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一种多重修饰血紫蛋白纳米氧载体的构建及体外性能检测
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作者 黄志华 赵会民 +1 位作者 苏春元 杨康 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第22期4740-4747,共8页
背景:血紫蛋白分子稳定性及生物相容性优于人和哺乳动物血红蛋白,经过修饰可能成为更加安全长效的红细胞代用品。目的:制备多重修饰血紫蛋白纳米微粒,进行理化性质表征及体外性能测试。方法:以切向流超滤法分离纯化方格星虫血紫蛋白,使... 背景:血紫蛋白分子稳定性及生物相容性优于人和哺乳动物血红蛋白,经过修饰可能成为更加安全长效的红细胞代用品。目的:制备多重修饰血紫蛋白纳米微粒,进行理化性质表征及体外性能测试。方法:以切向流超滤法分离纯化方格星虫血紫蛋白,使用京尼平完成分子内交联,然后利用多巴胺完成纳米粒子封装,再用聚乙二醇完成钝化,获得多重修饰血紫蛋白纳米粒,表征该纳米粒的理化性质。将不同质量浓度(0,0.25,0.5,1.0,2.0 mg/mL)的血紫蛋白纳米粒、血紫蛋白、血红蛋白氧载体HBOC-201分别与巨噬细胞共同孵育6,24 h,与血管内皮细胞共同孵育24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率,ELISA法检测血管内皮细胞培养液中一氧化氮及血管细胞黏附因子1水平。结果与结论:(1)血紫蛋白纳米粒电镜下呈现椭球形,有致密外膜,内部质地较为均匀,粒径为(150.12±1.67) nm,分散指数为0.21±0.03,Zeta电位为(-24.54±2.61) mV,半饱和氧分压为(0.97±0.15) kPa,Hill系数为1.49±0.16。(2)孵育6 h,在≤1.0 mg/mL质量浓度范围内,血紫蛋白纳米粒组、血紫蛋白组、HBOC-201组巨噬细胞存活率均在85%以上;在2.0 mg/mL质量浓度下,仅血紫蛋白纳米粒组巨噬细胞存活率在80%以上。孵育24 h,3组巨噬细胞存活率均低于80%,其中血紫蛋白纳米粒组巨噬细胞存活率高于血紫蛋白组、HBOC-201组(P <0.05)。(3)随着药物质量浓度的增加,3组血管内皮细胞存活率降低,在1.0 mg/mL或2.0 mg/mL质量浓度下,血紫蛋白纳米粒组细胞存活率高于血紫蛋白组、HBOC-201组(P <0.05);在相同质量浓度下,血紫蛋白纳米粒组一氧化氮水平高于血紫蛋白组、HBOC-201组(P <0.05);在0.25-2.0 mg/mL质量浓度范围内,血紫蛋白纳米粒组血管细胞黏附因子1水平低于血紫蛋白组、HBOC-201组(P <0.05)。(4)结果表明,经过分子内交联和聚多巴胺/聚乙二醇修饰的血紫蛋白纳米粒在体外具有良好的携氧活 展开更多
关键词 红细胞代用品 血紫蛋白 化学修饰 细胞实验 血红蛋白氧载体
三叉苦研究进展
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作者 刘鑫颖 王昕仪 +3 位作者 刘欣茹 翁庆丰 黄黎月 郑晓辉 《中国当代医药》 CAS 2024年第24期195-198,共4页
三叉苦属芸香科吴茱萸属,性寒,味苦,归肝、肺、胃经,具有清热解毒、行气止痛、燥湿止痒功效,属清热药下分类的清热燥湿药,主治咽喉肿痛、风湿骨痛、疟疾黄疸、湿疹、皮炎、跌打损伤及虫蛇咬伤等症。研究显示,三叉苦含有生物碱、香豆素... 三叉苦属芸香科吴茱萸属,性寒,味苦,归肝、肺、胃经,具有清热解毒、行气止痛、燥湿止痒功效,属清热药下分类的清热燥湿药,主治咽喉肿痛、风湿骨痛、疟疾黄疸、湿疹、皮炎、跌打损伤及虫蛇咬伤等症。研究显示,三叉苦含有生物碱、香豆素、黄酮、寡糖、喹啉和色烯类等多种化学成分,但不同季节、产地采摘的不同部位三叉苦采用不同提取方式或炮制方法,其化学成分与含量存在显著差异,药理作用也不尽相同。近代药理学研究显示三叉苦具有抑菌抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保肝及调节血脂血糖代谢等明显药用价值。本文从其化学成分与含量及影响因素、细胞和动物模型水平研究显示的药理作用综述国内外对三叉苦的研究,拟为其后续进一步研究和临床应用提供参考。 展开更多
关键词 三叉苦 成分 药理作用 细胞实验 动物模型
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基于网络药理学研究葛根汤治疗偏头痛的作用机制及实验验证
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作者 沈浩 王瑞明 《浙江中医杂志》 2024年第2期95-99,共5页
目的:基于网络药理学探究葛根汤治疗偏头痛的作用机制,并通过细胞实验验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台检索葛根汤的化学物质及药物靶点,通过Genecard数据库检索偏头痛的疾病靶点。将二者靶点取交集得到葛根汤治疗偏头痛... 目的:基于网络药理学探究葛根汤治疗偏头痛的作用机制,并通过细胞实验验证。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台检索葛根汤的化学物质及药物靶点,通过Genecard数据库检索偏头痛的疾病靶点。将二者靶点取交集得到葛根汤治疗偏头痛的潜在靶点。构建有效化合物-作用靶点-疾病网络、蛋白质相互作用(PPI)网络。进行GO功能及KEGG通路富集分析。采用BV-2小胶质细胞进行细胞实验,分为空白对照组(control),模型组[脂多糖(LPS)组],葛根汤高(800μg·mL^(-1))、低剂量组(400μg·mL^(-1))。结果:筛选得到葛根汤治疗偏头痛的潜在有效成分共122个,潜在靶点144个,其中槲皮素、木犀草素、山奈酚等可能是关键成分,STAT3、JUN、IL6等可能是关键靶点。氧化应激反应、DNA信号转录传导、受体结合、细胞因子活性等是葛根汤治疗偏头痛的可能生物学途径。高级糖基化终末产物-受体(AGE-RAGE)、脂质与动脉粥样硬化、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-17(IL-17)等信号通路是葛根汤治疗偏头痛的可能信号通路。Western Blot结果表明,与空白对照组比较,模型组IL-6、STAT3、p-STAT3蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,葛根汤高、低剂量组均可以显著降低IL-6、STAT3、p-STAT3蛋白的表达(P<0.05)。结论:葛根汤中的槲皮素、木犀草素、山奈酚等可能通过作用于STAT3、IL-6等靶点调控脂质与动脉粥样硬化通路,从而起到治疗偏头痛的作用。 展开更多
关键词 网络药理学 葛根汤 偏头痛 细胞实验 炎症
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基于网络药理学和细胞实验验证黄芪抗肝癌的作用机制 被引量:2
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作者 庄耀隆 姚霏 +2 位作者 侯文跃 张露蓉 宋卿 《世界中医药》 CAS 2023年第23期3311-3316,共6页
目的:从细胞实验和网络药理学探讨黄芪对肝癌的作用机制。方法:通过国家知识基础设施数据库(CNKI)、PubMed、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索黄芪和肝癌的相关基因靶点及... 目的:从细胞实验和网络药理学探讨黄芪对肝癌的作用机制。方法:通过国家知识基础设施数据库(CNKI)、PubMed、中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、GeneCards数据库、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索黄芪和肝癌的相关基因靶点及活性成分。通过STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)和黄芪-肝癌作用网络。以DAVID数据库进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,并以CB-DOCK平台进行分子对接。细胞实验采用MTT法和蛋白质印迹法检测细胞增殖和蛋白表达。结果:筛选出黄芪19个有效成分,250个靶点。GO和KEGG富集分析得549个条目,145条信号通路,主要涉及调节DNA的转录,对细胞增殖和凋亡的调控等。作用通路主要涉及肿瘤相关的通路,如癌症通路、脂质和动脉粥样硬化、卡波西肉瘤、PI3K-AKT信号通路等。分子对接结果显示黄芪抗肝癌核心成分芒柄花黄素,毛蕊异黄酮,黄芪甲苷与PI3K-AKT信号通路蛋白有较好的结合力。网络药理学分析结果基础上,进一步细胞实验证实黄芪水提液能有效抑制HepG2细胞增殖,下调AKT1、PI3K p110,p-AKT1的蛋白表达水平。结论:黄芪能抑制PI3K-AKT信号通路,发挥对肝癌细胞的抑制作用,为其应用于肝癌临床治疗提供理论支持。 展开更多
关键词 黄芪 抗肝癌机制 PI3K-AKT信号通路 网络药理学 细胞实验 靶点 拓扑分析 分子对接
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整合网络药理学和体外实验探究夏枯草-半枝莲药对治疗乳腺癌的作用及机制
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作者 刘苏 陈洪晓 +3 位作者 金乐 张慧慧 张蕾 陈昭琳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第7期1134-1142,共9页
目的采用网络药理学和体外细胞实验探究夏枯草-半枝莲药对抗乳腺癌的作用机制。方法运用中药系统药理学数据库与分析平台筛选出夏枯草-半枝莲药对的有效成分和靶点;利用GeneCards、OMIM数据库找到乳腺癌靶点,进而构建药物-活性成分-关... 目的采用网络药理学和体外细胞实验探究夏枯草-半枝莲药对抗乳腺癌的作用机制。方法运用中药系统药理学数据库与分析平台筛选出夏枯草-半枝莲药对的有效成分和靶点;利用GeneCards、OMIM数据库找到乳腺癌靶点,进而构建药物-活性成分-关键靶点网络和蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络;运用R语言进行GO功能和KEGG通路富集分析以及生存分析;将筛选出的活性成分和核心靶点进行分子对接验证;采用CCK-8法检测细胞活力;EdU、流式实验检测细胞增殖和凋亡情况;Western blot法检测p-AKT1、AKT1、β-catenin和c-MYC的蛋白表达水平。结果通过数据分析共筛选出有效成分36个,交集靶点105个,其核心成分是槲皮素、木犀草素、山奈酚、汉黄芩素、黄芩素;通过PPI和生存分析得出其关键靶点是AKT1、ESR1、CASP3、MYC;GO分析共包含4303条富集结果,KEGG分析共包含232条通路;分子对接显示核心成分与关键靶点均具有较强的结合能力。细胞实验证明,核心活性成分槲皮素可以抑制乳腺癌细胞的增殖并促进其凋亡(P<0.05),下调p-AKT1、β-catenin和c-MYC蛋白的表达水平(P<0.05)。结论夏枯草-半枝莲药对中活性成分槲皮素可能通过AKT1/β-catenin信号通路来发挥作用,为其治疗乳腺癌的作用机制研究提供了科学参考。 展开更多
关键词 网络药理学 夏枯草 半枝莲 分子对接 细胞实验 作用机制
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DNAJC2对肝细胞癌细胞生物学功能影响的初步研究
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作者 徐子云 范玉纯 +4 位作者 韦万硕 张朝升 张林莉 吴桐 蒋利和 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第8期1375-1381,共7页
目的:探究DNAJC2在肝细胞癌中的作用,以及对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。方法:基于生物信息学分析DNAJC2在肝癌中的表达和预后作用,使用TCGA数据库对DNAJC2的正、负相关基因进行KEGG富集分析,GDSC数据库分析DNAJC2表达... 目的:探究DNAJC2在肝细胞癌中的作用,以及对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡能力的影响。方法:基于生物信息学分析DNAJC2在肝癌中的表达和预后作用,使用TCGA数据库对DNAJC2的正、负相关基因进行KEGG富集分析,GDSC数据库分析DNAJC2表达量不同时药物敏感性的差异。CCK-8和集落形成实验、Transwell和划痕实验、Hoechst和JC-1实验检测敲低DNAJC2对肝癌MHCC97H细胞增殖能力、细胞迁移和侵袭能力、细胞凋亡能力的影响。结果:DNAJC2在肝癌中高表达并与患者的预后显著相关。DNAJC2的正相关基因与主要富集于核质转运、泛素介导的蛋白质降解等通路,负相关基因与补体和凝血级联反应有关。DNAJC2高表达组对索拉菲尼和舒尼替尼更敏感。细胞实验表明,敲低DNAJC2可抑制肝癌细胞MHCC97H的增殖、迁移及侵袭,并促进其凋亡。结论:DNAJC2在肝癌中高表达并具有良好的预后价值,且高水平DNAJC2对索拉菲尼敏感;在肝癌中可能与核质转运、泛素介导的蛋白质降解、补体和凝血级联反应等信号通路相关;敲低DNAJC2能抑制肝癌细胞恶性行为。 展开更多
关键词 肝癌 DNAJC2 生物信息学分析 细胞实验
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花粉治疗前列腺增生及有效组分研究进展 被引量:4
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作者 陈璇 童晔玲 +3 位作者 杨锋 戴关海 任泽明 王波波 《中国蜂业》 2013年第Z1期29-31,共3页
前列腺增生(BPH)是世界范围内严重影响中老年男性生活质量的主要问题之一。体内实验证据表明花粉及其提取物对实验性动物BPH有显著性抑制作用,体外实验证明花粉及其提取物可抑制前列腺病变细胞的生长。科研人员对花粉中治疗BPH的有效组... 前列腺增生(BPH)是世界范围内严重影响中老年男性生活质量的主要问题之一。体内实验证据表明花粉及其提取物对实验性动物BPH有显著性抑制作用,体外实验证明花粉及其提取物可抑制前列腺病变细胞的生长。科研人员对花粉中治疗BPH的有效组分进行了不断的挖掘。本文对这些研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 花粉 前列腺增生 动物实验 细胞实验 有效组分
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基于生物信息学、分子对接与细胞实验探究C5orf46高表达在胃癌中的意义及潜在的中药干预 被引量:1
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作者 周映伽 刘佳铭 +7 位作者 刘滨 王梓霞 范芯瑜 黄沛桢 黄雨欣 孙敬宁 陈奇祺 沈红梅 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2368-2378,共11页
该研究旨在探究C5orf46在胃癌中的表达、预后和临床意义,研究C5orf46的潜在有效成分与中药的相互作用。运用ggplot2包对胃癌组织和正常邻近组织中的C5orf46进行差异表达分析;运用survival包进行生存分析、单因素及多因素回归分析,运用No... 该研究旨在探究C5orf46在胃癌中的表达、预后和临床意义,研究C5orf46的潜在有效成分与中药的相互作用。运用ggplot2包对胃癌组织和正常邻近组织中的C5orf46进行差异表达分析;运用survival包进行生存分析、单因素及多因素回归分析,运用Nomogram分析评估C5orf46在胃癌中的表达和总体生存率的关系;最后利用GSVA包对肿瘤浸润淋巴细胞丰度进行计算。Coremine数据库、TCMSP数据库与PubChem数据库用于查找C5orf46基因对应的潜在成分与中药成分,分子对接用于探讨潜在成分与C5orf46基因的结合强度,并利用细胞实验探究空白组、模型组、不同浓度给药组细胞C5orf46基因的相对表达情况。对比正常组织,胃癌组织中C5orf46的表达较高,在早期(T2期、N0期、M0期)有更显著的预测效应;肿瘤原发灶-区域淋巴结-远处转移(tumor-node-metastasis,TNM)分期越晚,C5orf46表达越高,胃癌患者生存概率越低;C5orf46的表达与胃癌中的辅助性T细胞1、巨噬细胞的浸润水平呈正相关趋势,与B细胞、中央记忆型T细胞、辅助性T细胞17、滤泡辅助性T细胞呈显著负相关趋势。C5orf46的对应潜在成分有7个,经过筛选得到3个有效成分,对应中药成分5个,分别为黑豆、大枣、瓜蒌、水飞蓟、天竺黄。分子对接显示唾液酸、单磷酸腺苷(adenosine monophosphate,AMP)与C5orf46结合情况较牢固。RTqPCR和Western blot结果显示,不同浓度AMP给药组C5orf46 mRNA和蛋白的表达水平均显著低于模型组,且浓度为40μmol·L^(-1)时表达水平最低。研究结果能为临床上治疗胃癌以及其他癌症的中药复方研发提供思路。 展开更多
关键词 胃癌 C5orf46 单磷酸腺苷 细胞实验 生物信息学 分子对接
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基于网络药理学及体外实验验证探讨黄连素治疗非酒精性脂肪性肝炎的作用机制 被引量:1
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作者 黄燕萍 伍月兰 +1 位作者 孙明瑜 张琴 《上海中医药杂志》 CSCD 2023年第5期12-19,共8页
目的借助网络药理学、分子对接技术及体外细胞实验探讨黄连素治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的潜在作用机制,为临床用药提供理论依据。方法借助中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)获取黄连素的吸收、分布、代谢和排泄(ADME)特征性信... 目的借助网络药理学、分子对接技术及体外细胞实验探讨黄连素治疗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的潜在作用机制,为临床用药提供理论依据。方法借助中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)获取黄连素的吸收、分布、代谢和排泄(ADME)特征性信息,采用毒物基因组学数据库(CTD)、人类基因综合数据库(GeneCards)筛选黄连素靶点基因及NASH相关基因,并借助Bioinformatics工具获得基因交集;采用Cytoscape v3.6.1软件构建“黄连素-目标基因-通路”网络,进行基因互作网络分析、功能富集分析,以确定黄连素治疗NASH的关键基因。使用webina分子对接技术评估黄连素与关键基因靶点的结合能力。取对数生长期的小鼠正常肝细胞(AML12),分为空白组、模型组和黄连素各剂量组,各组给予相应干预,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测验证相关作用靶点。结果黄连素治疗NASH的关键基因有白介素-10(IL-10)、前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2)、血红素加氧酶1(HMOX1)、CC趋化因子配体2(CCL2)、重组人白介素8(CXCL8)、Toll样受体4(TLR4)、JUN原癌基因(JUN)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-6(IL-6)等,分子对接结果表明黄连素与TLR4、CCL2、MMP9、CXCL8蛋白具有良好的结合性能。体外细胞实验结果表明,与空白组比较,模型组PTGS2、CCL2和TLR4 mRNA表达升高(P<0.01);与模型组比较,黄连素各剂量组PTGS2、CCL2和TLR4 mRNA表达降低(P<0.01),呈现剂量依赖趋势。结论黄连素可以靶向调控NASH发生发展过程中的关键分子构成的网络,进而发挥系统药理作用。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝炎 黄连素 网络药理学 分子对接 细胞实验 中药
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基于网络药理学和细胞实验探究复方散热颗粒治疗流行性感冒的作用机制 被引量:1
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作者 王雪萌 苏文灵 +4 位作者 王玥 宋端慧 郑瑞芳 胡旭 邢建国 《新疆医科大学学报》 CAS 2023年第5期679-688,共10页
目的 采用网络药理学及体外细胞实验探究预测复方散热颗粒治疗流行性感冒的作用机制。方法 通过TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction等平台以及相关文献获取复方散热颗粒活性成分及对应靶点。基于DrugBank、OMIM、GeneCards数据库... 目的 采用网络药理学及体外细胞实验探究预测复方散热颗粒治疗流行性感冒的作用机制。方法 通过TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction等平台以及相关文献获取复方散热颗粒活性成分及对应靶点。基于DrugBank、OMIM、GeneCards数据库获取流行性感冒相关靶点。利用Venny 2.1.0绘制复方成分靶点和流感靶点的韦恩图,采用STRING数据库构建蛋白相互作用网络,利用Cytoscape 3.9.0软件构建复方药材-化学成分-靶点网络,通过R语言对复方-疾病共同靶点进行GO及KEGG富集分析,采用AutoDock对关键成分与核心靶点进行分子对接。通过酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白免疫印迹(WB)检测流感病毒感染MDCK细胞炎性因子水平及PI3K/AKT通路相关蛋白的表达。结果 经筛选得到活性成分224个,包括槲皮素、山柰酚、木犀草素等;其作用于流感治疗的靶点共145个,包括STAT3、CASP3等。GO和KEGG富集分析显示,复方散热颗粒主要通过甲型流感通路、Toll样受体信号通路等发挥治疗流感的作用。分子对接结果显示其主要化学成分与核心靶点具有良好的结合能力。复方散热颗粒能够降低流感病毒感染细胞炎性因子的释放以及p-PI3K、p-AKT1、MMP9蛋白的表达水平。结论 复方散热颗粒可通过多成分、多靶点发挥治疗流感的作用,而PI3K/AKT信号通路是其发挥作用的主要机制。 展开更多
关键词 复方散热颗粒 流行性感冒 网络药理学 分子对接 体外实验
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基于网络药理学和实验验证探讨石榴皮对非酒精性脂肪性肝炎的作用机制 被引量:1
11
作者 孙懿 黄鑫宇 +3 位作者 屈雅琴 郑国华 田先翔 邱振鹏 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第17期2384-2392,共9页
目的基于网络药理学和细胞实验验证的方法探讨石榴皮改善非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)作用机制。方法利用中药系统药理学数据库(TCMSP)进行条件检索,获取石榴皮的活性成分及其对应的作用靶点。利用人类基因... 目的基于网络药理学和细胞实验验证的方法探讨石榴皮改善非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)作用机制。方法利用中药系统药理学数据库(TCMSP)进行条件检索,获取石榴皮的活性成分及其对应的作用靶点。利用人类基因数据库(GeneCards)等5个数据库获取NASH相关的靶点。将获得的石榴皮和NASH靶点进行筛选,通过韦恩图得到共同靶点。使用蛋白相互作用数据库(STRING)构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,并用Cytoscape 3.7.1建立“石榴皮-成分-靶点-NASH”网络。利用Metascape软件进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析。最后借助人肝癌细胞HepG2观察石榴皮中主要活性成分对NASH的影响。结果石榴皮活性成分有7个,获得靶点基因191个,NASH靶点1818个,两者交集靶点98个,拓扑学分析显示,石榴皮治疗NASH的核心成分为槲皮素、山奈酚和木犀草素,核心靶点为蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)、白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等。KEGG通路分析结果显示石榴皮治疗NASH主要涉及磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/Akt、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)等信号通路。体外细胞试验结果显示,与对照组相比,模型组磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-Akt^(Thr308),p-Akt^(Thr308))、IL-6等蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组相比,石榴皮活性成分可显著降低p-AktThr308、IL-6等蛋白的表达水平(P<0.05),也能够降低IL-6、TNF-α基因的mRNA表达水平(P<0.05)。结论石榴皮可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗NASH的作用,其机制可能与石榴皮中活性成分槲皮素、山奈酚和木犀草素影响Akt1等核心靶点及调控PI3K/Akt、NF-κB等信号通路,进而抑制相关炎症因子表达有关。 展开更多
关键词 石榴皮 网络药理学 非酒精性脂肪性肝炎 细胞实验 分子机制
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人参皂苷Rg3调控LncRNA CDKN2B-AS1对胃癌细胞抑制作用的研究 被引量:5
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作者 楼亭 胡学谦 +1 位作者 张婷素 袁春樱 《新中医》 CAS 2020年第17期1-4,共4页
目的:探讨人参皂苷Rg3调控长链非编码RNA(LncRNA)CDKN2B-AS1对胃癌细胞的抑制作用。方法:选用胃癌细胞系SGC-7901,在培养液中加入人参皂苷Rg3的胃癌细胞确定为研究组,同时未加药物培养的胃癌细胞为对照组。培养72 h后用RT-PCR法检测细胞... 目的:探讨人参皂苷Rg3调控长链非编码RNA(LncRNA)CDKN2B-AS1对胃癌细胞的抑制作用。方法:选用胃癌细胞系SGC-7901,在培养液中加入人参皂苷Rg3的胃癌细胞确定为研究组,同时未加药物培养的胃癌细胞为对照组。培养72 h后用RT-PCR法检测细胞中LncRNA CDKN2B-AS1、神经钙粘蛋白(N-cadherin)、上皮钙粘蛋白(E-cadherin)、血管内皮生长因子(VEGF)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA表达水平;用免疫印迹法检测细胞中细胞外调节蛋白激酶1/2 (ERK1/2)、磷酸化激活的ERK1/2 (p-ERK1/2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平;用MTT试剂盒检测2组细胞的增殖抑制率;用CCK-8试剂盒检测2组细胞增殖水平。结果:与对照组比较,研究组细胞LncRNA CDKN2B-AS1、VEGF、N-cadherin、Bcl-2 mRNA及ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-9表达降低(P<0.05);Bax及E-cadherin m RNA表达升高(P<0.05);细胞增长抑制率升高(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05)。结论:在胃癌细胞的培养过程中加入人参皂苷Rg3能够有效抑制癌细胞的增殖与上皮间充质转化(EMT),为进一步临床试验提供可靠的理论基础。 展开更多
关键词 胃癌 人参皂苷RG3 LncRNA CDKN2B-AS1 抑制作用 细胞实验
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正源方抗肝纤维化的网络药理学预测分析及实验验证
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作者 庞夏云 任美 +4 位作者 苏洁 周瑞 刘妍如 宋忠兴 唐志书 《中国现代中药》 CAS 2023年第10期2135-2146,共12页
目的:基于网络药理学、分子对接技术预测正源方抗肝纤维化的作用机制,并进行细胞水平实验验证。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及文献检索获得正源方活性成分,通过PubChem、SwissTargetPrediction、Similarity Ensembl... 目的:基于网络药理学、分子对接技术预测正源方抗肝纤维化的作用机制,并进行细胞水平实验验证。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及文献检索获得正源方活性成分,通过PubChem、SwissTargetPrediction、Similarity Ensemble Approach数据库筛选活性成分潜在靶点,通过OMIM、GeneCards疾病数据库收集肝纤维化的相关靶点,运用Venny平台获得正源方与肝纤维化交集靶点,利用String数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点,利用String数据库进行基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-通路网络,使用AutoDock Vina软件模拟关键候选活性成分与核心基因的结合活性。建立人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞LX2活化模型,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法(WB)检测磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:网络药理学筛选得到正源方活性成分145个及相关靶点1109个,肝纤维化靶点1573个,正源方抗肝纤维化潜在作用靶点415个,拓扑分析得关键靶点61个;PPI网络分析核心靶点为Akt1、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素-1β(IL-1β)等,GO富集分析得到1753个条目,其功能主要与细胞凋亡、细胞增殖、酶结合等有关;KEGG富集分析得到174个条目,主要涉及癌症通路、PI3K-Akt通路、细胞凋亡通路等;分子对接显示,槲皮素、木犀草素、熊果酸等与Akt1、VEGFA、Jun原癌基因(JUN)等靶点结合活性较强;细胞实验结果表明,不同剂量的正源方给药后,可以显著抑制TGF-β1诱导的LX2细胞的活化,降低磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)/Akt蛋白表达,且具有质量浓度依赖性。结论:正源方可能通过多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制� 展开更多
关键词 正源方 肝纤维化 网络药理学 分子对接 细胞实验 磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路
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特应性皮炎免疫浸润相关miR-155靶基因的筛选及验证
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作者 王晓晨 陈露 +3 位作者 刘畅 陈晓青 李芃 邱文洪 《山东医药》 CAS 2023年第21期15-19,共5页
目的筛选与特应性皮炎(AD)免疫浸润相关的miR-155靶基因,并进行细胞实验验证。方法从GEO数据库获取AD基因表达谱数据集GSE121212和GSE157194,筛选出AD皮损区差异表达基因,并进行GO功能富集分析、KEGG通路富集分析,构建蛋白互作网络(PPI... 目的筛选与特应性皮炎(AD)免疫浸润相关的miR-155靶基因,并进行细胞实验验证。方法从GEO数据库获取AD基因表达谱数据集GSE121212和GSE157194,筛选出AD皮损区差异表达基因,并进行GO功能富集分析、KEGG通路富集分析,构建蛋白互作网络(PPI)。基于CIBERSORT算法,分析AD患者免疫细胞浸润情况。利用miRNet网站预测miR-155靶基因,并筛选与AD免疫浸润相关的miR-155靶基因。将人永生化角质形成细胞株HaCaT细胞分为control组和TI组,TI组细胞加入TNF-α和IFN-γ构建炎症模型,control组常规培养,采用qRT-PCR法检测TI组、control组细胞中miR-155。取TI组HaCaT细胞分成TI+miR-155 mimics组、TI+mimics NC组,TI+miR-155 mimics组转染miR-155过表达质粒miR-155 mimics,TI+mimics NC组转染过表达对照质粒mimics NC,采用qRT-PCR法检测TI+miR-155 mimics组、TI+mimics NC组细胞中CXCL1、CXCL8 mRNA。结果筛选得到519个AD皮损区差异表达基因。GO功能富集分析结果显示,差异表达基因主要参与免疫系统过程、免疫反应、对外部刺激的反应、防御反应、免疫系统的调节等生物过程,KEGG通路富集分析结果显示,通路主要富集在细胞因子—细胞因子受体相互作用、病毒蛋白与细胞因子及细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路、IL-17信号通路等炎症相关信号通路。成功构建出由67个节点、146条边组成的PPI网络图。树突状细胞、M2巨噬细胞和肥大细胞在表皮免疫微环境中占比最高,免疫浸润最明显。与AD免疫浸润相关性比较高的miR-155靶基因为CXCL1、CXCL8。TI组细胞中miR-155相对表达量高于control组(P<0.05),TI+miR-155 mimics组细胞中CXCL1、CXCL8 mRNA相对表达量高于TI+mimics NC组(P均<0.05)。结论筛选获得的与AD免疫浸润相关的miR-155靶基因是CXCL1、CXCL8基因。高表达miR-155可提高炎症时HaCaT细胞中CXCL1、CXCL8基因的表达水平。 展开更多
关键词 特应性皮炎 MIR-155 免疫浸润 CXCL1基因 CXCL8基因 生物信息学分析 细胞实验
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基于网络药理学及体外实验探讨芪灵扶正清解颗粒抗肝癌的作用
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作者 陈丽丽 王奕锦 +2 位作者 林春凤 沈双宏 杜建 《世界中西医结合杂志》 2023年第7期1360-1365,共6页
目的通过网络药理学和细胞实验探讨芪灵扶正清解颗粒(简称芪灵)对肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法中药系统药理学数据库与分析平台、成分靶点预测平台、蛋白质百科全书数据库收集整理芪灵扶正清解颗粒6味药材活性成分及靶点,在GeneCards... 目的通过网络药理学和细胞实验探讨芪灵扶正清解颗粒(简称芪灵)对肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法中药系统药理学数据库与分析平台、成分靶点预测平台、蛋白质百科全书数据库收集整理芪灵扶正清解颗粒6味药材活性成分及靶点,在GeneCards平台获取肝癌病变靶点,采用STRING 11.0软件制作蛋白网络互作图,采用omicshare数据库进行基因本体联合(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,体外细胞实验验证相关信号通路。结果筛选获得芪灵扶正清解颗粒34个活性成分及相应238个靶蛋白。GO富集结果提示芪灵扶正清解颗粒干预细胞死亡调控及含氧化合物反应等生物学过程;参与酶结合、蛋白激酶结合等分子功能的调节。KEGG通路富集提示芪灵扶正清解颗粒可能通过作用于细胞自噬、AMPK信号通路、P53信号通路、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路调节细胞程序性死亡;体外细胞实验结果表明芪灵扶正清解颗粒可抑制AKT、p-PI3K蛋白表达量,促进LC3、AMPK、Casepase3、P53、ULK1、PI3K蛋白表达量,RTqPCR结果显示芪灵扶正清颗粒能促进LC3、ULK1、AMPK、P53 mRNA表达,抑制PI3K、AKT mRNA表达。结论芪灵扶正清解颗粒可能通过调节P53、AMPK、PI3K-AKT信号通路促进肝癌细胞自噬和凋亡,发挥抗肝癌作用。 展开更多
关键词 网络药理学 芪灵扶正清解颗粒 肝癌 细胞实验
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胶原蛋白肽抗皮肤自然老化作用机制与临床研究进展
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作者 刘璐 尹翠元 +1 位作者 胡红忠 何琳琳 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期455-458,共4页
近年来胶原蛋白肽(CP)成为延缓皮肤自然老化的研究热点。动物实验证明,CP可通过促进胶原蛋白合成、抑制胶原蛋白降解和提高抗氧化酶活性修复自然老化皮肤。细胞实验证明,CP可通过刺激核因子κB信号通路和转化生长因子β/Smad信号通路促... 近年来胶原蛋白肽(CP)成为延缓皮肤自然老化的研究热点。动物实验证明,CP可通过促进胶原蛋白合成、抑制胶原蛋白降解和提高抗氧化酶活性修复自然老化皮肤。细胞实验证明,CP可通过刺激核因子κB信号通路和转化生长因子β/Smad信号通路促进成纤维细胞增殖和胶原蛋白、弹性蛋白合成。临床研究表明,长期口服补充CP或CP联合其他具有抗氧化活性物质可改善皮肤含水量并降低皮肤经皮水分散失,改善皮肤皱纹和弹性,还可改善皮肤胶原纤维结构、真皮和表皮质量及面部皮肤的整体状况。本文对皮肤自然老化机制和近年来CP修复自然老化皮肤的作用机制研究进行综述,以期为临床进一步研究并应用CP修复自然老化皮肤提供理论依据。 展开更多
关键词 皮肤衰老 动物实验 细胞实验 胶原蛋白肽 皮肤自然老化 临床研究
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PLGA与PLGA-PEG复合纳米粒的初筛及长循环研究 被引量:2
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作者 汪家鼎 吴青思 +2 位作者 冯佳星 傅强 张凌 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2022年第2期134-137,共4页
目的初步筛选最优聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)与PLGA-聚乙二醇(PEG)复合纳米粒(PEG/PLGA)的配方,探究PLGA-PEG的修饰对PLGA纳米粒体液循环的影响。方法考察不同配方制剂纳米粒的粒径与电位的差别;通过体外细胞实验,筛选出拥有最优长循... 目的初步筛选最优聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)与PLGA-聚乙二醇(PEG)复合纳米粒(PEG/PLGA)的配方,探究PLGA-PEG的修饰对PLGA纳米粒体液循环的影响。方法考察不同配方制剂纳米粒的粒径与电位的差别;通过体外细胞实验,筛选出拥有最优长循环潜力的制剂处方;通过动物活体成像系统,分析PEG修饰对PLGA纳米粒体内循环的影响。结果成功制备了PEG/PLGA复合纳米粒,随着PEG修饰程度的增加,纳米粒表面电荷逐渐趋于电中性,且PLGA-PEG的使用对PLGA纳米粒载药能力无影响;大量的PEG修饰能够显著降低细胞对PLGA纳米粒的摄取;PEG的修饰能够有效减缓PLGA纳米粒在血液中的清除速度,促进其体内长循环。结论PLGA-PEG的修饰能够明显降低细胞对PLGA纳米粒的摄取效率,并延长纳米粒在体内的循环时间。 展开更多
关键词 聚乳酸-羟基乙酸共聚物 聚乳酸-羟基乙酸共聚物-聚乙二醇 复合纳米粒 摄取 长循环 细胞实验 动物活体成像系统
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基于网络药理学及细胞验证探讨肉桂油的抗肿瘤作用研究 被引量:1
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作者 蒋且英 杨慧 +2 位作者 徐希强 黄小英 梁新丽 《江西中医药大学学报》 2022年第4期78-85,共8页
目的:利用网络药理学挖掘肉桂油抗肿瘤主要活性成分的作用靶点,探讨其多成分、多靶点、多通路的作用机制,并通过细胞实验验证肉桂油对肿瘤细胞的抑制作用。方法:通过查阅近年文献,确定肉桂油中的化学成分,利用Uniprot数据库进行校正与转... 目的:利用网络药理学挖掘肉桂油抗肿瘤主要活性成分的作用靶点,探讨其多成分、多靶点、多通路的作用机制,并通过细胞实验验证肉桂油对肿瘤细胞的抑制作用。方法:通过查阅近年文献,确定肉桂油中的化学成分,利用Uniprot数据库进行校正与转化,并根据Swiss ADME数据库,结合胃肠道吸收和类药性参数,筛选肉桂油的活性成分;通过Swiss Target Prediction数据库,获得潜在作用靶点;比对Genecards数据库筛选并整合得肉桂油抗肿瘤的潜在靶点;通过DAVID v6.8数据库进行GO富集和KEGG通路注释分析;采用Cytoscape 3.8.1软件构建“活性成分-靶点”网络图、“核心成分-核心靶点-核心通路”网络图;通过细胞实验法验证肉桂油的抗肿瘤活性。结果:经筛选后得到肉桂油22个活性成分,56个潜在靶点,其中20条重要信号通路关联49个核心靶点,通过拓扑参数分析筛选得到6个核心成分,即异丁酸苯乙酯、乙酸肉桂酯、反式橙花叔醇、肉桂醛二乙缩醛、1-苯基-1,2-丙二酮、乙酸桂酯可能是肉桂油抗肿瘤的主要活性成分,可能作用于ACHE、AR、CHRM2、GRM5、NR3C1、SLC6A4、MAPK8、PARP1、JAK2等关键靶点,而PI3K-Akt信号通路、癌症的途径、神经活性配体-受体相互作用通路、NOD样受体信号通路、趋化因子信号通路、癌症中的蛋白多糖可能是重要的通路,肉桂油对MDA-MB-231、MCF-7、A549、Hep G24种肿瘤细胞存在抑制作用,对MDA-MB-231细胞的抑制作用较强,且存在时间依赖性和浓度依赖性。结论:肉桂油中异丁酸苯乙酯、乙酸肉桂酯、反式橙花叔醇、肉桂醛二乙缩醛、1-苯基-1,2-丙二酮、乙酸桂酯可能是发挥抗肿瘤作用的关键成分,通过抑制肿瘤细胞增殖和分化、诱导肿瘤细胞凋亡,调节糖代谢、激素水平等发挥多成分-多靶点-多通路的抗肿瘤作用机制。 展开更多
关键词 肉桂油 网络药理学 抗肿瘤 细胞实验
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细胞实验系统评价/Meta分析检索策略制定和报告现状调查 被引量:1
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作者 赵霏 赵璐璐 +10 位作者 闫琼 张艳 边天月 侯皓中 邝心颖 耿劲松 王欢 唐晓宇 彭冀晔 马彬 《中国循证心血管医学杂志》 2019年第8期914-918,共5页
目的全面分析细胞实验系统评价/Meta分析(SRs/MAs)检索策略的制定和报告现状,为后续相关研究的开展提供参考依据。方法计算机检索PubMed、CNKI和Wanfang Data,检索时限均为建库截至2017年10月。结果最终纳入细胞实验SRs/MAs共82篇,其中... 目的全面分析细胞实验系统评价/Meta分析(SRs/MAs)检索策略的制定和报告现状,为后续相关研究的开展提供参考依据。方法计算机检索PubMed、CNKI和Wanfang Data,检索时限均为建库截至2017年10月。结果最终纳入细胞实验SRs/MAs共82篇,其中英文79篇,中文3篇。64.63%(53/82)的研究报告了文献筛选流程图,6.10%(5/82)报告了检索人员的资质,45.13%(37/82)报告了至少一个完整的检索策略。有18.29%(15/82)的细胞实验SRs/MAs仅检索了1个数据库,检索5个以上数据库的研究仅9.76%(8/82)。此外,有53.66%(44/82)和8.54%(7/82)的研究中分别进行了其他方法的补充检索和灰色文献检索。在检索方式上,以DI(疾病+干预措施)的方式最为常见。结论目前已发表的细胞实验SRs/MAs在检索策略制定和报告方面均存在一定局限性,并无共识标准或规范的方法。因此,今后的研究有必要:①在数据库的选择上,除检索PubMed、EMBASE外,应对Web of Science、Scoups等数据库也进行检索。此外,对于灰色文献的收集,包括会议资料等阴性结果或未发表研究的收集需要更加关注;②在细胞实验SRs/MAs检索词的选择方面,除涉及的细胞及其干预措施外,涉及到测量指标的检索词亦是重要的参考依据;③研发细胞实验SRs/MAs的报告规范,以提高其报告质量,包括提供至少一个数据库完整的检索策略、提高检索人员的资质等相关信息的报告度。 展开更多
关键词 细胞实验 系统评价 META分析 检索策略 报告 制定
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细胞实验系统评价/Meta分析研究的现状分析
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作者 胡凯燕 张维益 +6 位作者 张婷 陈静红 朱敏 孟阳 宋文娟 马彬 赵霏 《中国循证心血管医学杂志》 2019年第7期778-781,共4页
目的对国内外发表的细胞实验系统评价/Meta分析(SRs/MAs)的研究现状及存在的问题进行全面分析,为今后的研究提供参考依据。方法计算机检索PubMed,中国知网(CNKI)和万方数据资源(Wangfang Data),纳入国内外发表的细胞实验SRs/MAs研究,不... 目的对国内外发表的细胞实验系统评价/Meta分析(SRs/MAs)的研究现状及存在的问题进行全面分析,为今后的研究提供参考依据。方法计算机检索PubMed,中国知网(CNKI)和万方数据资源(Wangfang Data),纳入国内外发表的细胞实验SRs/MAs研究,不限制细胞来源,检索时限均为建库截至2017年10月。由两位研究者按纳入与排除标准筛选文献、提取资料,对纳入研究的特征进行描述性分析。结果最终纳入82篇细胞实验的SRs/MAs,其中英文79篇,中文3篇。其中14篇(17.07%,14/82)研究被引次数为零,引用频次超过10的研究有43篇(52.44%,43/82)。在方法学上,超过80%(81.71%,67/82)未对纳入研究的偏倚风险进行评估。结论目前发表的细胞实验SRs/MAs数量少,被引率低,在方法学上存在较多问题。因此,亟待在今后研发和制定细胞实验SRs/MAs的标准制作流程和报告规范以促进细胞实验SRs/MAs的方法和报告质量的提高,促进其成果的转化和利用。 展开更多
关键词 细胞实验 系统评价 META分析
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