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柑橘衰退病和碎叶病复合感染病原的脱毒研究 被引量:3
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作者 乔芬 祁鹏志 +3 位作者 伏卉 张鹏 吴珊 姜玲 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期416-421,共6页
以带毒柑橘品种为试材,采用植物中药制剂处理与热处理结合、茎尖微芽嫁接与植物中药制剂处理结合,用RT-PCR法检测病原带毒情况,并在药剂处理后1、3、5、7、9 d取样,检测抗性相关酶活性的含量变化,结果表明:采用板蓝根和黄芩混合中药制... 以带毒柑橘品种为试材,采用植物中药制剂处理与热处理结合、茎尖微芽嫁接与植物中药制剂处理结合,用RT-PCR法检测病原带毒情况,并在药剂处理后1、3、5、7、9 d取样,检测抗性相关酶活性的含量变化,结果表明:采用板蓝根和黄芩混合中药制剂处理8次,结合热处理,在PC板制成的温室(白天40℃(6 h/d),晚上25℃,处理50 d)中,可有效地脱除试验苗木中柑橘衰退病和柑橘碎叶病复合感染病原;对柑橘茎尖微芽嫁接苗进行板蓝根和黄芩混合中药制剂脱毒处理后苗木经RT-PCR法检测表明:85.7%植株可以脱除柑橘衰退病和柑橘碎叶病病毒;药剂处理后PPO、POD、SOD酶活性与对照相比均有所提高。 展开更多
关键词 中药制剂 热处理 茎尖微芽嫁接 复合感染 病原 rt-pcr
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鉴别牛肠道病毒感染复合PCR方法的建立及初步应用 被引量:1
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作者 章凡 常晓冉 +5 位作者 王浴光 杨茗葳 米日古丽买吐送 董坤 胡俊英 王新平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期244-249,共6页
牛肠道病毒(bovine enterovirus, BEV)感染是国内近年来报道的一种临床上以消化道、呼吸道症状为特点的新发传染病,其病原体为小RNA病毒科肠道病毒属中的成员。目前,BEV分为EV-E和EV-F 2个病毒种,两者间的核苷酸序列差异很大,属于不同... 牛肠道病毒(bovine enterovirus, BEV)感染是国内近年来报道的一种临床上以消化道、呼吸道症状为特点的新发传染病,其病原体为小RNA病毒科肠道病毒属中的成员。目前,BEV分为EV-E和EV-F 2个病毒种,两者间的核苷酸序列差异很大,属于不同的血清型/基因型,常规血清学方法难以将其区别。为建立一种鉴别EV-E和EV-F病毒的方法,本研究根椐GenBank已发表的EV-E和EV-F肠道病毒的基因组序列,设计合成引物,建立了鉴别EV-E和EV-F的复合PCR方法,并确定了该方法的特异性、敏感性和重复性。同时,应用该方法检测吉林省长春地区疑似BEV感染样品。结果显示,建立的方法具有良好的特异性,只能检测出EV-E或EV-F肠道病毒,而牛细小病毒、牛病毒性腹泻病毒等病原检测均为阴性。敏感性试验结果显示,EV-E和EV-F最低检出量分别为3.67×10^(2),5.21×10^(3)拷贝/μL。检测长春地区的32份牛粪便样品的结果显示,EV-E和EV-F病毒的检出阳性率分别为28.13%和34.38%,两种病毒混合感染率为15.63%,与间接ELISA检测方法结果一致。上述结果表明,本试验建立的复合PCR方法具有特异性强,灵敏度高、快速与简便等特点,可用于EV-E和EV-F两种肠道病毒的鉴别诊断及流行病学调查。 展开更多
关键词 E种肠道病毒(EV-E) F种肠道病毒(EV-F) 复合rt-pcr
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RT-PCR法检测PD线粒体的缺失突变
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作者 古先祥 李桢 郭锋 《中国优生与遗传杂志》 2011年第5期9-9,4,共2页
目的研究线粒体DNA突变与自发性帕金森病(PD)的关系。方法从帕金森病患者以及正常对照者血液中提取线粒体DNA并运用RT-PCR法进行检测分析。结果在帕金森患者和对照组中都发现了线粒体DNA 4977bp的缺失,但是在帕金森病患者中缺失的量远... 目的研究线粒体DNA突变与自发性帕金森病(PD)的关系。方法从帕金森病患者以及正常对照者血液中提取线粒体DNA并运用RT-PCR法进行检测分析。结果在帕金森患者和对照组中都发现了线粒体DNA 4977bp的缺失,但是在帕金森病患者中缺失的量远大于对照组(P<0.05)。结论线粒体DNA 4977bp的缺失可能是导致帕金森病的机制之一。 展开更多
关键词 帕金森病 线粒体DNA4977bp缺失 线粒体呼吸链复合物Ⅰ rt-pcr
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盐胁迫下己唑醇铜配合物对小麦幼苗脯氨酸合成的影响
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作者 毕彦博 李婕 +3 位作者 赵佳 张晓庆 潘红艳 步怀宇 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2013年第4期104-107,113,共5页
以己唑醇为配体与醋酸铜配合获得元素组成异化的己唑醇铜配合物。配合物对小麦种子浸种处理,待萌发生长至幼苗阶段将其进行NaCl胁迫处理,通过对幼苗脯氨酸含量以及脯氨酸合成酶基因P5CS、P5CR表达变化的测定,评价己唑醇铜配合物对植物... 以己唑醇为配体与醋酸铜配合获得元素组成异化的己唑醇铜配合物。配合物对小麦种子浸种处理,待萌发生长至幼苗阶段将其进行NaCl胁迫处理,通过对幼苗脯氨酸含量以及脯氨酸合成酶基因P5CS、P5CR表达变化的测定,评价己唑醇铜配合物对植物抗盐能力的影响。结果表明:小麦幼苗脯氨酸含量随着盐浓度的增大及胁迫时间的延长而增加,200mmol·L-1NaCl胁迫下,配合物处理后脯氨酸含量最高,达55.44μg·g-1,相比己唑醇和醋酸铜处理分别增加13.68%和58.45%;而100mmol·L-1NaCl处理6h,己唑醇铜配合物处理小麦幼苗的脯氨酸合成增幅最大,P5CS、P5CR表达量明显增加,在一定程度上缓解了小麦幼苗的渗透胁迫伤害。 展开更多
关键词 己唑醇铜配合物 脯氨酸 半定量pcr 盐胁迫
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金丝桃素蛋白络合物在鸡体内对H9N2亚型禽流感病毒杀灭效果的研究 被引量:9
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作者 祝艳华 梁剑平 +6 位作者 赵晓虹 王雯慧 尚若锋 崔颖 罗永江 廖明 王学红 《中兽医医药杂志》 2006年第3期5-8,共4页
为了明确金丝桃素蛋白络合物在动物体内对H9N2亚型AIV的杀灭效果及临床上用于预防和治疗的剂量,将180只28日龄非免疫石歧杂黄鸡随机分为6组,分别为金丝桃素蛋白络合物高、中、低剂量组,金刚烷胺药物对照组,感染不给药组及健康对照组。其... 为了明确金丝桃素蛋白络合物在动物体内对H9N2亚型AIV的杀灭效果及临床上用于预防和治疗的剂量,将180只28日龄非免疫石歧杂黄鸡随机分为6组,分别为金丝桃素蛋白络合物高、中、低剂量组,金刚烷胺药物对照组,感染不给药组及健康对照组。其中,金丝桃素蛋白络合物三个剂量组的实验鸡于感染H9N2亚型AIV12h后分别以不同的剂量灌服给药,而金刚烷胺药物组于攻毒12h后以100mg/l饮水。用棉拭子采集各实验组鸡的咽喉及泄殖腔黏液,进行微量血凝(HA)试验及RT-PCR检测,以确定各实验组鸡的排毒情况。结果表明,金丝桃素蛋白络合物对人工感染H9N2亚型AIV的实验鸡有较好的保护作用,与金刚烷胺药物对照及感染不给药组相比有显著差异。 展开更多
关键词 H9N2亚型AIV 金丝桃素蛋白络合物 HA试验 rtpcr
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复方丹参注射液对变应性哮喘小鼠脾巨噬细胞TLR2和TLR4 mRNA表达的研究 被引量:3
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作者 朱蓉 洪永清 《临床肺科杂志》 2009年第7期895-897,共3页
目的通过观察卵清蛋白(OVA)诱导的变应性哮喘小鼠脾脏巨噬细胞中TLR2和TLR4 mRNA的表达变化,探讨复方丹参注射液(Complex Salvia Miltiorrhiza Injection,SA)对其作用的机制。方法将30只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组和SA组,每... 目的通过观察卵清蛋白(OVA)诱导的变应性哮喘小鼠脾脏巨噬细胞中TLR2和TLR4 mRNA的表达变化,探讨复方丹参注射液(Complex Salvia Miltiorrhiza Injection,SA)对其作用的机制。方法将30只雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组和SA组,每组各10只。各组按要求处理于20天后取脾脏,贴壁法分离脾巨噬细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR),检测TLR2和TLR4 mRNA以及GAPDH cDNA的荧光域值循环数,观察SA对TLR2和TLR4 mRNA水平表达的影响。结果与对照组相比,模型组TLR2 mRNA表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05),而TLR4 mRNA表达无变化(P>0.05);模型组与SA组比较,SA组TLR2和TLR4 mRNA表达均上调,且有统计学差异(P<0.05)。结论SA能使变应性哮喘模型小鼠脾巨噬细胞中TLR2和TLR4 mRNA水平表达上调,为中药在哮喘治疗中的应用提供了科学依据。 展开更多
关键词 TOLL样受体 巨噬细胞 哮喘 复方丹参注射液 实时pcr
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Porcine Respiratory Pathogens in Swine Farms Environment in Mexico
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作者 Victor M. Loera-Muro Abraham Loera-Muro +5 位作者 Marcela Morfín-Mata Mario Jacques Francisco J. Avelar-González Flor Ramírez-Castillo Elsa M. Ramírez-López Alma L. Guerrero-Barrera 《Open Journal of Animal Sciences》 2014年第4期196-205,共10页
Respiratory pathogens are the main health problem in the swine industry worldwide. These pathogens are transmitted by direct contact between animals or by aerosols and however are not well known yet, if the environmen... Respiratory pathogens are the main health problem in the swine industry worldwide. These pathogens are transmitted by direct contact between animals or by aerosols and however are not well known yet, if the environment works as its reservoir, inoculum and/or dispersion medium. The objective of this study was to determine the presence of respiratory pathogens in environmental samples from swine farms in Aguascalientes, Mexico, through of PCR and RT-PCR techniques. The bacteria Actinobacillus pleuropneumoniae and Pasteurella multocida were found viable in samples from water, food, soil and air. Streptococcus suis was found in a viable state in water samples. Haemophilus parasuis, Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus and Swine Influenza virus (H1N1 and H3N2) were detected in drinking water samples. Mycoplasma hyopneumoniae and Porcine Circovirus type 2 (PCV2) were not detected in environmental samples. These results suggest that the environment of the farms acts as a reservoir, inoculum and/or vehicle of dispersion for these pathogens except for M. hyopneumoniae and PCV2. 展开更多
关键词 ENVIRONMENT RESPIRATORY PATHOGEN PORCINE RESPIRATORY DISEASE complex pcr and rt-pcr
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CLINICAL STUDY OF T-PA AND U-PA EXPRESSION IN PATIENTS WITH GASTROINTESTINAL CANCER
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作者 吴方 璩斌 +3 位作者 巩云霞 王学锋 杨晨敏 王鸿利 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第2期97-102,共6页
Objective: To study the changes of tissue-type plasminogen activator (t-PA), urokinase-type plasminogen activator (u-PA) expressions and fibrinolysis molecular markers in patients with gastrointestinal cancer in order... Objective: To study the changes of tissue-type plasminogen activator (t-PA), urokinase-type plasminogen activator (u-PA) expressions and fibrinolysis molecular markers in patients with gastrointestinal cancer in order to elucidate their clinical significance. Methods: The plasma levels of t-PA, u-PA, urokinase-type plasminogen activator receptor (u-PAR) and plasmin anti-plasmin complex (PAP) were measured by ELISA. t-PA and u-PA mRNAs were detected by Real-time RT-PCR. Results: The plasma levels of u-PA, u-PAR and PAP were elevated in gastrointestinal cancer patients, while u-PA was markedly elevated in patients with local infiltration, lymph node involvement or distal metastasis. U-PA mRNA was higher and t-PA was lower in gastrointestinal cancer compared to normal tissue. Conclusion: Hyperfibrinolysis is an important factor related with metastasis potential of gastrointestinal cancer. t-PA may be a character of well differentiated tissue. 展开更多
关键词 Tissue-type plasminogen activator Urokinase-type plasminogen activator Urokinase-type plasminogen activator receptor Plasmin anti-plasmin complex Real-time rt-pcr Gastrointestinal cancer FIBRINOLYSIS
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