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柞蚕溶菌酶基因的克隆和序列分析 被引量:9
1
作者 张波 王林美 +3 位作者 叶博 赵振军 范琦 李树英 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期539-546,共8页
采用cDNA末端扩增(RACE)方法及简并引物克隆了柞蚕溶菌酶(Antheraea pernyilysozyme)基因(Gen-Bank登录号:DQ353869)。该基因cDNA序列全长675 bp,由3个外显子和2个内含子组成,其开放读码框(ORF)长420 bp,编码140个氨基酸。生物信息学分... 采用cDNA末端扩增(RACE)方法及简并引物克隆了柞蚕溶菌酶(Antheraea pernyilysozyme)基因(Gen-Bank登录号:DQ353869)。该基因cDNA序列全长675 bp,由3个外显子和2个内含子组成,其开放读码框(ORF)长420 bp,编码140个氨基酸。生物信息学分析表明,该基因编码蛋白的1-20位氨基酸为信号肽序列,21-140位氨基酸为柞蚕溶菌酶成熟蛋白(分子质量14 kD,等电点8.46)。柞蚕溶菌酶氨基酸序列中含有c型溶菌酶分子所特有的活性中心Glu32、Asp50以及8个半胱氨酸残基,与鳞翅目昆虫溶菌酶的氨基酸序列同源性较高,属非钙结合型c型溶菌酶。柞蚕溶菌酶的模拟三级结构与印度柞蚕(Antheraea mylitta)溶菌酶的三级结构十分相似。 展开更多
关键词 柞蚕溶菌酶基因 cDNA末端扩增 生物信息学分析
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杨树基因组AMT转运蛋白的生物信息学特性(英文) 被引量:6
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作者 宋志忠 杨顺瑛 +1 位作者 金曼 苏彦华 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期641-648,共8页
本研究中,通过隐马尔科夫模型(HMM)和杨树蛋白质库搜索,共找到 17 个杨树铵转运体蛋白(PtAMTs)。利用生物信息学方法,我们对杨树家族 17 条 AMT 蛋白序列的系统发生和 AMT 基因组定位进行分析,然后对其氨基酸组成成分、理化性质以及二... 本研究中,通过隐马尔科夫模型(HMM)和杨树蛋白质库搜索,共找到 17 个杨树铵转运体蛋白(PtAMTs)。利用生物信息学方法,我们对杨树家族 17 条 AMT 蛋白序列的系统发生和 AMT 基因组定位进行分析,然后对其氨基酸组成成分、理化性质以及二级结构进行预测和分析,同时还分析了杨树与拟南芥、水稻、番茄、百脉根和欧洲油菜的 AMT 基因家族之间的联系。二级结构预测结果发现不同成员间氨基酸数目、氨基酸序列间的疏水性存在一定的差异;α- 螺旋和无规则卷曲为主要二级结构组成部分。同源性比对分析表明,PtAMT 基因家族主要分为 2 个亚家族,AMT1 (11 个成员)和 AMT2 (6 个成员),基因结果分析表明 AMT2 亚家族成员不含内含子。杨树 AMT 蛋白的亚细胞定位分析表明 PtAMT 主要定位于膜结构上。电子表达图谱分析结果表明:只有 XP_002309151 和 XP_002334025 基因有对应的 EST 序列,并有相应的电子表达谱,并主要在花蕾表达。 展开更多
关键词 杨树 NH4+转运体 生物信息学分析
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柳杉毛虫JHBP家族基因鉴定及生物信息学分析
3
作者 叶淑婷 陈祯鸿 +3 位作者 赵真辉 何欢 林孝春 梁光红 《森林与环境学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期95-104,共10页
研究我国林业重要食叶害虫——柳杉毛虫保幼激素结合蛋白(JHBP),对于揭示其生长发育、化蛹、摄食、交配生殖及抗药性等生命活动具有重要意义。参照模式昆虫家蚕的41条JHBP蛋白序列,构建系统进化树,并对这些基因所编码的蛋白质二级结构... 研究我国林业重要食叶害虫——柳杉毛虫保幼激素结合蛋白(JHBP),对于揭示其生长发育、化蛹、摄食、交配生殖及抗药性等生命活动具有重要意义。参照模式昆虫家蚕的41条JHBP蛋白序列,构建系统进化树,并对这些基因所编码的蛋白质二级结构、疏水性、蛋白质序列基序和三级结构等生物学特性进行分析,利用heatmap可视化工具分析柳杉毛虫JHBP在不同发育时期的表达水平。结果表明,柳杉毛虫JHBP基因共有JHBPa、JHBPc、JHBPd 3个亚家族,分别包含6、26、15个JHBP基因;蛋白序列至少含有1个JHBP结构域,且其中Dho05G001220蛋白序列不仅含有JHBP结构域,还含有Grp allergen结构域,各蛋白序列的疏水性区域呈明显的聚集分布,亲水性区域的聚集分布则不明显;JHBP基因在柳杉毛虫的低龄和中龄幼虫、蛹和成虫中显著表达,表明JHBP明显参与调控不同虫态的发育或变态过程。研究结果可为进一步明确柳杉毛虫JHBP基因家族的生物学功能提供参考。 展开更多
关键词 柳杉毛虫 基因家族 JHBP 生物信息学分析
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小鼠Aurora-A蛋白的生物信息学分析
4
作者 杨可心 王会 李会 《中国科技纵横》 2023年第24期33-35,共3页
分析小鼠极光激酶A(Aurora-A)蛋白的性质和结构特征。利用NCBI、ExPASy和CBS网站中的各种生物信息学分析工具,对小鼠Aurora-A蛋白质的理化性质、亲疏水性、二/三级结构以及磷酸化和SUMO化位点进行分析。小鼠Aurora-A蛋白是一个不稳定的... 分析小鼠极光激酶A(Aurora-A)蛋白的性质和结构特征。利用NCBI、ExPASy和CBS网站中的各种生物信息学分析工具,对小鼠Aurora-A蛋白质的理化性质、亲疏水性、二/三级结构以及磷酸化和SUMO化位点进行分析。小鼠Aurora-A蛋白是一个不稳定的亲水性碱性蛋白质;二级结构中含有27.10%的α-螺旋、11.99%的延伸链、5.28%的β-转角和55.64%的无归卷曲;共含有43个磷酸化位点和一个保守的SUMO化序列。Aurora-A的蛋白质的性质和结构特征的分析为进一步研究其在生理和病理条件下的功能和调控机制提供实验依据。 展开更多
关键词 AURORA-A 生物信息学分析 蛋白结构
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烟粉虱溶菌酶基因的鉴定及表达分析 被引量:4
5
作者 于洁 王登杰 +1 位作者 雷仲仁 王海鸿 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第13期2534-2543,共10页
【目的】鉴定烟粉虱(Bemisia tabaci)体内的溶菌酶基因,并对其序列特征、进化关系和表达模式进行分析,探索该基因在烟粉虱应对球孢白僵菌侵染过程中的作用,为进一步解析烟粉虱先天免疫过程提供理论依据。【方法】以第2代高通量测序的结... 【目的】鉴定烟粉虱(Bemisia tabaci)体内的溶菌酶基因,并对其序列特征、进化关系和表达模式进行分析,探索该基因在烟粉虱应对球孢白僵菌侵染过程中的作用,为进一步解析烟粉虱先天免疫过程提供理论依据。【方法】以第2代高通量测序的结果为依据,比对非冗余核苷酸数据库,筛选E值<10-5的基因为烟粉虱溶菌酶基因(lysozyme gene of Bemisia tabaci,BtLyz),利用ORF Finder预测BtLyz的开放阅读框,并得到氨基酸序列;利用Pfam和SMART预测BtLyz的蛋白质结构域;利用Singl P 4.1 Server预测BtLyz序列的信号肽;利用MEGA6.0软件进行BtLyz的氨基酸多序列比对;利用MEGA6.0软件,对BtLyz与其他昆虫的31个同源蛋白序列进行系统进化分析,并利用邻接法构建系统进化树来进一步分析鉴定该基因;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析球孢白僵菌侵染烟粉虱卵、若虫、成虫后,在12、24、36、48、60 h时目标基因的时空表达模式。【结果】鉴定出烟粉虱4个溶菌酶基因,分别命名为BtLyz1、BtLyz2、BtLyz3和BtLyz4,基因序列全长分别为1 819、1 149、829和928 nt,分别编码159、160、148和160个氨基酸,且均含有信号肽。蛋白质结构分析、氨基酸序列比对和系统进化分析发现,BtLyz1和BtLyz4属于i型溶菌酶,BtLyz2和BtLyz3属于c型溶菌酶。BtLyz-1与豌豆长管蚜Ap Lyz-i1位于同一进化支上,BtLyz4与柑橘木虱DcLyz-i3和豌豆长管蚜ApLyz-i2位于同一进化支上。BtLyz2和BtLyz3与褐飞虱Nl Lyz-c1和异色瓢虫HaLyz-c3位于同一进化支上。与对照相比,卵期4个溶菌酶基因和若虫期BtLyz4的相对表达量没有显著变化;若虫期BtLyz1的相对表达量先上调再下调,而后又有所上调的波动趋势,24 h时上调表达最明显,为对照组的4.55倍;成虫期BtLyz1和BtLyz4的相对表达量均为先上调再下调,而后又有所上调的波动趋势,60 h时上调表达最明显,为对照组的11.31和4.21倍;若虫期BtLyz2和BtLyz3的相对� 展开更多
关键词 烟粉虱 溶菌酶 生物信息学分析 实时荧光定量PCR
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JARID2在人舌鳞状细胞癌中的表达 被引量:2
6
作者 张岚 刘法昱 《解剖科学进展》 2017年第6期590-592,共3页
目的探讨Jumonji富含AT结合结构域2(Jumonji AT-rich interactive domain 2,JARID2)在舌鳞状细胞癌(Tongue squamous cell carcinoma)中的表达。方法利用生物信息学软件,分析JARDI2在舌鳞状细胞癌中的表达。收集5例人舌鳞状细胞癌及癌... 目的探讨Jumonji富含AT结合结构域2(Jumonji AT-rich interactive domain 2,JARID2)在舌鳞状细胞癌(Tongue squamous cell carcinoma)中的表达。方法利用生物信息学软件,分析JARDI2在舌鳞状细胞癌中的表达。收集5例人舌鳞状细胞癌及癌旁正常组织,提取组织总蛋白进行蛋白免疫印记检测JARID2蛋白表达。Image J软件分析JARID2蛋白灰度值,利用t检验分析JARID2在舌鳞状细胞癌中的表达。结果生物信息学预测JARID2在舌鳞状细胞癌中表达增高,蛋白印记检测JARID2在5例舌鳞状细胞癌病例中表达明显高于癌旁正常组织。结论 JARID2在舌鳞状细胞癌中高表达,可能参与舌鳞状细胞癌的发病机制。 展开更多
关键词 JARID2 舌鳞状细胞癌 生物信息学分析 蛋白表达
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巨桉纤维素合酶Ces家族的生物信息学分析 被引量:1
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作者 徐双 曾炳山 +3 位作者 范春节 刘英 李湘阳 裘珍飞 《广东林业科技》 2014年第2期15-22,共8页
纤维素合酶(Cellulose synthase,Ces)基因家族成员负责催化纤维素的合成。利用Phytozome网站对巨桉(Eucalyptus grandis)全基因组序列进行检索,共发现31条蛋白质序列属于Ces家族,其中包括18个CesA亚族成员与13个CslD亚族成员。使用Clust... 纤维素合酶(Cellulose synthase,Ces)基因家族成员负责催化纤维素的合成。利用Phytozome网站对巨桉(Eucalyptus grandis)全基因组序列进行检索,共发现31条蛋白质序列属于Ces家族,其中包括18个CesA亚族成员与13个CslD亚族成员。使用ClustalW、Protparam、TMHMM等生物学在线服务器,对巨桉31个Ces家族成员进行全面生物信息学分析预测,结果显示:31条蛋白质序列均具有Cellulose synthase特征性保守结构域,具有Ces家族成员特征;巨桉Ces家族与拟南芥Ces家族、杨树Ces家族在亚族种类、成员组成、蛋白理化性质方面存在变异性;蛋白结构域、二级结构、跨膜区预测、无序性、亚细胞定位分析结果存在保守性。 展开更多
关键词 巨桉 纤维素合酶家族 生物信息学分析
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人头颈鳞癌中ceRNA网络构建及表达趋势
8
作者 张岚 刘法昱 《解剖科学进展》 2020年第2期143-145,149,共4页
目的分别比较4例HNSCC患者癌和癌旁组织的环状RNA、微小RNA和mRNA芯片表达谱,构建hsacircRNA103580/hsa-miR-9-5P/PRDM15相关的ceRNA网络,探讨其表达趋势。方法利用芯片筛选HNSCC组织中差异表达的circRNA、miRNA和mRNA基因,根据miRwalk... 目的分别比较4例HNSCC患者癌和癌旁组织的环状RNA、微小RNA和mRNA芯片表达谱,构建hsacircRNA103580/hsa-miR-9-5P/PRDM15相关的ceRNA网络,探讨其表达趋势。方法利用芯片筛选HNSCC组织中差异表达的circRNA、miRNA和mRNA基因,根据miRwalk3.0在线软件预测的结果,构建HNSCC中的circRNA/miRNA/mRNA-相关的ceRNA网络。采用qRT-PCR方法检测HNSCC组织中hsacircRNA103580/hsamiR-9-5P/PRDM15基因的表达。结果芯片技术检测4例HNSCC患者癌和癌旁组织中差异表达的circRNA、miRNA及mRNA基因,获得显著差异的环状RNAs转录本311个,microRNAs转录本52个及circRNA433个。结合以上数据,构建了一个包含48种circRNAs,21种miRNAs和79种mRNAs的ceRNA网络并验证has-circRNA103580、has-miR-9-5p与PRDM15的基因表达水平与芯片中表达趋势一致。结论hsacircRNA103580/hsa-miR-9-5P/PRDM15轴可能是HNSCC预后和治疗新的靶点。 展开更多
关键词 乳颈部鳞癌 生物信息学分析 ceRNA
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一个新的家蚕LIMonly蛋白基因的序列分析和原核表达
9
作者 吴淑春 虞淼 《生物学杂志》 CAS CSCD 2010年第6期29-32,56,共5页
LIM蛋白是一类含有LIM结构域的真核蛋白家族,它可介导细胞分化和发育,转录调控和激活、参与细胞骨架形成等多种重要的生物调节过程。从家蚕蛹cDNA文库获得一个新的编码LIM only蛋白的基因,我们将其命名为BmLIMO(BombyxmoriLIMonly prote... LIM蛋白是一类含有LIM结构域的真核蛋白家族,它可介导细胞分化和发育,转录调控和激活、参与细胞骨架形成等多种重要的生物调节过程。从家蚕蛹cDNA文库获得一个新的编码LIM only蛋白的基因,我们将其命名为BmLIMO(BombyxmoriLIMonly protein)。该基因ORF长度为561 bp,编码长度为186个氨基酸残基的蛋白质,预测分子量为21.6 kDa,等电点为9.14。对BmLIMO基因进行了生物信息学方面的分析,并用DNA重组技术将Bm-LIMO片段克隆到原核表达载体pET-28α中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了可溶性BmLIMO蛋白,这为进一步研究该蛋白功能奠定了基础。 展开更多
关键词 家蚕 LIMonly 生物信息学分析 原核表达
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高质量临床微生物基因组参考数据库构建的思考
10
作者 刘东来 吴林寰 +3 位作者 关文达 庞慧芳 胡松年 许四宏 《中国食品药品监管》 2024年第6期32-39,共8页
病原宏基因组高通量测序(mNGS)技术因其检测时间短、分辨率高,能识别罕见、新发病原体引发的感染或者混合感染等优势,已经被广泛地应用于临床疑难感染的辅助诊断。然而,由于目前尚缺乏标准化生物信息学分析流程和高质量临床微生物基因... 病原宏基因组高通量测序(mNGS)技术因其检测时间短、分辨率高,能识别罕见、新发病原体引发的感染或者混合感染等优势,已经被广泛地应用于临床疑难感染的辅助诊断。然而,由于目前尚缺乏标准化生物信息学分析流程和高质量临床微生物基因组参考数据库等问题,一定程度上制约了该技术临床应用的进一步发展。本文介绍了高质量临床微生物基因组参考数据库建设现状,探讨了高质量临床微生物基因组参考数据库构建的技术要求、质量控制过程和实现方式,并提出相关思考和建议。 展开更多
关键词 病原宏基因组高通量测序 生物信息学分析 微生物基因组参考数据库 建设现状 技术要求
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谷子MYB转录因子家族与抗旱关系的研究 被引量:6
11
作者 程璐 张彬 +4 位作者 张耀元 苏彦冰 魏东 郭展 李红英 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第12期846-849,867,共5页
[目的]MYB蛋白家族是一类含有MYB保守结构域的转录因子,广泛参与调控植物生长发育及抗逆等多种生理反应。为探究抗旱作物谷子的抗旱性与MYB转录因子家族基因关系,从而为谷子特有抗旱基因资源的发掘及谷子抗旱分子机制的研究提供参考。[... [目的]MYB蛋白家族是一类含有MYB保守结构域的转录因子,广泛参与调控植物生长发育及抗逆等多种生理反应。为探究抗旱作物谷子的抗旱性与MYB转录因子家族基因关系,从而为谷子特有抗旱基因资源的发掘及谷子抗旱分子机制的研究提供参考。[方法]本研究以抗旱品种勾勾母鸡咀(GG)和干旱敏感品种晋汾16(JF)为研究对象,在苗期PEG处理条件下,取叶片进行转录组测序,进而对有差异表达的MYB转录因子家族基因进行生物信息学分析。[结果]研究表明,26个MYB转录因子基因在GG和JF两个谷子品种中表现出较为明显的表达差异;且对应启动子区域的抗旱相关调控元件也呈现出差异的组成与分布;抗旱品种GG中明显上调的3个MYB调控基因(Si034363m、Si003539m、Si030711m)与拟南芥中主要参与抗逆的MYB转录因子存在较近亲缘关系。[结论]基于对谷子MYB转录因子的研究,推测26个表达差异的MYB类转录因子基因可作为谷子抗旱的重要候选基因,可为后续谷子抗旱分子机制的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 谷子 MYB转录因子 干旱胁迫 生物信息学分析
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病原宏基因组高通量测序生物信息学分析质量评价的研究现状与思考
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作者 刘东来 关文达 +3 位作者 吴林寰 王浩 杨子峰 许四宏 《中国食品药品监管》 2024年第5期34-41,共8页
病原宏基因组高通量测序(mNGS)技术已成为感染病原学诊断的新工具,由实验操作(湿实验)和生物信息学分析(干实验)两部分组成。干实验由算法和数据库构成,其功能是对湿实验产生的测序数据进行分析处理后输出检测结果。干实验的性能受到测... 病原宏基因组高通量测序(mNGS)技术已成为感染病原学诊断的新工具,由实验操作(湿实验)和生物信息学分析(干实验)两部分组成。干实验由算法和数据库构成,其功能是对湿实验产生的测序数据进行分析处理后输出检测结果。干实验的性能受到测序数据中复杂多变的干扰因素的影响,包括临床样本中大量的人源核酸、试剂与耗材携带的微生物核酸、采样与湿实验引入的环境微生物核酸、数据库中基因组质量不均一或不同物种基因组之间的相似性过高导致的错误比对与注释,以及算法与参数差异对分类鉴定的影响等。上述干扰因素可能来自mNGS检测各个环节,不仅可能导致干实验输出错误的物种鉴定和微生物检测结果,也给干实验的质量控制与评价带来较大挑战。本文综述了mNGS干实验质量控制的关键问题以及关于质量评价方法的思考。 展开更多
关键词 病原宏基因组高通量测序 生物信息学分析 质量评价 数字参考品
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天麻特异DNA序列的克隆及其在天麻鉴定中的应用 被引量:5
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作者 陶钧 傅铁祥 +6 位作者 罗志勇 文李 王志成 舒孝顺 刘水平 陶垚 胡维新 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期587-591,共5页
应用改进的RAPD方法测定了名贵中药材天麻基因组DNA指纹图谱;通过选择和回收各种天麻种群共有和优良种群特有的DNA片段,加以克隆、测序和生物信息学分析,证明其中5个DNA序列是未报道的,已被美国基因数据库收录,并运用高效液相色谱技术... 应用改进的RAPD方法测定了名贵中药材天麻基因组DNA指纹图谱;通过选择和回收各种天麻种群共有和优良种群特有的DNA片段,加以克隆、测序和生物信息学分析,证明其中5个DNA序列是未报道的,已被美国基因数据库收录,并运用高效液相色谱技术测定了天麻样本的有效成分天麻素含量。运用PCR技术研究了这些DNA序列在9个天麻种群中的分布及其与天麻素含量的关系。结果表明这5个DNA序列在这些天麻种群中的分布各不相同,其中DNA序列1是所研究的全部天麻种群共有、而其伪品没有的特异DNA分子标记;DNA序列2可能与天麻的天麻素含量高有关。这些DNA标记序列可用于天麻的真伪鉴别、品种鉴定和优选优育等。 展开更多
关键词 DNA分子标记 天麻 天麻素 生物信息学分析
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Bioinformatics analyses of differentially expressed genes associated with spinal cord injury:a microarray-based analysis in a mouse model 被引量:3
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作者 Lei Guo Jing Lv +2 位作者 Yun-Fei Huang Ding-Jun Hao Ji-Jun Liu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第7期1262-1270,共9页
Gene spectrum analysis has shown that gene expression and signaling pathways change dramatically after spinal cord injury,which may affect the microenvironment of the damaged site.Microarray analysis provides a new op... Gene spectrum analysis has shown that gene expression and signaling pathways change dramatically after spinal cord injury,which may affect the microenvironment of the damaged site.Microarray analysis provides a new opportunity for investigating diagnosis,treatment,and prognosis of spinal cord injury.However,differentially expressed genes are not consistent among studies,and many key genes and signaling pathways have not yet been accurately studied.GSE5296 was retrieved from the Gene Expression Omnibus DataSet.Differentially expressed genes were obtained using R/Bioconductor software(expression changed at least two-fold;P < 0.05).Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery was used for functional annotation of differentially expressed genes and Animal Transcription Factor Database for predicting potential transcription factors.The resulting transcription regulatory protein interaction network was mapped to screen representative genes and investigate their diagnostic and therapeutic value for disease.In total,this study identified 109 genes that were upregulated and 30 that were downregulated at 0.5,4,and 24 hours,and 3,7,and 28 days after spinal cord injury.The number of downregulated genes was smaller than the number of upregulated genes at each time point.Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery analysis found that many inflammation-related pathways were upregulated in injured spinal cord.Additionally,expression levels of these inflammation-related genes were maintained for at least 28 days.Moreover,399 regulation modes and 77 nodes were shown in the protein-protein interaction network of upregulated differentially expressed genes.Among the 10 upregulated differentially expressed genes with the highest degrees of distribution,six genes were transcription factors.Among these transcription factors,ATF3 showed the greatest change.ATF3 was upregulated within 30 minutes,and its expression levels remained high at28 days after spinal cord injury.These key genes screened by bioin 展开更多
关键词 nerve REGENERATION spinal cord injury differentially expressed GENES bioinformaticS analyses Database for Annotation Visualization and Integrated Discovery analysIS inflammation Kyoto Encyclopedia of GENES and Genomes pathway MICROARRAY transcription factors neural REGENERATION
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丁烯醛对动脉内皮细胞氧化损伤的蛋白组学研究与生物信息学分析
15
作者 谢明章 林飞 +10 位作者 张毅 李杰 崔小瑞 莫清江 赵峰 王立波 刘慧兵 汪磊 薄德映 焦路阳 赵国安 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期52-60,共9页
目的通过同位素标记相对与绝对定量蛋白质组学技术筛查丁烯醛导致人动脉内皮细胞损伤进程中的氧化损伤相关蛋白标记物。方法根据细胞活力损伤曲线确定导致90%细胞损伤所需的丁烯醛药物浓度(LD90)。利用蛋白质组学技术检测丁烯醛处理和... 目的通过同位素标记相对与绝对定量蛋白质组学技术筛查丁烯醛导致人动脉内皮细胞损伤进程中的氧化损伤相关蛋白标记物。方法根据细胞活力损伤曲线确定导致90%细胞损伤所需的丁烯醛药物浓度(LD90)。利用蛋白质组学技术检测丁烯醛处理和未处理过的人动脉内皮细胞的蛋白质表达情况;采用生物信息学手段分析蛋白质数据;使用平行反应监测技术进行蛋白标记物的验证;通过检测线粒体膜电位与分光光度法测谷胱甘肽活性验证目标蛋白改变对氧化损伤功能的影响。结果以倍数变化>1.5的标准(上调>1.5倍或者下调至<67%)共鉴定出153个差异表达蛋白,其中氧化损伤相关差异表达蛋白质共12种:传感蛋白(A0A2P9AJA0)、激活信号辅整合素1复合体亚基2(B1AH59)、烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶1(B1AN62)、cDNA FLJ58404(B4DRL9)、cDNA FLJ55250(B4DV58)、cDNA FLJ55007(B4DY35)、氧化酶(细胞色素1)装配蛋白样1(E7EVY0,OXA1L)、电子转移黄素蛋白α亚单位(H0YL12)、细胞色素C氧化酶亚基6A(O95101)、谷氨酸-半胱氨酸连接酶调节亚基(P48507)、细胞色素C氧化酶装配因子4(Q9NYJ1)、39S核糖体蛋白L3(P09001)。基因本体(GO)、京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析显示差异蛋白明显富集的生物过程与碳水化合物、脂肪酸等有机物的代谢有关,而代谢过程则与ATP的产生、代谢氧化产物的产生和集聚、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)的相互作用等密切相关。丁烯醛作用于人动脉内皮细胞后线粒体膜电位出现明显降低,谷胱甘肽活性出现了明显下降。蛋白网络互作结果显示,OXA1L、电子转移黄素蛋白亚单位α(ETFA)、线粒体核糖体蛋白L3(MRPL3)及谷氨酸-半胱氨酸连接酶修饰亚单位(GCLM)为4个关键的候选蛋白质。结论丁烯醛改变了人动脉内皮细胞的氧化损伤相关蛋白表达模式,表现为OXA1L、ETFA、G 展开更多
关键词 丁烯醛 动脉内皮细胞 氧化损伤相关蛋白 蛋白组学技术 生物信息分析
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谷子SnRK2家族基因的生物信息分析 被引量:4
16
作者 许冰霞 尹美强 +5 位作者 李娜 温银元 赵娟 原向阳 宋喜娥 董淑琦 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2017年第9期616-621,共6页
[目的]植物SnRK2是一类蔗糖非酵解型蛋白激酶,在信号转导和非生物胁迫及生长发育中具有非常重要的作用。[方法]本文利用生物信息学的方法从谷子基因组中分析鉴定出10个SnRK2基因,并对这些基因的染色体分布、理化性质、内含子-外显子结... [目的]植物SnRK2是一类蔗糖非酵解型蛋白激酶,在信号转导和非生物胁迫及生长发育中具有非常重要的作用。[方法]本文利用生物信息学的方法从谷子基因组中分析鉴定出10个SnRK2基因,并对这些基因的染色体分布、理化性质、内含子-外显子结构、系统进化和顺式调控元件进行了分析。[结果]谷子的SnRK2基因分布在基因组中不同的染色体上,外显子数目大多为9个。这些基因被分为3个亚组,且与拟南芥和水稻的分类一致。而且,这些基因的上游启动子序列含有多个不同的激素和非生物逆境应答顺式元件,这说明它们在逆境应答和激素信号转导中具有一定的功能。[结论]本文为进一步研究谷子SnRK2基因在非生物胁迫和激素应答中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 谷子 SnRK2 生物信息学分析
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circ RNA_0017178对戊四氮致癫痫小鼠模型的影响
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作者 毛戬 温萍萍 +3 位作者 孙洪英 张舒雅 孟晨曦 张佳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2081-2088,共8页
目的探究环状RNA(circ RNA)在癫痫发病中的可能作用机制。方法利用circRNA基因芯片检测癫痫患者与健康对照者外周静脉血中circRNA表达谱筛选出差异表达的circRNA。利用circPrimer、circMir、TargetScan对circ_0017178与癫痫进行生物信... 目的探究环状RNA(circ RNA)在癫痫发病中的可能作用机制。方法利用circRNA基因芯片检测癫痫患者与健康对照者外周静脉血中circRNA表达谱筛选出差异表达的circRNA。利用circPrimer、circMir、TargetScan对circ_0017178与癫痫进行生物信息学分析并构建相关腺病毒载体。将30只雄性成年C57BL/6小鼠随机分为对照组、空载体组、circ_0017178过表达组(10只/组),分别向3组小鼠海马内注射生理盐水、空质粒腺病毒载体、circ_0017178过表达腺病毒载体,构建戊四唑癫痫模型后观察各组小鼠的动物行为学变化,用Tunel染色法分析各组小鼠海马组织细胞凋亡情况。结果基因芯片结果表明,与对照组比较,癫痫组中circ_0069272、circ_0033065、circ_0017178、circ_0073442、circ_0033063、circ_0049415上调,circ_0083773、circ_0088262、circ_0016396下调。其中circ_0017178可能与癫痫密切相关,通过生信分析circ_0017178可能结合20个miRNA调控39个癫痫基因,并具备潜在m6A、IRES、ORF1结合位点。在动物实验中,相比空载体组及对照组,circ_0017178过表达组癫痫的潜伏期缩短(P<0.05)、发作时间延长(P<0.05)、发作次数增加(P<0.05);空载体组及对照组间无统计学意义(P>0.05)。相比空载体组及对照组,circ_0017178过表达组癫痫小鼠海马组织细胞凋亡程度明显增加(P<0.05),空载体组及对照组间无统计学意义(P>0.05)。结论Circ_0017178在癫痫患者外周血单个核细胞表达谱中升高,Circ_0017178可能充当miRNA的“分子海绵”在癫痫中发挥作用,并具备m6A甲基化和翻译蛋白质的潜能。Circ_0017178可能通过促进戊四唑癫痫小鼠的细胞凋亡增加癫痫的易感性和严重程度。 展开更多
关键词 环状RNA_0017178 癫痫 差异性表达 生物信息学分析 细胞凋亡
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柑橘采后病原菌意大利青霉PacC基因的克隆及表达分析 被引量:2
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作者 冯越 张美红 +2 位作者 李笑影 李倩如 彭丽桃 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第4期145-152,共8页
为初步分析柑橘采后病原菌意大利青霉(Penicillium italicum)pH信号传导途径中转录因子PacC的功能特性,克隆了PacC基因并对其进行生物信息学和表达模式分析。结果表明:PacC基因全长1921 bp,有1个内含子,编码蛋白质的氨基酸数量为636个,... 为初步分析柑橘采后病原菌意大利青霉(Penicillium italicum)pH信号传导途径中转录因子PacC的功能特性,克隆了PacC基因并对其进行生物信息学和表达模式分析。结果表明:PacC基因全长1921 bp,有1个内含子,编码蛋白质的氨基酸数量为636个,共包含3个转录因子典型的锌指蛋白结构域。进化树分析显示,PacC与指状青霉(Penicillium digitatum)和产黄青霉(Penicillium chrysogenum)亲缘关系较近。离体培养条件下PacC在意大利青霉生长中稳定表达;培养基pH影响意大利青霉生长与PacC表达,酸性条件下表达量显著下调(P<0.05),碱性条件下表达量显著上调(P<0.05);碳源条件影响该基因表达,葡萄糖饥饿和回补均显著提高PacC表达(P<0.05);低浓度蔗糖引起培养液pH碱化,显著刺激PacC表达(P<0.05),高浓度蔗糖引起培养液pH酸化,PacC表达逐渐下调(P<0.05)。活体结果表明,不同品种柑橘果实接种意大利青霉会导致果皮pH下降;接种初始pH影响意大利青霉的致病力,PacC在侵染柑橘果实期间表达较为稳定。这些结果表明,环境pH和碳源供应均能影响意大利青霉PacC表达,影响意大利青霉的致病性。 展开更多
关键词 柑橘 意大利青霉 PACC PH 信号通路 生物信息学分析 致病力
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滩羊FGF21基因CDS区克隆表达及生物信息学分析 被引量:3
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作者 刘玉芳 康晓龙 方美英 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2016年第13期23-28,共6页
为了探究滩羊卷曲被毛时空变化特征,本研究运用基因克隆技术对滩羊FGF21基因的编码区全长序列进行克隆测序,利用生物信息学方法进行序列分析,并对FGF21基因在滩羊不同生长时期皮肤中的表达模式进行分析。结果表明:滩羊FGF21基因的CDS区... 为了探究滩羊卷曲被毛时空变化特征,本研究运用基因克隆技术对滩羊FGF21基因的编码区全长序列进行克隆测序,利用生物信息学方法进行序列分析,并对FGF21基因在滩羊不同生长时期皮肤中的表达模式进行分析。结果表明:滩羊FGF21基因的CDS区有1个630 bp的开放阅读框,编码209个氨基酸,其编码蛋白分子量和理论等电点分别为22645.8 ku和6.08 ku,该蛋白不存在跨膜结构,为膜外蛋白,且属于亲水性蛋白;二级结构由α-螺旋、延伸、β-折叠及无规则卷曲4种结构组成;滩羊FGF21基因序列与山羊、牛等物种间同源性较高,所构建系统发生树与其物种同源性关系吻合。半定量RT-PCR分析FGF21基因在滩羊不同组织中分布发现,FGF21仅在肝脏、肺脏、胃和皮肤中表达,在皮肤中表达量低于在肝脏中的表达量,但高于在胃中的表达量;不同时期滩羊皮肤组织荧光定量PCR结果显示,FGF21基因在幼龄组(1月龄)滩羊皮肤中表达量极显著高于成年组(48月龄)表达量(P<0.01),表明FGF21基因有可能是调控滩羊皮肤被毛卷曲差异的候选基因之一。本研究将为滩羊毛发生长的生物学机制研究提供一定的参考价值。 展开更多
关键词 滩羊 FGF21基因 卷曲毛发 生物信息分析
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Differentially expressed genes identified by microarray analysis following oxymatrine treatment of hepatic stellate cell 被引量:1
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作者 Junwei Hu Shuang Dong +7 位作者 Qinqin Wang Yicheng Jian Lijuan Hu Lijing Wang Yi He Genmei Yang Jinjun Wang Wujun Xiong 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2013年第8期49-57,共9页
AIM: To investigate the effects of oxymatrine on the gene expression profile of hepatic stellate cell (HSC) and provide novel insights into the mechanism of oxymatrine against hepatic fibrosis. Methods: HSC was isolat... AIM: To investigate the effects of oxymatrine on the gene expression profile of hepatic stellate cell (HSC) and provide novel insights into the mechanism of oxymatrine against hepatic fibrosis. Methods: HSC was isolated from normal SD by in situ perfusion of collagenase and pronase and density Nycodenz gradient centrifugation. MTT colorimetry was used to study the effect of oxymatrine on the proliferation of HSC. Total RNA and mRNA of quiescent HSC, culture-activated HSC and oxymatrine treated HSC were extracted. Effect of oxymatrine on HSC gene expression profile was detected by oligonucleotide microarray analysis with Affymetrix gene chip rat U230A. Differentially expressed genes were annotated with Gene Ontology (GO) and analyzed with Kyoto encyclopedia of genes and genomes (KEGG) pathway using the Database for Annotation, Visualization and Integrated Discovery. Results: Oxymatrine could inhibit the proliferation of HSC in a dose-dependent manner. A total of 4641 differentially expressed genes were identified by cDNA chip between activated and quiescent HSC, among which 2702 genes were upregulated, and 1939 genes were down-regulated in activated HSC. cDNA microarray uncovered downregulation of 56 genes in response to oxymatrine, the representative genes including alpha 2 type I procollagen, alpha-1 type I collagen, tissue inhibitor of metalloproteinase 1, interleukin 1 beta, early growth response 1, chemokine ligand 2, chemokine ligand 1, CTGF, TGFβ1. The most enriched GO terms included response to wounding, inflammatory response, cell migration, cell motility, wound healing, TGFβ receptor signaling pathway. KEGG pathway analysis revealed that oxymatrine affected the ECM-receptor interaction, focal adhesion, cytokine-cytokine recaptor interaction, TGFβ signaling pathway, MAPK signaling pathway. There were 37 genes upregulated significantly following oxymatrine treatment. The most enriched GO terms included oxidation reduction, negative regulation of lipoprotein oxidation, regulation of lipoprotein oxidation 展开更多
关键词 OXYMATRINE HEPATIC Stellate Cell MICROARRAY bioinformaticS analyses
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