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兔角膜基质细胞在壳聚糖胶原共混膜体外培养研究 被引量:9
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作者 丁勇 徐锦堂 +2 位作者 陈建苏 吴春云 陈瑞 《眼科新进展》 CAS 2004年第2期88-90,共3页
目的 探讨壳聚糖 胶原共混膜作为载体体外培养兔角膜基质细胞的可行性。方法 先同时消化角膜上皮及内皮层 ,然后刮去上皮、内皮、前弹力层和后弹力层 ,将剩余的基质层剪碎消化 ,接种在壳聚糖 胶原共混膜上 ,通过间接免疫荧光细胞化学... 目的 探讨壳聚糖 胶原共混膜作为载体体外培养兔角膜基质细胞的可行性。方法 先同时消化角膜上皮及内皮层 ,然后刮去上皮、内皮、前弹力层和后弹力层 ,将剩余的基质层剪碎消化 ,接种在壳聚糖 胶原共混膜上 ,通过间接免疫荧光细胞化学染色对培养的细胞进行鉴别。结果 角膜基质细胞应用消化培养法 4h后部分基质细胞与壳聚糖 胶原共混膜有贴壁现象出现 ,细胞呈梭形。培养 2 4h后 ,基质细胞呈纺锤形且透明 ,此后细胞分裂增殖越来越多并向周围延伸 ,培养第 6天细胞已经达到完全融合状态 ,呈梭形 ,排列比较整齐。在 6d左右达到 10 0 %融合状态 ,间接免疫荧光细胞化学染色、Vim染色、胞浆染色阳性。结论 传代的细胞具有角膜基质细胞的生物特性 ,壳聚糖 展开更多
关键词 壳聚糖-胶原共混膜 兔角膜基质细胞 体外培养 载体
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几丁质-胶原蛋白膜的制作及皮下埋植实验 被引量:7
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作者 王永胜 侯春林 +2 位作者 肖仕初 刘志国 杨珺 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第3期233-236,共4页
目的 探讨几丁质 -胶原蛋白膜作为真皮支架的可行性。方法 以酸溶法制备胶原溶液 ,添加一定比例的脱乙酰化几丁质 ,冻干成膜 ,0 .0 5 %戊二醛溶液浸泡交联 ,行体外酶降解实验 ,检测其耐受酶降解能力 ;将制备的几丁质 -胶原蛋白膜包埋... 目的 探讨几丁质 -胶原蛋白膜作为真皮支架的可行性。方法 以酸溶法制备胶原溶液 ,添加一定比例的脱乙酰化几丁质 ,冻干成膜 ,0 .0 5 %戊二醛溶液浸泡交联 ,行体外酶降解实验 ,检测其耐受酶降解能力 ;将制备的几丁质 -胶原蛋白膜包埋于 36只 SD大鼠皮下 ,术后 3、5天 ,1、2、3、4、6、8和 12周取材 ,检测其组织相容性、血管化能力及材料在体内降解情况。结果 制备的几丁质 -胶原蛋白膜 ,呈微黄、半透明状 ,纤维排列呈网状 ,一侧较光滑 ,孔小 ,另一侧孔稍大 ,孔径大小保持在 5 0~ 2 5 0μm之间 ,其体外降解缓慢。皮下埋植实验术后 5天~ 2周显示材料具有良好的组织相容性 ,无明显炎性反应 ,血管化早 ,体内降解缓慢 ;8周后经改建可形成纤维排列较规则的类真皮样结构。结论 几丁质 -胶原蛋白膜具有较好的物理及生物学性能 ,组织相容性好 ,血管化能力强 ,体内、外降解缓慢 ,具有良好的真皮替代功能。 展开更多
关键词 几丁质 胶原蛋白膜 制作 皮下埋植 实验 真皮支架 可行性 生物学性能
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复合rhTGF-β_1的壳聚糖/胶原支架培养牙周膜成纤维细胞的体外研究 被引量:2
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作者 刘同军 程祥荣 +3 位作者 何晓宁 张玉峰 彭琳 石珊珊 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第4期349-352,共4页
目的:研究复合在壳聚糖/胶原支架上的重组人转化生长因子β1(recomb ined hum an transform ing growthfactorβ1,rhTGF-β1)的释放情况及人牙周膜成纤维细胞(hum an periodontal ligam ent fibro-b lasts,HPDLFs)在载体上三维培养的生... 目的:研究复合在壳聚糖/胶原支架上的重组人转化生长因子β1(recomb ined hum an transform ing growthfactorβ1,rhTGF-β1)的释放情况及人牙周膜成纤维细胞(hum an periodontal ligam ent fibro-b lasts,HPDLFs)在载体上三维培养的生物学行为。方法:采用ELISA法检测rhTGF-β1的释放过程;原代培养HPDLFs,用MTT法检测及激光共聚焦显微镜观察HPDLFs在含有rhTGF-β1和不含rhTGF-β1的壳聚糖/胶原支架上的增殖情况。结果:ELISA显示复合在壳聚糖/胶原支架上rhTGF-β1的释放,可持续至4周。MTT结果与电镜扫描分析均显示HP-DLFs在两种不同支架上的增殖有显著性差异(P<0.5)。结论:复合在支架上的TGF-β1对HPDLFs的增殖有较好的促进作用。该复合支架能在一定程度上起到控释TGF-β1作用,但控释持续时间仍显不足。 展开更多
关键词 壳聚糖 胶原 支架 转化生长因子Β1
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人牙周韧带细胞与壳聚糖-胶原支架体外培养的实验研究 被引量:1
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作者 何晓宁 程祥荣 +1 位作者 彭琳 关丽 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2008年第4期399-401,共3页
目的:探讨壳聚糖-胶原支架在人牙周韧带细胞(PDLC)体外培养中的作用。方法:将体外培养PDLC接种于壳聚糖-胶原支架上,通过MTT法测定细胞增殖情况,通过半定量PCR检测细胞mRNA合成变化。结果:与传统的平板培养相比,PDLC在壳聚糖-胶原支架... 目的:探讨壳聚糖-胶原支架在人牙周韧带细胞(PDLC)体外培养中的作用。方法:将体外培养PDLC接种于壳聚糖-胶原支架上,通过MTT法测定细胞增殖情况,通过半定量PCR检测细胞mRNA合成变化。结果:与传统的平板培养相比,PDLC在壳聚糖-胶原支架上的增殖及mRNA合成情况有显著性差异(P<0.05)。结论:该复合支架可以作为PDLC的载体;对PDLC的增殖及细胞外基质的合成均有较好地促进作用。 展开更多
关键词 壳聚糖 胶原 支架 牙周韧带细胞
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Chitosan-collagen porous scaffold and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for ischemic stroke 被引量:5
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作者 Feng Yan Wei Yue +5 位作者 Yue-lin Zhang Guo-chao Mao Ke Gao Zhen-xing Zuo Ya-jing Zhang Hui Lu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期1421-1426,共6页
In this study, we successfully constructed a composite of bone marrow mesenchymal stem cells and a chitosan-collagen scaffold in vitro, transplanted either the composite or bone marrow mesenchymal stem cells alone int... In this study, we successfully constructed a composite of bone marrow mesenchymal stem cells and a chitosan-collagen scaffold in vitro, transplanted either the composite or bone marrow mesenchymal stem cells alone into the ischemic area in animal models, and compared their effects. At 14 days after co-transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells and the hi- tosan-collagen scaffold, neurological function recovered noticeably. Vascular endothelial growth factor expression and nestin-labeled neural precursor cells were detected in the iscbemic area, surrounding tissue, hippocampal dentate gyrus and subventricular zone. Simultaneously, a high level of expression of glial fibrillary acidic protein and a low level of expression of neuron-spe- cific enolase were visible in BrdU-labeled bone marrow mesenchymal stem cells. These findings suggest that transplantation of a composite of bone marrow mesenchymal stem cells and a chi- tosan-collagen scaffold has a neuroprotective effect following ischemic stroke. 展开更多
关键词 nerve regeneration ischemic stroke chitosan-collagen scaffold bone marrow mesenchymalstem cells cell transplantation cell differentiation neurological function neural regeneration
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以壳聚糖-胶原共混膜为三维支架同种异体工程化软骨的构建 被引量:6
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作者 倪云峰 李小飞 +3 位作者 刘源 王新文 雷站军 卢强 《生物医学工程与临床》 CAS 2006年第3期125-127,F0003,共4页
目的探讨以壳聚糖-胶原共混膜为三维支架材料的同种异体软骨细胞构建组织工程化软骨的能力。方法将分离、培养、扩传兔软骨细胞,接种在壳聚糖-胶原共混膜上,倒置显微镜下观察细胞在共混膜上的生长情况。体外培养7d后,将细胞-材料复合物... 目的探讨以壳聚糖-胶原共混膜为三维支架材料的同种异体软骨细胞构建组织工程化软骨的能力。方法将分离、培养、扩传兔软骨细胞,接种在壳聚糖-胶原共混膜上,倒置显微镜下观察细胞在共混膜上的生长情况。体外培养7d后,将细胞-材料复合物种植在新西兰兔皮下,6周取材,对获得的同种异体工程化软骨进行组织学评价。结果兔软骨细胞接种于壳聚糖-胶原共混膜上4h后有贴壁现象出现,细胞呈梭形。培养48h后,软骨细胞分裂增殖越来越多并向周围延伸,培养第7天取材,HE染色示细胞生长良好,呈梭形。体内培养6周取材,HE染色、Masson染色为均一的成熟软骨组织,且共混膜已降解。结论以壳聚糖-胶原共混膜为支架材料同种异体软骨细胞在有免疫力的动物体内可形成工程化软骨。 展开更多
关键词 壳聚糖-胶原共混膜 兔软骨细胞 组织工程
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一种载有生长因子的壳聚糖/胶原生物支架的制备 被引量:2
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作者 石珊珊 张志升 尹路 《口腔颌面修复学杂志》 2019年第4期193-196,202,共5页
目的:探讨一种壳聚糖-胶原-BMP2微球复合材料在制备时的规律特点,为今后组织工程中生物材料的制备提供理论基础。方法:水包水法制备BMP-2微球;冷冻干燥法制备不同比例组合的BMP-2微球-壳聚糖/胶原复合支架;乙醇置换法检测复合支架孔隙率... 目的:探讨一种壳聚糖-胶原-BMP2微球复合材料在制备时的规律特点,为今后组织工程中生物材料的制备提供理论基础。方法:水包水法制备BMP-2微球;冷冻干燥法制备不同比例组合的BMP-2微球-壳聚糖/胶原复合支架;乙醇置换法检测复合支架孔隙率;平衡溶胀试验测量吸水率;细胞培养后测量相关收缩率;取壳聚糖和胶原4/6、1/9比例的样本做扫描电镜观察和MTT实验。结果:各比例材料的孔隙率稳定;一定范围内吸水率随胶原比例增加而增加;收缩率随壳聚糖比例增加而减小;壳聚糖和胶原4/6时孔径均匀,促细胞增殖能力较强。结论:BMP-2微球复合壳聚糖-胶原支架中壳聚糖/胶原以比例4/6相复合时性能较佳。 展开更多
关键词 微球-壳聚糖-胶原支架 孔隙率 吸水率 细胞相关收缩率 MTT
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一种壳聚糖/胶原支架复合TGF-β微球在制备上的研究
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作者 石珊珊 张志升 尹路 《口腔颌面修复学杂志》 2019年第5期257-260,共4页
目的:对构建的壳聚糖-胶原-TGF-β微球复合材料完善相关性能检测,进一步探讨支架制备的方法特点。方法:制备TGF-β微球和载不同量TGF-β微球的复合壳聚糖-胶原支架;MicroBCA试剂盒检测TGF-β体外释放;取载有不同量TGF-β微球的壳聚糖-... 目的:对构建的壳聚糖-胶原-TGF-β微球复合材料完善相关性能检测,进一步探讨支架制备的方法特点。方法:制备TGF-β微球和载不同量TGF-β微球的复合壳聚糖-胶原支架;MicroBCA试剂盒检测TGF-β体外释放;取载有不同量TGF-β微球的壳聚糖-胶原支架分组在扫描电镜下观察孔径;乙醇置换实验测量孔隙率;平衡溶胀试验测量吸水率;MTT观察细胞增殖情况。结果:载有微球最多的实验组C孔径、孔隙率和吸水率都比A\B组小,且细胞增殖能力最弱;而B组细胞增殖能力最强。结论:负载生长因子的微球的比例不一定与复合微球-壳聚糖-胶原支架细胞增殖能力成正比。 展开更多
关键词 壳聚糖-胶原支架 微球 生长因子 组织工程
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壳聚糖与型胶原复合制作组织工程软骨支架及其性能研究 被引量:29
9
作者 史德海 蔡道章 +3 位作者 周长忍 李立华 曾春 李晓峰 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期278-282,共5页
目的 探讨采用壳聚糖与 型胶原复合制作新型组织工程软骨三维多孔支架的方法,并对其理化性能进行检测。 方法 将精制88%脱乙酰度壳聚糖溶于0 .2 mol/ L 醋酸溶液制成2 %溶液,高纯度猪 型胶原溶于0 .5 m ol/ L醋酸溶液制成1%溶液,两者... 目的 探讨采用壳聚糖与 型胶原复合制作新型组织工程软骨三维多孔支架的方法,并对其理化性能进行检测。 方法 将精制88%脱乙酰度壳聚糖溶于0 .2 mol/ L 醋酸溶液制成2 %溶液,高纯度猪 型胶原溶于0 .5 m ol/ L醋酸溶液制成1%溶液,两者按4∶1(重量比)充分搅拌混合,采用冷冻干燥法制成壳聚糖与 型胶原复合支架。采用碳化二亚胺/ N-羟基琥珀酰亚胺对支架进行交联,力学测定比较支架交联前后的强度变化,扫描电镜观察其超微结构,于2、4、6和8周经溶菌酶体外降解实验测定其体外降解性。 结果 制备的复合支架成形良好,交联后其力学强度明显增加。扫描电镜显示壳聚糖与 型胶原成分在支架内分布均匀,支架内孔洞相互连通似海绵状,孔径10 0~2 5 0 μm。各时间段复合支架体外降解较单纯壳聚糖支架快。 结论 壳聚糖与 型胶原复合成功地制作成了三维多孔复合支架。其理化性能及体外降解测定,可以作为支架载体,应用于组织工程软骨的构建。 展开更多
关键词 胶原复合 壳聚糖 性能研究 软骨支架 制作 N-羟基琥珀酰亚胺 组织工程软骨 mol/L 三维多孔支架 Ⅱ型胶原 复合支架 扫描电镜观察 体外降解 理化性能 碳化二亚胺 冷冻干燥法 脱乙酰度 强度变化 超微结构 支架成形 胶原成分
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