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肿瘤坏死因子-α对体外培养的牛眼小梁细胞MMP_3,MMP_9和TIMP-2表达的影响 被引量:4
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作者 吴琼 张德秀 +1 位作者 李琛 齐翔云 《国际眼科杂志》 CAS 2006年第2期328-331,共4页
目的:观察肿瘤坏死因子-α对体外培养的牛眼小梁细胞MMP3,MMP9和TIMP-2表达的影响,探讨原发性开角型青光眼的发病机制。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,应用免疫组化方法(NSE,Ⅷ因子相关抗原染色)鉴定细胞,化学及电子透射电镜... 目的:观察肿瘤坏死因子-α对体外培养的牛眼小梁细胞MMP3,MMP9和TIMP-2表达的影响,探讨原发性开角型青光眼的发病机制。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,应用免疫组化方法(NSE,Ⅷ因子相关抗原染色)鉴定细胞,化学及电子透射电镜对细胞进行形态学及生长特性的观察;对传3代的小梁细胞分别施加含TNF-α终浓度为0,12.5,25,50μg/L的培养液,48h后行MMP3和MMP9免疫组化SP染色,结果进行计算机图像分析并进行统计学检验。分组提取细胞培养液用ELASA检测TIMP-2量的变化。结果:体外培养的牛眼小梁细胞表达MMP3及MMP9,TNF-α可增加MMP3及MMP9的表达,并且抑制TIMP-2的表达。结论:TNF-α在一定范围内可以增加MMP3及MMP9的表达(P<0.05),并抑制TIMP-2的表达(P<0.01),故TNF-α可以减少小梁细胞细胞外基质的堆积,使房水引流通畅,对激光小梁成形术的手术原理有一定的说明意义。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 肿瘤坏死因子 基质金属 蛋白酶 组织抑制物 免疫组化 酶联免疫吸附 原发性开角型青光眼 氩激光小梁成形术
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上皮状牛眼小梁细胞选择性体外培养 被引量:5
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作者 卢艳 李美玉 沈亚云 《眼科新进展》 CAS 1997年第4期209-211,共3页
目的建立上皮状牛眼小梁细胞体外培养的方法。方法用DME培养液加10%胎半血清选择性培养上皮状牛眼小梁细胞.结果(1)原代和传1、传2代牛眼小粱细胞生长不稳定,传3~7代牛眼小梁细胞生长旺盛;(2)原代细胞和传代细胞汇合前其形态... 目的建立上皮状牛眼小梁细胞体外培养的方法。方法用DME培养液加10%胎半血清选择性培养上皮状牛眼小梁细胞.结果(1)原代和传1、传2代牛眼小粱细胞生长不稳定,传3~7代牛眼小梁细胞生长旺盛;(2)原代细胞和传代细胞汇合前其形态可是多种多样,汇合后均为单层上皮状小梁细胞。结论(1)牛眼小梁组织丰富,解剖清楚,体外培养易生长;(2)选择性培养可得到单纯上皮状牛眼小梁细胞,更易与邻近组织细胞相区别。 展开更多
关键词 牛眼 细胞培养 上皮状小梁细胞 青光眼 小梁细胞
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大麻素对牛眼小梁细胞增殖、粘附和迁移的影响 被引量:5
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作者 杨晓岗 张德秀 +2 位作者 刘思伟 陈丽 孙松林 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第7期1343-1345,共3页
目的:通过研究内源性大麻素物质(anandamine,AEA),对体外培养的牛眼小梁细胞的增殖、黏附以及迁移功能的影响,探讨AEA降低眼压的机制。方法:对牛眼小梁细胞进行体外原代培养及传代培养,应用免疫组化的方法(NES,Ⅷ因子相关抗原染色)鉴定... 目的:通过研究内源性大麻素物质(anandamine,AEA),对体外培养的牛眼小梁细胞的增殖、黏附以及迁移功能的影响,探讨AEA降低眼压的机制。方法:对牛眼小梁细胞进行体外原代培养及传代培养,应用免疫组化的方法(NES,Ⅷ因子相关抗原染色)鉴定细胞,化学及透射电镜观察。对3代牛眼小梁细胞分别以含AEA10,1,0.1,0μmol/L DMEM(含100ml/L小牛血清)培养液进行干预,分别于24,2h,2h后用MTT法计数细胞,再利用计算机统计软件进行数据分析,观察其对牛眼小梁细胞的增殖、粘附及迁移功能的影响。结果:内源性大麻素,在一定浓度范围内,对体外培养的牛眼小梁细胞的增殖、粘附及迁移功能均有较为明显的抑制作用(P<0.05)。结论:由此,可以了解到AEA可能是通过影响小梁细胞的增殖、粘附及迁移功能来改变房水流出途径的阻力,而降低眼内压。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 内源性大麻素 纤维连接蛋白 原发性开角型青光眼
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内源性大麻素对体外培养的牛眼小梁细胞PGE2表达及细胞骨架的影响 被引量:3
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作者 陈丽 张德秀 +3 位作者 刘明 杨晓岗 孙松林 张俊霞 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第1期60-63,共4页
目的:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10μmol/... 目的:研究内源性大麻素N-花生四氢酸氨基乙醇(anan-damide,AEA)对体外培养的牛眼小梁细胞细胞骨架及PGE2表达的影响。方法:对牛眼小梁细胞进行原代及传代培养,并行鉴定。对传3代的牛眼小梁细胞分别施加AEA浓度分别为0,0.1,1.0,10μmol/L的无血清培养液,作用24h后提取细胞上清液,并将细胞置于倒置显微镜下摄像,计算机图像分析系统计算细胞面积。用ELISA法检测PGE2浓度的变化。结果:AEA可以产生明显的细胞舒张效应,呈浓度依赖性。而且在一定范围内可以成剂量依赖性的促进PGE2的表达。与对照组均有显著性差异(P<0.05)。结论:AEA可引起小梁细胞的舒张和促进PGE2的释放。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 N-花生四氢酸氨基乙醇 细胞骨 前列腺素 青光眼
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IL-1α对体外培养的牛小梁网细胞MMPs及TIMPs表达的影响
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作者 李琛 张德秀 +1 位作者 齐翔云 吴琼 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期518-522,共5页
目的观察白细胞介素-1α(IL-1α)对体外培养的牛小梁网细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的影响,探讨IL-1α降低眼压的机制。方法采用酶谱分析法和反向酶谱分析法检测牛小梁网细胞MMP和TIMPs的分泌,并观察... 目的观察白细胞介素-1α(IL-1α)对体外培养的牛小梁网细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs)的影响,探讨IL-1α降低眼压的机制。方法采用酶谱分析法和反向酶谱分析法检测牛小梁网细胞MMP和TIMPs的分泌,并观察IL-1α对MMP和TIMPs分泌的调节作用。结果体外培养的牛小梁细胞分泌MMP-2、MMP-3、MMP-9和TIMP-1;IL-1α对MMP-2、MMP-3、MMP-9的分泌有促进作用,且呈时间和浓度依赖性,其中以IL-1α对MMP-3的分泌促进作用最强;IL-1α对TIMP-1的分泌也有微小的增加作用。结论IL-1α能够显著促进牛小梁网细胞分泌MMPs,打破了MMP/TIMPs的平衡,可能进一步促进小梁网细胞外基质(ECM)的分解,增强房水流动性。 展开更多
关键词 牛小梁网细胞 白细胞介素-1Α 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制剂 酶谱分析
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血管紧张素Ⅱ对体外培养的牛眼小梁细胞微管及微丝动力学影响的研究 被引量:8
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作者 刘涛 张德秀 +1 位作者 刘勇 张华 《眼科新进展》 CAS 2001年第1期24-27,共4页
目的 研究血管紧张素 (angiotensin ,Ang )对体外培养的牛眼小梁细胞骨架的动力学影响 ,探讨 Ang 对房水的调节作用及在青光眼发病机制中的意义。方法 (1)牛眼小梁细胞的体外培养 ,应用免疫组化方法 (NSE, 因子相关抗原染色 )细胞鉴... 目的 研究血管紧张素 (angiotensin ,Ang )对体外培养的牛眼小梁细胞骨架的动力学影响 ,探讨 Ang 对房水的调节作用及在青光眼发病机制中的意义。方法 (1)牛眼小梁细胞的体外培养 ,应用免疫组化方法 (NSE, 因子相关抗原染色 )细胞鉴定 ,光学及电子透射显微镜对细胞进行形态学及生长特性的观察 ;(2 )以含不同浓度 Ang -的培养液孵育小梁细胞 12~ 2 4h,(终浓度分别是 10 - 5、10 - 6、10 - 7m ol· L- 1 )。免疫组化法 (SABC)对α- sm ooth- actin、tubulin-α染色。结果以计算机图像分析系统分析 ,并统计学检验。结果 牛眼小梁细胞培养成功 ,成活率 80 %~ 10 0 % ,上皮型为主 ,Ang 产生明显的细胞收缩效应 ,actin是收缩的主要效应器。结论 体外培养牛眼小梁细胞技术是研究小梁细胞特性的重要实验技术。 Ang 可以引起小梁细胞的浓度依赖性的收缩 ,提示 Ang可能是房水排出途径的调节因子之一 。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 青光眼 细胞培养 微管 微丝动力学 ACTIN TUBULIN 血管紧张素Ⅱ
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转化生长因子β_1对体外培养的牛眼小梁细胞MMP_3和MMP_9表达的影响 被引量:5
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作者 刘菲 张德秀 +1 位作者 曹培龙 宋哲 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期428-430,共3页
目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对培养的牛眼小梁细胞基质金属蛋白酶 (MMPs)的影响 ,房水引流阻力在原发性开角型青光眼 (POAG)发病机制中的作用。方法 对牛眼小梁细胞进行体外原代及传代培养。对传三代小梁细胞分别施加含TGF β... 目的 探讨转化生长因子 β1(TGF β1)对培养的牛眼小梁细胞基质金属蛋白酶 (MMPs)的影响 ,房水引流阻力在原发性开角型青光眼 (POAG)发病机制中的作用。方法 对牛眼小梁细胞进行体外原代及传代培养。对传三代小梁细胞分别施加含TGF β1终浓度为 0、0 .5、1、5ng/ml的培养液 ,48h后行MMP3 及MMP9免疫组化SP法染色 ,结果进行计算机图像分析并行统计学检验。结果 体外培养的牛眼小梁细胞表达MMP3 及MMP9,TGF β1可抑制小梁细胞MMP3 及MMP9表达。结论 TGF β1在一定范围内抑制小梁细胞MMP3 及MMP9表达 ,造成小梁网ECM的异常堆积 ,导致房水引流阻力增高。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 体外培养 小梁细胞 基质金属蛋白酶 原发性开角型青光眼 房水引流阻力
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花生四氢酸氨基乙醇对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3和基质金属蛋白酶抑制剂-1表达的影响 被引量:2
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作者 刘明 陈丽 +3 位作者 张德秀 梁厚成 杨晓岗 黄磊 《新乡医学院学报》 CAS 2015年第2期123-126,共4页
目的观察花生四氢酸氨基乙醇(AEA)对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法对牛眼小梁网细胞进行原代及传代培养,并进行鉴定。对传3代的牛眼小梁网细胞分别施加AEA浓度为0.... 目的观察花生四氢酸氨基乙醇(AEA)对体外培养的牛眼小梁网细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)表达的影响。方法对牛眼小梁网细胞进行原代及传代培养,并进行鉴定。对传3代的牛眼小梁网细胞分别施加AEA浓度为0.0、0.1、1.0、10.0μmol·L-1的无血清培养液,作用24 h后提取细胞上清液,并制备10.0μmol·L-1作用6、12、18、24 h的细胞上清液,用酶联免疫吸附测定法检测AEA作用后细胞上清液中MMP-3及TIMP-1水平的变化。结果随着AEA浓度的增加,MMP-3及TIMP-1水平均逐渐增加,并呈剂量依赖性(P<0.05)。10.0μmol·L-1AEA作用6、12、18、24 h后的MMP-3、TIMP-1水平均高于0.0μmol·L-1组(P<0.05),且MMP-3、TIMP-1水平随着作用时间的延长逐渐增加,各时间点之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AEA可以促进MMP-3的分泌,早期AEA可以抑制TIMP-1的分泌,进一步打破MMP-3及TIMP-1的平衡,影响细胞外基质的降解,从而起到降低眼压的作用。 展开更多
关键词 牛眼小梁网细胞 花生四氢酸氨基乙醇 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶抑制剂 原发性开角型青光眼
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高糖对牛眼小梁细胞形态、增殖及凋亡的影响 被引量:1
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作者 张俊霞 张德秀 +2 位作者 刘思伟 刁鹏飞 陈丽 《国际眼科杂志》 CAS 2009年第4期663-665,共3页
目的:建立牛眼小梁细胞体外培养体系,观察高浓度葡萄糖对小梁细胞的影响,研究高糖与开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)以及糖尿病与POAG之间的关系,探讨糖尿病开角型青光眼的发病机制,从而为指导开角型青光眼的临床用药... 目的:建立牛眼小梁细胞体外培养体系,观察高浓度葡萄糖对小梁细胞的影响,研究高糖与开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)以及糖尿病与POAG之间的关系,探讨糖尿病开角型青光眼的发病机制,从而为指导开角型青光眼的临床用药提供重要依据。方法:以新鲜牛眼为材料,分离并培养小梁细胞,用光学镜、电镜观察正常小梁细胞的形态。将传至第3代的小梁细胞制作成细胞悬液、计数并接种于培养板(或培养瓶)中,待细胞贴壁后,将细胞分为两组:对照组(葡萄糖浓度为5.5mmol/L)和高糖组(葡萄糖浓度为35mmol/L),分别培养7d后收集细胞,用透射电子显微镜、MTT法、流式细胞仪(FCM)检测法,研究高糖对小梁细胞形态、增殖和凋亡的影响。结果:高糖组与对照组相比较,小梁细胞胞浆内细胞器减少,内质网、高尔基复合体、线粒体等细胞器肿胀,溶酶体及脂肪滴增多,核浆比减小,可见凋亡小体;高浓度葡萄糖对小梁细胞的增殖有明显的抑制作用,能够促进小梁细胞的凋亡,均有统计学意义(P<0.05)。结论:高糖可能通过使小梁细胞的增殖能力下降,凋亡率增加,使近管小梁网的网状结构改变,网孔变小,改变房水流出途径的阻力导致眼内压升高,可能是糖尿病患者PO-AG发病率增高的原因之一。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 高糖 细胞培养 开角型青光眼 增殖 凋亡
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缓激肽对体外培养的牛眼小梁细胞前列腺素E_2信号转导的影响
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作者 肖颖 张德秀 陆慧琴 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期605-608,共4页
目的了解在体外培养的牛眼小梁细胞(trabecular meshwork cells,TMCs)中缓激肽(bradykinin,Bk)对前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)信号的影响,探讨两种信号系统在TMCs中相互作用的方式。方法Bk、PGE2单用及联用刺激TMCs,用放射免疫的... 目的了解在体外培养的牛眼小梁细胞(trabecular meshwork cells,TMCs)中缓激肽(bradykinin,Bk)对前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)信号的影响,探讨两种信号系统在TMCs中相互作用的方式。方法Bk、PGE2单用及联用刺激TMCs,用放射免疫的方法检测细胞内环磷酸腺苷(cAMP)的生成量。结果Bk能够增强PGE2对TMCs的刺激作用;PGE2和Bk联合使用比单用PGE2能更大程度地升高TMCs内cAMP的浓度(P<0.05)。结论Bk可能是通过G蛋白藕联受体(G protein-coupled receptor,GPCR)显著增强PGE2的信号,导致细胞内cAMP的生成显著增多。 展开更多
关键词 牛眼小梁细胞 缓激肽 前列腺素E2 环磷酸腺苷 原发性开角型青光眼
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