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三磷酸肌醇受体Ⅲ型DNA甲基化对硫酸铍致人胚肺成纤维细胞损伤研究 被引量:6
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作者 龚爱红 刘志宏 +3 位作者 严青 张庆峰 张志远 王光俊 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2013年第5期398-402,共5页
目的探讨三磷酸肌醇受体Ⅲ型(IP3RⅢ)DNA甲基化对硫酸铍(BeSO4)致人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)损伤的影响。方法建立离体细胞培养实验模型,以终浓度分别为1.0、10.0、100.0μmol/L的BeSO4染毒MRC-5细胞24 h(设为低、中、高剂量染毒组),... 目的探讨三磷酸肌醇受体Ⅲ型(IP3RⅢ)DNA甲基化对硫酸铍(BeSO4)致人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)损伤的影响。方法建立离体细胞培养实验模型,以终浓度分别为1.0、10.0、100.0μmol/L的BeSO4染毒MRC-5细胞24 h(设为低、中、高剂量染毒组),对照组不使用BeSO4染毒。采用巢式降落式甲基化特异性聚合酶链式反应(PCR)法检测IP3RⅢDNA甲基化的变化,实时定量PCR检测IP3RⅢmRNA的表达,激光共聚焦显微镜检测细胞钙离子浓度([Ca2+]i)。结果高剂量组IP3RⅢDNA甲基化值分别低于对照组、低剂量组和中剂量组[(0.26±0.07)vs(0.48±0.02)、(0.44±0.04)、(0.37±0.03),P<0.01,P<0.01,P<0.05];低、中、高剂量组IP3RⅢmRNA表达量均高于对照组[(0.35±0.08)、(0.31±0.05)、(0.71±0.09)vs(0.03±0.01),P<0.01],高剂量组IP3RⅢmRNA表达量分别高于低、中剂量组[(0.71±0.09)vs(0.35±0.08)、(0.31±0.05),P<0.01];高剂量组细胞内[Ca2+]i平均荧光强度高于对照组[(6 171.66±601.72)vs(3 618.33±559.26),P<0.05]。结论 IP3RⅢDNA低甲基化致细胞内IP3RⅢmRNA表达增加,[Ca2+]i增加,可能是BeSO4致MRC-5细胞损伤的重要机制之一。 展开更多
关键词 三磷酸肌醇受体 DNA甲基化 硫酸铍 人胚肺成纤维细胞
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C-myc、H-ras及p16癌基因在硫酸铍致人胚肺成纤维细胞损伤下的表达 被引量:3
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作者 安晓丹 刘志宏 +3 位作者 张志远 王光俊 朱玲勤 张勇 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2010年第4期271-273,276,共4页
目的观察原癌基因C-myc、H-ras及抑癌基因p16在硫酸铍致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤下的表达,探讨硫酸铍对离体培养HELF的影响。方法不同物质的量浓度硫酸铍(终物质的量浓度为2.0、20.0、100.0μmol/L)重复染毒HELF后,采用免疫组化SP法... 目的观察原癌基因C-myc、H-ras及抑癌基因p16在硫酸铍致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤下的表达,探讨硫酸铍对离体培养HELF的影响。方法不同物质的量浓度硫酸铍(终物质的量浓度为2.0、20.0、100.0μmol/L)重复染毒HELF后,采用免疫组化SP法和甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)技术分别检测C-myc、H-ras蛋白及p16基因的表达。结果不同物质的量浓度染毒组培养至第12、24、36天时,C-myc蛋白的表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),且具有剂量效应关系(r12=0.755,r24=0.822,r36=0.792,P<0.01);不同物质的量浓度染毒组在培养至第24、36天时H-ras蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且具有剂量效应关系(r24=0.586,r36=0.845,P<0.01)。染毒组p16基因在培养至第24、36天时,第24天2.0μmol/L染毒组表达部分甲基化条带,其他均表达甲基化条带。结论硫酸铍在引起HELF损伤的情况下,可诱发HELFC-myc和H-ras蛋白异常表达、p16基因甲基化。 展开更多
关键词 硫酸铍 人胚肺成纤维细胞(HELF) 癌基因蛋白 甲基化
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硫酸铍对人胚肺成纤维细胞的细胞毒性和遗传毒性 被引量:4
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作者 王光俊 刘志宏 +5 位作者 安晓丹 张晓宇 张勇 刘贺荣 朱玲勤 马小梅 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2009年第3期222-225,共4页
背景与目的:探讨硫酸铍对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HEL-I)的细胞毒性和遗传毒性。材料与方法:用不同浓度的硫酸铍(0.2、2.0、20.0、100.0、200.0μmol/L)作用HEL_I细胞24 h,采用MTT法测定细胞存活情况,用单细胞凝胶电泳(SCGE)和微核... 背景与目的:探讨硫酸铍对体外培养的人胚肺成纤维细胞(HEL-I)的细胞毒性和遗传毒性。材料与方法:用不同浓度的硫酸铍(0.2、2.0、20.0、100.0、200.0μmol/L)作用HEL_I细胞24 h,采用MTT法测定细胞存活情况,用单细胞凝胶电泳(SCGE)和微核实验测定硫酸铍对HEL_I细胞遗传损伤的情况。结果:随着硫酸铍浓度的增加,HEL-I细胞的存活率呈下降趋势,硫酸铍浓度为100.0μmol/L和200.0μmol/L时,存活细胞数低于空白对照组(P<0.05);在2.0~100.0μmol/L浓度范围内,硫酸铍均可诱发HEL-I细胞出现DNA损伤和微核率升高(P<0.05)。结论:硫酸铍对HEL-I细胞具有明显细胞毒性和遗传毒性。 展开更多
关键词 硫酸铍 人胚肺成纤维细胞 细胞毒性 遗传毒性 DNA损伤
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硫酸铍对小鼠体外脾淋巴细胞DNA损伤的剂量效应 被引量:5
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作者 骆蓉 刘志宏 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第9期809-811,共3页
目的:观察不同剂量硫酸铍(BeSO4)在不同时相处理后引发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤的剂量效应.方法:采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)分别测定BALB/c小鼠脾淋巴细胞体外染毒0.2,2,20,100和200μmol/L1h和2h后DNA链断裂损伤情况.结果:... 目的:观察不同剂量硫酸铍(BeSO4)在不同时相处理后引发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤的剂量效应.方法:采用单细胞凝胶电泳法(SCGE)分别测定BALB/c小鼠脾淋巴细胞体外染毒0.2,2,20,100和200μmol/L1h和2h后DNA链断裂损伤情况.结果:在不同剂量硫酸铍染毒1h后,脾淋巴细胞出现DNA链断裂损伤的测定指标在各剂量组明显高于对照;染毒1h和2h后,细胞均出现明显的DNA链断裂损伤,但其相同剂量组之间差异无显著性.结论:硫酸铍可诱发小鼠体外脾淋巴细胞的DNA链断裂损伤. 展开更多
关键词 硫酸铍 淋巴细胞 单细胞凝胶电泳 DNA链断裂损伤
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胸腺细胞分化抗原-1DNA甲基化在硫酸铍致人胚肺成纤维细胞纤维化中作用研究 被引量:5
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作者 王瑶 刘志宏 +5 位作者 魏丛慧 龚爱红 严青 张庆锋 王凯 王和静 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2016年第1期20-25,共6页
目的通过观察硫酸铍刺激人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)所致胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化改变情况,探讨Thy-1在硫酸铍致肺纤维化中的作用。方法建立离体MRC-5细胞培养实验模型,以终浓度分别为1.0、10.0和100.0μmol/L的硫酸铍染毒... 目的通过观察硫酸铍刺激人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)所致胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)DNA甲基化改变情况,探讨Thy-1在硫酸铍致肺纤维化中的作用。方法建立离体MRC-5细胞培养实验模型,以终浓度分别为1.0、10.0和100.0μmol/L的硫酸铍染毒(设为低、中、高剂量组),对照组不作染毒处理;另设甲基化转移酶抑制剂5-氮杂胞苷(AZC)干预组(予终浓度为10.0μmol/L硫酸铍和10.0μmol/L AZC处理)和组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)干预组(予终浓度为10.0μmol/L硫酸铍和0.5μmol/L TSA处理)。分别在染毒24、48和72 h后收集细胞,采用实时定量式聚合酶链式反应检测胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Thy-1的mRNA相对表达水平,巢式降落式甲基化特异性聚合酶链式反应检测Thy-1 DNA甲基化水平。结果在24 h时间点,MRC-5细胞中胶原蛋白ⅢmRNA相对表达水平呈随染毒剂量增加而增加的趋势(P<0.05);在48和72 h时间点,MRC-5细胞中胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ和α-SMA的mRNA相对表达水平均呈随染毒剂量增加而增加的趋势(P<0.05);3个剂量组MRC-5细胞上述3个指标均呈随着染毒时间的增加而增加趋势(P<0.05)。3个剂量组MRC-5细胞Thy-1 mRNA相对表达水平均低于对照组(P<0.05),高剂量组MRC-5细胞Thy-1 mRNA相对表达水平低于低剂量组(P<0.05)。中、高剂量组Thy-1 DNA甲基化水平均高于对照组(P<0.05),3个剂量组Thy-1 DNA甲基化水平呈随染毒剂量增加而增加趋势(P<0.05)。2个干预组MRC-5细胞Thy-1 DNA甲基化水平均高于对照组(P<0.05),但与中剂量组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论硫酸铍刺激可导致MRC-5细胞纤维化的发生;该过程中Thy-1 DNA甲基化程度升高,Thy-1 mRNA表达水平降低,可能是硫酸铍致肺纤维化的重要机制之一。 展开更多
关键词 硫酸铍 胸腺细胞分化抗原-1 胶原蛋白 Α-平滑肌肌动蛋白 肺纤维化 DNA甲基化 人胚肺成纤维细胞
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内源性硫化氢对硫酸铍致大鼠肺组织急性损伤影响 被引量:3
6
作者 廖永红 黄炼 +2 位作者 王淑娟 胡立丹 张朝晖 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2013年第5期403-406,410,共5页
目的探讨内源性硫化氢(H2S)对硫酸铍(BeSO4)致大鼠肺组织急性损伤的作用及可能机制。方法 48只雄性无特定病原体级SD大鼠随机分为对照组、BeSO4组、[BeSO4+硫氢化钠(NaHS)]组和[BeSO4+DL-炔丙基甘氨酸(PPG)]组,每组12只。对照组一次性... 目的探讨内源性硫化氢(H2S)对硫酸铍(BeSO4)致大鼠肺组织急性损伤的作用及可能机制。方法 48只雄性无特定病原体级SD大鼠随机分为对照组、BeSO4组、[BeSO4+硫氢化钠(NaHS)]组和[BeSO4+DL-炔丙基甘氨酸(PPG)]组,每组12只。对照组一次性给予气管内滴注0.001 ml/g体质量灭菌生理氯化钠溶液,30 min后腹腔注射灭菌生理氯化钠溶液0.010 ml/g体质量;其余3组均气管内滴注质量浓度为12 g/L的BeSO4灭菌生理生理氯化钠溶液,30 min后分别腹腔注射灭菌生理氯化钠溶液、浓度为14μmol/L NaHS灭菌生理氯化钠溶液和质量浓度为37.5 g/L PPG灭菌生理氯化钠溶液。7周后颈动脉放血处死大鼠,检测活性氧(ROS)和血浆及肺组织中H2S水平;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行炎性细胞计数;观察肺组织病理形态及超微结构变化。结果与对照组比较,BeSO4组、(BeSO4+NaHS)组和(BeSO4+PPG)组肺脏系数、ROS水平及BALF中炎性细胞数均升高(P<0.05);血浆及肺组织中H2S水平均降低(P<0.05);BeSO4组、(BeSO4+NaHS)组和(BeSO4+PPG)组肺组织均可见大量炎性细胞浸润,纤维组织及巨噬细胞增生,甚至坏死;肺组织超微结构损伤明显。结论内源性H2S对BeSO4致大鼠肺组织损伤具有保护作用,其机制可能与内源性H2S调节炎症反应,减少ROS的生成有关。 展开更多
关键词 硫酸铍 硫化氢 大鼠 肺组织损伤 支气管肺泡灌洗液
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硫酸铍诱导A549细胞纤维化中miR-21靶向调控Smad7的机制 被引量:2
7
作者 戚发秋 陈小惠 +4 位作者 刘红娅 赵枫 付有娟 关素珍 王凯 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期206-211,共6页
[背景]铍致肺纤维化发病机制未明且没有特效治疗方法,微小RNA(miRNA)在铍致肺纤维化进程中或可发挥作用。[目的]构建微小RNA-21(miR-21)干扰细胞系,探讨miR-21对硫酸铍(BeSO_(4))所致人肺腺癌肺泡基底上皮细胞(A549细胞)纤维化的影响以... [背景]铍致肺纤维化发病机制未明且没有特效治疗方法,微小RNA(miRNA)在铍致肺纤维化进程中或可发挥作用。[目的]构建微小RNA-21(miR-21)干扰细胞系,探讨miR-21对硫酸铍(BeSO_(4))所致人肺腺癌肺泡基底上皮细胞(A549细胞)纤维化的影响以及潜在的作用机制。[方法]通过在线数据库miRBase预测miR-21靶基因并通过双荧光素酶报告基因实验验证。用miR-21干扰慢病毒转染A549细胞后,用嘌呤霉素筛选出稳定细胞系。使用BeSO_(4)染毒A549细胞建立肺纤维化体外模型,BeSO_(4)浓度为10μmol·L^(-1),染毒时间为48 h。将细胞分为对照组、模型组、miR-21干扰组和miR-21干扰对照组。采用实时荧光定量PCR法检测miR-21 mRNA相对表达水平。采用蛋白免疫印迹检测TGF-β1/Smads通路相关蛋白[Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、Smad7和转化生长因子-β1(TGF-β1)]表达水平,肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)的蛋白相对表达水平。[结果]miRBase预测miR-21与Smad7有结合点位,双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-21靶基因为Smad7。miR-21干扰A549细胞系构建成功。与对照组相比,模型组miR-21mRNA相对表达量升高了97.57%,Smad7蛋白相对表达量下降了15.48%,Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ的蛋白相对表达量分别升高了13.55%、35.72%、18.35%、35.75%、25.52%、31.58%、24.61%和11.66%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。相较于干扰对照组,干扰组miR-21 mRNA相对表达水平降低28.96%,Smad7蛋白相对表达量升高了19.07%,Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3、TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ和COL-Ⅲ的蛋白相对表达量降低了8.01%、19.95%、14.56%、19.37%、11.95%、10.96%、18.81%和31.36%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。模型组与干扰对照组的各基因及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]在铍 展开更多
关键词 微小RNA-21 SMAD7 硫酸铍 肺纤维化 转化生长因子-Β1
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硫酸铍致小鼠肺线粒体通透性转换孔高通透性开放及细胞凋亡研究 被引量:3
8
作者 黄炼 王淑娟 +1 位作者 骆金俊 张朝晖 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期19-22,共4页
目的研究腹腔注射硫酸铍(Be SO4·4H2O)溶液致小鼠肺线粒体通透性转换孔(m PTP)的高通透性开放及细胞凋亡效应。方法 6周龄雄性昆明小鼠36只随机分成3组,每组12只:空白对照组、1.0 mg/kg Be SO4组和2.0 mg/kg Be SO4组,分别按0.1 ml... 目的研究腹腔注射硫酸铍(Be SO4·4H2O)溶液致小鼠肺线粒体通透性转换孔(m PTP)的高通透性开放及细胞凋亡效应。方法 6周龄雄性昆明小鼠36只随机分成3组,每组12只:空白对照组、1.0 mg/kg Be SO4组和2.0 mg/kg Be SO4组,分别按0.1 ml/10 g(体重)腹腔注射灭菌生理盐水、1.0、2.0 mg/kg Be SO4灭菌生理盐水,均隔天注射,一月后处死小鼠取肺脏:差速离心制备线粒体悬液检测线粒体活性氧(ROS)、跨膜电位(Δψm)和m PTP开放度;提取蛋白测定细胞色素C(Cyt-c)、Bax、Bcl-2的表达;电子显微镜观察肺细胞超微结构。结果与对照组比较,硫酸铍染毒组小鼠肺线粒体ROS含量、PTP开放度、细胞色素C和Bax表达均增加(P<0.05),Δψm、Bcl-2及Bcl-2/Bax比例均降低(P<0.05);染毒组小鼠肺上皮细胞绒毛消失,细胞核固缩,凋亡特征明显。结论腹腔注射硫酸铍可致小鼠肺细胞线粒体通透性转换孔高通透性开放及肺细胞凋亡。 展开更多
关键词 硫酸铍 线粒体通透性转换孔 细胞凋亡 BAX/BCL-2 细胞色素C
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硫酸铍致小鼠肝线粒体功能障碍研究 被引量:2
9
作者 张朝晖 王淑娟 +3 位作者 骆金俊 黄炼 李程 廖永红 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2012年第5期376-379,共4页
目的探讨硫酸铍(BeSO4.4H2O)对小鼠肝线粒体功能的影响。方法将36只6周龄昆明(KM)小鼠随机分为对照组、低剂量组及高剂量组3组,每组12只,雌雄各半。对照组采用灭菌生理氯化钠溶液按0.01 ml/g(体质量)隔天腹腔注射,低、高剂量组分别以1、... 目的探讨硫酸铍(BeSO4.4H2O)对小鼠肝线粒体功能的影响。方法将36只6周龄昆明(KM)小鼠随机分为对照组、低剂量组及高剂量组3组,每组12只,雌雄各半。对照组采用灭菌生理氯化钠溶液按0.01 ml/g(体质量)隔天腹腔注射,低、高剂量组分别以1、2 mg/kg BeSO4.4H2O生理氯化钠溶液隔天腹腔注射染毒,连续染毒3周。取肝脏采用差速离心法制备线粒体,采用荧光分光光度法测定其活性氧(ROS)水平及线粒体膜电位(Δψm),采用分光光度法测定细胞色素C(Cytc)水平及线粒体肿胀程度。结果与对照组比较,低、高剂量组肝脏系数增高,肝脏线粒体ROS及Cytc水平随染毒剂量的增加而升高,差异均有统计学意义(P<0.05);随染毒剂量的增加Δψm下降、线粒体肿胀明显。结论 BeSO4.4H2O可致小鼠肝线粒体功能障碍。 展开更多
关键词 硫酸铍 线粒体功能障碍 活性氧 细胞色素C 跨膜电位
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小鼠腹腔注射硫酸铍的病理形态学观察 被引量:1
10
作者 张朝晖 黄炼 +4 位作者 谭滇湘 骆金俊 李程 王淑娟 廖永红 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第5期58-61,I0008,共5页
目的研究腹腔注射硫酸铍(BeSO4.4H2O)对小鼠主要脏器的损害作用。方法将30只6周龄昆明(KM)雄性小鼠随机分为三组,分别予以不同剂量硫酸铍生理盐水溶液腹腔注射染毒,隔日一次,染毒两周。观察主要脏器的病理组织学变化并测定脏器系数。结... 目的研究腹腔注射硫酸铍(BeSO4.4H2O)对小鼠主要脏器的损害作用。方法将30只6周龄昆明(KM)雄性小鼠随机分为三组,分别予以不同剂量硫酸铍生理盐水溶液腹腔注射染毒,隔日一次,染毒两周。观察主要脏器的病理组织学变化并测定脏器系数。结果与对照组比较,染毒组心、脾、肾、睾丸脏器系数无显著差异,肝、肺脏器系数差异有统计学意义(P<0.05);对照组肺、肝病理学组织检查未见异常,低剂量组小鼠肺组织可见淤血、出血、支气管扩张出血,肺泡腔内有少量炎性渗出物、支气管周围炎、间质性肺炎、小叶性肺炎等;高剂量组小鼠肺组织可见支气管扩张出血,支气管腔内有大量炎性渗出物,支气管周围肺泡扩张,间质性肺炎、小叶性肺炎、融合性小叶性肺炎;低剂量组肝细胞水肿,可见点状坏死和小灶性坏死;高剂量组小鼠肝组织损伤严重,肝细胞排列紊乱,多数肝细胞呈细胞水肿,肝细胞胞质成空泡状,可见明显的点状坏死和小灶性坏死,并伴有炎细胞浸润,坏死区周围肝细胞细胞质呈嗜酸性变,轻度核固缩,并且肝细胞呈不同程度的胞质疏松,肝窦以及肝中央静脉扩张有广泛变性、坏死等病理改变。睾丸、心、脾、肾未见明显异常。结论小鼠腹腔注射本试验剂量的硫酸铍后主要引起肺组织和肝脏损伤,其它脏器未见明显异常。 展开更多
关键词 硫酸铍 小鼠 脏器系数 病理学
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硫酸铍诱导人胚肺成纤维细胞凋亡机制研究 被引量:1
11
作者 严青 周丽娜 +2 位作者 张娜 周慈 刘志宏 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2016年第4期408-413,419,共7页
目的观察硫酸铍对人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)凋亡的影响。方法取离体培养MRC-5细胞,随机分为对照组,硫酸铍低、中、高剂量染毒组,拮抗剂组和激活剂组。前4组硫酸铍染毒终浓度分别为0、1、10、100μmol/L;拮抗剂组先后分别予终浓度均... 目的观察硫酸铍对人胚肺成纤维细胞(MRC-5细胞)凋亡的影响。方法取离体培养MRC-5细胞,随机分为对照组,硫酸铍低、中、高剂量染毒组,拮抗剂组和激活剂组。前4组硫酸铍染毒终浓度分别为0、1、10、100μmol/L;拮抗剂组先后分别予终浓度均为10μmol/L的硫酸铍和2-氨基乙酯二苯基硼酸联合处理;激活剂组先后分别予终浓度均为10μmol/L的硫酸铍和肌醇三磷酸(IP3)联合处理。各组染毒后分别于培养24和48 h时间点收获细胞,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦法检测细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测三磷酸肌醇受体Ⅲ型(IP_3RⅢ)和B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)的mRNA相对表达水平,酶联免疫吸附法测定IP_3RⅢ和IP3蛋白表达水平。结果在24和48 h时间点的细胞凋亡率,硫酸铍3个剂量组均低于同时间点对照组(P<0.05),拮抗剂组分别低于同时间点对照组和硫酸铍中剂量组(P<0.05);激活剂组48 h时间点细胞凋亡率低于同时间点的对照组(P<0.05),高于同时间点硫酸铍中剂量组(P<0.05)。24 h时间点细胞内Ca^(2+)浓度,在硫酸铍低剂量组低于对照组(P<0.05),硫酸铍高剂量组高于对照组(P<0.05);48 h时间点硫酸铍中和高剂量组细胞内Ca^(2+)浓度均低于对照组(P<0.05);分别与24、48 h时间点对照组和硫酸铍中剂量组比较,拮抗剂组细胞内Ca^(2+)浓度均下降(P<0.05),激活剂组细胞Ca^(2+)浓度均升高(P<0.05)。24和48 h时间点BCL-2 mRNA表达水平在硫酸铍3个剂量组、拮抗剂和激活剂组均高于同时间点对照组(P<0.05)。细胞IP_3RⅢmRNA表达水平在硫酸铍3个剂量组、拮抗剂和激活剂组均高于对照组(P<0.05)。24 h时间点IP_3RⅢ蛋白表达水平在硫酸铍中剂量组、拮抗剂组和激活剂组均低于对照组(P<0.05);48 h时间点IP_3RⅢ蛋白表达水平,在硫酸铍高剂量组低于对照组(P<0.05),拮抗剂和激活剂组均高于硫酸铍中剂量组 展开更多
关键词 硫酸铍 人胚肺成纤维细胞 肌醇三磷酸 三磷酸肌醇受体Ⅲ型 2-氨基乙酯二苯基硼酸 细胞凋亡 钙离子
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枸杞多糖对硫酸铍致人胚肺成纤维细胞bcl-2、bax及c-fos表达的影响 被引量:1
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作者 王和静 周慈 +3 位作者 张娜 严青 王凯 刘志宏 《宁夏医科大学学报》 2017年第1期14-18,共5页
目的探讨硫酸铍(BeSO_4)对体外培养人胚肺成纤维细胞凋亡相关蛋白bcl-2、bax及原癌基因c-fos蛋白表达的影响,以及枸杞多糖(LBP)的干预作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5)细胞系,分为空白对照组,低、中、高剂量BeSO_4染毒组(1、1... 目的探讨硫酸铍(BeSO_4)对体外培养人胚肺成纤维细胞凋亡相关蛋白bcl-2、bax及原癌基因c-fos蛋白表达的影响,以及枸杞多糖(LBP)的干预作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5)细胞系,分为空白对照组,低、中、高剂量BeSO_4染毒组(1、10、100μmol·L^(-1)),均分别体外培养24h、48h、72h;LBP干预组(0.2 mg·mL^(-1) LBP+10μmol·L^(-1) BeSO_4)及LBP对照组(0.2 mg·mL^(-1) LBP),分别培养48h。采用Western blot检测MRC-5细胞bcl-2、bax、c-fos蛋白表达水平。结果染毒48、72h时,各剂量组bcl-2蛋白的表达及中、高剂量组bcl-2/bax比值与对照组相比增高(P<0.05或P<0.01),染毒48h时,中、高剂量组c-fos蛋白的表达与对照组相比增高(P<0.01),染毒72h时,bax各剂量组的表达与对照组相比降低(P<0.05或<0.01),且存在剂量效应关系(P<0.01);同一剂量组,bcl-2蛋白的表达在48h之内随染毒时间的延长而增加,bcl-2/bax比值与c-fos蛋白的表达在72h之内随染毒时间的延长而升高,同一中、高剂量组,染毒24h之后,bax表达量随染毒时间的延长而降低,且存在时间效应关系(P<0.01)。LBP干预48h,bcl-2、c-fos、bcl-2/bax的表达与BeSO_4染毒组相比降低(P<0.05或<0.01),但bax的表达上调无统计学意义。结论 bcl-2和bax参与BeSO_4致MRC-5细胞凋亡的调控,原癌基因c-fos被激活,LBP可调节BeSO_4对细胞凋亡相关蛋白及原癌基因表达的影响。 展开更多
关键词 硫酸铍 细胞凋亡 枸杞多糖
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硫酸铍对小鼠肾脏氧化损伤的诱导
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作者 谭滇湘 张朝晖 +1 位作者 王淑娟 黄炼 《实验动物科学》 2012年第6期13-16,共4页
目的探讨硫酸铍(BeSO4.4H2O)致小鼠肾脏氧化损伤的作用。方法将36只6周龄雄性昆明种小鼠随机分成对照组、低剂量组及高剂量组,每组12只,对照组用灭菌生理盐水(0.9%氯化钠溶液)按0.1 mL/10 g(体质量)隔天腹腔注射,低、高剂量组分别以1mg/... 目的探讨硫酸铍(BeSO4.4H2O)致小鼠肾脏氧化损伤的作用。方法将36只6周龄雄性昆明种小鼠随机分成对照组、低剂量组及高剂量组,每组12只,对照组用灭菌生理盐水(0.9%氯化钠溶液)按0.1 mL/10 g(体质量)隔天腹腔注射,低、高剂量组分别以1mg/kg BeSO4.4H2O和2 mg/kg BeSO4.4H2O生理盐水溶液隔天腹腔注射染毒,连续染毒4周。采集血液测定血清肌酐及尿素氮含量;计算肾脏脏器系数,采用差速离心法制备肾脏线粒体悬液,检测肾线粒体中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组相比,硫酸铍暴露小鼠肾脏脏器系数显著降低,血清中肌酐及尿素氮含量明显升高(P<0.05);硫酸铍暴露小鼠肾脏线粒体活性氧(ROS)、脂质过氧化终产物丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.01);SOD、GSH-Px活性受到明显抑制(P<0.01)。结论硫酸铍可以抑制肾组织线粒体抗氧化系统导致小鼠肾脏功能损害。 展开更多
关键词 硫酸铍 线粒体 脂质过氧化
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硫酸铍对小鼠脾脏淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响
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作者 严青 刘志宏 +1 位作者 龚爱红 张庆锋 《宁夏医科大学学报》 2013年第12期1329-1332,共4页
目的观察硫酸铍(BeSO4)对BALB/C小鼠脾脏淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响。方法 BALB/C小鼠随机分为对照组和BeSO4染毒低(2.5mg·kg-1)、中(5.0mg·kg-1)、高(10.0mg·kg-1)剂量组。每周称量小鼠体重一次,染毒结束后小鼠脱... 目的观察硫酸铍(BeSO4)对BALB/C小鼠脾脏淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响。方法 BALB/C小鼠随机分为对照组和BeSO4染毒低(2.5mg·kg-1)、中(5.0mg·kg-1)、高(10.0mg·kg-1)剂量组。每周称量小鼠体重一次,染毒结束后小鼠脱颈椎处死,无菌取出脾脏并称重。MTT法检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖,流式细胞术测定T淋巴细胞亚群。结果 BeSO4染毒5周后,低、中、高剂量组BALB/C小鼠体重均下降,其中中、高剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量BeSO4染毒组脾脏重量及脾脏系数均高于对照组(P<0.05);经BeSO4染毒后小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力增强,低、中、高剂量组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);三种剂量BeSO4染毒均可明显增加小鼠脾脏CD4+T细胞数量及CD4+T细胞与CD8+T细胞的比值(P<0.05)。结论 BeSO4可致BALB/C小鼠细胞免疫功能紊乱。 展开更多
关键词 硫酸铍 淋巴细胞增殖 T细胞亚群
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硫酸铍对人胚肺成纤维细胞凋亡相关蛋白表达的影响及枸杞多糖的作用
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作者 周慈 严青 +2 位作者 张志远 张娜 刘志宏 《宁夏医科大学学报》 2017年第9期989-993,共5页
目的探讨硫酸铍(BeSO_4)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)凋亡相关蛋白的影响及枸杞多糖(LBP)对细胞的保护作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),随机分为6组:空白对照组,低、中、高剂量BeSO_4染毒组(1、10、100μM),LBP干预组(0.2 mg&#... 目的探讨硫酸铍(BeSO_4)对人胚肺成纤维细胞(MRC-5)凋亡相关蛋白的影响及枸杞多糖(LBP)对细胞的保护作用。方法体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),随机分为6组:空白对照组,低、中、高剂量BeSO_4染毒组(1、10、100μM),LBP干预组(0.2 mg·mL^(-1) LBP+10μM BeSO_4)和LBP对照组(0.2mg·mL^(-1) LBP)。LBP干预组采用0.2mg·mL^(-1) LBP与10μM BeSO_4混合培养基方式进行干预。各组细胞培养24h后,采用免疫组织化学法检测MRC-5细胞中Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达,流式细胞术检测活性氧(ROS)含量。结果与空白对照组比较,BeSO_4低、中、高剂量组Bcl-2表达升高(P<0.05),Caspase-3表达降低(P<0.05),BeSO_4中、高剂量组Bax表达降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05);与BeSO_4低剂量组比较,BeSO_4中、高剂量组Bax表达降低(P<0.05),BeSO_4高剂量组Caspase-3表达降低(P<0.05),BeSO_4中、高剂量组Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05);与BeSO_4中剂量组相比较,BeSO_4高剂量组Caspase-3表达降低(P<0.05);BeSO_4中、高剂量组ROS含量高于空白对照组和BeSO_4低剂量组(P<0.05)。LBP对照组Bcl-2、Bax、Caspase-3表达及Bcl-2/Bax比值与空白对照组和LBP干预组比较差异均无统计学意义(P均>0.05);LBP干预组Bcl-2表达低于BeSO_4中剂量组(P<0.05),而Bax表达高于BeSO_4中剂量组(P<0.05),Caspase-3表达高于BeSO_4中剂量组(P<0.05);LBP干预组Bcl-2/Bax比值低于BeSO_4中剂量组(P<0.05);LBP对照组ROS含量与空白对照组及LBP干预组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 BeSO_4诱发MRC-5细胞Bcl-2蛋白表达上调,Bax、Caspase-3蛋白表达下调以及ROS升高,LBP对细胞有一定的保护作用。 展开更多
关键词 硫酸铍 活性氧 细胞凋亡 枸杞多糖
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从高氟硫酸铍溶液中萃取铍工艺研究 被引量:3
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作者 雷湘 《有色金属(冶炼部分)》 CAS 北大核心 2019年第10期30-32,共3页
高氟铍矿石中的成分复杂,其中氟、磷、硅、铝、铁等杂质在传统法工艺中对氧化铍的回收率及质量影响很大;萃取法生产氧化铍过程中,P204对铍浸出液中的阳离子进行交换,浸出液中的阴离子氟、硅、磷等基本不被萃取;利用阳离子在P204中的萃... 高氟铍矿石中的成分复杂,其中氟、磷、硅、铝、铁等杂质在传统法工艺中对氧化铍的回收率及质量影响很大;萃取法生产氧化铍过程中,P204对铍浸出液中的阳离子进行交换,浸出液中的阴离子氟、硅、磷等基本不被萃取;利用阳离子在P204中的萃取顺序,将铁还原成二价铁,并在还原气氛中减少铝铁与铍同萃机会。同时高氟铍矿石中的氟与铝的络合作用可抑制铝的萃取,萃入有机相中的铝铁经洗涤后基本可除去。洗后的有机相经反萃、水解沉淀、煅烧得到合格的工业氧化铍。 展开更多
关键词 高氟铍矿 硫酸铍溶液 萃取 P204
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