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桃PpCuAO家族基因鉴定及在果实发育和成熟中的表达分析 被引量：3
1
作者 王伟 刘世豪 +3 位作者 郑先波 谭彬 程钧 冯建灿 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1413-1422,共10页
【目的】明确铜胺氧化酶(CuAO)基因与桃果实发育和成熟过程中多胺积累的关系,探究CuAO介导的多胺分解在桃果实成熟中的作用。【方法】采用乙腈浸提法提取黄水蜜桃果实发育过程中的多胺,采用高效液相质谱联用方法测定多胺含量。挖掘并分... 【目的】明确铜胺氧化酶(CuAO)基因与桃果实发育和成熟过程中多胺积累的关系,探究CuAO介导的多胺分解在桃果实成熟中的作用。【方法】采用乙腈浸提法提取黄水蜜桃果实发育过程中的多胺,采用高效液相质谱联用方法测定多胺含量。挖掘并分析桃基因组CuAO基因家族成员在不同组织及桃果实不同发育时期的表达水平,并利用转基因技术验证关键成员在多胺分解代谢中的作用。【结果】多胺含量分析发现,伴随着桃果实发育和成熟过程,多胺含量逐渐降低。在桃基因组中鉴定了4个CuAO候选基因(PpCuAO1~4),各基因呈现明显的组织表达特异性,其中PpCuAO4在果实发育后期受到明显诱导。利用外源多胺处理及转基因技术分析,表明PpCuAO4可能参与亚精胺(spermidine,Spd)的氧化分解代谢。【结论】PpCuAO4介导的多胺分解是导致桃果实成熟过程中多胺积累减少的重要原因。 展开更多
关键词 桃 多胺分解 铜胺氧化酶 基因表达 果实成熟
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蛇足石杉HsCAO3基因的克隆及转录自激活能力检测 被引量：2
2
作者 刘爱佳 陈晓英 +4 位作者 李翠 闫志刚 冯世鑫 缪剑华 雷明 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第3期809-816,共8页
蛇足石杉(Huperzia serrata (Thunb.) Trev.)铜胺氧化酶(copper-containing amine oxidase, CAO)是石杉碱甲(huperzine A, HupA)生物合成途径中的关键酶之一。研究蛇足石杉CAO家族不同成员间的相互作用,筛选出高活性的蛇足石杉CAO或CAO... 蛇足石杉(Huperzia serrata (Thunb.) Trev.)铜胺氧化酶(copper-containing amine oxidase, CAO)是石杉碱甲(huperzine A, HupA)生物合成途径中的关键酶之一。研究蛇足石杉CAO家族不同成员间的相互作用,筛选出高活性的蛇足石杉CAO或CAO组合,有望为后续通过生物工程方法实现HupA的合成、加快新药创制进度提供理论依据。本研究基于蛇足石杉转录组数据中得到的一个CAO-like基因片段,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of c DNA ends, RACE)技术克隆到其cDNA全长,并将其命名为Hs CAO3。Hs CAO3的cDNA全长为2 736 bp,CDS为2 202 bp,共编码733个氨基酸。氨基酸序列同源性对比和进化树分析结果表明Hs CAO3与蛇足石杉中的另一个CAO (HsCAO1)具有较高同源性;蛋白三级结构模拟结果暗示Hs CAO3可能以同源二聚体的形式存在并发挥生物学功能。在此基础上进一步构建了pGBKT7-Hs CAO3重组载体,并进行了转录自激活检测,结果表明Hs CAO3无自激活活性。本研究为后续探究不同Hs CAOs间的相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 蛇足石杉(Huperzia serrata) 石杉碱甲 铜胺氧化酶 基因克隆 转录自激活
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茄科植物甲基腐胺氧化酶基因进化路径分析 被引量：2
3
作者 王鹏 罗朝鹏 盖江涛 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期47-53,共7页
甲基腐胺氧化酶(MPO)是茄科植物中腐胺衍生的生物碱合成途径中重要基因。前人研究表明,MPO基因由DAO基因进化而来,然而其在植物中的完整进化图景未见报道。本研究在全基因组水平上全面鉴定MPO基因所属的CuAO基因的基础上,通过进化分析,... 甲基腐胺氧化酶(MPO)是茄科植物中腐胺衍生的生物碱合成途径中重要基因。前人研究表明,MPO基因由DAO基因进化而来,然而其在植物中的完整进化图景未见报道。本研究在全基因组水平上全面鉴定MPO基因所属的CuAO基因的基础上,通过进化分析,构建了植物的MPO基因进化路径。首先,从已报道的MPO、CuAO及DAO基因中均鉴定得到了三个保守结构域;在此基础上,结合BLAST和HMMER,从6个植物基因组中鉴定得到了35个CuAO家族基因。系统发育分析表明,该家族基因分为4个亚家族。亚家族Ⅰ和Ⅱ均为AO基因;亚家族Ⅲ基因功能还未获鉴定,该亚家族基因在烟草属植物中不存在;亚家族Ⅳ基因仅在菊亚纲中发现,其在茄科中进一步分化成DAO基因和MPO基因。本研究表明,MPO基因的起源最早可追溯到AO基因,而其最近的祖先出现于菊亚纲,最终在茄科植物起源后进化得到具有MPO活性的基因,从而整合入尼古丁等腐胺衍生的生物碱生物合成途径。 展开更多
关键词 腐胺甲基氧化酶 含铜氨基氧化酶 基因挖掘 进化
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蛇足石杉HsCAO2基因的克隆、生物信息学分析及载体构建 被引量：2
4
作者 刘爱佳 陈晓英 +5 位作者 李翠 闫志刚 冯世鑫 张占江 雷明 缪剑华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期7309-7316,共8页
目的为筛选高活性的蛇足石杉铜胺氧化酶(copper-containing amine oxidase,CAO),通过生物工程方法实现石杉碱甲(huperzine A,HupA)的合成、为加快新药创制进度提供理论依据。方法基于蛇足石杉转录组测序得到的CAO序列片段,利用c DNA末... 目的为筛选高活性的蛇足石杉铜胺氧化酶(copper-containing amine oxidase,CAO),通过生物工程方法实现石杉碱甲(huperzine A,HupA)的合成、为加快新药创制进度提供理论依据。方法基于蛇足石杉转录组测序得到的CAO序列片段,利用c DNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,扩增、拼接并验证获得该基因的全长c DNA序列,并将其命名为HsCAO2。结果通过RACE技术得到Hs CAO2的c DNA全长为2696 bp,CDS为2199 bp,编码732个氨基酸。氨基酸序列同源性比对发现,HsCAO2具有保守的氨基酸位点和Cu2+结合位点;进化树分析结果表明,HsCAO2与蛇足石杉中的另一个CAO(HsCAO1)同源性最高,达91.67%;蛋白质结构分析结果表明,HsCAO2也可能在生物体里以同源二聚体的形式存在。在此基础上,进一步分别构建了超表达载体pOX-Hs CAO2和体外蛋白表达载体pET-28a(+)-HsCAO2。结论HsCAO2很可能是蛇足石杉中的一个新的功能性CAO,且超表达载体和体外蛋白表达载体的成功构建为进一步研究其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 蛇足石杉 石杉碱甲 铜胺氧化酶 基因克隆 载体构建
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链状亚历山大藻铜胺氧化酶基因的克隆和表达分析 被引量：1
5
作者 商二磊 隋正红 +2 位作者 刘源 米萍 刘昊昕 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期79-86,共8页
本文以链状亚历山大藻为实验材料,克隆了2个铜胺氧化酶基因,分别命名为cad-1和cad-2。对获取的基因序列进行生物信息学分析,使用实时荧光定量PCR技术分析了cad-1和cad-2在链状亚历山大藻不同生长时期的表达。结果发现,cad-1开放阅读框全... 本文以链状亚历山大藻为实验材料,克隆了2个铜胺氧化酶基因,分别命名为cad-1和cad-2。对获取的基因序列进行生物信息学分析,使用实时荧光定量PCR技术分析了cad-1和cad-2在链状亚历山大藻不同生长时期的表达。结果发现,cad-1开放阅读框全长1 023bp,编码340个氨基酸;cad-2开放阅读框全长1 800bp,编码599个氨基酸,含一个内含子1 065bp。2个基因编码的蛋白与颗石藻和抑食金球藻的铜胺氧化酶有较近的亲缘关系。荧光定量PCR分析结果显示,cad-1和cad-2在对数期和衰亡期分别是下调表达和上调表达。依据铜胺氧化酶的功能和链状亚历山大藻衰亡的相关研究,推测铜胺氧化酶可能通过催化多胺产生过量过氧化氢的方式参与链状亚历山大藻赤潮衰亡的过程。 展开更多
关键词 链状亚历山大藻 衰亡 铜胺氧化酶 实时荧光定量PCR
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血管黏附蛋白1在临床疾病中的研究进展 被引量：1
6
作者 易伟 姚骏 胡志前 《医学综述》 2014年第8期1345-1348,共4页
血管黏附蛋白1(VAP-1)是一种在哺乳动物体内广泛存在的多功能蛋白。VAP-1既是一种黏附分子,又是一种胞外酶,其在白细胞渗出、黏附级联反应、糖代谢调节、血管损伤等方面都发挥了重要的作用。在炎症性疾病、糖代谢相关疾病、肿瘤、脑卒... 血管黏附蛋白1(VAP-1)是一种在哺乳动物体内广泛存在的多功能蛋白。VAP-1既是一种黏附分子,又是一种胞外酶,其在白细胞渗出、黏附级联反应、糖代谢调节、血管损伤等方面都发挥了重要的作用。在炎症性疾病、糖代谢相关疾病、肿瘤、脑卒中等众多临床疾病中,VAP-1的表达及功能都有着重要的意义,而使用VAP-1抗体和抑制剂已经在许多临床疾病的动物模型上显示了显著的治疗作用。 展开更多
关键词 血管黏附蛋白1 含铜胺氧化酶3 氨基脲敏感性胺氧化酶 临床疾病
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