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贵妃鸡羽速基因分子检测及相关早熟性状分析 被引量：18
1
作者 李培周 李华 +4 位作者 杜炳旺 陈洁波 陶林 陈琦 林丽超 《中国家禽》 北大核心 2013年第21期5-8,共4页
利用鸡性连锁羽速基因K/k+中慢羽基因K与内源性病毒21基因(ev21)的关系,对贵妃鸡ev21基因插入位点,进行贵妃鸡羽速基因的分子检测。检测结果与雏鸡羽速表型判定结果间一致率达99.24%。应用PCR-RFLP,对38只表型为慢羽的贵妃公鸡基因型进... 利用鸡性连锁羽速基因K/k+中慢羽基因K与内源性病毒21基因(ev21)的关系,对贵妃鸡ev21基因插入位点,进行贵妃鸡羽速基因的分子检测。检测结果与雏鸡羽速表型判定结果间一致率达99.24%。应用PCR-RFLP,对38只表型为慢羽的贵妃公鸡基因型进行检测,其中21个是纯合子,15个杂合子,2个ev21缺失个体,表型慢羽公鸡分子分型结果与常规测交验证的准确率达94.74%。同时分析了不同羽速类型120日龄贵妃鸡的相关早熟性状,结果显示:同一性别中慢羽鸡体重大于快羽鸡、肉垂长度则小于快羽鸡,但均差异不显著(P>0.05);慢羽公鸡的冠高显著大于快羽公鸡(P<0.05),慢羽母鸡的通管评分则显著优于快羽系(P<0.05);慢羽公鸡中,纯合子与杂合子在各相关早熟性状间均差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 贵妃鸡 ev21基因 表型 早熟性状
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清远麻鸡羽速基因的分子检测及其与体重和冠高相关性分析 被引量：12
2
作者 李培周 朱晓萍 +4 位作者 邝智祥 李华 景栋林 林丽超 谢艳玲 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第7期10-12,共3页
本研究旨在探讨清远麻鸡的羽速分子检测技术鉴别的准确性以及在生产中的应用,以加快配套系的组建。基于内源性病毒21基因(ev21)结合位点与慢羽基因K紧密连锁,对清远麻鸡中249个个体进行ev21基因插入位点的PCR检测,并进一步对慢羽系80只... 本研究旨在探讨清远麻鸡的羽速分子检测技术鉴别的准确性以及在生产中的应用,以加快配套系的组建。基于内源性病毒21基因(ev21)结合位点与慢羽基因K紧密连锁,对清远麻鸡中249个个体进行ev21基因插入位点的PCR检测,并进一步对慢羽系80只公鸡进行PCR-RFLP分型,分析羽速与体重、冠高的相关性。结果表明:ev21基因插入位点的分子检测与表型鉴定一致率达到98.8%;分型发现32个为杂合子,19个为纯合子,29个为缺失体;在清远麻鸡的快羽系和慢羽系中,110日龄的体重和冠高呈高强度正相关,相关系数(r)分别为0.886和0.694(P<0.01);但快慢羽品系间体重和冠高差异不显著(P>0.05)。结果显示,清远麻鸡中应用快慢羽分子检测技术有利于选育计划的实施。 展开更多
关键词 ev21基因 冠高 体重 清远麻鸡
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清远麻鸡快慢羽品系产蛋性能比较分析 被引量：10
3
作者 刘聪 李华 +3 位作者 张正芬 华国洪 罗杰灵 于辉 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1625-1631,共7页
【目的】明确清远麻鸡快慢羽系产蛋性能差异,并分析清远麻鸡慢羽系中Z染色体上K基因座禽内源性白血病毒21基因(ev21)对产蛋性能的影响,为下一步培育无ev21基因清远麻鸡品系及开展抗性研究提供参考依据。【方法】运用不同产蛋模型拟合不... 【目的】明确清远麻鸡快慢羽系产蛋性能差异,并分析清远麻鸡慢羽系中Z染色体上K基因座禽内源性白血病毒21基因(ev21)对产蛋性能的影响,为下一步培育无ev21基因清远麻鸡品系及开展抗性研究提供参考依据。【方法】运用不同产蛋模型拟合不同羽速清远麻鸡的产蛋曲线,寻找最佳模型并分析产蛋过程中存在的问题;采用PCRRFLP检测清远麻鸡慢羽系中ev21基因的插入情况。【结果】清远麻鸡慢羽系的开产日龄极显著迟于快羽系(P<0.01,下同),但开产体重和开产蛋重、40周龄蛋重及64周龄产蛋量均极显著高于快羽系,清远麻鸡慢羽系的40周龄体重极显著低于快羽系。利用伍德模型、杨宁模型和分室模型分别对清远麻鸡快慢羽系的产蛋率进行拟合,发现慢羽系和快羽系均以杨宁模型拟合的效果最佳,对应的拟合度(R2)分别为0.966和0.974。在清远麻鸡慢羽系中,L1亚群(含ev21基因)和L2亚群(不含ev21基因)间的产蛋性能差异均不显著(P>0.05),即ev21基因存在与否对产蛋性能无明显影响。【结论】清远麻鸡慢羽系产蛋性能优于快羽系,具体表现为产蛋率高,蛋重,且产蛋量多;ev21基因存在与否对清远麻鸡慢羽系产蛋性能无直接影响。清远麻鸡慢羽系产蛋性能尚有提升空间,因此生产上需加强其产蛋期的饲养管理。 展开更多
关键词 清远麻鸡 快羽系 慢羽系 ev21基因 产蛋性能
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北京油鸡羽速基因分子检测及其对生产性能的影响 被引量：8
4
作者 初芹 张剑 +3 位作者 张爱平 王海宏 耿爱莲 刘华贵 《中国家禽》 北大核心 2011年第6期30-33,共4页
通过对北京油鸡雏鸡进行羽速表型判定，并与ev21基因插入位点分子检测结果比对，二者之间一致性达到99％，证实羽速基因在北京油鸡群体中属于性连锁基因，具备建立自别雌雄配套系的遗传基础。对不同羽速类型北京油鸡母鸡生产性能分析发... 通过对北京油鸡雏鸡进行羽速表型判定，并与ev21基因插入位点分子检测结果比对，二者之间一致性达到99％，证实羽速基因在北京油鸡群体中属于性连锁基因，具备建立自别雌雄配套系的遗传基础。对不同羽速类型北京油鸡母鸡生产性能分析发现，不同羽型油鸡母鸡8～22周双周末体重差异不显著（P〉0．05），42－44周龄总产蛋数以及相同日龄蛋重之间均差异不显著（P〉0．05）。 展开更多
关键词 北京油鸡 羽速 ev21基因 生产性能
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慢羽系麒麟公鸡纯合个体分子检测方法的建立 被引量：7
5
作者 李珊珊 李东华 +3 位作者 吕福琨 董晶 李艳青 杜炳旺 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第7期118-121,共4页
为建立一种快速准确鉴定麒麟公鸡慢羽纯合子的分子检测方法,以加快纯合慢羽系及其配套系的育种速度,利用鸡性连锁羽速基因K/k中慢羽基因K与禽白血病内源性病毒基因ev21的紧密连锁关系,选择241只(直观鉴定171只为表型慢羽,70只为表型快羽... 为建立一种快速准确鉴定麒麟公鸡慢羽纯合子的分子检测方法,以加快纯合慢羽系及其配套系的育种速度,利用鸡性连锁羽速基因K/k中慢羽基因K与禽白血病内源性病毒基因ev21的紧密连锁关系,选择241只(直观鉴定171只为表型慢羽,70只为表型快羽)140日龄麒麟公鸡,应用PCR扩增URa和URb基因以鉴定其快、慢羽型,再扩增ev21基因,并采用限制性内切酶HaeⅢ对慢羽鸡扩增产物进行消化,检测基因型为纯合子的慢羽公鸡。麒麟鸡羽速类型检测结果显示,慢羽公鸡(170只)2条带,快羽麒麟公鸡(71只)1条带。慢羽公鸡酶切基因分型结果显示,酶切后有2条带的为ev21缺失个体(72只),有3条带的是杂合个体(94只),有1条带的为纯合个体(5只)。综上,可以利用ev21插入位点鉴定麒麟鸡基因型是否为纯合的慢羽个体。 展开更多
关键词 麒麟鸡 羽速基因 ev21基因 纯合子 配套系
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鸡慢羽基因型在不同品种中多态性及其与产蛋性状相关性研究
6
作者 贾子佳 南九红 +1 位作者 蔡金萍 李世军 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期16-21,共6页
研究旨在丰富慢羽基因型的分子标记并探究慢羽基因型与产蛋量的相关关系。试验基于2个慢羽母鸡群体京红1号父母代种鸡母本和欣华鸡母本鉴定慢羽基因型的种类,采用PCR扩增方法检测个体中融合基因dPRLR-dSPEF2和内源性逆转录病毒ev21基因... 研究旨在丰富慢羽基因型的分子标记并探究慢羽基因型与产蛋量的相关关系。试验基于2个慢羽母鸡群体京红1号父母代种鸡母本和欣华鸡母本鉴定慢羽基因型的种类,采用PCR扩增方法检测个体中融合基因dPRLR-dSPEF2和内源性逆转录病毒ev21基因的插入情况。结果显示:在两个慢羽母鸡群体中存在6种不同的慢羽基因型,当个体存在ev21基因(OR)或融合基因dPRLR-dSPEF2中的任意一种或两种时均表现为慢羽,当无ev21基因(UR)且融合基因dPRLR-dSPEF2也不存在时,表现为快羽;11个其他品种快慢羽基因型频率统计发现不同的品种快慢羽基因型频率存在差异。个体中携带融合基因dPRLR-dSPEF2时,其产蛋量会显著高于不携带者(P<0.05);与仅携带ev21基因(OR突变)的个体相比,同时携带ev21基因(OR突变)和正常UR区域的产蛋量有显著升高(P<0.05)。研究表明,ev21插入和融合基因并非鸡快慢羽的唯一关联突变,且京红1号父母代群体中慢羽基因型间存在显著的产蛋量差异。 展开更多
关键词 鸡 快慢羽 融合基因dPRLR-dSPEF2 ev21基因 产蛋量
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地方品种鸡ev21基因和JS序列分布对鸡羽速表型的影响 被引量：2
7
作者 付华丽 莫国东 +2 位作者 伍子放 王归燕 张细权 《中国家禽》 北大核心 2021年第3期11-15,共5页
试验旨在探究多个地方品种快慢羽鸡的内源性病毒基因21(ev21)以及SPEF2基因与PRLR基因的部分重复序列(JS序列)分布对羽速基因(Kk)表型的影响。采用PCR扩增、HaeⅢ限制性内切酶酶切的方法检测不同地方品种快慢羽鸡性染色体上OR区域(ev21... 试验旨在探究多个地方品种快慢羽鸡的内源性病毒基因21(ev21)以及SPEF2基因与PRLR基因的部分重复序列(JS序列)分布对羽速基因(Kk)表型的影响。采用PCR扩增、HaeⅢ限制性内切酶酶切的方法检测不同地方品种快慢羽鸡性染色体上OR区域(ev21占据片段)、UR区域(URa、URb(ev21未占据片段))以及JS序列分布情况。结果表明:国内的一些地方品种部分慢羽鸡个体OR区域ev21基因缺失以及部分快羽鸡的URb区域存在ev21基因插入;可通过JS序列扩增对快慢羽表型进行准确鉴定。研究结果显示JS序列可作为快慢羽鉴定候选基因,该方法可广泛应用于国内快慢羽鸡种的鉴定。 展开更多
关键词 快慢羽 鸡 ev21基因 OR区域 UR区域 JS序列
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乌骨鸡快慢羽的ev21和dSPEF2/dPRLR分子标记检测 被引量：2
8
作者 王欢欢 宋丹丹 +3 位作者 葛莹 张雷 李庆海 章学东 《浙江畜牧兽医》 2020年第2期1-3,共3页
鸡的快慢羽性状受Z染色体上的一对等位基因(Kk)所控制。据报道,慢羽K基因通常携带有插入的内源性病毒基因21(ev21基因)。同时,慢羽K基因还可能包含由SPEF2基因和PRLR基因的非编码区融合组成的重复片段(dSPEF2/dPRLR基因)。为明确乌骨鸡... 鸡的快慢羽性状受Z染色体上的一对等位基因(Kk)所控制。据报道,慢羽K基因通常携带有插入的内源性病毒基因21(ev21基因)。同时,慢羽K基因还可能包含由SPEF2基因和PRLR基因的非编码区融合组成的重复片段(dSPEF2/dPRLR基因)。为明确乌骨鸡新品系的快慢羽分子结构特点,本试验选择HW1系黑羽乌骨鸡,在1日龄时,对756只健康雏鸡进行羽速观察,区分快羽和慢羽鸡。在90日龄时,分别采集快羽和慢羽鸡各40只血液,采用ev21基因和dSPEF2/dPRLR基因扩增引物及双重PCR方法扩增特异性片段。结果显示:HW1系乌骨鸡的快羽和慢羽鸡比例分别为72.2%和27.8%。慢羽乌骨鸡样本采用ev21基因引物扩增电泳后出现396 bp和341 bp两条带,而快羽乌骨鸡仅出现396 bp一条带。采用dSPEF2/dPRLR基因引物扩增电泳后,慢羽乌骨鸡样本出现1950 bp和1437 bp两条带,而快羽乌骨鸡仅出现1950 bp一条带。40只快羽鸡和40只慢羽鸡的ev21基因和dSPEF2/dPRLR基因PCR分型结果与出雏时的羽速观察分型结果一致。本试验表明,HW1系乌骨鸡中存在快慢羽性状,慢羽鸡的K基因上同时含有ev21插入基因和融合基因dSPEF2/dPRLR。因此后续研究中,将重点考虑以ev21和dSPEF2/dPRLR作为乌骨鸡快慢羽筛选的分子标记,达到准确区分纯合(ZKZK)与杂合(ZKZk)的慢羽公鸡,加快品系的选育速度。 展开更多
关键词 乌骨鸡 快慢羽 ev21基因 dSPEF2/dPRLR基因
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慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因敲除 被引量：1
9
作者 徐天鹏 吴思乐 +6 位作者 温健 韦义荣 李思佳 谢龙 虞霖田 宋中宝 陆阳清 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2259-2266,共8页
【目的】探索在慢羽鸡成纤维细胞中敲除ev21基因的可行性,净化鸡群内源性逆转录病毒,同时为快速培育缺失ev21基因的慢羽鸡配套系打下基础。【方法】根据ev21基因序列(KY235336)特点,分别在其5’和3’端各设计2个sgRNA,用于构建4种不同sg... 【目的】探索在慢羽鸡成纤维细胞中敲除ev21基因的可行性,净化鸡群内源性逆转录病毒,同时为快速培育缺失ev21基因的慢羽鸡配套系打下基础。【方法】根据ev21基因序列(KY235336)特点,分别在其5’和3’端各设计2个sgRNA,用于构建4种不同sgRNA的打靶质粒,筛选出在5’和3’端打靶效率较高的sgRNA。然后基于CRISPR/Cas9基因编辑技术对ev21基因进行剪切,并通过同源重组方式以红色荧光蛋白(mCherry)的DNA片段(CAG-mCherry)替换ev21基因,实现对慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因定点敲除。【结果】在慢羽鸡成纤维细胞中能检测到ev21基因,构建的4种sgRNA(sgRNA1~sgRNA4)均能成功插入对应的打靶质粒中,经嘌呤霉素筛选及T7E1酶切检测,发现转染4种不同sgRNA打靶质粒后慢羽鸡成纤维细胞均有不同程度的死亡,其中又以sgRNA1和sgRNA3的基因敲除效率较高。同时针对同源位点左右同源臂构建表达mCherry的供体质粒,以其转染293T细胞12 h后均能表达出mCherry。以sgRNA1和sgRNA3打靶质粒及供体质粒共同转染慢羽鸡成纤维细胞,观察发现成纤维细胞内的mCherry持续表达,至转染后第30 d通过流式细胞仪分选收集红色荧光阳性成纤维细胞,并提取其总DNA进行PCR鉴定与基因测序,结果显示红色荧光阳性成纤维细胞中有目的片段(CAG-mCherry)插入,即以插入替换方式能实现对ev21基因的敲除。【结论】基于crispr/cas9基因编辑技术的基因敲除方法能成功敲除慢羽鸡成纤维细胞内源性白血病病毒ev21基因,为培育缺失ev21基因的慢羽鸡品系提供技术支持。 展开更多
关键词 慢羽鸡 禽白血病病毒(ALV) ev21基因 CRISPR/Cas9 基因敲除
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