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猫杯状病毒荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：10
1
作者 姜雪 高玉伟 +6 位作者 胡桂学 杨松涛 赵艳丽 刘秋燕 徐春忠 梁秀娟 夏咸柱 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期973-977,共5页
根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列,设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针,建立了快速检测FCV的荧光定量PCR方法.通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化,建立了标准曲线,给出了特异性、敏感性和重复性实验... 根据GenBank中编码猫杯状病毒(FCV)衣壳蛋白ORF2的保守序列,设计并合成了一对引物和相应的TaqMan探针,建立了快速检测FCV的荧光定量PCR方法.通过对该方法的反应体系和反应条件进行优化,建立了标准曲线,给出了特异性、敏感性和重复性实验,并对临床24份疑似样品(其中阳性3份、阴性21份)进行检测.结果表明:该方法检测cDNA的线性关系为0.992,线性范围为2.26×1011-2.26×101拷贝/μL;可检测出样品中的FCV,其他猫相关病毒检测为阴性;批内重复性实验变异系数为2.158%,与病毒分离结果相符. 展开更多
关键词 猫杯状病毒（fcv） 荧光定量PCR 检测方法
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北京部分地区猫泛白细胞减少症病毒、疱疹病毒和杯状病毒流行病学调查分析
2
作者 张美华 张中华 +5 位作者 鲁锋 朱方超 赵俊鑫 苏煜智 武峥 石文达 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期138-141,共4页
为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)... 为了解北京地区猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、疱疹病毒(FHV)和杯状病毒(FCV)的流行情况,并统计分析年龄和疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率的相关性,本调查于2021年1月—2023年6月收集北京地区多家宠物医院疑似感染FPV(313份)、FHV(1869份)或FCV(1638份)和体检动物样本,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)进行检测,并对结果进行统计分析。结果显示,FPV、FHV和FCV阳性率分别为57.51%、39.43%和42.31%;0~6月龄猫FPV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FPV;0~6月龄猫FHV阳性率显著高于>6~12月龄、>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~6月龄猫更易感染FHV;0~6月龄和>6~12月龄猫FCV阳性率显著高于>1~9岁和>9岁猫(P<0.05),说明0~12月龄猫更易感染FCV;免疫猫FPV、FHV和FCV阳性率极显著低于未免疫猫(P<0.01),说明疫苗免疫与FPV、FHV和FCV阳性率呈强相关性,进一步表明疫苗免疫可有效降低FPV、FHV和FCV阳性率。因此,建议在0~6月龄及时进行猫三联疫苗免疫,可有效降低猫感染FPV、FHV和FCV的风险,更有利于宠物健康。 展开更多
关键词 猫泛白细胞减少症病毒(FPV) 猫疱疹病毒(FHV) 猫杯状病毒(fcv) 流行病学调查
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1株猫嵌杯病毒的分离鉴定及全基因序列分析
3
作者 陈昌毅 李根 +4 位作者 何红玲 陈昱彤 黄学喆 罗均 郭霄峰 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3707-3718,共12页
【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒... 【目的】从疑似患猫鼻咽拭子和粪便病料中分离猫嵌杯病毒(Feline calicivirus, FCV),为研究FCV的生物学特性及流行分布提供理论依据。【方法】从广东省江门市采集的11份疑似患猫的病料中,以RT-PCR筛选含有FCV的病料,利用F81细胞及病毒空斑纯化试验对其进行纯化和扩繁。电镜下观察纯净化分离病毒的形态。通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay, IFA)测定病毒的半数组织培养感染剂量(median tissue culture infectious dose, TCID50)及不同收毒时间的病毒滴度,绘制分离病毒的一步生长曲线。对分离病毒全基因序列进行核苷酸序列测定,并对其遗传进化及相似性进行分析。【结果】从疑似患猫的粪便病料中分离获得1株FCV,经空斑纯化后,该毒株会导致F81细胞发生皱缩、变圆、葡萄串样聚集和脱落等细胞病变效应。在电镜下病毒粒子呈圆形、直径35~39 nm、无囊膜。IFA结果显示,分离病毒可与兔源FCV VP1-F蛋白特异性多克隆抗体发生结合,在荧光显微镜下可见明显特异性荧光,病毒滴度为1×109TCID50/mL。分离病毒基因组全长为7 722 bp,与FCV-SH毒株核苷酸相似性最高,为83.94%,属于同一分支。VP1基因与FCV-SH1902毒株核苷酸相似性最高,为81.32%,与FCV-SH1901毒株氨基酸相似性最高,为89.99%。【结论】本研究成功分离到1株FCV,并对其全基因序列进行分析。该研究为FCV致病机理及疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猫嵌杯病毒(fcv) 分离鉴定 基因测序 遗传进化分析
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检测猫杯状病毒RT-qPCR方法的优化与应用 被引量：2
4
作者 刘迪 郑亚婷 +6 位作者 许鑫燕 董丽丽 康洪涛 姜骞 杨鸣发 刘家森 曲连东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期53-60,共8页
为建立一种通用性良好的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法,根据GenBank上猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)ORF1保守区域序列,设计合成1对特异性引物,用于FCV的快速检测。灵敏性试验结果显示,该方法的检测下限为4.93×10;拷贝/μL... 为建立一种通用性良好的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法,根据GenBank上猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)ORF1保守区域序列,设计合成1对特异性引物,用于FCV的快速检测。灵敏性试验结果显示,该方法的检测下限为4.93×10;拷贝/μL,比普通RT-PCR检测下限高100倍;特异性试验结果显示,该检测方法与猫疱疹病毒、猫细小病毒、猫传染性腹膜炎病毒等无交叉反应;通用性试验结果显示,针对引物靶位点区间,该方法对所有已知变异位点的人工合成质粒和本实验室保存的不同变异位点的FCV毒株,均能够良好检出;重复性试验结果显示,组内的变异系数为0.09%~0.71%,组间变异系数为0.05%~0.82%,均小于1%。对23份临床样品进行检测,该方法的阳性检出率为60.9%,检出的14份阳性病料分别接种到CRFK细胞中,对细胞病变产物进行扩增并测序,BLAST对比后结果证实为FCV毒株。结果表明,本试验建立的荧光定量RT-PCR检测方法可用于FCV的快速诊断及流行病学的调查。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 实时荧光定量RT-PCR SYBR GreenⅠ ORF1
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猫杯状病毒引起细胞凋亡的信号转导通路研究进展 被引量：1
5
作者 崔占鼎 郭衍冰 +5 位作者 李登亮 孙明洁 赵涵 张雪竹 张颖 胡桂学 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期679-684,共6页
猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是猫科动物上呼吸系统疾病的常见病因,威胁野生猫科动物和家猫的健康。FCV在体外培养过程中会引起CRFK等细胞的凋亡,导致明显的细胞病变。近年来已有FCV对细胞凋亡转导通路影响的研究,其中较为详细... 猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)是猫科动物上呼吸系统疾病的常见病因,威胁野生猫科动物和家猫的健康。FCV在体外培养过程中会引起CRFK等细胞的凋亡,导致明显的细胞病变。近年来已有FCV对细胞凋亡转导通路影响的研究,其中较为详细的是线粒体转导通路,但对FCV影响细胞凋亡机制的研究尚不完整。本文对FCV结构特征及诱导凋亡产生的细胞病理变化和相关信号转导途径的现阶段研究情况展开综述,以期为FCV致病机制的深入研究和该病治疗方法的探索提供参考及理论依据。 展开更多
关键词 猫杯状病毒(fcv) 细胞凋亡 信号通路
原文传递
猫病毒血清学检测方法的建立及初步应用 被引量：11
6
作者 蒋虹 时建东 吴小闲 《中国实验动物学杂志》 1999年第1期39-41,共3页
通过摸索猫鼻气管炎病毒、嵌杯状病毒、泛白细胞减少症病毒的培养条件，制备兔抗猫ＩｇＧ，建立二种检测猫病毒抗体血清学方法即免疫酶染色法（ＩＥＡ）及免疫荧光法（ＩＦＡ），用两方法检测５份猫血清标本，ＩＥＡ与ＩＦＡ的阳性数均... 通过摸索猫鼻气管炎病毒、嵌杯状病毒、泛白细胞减少症病毒的培养条件，制备兔抗猫ＩｇＧ，建立二种检测猫病毒抗体血清学方法即免疫酶染色法（ＩＥＡ）及免疫荧光法（ＩＦＡ），用两方法检测５份猫血清标本，ＩＥＡ与ＩＦＡ的阳性数均为４份，结果表明ＩＥＡ和ＩＦＡ都适用于猫病毒抗体的检查。 展开更多
关键词 病毒抗体 IFA 血清学检测 血清标本 杯状病毒 免疫荧光法 血清学方法 鼻气管炎病毒 阳性数 培养条件
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