甘蔗组织培养外植体的防褐化措施 被引量：7

1

作者 武媛丽 谭贤教 +1 位作者 张树珍 杨本鹏 《热带生物学报》 2013年第4期313-316,共4页

为了抑制甘蔗外植体在培养过程中产生的褐化,保证其的正常生长分化,就甘蔗不同部位的茎尖及不同的抗氧化剂进行了研究.结果表明,甘蔗幼嫩的带芽茎段萌生的腋芽（5～8位芽）适宜做外植体;用0.75 g·L^-1的抗坏血酸对外植体进行预处理... 为了抑制甘蔗外植体在培养过程中产生的褐化,保证其的正常生长分化,就甘蔗不同部位的茎尖及不同的抗氧化剂进行了研究.结果表明,甘蔗幼嫩的带芽茎段萌生的腋芽（5～8位芽）适宜做外植体;用0.75 g·L^-1的抗坏血酸对外植体进行预处理30 min,可以有效地防止褐化的产生,且不影响外植体的生长分化. 展开更多

关键词 甘蔗 外植体 褐化 防褐化措施

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含胎肌条件培养液的DMD原代肌组织培养体系的建立 被引量：1

2

作者 谢建武 陈碧芬 +1 位作者 陈丽英 龚华实 《福建医学院学报》 1993年第3期189-192,共4页

应用含胎肌条件培养液的培养体系对 DMD 和正常肌组织进行原代培养。经倒置相差显微镜、透射电镜和 Desmin 免疫细胞化学技术鉴定,显示该培养体系能使肌组织成肌细胞生长并大量繁殖,分化良好,全部形成肌管。提示含胎肌条件培养液的培养... 应用含胎肌条件培养液的培养体系对 DMD 和正常肌组织进行原代培养。经倒置相差显微镜、透射电镜和 Desmin 免疫细胞化学技术鉴定,显示该培养体系能使肌组织成肌细胞生长并大量繁殖,分化良好,全部形成肌管。提示含胎肌条件培养液的培养体系能激活正常人及患者的肌卫星细胞,具有良好定向培养肌细胞的能力。 展开更多

关键词 肌营养障碍 肌组织 原代培养

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蓝花楹组培技术研究 被引量：19

3

作者 王红梅 《西部林业科学》 CAS 2008年第3期18-22,共5页

以蓝花楹实生苗茎尖作为外植体的组培技术研究结果表明,其组培中的启动培养基宜为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2 mg/L;增殖培养基宜为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L或MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5mg/L;生根培养基宜为1/2 MS+NAA0.5 mg/L。其试管苗适... 以蓝花楹实生苗茎尖作为外植体的组培技术研究结果表明,其组培中的启动培养基宜为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.2 mg/L;增殖培养基宜为MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L或MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.5mg/L;生根培养基宜为1/2 MS+NAA0.5 mg/L。其试管苗适宜的移栽基质为营养土+蛭石(比例1?1),移栽成活率为55.10%。有利于其试管苗增殖的光照条件为3 000 lx。继代次数对其试管苗的增殖和生根均有影响,而适宜转向生根培养的继代数最少为9代。 展开更多

关键词 蓝花楹 实生苗茎尖外植体 组织培养技术

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原代人牙周膜成纤维细胞的培养及培养方法的改进 被引量：8

4

作者 张明珠 雷雅燕 +2 位作者 刘晓 朱红 欧炯光 《昆明医学院学报》 2004年第1期53-56,共4页

目的 :探讨如何提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率 .方法 :组织来源于 11～ 15岁青少年因正畸而拔除的前磨牙 ,刮取牙根中 1/ 3的牙周膜组织 ,组织贴壁培养法进行培养 .采用冠根分离控制取材中的污染 ,首次传代前进行细胞分散的... 目的 :探讨如何提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率 .方法 :组织来源于 11～ 15岁青少年因正畸而拔除的前磨牙 ,刮取牙根中 1/ 3的牙周膜组织 ,组织贴壁培养法进行培养 .采用冠根分离控制取材中的污染 ,首次传代前进行细胞分散的方法来提高传代的成功率 ,并对培养细胞的形态及超微结构进行了观察 .结果 :经免疫组化染色证实所培养的细胞为牙周膜成纤维细胞 ,通过冠根分离法可有效的控制组织污染 ,首次传代前进行细胞分散可提高细胞传代成功率 ,从而使细胞培养成功率提高 .结论 :获得人牙周膜成纤维细胞 ,培养成功率在 15 %～ 2 0 % . 展开更多

关键词 牙周膜成纤维细胞 培养方法 组织培养法 原代培养

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大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞原代培养方法的改进 被引量：12

5

作者 孟立平 蒋承建 +3 位作者 赵飞 郭艳 池菊芳 郭航远 《温州医学院学报》 CAS 2015年第8期593-596,共4页

目的:探索提高大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)原代培养效率和纯度的方法。方法:在原有组织贴块法培育大鼠原代VSMCs的基础上进行改良,分离出胸主动脉后进一步分离中膜,DMEM高糖培养基中加入10μg/L血小板源性生长因子B(PDGF-B)。用细胞形态... 目的:探索提高大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)原代培养效率和纯度的方法。方法:在原有组织贴块法培育大鼠原代VSMCs的基础上进行改良,分离出胸主动脉后进一步分离中膜,DMEM高糖培养基中加入10μg/L血小板源性生长因子B(PDGF-B)。用细胞形态学及细胞免疫荧光对VSMCs进行鉴定。结果:6 d左右组织块周围有细胞爬出,12 d左右可以传代。镜下见细胞呈梭形,典型"峰谷"状排列生长;免疫荧光鉴定可见大量平滑肌肌动蛋白(SMA),比传统方法获得的细胞纯度高。结论:加入PDGF-B可以缩短大鼠VSMCs原代培养时间,提高效率;剥离中膜可以提高大鼠VSMCs原代细胞的纯度。 展开更多

关键词 原代细胞 血管平滑肌细胞 组织贴块法 血小板源性生长因子B

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组织块法培养原代人PDLCs技术的新探讨 被引量：10

6

作者 黄南楠 梁焕友 +2 位作者 唐倩 肖峰 李婵秀 《中华口腔医学研究杂志（电子版）》 CAS 2009年第1期7-10,共4页

目的探讨组织块法培养原代人PDLCs生长情况和成功率,以及提高组织块法培养原代人PDLCs成功率的方法。方法采用组织块法培养原代人PDLCs。免疫组化ABC法进行波形丝蛋白(VIM)和细胞角蛋白(CK)的免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微... 目的探讨组织块法培养原代人PDLCs生长情况和成功率,以及提高组织块法培养原代人PDLCs成功率的方法。方法采用组织块法培养原代人PDLCs。免疫组化ABC法进行波形丝蛋白(VIM)和细胞角蛋白(CK)的免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微镜下进行形态学观察,取第4代人PDLCs用MTT法绘制生长曲线。计算细胞培养成功率。结果组织块法培养原代人PDLCs成功率52.4%。波形丝蛋白染色阳性,细胞角蛋白染色阴性。细胞大多呈长梭形,胞体丰满,伸展良好,核仁清晰,细胞排列均匀,呈漩涡状,火焰状。生长曲线示细胞第3天开始进入对数生长期。结论本实验组织块法培养原代人PDLCs的成功率为52.4%,为人PDLCs作为种子细胞的牙周组织工程的研究,提供了实验基础和理论依据。 展开更多

关键词 人牙周韧带细胞 组织块培养法 牙周组织 种子细胞

原文传递

组织块法培养大鼠颌下腺细胞的实验研究 被引量：9

7

作者 黄巍巍 谭学新 +4 位作者 李波 王哲 李欣宇 马丽 黄丹丹 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期194-196,共3页

目的探讨组织块法培养大鼠颌下腺细胞(RSGC)的方法与细胞生长的特点。方法采用组织块法培养RSGC,使用酶消化法和差速贴壁法进行细胞纯化,免疫组织化学SABC方法进行细胞角蛋白-8免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微镜下进行形态学观... 目的探讨组织块法培养大鼠颌下腺细胞(RSGC)的方法与细胞生长的特点。方法采用组织块法培养RSGC,使用酶消化法和差速贴壁法进行细胞纯化,免疫组织化学SABC方法进行细胞角蛋白-8免疫组化染色,进行细胞来源鉴定。倒置显微镜下进行形态学观察,取第2代RSGC,FDA-PI双色荧光法检测细胞活力,MTT法绘制生长曲线。结果细胞角蛋白-8染色阳性。倒置显微镜下,细胞主要呈3种形态,为圆形亮细胞、多角形暗细胞、梭形暗细胞。细胞活力>95%,生长曲线表示细胞5d开始进入对数生长期。结论此方法简便,易操作,获得了大量的RSGC,为颌下腺细胞作为种子细胞的颌下腺组织工程研究提供了实验基础和理论依据。 展开更多

关键词 颌下腺细胞 组织块培养方法 酶消化法 差速贴壁法 组织工程

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人根尖牙乳头细胞分离、培养的研究 被引量：5

8

作者 郭俊 杨健 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1010-1012,共3页

目的:探讨采用组织块法从根尖牙乳头中分离AP细胞,为牙体及牙髓再生研究奠定基础。方法:前磨牙根尖分离牙乳头;组织块法分离AP细胞,计算集落形成率;免疫荧光、流式细胞仪检测细胞标记物。结果:细胞集落形成率为10～20colonies/103细胞;... 目的:探讨采用组织块法从根尖牙乳头中分离AP细胞,为牙体及牙髓再生研究奠定基础。方法:前磨牙根尖分离牙乳头;组织块法分离AP细胞,计算集落形成率;免疫荧光、流式细胞仪检测细胞标记物。结果:细胞集落形成率为10～20colonies/103细胞;细胞贴壁生长梭形或多角形核浆比大;原代细胞生长慢,传代后细胞生长快,可传12代以上;细胞表达间质干细胞标记物,AP细胞还表达神经干细胞标记物CD24、Nestin;不表达DSP。结论:组织块法能有效分离牙乳头细胞,AP细胞不同于牙髓干细胞(CD24-)。 展开更多

关键词 组织块培养 根尖牙乳头细胞 前磨牙

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大鼠下颌下腺细胞培养及其生物学特性研究 被引量：4

9

作者 柳康 王越 +4 位作者 彭慧敏 卢浩 马晓周 杜宝霞 张伟 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期816-818,共3页

目的:体外培养大鼠下颌下腺细胞,并对其生物学特性进行研究,为涎腺疾病的探索提供体外模型。方法:无菌条件下取7d龄Wistar大鼠双侧下颌下腺,仔细分离脂肪、包膜、神经和血管,采用组织块培养法进行培养。运用酶消化法和差速贴壁法纯化细... 目的:体外培养大鼠下颌下腺细胞,并对其生物学特性进行研究,为涎腺疾病的探索提供体外模型。方法:无菌条件下取7d龄Wistar大鼠双侧下颌下腺,仔细分离脂肪、包膜、神经和血管,采用组织块培养法进行培养。运用酶消化法和差速贴壁法纯化细胞;免疫组化SP法检测Cytokeratin-8(CK-8)抗体和α-Amylase抗体的表达;PAS染色法检测细胞糖原分泌;扫描电镜(scanning electronic microscopy,SEM)观察细胞的形态学特征。结果:组织块培养法可成功获得下颌下腺细胞,免疫组化染色可见大部分细胞胞质为棕黄色,提示CK-8抗体表达阳性,α-Amylase抗体表达阳性;PAS染色可见胞质呈紫红色;SEM可见细胞伸出长短不一的伪足,胞核着色深,有些细胞可见分泌颗粒。结论:组织块培养法可以成功培养大鼠下颌下腺细胞,并且操作简便。 展开更多

关键词 下颌下腺细胞 原代培养 组织块培养 扫描电镜

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组织块结合酶消化法培养婴幼儿血管瘤内皮细胞 被引量：3

10

作者 廖洪跃 邢新 +5 位作者 欧阳天祥 郭伶俐 李军辉 薛春雨 袁斯明 李鸣 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期147-150,共4页

目的:探讨血管瘤内皮细胞体外培养的方法并观察其生物学特性。方法:收集新鲜手术切除的婴幼儿血管瘤标本,采用组织块结合酶消化法培养内皮细胞,免疫组化EnVision法对培养的细胞进行鉴定;流式细胞仪FITC-CD34检测内皮细胞纯度;相差显微... 目的:探讨血管瘤内皮细胞体外培养的方法并观察其生物学特性。方法:收集新鲜手术切除的婴幼儿血管瘤标本,采用组织块结合酶消化法培养内皮细胞,免疫组化EnVision法对培养的细胞进行鉴定;流式细胞仪FITC-CD34检测内皮细胞纯度;相差显微镜下观察血管瘤内皮细胞的生物学特性。结果:共收集血管瘤标本14例,有8例成功培养出内皮细胞,内皮细胞呈现两种形态:多角形和梭形,经免疫组化鉴定为内皮细胞;培养的细胞中CD34+细胞数为76.28%;血管瘤内皮细胞有明显的"管腔形成"。结论:组织块结合酶消化法能成功培养较纯的婴幼儿血管瘤内皮细胞,培养的内皮细胞具有某些生物学特性。 展开更多

关键词 血管瘤 婴幼儿 内皮细胞 细胞培养 组织块结合酶消化法

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组织块法和酶消化法培养大鼠颌下腺细胞的比较研究 被引量：3

11

作者 王蕾 王雪红 +3 位作者 张华炎 汪义菲 熊永 韩立赤 《大连大学学报》 2014年第3期103-106,共4页

应用组织块法和酶消化法进行原代大鼠颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSGCs)分离培养,通过免疫细胞化学法检测细胞角蛋白-8的表达,经DAB染色均呈阳性,提示培养细胞为上皮细胞来源。在倒置显微镜下观察细胞数量、生长情况和... 应用组织块法和酶消化法进行原代大鼠颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSGCs)分离培养,通过免疫细胞化学法检测细胞角蛋白-8的表达,经DAB染色均呈阳性,提示培养细胞为上皮细胞来源。在倒置显微镜下观察细胞数量、生长情况和生长周期,两种方法所培养的原代大鼠颌下腺细胞均生长良好,相互聚集形成腺泡、腺管样结构或呈铺路石状。其中酶消化法所培养细胞贴壁较好,生长周期短,细胞数量更多。提示酶消化法分离培养较组织块法更易获得大量RSGCs,为以颌下腺细胞作为实验载体的涎腺非肿瘤性疾病的研究奠定了实验基础。 展开更多

关键词 颌下腺细胞 组织块法 酶消化法

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耳蜗血管纹组织块的缘细胞培养 被引量：2

12

作者 张运东 孔维佳 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期352-354,共3页

目的 :建立豚鼠耳蜗血管纹 (SV)组织块缘细胞 (MCs)的培养方法 ,为进一步研究药物耳毒性及其作用机制奠定基础。方法 :2 6只豚鼠按SV培养时间随机分成 4组 :2 4h组 (n =8) ;72h组 (n =8) ;>72h组 (n =8) ;对照组 (新鲜SV固定组 ,n =... 目的 :建立豚鼠耳蜗血管纹 (SV)组织块缘细胞 (MCs)的培养方法 ,为进一步研究药物耳毒性及其作用机制奠定基础。方法 :2 6只豚鼠按SV培养时间随机分成 4组 :2 4h组 (n =8) ;72h组 (n =8) ;>72h组 (n =8) ;对照组 (新鲜SV固定组 ,n =2 )。显微解剖数段连同螺旋韧带的SV组织块 ,置于 5 %CO2 / 95 %空气的二氧化碳恒温 (37℃ )培养箱中进行培养 ,分别进行形态学和组织学观察。结果 :培养 2 4hSV组织块保持良好活性 ,其组织学结构与新鲜固定的SV结构无明显差异 ;培养 72hSV组织块与新鲜固定的SV在组织学结构方面有显著性差异 ,不能观察到正常的SV结构 ,组织结构松散 ,缘细胞从组织块离心性生长出来 ;从SV组织块培养出的缘细胞能在培养皿内存活 13d。结论 :采用组织块培养技术 ,成功地建立了豚鼠耳蜗SV组织块的缘细胞培养方法 ;培养 2 4h的SV组织块光镜下保持了良好活性和正常组织学结构 ,可用来进一步研究药物耳毒性及其作用机制。 展开更多

关键词 耳蜗 血管纹 缘细胞 组织块培养

原文传递

人成肌细胞体外培养的动态观察和形态学的初步研究 被引量：2

13

作者 谢建武 陈碧芬 +6 位作者 陈丽英 慕容慎行 龚华实 王柠 吴翊钦 张文璇 陈莲云 《福建医学院学报》 1994年第2期107-111,共5页

以肌组织原代培养方法对正常人成肌细胞进行体外培养；用倒置相差显微镜观察成肌细胞的成肌过程，并应用透射和扫描电镜以及免疫细胞化学技术研究成肌细胞的超微结构以及中间丝结蛋白的分布情况。结果显示，体外培养肌细胞可分为缓慢生... 以肌组织原代培养方法对正常人成肌细胞进行体外培养；用倒置相差显微镜观察成肌细胞的成肌过程，并应用透射和扫描电镜以及免疫细胞化学技术研究成肌细胞的超微结构以及中间丝结蛋白的分布情况。结果显示，体外培养肌细胞可分为缓慢生长、分裂增殖和肌管形成期３个不同的生长、成熟阶段。成肌细胞是幼稚的早期单核肌细胞，体外分裂增殖能力强，可呈克隆生长或（和）簇状分布的不断的成熟分化过程。分裂增殖期成肌细胞胞浆有束状平行排列的肌丝以及线粒体和糖原分布，并呈逐步的分化成熟过程，可相互融合形成肌管，并可与初生肌管进一步融合发育成熟。各期成肌细胞胞浆中间丝结蛋白呈阳性反应，早期生成结蛋白量少且分布不均。上述方法对同期培养的成肌细胞与纤维母细胞可资鉴别。 展开更多

关键词 成肌细胞 结蛋白 体外培养 胞浆 动态观察 早期 形态学 生长 显微镜观察 育成

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‘夏日阳光’番茄侧芽离体培养快繁技术 被引量：2

14

作者 赖呈纯 潘红 +2 位作者 范丽华 谢鸿根 黄贤贵 《中国农学通报》 2016年第34期49-54,共6页

‘夏日阳光’番茄是近年来引进的高端品种,丰产性好、品质高,深受市场的青睐,但其种子为F1代杂种,价格昂贵,很难在市场上大面积推广。利用植物离体培养技术快速繁殖‘夏日阳光’番茄种苗,是生产上推广该品种的一条可行途径。为快速建立... ‘夏日阳光’番茄是近年来引进的高端品种,丰产性好、品质高,深受市场的青睐,但其种子为F1代杂种,价格昂贵,很难在市场上大面积推广。利用植物离体培养技术快速繁殖‘夏日阳光’番茄种苗,是生产上推广该品种的一条可行途径。为快速建立‘夏日阳光’番茄无菌株系以及获得其试管芽苗的高效增殖,以‘夏日阳光’番茄侧芽为材料,探讨其离体培养过程中的关键技术。试验结果表明,采用0.1%Hg Cl2溶液(w/v)加2滴土温20消毒8 min的处理方式消毒后,培养在MS+0.1 mg/L BA+0.1 mg/L IBA培养基中,可以较快速地建立‘夏日阳光’番茄无菌株系,成苗率为46.7%;继代增殖适宜的培养基配方为MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA,增殖系数可达4.3,并且芽苗生长健壮,为其种苗的规模化繁育提供技术基础。 展开更多

关键词 番茄 侧芽 外植体 增殖 快繁技术

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速尿对离体培养豚鼠血管纹毒性作用的观察 被引量：1

15

作者 张运东 孔维佳 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2002年第3期174-176,T002,共4页

目的　观察速尿对离体培养的豚鼠血管纹组织的影响 ,探讨速尿耳毒性的作用机制。方法　 2 0只花色豚鼠随机分成二组 :速尿组 (n =16 ) ,正常对照组 (n =4)。应用组织块培养的方法 ,将血管纹组织培养 2 4小时 ,随即对不同的实验组分别应... 目的　观察速尿对离体培养的豚鼠血管纹组织的影响 ,探讨速尿耳毒性的作用机制。方法　 2 0只花色豚鼠随机分成二组 :速尿组 (n =16 ) ,正常对照组 (n =4)。应用组织块培养的方法 ,将血管纹组织培养 2 4小时 ,随即对不同的实验组分别应用不同终浓度的速尿 (6 0、30 0、6 0 0、12 5 0、2 5 0 0 μg/ml) ,分别继续培养 30分钟和 90分钟 ,观察培养的血管纹组织学结构。结果　速尿组在组织学方面均未出现血管纹水肿、缘细胞胞浆肿胀、细胞间隙扩大和中间细胞皱缩等病理改变 ,与对照组相比较血管纹结构无显著性差异。结论　速尿对体外培养的豚鼠血管纹组织无明显诱导水肿的作用 ,提示速尿耳毒性的产生 。 展开更多

关键词 速尿 耳毒性 血管纹 组织块培养 FUR

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