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脯氨酸羟化酶抑制剂对小鼠间充质干细胞的动员作用 被引量:3
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作者 刘伟 余勤 +2 位作者 刘丽珍 周丽萍 胡韶君 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第12期1371-1376,共6页
[目的]探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对小鼠间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)的动员作用。[方法]ICR小鼠随机分为对照组及3个DMOG动员剂量组(20、40、80mg·kg-1... [目的]探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxaloylglycine,DMOG)对小鼠间充质干细胞(mouse mesenchymal stem cells,mMSCs)的动员作用。[方法]ICR小鼠随机分为对照组及3个DMOG动员剂量组(20、40、80mg·kg-1)。不同剂量的DMOG每天一次在固定的时间段腹腔内注射入ICR小鼠,对照组给予相同体积的生理盐水。采用流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测不同浓度DMOG处理后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量,Western blotting法检测骨髓细胞中HIF-1α、SDF-1α及VEGF蛋白的表达,ELISA法检测骨髓上清及外周血清中SDF-1α及VEGF蛋白的浓度。[结果]流式细胞术与成纤维细胞集落形成单位法检测发现不同剂量的DMOG处理7d后小鼠外周血与骨髓中MSCs数量较对照组显著增加(P<0.05),且CD45-CD90+细胞群比例升高(P<0.05)。同时Western blotting法及ELISA法检测发现小鼠骨髓HIF-1α、SDF-1α表达上调,VEGF浓度升高(P<0.05)。[结论]DMOG对小鼠间充质干细胞具有动员作用,可能与通过上调HIF-1α,从而调控其下游相关通路有关。 展开更多
关键词 间充质干细胞 动员 缺氧诱导因子-1Α 成纤维细胞集落生成单位 HYPOXIA INDUCIBLE factor-1α
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几种细胞因子对骨髓基质成纤维细胞集落形成的影响及意义 被引量:6
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作者 孔佩艳 常诚 +3 位作者 郭朝华 孙爱华 周燕虹 罗成基 《临床血液学杂志》 CAS 2002年第2期73-74,77,共3页
目的 :观察细胞因子粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、干细胞因子 (SCF)、白细胞介素 3(IL 3)、肿瘤坏死因子 (TNF)及其联合应用对骨髓基质成纤维细胞集落生成单位 (CFU F)形成的作用。方法 :应用体外骨髓基质细胞贴壁培养的方法 ,... 目的 :观察细胞因子粒 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、干细胞因子 (SCF)、白细胞介素 3(IL 3)、肿瘤坏死因子 (TNF)及其联合应用对骨髓基质成纤维细胞集落生成单位 (CFU F)形成的作用。方法 :应用体外骨髓基质细胞贴壁培养的方法 ,分别加入不同的细胞因子 ,进行培养 2周时的CFU F计数和培养 4周时贴壁细胞的增殖状态观察。结果 :GM CSF、SCF及TNF对骨髓基质细胞的增殖有明显的促进作用。结论 :体外加入某些细胞生长因子对骨髓基质细胞具有明显的扩增作用 ,提示基质细胞在体外适当细胞因子作用下扩增后进行回输 。 展开更多
关键词 基质细胞 细胞因子 成纤维细胞集落生成单位 白细胞介素-3 肿瘤坏死因子 干细胞因子 细胞集落刺激因子 骨髓基质成纤维细胞集落生成单位
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免疫抑制剂环胞素A对鼠骨代谢的生物学效应 被引量:3
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作者 吴学宾 陈建新 +2 位作者 周越 王轩 李佳 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第2期133-136,共4页
目的探讨实验条件下免疫抑制剂环胞素A(CsA)在骨代谢过程中对破骨细胞和成骨细胞克隆的生物作用及其机制。方法用不同浓度的环胞素A与鼠骨髓细胞共同培养,诱导产生破骨细胞和成骨细胞克隆。分别以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检查破骨... 目的探讨实验条件下免疫抑制剂环胞素A(CsA)在骨代谢过程中对破骨细胞和成骨细胞克隆的生物作用及其机制。方法用不同浓度的环胞素A与鼠骨髓细胞共同培养,诱导产生破骨细胞和成骨细胞克隆。分别以抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检查破骨细胞,碱性磷酸酶(ALP)染色检查CFU-F克隆和Von’Kassol染色检查CFU-OB克隆;光镜下计数破骨细胞数、CFU-F和CFU-OB成骨细胞克隆数。结果实验条件下环胞素A可诱导鼠破骨细胞的数量显著增加(F=16.496,P<0.001),且破骨细胞的数量与环胞素A剂量呈线性正相关(r=0.579,P<0.05);成骨细胞克隆CFU-F和CFU-OB的数量变化与环胞素A无相关性(F=1.380,F=0.305,P>0.05)。结论环胞素A在实验条件下可诱导鼠破骨细胞数量的增加,但对成骨细胞克隆无显著影响,环胞素A对骨代谢的生物作用可能是通过上调破骨细胞系统从而导致生物体发生骨质疏松。 展开更多
关键词 环胞素A 骨骼 破骨细胞 成骨细胞 纤维母细胞克隆形成单位 成骨细胞克隆形成单位
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慢性粒单核细胞白血病患者骨髓成纤维集落形成单位功能及意义 被引量:2
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作者 徐若豪 李超 +7 位作者 吴萍 李敏明 邓程新 耿素霞 赖沛龙 陆泽生 翁建宇 杜欣 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第21期3398-3403,共6页
背景:研究表明,异常的骨髓微环境可能参与慢性粒单核细胞白血病的发生,成纤维集落形成单位(colony formingunit-fibroblast,CFU-F)代表了一组具有多系分化潜能的间充质干细胞,其功能、数量状态具有评价骨髓基质微环境状态的意义。目的:... 背景:研究表明,异常的骨髓微环境可能参与慢性粒单核细胞白血病的发生,成纤维集落形成单位(colony formingunit-fibroblast,CFU-F)代表了一组具有多系分化潜能的间充质干细胞,其功能、数量状态具有评价骨髓基质微环境状态的意义。目的:评估慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞形成CFU-F的能力与成骨分化潜能,探讨CFU-F指标与患者外周血细胞计数、疾病表现型等指标的相关性。方法:①收集广东省人民医院血液科收治、资料齐全的慢性粒单核细胞白血病患者15例与对照组志愿者10例,比较两组间骨髓形成CFU-F的功能与分化潜能;②分析慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量与初诊时外周血细胞计数、临床表现型、骨髓原始细胞及患者基因突变的相关性。实验方案得到广东省人民医院(广东省医学科学院)伦理委员会批准,批件号:[2018]002号。结果与结论:①15例慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量低于对照组(P=0.04),其中67%(10/15)的慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量显著降低(P=0.00),33%(5/15)患者CFU-F水平接近对照组(P=0.14);②全组慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞成骨转录因子Osterix及RUNX2的表达量显著降低(P <0.05),成骨分化潜能显著下降(P=0.00);③慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量与初诊时外周血白细胞、中性粒细胞以及单核细胞计数呈负相关,与外周血小板计数呈正相关;④在CFU-F数量显著降低的10例患者中,90%(9/10)外周血白细胞计数均升高(≥13×10~9L^(-1),P=0.01),50%(5/10)患者携带有NRAS/KRAS基因位点突变。⑤结果表明:慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞功能受损,形成的CFU-F数量降低,CFU-F数量与外周血细胞计数以及患者临床特征具有相关性,提示了CFU-F指标具有潜在的临床价值。 展开更多
关键词 成纤维集落形成单位 骨髓 间充质干细胞 慢性粒单核细胞白血病 KRAS基因 NRAS基因 成骨分化 外周血细胞计数 MPN-CMML型 MDS-CMML型 骨髓微环境
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成人骨髓基质细胞的体外培养
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作者 王少山 王楠 +3 位作者 解琨 杜春青 张尚立 苗俊英 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期121-124,共4页
本研究从成人的髋骨抽取骨髓液 ,离心后将骨髓基质细胞悬液接种培养 ,待细胞贴壁融合后 ,进行传代扩增培养 .并采用流式细胞术进行细胞周期分析 .结果表明原代培养和传代培养的细胞均为贴壁、形态不一的骨髓基质细胞 ,且此体外培养的骨... 本研究从成人的髋骨抽取骨髓液 ,离心后将骨髓基质细胞悬液接种培养 ,待细胞贴壁融合后 ,进行传代扩增培养 .并采用流式细胞术进行细胞周期分析 .结果表明原代培养和传代培养的细胞均为贴壁、形态不一的骨髓基质细胞 ,且此体外培养的骨髓基质细胞具有很强的增殖能力 .本研究成功地建立了一套完整、简单、可行的体外分离、长期培养扩增人骨髓基质细胞 (HumanBoneMarrowStromalCellshBMSCs )的系统 ,证明成人骨髓基质细胞能够在体外长期增殖 ,为人的骨髓基质细胞的理论研究和临床应用奠定了基础 . 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 体外培养 成纤维细胞集落
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人腹膜中间充质干细胞生物学特性的初步研究
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作者 吴黎敏 林庆凡 +2 位作者 李航 李黎洪 张劲帆 《组织工程与重建外科杂志》 2011年第3期133-135,共3页
目的探讨人腹膜中是否含有间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC),并研究其生物学特性。方法腹膜取自接受胃大部切除及腹腔淋巴结清扫术的胃癌患者。将腹膜剪碎,Ⅰ型胶原酶消化后以低密度接种,2周后计算细胞群中成纤维细胞集落形成... 目的探讨人腹膜中是否含有间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC),并研究其生物学特性。方法腹膜取自接受胃大部切除及腹腔淋巴结清扫术的胃癌患者。将腹膜剪碎,Ⅰ型胶原酶消化后以低密度接种,2周后计算细胞群中成纤维细胞集落形成单位(Colony-forming unit-fibroblast,CUF-F)数量;流式细胞分析贴壁细胞表型;定向诱导2周后,碱性磷酸酶和油红O染色,观察细胞体外成骨和成脂肪能力。结果贴壁的细胞呈成纤维细胞样,消化的腹膜细胞群中,CFU-F比例平均为0.574‰(0.26‰~0.84‰)。流式分析显示,细胞均一表达CD29、CD44和CD73,不表达CD31、CD34和CD45。成骨细胞定向诱导后,细胞呈现碱性磷酸酶活性;成脂诱导后细胞内出现脂肪滴,油红O染色阳性。结论人腹膜中富含MSC,可作为一个含有生物支架的干细胞来源。 展开更多
关键词 间充质干细胞 腹膜 成纤维细胞集落形成单位
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不同来源血清和细胞因子对骨髓基质细胞成纤维细胞集落形成的影响
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作者 许力 毛平 《内科》 2009年第2期202-204,共3页
目的观察SD大鼠骨髓基质细胞(BMSC)体外培养的生物学特性并加以鉴定,并探讨不同来源血清和细胞因子对其成纤维系祖细胞(CFU-F)产率的影响。方法取SD大鼠骨髓,进行BMSC原代培养,传代后分别观察其生长特性,绘制贴壁率,测定生长曲线,并应... 目的观察SD大鼠骨髓基质细胞(BMSC)体外培养的生物学特性并加以鉴定,并探讨不同来源血清和细胞因子对其成纤维系祖细胞(CFU-F)产率的影响。方法取SD大鼠骨髓,进行BMSC原代培养,传代后分别观察其生长特性,绘制贴壁率,测定生长曲线,并应用流式细胞仪鉴定细胞表型;采用体外长期液体培养法观察CFU-F的产率。结果原代培养的BMSCs生长良好,倍增时间约为40小时,传代后12小时贴壁率达85%以上;胎牛血清较脐血清和马血清能促进CFU-F的增值和分化。与未加细胞因子对照组相比,单用细胞因子SCF,SDF-1均可促进CFU-F的增殖,但二者之间差异无显著性(P>0.05),同时加入SCF,SDF-1可明显的促进CFU-F的增殖,并优于单用SCF和SDF-1(P<0.05)。结论体外培养的BMSCs生长稳定,传代后细胞适应性强;胎牛血清中可能较脐血清和马血清存在较多的对CFU-F有促进作用的生长因子;SCF可协同SDF-1促进CFU-F的增殖。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 血清 细胞因子 成纤维系集落形成单位
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苯和二甲苯对骨髓成纤维细胞克隆形成单位(CFU-F)的联合作用 被引量:2
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作者 蔡俊超 金锡鹏 +1 位作者 黄雷鸣 林惠芬 《劳动医学》 1996年第4期207-209,共3页
本实验用苯和二甲苯在30mg/kg和60mg/kg两个浓度下对近交系BALB/c小鼠进行腹腔注射染毒。结果发现,经一周连续腹腔注射染毒,在两个浓度下苯染毒组骨髓CFU-F均显著减少,且有明确的剂量反应关系。而二甲苯染... 本实验用苯和二甲苯在30mg/kg和60mg/kg两个浓度下对近交系BALB/c小鼠进行腹腔注射染毒。结果发现,经一周连续腹腔注射染毒,在两个浓度下苯染毒组骨髓CFU-F均显著减少,且有明确的剂量反应关系。而二甲苯染毒组没有显著变化,苯、二甲苯联合染毒组也没有显著变化。该实验提示苯对骨髓CFU-F有抑制作用,而在苯和二甲苯联合染毒时,该抑制作用又表现得不明显,故作者认为两者对CFU-F的联合作用是相减的。 展开更多
关键词 苯中毒 二甲苯 成纤维细胞 克隆形成单位
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