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彩色显微骨髓细胞图像噪声的自适应矢量中值滤波 被引量：3
1
作者 孙万蓉 俞卞章 朱天桥 《西安电子科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期634-638,共5页
提出了一种基于彩色图像噪声的自适应矢量中值滤波方法,可根据噪声干扰的情况自动选择滤波窗口的大小.首先,检测3×3窗口中矢量中值与其他矢量之间的平均距离,然后根据这个平均距离的大小来判断选择3×3窗口,或5×5窗口,或1... 提出了一种基于彩色图像噪声的自适应矢量中值滤波方法,可根据噪声干扰的情况自动选择滤波窗口的大小.首先,检测3×3窗口中矢量中值与其他矢量之间的平均距离,然后根据这个平均距离的大小来判断选择3×3窗口,或5×5窗口,或1×1窗口.当选择1×1窗口时,意味着滤波输出就是原图像的像素值.模拟实验显示,应用自适应矢量中值滤波器能有效地滤除彩色显微骨髓细胞图像的噪声,并能较好地保护边缘和细节,其性能较一般的矢量中值滤波方法要好. 展开更多
关键词 自适应矢量滤波 彩色显微图像 骨髓细胞
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胎盘间充质干细胞与骨髓间充质干细胞分离培养和生物学特性研究 被引量：12
2
作者 卢遥 邓力 +3 位作者 李秀群 智伟 杨志明 解慧琪 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期989-993,共5页
目的探讨兔胎盘问充质干细胞（placenta—derived mesenchymal stem cells，PMSCs）和兔骨髓间充质干细胞（bone marrow—derived MSCs，BMSCs）体外分离培养、增殖，对其生物学性状进行比较观察。方法取足月待产新西兰大耳白兔1只，采... 目的探讨兔胎盘问充质干细胞（placenta—derived mesenchymal stem cells，PMSCs）和兔骨髓间充质干细胞（bone marrow—derived MSCs，BMSCs）体外分离培养、增殖，对其生物学性状进行比较观察。方法取足月待产新西兰大耳白兔1只，采用密度梯度离心法及贴壁培养技术从兔胎盘对PMSCs进行分离、纯化和传代培养。取2周龄新西兰大耳白兔1只，采用直接贴壁法从后肢骨髓中对BMSCs进行分离、纯化和传代培养。用倒置相差显微镜观察两种细胞形态。免疫组织化学染色对第3代细胞表面标志（CD44、CD105、CD34、CD40L）进行鉴定。将BMSCs与PMSCs第2代细胞分别与生物衍生骨进行复合培养5d，每条材料接种（1．0～1．5）×10^6个细胞，苏木素染色观察细胞与材料复合培养情况。扫描电镜观察两种细胞分别与材料复合培养3d和8d的情况。结果在倒置相差显微镜下观察，两种细胞均为贴壁生长，形态为均一成纤维细胞样。PMSCs增殖力强，细胞的增殖能力随传代次数的增加而有所下降，细胞体外培养10代后，生长速度减慢。两种细胞均表达CD44、CD105，不表达CD34、CD40L。复合培养5d，PMSCs和BMSCs在生物衍生骨表面生长，大量黏附，细胞积聚成团，相互连接成网状，孔隙内也可见细胞生长和增殖，并分泌基质。扫描电镜观察：复合培养3d，可见较多量的细胞在生物衍生骨上黏附，呈梭形或多角形；8d两种细胞均已大量增长，呈层状排列，细胞连接紧密，分泌大量基质，细胞周围有较多的网状胶原形成。结论PMSCs与BMSCs有相似的生物学特性，可作为组织工程的另一成体干细胞来源。 展开更多
关键词 组织工程 胎盘间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 生物学特性 兔
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化学去细胞异体神经添加不同组织来源雪旺细胞对周围神经损伤修复的功能评价 被引量：9
3
作者 赵喆 赵斌 +8 位作者 王玉 彭江 张莉 陈继凤 赵庆 任志午 刘炎 许文静 卢世璧 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1281-1287,共7页
目的构建不同组织来源雪旺细胞(Schwann cells,SCs)及化学去细胞异体神经(chemically extracted acellular nerve allograft,CEANA)移植物,比较其修复周围神经缺损的效果。方法 4周龄SD大鼠3只,体重80～120g,体外培养、扩增和鉴定BMSCs... 目的构建不同组织来源雪旺细胞(Schwann cells,SCs)及化学去细胞异体神经(chemically extracted acellular nerve allograft,CEANA)移植物,比较其修复周围神经缺损的效果。方法 4周龄SD大鼠3只,体重80～120g,体外培养、扩增和鉴定BMSCs及脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)。体外诱导BMSCs和ADSCs分化为类雪旺细胞(dMSC,dADSC),并采用胶质细胞标记物p75和抗胶原纤维酸性蛋白(glial fi brillary acidic protein,GFAP)进行鉴定。取出生3d SD大鼠10只,体重6～8g,分离培养SCs。20只成年Wistar大鼠,体重200～250g,取双侧约20mm坐骨神经制备CEANA。40只成年雄性SD大鼠,制备左侧15mm坐骨神经缺损模型,根据神经缺损修复方法不同随机分为5组(n=8):A组,取自体坐骨神经翻转后吻合;B组,取15mm CEANA吻合后补充5×105个SCs;C组,取15mm CEANA吻合后补充5×105个dMSC;D组,取15mm CEANA吻合后补充5×105个dADSC;E组,取15mm CEANA吻合。术后12周行感觉和运动功能恢复评价及组织学评价。结果 BMSCs和ADSCs表面抗原标志为CD34-、CD45-、CD90+。经诱导后BMSCs和ADSCs形态变化与SCs相似,呈双极、星形结构,SCs标记物p75和GFAP均表达阳性。术后12周,A、B、C、D、E组肢体50%回缩阈值分别为(13.8±2.3)、(15.4±6.5)、(16.9±5.3)、(16.3±3.5)和(20.0±5.3)g,A组与E组比较差异有统计学意义(P<0.01),B、C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。A、B、C、D、E组小腿三头肌收缩力恢复率分别为87.0%±9.7%、70.0%±6.6%、69.0%±6.7%、65.0%±9.8%和45.0%±12.1%,A、B、C、D组与E组比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组远端吻合口神经坚牢蓝染色显示神经纤维排列整齐,无炎性反应。甲苯胺蓝染色和透射电镜观察显示,B、C、D组有髓神经纤维计数及有髓神经纤维髓鞘厚度均大于E组,差异均有统计学意义(P<0.01);B组轴突直径大于C、D组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CEANA补充dADSC修复周围神经缺损与补 展开更多
关键词 化学去细胞异体神经 雪旺细胞 BMSCS 脂肪来源干细胞 神经再生
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脐带Wharton胶来源MSCs生物学特性及其优越性的研究进展 被引量：7
4
作者 刘玲英 柴家科 +3 位作者 韩焱福 孙天骏 李东杰 赵京玉 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期745-749,共5页
目的总结脐带Wharton胶来源MSCs(Wharton’s jelly-MSCs,WJ-MSCs)生物学特性及其优越性的研究进展。方法查阅近年来关于WJ-MSCs的生物学特性及其与脐带血MSCs(umbilical cord blood MSCs,UBMSCs)和BMSCs相比较的文献,进行综述分析。结... 目的总结脐带Wharton胶来源MSCs(Wharton’s jelly-MSCs,WJ-MSCs)生物学特性及其优越性的研究进展。方法查阅近年来关于WJ-MSCs的生物学特性及其与脐带血MSCs(umbilical cord blood MSCs,UBMSCs)和BMSCs相比较的文献,进行综述分析。结果从脐带Wharton胶中可分离获得大量具有自我复制、自我更新、高度增殖和多向分化潜能的MSCs。与UBMSCs和BMSCs相比较,WJ-MSCs在分离时间、分离成功率、倍增时间、传代数量和扩增潜能等方面均具有优越性。结论 WJ-MSCs具有取材简便、来源丰富、相对纯净、无伦理问题等优点,是细胞移植治疗、基因治疗和组织工程器官构建的理想种子细胞,为组织再生修复与原位重建提供了新思路。 展开更多
关键词 Wharton胶来源MSCs 生物学特性 诱导分化 脐带血MSCs BMSCS
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来源于骨髓和脐带血的基质细胞基本特性的比较 被引量：6
5
作者 黄友章 杨平地 +7 位作者 沈建良 兰雨 向丹 岑坚 马骢 郭启煜 唐亚辉 刘晓鹏 《北京医学》 CAS 北大核心 2002年第6期399-402,共4页
目的　比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性 ,为基质细胞的选择应用提供依据。方法　用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞 ,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵... 目的　比较骨髓与脐带血细胞体外培养基质细胞的基本特性 ,为基质细胞的选择应用提供依据。方法　用Dexter长期培养体系培养骨髓和脐带血基质细胞 ,以细胞增殖、细胞形态、细胞化学染色、细胞表面及基质细胞支持另一骨髓细胞形成的鹅卵石造血区 (CAFC) ,长期培养起始细胞 (LTC IC)为指标 ,比较两者的生长特性、成分及功能。结果　①细胞生长特性 :出现贴壁细胞时间 ,骨髓细胞为培养 3d ,脐带血细胞为培养 5～ 6d ;细胞融合成片时间 ,骨髓细胞为培养 10～ 14d ,脐带血细胞为培养 12～ 18d ;第 2 1天细胞增殖数 ,骨髓比脐带血细胞增殖少 ;②细胞成分 :2 1d培养后细胞成分 ,骨髓来源者以成纤维细胞为主 ,其次是巨噬细胞与内皮细胞 ,脂肪细胞最少 ;脐带血细胞来源者 ,以巨噬细胞为主 ,其次是内皮细胞、成纤维细胞 ,偶见脂肪细胞 ;细胞化学与上述结果基本一致 ;细胞表面抗原检测 ,CD14、CD4 5的表达骨髓细胞明显低于脐带血细胞 ;③细胞功能 :骨髓来源的基质细胞较脐带血细胞的基质细胞支持另一骨髓细胞形成的CAFC和LTC IC明显多。结论　①生长特征 :形成贴壁细胞时间骨髓较脐带血短 ,骨髓细胞比脐带血细胞有核细胞数增殖快、持续时间相对短 ;②细胞成分特性 :骨髓来源形成的基质细胞以成纤维细胞为主 。 展开更多
关键词 基质细胞 骨髓 脐带血 体外培养
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脐静脉和骨髓来源的间充质干细胞的比较研究 被引量：4
6
作者 唐晓琼 赵智刚 +1 位作者 王红祥 邹萍 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期6-10,共5页
间充质干细胞(MSCs)的来源有限,成人骨髓是MSCs的主要来源,这极大地限制了其在实验和临床中的应用。为拓宽MSCs来源,从细胞形态、生长特性、免疫表型和多向分化能力等四个方面对人脐静脉来源和成人骨髓来源的间充质干细胞进行了比较研... 间充质干细胞(MSCs)的来源有限,成人骨髓是MSCs的主要来源,这极大地限制了其在实验和临床中的应用。为拓宽MSCs来源,从细胞形态、生长特性、免疫表型和多向分化能力等四个方面对人脐静脉来源和成人骨髓来源的间充质干细胞进行了比较研究。结果表明,人脐静脉来源和成人骨髓来源的MSCs具有相似的生物学特征,成纤维细胞样形态生长,并具有强大的体外扩增和多向分化能力。人脐静脉来源的MSCs可替代成人骨髓MSCs,作为满足实验和临床需要的重要来源。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨髓 脐静脉
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法舒地尔对人骨髓间充质干细胞向表皮细胞分化的影响 被引量：3
7
作者 张奇 白晓东 +4 位作者 杨洋 李凌云 宋燚 王均强 付小兵 《武警医学》 CAS 2005年第9期647-650,共4页
目的探讨HA-1077(fasudil,法舒地尔)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为表皮细胞的影响。方法采用直接贴壁法培养并扩增人胚胎股骨骨髓干细胞,免疫细胞化学及流式细胞仪进行表面标志的检测。设对照组、诱导组、HA-1077诱导组1、HA-1077... 目的探讨HA-1077(fasudil,法舒地尔)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为表皮细胞的影响。方法采用直接贴壁法培养并扩增人胚胎股骨骨髓干细胞,免疫细胞化学及流式细胞仪进行表面标志的检测。设对照组、诱导组、HA-1077诱导组1、HA-1077诱导组2,采用免疫细胞化学及流式细胞仪对各组细胞角质蛋白表达变化进行检测,观察其对MSCs分化为表皮细胞的影响。结果采用直接贴壁法可以获得大量高纯度的人骨髓MSCs,分组培养后第2天开始出现少量细胞角质蛋白阳性表达细胞,随着时间延长,阳性率逐渐提高。7天后流式细胞仪显示单纯诱导组及HA-1077诱导组CK5/8、CK10/13、CK19阳性率均远高于诱导组(P<0.01)。结论HA-1077可能通过抑制Rho-ROCK途径的激活从而促进MSCs体外培养中角蛋白表达的显著提升,Rho-ROCK途径可能在促进MSCs分化为表皮细胞过程中起着重要调控作用。 展开更多
关键词 HA-1077 间充质干细胞 骨髓 角蛋白 表皮细胞 人骨髓间充质干细胞 表皮细胞分化 免疫细胞化学 细胞角质蛋白 流式细胞仪
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定向诱导骨髓间充质干细胞参与创面修复的研究 被引量：4
8
作者 李晓亮 刘德伍 +2 位作者 梁艳 牛希华 夏成德 《中华损伤与修复杂志（电子版）》 CAS 2010年第2期14-16,共3页
目的探讨诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为血管内皮样细胞参与创面修复的可能机制。方法选择正常成人MSCs,经密度梯度离心分离、纯化及体外培养扩增后,定向诱导分化为血管内皮样细胞作为种子细胞,以大于(1～2)×10个/cm密度种植于... 目的探讨诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为血管内皮样细胞参与创面修复的可能机制。方法选择正常成人MSCs,经密度梯度离心分离、纯化及体外培养扩增后,定向诱导分化为血管内皮样细胞作为种子细胞,以大于(1～2)×10个/cm密度种植于支架上,扫描电镜观察后,应用溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记技术标记细胞。于兔子背部制作全层皮肤缺损创面,即刻以纤维蛋白胶为载体,将已标记的血管内皮样细胞回植到供体动物创面上。术后2周切取创面组织,行BrdU和凝血因子Ⅷ(FⅧ)免疫组织化学染色。结果 BrdU阳性的MSCs多聚集在创面肉芽组织中的小血管周围,且有个别血管内皮细胞也呈现BrdU阳性。部分MSCs细胞质中亦有FⅧ表达。结论创面愈合过程中,诱导的MSCs与肉芽组织中小血管的形成密切相关。诱导的MSCs可分化为血管内皮样细胞,并参与创面修复。 展开更多
关键词 细胞分化 间质干细胞 骨髓 血管内皮细胞 创面修复
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人骨髓及脐血间充质干细胞体外大量扩增及建库的质量控制 被引量：3
9
作者 吴燕峰 包蓉 +4 位作者 张绪超 周敦华 梁舜华 方建培 黄绍良 《实用医学杂志》 CAS 2006年第1期1-3,共3页
目的:研究人骨髓和脐血间充质干细胞(MSC)的体外培养特性及建立细胞库的可行性。方法:Ficoll离心剂法分离人骨髓及脐血来源单个核细胞,进行体外培养并大量扩增,观察细胞生长特性,流式细胞术检测MSC表面分子标志物表达情况。结果:骨髓样... 目的:研究人骨髓和脐血间充质干细胞(MSC)的体外培养特性及建立细胞库的可行性。方法:Ficoll离心剂法分离人骨髓及脐血来源单个核细胞,进行体外培养并大量扩增,观察细胞生长特性,流式细胞术检测MSC表面分子标志物表达情况。结果:骨髓样本比脐血标本的MSC更易于体外短期培养扩增,骨髓样本(5×106)体外培养2周约获得MSC3×107～1.2×108,成功率达100%,而脐血样本的MSC较难培养,成功率低(12.9%),细胞数扩增有限。对冻存复苏前后的细胞进行流式细胞术检测提示MSC表面标志物CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166等均阳性表达,造血细胞标志物CD34、CD14和CD45为阴性表达,提示MSC对本室的冻存复苏程序耐受能力较好,可获得复苏后扩增培养。结论:本研究表明对成人骨髓MSC建库的条件较成熟,获得成功培养的MSC分子表型在冻存复苏前后无明显改变。而脐血来源的MSC培养条件有待改善方能提高MSC培养成功率。 展开更多
关键词 间质干细胞 骨髓 胎血 质量控制
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成人骨髓间充质干细胞向成骨细胞定向诱导分化的实验研究 被引量：3
10
作者 朱伟 孙俊英 +2 位作者 岑建龙 朱礼贤 顾联 《实用医学杂志》 CAS 2007年第18期2822-2825,共4页
目的:研究体外培养的成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在特定的条件下定向诱导分化为成骨细胞,探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:从骨髓血中提取hMSCs,在含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基中培养,以流式细胞仪检测hMSCs的表面抗原... 目的:研究体外培养的成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)在特定的条件下定向诱导分化为成骨细胞,探讨其作为骨组织工程种子细胞的可行性。方法:从骨髓血中提取hMSCs,在含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基中培养,以流式细胞仪检测hMSCs的表面抗原表达。传代后改用含地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基培养,相差显微镜观察并绘制生长曲线。免疫组化检测Ⅰ型胶原、骨钙素。NAP法碱性磷酸酶染色、von Kossa法钙结节染色。结果:hMSCs增殖活跃,CD105、CD44表达阳性,CD14、CD34和CD45阴性。诱导培养后碱性磷酸酶、钙结节、Ⅰ型胶原和骨钙素染色阳性。结论:hMSCs取材方便,易诱导分化为成骨细胞,是研究骨组织工程的理想种子细胞。 展开更多
关键词 间质干细胞 骨髓细胞 成骨细胞 分化 组织工程
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神经干细胞与BMSCs移植治疗脊髓损伤的研究进展 被引量：3
11
作者 许朝进 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期186-189,共4页
目的综述神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与BMSCs的免疫学特性及治疗脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)的新进展。方法广泛查阅近年国内外相关文献,对NSCs与BMSCs的免疫学特性、移植治疗SCI的实验研究与可能存在的问题进行分析。结... 目的综述神经干细胞(neural stem cells,NSCs)与BMSCs的免疫学特性及治疗脊髓损伤(spinal cordinjury,SCI)的新进展。方法广泛查阅近年国内外相关文献,对NSCs与BMSCs的免疫学特性、移植治疗SCI的实验研究与可能存在的问题进行分析。结果动物实验表明NSCs与BMSCs移植可促进SCI动物行为学改善,但由于两种干细胞的免疫学特性,同种异体干细胞移植后将产生免疫排斥反应。结论 NSCs与BMSCs对SCI有很好的治疗效果,但是免疫排斥问题值得考虑。 展开更多
关键词 神经干细胞 BMSCS 免疫学特性 脊髓损伤 细胞移植
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小鼠骨髓干细胞参与肾小管上皮细胞更新的实验研究 被引量：2
12
作者 李保春 郭志勇 +3 位作者 刘先峰 张懿 崔若兰 程涛 《中国中西医结合肾病杂志》 2007年第3期139-141,F0002,共4页
目的:观察骨髓来源的干细胞能否分化成肾小管上皮细胞,深化对骨髓干细胞可塑性的认识。方法:绿色荧光蛋白标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓,同种无荧光的C57BL/6小鼠经致死剂量γ射线全身均匀照射后接受骨髓移植,分别在移植后第56d、84... 目的:观察骨髓来源的干细胞能否分化成肾小管上皮细胞,深化对骨髓干细胞可塑性的认识。方法:绿色荧光蛋白标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓,同种无荧光的C57BL/6小鼠经致死剂量γ射线全身均匀照射后接受骨髓移植,分别在移植后第56d、84d处死,采用荧光组织化学、免疫组织化学等方法观察绿色荧光在骨髓移植小鼠肾脏肾小管的分布及数量,观察骨髓干细胞在无损伤的小鼠肾脏中的分化。结果:骨髓移植后56d、84d的小鼠肾小管中有少量绿色荧光蛋白阳性细胞存在,激光共聚焦显微镜进一步证实这些细胞位于肾小管,并表达肾小管上皮细胞特异性的功能蛋白megalin。结论:骨髓干细胞可能参与肾小管上皮细胞的更新。 展开更多
关键词 骨髓移植 绿色荧光蛋白 肾小管上皮细胞 骨髓干细胞 修复
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干细胞技术及其在口腔医学中的研究及应用前景 被引量：1
13
作者 卿海 廖顺尧 +2 位作者 程惊秋 李幼平 田卫东 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 2002年第4期684-687,共4页
阐述了干细胞技术相关背景及其在口腔医学领域的研究进展 ,着重介绍了牙髓干细胞 ,骨髓基质干细胞和胚胎干细胞在口腔医学中诸如修复颅面缺损 ,重建牙齿缺损以及重建腮腺等其它组织的最新研究。干细胞技术为口腔医学提供了新的选择和广... 阐述了干细胞技术相关背景及其在口腔医学领域的研究进展 ,着重介绍了牙髓干细胞 ,骨髓基质干细胞和胚胎干细胞在口腔医学中诸如修复颅面缺损 ,重建牙齿缺损以及重建腮腺等其它组织的最新研究。干细胞技术为口腔医学提供了新的选择和广泛的应用前景 。 展开更多
关键词 干细胞技术 口腔医学 牙髓干细胞 骨髓基质干细胞 胚胎干细胞 临床应用
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BDNF对大鼠骨髓源神经干细胞诱导分化的影响 被引量：1
14
作者 陈晓娟 肖宗宇 +3 位作者 潘琪 惠超杰 侯倩 才鼎 《青海医学院学报》 CAS 2015年第3期171-175,共5页
目的观察脑源性神经生长因子(Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF)对体外培养的Wistar大鼠骨髓源神经干细胞诱导分化的影响。方法运用无血清培养基成功培养Wistar大鼠骨髓源神经干细胞,并对分离获得的悬浮生长的神经细胞球,运用免... 目的观察脑源性神经生长因子(Brain Derived Neurotrophic Factor,BDNF)对体外培养的Wistar大鼠骨髓源神经干细胞诱导分化的影响。方法运用无血清培养基成功培养Wistar大鼠骨髓源神经干细胞,并对分离获得的悬浮生长的神经细胞球,运用免疫组织化学法检测CD133和Nestin表达情况。采用10%胎牛血清诱导其分化,并添加10 ng/m L BDNF,分化7 d后,采用免疫荧光细胞化学染色方法检测分化后GFAP、Map2、β-tubulin III、Galc的表达情况。结果大鼠骨髓基质细胞在无血清培养基中,呈悬浮状态生长,形成细胞球,经免疫荧光检测,细胞球表达CD133和Nestin。将细胞球转入含血清培养基分化7 d后,表达GFAP的阳性细胞占61.78%±3.54%,Map2阳性细胞占6.28%±0.80%,β-tubulin III阳性细胞占7.43%±1.09%,Galc阳性细胞占2.79%±0.62%。添加10 ng/m L BDNF后,表达GFAP的阳性细胞占62.76%±2.94%,Map2阳性细胞占14.29%±2.45%,β-tubulin III阳性细胞占13.13%±2.42%,Galc阳性细胞占2.97%±0.82%。分别经两独立样本t检测,BDNF组分化为Map2及β-tubulin III阳性细胞,显著高于血清组(P<0.05),但BDNF组分化为GFAP及Galc阳性细胞与血清组相比,无显著性差异(P>0.05)。结论 BDNF可显著提高Wistar大鼠骨髓源神经干细胞分化为神经元的比例。 展开更多
关键词 骨髓基质干细胞 神经干细胞 骨髓源神经干细胞 BDNF分化
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间充质干细胞联合骨髓细胞输注对糖尿病胰岛移植大鼠细胞因子的影响 被引量：2
15
作者 余劲明 蔡德鸿 +1 位作者 张桦 陈宏 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期295-298,共4页
目的探讨同种异基因大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)联合骨髓细胞(BMCs)输注对胰岛移植大鼠体内细胞因子水平的影响。方法制备SD大鼠DM模型,Wistar大鼠骨髓传代纯化获得MSCs。经静脉输注供体MSCs和/或BNCs后7d,糖尿病SD大鼠进行同种异体胰... 目的探讨同种异基因大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)联合骨髓细胞(BMCs)输注对胰岛移植大鼠体内细胞因子水平的影响。方法制备SD大鼠DM模型,Wistar大鼠骨髓传代纯化获得MSCs。经静脉输注供体MSCs和/或BNCs后7d,糖尿病SD大鼠进行同种异体胰岛移植,观测胰岛移植物存活时间,检测白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)、白介素-6(IL-6)及转化生长因子-β1(TGF-β1)含量。结果预输注高浓度MCSs联合BMCs能显著延长移植胰岛的生存时间,平均为30d。该组大鼠体内IL-2、IFN-γ水平降低,IL-10和TGF-β1水平升高(P<0.05)。结论高浓度同种异基因大鼠MSCs联合BMCs输入体内后,使胰岛移植大鼠血清细胞因子发生显著变化,可能是诱导胰岛移植免疫耐受的原因之一。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 骨髓细胞 细胞因子 移植免疫耐受
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小鼠骨髓细胞和脾细胞诱导形成破骨细胞潜能的比较 被引量：2
16
作者 赵玉鸣 葛立宏 A E Grigoriadis 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期49-51,共3页
目的 在体外破骨细胞分化因子（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）联合应用的情况下，比较小鼠骨髓细胞和脾细胞形成破骨细胞的能力。方法选用小鼠M-CSF依赖性非附着性骨髓细胞和脾细胞，以不同的细胞密度在舍有25ng／ml sM-CSF和... 目的 在体外破骨细胞分化因子（RANKL）和巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）联合应用的情况下，比较小鼠骨髓细胞和脾细胞形成破骨细胞的能力。方法选用小鼠M-CSF依赖性非附着性骨髓细胞和脾细胞，以不同的细胞密度在舍有25ng／ml sM-CSF和30ng／ml sRANKL的（-MEM培养液中培养5、9天后，计数形成的抗酒石酸酸性磷酸酶染色（TRAP）阳性多核细胞的数目和骨吸收面积。结果脾细胞形成的破骨样细胞与骨髓形成的细胞形态与功能均无明显差异，但所需的细胞密度为骨髓细胞的10～20倍。结论在特殊情况下，脾细胞可替代骨髓细胞进行体外破骨细胞实验．但培养条件应适当调整。 展开更多
关键词 破骨细胞分化生长因子 巨噬细胞集落刺激因子 脾细胞 骨髓细胞 破骨细胞
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不同种子细胞复合壳聚糖水凝胶构建可注射组织工程髓核的比较研究 被引量：2
17
作者 王建 刘杰 +2 位作者 田华科 李长青 周跃 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期806-810,共5页
目的比较兔髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)和BMSCs在温敏性壳聚糖水凝胶支架中的生长及细胞外基质合成,筛选用于构建可注射组织工程髓核的种子细胞。方法取3周龄新西兰乳兔,体重150～200g,雌雄不限,分离培养兔NPCs;取1月龄新西... 目的比较兔髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)和BMSCs在温敏性壳聚糖水凝胶支架中的生长及细胞外基质合成,筛选用于构建可注射组织工程髓核的种子细胞。方法取3周龄新西兰乳兔,体重150～200g,雌雄不限,分离培养兔NPCs;取1月龄新西兰白兔,体重1.0～1.5kg,雌雄不限,穿刺抽取骨髓分离培养BMSCs。以壳聚糖、β甘油磷酸钠水溶液和羟乙基纤维素溶液为原料制备壳聚糖水凝胶支架。取第2代NPCs和第3代BMSCs分别与壳聚糖水凝胶混匀,构建可注射组织工程髓核。复合培养2d,观察NPCs和BMSCs在壳聚糖水凝胶中的存活情况;复合培养1周,扫描电镜观察两种细胞在支架中的生长分布;复合培养3周,行组织学、免疫组织化学检查,并用RT-PCR检测组织工程髓核中聚集蛋白聚糖、Ⅱ型胶原mRNA的表达。结果温敏性壳聚糖水凝胶室温呈液态,37℃放置15min发生交联反应成为半固态凝胶。吖啶橙/碘化丙啶染色示壳聚糖水凝胶中多数NPCs和BMSCs存活,少数死亡,细胞存活率均>90%。扫描电镜示NPCs和BMSCs分布于网状支架中,细胞表面有分泌的细胞外基质。HE染色、番红O染色及免疫组织化学染色显示细胞具有分泌细胞外基质的功能。RT-PCR检测示NPCs在壳聚糖水凝胶支架中复合培养3周,Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA表达量分别为0.564±0.071、0.725±0.046,BMSCs复合培养物分别为0.713±0.058、0.852±0.076,两种细胞比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论温敏性壳聚糖水凝胶具有良好的细胞相容性,与NPCs比较,BMSCs复合壳聚糖水凝胶培养保持了更好的形态、增殖及细胞外基质合成功能。 展开更多
关键词 组织工程髓核 髓核细胞 BMSCS 温敏性壳聚糖水凝胶 兔
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人骨髓来源多能成体祖细胞ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02体外共培养向肝样细胞的分化 被引量：1
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作者 王海澜 高毅 +1 位作者 蒋泽生 慕宁 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第23期2294-2300,共7页
目的:探索人骨髓来源多能成体祖细胞(ZHJ-MAPCs)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性．方法:(1)间接共培养:将第4代ZHJ-MAPCs和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养．分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细... 目的:探索人骨髓来源多能成体祖细胞(ZHJ-MAPCs)在与人肝细胞系L02在体外共培养条件下诱导分化为肝细胞的可行性．方法:(1)间接共培养:将第4代ZHJ-MAPCs和人肝细胞系L02仅培养液相通行间接共培养．分别于培养第1、3、5、7天应用免疫细胞化学法鉴定ZHJ-MAPCs的ALB、AFP、CK-18、CK-19等肝细胞特征性表型表达情况,并设阳性对照和阴性对照,计数阳性细胞比率;(2)直接共培养:将CFSE荧光(绿色)标记的第4代ZHJ-MAPCs与L02(密度均为1×107／L)按照各50％比例混合行直接共培养．5 d后用SABC-Cy3免疫荧光(红色)双标后在激光共聚焦显微镜下分别观察ZHJ—MAPCs表达ALB,AFP,CK-18的情况．同样设阳性对照和阴性对照．结果:(1)间接共培养:AFP在ZHJ-MAPCs间接共培养第1天即表现为强阳性,随后表达逐渐减弱．ALB在共培养第1天有可疑阳性,第3天出现较强的阳性,第5天达到高峰．CK-18在培养第1、3天检测均为阴性,至第5天开始出现阳性,第7天表达较前增强．CK-19在各时间点均为阴性着色．(2)直接共培养:胞质内呈黄色荧光ALB和CK18的阳性细胞即向肝细胞分化的ZHJ-MAPCs在共培养5 d时出现较多,而AFP阳性表达则仅出现在极个别细胞,该结果与阳性对照细胞荧光表达类似．结论:人骨髓来源的ZHJ-MAPCs与人肝细胞系L02行间接或直接共培养均能够诱导其向成熟肝样细胞定向分化,且直接共培养有提前趋势． 展开更多
关键词 人骨髓来源多能成体祖细胞 肝细胞 直接共培养 间接共培养
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血液病患者骨髓间充质干细胞的增殖分化特点 被引量：1
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作者 冯敏 夏永辉 +3 位作者 崔雯 林永敏 杨晴英 茹永新 《天津医药》 CAS 北大核心 2009年第3期167-169,共3页
目的:研究血液病患者骨髓间充质干细胞(MSC)的体外增殖分化特点。方法:用H4434甲基纤维素半固体培养基培养168例血液病患者骨髓单个核细胞14d,分析贴壁梭形细胞形态和生长等级特点;CD29、CD44、α-SMA、α-醋酸奈酚酯酶和碱性磷酸酶组... 目的:研究血液病患者骨髓间充质干细胞(MSC)的体外增殖分化特点。方法:用H4434甲基纤维素半固体培养基培养168例血液病患者骨髓单个核细胞14d,分析贴壁梭形细胞形态和生长等级特点;CD29、CD44、α-SMA、α-醋酸奈酚酯酶和碱性磷酸酶组化染色鉴定MSC特性和分化特点。结果:所有患者贴壁细胞为梭形,核圆或椭圆形,瑞氏染色胞浆淡蓝,核为紫红色;α-醋酸奈酚酯酶染色阳性。所有患者贴壁细胞的CD29和CD44阳性率在90%～95%之间,碱性磷酸酶和α-SMA阳性率分别为25%和30%。再生障碍性贫血、急性白血病、骨髓异常增生综合征和骨髓增殖性疾病4组患者贴壁细胞生长等级不同,再生障碍性贫血组分别高于其他3组(P<0.05)。结论:血液病患者MSC非诱导体外培养广泛表达骨和肌型细胞标志;再生障碍性贫血患者MSC生长等级显著高于急性白血病、骨髓异常增生综合征和骨髓增殖性疾病。 展开更多
关键词 血液病 间质干细胞 骨髓细胞 细胞 培养的 细胞分化 细胞增殖
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C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的改良和鉴定 被引量：2
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作者 夏宇 盛瑾 +2 位作者 朱铠 过常发 王春生 《贵州医药》 CAS 2012年第9期779-782,共4页
目的建立一种体外纯化及培养扩增C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的简单有效方法。方法利用骨髓MSCs在体外培养皿中培养时具有贴壁生长的特性,采用全骨髓法分离培养C57/BL6小鼠MSCs,通过体外培养和连续传代达到纯化和扩增MSCs目的,... 目的建立一种体外纯化及培养扩增C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的简单有效方法。方法利用骨髓MSCs在体外培养皿中培养时具有贴壁生长的特性,采用全骨髓法分离培养C57/BL6小鼠MSCs,通过体外培养和连续传代达到纯化和扩增MSCs目的,并与以优化。倒置显微镜下观察细胞形态变化情况;利用四唑盐比色(MTT)法测定MSCs的生长曲线;流式细胞仪(FCM)鉴定MSCs膜抗原。结果 C57/BL6小鼠胫骨全骨髓细胞在分离后与含15%优质胎牛血清DMEM/F12培养基混合,约5～10min后即可见大量有核细胞贴壁,细胞形态为圆形,24～48h后可见贴壁细胞转变为椭圆形、多角形及短梭形,7～12d时细胞呈长梭形并达到90%单层融合。通过传代细胞进一步纯化及扩增。细胞传代后2d内处于潜伏期,3d后进入生长期,5d后进入平台期。第4代MSCs进行FCM检测CD45、CD44、CD29和CD54阳性率分别为2.4%、83.2%、95.1%和94.1%。激光免疫共聚焦结果显示造血细胞表面标物CD34和CD45阴性,而CD44和CD105阳性。结论 C57/BL6小鼠全骨髓贴壁法能有效得到分离纯化的MSCs,用此方法培养的C57/BL6小鼠MSCs生长稳定,增殖能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性,可以为组织工程提供理想的种子细胞。 展开更多
关键词 间充质干细胞 骨 髓 贴壁法分离培养
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