胚胎小鼠肾脏发育不同阶段内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,探讨eNOS在胚胎小鼠肾脏早期发育中的意义。方法分别取胚龄13d(E13)、14d(E14)、15d(E15)、16d(E16)、18d(E18)组及新生组(P0)小鼠各10只,共6组。分别用免疫组化及免疫印迹方法对小鼠肾脏内eNOS表达进行定性、定量分析。结果(1)免疫组化结果显示:E14、E15组eNOS在生肾区呈阳性表达;E16组生肾区表达减弱,肾近端小管呈强阳性表达,同时远端小管及肾脏小动脉内皮也有阳性表达;E18组、P0组近端小管呈强阳性表达,远端小管呈阳性表达,髓质中的集合管eNOS表达弱阳性,而致密斑呈阴性表达。(2)免疫印迹结果显示:E14组肾脏eNOS含量较少,随后逐渐增多,PD0组eNOS含量最多。结论(1)eNOS在小鼠肾脏第14d开始呈阳性表达,以后含量逐渐升高,出生时含量最高。(2)eNOS表达部位从生肾区开始,以后其表达逐渐减弱甚至消失,而肾近端小管、远端小管的表达晚于生肾区,且呈逐渐增强趋势,至出生时达到最强。这一结果表明eNOS在胚胎小鼠肾脏发育的早期阶段起重要调节作用。 展开更多

关键词 内皮型一氧化氮合酶 小鼠 肾 发育

下载PDF 职称材料

甲基汞影响小鼠胚胎肠上皮凋亡的体外实验 被引量：3

7

作者 张海英 汪维伟 姜蓉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第5期669-672,共4页

目的:观察低剂量氯化甲基汞(methylmercury chloride,MMC)对胎鼠肠上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法:分别取E13.5d、E14.5d胎鼠的十二指肠及结肠,体外培养,分别加入MMC液(0μg/L,200μg/L,400μg/L,800μg/L),培养24h后取出... 目的:观察低剂量氯化甲基汞(methylmercury chloride,MMC)对胎鼠肠上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法:分别取E13.5d、E14.5d胎鼠的十二指肠及结肠,体外培养,分别加入MMC液(0μg/L,200μg/L,400μg/L,800μg/L),培养24h后取出标本,制成石蜡切片。部分切片经HE染色,体视学法计数肠上皮中的凋亡小体;余切片经免疫组化染色,观察凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,P53及c-Fos的表达。结果:①实验各组肠上皮凋亡小体数均较对照组高,P<0.05,与MMC剂量呈正相关,P<0.01。②Bcl-2在各实验组胎鼠肠上皮细胞的表达均低于对照组,P<0.05,与MMC的剂量呈负相关,P<0.01;而Bax、P53及c-Fos的表达则高于对照组,P<0.05,与MMC剂量均呈正相关,P<0.01。结论:MMC在体外可促进胎鼠肠上皮细胞凋亡,可能是一种通过下调Bcl-2表达,上调Bax及c-Fos表达的机制。 展开更多

关键词 氯化甲基汞 胎鼠 肠上皮 凋亡 小鼠 体外实验

下载PDF 职称材料

甲状旁腺相关蛋白在鼠胚髁突外植体软骨内成骨中的作用 被引量：3

8

作者 刘来奎 江宏兵 +2 位作者 徐艳 李晓箐 易新竹 《口腔医学》 CAS 2007年第1期1-4,共4页

目的探讨甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)对体外培养的鼠胚髁突软骨内成骨的影响。方法体外解剖分离鼠胚髁突,行外植体培养,通过组织学、免疫组化等方法观察PTHrP对体外培养的髁突外植体软骨内成骨的影响。结果髁突外植体在无血清半固态培养系... 目的探讨甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)对体外培养的鼠胚髁突软骨内成骨的影响。方法体外解剖分离鼠胚髁突,行外植体培养,通过组织学、免疫组化等方法观察PTHrP对体外培养的髁突外植体软骨内成骨的影响。结果髁突外植体在无血清半固态培养系统中能正常发育。加入人PTHrP(1-34)后,实验组髁突长度的增加较对照组明显,两组间差异有显著性(P<0.05);组织学及免疫组化染色显示:加入人PTHrP(1-34)后培养的髁突外植体增殖层和肥大软骨细胞层明显增厚,同时Ⅱ及Ⅹ型胶原在增殖层和肥大软骨细胞层中表达增强。结论PTHrP可刺激髁突外植体软骨增殖层和肥大层软骨细胞的增殖,促进髁突软骨内成骨的形成。 展开更多

关键词 甲状旁腺相关蛋白 软骨内成骨 髁突 外植体 鼠胚

下载PDF 职称材料

胎鼠和新生小鼠表皮郎格汉斯细胞的组织化学和电镜组化研究 被引量：2

9

作者 佘耀南 徐邦生 +1 位作者 王晓冬 汤乐民 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第5期416-420,共5页

用ATP酶组织化学、电镜组化和图像分析方法,研究胎鼠和新生小鼠表皮内郎格汉斯细胞的发育.结果表明:第16天胎鼠表皮中开始出现ATP酶阳性郎格汉斯细胞,电镜组化观察郎格汉斯细胞的胞膜表面有ATP酶反应物沉积。图像分析结果证实,随着表皮... 用ATP酶组织化学、电镜组化和图像分析方法,研究胎鼠和新生小鼠表皮内郎格汉斯细胞的发育.结果表明:第16天胎鼠表皮中开始出现ATP酶阳性郎格汉斯细胞,电镜组化观察郎格汉斯细胞的胞膜表面有ATP酶反应物沉积。图像分析结果证实,随着表皮分化,郎格汉斯细胞数量迅速增长,细胞的周长、面积和ATP酶反应物的灰度也逐渐增大。出生后4～5天郎格汉斯细胞的结构和数量均与成鼠相似,ATP酶含量也达成鼠的水平。 展开更多

关键词 胎鼠 新生小鼠 郎格汉斯细胞 组织化学 电镜

下载PDF 职称材料

雌三醇对胚胎小鼠脑发育的影响 被引量：2

10

作者 何威 翟秀岩 清木勘治 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期137-140,共4页

用免疫吸附及免疫组织化学方法研究了在妊娠期给予雌三醇对小鼠胚胎脑发育的影响。免疫定量结果表明：在小鼠生后１４ ｄ，雌三醇可增加神经元特异性标记物 神经元特异性烯醇化酶及神经丝的表达，而神经胶质细胞特异性标记物 神经胶质... 用免疫吸附及免疫组织化学方法研究了在妊娠期给予雌三醇对小鼠胚胎脑发育的影响。免疫定量结果表明：在小鼠生后１４ ｄ，雌三醇可增加神经元特异性标记物 神经元特异性烯醇化酶及神经丝的表达，而神经胶质细胞特异性标记物 神经胶质纤维酸性蛋白不受影响。免疫组织化学反应结果表明：雌三醇增加了位于视束前区，下丘脑视交叉上核、腹内侧核以及杏仁核等结构神经元的神经元特异性烯醇化酶的阳性反应强度，也增加了位于视束前外侧核神经元的神经丝反应强度。雌三醇除了明显减少了海马神经胶质细胞的神经胶质纤维酸性蛋白的表达外，在脑的其它区域对该抗原的反应性未见影响。本研究结果表明：妊娠期给予雌三醇可影响胚胎脑“性中枢”（ＰＯＡＡＭ ＢＨＡＭ 功能复合体）的发育。 展开更多

关键词 雌三醇 脑发育 神经元 特异性烯醇化酶 胎鼠

下载PDF 职称材料

胚胎小鼠大脑c-jun N-末端激酶表达的定量分析 被引量：2

11

作者 包翠芬 刘霞 +2 位作者 魏嘉 梁佳 秦书俭 《数理医药学杂志》 2009年第2期152-153,共2页

目的:探讨c-jun N-末端激酶(JNK)在胚胎小鼠脑发育中的作用。方法:按受孕时间将昆明小鼠随机分为6组,分别为胚龄10(E10)、12(E12)、14(E14)、16(E16)、18d(E18)组、新生组(P0),采用免疫印迹技术和光密度分析法对各组小鼠脑JNK进行定量检... 目的:探讨c-jun N-末端激酶(JNK)在胚胎小鼠脑发育中的作用。方法:按受孕时间将昆明小鼠随机分为6组,分别为胚龄10(E10)、12(E12)、14(E14)、16(E16)、18d(E18)组、新生组(P0),采用免疫印迹技术和光密度分析法对各组小鼠脑JNK进行定量检测,以测得的JNK最大量为1(100%),计算蛋白相对含量。结果:免疫印迹法测得E10、E12、E14、E16、E18及P0组JNK1含量分别为24.57%、46.62%、62.99%、82.06%、100%、89.65%,JNK2/3含量分别为58.89%、51.37%、28.67%、20.33%、6.54%、5.03%。结论:JNK在胚胎发育期间呈明显的变化规律,提示JNK可能在小鼠大脑的发生与发育中起重要作用。 展开更多

关键词 小鼠 脑 JNK 免疫印迹

下载PDF 职称材料

B19病毒VP1u蛋白对胎鼠心脏的影响 被引量：1

12

作者 聂晓晶 张国成 +6 位作者 樊蕊 孙新 成胜权 许东亮 付蓉 黄娜 杨晓蕾 《发育医学电子杂志》 2013年第1期11-15,共5页

目的探讨B19病毒vplu蛋白是否影响心脏发育及相关机制。方法对不同孕龄母鼠注射B19病毒vplu蛋白,采集胎鼠心脏组织标本,通过光镜、电镜、免疫组织化学、TUNEL和原位杂交技术观察心脏细胞结构变化、细胞凋亡及相关基因或表面标志物变化... 目的探讨B19病毒vplu蛋白是否影响心脏发育及相关机制。方法对不同孕龄母鼠注射B19病毒vplu蛋白,采集胎鼠心脏组织标本,通过光镜、电镜、免疫组织化学、TUNEL和原位杂交技术观察心脏细胞结构变化、细胞凋亡及相关基因或表面标志物变化。结果实验期间有23只小鼠怀孕,vplu蛋白和(或)抗vplu蛋白mAh干预组与对照组均未见胎鼠流产。各组产仔数量及鼠心脏重量进行组间方差分析,差异无显著性(P>0.05)。vplu蛋白和(或)抗VPIu蛋白mAl干预组光镜下均可见心肌细胞间隙增宽,胞质透明淡染,部分心肌细胞脂肪变性。电镜下vplu蛋白(或)和vplu蛋白mAh共同注射组、抗VPIu蛋白mAb注射组均可见线粒体聚集在增宽的心肌细胞间隙中,有空泡化,并TUNEL免疫荧光和免疫组织化学显示心肌细胞发生细胞凋亡。对照组胎鼠均未见异常。结论B19病毒vplu蛋白与胎鼠流产、心脏发育畸形无关,与胎鼠心脏水肿有关。 展开更多

关键词 人细小病毒 VP1u蛋白 胎鼠 心脏

下载PDF 职称材料

HCMV先天性感染胎鼠脑组织中iNOS基因的表达 被引量：1

13

作者 余莉 李艳秋 +5 位作者 张文艳 方草晖 类延花 吴建军 金晶 王明丽 《安徽医科大学学报》 CAS 2003年第3期175-178,共4页

目的　研究人巨细胞病毒 (HCMV)先天性感染小鼠及在不同剂量诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂和促进剂的干预下脑组织中的iNOS基因表达情况。方法　将 6～ 8周龄BALB/c小鼠分为 6组 ,每组 6只 ,♀♂各半。A组腹腔注射HCMV 1 0ml,B组、C... 目的　研究人巨细胞病毒 (HCMV)先天性感染小鼠及在不同剂量诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂和促进剂的干预下脑组织中的iNOS基因表达情况。方法　将 6～ 8周龄BALB/c小鼠分为 6组 ,每组 6只 ,♀♂各半。A组腹腔注射HCMV 1 0ml,B组、C组腹腔注射HCMV 1 0ml后2d ,分别每天腹腔注射氨基胍 (AG) 2 0 0mg/kg、2 0mg/kg ,D组、E组腹腔注射HCMV 1 0ml后 2d ,分别每天腹腔注射左旋精氨酸 (L Arg) 30 0mg/kg、30mg/kg ,F组为DMEM对照组 ,每天每只 0 2ml。持续 17d。以上各组在孕鼠受孕第19天 ,剖腹取胎鼠 ,观察各组胎鼠生长发育及体重 ,有无皮下出血、淤血等情况 ,同时取胎鼠脑组织 ,作以下检测 :①硝酸还原酶法测定脑组织匀浆中NO代谢产物亚硝酸盐的含量。②RT PCR测iNOSmRNA的转录。结果　HCMV感染各组孕鼠在孕 19d ,其体重明显低于对照组 ,有部分胎鼠发育迟缓并可见明显的出血现象。感染各组胎鼠脑组织匀浆NO代谢产物明显高于DMEM对照组 (P <0 0 0 1) ,以B组尤为明显 ,A、C、E组间无差异显著性。RT PCR在感染各组均扩增出iNOSmRNA特异性条带表达 ,B组信号量最高 ,D组信号最弱。DMEM对照组未检测到iNOS特异性条带。结论　HCMV先天性感染可刺激胎鼠脑组织iNOS的表达 ,其表达产物NO可能参与了脑组织病理损伤? 展开更多

关键词 人巨细胞病毒感染 胎鼠 脑组织 INOS基因 基因表达

下载PDF 职称材料

小鼠胎肺Ⅲ型上皮细胞的分离纯化及原代培养 被引量：1

14

作者 张明凤 张彦定 +2 位作者 王昕 王虹 张龙斌 《福建师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期82-86,97,共6页

用免疫黏附和差速离心法分离和纯化小鼠胎肺Ⅱ型细胞,所得细胞纯度达（90±2）%,产量为每5只小鼠胎肺收获（23.6±7）×10^6个细胞.原代培养的小鼠胎肺Ⅱ型细胞在12-24 h开始贴壁,在36-48 h呈指数生长,72 h后生长减缓,4-5 ... 用免疫黏附和差速离心法分离和纯化小鼠胎肺Ⅱ型细胞,所得细胞纯度达（90±2）%,产量为每5只小鼠胎肺收获（23.6±7）×10^6个细胞.原代培养的小鼠胎肺Ⅱ型细胞在12-24 h开始贴壁,在36-48 h呈指数生长,72 h后生长减缓,4-5 d左右细胞开始变形分化.免疫荧光鉴定胎肺Ⅱ型细胞表面活性蛋白C（SP-C）染色阳性,透射电镜观察到细胞内板层小体,细胞中proSP-C蛋白在培养48 h后表达较高.体外病毒转染成功,可见强烈荧光表达.成功建立了小鼠胎肺Ⅱ型上皮细胞的培养模型. 展开更多

关键词 胎鼠 肺泡Ⅱ型细胞 分离 鉴定 原代培养

下载PDF 职称材料

己烯雌酚对胎鼠睾丸发育的影响研究 被引量：1

15

作者 陈眷华 王文博 +3 位作者 徐在品 卢占军 张泽强 彭羽 《畜牧与兽医》 北大核心 2006年第7期1-4,共4页

为了研究己烯雌酚（DES）对胎鼠睾丸发育的影响，将雌鼠随机分为对照组和试验1、2、3组，每组10只。3个试验组母鼠从怀孕第10～18天分别每天连续皮下注射DES2、4和8μg／R，对照组则注射同等剂量的生理盐水，于最后一次注射后2h取出胎... 为了研究己烯雌酚（DES）对胎鼠睾丸发育的影响，将雌鼠随机分为对照组和试验1、2、3组，每组10只。3个试验组母鼠从怀孕第10～18天分别每天连续皮下注射DES2、4和8μg／R，对照组则注射同等剂量的生理盐水，于最后一次注射后2h取出胎鼠睾丸。常规石蜡切片，HE染色镜检，并应用免疫组织化学方法检测雄性胎鼠睾丸中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。结果显示：2雌组睾丸发育情况接近对照组，无明显病理变化；4μg组仅见生殖母细胞和间质细胞数量减少；8μg组可见生殖母细胞核仁不明显，支持细胞数量减少，间质细胞溶解；随着用药剂量的增加，睾丸中PCNA含量显著降低（P〈0．05）。结果表明DES会抑制胚胎期睾丸细胞的增殖，从而影响睾丸的发育，破坏睾丸的组织结构。 展开更多

关键词 己烯雌酚 胎鼠 睾丸发育

下载PDF 职称材料

外源性shh蛋白对c-kit^+造血祖细胞增殖分化作用研究

16

作者 胡采红 周琨 +1 位作者 孙汉英 刘文励 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期2091-2095,共5页

目的探讨sonic hedgehog(Shh)信号对小鼠造血祖细胞的扩增分化调控作用。方法取孕14.5天Balb/C小鼠,分离培养小鼠胎肝基质细胞作饲养层。免疫磁珠法分选小鼠骨髓来源c-kit+造血祖细胞,将分选的造血祖细胞在不同实验组培养条件下培养7d(a... 目的探讨sonic hedgehog(Shh)信号对小鼠造血祖细胞的扩增分化调控作用。方法取孕14.5天Balb/C小鼠,分离培养小鼠胎肝基质细胞作饲养层。免疫磁珠法分选小鼠骨髓来源c-kit+造血祖细胞,将分选的造血祖细胞在不同实验组培养条件下培养7d(a.对照组;b.Shh组;c.以胎肝基质细胞为饲养层的Transwell共培养组;d.Shh+Transwell共培养组)。通过绘制细胞生长曲线,免疫表型鉴定及功能分析,观察胎肝基质细胞饲养层以及Shh活性肽对细胞增殖、分化、集落形成的调控作用。结果和对照组相比,胎肝基质细胞可以明显促进造血祖细胞增殖(P<0.05);单纯的外源性Shh蛋白可以同时促进造血祖细胞的增殖和分化(P<0.05);在与胎肝基质细胞共培养体系中,外源性Shh蛋白可以明显地促进细胞增殖,经过体外培养7d后,细胞数达80×105,其中c-kit+细胞占(84±9.44)%,集落形成能力亦明显增强。结论 Shh蛋白参与调控造血祖细胞的增殖与分化,在胎肝基质细胞的支持下,Shh蛋白对小鼠c-kit+造血祖细胞的扩增有明显的促进作用,表明Shh蛋白与胎肝基质细胞存在着某种整合作用,这种作用在一定程度上调控着造血祖细胞的增殖与分化。 展开更多

关键词 造血微环境 基质细胞 Shh通路 胎鼠 胎肝 造血祖细胞(c-kit+)

下载PDF 职称材料

小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、原代培养及鉴定

17

作者 陈坤 邓世雄 +2 位作者 刘芳君 李虹 蒋朴 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期62-65,共4页

目的:建立系统可靠的小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养、纯化及鉴定技术,为进一步研究肺纤维化及肺肿瘤等疾病的发病机制奠定基础.方法:应用低质量分数胰酶联合胶原酶的方法消化小鼠胎鼠肺组织块,经差速离心和差速贴壁的方法纯化... 目的:建立系统可靠的小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、培养、纯化及鉴定技术,为进一步研究肺纤维化及肺肿瘤等疾病的发病机制奠定基础.方法:应用低质量分数胰酶联合胶原酶的方法消化小鼠胎鼠肺组织块,经差速离心和差速贴壁的方法纯化肺泡Ⅱ型上皮,进行原代培养.用改良巴氏染色法和透射电镜观察对所分离的细胞进行鉴定.结果:每只胎鼠可获得(5±2)×106的细胞产量,细胞活力为95%±2%,纯度达到92%±2%,改良巴氏法镜下观察可见胞质内含较多深色颗粒,透射电镜观察到特征性的嗜锇小体即板层小体和细胞膜上有明显的微绒毛.结论:该方法能成功分离出小鼠胎鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,且产量大、纯度高,能满足体外研究的需要. 展开更多

关键词 胎鼠 肺泡Ⅱ型上皮细胞 原代培养 鉴定

下载PDF 职称材料

孕鼠DEHP暴露影响胎儿早期卵母细胞H3K27me3表达的研究

18

作者 刘玉萍 李苓 +2 位作者 刘京才 付霞飞 李兰 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2017年第3期191-195,共5页

本文以胎鼠卵母细胞为研究对象,分析了妊娠母鼠孕期暴露邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对胎鼠卵母细胞早期发育过程中组蛋白甲基化修饰程度的影响,结果发现:妊娠母鼠在12.5dpc到16.5dpc期间暴露40μg/kg DEHP,第一次减数分裂前期的胎... 本文以胎鼠卵母细胞为研究对象,分析了妊娠母鼠孕期暴露邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)对胎鼠卵母细胞早期发育过程中组蛋白甲基化修饰程度的影响,结果发现:妊娠母鼠在12.5dpc到16.5dpc期间暴露40μg/kg DEHP,第一次减数分裂前期的胎鼠雌性生殖细胞的H3K27me3表达受到了显著影响,导致H3K27me3强阳性细胞比例显著减少。该研究结果说明DEHP可通过孕鼠影响胎鼠卵母细胞早期发育过程中的组蛋白甲基化修饰。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 胎鼠 卵母细胞 H3K27me3

下载PDF 职称材料

胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡与胃形态发生的关系

19

作者 林雪梅 汪维伟 李芳菲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期53-55,共3页

目的 研究胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡的时空规律及其与胃形态发生的关系。方法 每间隔0．5d取E11～15．5d小鼠整胎，横断连续切片，观察胃形态发生，体视学法测量胃贲门、幽门、大弯、小弯上皮分裂细胞密度（DMC）、凋亡小体密度（DAB）... 目的 研究胎鼠胃上皮细胞增殖、凋亡的时空规律及其与胃形态发生的关系。方法 每间隔0．5d取E11～15．5d小鼠整胎，横断连续切片，观察胃形态发生，体视学法测量胃贲门、幽门、大弯、小弯上皮分裂细胞密度（DMC）、凋亡小体密度（DAB）。结果①E11．5d胃开始发育，E12d胃底膨出，胃大、小弯出现。②上皮细胞DMC峰值均在DAB峰值之前。③贲门处DMC无明显峰值，DAB峰值在E11．5、12．5、13．5d；幽门处DMC峰值在E12．5d，DAB峰值在E14d；大弯DMC峰值在E11．5、12d时，DAB值持续较低；小弯DMC峰值在E11．5d，DAB峰值在E12．5d。结论 胎鼠胃上皮细胞的增殖及凋亡与胃发生有密切的时空关系。 展开更多

关键词 胎鼠 胃 增殖 凋亡 形态发生

下载PDF 职称材料

氢化可的松对小鼠胚胎肠上皮凋亡的影响

20

作者 张海英 林雪梅 汪维伟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第1期67-70,共4页

目的观察氢化可的松(hydrocortisone,HC)对胎鼠肠上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法分别取E13.5d、E14.5d胎鼠的十二指肠及结肠段,体外组织培养,实验各组分别加入HC液(0μg/ml,0.5μg/ml,1.0μg/ml,2.0μg/ml),培养24h后取出... 目的观察氢化可的松(hydrocortisone,HC)对胎鼠肠上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法分别取E13.5d、E14.5d胎鼠的十二指肠及结肠段,体外组织培养,实验各组分别加入HC液(0μg/ml,0.5μg/ml,1.0μg/ml,2.0μg/ml),培养24h后取出标本,制成石蜡切片。部分切片经HE染色,体视学法观测胎鼠肠上皮中的凋亡小体数;余切片经免疫组化染色,观察凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,P53及c-Fos的表达。结果①各实验组胎鼠肠上皮凋亡小体数均较对照组高,P<0.05,与HC剂量呈正相关,P<0.01。②各实验组胎鼠肠上皮细胞表达的Bcl-2均较对照组低,P<0.05,与HC的剂量呈负相关,P<0.01;而Bax及c-Fos的表达则高于对照组,P<0.05,与HC剂量均呈正相关,P<0.01;P53的表达差异无统计学意义。结论HC在体外可促进胎鼠肠上皮细胞凋亡,可能是一种通过下调Bcl-2表达,上调Bax及c-Fos表达的P53非依赖机制。 展开更多

关键词 氯化甲基汞 胎鼠 肠上皮 凋亡

下载PDF 职称材料