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基于AO/PI荧光染色原理的杀伤细胞数量及活率检测方法学验证和细胞培养、冻存、复苏稳定性研究
1
作者 储王龙 朱丽萍 +5 位作者 张芬 钟振忠 柯晖 梁晓 曾秀萍 刘沐芸 《药物评价研究》 CAS 2023年第2期377-383,共7页
目的验证基于吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)数量及活率的可行性,并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测,建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周... 目的验证基于吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色原理的自动细胞分析仪检测细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)数量及活率的可行性,并对CIK细胞培养全过程及冻存复苏后至使用前过程进行检测,建立相应的数量及活率标准。方法采集健康供者的外周血分离、培养CIK细胞,取培养过程中的细胞使用AO/PI荧光染色法、应用自动细胞分析仪检测细胞数量及活率,对结果的专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围进行验证。应用建立的方法对外周血分离后的外周血单个核细胞(PBMC)、培养过程中、冻存前及复苏后的CIK细胞数量及活率进行全过程检测。结果专属性、准确度、精密度、数量线性及范围、活率线性及范围验证均符合预期要求。CIK细胞培养全过程活率均不低于80%,样本平均倍增时间为(42.26±1.17)h。冻存前的CIK细胞在加入含5%DMSO的冷冻保护剂后90 min内活率稳定,复苏后未经稀释或洗涤处理120 min内活率稳定,复苏后经洗涤去除DMSO处理后12 h内活率稳定。结论基于AO/PI荧光染色原理的自动细胞分析仪可以用于检测CIK细胞的数量及活率,其结果可以用于细胞放行评价及稳定性研究。 展开更多
关键词 细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK) AO/PI荧光 自动细胞分析仪 细胞数量 活率 验证 稳定性
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畜禽粪便堆肥作为功能微生物载体的研究 被引量：11
2
作者 李敏清 袁英英 +3 位作者 区伟佳 李华兴 欧阳净化 凌龙 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1007-1013,共7页
以堆肥作为3株功能芽胞细菌液体菌剂的载体,通过优化载体含水量、温度和接种浓度等关键影响因子,以不同时间载体中有效活菌数的变化为指标,探讨堆肥代替草炭作为功能微生物载体的可行性和最适条件。研究结果表明,载体C(鸡粪)、P(猪粪)、... 以堆肥作为3株功能芽胞细菌液体菌剂的载体,通过优化载体含水量、温度和接种浓度等关键影响因子,以不同时间载体中有效活菌数的变化为指标,探讨堆肥代替草炭作为功能微生物载体的可行性和最适条件。研究结果表明,载体C(鸡粪)、P(猪粪)、M(1∶1鸡粪猪粪)和TP(猪粪+草炭)在72 h内的有效活菌数均显著低于草炭;混合载体TC2(50%草炭+50%鸡粪)和TM1(25%草炭+75%1∶1鸡粪猪粪)的有效活菌数随着时间的延长而增加,其中72 h时TC2的有效活菌数达到11.40×109 cfu.g-1,TM1的有效活菌数达到2.64×109 cfu.g-1,均与草炭无显著差异,因此适宜代替草炭作为功能微生物的载体。采用单因素实验,载体TC2和TM1的最优化影响因子为含水量30%、吸附温度30℃、菌液接种浓度为108cfu.mL-1。 展开更多
关键词 载体 堆肥 功能微生物 有效活菌数
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替代抗生素枯草芽孢杆菌菌剂固态发酵工艺优化 被引量：11
3
作者 徐速 孙立斌 +2 位作者 赵清霞 李相昕 于殿宇 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期132-139,共8页
为了提高北方粮油副产物的附加值,利用1株能抑制致病菌的枯草芽孢杆菌YSJB-30固态发酵制备益生菌剂。以秸秆、稻谷壳、豆粕为原料,结合原料价格成本,以活菌数为考察指标,确定最佳原料配比。用Plackett-Burman设计对影响发酵的8个因素进... 为了提高北方粮油副产物的附加值,利用1株能抑制致病菌的枯草芽孢杆菌YSJB-30固态发酵制备益生菌剂。以秸秆、稻谷壳、豆粕为原料,结合原料价格成本,以活菌数为考察指标,确定最佳原料配比。用Plackett-Burman设计对影响发酵的8个因素进行效应评价,用最陡爬坡法选取逼近最佳响应面区域,通过响应面分析法确定最优发酵工艺参数。结果:PB设计筛选出3个具有显著效应的因素:初始p H值、发酵温度和加水量。优化培养条件:初始p H 7.0,发酵温度36℃,加水量70%,K2HPO41.2%,Mg SO40.06%,玉米浆0.75%,葡萄糖1.5%,(NH4)2SO40.15%,发酵时间36 h,在此条件下枯草芽孢杆菌活菌数量达5.35×109 CFU/g。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抑制致病菌 PLACKETT-BURMAN设计 活菌数
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直接使用型酸奶发酵剂的研制 被引量：33
4
作者 刘宇峰 王金英 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 1995年第6期274-279,共6页
我们将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌培养在以１．０％碳酸钙作为缓冲剂的１２％脱脂乳中，使菌体浓度最高可达５．６９×１０９个／ｍｌ，在超速冷冻高心机中，从７０００ｒｐｍ，３５ｍｉｎ，４℃使菌体得到浓缩。浓缩的菌体以添加... 我们将保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌培养在以１．０％碳酸钙作为缓冲剂的１２％脱脂乳中，使菌体浓度最高可达５．６９×１０９个／ｍｌ，在超速冷冻高心机中，从７０００ｒｐｍ，３５ｍｉｎ，４℃使菌体得到浓缩。浓缩的菌体以添加适当保护剂的１０％脱脂乳制成菌悬浮液，经真空冷冻干燥机干燥后得到每克含活菌数为４．２×１０１０个的高活力酸乳发酵剂。本发酵剂可直接用于制备酸奶，还制备生产发酵制。 展开更多
关键词 乳酸菌 酸奶 发酵剂 活菌数 存活率
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基于人工神经网络的诊断模型对针吸细胞学诊断小细胞型乳腺癌的应用研究 被引量：5
5
作者 龚平 郭华雄 +3 位作者 王文清 王杏红 李春燕 赵廷宽 《中国体视学与图像分析》 2008年第2期98-101,共4页
目的探讨人工神经网络(ANN)诊断模型对小细胞型乳腺癌的针吸细胞学诊断价值。方法利用MPIAS-2000系统对60例乳腺癌及30例乳腺良性病变针吸细胞的29项形态定量参数进行定量分析,建立人工神经网络诊断模型,对19例小细胞型乳腺癌进行人工... 目的探讨人工神经网络(ANN)诊断模型对小细胞型乳腺癌的针吸细胞学诊断价值。方法利用MPIAS-2000系统对60例乳腺癌及30例乳腺良性病变针吸细胞的29项形态定量参数进行定量分析,建立人工神经网络诊断模型,对19例小细胞型乳腺癌进行人工神经网络诊断模型的判别分析。结果人工神经网络诊断模型对小细胞乳腺癌及良性病变的诊断特异性为100%,敏感性为84.2%。结论利用乳腺癌针吸细胞形态定量的人工神经网络诊断模型,对辅助针吸细胞学诊断小细胞型乳腺癌具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 针吸细胞学 细胞形态定量参数 人工神经网络 诊断模型 小细胞型乳腺癌
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经相同肝实质细胞体积分摊的血清HBsAg水平与肝组织病理进展相关而与HBeAg状态无关 被引量：5
6
作者 谭雷 吴涛 +4 位作者 吕艳 王韦力 任杰 郑荣琴 吴泽倩 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期747-753,共7页
【目的】回顾性研究HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型病毒性肝炎之间,血清HBsAg的水平以及经相同肝实质细胞体积(肝细胞数量)分摊计算后血清HBsAg水平的异同。【方法】选取中山大学附属第三医院168例因病情需要而进行了肝穿刺活检及HBsAg... 【目的】回顾性研究HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型病毒性肝炎之间,血清HBsAg的水平以及经相同肝实质细胞体积(肝细胞数量)分摊计算后血清HBsAg水平的异同。【方法】选取中山大学附属第三医院168例因病情需要而进行了肝穿刺活检及HBsAg定量检测的慢乙肝患者为研究对象。比较其HBeAg阳性与HBeAg阴性之间的血清HBsAg水平,以及经相同肝实质细胞体积(肝细胞数量)分摊计算后的血清HBsAg水平。【结果】血清HBsAg水平在HBeAg阳性和HBeAg阴性慢乙肝患者之间的差异有统计学意义(P=0.028);而经相同肝实质细胞体积(肝细胞数量)分摊计算后的血清HBsAg水平,在HBeAg阳性和HBeAg阴性慢乙肝之间的差异无统计学意义(P=0.073)。无论HBeAg阳性或HBeAg阴性,其血清HBsAg水平的高低与肝组织炎症程度无相关性(HBeAg阳性:rs=0.020,P=0.876;HBeAg阴性:rs=0.037,P=0.711);与肝纤维化进展无相关性(HBeAg阳性:rs=0.087,P=0.488;HBeAg阴性:rs=0.144,P=0.148)。而经相同肝实质细胞体积(肝细胞数量)分摊计算后的血清HBsAg水平与肝组织炎症程度呈正相关(HBeAg阳性:rs=0.309,P=0.012;HBeAg阴性:rs=0.389,P<0.001);与肝纤维化进展呈正相关性(HBeAg阳性:rs=0.490,P<0.001;HBeAg阴性:rs=0.599,P<0.001)。【结论】经相同肝实质细胞体积(肝细胞数量)分摊计算后的血清HBsAg,而非血清HBsAg水平,在HBeAg阳性或HBeAg阴性慢乙肝之间无差异;且均与肝组织炎症分级和纤维化分期程度呈正相关。 展开更多
关键词 血清HBSAG 肝实质细胞体积(肝细胞数量) 肝组织炎症分级 肝纤维化分期
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乳腺癌针吸细胞形态定量的人工神经网络诊断模型的建立及应用研究 被引量：5
7
作者 龚平 郭华雄 +1 位作者 王文清 李春燕 《中国体视学与图像分析》 2007年第3期198-201,共4页
目的建立乳腺癌针吸细胞形态定量参数的人工神经网络诊断模型,并验证其在辅助FNA诊断乳腺癌的价值。方法利用MPIAS-2000系统对60例乳腺癌及30例乳腺良性病变的针吸细胞学涂片进行形态定量测定,对获得的29项形态参数进行人工神经网络建... 目的建立乳腺癌针吸细胞形态定量参数的人工神经网络诊断模型,并验证其在辅助FNA诊断乳腺癌的价值。方法利用MPIAS-2000系统对60例乳腺癌及30例乳腺良性病变的针吸细胞学涂片进行形态定量测定,对获得的29项形态参数进行人工神经网络建模分析,并用盲法对其鉴别诊断能力进行评价。结果所建立的网络模型经过14次训练后即可达到误差要求,诊断模型对乳腺癌及乳腺良性病变的诊断正确率为100%,其特异性和敏感性均为100%。结论乳腺良恶性病变的针吸细胞学涂片进行ANN分析所建立的诊断模型,对乳腺癌及良性病病变的鉴别诊断具有较高的应用价值,为辅助针吸细胞学诊断乳腺良恶性病变提供了新的思路。 展开更多
关键词 针吸细胞学 乳腺癌 细胞形态定量参数 人工神经网络 诊断模型
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