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蓝舌病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立和比较研究 被引量:13
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作者 苗海生 李乐 +2 位作者 廖德芳 杨永钦 李华春 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期58-62,共5页
为建立一种检测成本低、操作简便的蓝舌病血清抗体监测方法,本研究通过制备群特异性的蓝舌病多克隆检测抗体和优化抗原固定技术,建立了蓝舌病多克隆抗体C-ELISA检测方法。通过对150份牛羊已知阴性血清的检测确定该检测方法的cut-off值为... 为建立一种检测成本低、操作简便的蓝舌病血清抗体监测方法,本研究通过制备群特异性的蓝舌病多克隆检测抗体和优化抗原固定技术,建立了蓝舌病多克隆抗体C-ELISA检测方法。通过对150份牛羊已知阴性血清的检测确定该检测方法的cut-off值为40%;对58份已知阳性血清样品同时进行中和实验和C-ELISA检测,检测结果经SPSS软件进行t检测统计分析,Sig.(双侧)=0.651,相关性0.912,相关性显著。对24个BTV血清型阳性血清,2份牛BVD阳性血清,2份羊口蹄疫阳性血清,2份羊痘阳性血清进行检测。结果表明,24个BTV血清型阳性血清为阳性,其他血清全部为阴性。对150份已知阴性血清和55份已知阳性血清用中和试验、美国VMRD公司试剂盒和本方法分别进行检测。结果表明,本检测方法与中和试验检测结果符合率达100%,进口试剂盒符合率为96.7%。 展开更多
关键词 蓝舌病 多克隆抗体 blue-tongue-virus (BTV) competition ELISA (C-ELISA)
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冷藏蓝舌病样品的Real-time PCR检测和病毒颗粒稳定性研究 被引量:6
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作者 苗海生 李乐 +2 位作者 朱建波 肖雷 李华春 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第6期41-44,共4页
为了探测长期冷藏对蓝舌病样品的Real-time PCR检测结果和蓝舌病病毒活性的影响,本试验对18份4℃保存了10~18年的样品进行Real-time PCR检测,并对其中10份全血样品进行蓝舌病病毒分离和免疫酶染色,结果显示所有检测样品都为Real-time ... 为了探测长期冷藏对蓝舌病样品的Real-time PCR检测结果和蓝舌病病毒活性的影响,本试验对18份4℃保存了10~18年的样品进行Real-time PCR检测,并对其中10份全血样品进行蓝舌病病毒分离和免疫酶染色,结果显示所有检测样品都为Real-time PCR阳性,从10份全血样品分离出5株蓝舌病病毒,通过免疫酶染色进一步证实为蓝舌病活病毒。研究结果提示冷藏蓝舌病病毒的活性高达18年,其稳定性超过目前现有的认识。 展开更多
关键词 蓝舌病 长期冷藏 稳定性
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蓝舌病病毒在细胞内生长特性和在抗原快速纯化中的应用
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作者 苗海生 李乐 +2 位作者 朱剑波 肖雷 李华春 《畜牧兽医杂志》 2013年第3期1-3,共3页
为了解决原来蓝舌病病毒抗原提取中,步骤繁琐效率低的特点,研究了一种高效提取蓝舌病病毒抗原的方法。进行了蓝舌病病毒在细胞内生长特性的研究,采用酶染色等方法对不同接种量、不同培养时间的细胞内病毒含量进行测定,发现可以在感染细... 为了解决原来蓝舌病病毒抗原提取中,步骤繁琐效率低的特点,研究了一种高效提取蓝舌病病毒抗原的方法。进行了蓝舌病病毒在细胞内生长特性的研究,采用酶染色等方法对不同接种量、不同培养时间的细胞内病毒含量进行测定,发现可以在感染细胞未产生病变前收获细胞,通过简单加工获得高浓度的病毒抗原。该方法快速高效,适用于蓝舌病的抗原生产,用于蓝舌病C-ELISA以及琼脂扩散实验中。该方法可推广用于其它病毒的纯化中。 展开更多
关键词 蓝舌病 抗原纯化 应用
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Effect of Viral Antigen Levels on the Serological Response and Efficiency of the Binary Ethylenimine-Inactivated Bluetongue Virus Serotype-16 Vaccine 被引量:2
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作者 Le Li Haisheng Miao +3 位作者 Defang Liao Meiling Kou Lin Gao Huachun Li 《World Journal of Vaccines》 2016年第4期47-63,共17页
Bluetongue (BT) is a serious hemorrhagic disease of ruminants caused by bluetongue virus (BTV). Inactive BTV vaccines have been successful in field trials in some areas, and inactivated vaccines are considered safer. ... Bluetongue (BT) is a serious hemorrhagic disease of ruminants caused by bluetongue virus (BTV). Inactive BTV vaccines have been successful in field trials in some areas, and inactivated vaccines are considered safer. However, information about the effect of the viral antigen level on the serological response and efficiency of the inactive BTV-16 vaccine is lacking. In the present study, the serological response and efficiency of the viral antigen concentration in the binary ethylenimine-inactivated Chinese BTV serotype-16 vaccine were investigated. The viral antigens in the viral suspension (VS) were quantified using a modified BTV AC-ELISA method. Four batches of vaccine containing 1, 5, 10, and 50 μg/ml of viral antigen were generated from the VS. Four groups of naive Chinese sheep were vaccinated with the different vaccine batches, and the serological response and vaccine efficiency were investigated before and after challenge infection. The vaccines containing 10 and 50 μg/ml of viral antigen induced significant ELISA and neutralizing antibody titers 14 days after vaccination, whereas the vaccines containing 1 and 5 μg/ml of viral antigen did not have these effects. A booster immunization at 21 days enhanced all groups’ antibody titers;however, the increased titer was related to the viral antigen level. In contrast to the serological response, the viral antigen level of the vaccines did not have a significant effect on the vaccine efficiency. With the exception of one sheep from the 5 μg/ml viral antigen group, all vaccinated sheep from the four antigen level groups showed strong resistance to infection based on their clinical symptoms, rectal temperatures and viremia. Collectively, these data suggested that viral antigen levels from 1 to 50 μg/ml had a significant effect on the serological response of the animals but a limited effect on the vaccine efficiency. The BTV-16 vaccine containing 1 μg/ml of viral antigen was sufficient to achieve high efficiency, but only the vaccines with more than 10 μg/ 展开更多
关键词 blue-tongue virus Serotype-16 Binary Ethylenimine-Inactivated Vaccine Viral Antigen Level Antibody EFFICIENCY
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Seroprevalence of Bluetongue Virus Antibody in Ruminants from Grenada
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作者 Ravindra Nath Sharma Sureni Beckford +4 位作者 Keshaw Tiwari Elodie Vinet Derek Thomas Claude de Allie Alfred Chikweto 《Open Journal of Veterinary Medicine》 2016年第6期99-103,共5页
The aim of the present study was to estimate the seroprevalence of antibodies to bluetongue virus (BTV) among domestic ruminants of Grenada. Sera samples from cattle (133), goat (314) and sheep (481) were tested using... The aim of the present study was to estimate the seroprevalence of antibodies to bluetongue virus (BTV) among domestic ruminants of Grenada. Sera samples from cattle (133), goat (314) and sheep (481) were tested using competitive Enzyme-linked immunosorbent assay (c-ELISA). Of the total of 928 samples tested, the overall BTV seroprevalence was 78.4% (95% confidence interval (CI ± 2.65). The seropositivity of ovine, caprine and bovine was found to be 71.7% (95% CI, 67.67% to 75.73%), 80.2% (95% CI, 75.79% to 84.61%) and 98.5% (95% CI, 96.43% to 100.57%), respectively. There was statistical significance in the seroprevalence of BTV among bovine, caprine and ovine (p < 0.05). It is evident from this study that blue tongue virus is endemic in Grenada. 展开更多
关键词 blue tongue virus C-ELISA SEROPREVALENCE Grenada RUMINANTS
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蓝舌病病毒内蒙古分离株的特性研究 被引量:1
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作者 程建国 刘俊 +3 位作者 解玉琴 田建 郝祯燕 韩文芳 《中国动物传染病学报》 CAS 2013年第1期23-28,共6页
蓝舌病病毒内蒙古株是继云南株、四川株之后,从隐性感染的山羊血液中分离获得的目前在中国唯一一株接近于蓝舌病毒血清17型的毒株。将他与云南毒株和美国17型毒株进行比较,发现其血清学反应群特异性完全相同;中和试验表明与云南毒株之... 蓝舌病病毒内蒙古株是继云南株、四川株之后,从隐性感染的山羊血液中分离获得的目前在中国唯一一株接近于蓝舌病毒血清17型的毒株。将他与云南毒株和美国17型毒株进行比较,发现其血清学反应群特异性完全相同;中和试验表明与云南毒株之间无交叉保护反应,与美国17型毒株有交叉保护反应,但中和不彻底;电镜下其形态与云南、美国毒株完全一致;核酸电泳分析,具有4组10基因片段,带型为3:3:3:1,第7、8、9片段不融合,与云南、美国毒株基本一致,但1、2、3组中迁移率有差异;人工接种绵羊、山羊、鸡胚,其病理变化和临床反应与云南、美国毒株比较有较大差异。 展开更多
关键词 蓝舌病毒 内蒙古毒株 特性
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地高辛标记探针检测蓝舌病病毒方法的研究
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作者 苏艳 《新疆农业大学学报》 CAS 1998年第3期219-221,共3页
采用3种不同的方法变性处理蓝舌病病毒BTV16RNA,与DIG标记的BTV16VP7基因制备的探针经斑点杂交和Northern印迹杂交。试验表明,DMSO变性处理的核酸杂交后探针的灵敏度最高。
关键词 地高辛标记探针 蓝舌病病毒 检测方法 反刍动物
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白纹伊蚊细胞系Aa-778对蓝舌病病毒的敏感性
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作者 潘李珍 樊玉珍 李根 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1992年第2期98-101,共4页
Aa-778单层细胞接种BTV-17后,于第三天出现细胞集聚,进而融合,脱落。细胞病变在第四天达高潮,第六天后,由于抗感染细胞繁殖逐渐覆盖单层空洞而恢复原样。用荧光抗体技术观察到Aa-778病变细胞中BTV-17包涵体和病毒抗原堆积物。TCID_(50)... Aa-778单层细胞接种BTV-17后,于第三天出现细胞集聚,进而融合,脱落。细胞病变在第四天达高潮,第六天后,由于抗感染细胞繁殖逐渐覆盖单层空洞而恢复原样。用荧光抗体技术观察到Aa-778病变细胞中BTV-17包涵体和病毒抗原堆积物。TCID_(50)测定,初步表明第一代细胞病毒不仅能在Aa-778细胞中繁殖传代,而且它的毒力类似于在BHK_(21)细胞中的毒力。 展开更多
关键词 细胞系 蓝舌病 病毒 白纹伊蚊
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