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叶绿体微卫星在植物种质资源研究中的应用 被引量:31
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作者 王化坤 娄晓鸣 章镇 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第z1期92-98,共7页
叶绿体微卫星(chloroplastsimplesequencerepeat,cpSSR)是近年来发展起来的一种新型高效的分子标记技术,由于具有微卫星标记共显性、高多态性、分布广泛性等优点又兼顾到叶绿体基因组结构简单、相对保守、单亲遗传等特点,目前广泛用于... 叶绿体微卫星(chloroplastsimplesequencerepeat,cpSSR)是近年来发展起来的一种新型高效的分子标记技术,由于具有微卫星标记共显性、高多态性、分布广泛性等优点又兼顾到叶绿体基因组结构简单、相对保守、单亲遗传等特点,目前广泛用于植物群体遗传分析及系统发育分析研究,在更高分类水平和自然植物群体间基因漂移研究上特别有用。本文就cpSSR分析技术的原理、特点、引物开发等方面进行了介绍,并针对其在群体遗传结构、基因流动进化、物种演化、胞质遗传特性、种群分类等方面的研究进展进行了综述,并据此提出问题和展望。 展开更多
关键词 叶绿体微卫星 分子标记 应用
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江淮流域杂草稻叶绿体DNA的籼粳分化 被引量:11
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作者 杨杰 王军 +6 位作者 曹卿 陈志德 汤陵华 王艳萍 方先文 王才林 仲维功 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期391-397,共7页
为了探明江淮流域杂草稻的细胞质来源,根据水稻叶绿体DNA ORF100(Open Reading Frame 100)序列在籼粳间存在69 bp差异的特征,设计了InDel标记cpDNA69。利用该标记对2个分别以籼稻和粳稻为母本的F2群体、22份栽培稻(Oryza sativaL.)、3... 为了探明江淮流域杂草稻的细胞质来源,根据水稻叶绿体DNA ORF100(Open Reading Frame 100)序列在籼粳间存在69 bp差异的特征,设计了InDel标记cpDNA69。利用该标记对2个分别以籼稻和粳稻为母本的F2群体、22份栽培稻(Oryza sativaL.)、3份普通野生稻(O.rufipogonGriff.)进行了分析验证。PCR结果可以获得缺失和非缺失两种带型,缺失带型与以籼稻为母本的F2群体、10份籼稻材料完全对应;非缺失带型与以粳稻为母本的F2群体、11份粳稻材料完全对应,3份广西普通野生稻为非缺失带型,属粳型,1份以粳稻为母本的籼粳杂交材料为粳型。因此,cpDNA69可以用作叶绿体籼粳鉴定标记。利用该标记对22份杂草稻的叶绿体DNA鉴定的结果表明,7份早年发现的杂草稻,即江苏省连云港穭稻和安徽省怀远、来安、全椒、肥东的塘稻的叶绿体DNA为非缺失带型,属粳型,而近年来在江苏省扬中、高邮、灌云、洪泽、盐都、兴化、如皋等地直播稻田发现的15份红米杂草稻的叶绿体DNA为缺失带型,属籼型。这为进一步研究江淮流域杂草稻的来源提供了依据。 展开更多
关键词 杂草稻 栽培稻 叶绿体DNA 籼粳分化 细胞质来源 分子标记
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山茶属叶绿体全基因组微卫星特征分析及标记开发 被引量:9
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作者 殷鑫 温强 +3 位作者 王建文 李田 叶金山 徐立安 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期6761-6769,共9页
以山茶属9个组9个物种的叶绿体基因组(chloroplast genome DNA, cpDNA)全序列为研究对象,统计分析其简单重复序列(chloroplast simple sequence repeat, cpSSR)或称微卫星分布特征。结果表明山茶属各物种cpSSR数量及组成相对一致,不同... 以山茶属9个组9个物种的叶绿体基因组(chloroplast genome DNA, cpDNA)全序列为研究对象,统计分析其简单重复序列(chloroplast simple sequence repeat, cpSSR)或称微卫星分布特征。结果表明山茶属各物种cpSSR数量及组成相对一致,不同微卫星重复基序中以三核苷酸基序为主,平均约占70%,随后是单核苷酸及二核苷酸基序。各物种单核苷酸和三核苷酸重复碱基类型较为一致,分别为A/T和AAG/TTC。比较叶绿体基因组的不同结构位置,各物种总的表现规律为小单拷贝区(small single copy, SSC) cpSSR分布比例最高,而反向重复区(inverted repeat, IR)最低;同时比较叶绿体基因组的不同功能区域,山茶属各物种的cpSSR主要分布于非编码区。cpSSR种间变异分析表明,cpSSR在山茶属内各组物种间差异较小,整体保持一个较高的一致性,说明山茶属是一个亲缘关系较近的属。对重复基序类型来说,单核苷酸重复基序cpSSR的变异率最高;在各结构域中,cpSSR在大单拷贝区(large single copy, LSC)的变异最大,变异比例占63.46%;而对功能区域来说,非编码区分布的cpSSR的变异率则高于编码区。研究同时建立了山茶属cpSSR分子标记体系,初步筛选出在种间具有较好多态性的cpSSR标记。本研究为今后山茶属多态性的cpSSR标记开发及应用提供重要的理论依据与物质基础。 展开更多
关键词 山茶属 叶绿体基因组 叶绿体微卫星 标记开发
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4种金花茶叶绿体基因组比较分析 被引量:2
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作者 丁祥青 李文芳 +5 位作者 吴丽君 陈义堂 王子墨 郑宏 郑航 邹双全 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第3期300-308,共9页
利用全基因组重测序数据组装得到了夏石金花茶等4种金花茶的叶绿体全基因组序列,并进行了注释和比较分析.结果表明,4种金花茶植物叶绿体基因组序列高度相似,约为156657~157046 bp,均预测注释134个基因,包含89个蛋白编码基因、8个rRNA和3... 利用全基因组重测序数据组装得到了夏石金花茶等4种金花茶的叶绿体全基因组序列,并进行了注释和比较分析.结果表明,4种金花茶植物叶绿体基因组序列高度相似,约为156657~157046 bp,均预测注释134个基因,包含89个蛋白编码基因、8个rRNA和37个tRNA;金花茶植物的叶绿体基因组在结构和进化上具有保守性,它们具有相似的密码子偏好性且均未发生大面积的倒位和基因重排;通过叶绿体基因组的比较分析和核苷酸多态性分析发掘了rps16和ycf1等高变异片段,这些片段可作为金花茶植物的分子标记;基于金花茶叶绿体基因组数据构建的系统进化树具有较高的支持度,说明金花茶叶绿体基因组序列的公布对其系统发育的研究具有重要意义. 展开更多
关键词 金花茶植物 叶绿体基因组 密码子偏好性 多态性分析 分子标记 SSR 系统发育分析
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叶绿体标记在玉米种质资源快速分组中的应用分析
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作者 王蕊 孙擘 +7 位作者 张云龙 张茗起 范亚明 田红丽 赵怡锟 易红梅 匡猛 王凤格 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1867-1876,共10页
叶绿体标记具有遗传保守性高且不受核基因重组干扰等特点,适于对玉米种质资源进行分类管理。本研究基于Maize6H-60K芯片对玉米叶绿体标记筛选获得叶绿体分组候选位点,使用上述位点对3549份玉米种质资源进行聚类分析,将玉米种质资源划分... 叶绿体标记具有遗传保守性高且不受核基因重组干扰等特点,适于对玉米种质资源进行分类管理。本研究基于Maize6H-60K芯片对玉米叶绿体标记筛选获得叶绿体分组候选位点,使用上述位点对3549份玉米种质资源进行聚类分析,将玉米种质资源划分为B、D、H、C、T共5个类群。通过基因型信息对比筛选出29个叶绿体分组特异标记(Varietal Chloroplast Panel,VCP)并设计KASP引物。开发兼容芯片、KASP平台的快速分组分析算法,算法结果与聚类分析一致。挑选5个类群特异位点利用序贯法对种质资源进行快速分组检测,构建玉米种质资源快速分组方法,减少了95%的检测量,为玉米种质资源提供一种新型高效的分组管理方法。 展开更多
关键词 玉米 种质资源 叶绿体标记 KASP 分组方案
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利用Indel标记鉴定太白贝母及其近缘种
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作者 廖海 喻心怡 +4 位作者 黄雪 张田 全慧鸽 李宇辰 周嘉裕 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期1393-1399,共7页
目的 建立基于插入缺失(Indel)标记的常规聚合酶链反应(PCR)方法对太白贝母及其近缘种开展分子鉴定研究。方法 从GenBank下载103条来自不同贝母来源植物的叶绿体基因组序列,序列比对筛选太白贝母的特异性Indel标记。在该Indel标记的上... 目的 建立基于插入缺失(Indel)标记的常规聚合酶链反应(PCR)方法对太白贝母及其近缘种开展分子鉴定研究。方法 从GenBank下载103条来自不同贝母来源植物的叶绿体基因组序列,序列比对筛选太白贝母的特异性Indel标记。在该Indel标记的上下游保守区中设计引物,通过常规PCR与凝胶电泳方法对不同贝母来源植物开展鉴定,并考察方法的特异性、灵敏性与最适反应温度。结果 太白贝母在accD-psaI基因间隔区具有一段长度为137 bp的缺失,可以作为太白贝母的特异性Indel标记。建立的常规PCR与凝胶电泳方法对太白贝母有良好的特异性,仅有太白贝母产生302 bp的条带,从而与暗紫贝母等其余12种不同贝母来源植物明显区分。该方法对贝母DNA模板的检测下限为0.239 ng·μL^(-1),最适熔解温度(T_(m))值为58℃。结论 该检测方法具有特异性高、快捷与成本低等特点,不仅能够实现对太白贝母及其近缘种的准确鉴定,还能够为其他重要来源植物的分子鉴定提供开发思路。 展开更多
关键词 叶绿体基因组 太白贝母 accD-psaI 插入缺失标记 分子鉴定
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Characterization and mapping of a white panicle mutant gene in rice 被引量:6
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作者 LIHongchang QIANQian +3 位作者 WANGYun LIXiaobo ZHULihuang XUJichen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2003年第5期457-459,共3页
A spontaneous white panicle mutant was found from the F6 progenies of an indica/japonica cross. The mu-tant exhibits white stripes on its basal leaves while the pani-cles, rachis and pedicel are milky white colored at... A spontaneous white panicle mutant was found from the F6 progenies of an indica/japonica cross. The mu-tant exhibits white stripes on its basal leaves while the pani-cles, rachis and pedicel are milky white colored at flowering stage. Genetic analysis in an F2 population from the cross of Zhi7/white panicle mutant indicates that the white panicle phenotype is controlled by a single recessive nuclear gene, tentatively termed as wp(t). Using microsatellite markers, the wp(t) gene was anchored between the markers of SSR101 and SSR63.9 with a map distance of 2.3 and 0.8 cM, respec-tively, and co-segregated with the marker of SSR17 on rice chromosome 1. 展开更多
关键词 水稻 蛋白 圆锥花序 突变基因 基因作图 基因表达
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非AA型野生稻叶绿体DNA籼粳特性研究 被引量:3
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作者 张武汉 邓华凤 +4 位作者 陈良碧 何强 舒服 陈觉梁 袁隆平 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 2007年第3期93-97,共5页
籼粳分化现象广泛存在于亚洲栽培稻(O.sativa)中。大量研究表明,普通野生稻(O.rufipogon)的叶绿体DNA也存在籼粳分化。为进一步探明非AA型野生稻的叶绿体DNA是否存在籼粳分化现象,利用2个长度多态性籼粳分型标记(ORF100和ORF29-TrnCGCA)... 籼粳分化现象广泛存在于亚洲栽培稻(O.sativa)中。大量研究表明,普通野生稻(O.rufipogon)的叶绿体DNA也存在籼粳分化。为进一步探明非AA型野生稻的叶绿体DNA是否存在籼粳分化现象,利用2个长度多态性籼粳分型标记(ORF100和ORF29-TrnCGCA)对12个非AA型野生稻种的叶绿体DNA进行籼粳特性分析。研究发现,非AA型野生稻叶绿体DNA都呈现偏粳趋势。对叶绿体DNA碱基多态性最丰富的2个区域(rps16基因内含子和TrnTUGU-TrnLUAA间区)进行测序比较,在4个位点的籼粳分型标记中,非AA型野生稻有3个位点与粳型标记一致,1个位点与籼型标记一致,但另有多个位点的碱基与栽培稻不同。研究结果表明,非AA型野生稻叶绿体DNA总体偏粳,但与典型粳稻存在一定遗传差异。推测粳型叶绿体可能为稻属原始类型。 展开更多
关键词 非AA型野生稻 叶绿体DNA 分子标记 籼粳特性
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基于叶绿体全基因组序列的双峰法鉴定粗茎秦艽及其近缘物种 被引量:3
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作者 高娜娜 倪梁红 +1 位作者 赵志礼 嘎务 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2520-2527,共8页
粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为中药“秦艽”的基原植物之一,而同为龙胆属秦艽组的西藏秦艽Gentiana tibetica King ex Hook.f.、粗壮秦艽Gentiana robusta King ex Hook.f.为其近缘的非国家药典品种。因存在较大的... 粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.为中药“秦艽”的基原植物之一,而同为龙胆属秦艽组的西藏秦艽Gentiana tibetica King ex Hook.f.、粗壮秦艽Gentiana robusta King ex Hook.f.为其近缘的非国家药典品种。因存在较大的种内形态变异,粗茎秦艽与西藏秦艽、粗壮秦艽间表现出较高的形态相似性,且存在一定的同域分布,为粗茎秦艽的鉴定带来了一定的难度。为有效鉴定中药秦艽国家药典品种粗茎秦艽与其近缘的非药典品种,本文基于前期测定的粗茎秦艽、粗壮秦艽叶绿体基因组序列,首次测定西藏秦艽叶绿体基因组序列,筛选分子标记并构建这三个物种的分子鉴定方法。结果如下:①获得西藏秦艽叶绿体基因组序列,长度为148765 bp,大单拷贝区(LSC)、小单拷贝区(SSC)分别为81163 bp和17070 bp,反向重复区(IR)为25266 bp;②粗茎秦艽、西藏秦艽、粗壮秦艽的叶绿体基因组结构一致;粗茎秦艽与西藏秦艽的重复序列、SSR分布情况一致,两个物种间叶绿体基因组变异位点数仅为9;③筛选同时对这三个物种有效鉴定的单核苷酸多态性位点(SNP),并验证稳定性;④建立SNP双峰检测方法,对各物种及混合样品进行有效鉴定。本工作可为粗茎秦艽及其近缘物种的DNA分子鉴定,以及相关藏药品种的整理等工作提供基础资料。 展开更多
关键词 粗茎秦艽 西藏秦艽 粗壮秦艽 叶绿体基因组 SNP标记 双峰检测法
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Diversity,community structure,and quantity of eukaryotic phytoplankton revealed using 18S rRNA and plastid 16S rRNA genes and pigment markers:a case study of the Pearl River Estuary
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作者 Shumin Xu Guihao Li +10 位作者 Cui He Yi Huang Dan Yu Huiwen Deng Zhuyin Tong Yichong Wang Christine Dupuy Bangqin Huang Zhuo Shen Jie Xu Jun Gong 《Marine Life Science & Technology》 SCIE CSCD 2023年第3期415-430,共16页
Understanding consistencies and discrepancies in characterizing diversity and quantity of phytoplankton is essential for better modeling ecosystem change.In this study,eukaryotic phytoplankton in the Pearl River Estua... Understanding consistencies and discrepancies in characterizing diversity and quantity of phytoplankton is essential for better modeling ecosystem change.In this study,eukaryotic phytoplankton in the Pearl River Estuary,South China Sea were investigated using nuclear 18S rRNA and plastid 16S or 23S rRNA genes and pigment analysis.It was found that 18S abundance poorly explained the variations in total chlorophyll a(Chl-a).However,the ratios of log-transformed 18S abundance to Chl-a in the major phytoplankton groups were generally environment dependent,suggesting that the ratio has potential as an indicator of the physiological state of phytoplankton.The richness of 18S-based operational taxonomic units was positively correlated with the richness of 16S-based amplicon sequence variants of the whole phytoplankton community,but insignifcant or weak for individual phytoplankton groups.Overall,the 18S based,rather than the 16S based,community structure had a greater similarity to pigment-based estimations.Relative to the pigment data,the proportion of haptophytes in the 18S dataset,and diatoms and cryptophytes in the 16S dataset,were underestimated.This study highlights that 18S metabarcoding tends to refect biomass-based community organization of eukaryotic phytoplankton.Because there were lower copy numbers of plastid 16S than 18S per genome,metabarcoding of 16S probably approximates cell abundance-based community organization.Changes in biomass organization of the pigment-based community were sensitive to environmental changes.Taken together,multiple methodologies are recommended to be applied to more accurately profle the diversity and community composition of phytoplankton in natural ecosystems. 展开更多
关键词 Accessory pigments chloroplast marker gene Metabarcoding PHYTOPLANKTON
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Development of high-resolution chloroplast markers for intraspecific phylogeographic studies of Phaeocystis globosa 被引量:3
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作者 Qingchun ZHANG Zhuang NIU +5 位作者 Jinxiu WANG Chao LIU Fanzhou KONG Xiaokun HU Jiayu ZHAO Rencheng YU 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2021年第2期508-524,共17页
Phaeocystis globosa is an important harmful algal bloom causative species distributing widely in temperate and tropical coastal waters in the world.The morphological,physiological,and biochemical characteristics are d... Phaeocystis globosa is an important harmful algal bloom causative species distributing widely in temperate and tropical coastal waters in the world.The morphological,physiological,and biochemical characteristics are different among geographic strains,which can not be distinguished with nuclear ribosomal DNA markers at present.Therefore,the genetic distance and phylogeographic relationships of nuclear 28S rDNA D1–D2 and ITS regions,and three chloroplast intergenic spacers(petN-trnS1,trnM1-psbA,and rbcS-rpl27)were analyzed and compared among 13 strains of P.globosa isolated from the Pacific Ocean and Atlantic Ocean in this study.In addition,the nucleotide polymorphisms of 28S rDNA D1–D2,ITS,and rbcS-rpl27 regions were evaluated in two P.globosa strains.The various levels of nucleotide polymorphism were in the nuclear 28S rDNA D1–D2 region and ITS region,but no polymorphism was in the chloroplast rbcS-rpl27 intergenic spacer.A reasonable intraspecific phylogeographic relationship was presented by rbcS-rpl27 intergenic spacer,which had the strongest distinction to geographic strains compared to those of 28S rDNA D1–D2 and ITS regions.In the phylogenetic tree of rbcS-rpl27 intergenic spacer,the two strains from the North Sea of the Atlantic Ocean were divided firstly from the species of P.globosa,and then formed an independent clade,while the other Atlantic strains and all of Pacific strains joined up to build the other clade.It was implied that at least two genetically distant populations of P.globosa existed in the Atlantic coastal regions.This study provided a high-resolution chloroplast marker to analyze intraspecific phylogeographic populations of P.globosa,and preliminarily clarified the genetic relationships of the Pacific and Atlantic strains of P.globosa. 展开更多
关键词 Phaeocystis globosa chloroplast DNA marker PHYLOGENY
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芒属植物叶绿体InDel标记的开发与应用 被引量:2
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作者 薛宏 易自力 +3 位作者 肖亮 丁力 彭思佳 蒋建雄 《现代农业科技》 2015年第7期153-155,159,共4页
研究利用芒属植物(芒02381和荻04005)叶绿体全基因组测序的结果,开发12对InDel标记。采用正交设计法优化cpInDelPCR体系,得到模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物、TaqDNA聚合酶5个关键因素在体系中的最佳组合。12对InDel标记对43份芒属和2份甘... 研究利用芒属植物(芒02381和荻04005)叶绿体全基因组测序的结果,开发12对InDel标记。采用正交设计法优化cpInDelPCR体系,得到模板DNA、dNTPs、Mg2+、引物、TaqDNA聚合酶5个关键因素在体系中的最佳组合。12对InDel标记对43份芒属和2份甘蔗材料进行扩增,共扩增出538条条带,其中3对引物扩增出13条多态性条带,占总数的2.4%。将所有位点读带转化为数值矩阵并用UPGMA法聚类,在遗传相似系数1.4的水平上,和南荻聚为一类,而芒和与五节芒、双药芒、红山茅、尼泊尔芒、甘蔗聚为一类,4个具有杂交种特征的材料单独聚为一类。试验开发的芒属植物cpInDel标记可用于芒与荻的区分,指导芒属植物的杂交育种。 展开更多
关键词 芒属植物 叶绿体 INDEL标记 育种 应用
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菝葜叶绿体基因组的组装分析与分子标记研究 被引量:1
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作者 钟浩天 蒋莉萍 +4 位作者 江宇慧 胡志刚 余坤 刘义飞 森林 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第4期1411-1421,共11页
目的采用高通量测序数据和新组装手段对药用植物菝葜的叶绿体基因组进行精细组装,并以此为基础厘清其分类地位,开发分子鉴定标记。方法利用两种测序手段重新测定并精细组装菝葜叶绿体基因组;重建菝葜近缘物种在时间尺度下的系统发育关系... 目的采用高通量测序数据和新组装手段对药用植物菝葜的叶绿体基因组进行精细组装,并以此为基础厘清其分类地位,开发分子鉴定标记。方法利用两种测序手段重新测定并精细组装菝葜叶绿体基因组;重建菝葜近缘物种在时间尺度下的系统发育关系;分析菝葜叶绿体基因组一级结构并检测编码区选择压力;筛选并验证具备种群特异性的SSR引物。结果混合组装结果显示菝葜叶绿体基因组全长157959 bp,内含编码基因86个。菝葜族与油点草族和百合族互为姐妹群;其内部约26.5Mya开始出现分化。在accD、rbcL及rpl20基因中存正选择信号。247个SSR位点中的3个具备作为菝葜分子鉴定标记的潜力。结论利用短读长和长读长共同组装菝葜叶绿体基因组的结果更佳。已探明的3个SSR位点能为筛选分子标记提供数据支撑。 展开更多
关键词 菝葜 叶绿体基因 高精度组装 分子标记 系统发育
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Exploitation of Concatenated Olive Plastome DNA Markers for Reliable Varietal Identification for On-Farm Genetic Resource Conservation
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作者 Muhammad Noman Wajya Ajmal +2 位作者 Muhammad Ramzan Khan Armghan Shahzad Ghulam Muhammad Ali 《American Journal of Plant Sciences》 2015年第19期3045-3074,共30页
Rapid and reliable identification of olive plants using DNA markers has been attempted in the past but the selection of polymorphic regions for discrimination at varietal level remained obscure. Recent sequencing of p... Rapid and reliable identification of olive plants using DNA markers has been attempted in the past but the selection of polymorphic regions for discrimination at varietal level remained obscure. Recent sequencing of plastid genome of the olive flaunts high resolution Cp markers for olive DNA fingerprinting. Using this information, we designed a combination of chloroplast markers to amplify genes recruited in photosynthesis, ribosomal and NADH energy metabolism for varietal identification of olive plants. Concatenated DNA sequences of more than 100 unknown and 10 reference plants samples were analyzed using various bioinformatics and phylogenetic tools. Conserved blocks of nucleotide sequences were detected in multiple alignments. Phylogenetic reconstruction differentiated the unknown plants into various clusters with known varieties. Further narrowing down of the samples through UPGMA tree clearly separated the plants into Arbosana, Frantoio and Koroneiki as the major varieties. Multiple alignments of these clusters revealed important variety specific SNPs including G and T nucleotides at specific positions. Sequence identifying at intra cultivar level was more than 98.79% while it dropped to 97%, and even to 96% at inter varietal level. Furthermore, a neighbor net network analysis separated these three clusters, thus validating the results of UPGMA tree. Over all, out of 100 plants samples, 49 plants were identified that fall into 10 varieties including Arbosana, Carolea, Chetoui, Coratina, Domat, Frantoio, Gemlik, Koroneiki,Leccino and Moraiolo. The maximum number of known plants belongs to Frantoio and Gemlik (8 each). The least number of samples was identified from Carolea, Domat and Moraiolo with 2 samples each. However, 51 plants could not be identified, as plants were not clustered with any of reference control. Our results have implications in on-farm conservation of olive germplasm and provision of genuine material for multiplication of authentic varieties. This strategy can be extended to varietal ident 展开更多
关键词 DNA Fingerprinting OLIVE marker chloroplast Genome Identification PHYLOGENETIC
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药食两用藠头叶绿体基因组解析、比较基因组学及系统发育研究 被引量:15
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作者 杨俏俏 姜梅 +3 位作者 王立强 陈海梅 刘昶 黄林芳 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期173-181,共9页
藠头(Allium chinense)为百合科葱属常用药食两用植物。为探究部分葱属植物系统发育关系不明确及该属物种鉴别通用DNA条形码匮乏的问题,本研究应用高通量测序技术对藠头叶绿体全基因组进行测序、组装、注释及系统进化研究。结果显示藠... 藠头(Allium chinense)为百合科葱属常用药食两用植物。为探究部分葱属植物系统发育关系不明确及该属物种鉴别通用DNA条形码匮乏的问题,本研究应用高通量测序技术对藠头叶绿体全基因组进行测序、组装、注释及系统进化研究。结果显示藠头叶绿体基因组为152 525 bp,呈典型的四分状结构,共编码116个基因,其中蛋白质编码基因81个,转运RNA (transfer RNA)基因31个和核糖体RNA (ribosome RNA)基因4个。对6个葱属植物叶绿体基因组比较分析发现了7个变异较大的区间,包括基因编码区ndhA和ycf1,以及非编码区rps16-trnQ、trnT-trnF、ndhF-rpl32、rpl32-trnL和rpl16-rps3。利用葱属和非葱属53个物种的58个共有蛋白序列构建了进化树,发现除百合属、重楼属外其余各属物种所在分枝的支持率都达到66%~100%,有效地解决该类植物的系统进化与分类问题。此外,利用EcoPrimer软件成功发现了7个可用于葱属物种鉴定的候选DNA条形码序列并设计了引物。本研究首次获得了藠头叶绿体基因组序列,明确葱属物种间的亲缘关系,发现了一系列葱属物种特异的DNA条形码序列,为深入研究葱属植物的系统进化、分类及物种鉴定提供科学依据。 展开更多
关键词 藠头 叶绿体基因组 分子标记 系统发育 DNA条形码
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含当归中成药的DNA提取及其分子鉴定 被引量:13
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作者 苟惠 王译伟 +2 位作者 郑茜 王钦 张春 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期44-50,共7页
目的:优化含当归中成药的DNA提取方法,并利用叶绿体trn L-F基因及当归特异分子标记对当归中成药进行鉴定。方法:采用传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法,十二烷基磺酸钠(SDS)法,磁珠法以及改良CTAB法对10种含有当归成分的中成药进... 目的:优化含当归中成药的DNA提取方法,并利用叶绿体trn L-F基因及当归特异分子标记对当归中成药进行鉴定。方法:采用传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法,十二烷基磺酸钠(SDS)法,磁珠法以及改良CTAB法对10种含有当归成分的中成药进行DNA提取,利用微量紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳检测所得总DNA的完整性、纯度和浓度。对10份当归中成药的trn L-F序列进行扩增、测序,对序列进行比对分析并构建系统发育树。利用当归特异鉴别分子标记对10种当归中成药中的当归成分进行分子鉴别。结果:利用改良CTAB法获得了纯度较高,质量较好的DNA。10种中成药中当归的trn L-F序列与正品当归序列相似度为99.88%-100%,系统发育树显示10份中成药中的当归与正品当归聚为一类。利用当归特异性鉴别分子标记进行验证,10种中成药DNA样品均能得到明亮的扩增条带。结论:改良CTAB法可以有效提取当归中成药中的基因组DNA。利用trn L-F序列和当归特异性鉴别分子标记,成功对10份市售当归中成药进行了分子鉴别,为当归类中成药的分子鉴定奠定了基础。 展开更多
关键词 当归中成药 DNA提取方法 叶绿体trn L-F序列 特异性鉴别分子标记 分子鉴定
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Advances in chloroplast engineering 被引量:6
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作者 Huan-Huan Wang Wei-Bo Yin Zan-Min Hu 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2009年第7期387-398,共12页
The chloroplast is a pivotal organelle in plant cells and eukaryotic algae to carry out photosynthesis, which provides the primary source of the world's food. The expression of foreign genes in chloroplasts offers se... The chloroplast is a pivotal organelle in plant cells and eukaryotic algae to carry out photosynthesis, which provides the primary source of the world's food. The expression of foreign genes in chloroplasts offers several advantages over their expression in the nucleus: high-level expression, transgene stacking in operons and a lack of epigenetic interference allowing stable transgene expression. In addition, transgenic chloroplasts are generally not transmitted through pollen grains because of the cytoplasmic localization. In the past two decades, great progress in chloroplast engineering has been made. In this paper, we review and highlight recent studies of chloroplast engineering, including chloroplast transformation procedures, controlled expression of plastid transgenes in plants, the expression of foreign genes for improvement of plant traits, the production of biopharmaceuticals, metabolic pathway engineering in plants, plastid transformation to study RNA editing, and marker gene excision system. 展开更多
关键词 chloroplast (plastid) transformation homologous recombination protein expression marker excision
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柑橘体细胞胞质遗传及叶绿体SSR引物开发 被引量:6
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作者 程运江 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期780-783,共4页
以38个组合的柑橘体细胞杂种(或胞质杂种)为试验材料,综合应用RFLP、CAPS和cpSSR分子标记技术,对这些杂种的线粒体和叶绿体遗传组成进行了分析;同时对试验技术体系进行了完善与拓展,开发了柑橘叶绿体SSR标记;并对柑橘愈伤组织长期继... 以38个组合的柑橘体细胞杂种(或胞质杂种)为试验材料,综合应用RFLP、CAPS和cpSSR分子标记技术,对这些杂种的线粒体和叶绿体遗传组成进行了分析;同时对试验技术体系进行了完善与拓展,开发了柑橘叶绿体SSR标记;并对柑橘愈伤组织长期继代保存过程中胞质基因组遗传变异进行了分析,主要结果如下: 展开更多
关键词 柑橘 体细胞杂种 线粒体基因组(mtDNA) 叶绿体基因组(cpDNA) 叶绿体SSR(cpSSR) 愈伤组织 分子标记
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基于叶绿体SSR分子标记的苦参种质资源遗传多样性分析 被引量:2
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作者 宋芸 张鑫瑞 +4 位作者 贺嘉欣 李政 孙哲 李澳旋 乔永刚 《作物杂志》 北大核心 2023年第1期30-37,共8页
以来自15个不同产地的150份苦参为材料,采用cpSSR分子标记技术探究不同产地苦参种质资源的遗传多样性。结果表明,18对cpSSR引物共扩增出311个条带,检测出97.47个等位基因,平均每对cpSSR引物扩增出17.28个条带。平均检测到的等位基因数(... 以来自15个不同产地的150份苦参为材料,采用cpSSR分子标记技术探究不同产地苦参种质资源的遗传多样性。结果表明,18对cpSSR引物共扩增出311个条带,检测出97.47个等位基因,平均每对cpSSR引物扩增出17.28个条带。平均检测到的等位基因数(Na)为5.415,有效等位基因数(Ne)为4.395,Shannon's信息指数(I)为1.535,多样性指数(h)为0.748,无偏多样性指数(uh)为0.832,多态信息含量(PIC)为0.886,PIC>0.5说明18对cpSSR引物具有较高的多态性。不同产地的苦参遗传多样性丰富,其中山西武乡土河坪种质(THP)的I为1.600,Ne为4.786,其他遗传多样性指数均较大,是遗传多样性较丰富的苦参产地。居群分子方差分析(AMOVA)表明,苦参种质内个体间差异大,苦参种质内遗传变异率大于种质间的。聚类分析、主坐标分析(PCoA)和STRUCTURE软件进行的遗传结构分析结果均将不同产地的苦参分为2个类群,并且分类结果有明显的地理相关性。第1类群中的9个苦参种质主要来自山西、河北、陕西和内蒙古等地,第2类群主要来自山东、河南、江苏以及安徽等地。18对cpSSR引物在苦参内具有很好的适用性。苦参种质资源的遗传多样性研究为发掘、利用与保护苦参种质资源以及优良品种的选育提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 苦参 叶绿体分子标记 遗传多样性 种质资源
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叶绿体遗传转化研究中的选择标记 被引量:4
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作者 李轶女 杨宗岐 +1 位作者 张志芳 沈桂芳 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期132-138,共7页
与核遗传转化相同,叶绿体遗传转化研究需要有合适的选择标记作为辅助手段。多种选择标记已经在叶绿体转化中得到应用,但由于叶绿体自身的结构与遗传特点,选择标记的选择与使用与核遗传转化明显不同,所以正确的选择合适的选择标记对于成... 与核遗传转化相同,叶绿体遗传转化研究需要有合适的选择标记作为辅助手段。多种选择标记已经在叶绿体转化中得到应用,但由于叶绿体自身的结构与遗传特点,选择标记的选择与使用与核遗传转化明显不同,所以正确的选择合适的选择标记对于成功的叶绿体遗传转化是非常重要的。目前叶绿体转化中常用的选择标记大多为抗生素选择标记,对人类存在潜在的威胁,如何摆脱对抗生素选择标记的依赖是当前研究的热点。综述了国内外叶绿体转化研究中主要使用的选择标记,并着重介绍了非抗生素选择标记——甜菜碱醛脱氢酶和选择标记的删除体系。 展开更多
关键词 叶绿体遗传转化 选择标记 甜菜碱醛脱氢酶 位点特异性重组
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