eIF4E与磷酸化eIF4E结合蛋白1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量：4

1

作者 万婕 吴人亮 周晟 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期764-767,共4页

目的观察真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)及磷酸化eIF4E结合蛋白1(p-4EBP1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达,并探讨其与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移等临床病理特征间的关系。方法采用免疫组化EnVinsion法检测66例乳头状癌(经典型乳头状癌37... 目的观察真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)及磷酸化eIF4E结合蛋白1(p-4EBP1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达,并探讨其与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移等临床病理特征间的关系。方法采用免疫组化EnVinsion法检测66例乳头状癌(经典型乳头状癌37例,滤泡型乳头状癌29例)、20例结节性甲状腺肿伴乳头状增生及上述病例的肿瘤旁正常甲状腺组织中eIF4E与p-4EBP1的表达。结果在肿瘤旁正常甲状腺组织、甲状腺肿伴乳头状增生及乳头状癌中,eIF4E的阳性率分别为11.6%(10/86)、50.0%(10/20)和84.8%(56/66)(P<0.01);p-4EBP1的阳性率分别为8.1%(7/86)、40.0%(8/20)和66.7%(44/66)(P<0.01),并且p-4EBP1在滤泡型乳头状癌中的表达显著高于其在经典型乳头状癌中的表达(P<0.01)。eIF4E在有腺外侵袭和淋巴结转移的病例中的阳性率分别为96.7%(29/30)和100.0%(29/29),分别高于无腺外侵袭和无淋巴结转移的病例,后者阳性率分别为75.0%(27/36)和73.0%(27/37)(P<0.05)。而p-4EBP1在这两组病例中的表达差异则无显著性意义(P>0.05)。结论和正常甲状腺及甲状腺良性病变相比,eIF4E和p-4EBP1在乳头状癌中存在过表达;eIF4E的过表达与乳头状癌的侵袭与转移关系密切,在乳头状癌的进展中可能发挥了重要作用。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 乳头状 真核细胞翻译起始因子4e 真核细胞翻译起始因子4e结合蛋白1

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基于mTOR-p70S6K/4EBP1信号通路探讨淫羊藿苷抑制病毒性心肌炎模型小鼠心肌损伤的实验研究 被引量：1

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作者 黄莉芳 刘超权 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2023年第9期52-56,共5页

目的探讨淫羊藿苷对病毒性心肌炎小鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)/真核细胞起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)信号通路的影响。方法健康雄性BALB/c小鼠65只,分为对照组(n=11)和模型组(n=54)。模型组采用柯萨奇病毒B3标... 目的探讨淫羊藿苷对病毒性心肌炎小鼠雷帕霉素靶蛋白(mTOR)-p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)/真核细胞起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)信号通路的影响。方法健康雄性BALB/c小鼠65只,分为对照组(n=11)和模型组(n=54)。模型组采用柯萨奇病毒B3标准株腹腔接种建立病毒性心肌炎小鼠模型,对照组给予等体积不含病毒的培养液腹腔注射。将造模成功的小鼠随机分为模型组(n=11)、淫羊藿苷低浓度组(n=12)、淫羊藿苷高浓度组(n=12)和卡托普利组(n=11)。模型组与对照组分别予以0.5%羧甲基纤维素钠;淫羊藿苷低、高浓度组分别予以8、16 mg/mL淫羊藿苷混悬液;卡托普利组予以10 mg/mL卡托普利混悬液;各组药物灌胃剂量均为10 mL/kg,每日1次,连续干预60 d。检测比较各组小鼠心脏超声指标,心肌组织病理评分,心肌胶原容积分数(CVF),血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)、Ⅲ型前胶原氨基端原肽(PⅢNP)、转化生长因子β1(TGF-β1)含量,以及心肌组织磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化p70S6K(p-p70S6K)、磷酸化4EBP1(p-4EBP1)表达水平。结果干预后,与模型组比较,各组小鼠左室收缩末期内径(LVEDs)、左室舒张末期内径(LVEDd)较低,左室内径缩短率(FS)水平较高,心肌组织病理学评分较低,心肌CVF较低,血清PⅠCP、PⅢNP、TGF-β1含量较低,心肌组织p-mTOR、p-p70S6K、p-4EBP1表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05),且淫羊藿苷干预组呈一定量效关系。结论淫羊藿苷能剂量依赖性地改善病毒性心肌炎小鼠心脏收缩舒张功能,减轻心肌组织病理损伤,延缓心肌纤维化,其作用可能与抑制mTOR-p70S6K/4EBP1信号通路活性有关。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 病毒性心肌炎 心肌纤维化 雷帕霉素靶蛋白 p70核糖体蛋白S6激酶 真核细胞起始因子4e结合蛋白1

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神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1在外伤性癫痫致痫灶中的表达及其临床意义 被引量：1

3

作者 付建辉 张霞 +1 位作者 周键 陈奇翰 《中国卫生检验杂志》 CAS 2021年第4期462-465,共4页

目的探讨神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1在外伤性癫痫致痫灶中的表达及其临床意义。方法选择2017年1月-2019年6月本院接诊外伤性癫痫患者37例纳入研究组,经手术切除癫痫致癫灶;同期,另选择于单纯脑外伤患者40例纳入对照组,分别于脑外伤... 目的探讨神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1在外伤性癫痫致痫灶中的表达及其临床意义。方法选择2017年1月-2019年6月本院接诊外伤性癫痫患者37例纳入研究组,经手术切除癫痫致癫灶;同期,另选择于单纯脑外伤患者40例纳入对照组,分别于脑外伤后6 h内手术获取脑组织样本。通过蛋白质印迹法测定外伤性癫痫致癫灶中KCC2、NKCC1、4E-BP1表达,并利用RT-PCR法测定外伤性癫痫致癫灶中KCC2 m RNA、NKCC1 m RNA、4E-BP1m RNA相对表达量。结果蛋白质印迹法检测显示:研究组患者的神经元细胞KCC2相对灰度值低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);研究组患者的神经元细胞NKCC1、4E-BP1相对灰度值均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);RT-PCR检测显示:研究组患者的致癫灶中KCC2 m RNA相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);研究组患者的致癫灶中NKCC1 m RNA、4E-BP1 m RNA相对表达量均高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论神经元细胞KCC2、NKCC1及4E-BP1为脑外伤后患者脑组织的组织学改变、癫痫反复发作主要分子机制;KCC2在外伤性癫痫致癫灶中表达异常降低,而神经元细胞NKCC1、4E-BP1的表达异常增高,可以作为外伤性癫痫致痫灶靶向诊断因子。 展开更多

关键词 神经元细胞 钾离子-氯离子共转运体2 钠离子-钾离子-氯离子共转运体1 真核细胞始动因子4e结合蛋白1 外伤性癫痫

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利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建敲除4EBP1基因的乳腺癌细胞系

4

作者 鄱宛玉 张哲 +3 位作者 罗国兰 黄芳 郑红 李山虎 《中华乳腺病杂志（电子版）》 CAS CSCD 2023年第3期143-150,共8页

目的利用规律性重复短回文序列簇/相关基因9(CRISPR/Cas9)编辑技术构建真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)基因敲除的人乳腺癌MCF-7、ZR-75-1细胞系。方法设计能特异性针对4EBP1基因的特异性向导RNA(sgRNA),以lentiCRISPRv2质粒为骨架... 目的利用规律性重复短回文序列簇/相关基因9(CRISPR/Cas9)编辑技术构建真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4EBP1)基因敲除的人乳腺癌MCF-7、ZR-75-1细胞系。方法设计能特异性针对4EBP1基因的特异性向导RNA(sgRNA),以lentiCRISPRv2质粒为骨架构建能表达sgRNA和Cas9蛋白的重组质粒。测序鉴定后将重组质粒与逆转录病毒包装质粒pMD2.G、psPAX2共同转入HEK293T细胞进行慢病毒包装,收集病毒上清感染人乳腺癌MCF-7、ZR-75-1细胞。利用嘌呤霉素筛选4EBP1表达缺失的MCF-7、ZR-75-1细胞,DNA测序和Westernblot验证。在MCF-7、ZR-75-1野生型与4EBP1基因敲除的细胞中转人pcDNA3-rluc-poli-IRESfluc质粒,并用双荧光素酶报告基因实验检测4EBP1、4EBP1不同突变体对帽子依赖翻译的影响,以海肾荧光素酶与萤火虫荧光素酶比值(R/F比值)来表示帽子依赖的翻译水平。R/F比值的组间比较采用t检验,两两比较采用LSD法。结果Western blot结果显示构建的3种lentiCRISPRv2-4EBP1-KO重组质粒转染MCF-7、ZR-75-1细胞后,4EBP1蛋白的表达水平均明显降低,说明4EBP1基因敲除成功。DNA测序发现MCF-7细胞的DNA序列中sgRNA出现了T碱基的插入突变,在ZR-75-1细胞DNA序列中sgRNA出现了GC碱基的缺失突变,证明细胞基因组DNA中的基因编辑成功。野生型和4EBP1基因敲除的ZR-75-1细胞中测得的R/F比值分别为1.83±0.10和5.48±0.33,组间比较差异有统计学意义(t=-18.338,P<0.001)。野生型和4EBP1基因敲除的MCF-7细胞中测得的R/F比值分别为1.17±0.06和2.03±0.20,组间比较差异有统计学意义(t=-7.167,P<0.001)。4EBP1基因敲除、敲除后分别转染4EBP1、plv-neo-4EBP1-37/46和plv-neo-4EBP1-4A的4种ZR-75-1细胞中测得的R/F比值分别为5.48±0.33、3.83±0.10、3.53±0.23和1.87±0.05,组间比较差异有统计学意义(F=151.995,P<0.001);4种MCF-7细胞中测得的R/F比值分别为2.03±0.200、1.37±0.14、1.90±0.19和1.20±0.17组间比较差异有统计学意 展开更多

关键词 真核翻译起始因子4e结合蛋白1 人类 乳腺肿瘤 细胞系 肿瘤

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C-myb蛋白、4E-BP1蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达与预后的关系

5

作者 崔红丽 贾洪菊 许杰 《临床和实验医学杂志》 2023年第20期2165-2168,共4页

目的探讨转录激活因子Myb(C-myb)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(4E-BP1)蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达及与预后的关系。方法回顾性选取2017年12月至2019年12月在秦皇岛市第一医院治疗的NK/T细胞淋巴瘤患者34例作为观察组,同时选... 目的探讨转录激活因子Myb(C-myb)、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(4E-BP1)蛋白在NK/T细胞淋巴瘤中的表达及与预后的关系。方法回顾性选取2017年12月至2019年12月在秦皇岛市第一医院治疗的NK/T细胞淋巴瘤患者34例作为观察组,同时选取腺样体肥大组织30例作为对照组。采用免疫组织化学法检测C-myb、4E-BP1表达,比较两组患者C-myb、4E-BP1表达情况,分析观察组C-myb、4E-BP1表达与临床病理关系。采用Spearman秩相关分析C-myb和4E-BP1表达相关性。随访患者总体生存时间,分析C-myb、4E-BP1表达与预后的关系。结果观察组C-myb和4E-BP1阳性表达率分别为55.88%和61.76%,明显高于对照组(10.00%、6.67%),差异均有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅳ患者C-myb阳性表达率为91.67%,明显高于Ⅰ~Ⅱ患者(36.36%),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、原发部位、B症状、国际预后指数(IPI)指数及淋巴结侵犯患者C-myb阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。IPI指数≤2分患者4E-BP1阳性表达率为76.00%,明显高于IPI指数>2分患者(22.22%),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、原发部位、B症状、临床分期及淋巴结侵犯患者4E-BP1阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P>0.05);C-myb和4E-BP1表达呈正相关(r_(s)=0.642,P<0.05);C-myb阳性表达和阴性表达患者中位总生存时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);4E-BP1阳性表达患者中位总生存时间为24个月(95%CI:21.15~26.85),明显短于4E-BP1阴性表达患者的33个月(95%CI:32.20~33.80),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NK/T细胞淋巴瘤中C-myb和4E-BP1蛋白表达上调,与临床分期、IPI指数有一定关系,其中4E-BP1表达与患者预后可能有一定联系。 展开更多

关键词 转录激活因子Myb 真核细胞翻译起始因子4e结合蛋白-1 NK/T细胞淋巴瘤 预后 临床病理特征

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磷酸化真核细胞始动因子4E结合蛋白1表达水平与乳腺癌患者淋巴结转移的关联性

6

作者 唐艳林 黄晶 梁英 《中外医学研究》 2021年第26期68-70,共3页

目的:研究磷酸化真核细胞始动因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)表达水平与乳腺癌患者淋巴结转移的关联性。方法:选取2018年6月-2019年6月本院乳腺癌患者134例,检测癌组织、癌旁组织中p-4EBP1表达阳性率,并分析其与临床病理学特征、淋巴结转移... 目的:研究磷酸化真核细胞始动因子4E结合蛋白1(p-4EBP1)表达水平与乳腺癌患者淋巴结转移的关联性。方法:选取2018年6月-2019年6月本院乳腺癌患者134例,检测癌组织、癌旁组织中p-4EBP1表达阳性率,并分析其与临床病理学特征、淋巴结转移的相关性。结果:癌组织p-4EBP1表达阳性率为65.67%,高于癌旁组织的11.94%,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、TNM分期、肿瘤直径、组织学分级、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体-2(Her-2)表达的患者乳腺癌组织中p-4EBP1表达情况比较差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌p-4EBP1阳性患者中淋巴结转移占比62.50%,高于阴性患者的37.50%(P<0.05);淋巴结转移p-4EBP1阳性患者中淋巴结转移≥4枚占比54.55%,高于阴性患者的11.76%(P<0.05)。经Pearson相关性分析,p-4EBP1表达水平与淋巴结转移呈正相关(r=0.589,P<0.05),且当淋巴结转移≥4枚时,相关性最显著(r=0.654,P<0.05)。结论:p-4EBP1在乳腺癌组织中阳性表达增高,且与淋巴结转移具有关联性,转移枚数越多,相关性越强,有助于临床诊断与治疗。 展开更多

关键词 磷酸化真核细胞始动因子4e结合蛋白1 乳腺癌 淋巴结转移 临床分期 组织学分级 关联性

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RIP3/MLKL通过激活4EBP1-eIF4E通路诱导程序性坏死 被引量：1

7

作者 王树超 徐玫丽 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期979-985,共7页

目的:程序性坏死是一种由受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)和混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)介导的细胞死亡形式,有研究指出哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路可能参与程序性... 目的:程序性坏死是一种由受体相互作用蛋白3(receptor interacting protein 3,RIP3)和混合谱系激酶域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein,MLKL)介导的细胞死亡形式,有研究指出哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路可能参与程序性坏死的调控,真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1(eukaryotic translation initiation factor 4Ebinding protein 1,4EBP1)-真核起始因子4E(eukaryotic initiation factor 4E,eIF4E)通路是哺乳动物雷帕霉素靶蛋白最重要的下游分子通路之一,然而此通路是否参与程序性坏死的发生,目前尚无相关研究。本研究旨在探索4EBP1-eIF4E通路在程序性坏死中是否发生改变。方法:首先向小鼠上皮样成纤维细胞系L929细胞中加入程序性坏死诱导剂TSZ(TNF-α/SM-164/Z-VAD-FMK),在光学显微镜下观察细胞坏死情况;进一步向敲除RIP3和MLKL基因的L929细胞中加入TSZ,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色观察细胞坏死情况,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测4EBP1和eIF4E的mRNA和蛋白质表达水平。结果:野生型L929细胞用TSZ处理后,坏死细胞增加,4EBP1的mRNA和蛋白质表达水平明显下调且磷酸化的4EBP1(phosphorylated 4EBP1,p-4EBP1)/4EBP1值增加(P<0.05或P<0.01),eIF4E的mRNA表达水平明显上调且磷酸化的eIF4E(phosphorylated eIF4E,p-eIF4E)/eIF4E值增加(均P<0.01);在敲除L929细胞中的RIP3和MLKL基因后,PI阳性坏死细胞明显减少,4EBP1的mRNA和蛋白质表达水平明显上调且p-4EBP1/4EBP1值下降(P<0.05或P<0.01),eIF4E的mRNA表达水平明显下调且p-eIF4E/eIF4E值下降(均P<0.01)。结论:4EBP1-eIF4E通路在RIP3/MLKL介导的程序性坏死中发生活化。 展开更多

关键词 程序性坏死 受体相互作用蛋白3 混合谱系激酶域样蛋白 真核细胞翻译起始因子4e结合蛋白1 真核起始因子4e

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1,25-二羟基维生素D_3对人肾小球系膜细胞增殖、周期的影响及其机制 被引量：3

8

作者 聂晴晴 唐玉玲 +2 位作者 赵丹 张春江 杨晓萍 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第39期12-15,共4页

目的观察1,25-二羟维生素D_3(1,25-(OH)_2D_3)对人肾小球系膜细胞株增殖及细胞周期的影响,并探讨其可能作用机制。方法对数生长期人肾小球系膜株细胞分为A、B、C、D组,分别加入终浓度为10^(-8)mol/L的1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培... 目的观察1,25-二羟维生素D_3(1,25-(OH)_2D_3)对人肾小球系膜细胞株增殖及细胞周期的影响,并探讨其可能作用机制。方法对数生长期人肾小球系膜株细胞分为A、B、C、D组,分别加入终浓度为10^(-8)mol/L的1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培养基、5 mg/L雷帕霉素+含5%FBS的L-DMEM培养基、5 mg/L雷帕霉素+终浓度为10^(-8)mol/L 1,25(OH)_2D_3+含5%FBS的L-DMEM培养基。给药48 h时观测各组细胞增殖及细胞周期分布,检测各组细胞真核细胞翻译起始抑制因子4E结合蛋白(4E-BP1)、磷酸化4E-BP1蛋白。结果给药48h时A、B、C组的细胞凋亡率分别为38.02%、55.62%、99.23%,组间比较,P均<0.05。给药48 h时,A、B、C组G_1期细胞所占比例明显高于D组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于D组(P均<0.05);B、C组G_1期细胞所占比例明显高于A组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于D组(P均<0.05);C组G_1期细胞所占比例明显高于B组(P均<0.05),S、G_2/M期细胞所占比例明显低于B组(P均<0.05)。A、B、C组细胞4EBP1、磷酸化4E-BP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于D组(P均<0.05);B、C组细胞4E-BP1、磷酸化4E-BP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于A组(P均<0.05);C组细胞4E-BP1、磷酸化4EBP1蛋白相对表达量及磷酸化4E-BP1/4E-BP1均低于B组(P均<0.05)。结论 1,25(OH)_2D_3可抑制人肾小球系膜细胞株的增殖,阻滞细胞周期于G_1期,其机制可能为1,25-(OH)_2D_3下调4E-BP1的表达。 展开更多

关键词 人肾小球系膜细胞株 1 25-二羟维生素D3 真核细胞翻译起始抑制因子4e结合蛋白 细胞增殖 细胞周期

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自噬相关蛋白4EBP1与eIF4E在几种常见脑瘤组织中的表达 被引量：2

9

作者 许加军 刘宗现 +2 位作者 许风雷 王磊 孔维华 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第9期72-76,共5页

目的探讨自噬相关蛋白4EBP1与eIF4E在星形细胞瘤、脑膜瘤、少突胶质细胞瘤、胆脂瘤和正常脑组织中的表达及其差异。方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测4种脑瘤中4EBP1和eIF4E mRNA的表达情况,采用免疫组化SABC法和Western blot... 目的探讨自噬相关蛋白4EBP1与eIF4E在星形细胞瘤、脑膜瘤、少突胶质细胞瘤、胆脂瘤和正常脑组织中的表达及其差异。方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测4种脑瘤中4EBP1和eIF4E mRNA的表达情况,采用免疫组化SABC法和Western blotting检测4EBP1和eIF4E在4种脑瘤组织中的表达情况,并应用SPSS 17.0统计软件,分析4EBP1和eIF4E在4种脑瘤以及正常脑组织中的表达差异。结果 4种脑瘤细胞均转录4EBP1和eIF4E mRNA,表达4EBP1、eIF4E蛋白,同时伴随着自噬标志蛋白LC-3的表达和LAMP-2A的高表达。免疫组化结果显示,与正常组织相比,4EBP1和eIF4E在4种肿瘤中的表达量明显升高,方差分析结果表明4EBP1和eIF4E在4种肿瘤组织与正常脑组织中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论自噬相关蛋白4EBP1和eIF4E在4种脑肿瘤组织中的表达明显上调,说明4EBP1和eIF4E及其自噬信号通路在肿瘤发生、发展中可能发挥重要作用,可作为脑瘤治疗的潜在靶标以及为临床诊断提供一种新的依据。 展开更多

关键词 脑瘤 真核起始因子结合蛋白1 真核起始因子 免疫组化

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LINC02870对肝细胞性肝癌细胞增殖的影响及机制 被引量：2

10

作者 郭梦雅 邵晓雯 +3 位作者 黄佳宁 白楠 李茗鹤 李咏梅 《山东医药》 CAS 2022年第31期48-51,共4页

目的 探讨长链非编码RNA-02870(LINC02870)对肝细胞性肝癌(HCC)细胞(PLC细胞)增殖的影响及机制。方法 常规培养PLC细胞并随机分为对照组、过表达组,分别转染载体对照pcDNA3.1+质粒、LINC02870质粒,48 h后常规进行细胞传代。采用实时定... 目的 探讨长链非编码RNA-02870(LINC02870)对肝细胞性肝癌(HCC)细胞(PLC细胞)增殖的影响及机制。方法 常规培养PLC细胞并随机分为对照组、过表达组,分别转染载体对照pcDNA3.1+质粒、LINC02870质粒,48 h后常规进行细胞传代。采用实时定量聚合酶链式反应检测细胞内LINC02870表达,用CCK8实验、EdU染色法检测细胞增殖能力,用Western blotting法检测细胞内磷酸化真核细胞起始因子4E结合蛋白1(p-4EBP-1)表达。结果 对照组、过表达组LINC02870相对表达量分别为1.00±0.07、113.40±1.57,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。培养24、48、72 h,过表达组OD值逐渐升高,且均高于对照组同期(P均<0.05);过表达组EdU染色阳性细胞比例高于对照组(P<0.05)。过表达组p-4EBP-1蛋白相对表达量高于对照组(P均<0.05)。结论 LINC02870可促进HCC细胞增殖,其机制可能与调控4EBP-1蛋白磷酸化有关。 展开更多

关键词 肝细胞性肝癌 细胞增殖 长链非编码RNA-02870 真核细胞起始因子4e结合蛋白1

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4E-BP1在人脑胶质瘤细胞对卡氮芥获得性耐药中的作用 被引量：2

11

作者 朱慧丽 翁泽平 +5 位作者 张继君 林琛莅 谢思明 王超 马继伟 钟雪云 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1192-1196,共5页

目的:探讨真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)与人脑胶质瘤细胞耐药性的关系,为寻找克服胶质瘤获得性耐药的新靶点提供理论依据。方法:Western blotting检测SWOZ2及其获得性耐药细胞株SWOZ2-BCNU中4E-BP1及其磷酸化蛋白(p-4E-BP1)的... 目的:探讨真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)与人脑胶质瘤细胞耐药性的关系,为寻找克服胶质瘤获得性耐药的新靶点提供理论依据。方法:Western blotting检测SWOZ2及其获得性耐药细胞株SWOZ2-BCNU中4E-BP1及其磷酸化蛋白(p-4E-BP1)的表达。小干扰RNA下调4E-BP1表达后,细胞计数试剂盒8检测SWOZ2细胞对卡氮芥(BCNU)的耐药性。免疫荧光法检测4E-BP1及p-4E-BP1(T70)蛋白在2株细胞中的表达位置。结果:SWOZ2-BCNU细胞中4E-BP1及其磷酸化蛋白表达较SWOZ2细胞明显下降。下调4E-BP1表达能明显增加敏感细胞对BCNU的耐药性。SWOZ2-BCNU细胞p-4E-BP1(T70)蛋白在获得性耐药过程中出现了核转位。结论:4E-BP1作为翻译调控关键蛋白,可能参与了人脑胶质瘤获得性耐药的发生机制。 展开更多

关键词 真核翻译起始因子4e结合蛋白1 神经胶质瘤 获得性耐药

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