二烯丙基二硫启动人白血病HL-60细胞凋亡模型的建立 被引量：9

1

作者 易岚 曾希 +5 位作者 苏琦 周建国 葛玲 解娜 黄炎 石莺 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1250-1253,共4页

目的寻找二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点,建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型。方法实验设未处理组、处理组和撤药组,分别采用细胞计数、流式细胞术、DNA凝胶电泳、Western blot等方法,绘制生长曲... 目的寻找二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点,建立DADS启动HL-60细胞凋亡模型。方法实验设未处理组、处理组和撤药组,分别采用细胞计数、流式细胞术、DNA凝胶电泳、Western blot等方法,绘制生长曲线,检测凋亡率、活化的caspase-3表达率以及DNALadder、凋亡相关蛋白的检测。结果3.6mg.L-1DADS作用HL-60细胞1d,与对照组相比,细胞数没有明显变化,而作用2～6d,细胞数分别减少24.1%、36.5%、44.2%、52%、53.6%。DADS作用1、2d,凋亡率分别为3.1%、4.3%,与未处理组(3.0%)差异无显著性,而作用3～5d的凋亡率分别达到8.5%,15.2%,27.4%,均高于未处理组(P<0.05)。DADS作用2～5d撤药后再培养至d6,凋亡率分别为7.9%,12.4%,16.5%,18.8%,高于未处理组的3.3%(P<0.05)。处理2～5d后,活化的caspase-3的表达率分别为10.0%、10.4%、14.9%、17.3%,均高于未处理组5.4%(P<0.05)。处理组中DADS处理4d后DNA凝胶电泳出现梯状条带,而DADS作用2～5d撤药后再培养至d6均出现明显梯状条带。Westernblot结果表明,从作用2d起,caspase-3表达开始上调,而Bcl-2表达开始下调。结论3.6mg.L-1DADS诱导人白血病HL-60细胞凋亡的启动点为处理2d。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 启动 HL-60细胞 凋亡模型

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淫羊藿总黄酮含药血浆对泪腺上皮细胞凋亡模型Caspase-3及Caspase-8表达的影响 被引量：6

2

作者 王方 洪作权 +2 位作者 卢书娟 胡文婧 石玉恒 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期216-219,共4页

目的观察淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔泪腺上皮细胞半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及Caspase-8表达的影响,探究其作用机制。方法将体外培养的雄兔泪腺上皮细胞,随机分为淫羊藿黄酮治疗组(黄酮组)、含雄激素培养对照组(雄激素组)和空白对照... 目的观察淫羊藿总黄酮含药血浆对雄兔泪腺上皮细胞半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及Caspase-8表达的影响,探究其作用机制。方法将体外培养的雄兔泪腺上皮细胞,随机分为淫羊藿黄酮治疗组(黄酮组)、含雄激素培养对照组(雄激素组)和空白对照组(空白组)。分别加入含淫羊藿总黄酮血浆、丙酸睾酮、空白血浆干预48 h后,各组加入双氧水(H2O2)诱导细胞凋亡。采用Western Blot法检测Caspase-3、Caspase-8的表达情况。结果与空白组比较,黄酮组及雄激素组Caspase-3、Caspase-8蛋白表达降低(P<0.01),同时黄酮组较雄激素组的Caspase-3、Caspase-8蛋白表达降低(P<0.01)。结论淫羊藿总黄酮含药血浆作用于泪腺上皮细胞凋亡模型可抑制Caspase-3及Caspase-8的表达。 展开更多

关键词 淫羊藿总黄酮 泪腺 细胞凋亡模型 半胱氨酸蛋白酶-3 半胱氨酸蛋白酶-8

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ATP对大鼠成肌细胞抗H_2O_2凋亡模型分析 被引量：2

3

作者 朱道立 王康乐 +1 位作者 陈佩林 沈威 《北京工业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期314-320,共7页

为了探讨解决L6大鼠成肌细胞被H2O2损伤的问题,分别用1.210 48、2.420 96、4.841 92 g/L ATP溶液对成肌细胞处理后,利用MTT法、流式细胞仪和荧光凋亡抗体检测了细胞损伤程度.结果表明,经H2O2损伤后L6成肌细胞存活率明显降低,凋亡率增加... 为了探讨解决L6大鼠成肌细胞被H2O2损伤的问题,分别用1.210 48、2.420 96、4.841 92 g/L ATP溶液对成肌细胞处理后,利用MTT法、流式细胞仪和荧光凋亡抗体检测了细胞损伤程度.结果表明,经H2O2损伤后L6成肌细胞存活率明显降低,凋亡率增加.各种剂量ATP溶液均能提高L6成肌细胞的存活率,促使抗凋亡因子bcl-2表达增加,促凋亡因子bax表达降低,减少凋亡的发生.其保护程度随ATP溶液剂量的减少而增强,在1.210 48 g/L剂量时效果最为显著.ATP溶液对H2O2诱导损伤的L6大鼠成肌细胞具有明显保护作用,其机制是通过mTOR/STAT3信号通路增强凋亡抑制因子bcl-2表达、抑制凋亡促进因子bax表达,从而与抑制细胞凋亡有关. 展开更多

关键词 ATP溶液 过氧化氢(H2O2) L6大鼠成肌细胞 凋亡模型

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体外培养的家兔视网膜色素上皮细胞凋亡模型的建立

4

作者 李素芳 魏锐利 金玲 《武警医学院学报》 CAS 2008年第2期106-108,F0004,共4页

【目的】探讨建立体外培养的家兔视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡模型的实验方法。【方法】实验组为加入浓度分别为0、100、200、400、600、800和1000μmol/L的吲哚美辛(I N),对照组为加入等体积无水乙醇,分别作用家兔RPE细胞24 h,用MTT法... 【目的】探讨建立体外培养的家兔视网膜色素上皮(RPE)细胞凋亡模型的实验方法。【方法】实验组为加入浓度分别为0、100、200、400、600、800和1000μmol/L的吲哚美辛(I N),对照组为加入等体积无水乙醇,分别作用家兔RPE细胞24 h,用MTT法测量OD值来观察细胞凋亡的数量,对其进行定量分析。【结果】I N浓度分别为200、400、600、800、1000μmol/L作用RPE细胞24 h,其OD值分别为0.2094±0.0113、0.0799±0.0809、0.0685±0.0746、0.0538±0.0512和0.0501±0.0616,与对照组OD值0.3012±0.0395比较,都有显著性差异,有统计学意义。【结论】浓度≥200μmol/L的I N可以诱导RPE细胞有实验意义的凋亡。 展开更多

关键词 视网膜色素上皮细胞 凋亡模型 吲哚美辛

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顺铂诱导非洲绿猴肾细胞凋亡模型的建立

5

作者 浦洋 薛礼长 +3 位作者 吕芳彪 樊建勇 张发洲 龙朝钦 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第22期4205-4208,共4页

目的:建立常见凋亡诱导剂顺铂(Cisplatin)诱导非洲绿猴肾细胞(Vero)凋亡的模型,为进一步研究抗凋亡基因在细胞凋亡中的分子机理打下基础。方法:分别以不同浓度的顺铂处理Vero细胞48h,用噻唑蓝(MTT)比色法、Gimesa染色、流式细胞术检测,... 目的:建立常见凋亡诱导剂顺铂(Cisplatin)诱导非洲绿猴肾细胞(Vero)凋亡的模型,为进一步研究抗凋亡基因在细胞凋亡中的分子机理打下基础。方法:分别以不同浓度的顺铂处理Vero细胞48h,用噻唑蓝(MTT)比色法、Gimesa染色、流式细胞术检测,观察处理后细胞的生长活力和凋亡情况。结果:以未处理的细胞作为对照组,1、2、3、4、5μg/mL的顺铂处理的Vero细胞生存率分别为(79.02±6.10)%、(68.84±4.42)%、(56.66±4.07)%、(46.83±3.76)%、(29.04±5.93)%(P<0.01);经顺铂诱导后细胞形态学发生明显改变,出现膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征;流式细胞仪检测,0、1、2、3、4、5μg/mL的顺铂处理的Vero细胞后凋亡率分别为1.66%±0.19%、16.65%±1.26%、24.82%±1.03%、36.22%±1.04%、48.49%±1.24%、43.34%±1.17%(P<0.01)。结论:本实验成功建立顺铂诱导非洲绿猴肾细胞凋亡模型,将有助于进一步探讨目的基因在Vero细胞凋亡作用的的分子机制。 展开更多

关键词 非洲绿猴肾细胞 细胞凋亡 顺铂 凋亡模型

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六味地黄汤药物血清抗血管内皮细胞凋亡的作用 被引量：17

6

作者 卞慧敏 张旭 +3 位作者 龚婕宁 朱平 魏凯峰 刘学风 《中药药理与临床》 CAS CSCD 2002年第5期9-11,共3页

目的 :研究六味地黄汤及其药物血清对血管内皮细胞 (VEC)损伤模型的保护作用。方法 :本实验利用大肠杆菌内毒素 (LPS)致VEC凋亡模型 ,并通过MTT、细胞周期和凋亡细胞的检测 ,观察了药物血清对VEC的保护作用 ,并通过MDA、SOD等指标探讨... 目的 :研究六味地黄汤及其药物血清对血管内皮细胞 (VEC)损伤模型的保护作用。方法 :本实验利用大肠杆菌内毒素 (LPS)致VEC凋亡模型 ,并通过MTT、细胞周期和凋亡细胞的检测 ,观察了药物血清对VEC的保护作用 ,并通过MDA、SOD等指标探讨其作用机理。结果 :六味地黄汤药物血清可减轻LPS对VEC的损伤 ,抑制VEC凋亡发生 ,促进VEC增殖 ;并可通过增加VEC分泌SOD ,清除MDA ,而达到其减轻LPS对内皮细胞损伤的目的。结论 :六味地黄汤具有保护VEC损伤模型的作用 ,这种作用将有助于血栓性疾病的防治。 展开更多

关键词 六味地黄汤 药物血清 血管内皮细胞 VEC凋亡模型 大肠杆菌内毒素

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氧化苦参碱对H_2O_2诱导的L_6成肌细胞凋亡的影响 被引量：6

7

作者 朱道立 王康乐 +1 位作者 陈佩林 姜雅琼 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第7期662-670,共9页

研究氧化苦参碱对L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡的影响.采用过氧化氢损伤L6大鼠成肌细胞的方法,建立L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡模型.使用剂量为0.3,0.15,0.75 g/L的氧化苦参碱处理细胞.应用MTT法统计存活率和流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用D... 研究氧化苦参碱对L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡的影响.采用过氧化氢损伤L6大鼠成肌细胞的方法,建立L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡模型.使用剂量为0.3,0.15,0.75 g/L的氧化苦参碱处理细胞.应用MTT法统计存活率和流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用DAPI荧光染色、HE染色以及Bax和Bcl-2抗体鉴定损伤程度,Western blot检测蛋白质差异.结果表明,H2O2损伤的成肌细胞存活率降低,凋亡率增加.各种剂量氧化苦参碱能提高成肌细胞的存活率,促使Bcl-2增高,Bax降低.对成肌细胞的保护程度随氧化苦参碱剂量增加而增强,在剂量为0.3 g/L时,效果显著,其次是0.15、0.75 g/L的氧化苦参碱.其生理生化机制是氧化苦参碱保护H2O2通过NFκB信号通路造成的大鼠成肌细胞凋亡模型.结果显示,氧化苦参碱具有作为新的抗氧化药物的潜力. 展开更多

关键词 氧化苦参碱 H2O2诱导凋亡模型 L6大鼠成肌细胞 BCL-2 BAX

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斑马鱼眼部细胞凋亡模型的建立 被引量：3

8

作者 杨菲 华永庆 +5 位作者 林紫微 黄天一 崔杰 李梦雨 陈婷婷 许惠琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1320-1325,共6页

目的建立邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的斑马鱼眼部细胞凋亡模型,并用于抗眼部细胞凋亡药物的活性评价。方法斑马鱼受精后30 h(hpf),加入DBP(0.1、10、50、100μmol·L^-1)18 h和42 h,观察斑马鱼的存活率;将30或54 hpf的斑马鱼在直射... 目的建立邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的斑马鱼眼部细胞凋亡模型,并用于抗眼部细胞凋亡药物的活性评价。方法斑马鱼受精后30 h(hpf),加入DBP(0.1、10、50、100μmol·L^-1)18 h和42 h,观察斑马鱼的存活率;将30或54 hpf的斑马鱼在直射光或非直射光条件下,加入DBP(0.1、1、5、10、50μmol·L^-1)造模18 h,吖啶橙染色(AO),采用体视荧光显微镜观察斑马鱼眼部细胞凋亡情况;造模同时,给予不同浓度N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)或人参皂苷Rg1,观察药物对斑马鱼眼部细胞凋亡的影响。结果DBP造模18、42 h,10μmol·L^-1及以下浓度对鱼卵存活率无明显影响,50μmol·L^-1及以上浓度会致使斑马鱼存活率明显降低(P<0.01);30 hpf的斑马鱼在10μmol·L^-1 DBP造模18 h后显示明显的眼部细胞凋亡(P<0.01)。斑马鱼在72 h可见眼部细胞自发性凋亡,且与光照条件无关。在该造模条件下,NAC或人参皂苷Rg1均能抑制斑马鱼眼部细胞凋亡(P<0.05)。结论利用DBP可快速高效地建立斑马鱼眼部细胞凋亡模型,该模型可用于药物活性的快速评价。 展开更多

关键词 斑马鱼 邻苯二甲酸二丁酯 眼部细胞凋亡模型 活性评价 N-乙酰-L-半胱氨酸 人参皂苷RG1

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氯沙坦及苯那普利对慢性肾衰大鼠肾功能和细胞凋亡的影响 被引量：6

9

作者 周富华 王笑云 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 1999年第4期330-332,共3页

目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体１ 拮抗剂（ Ａ Ｔ１ Ａ） 和血管紧张素转换酶抑制剂（ Ａ Ｃ Ｅ Ｉ） 对慢性肾衰（ Ｃ Ｒ Ｆ） 肾功能的影响及可能的机制。　方法：观察氯沙坦和苯那普利对５／６ 肾切除模型大鼠蛋白尿、肌酐清除率（... 目的：探讨血管紧张素Ⅱ受体１ 拮抗剂（ Ａ Ｔ１ Ａ） 和血管紧张素转换酶抑制剂（ Ａ Ｃ Ｅ Ｉ） 对慢性肾衰（ Ｃ Ｒ Ｆ） 肾功能的影响及可能的机制。　方法：观察氯沙坦和苯那普利对５／６ 肾切除模型大鼠蛋白尿、肌酐清除率（ Ｃｃｒ） 以及肾小球和肾小管细胞凋亡程度等方面的影响。　结果：两药物治疗组在给药１０ 周后对 Ｃ Ｒ Ｆ 大鼠的平均收缩压、 Ｃｃｒ 以及尿蛋白均有明显改善； Ｃ Ｒ Ｆ 大鼠较假手术组其肾小球和肾小管细胞凋亡指数增高（ Ｐ＜ ００１） ，而氯沙坦和苯那普利对此有明显抑制作用，此效应氯沙坦比苯那普利更加显著。　结论： Ａ Ｔ１ Ａ 和 Ａ Ｃ Ｅ Ｉ 可能通过抑制 Ｃ Ｒ Ｆ 时肾实质细胞过度凋亡而产生肾保护效应。 展开更多

关键词 肾功能衰竭 氯沙坦 细胞凋亡 苯那普利

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Altered expression of bcl-2 mRNA and Bax in hippocampus with focal cerebral ischemia model in rats 被引量：3

10

作者 张苏明 王伟 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1999年第7期32-35,共4页

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＩｓｃｈｅｍｉａａｎｄｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｓｕｌｔｓｍａｙｉｎｄｕｃｅａｎｔｉｉｎｊｕｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅｉｎｔｈｅｓｉｃｋｂｒａｉｎｃｅｌｓ，ｉｎｗｈｉｃｈｒｅｇｕｌａｔｉｖｅｇｅｎｅｓｉ... ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＩｓｃｈｅｍｉａａｎｄｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｓｕｌｔｓｍａｙｉｎｄｕｃｅａｎｔｉｉｎｊｕｒｙｒｅｓｐｏｎｓｅｉｎｔｈｅｓｉｃｋｂｒａｉｎｃｅｌｓ，ｉｎｗｈｉｃｈｒｅｇｕｌａｔｉｖｅｇｅｎｅｓｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｐｒｏｇｒａｍｍ... 展开更多

关键词 CEREBRAL ISCHEMIA HIPPOCAMPUS apoptosis animal model

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涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的动物实验 被引量：2

11

作者 董青 王洁 +2 位作者 董福生 李荷香 顾洪涛 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期7-10,共4页

目的　检测不同剂量的重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF -α)对涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的体内诱导。方法　利用人涎腺腺样囊性癌细胞株 (SACC - 83)建立裸鼠移植瘤动物模型 ,局部肿瘤内直接注射rhTNF -α,选用两个不同剂量 (1 0 0× 1 0 ... 目的　检测不同剂量的重组人肿瘤坏死因子α(rhTNF -α)对涎腺腺样囊性癌细胞凋亡的体内诱导。方法　利用人涎腺腺样囊性癌细胞株 (SACC - 83)建立裸鼠移植瘤动物模型 ,局部肿瘤内直接注射rhTNF -α,选用两个不同剂量 (1 0 0× 1 0 4 IU/kg和 1 0× 1 0 4 IU/kg) ,观察对肿瘤的抑制作用 ,并采用流式细胞术定量检测体内细胞凋亡及细胞周期的变化情况。结果　①A实验组的抑瘤率为 52 .1 6 % ,B实验组的抑瘤率为 73 .0 1 %。②用药后三组瘤体体积的变化有显著性差异。③三组流式细胞周期的变化及凋亡率有显著性差异。结论　①rhTNF -α可抑制裸鼠SACC移植瘤生长 ,使细胞增殖在G1 期发生阻滞。这种抑制主要通过细胞凋亡来实现的。②本文低剂量的rhTNF -α诱导凋亡的效果优于高剂量的rhTNF -α 。 展开更多

关键词 涎腺 腺样囊性癌 肿瘤坏死因子 细胞凋亡 动物模型

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过表达IL-18诱导舌鳞癌细胞凋亡机制的初步研究 被引量：2

12

作者 郭宇 侯旭 +4 位作者 李正强 李佳 徐志民 岳丽伟 刘炜炜 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期653-657,661,共6页

目的:探究白介素18(IL-18)的过表达对舌鳞癌细胞活性和凋亡的影响。方法:构建稳定转染人IL-18cDNA的舌鳞癌CRL1623细胞系,免疫荧光、qPCR和Western Blot证实IL-18的过表达;流式细胞术、吉姆萨染色和MTT法检测转染后CRL1623细胞活性的改... 目的:探究白介素18(IL-18)的过表达对舌鳞癌细胞活性和凋亡的影响。方法:构建稳定转染人IL-18cDNA的舌鳞癌CRL1623细胞系,免疫荧光、qPCR和Western Blot证实IL-18的过表达;流式细胞术、吉姆萨染色和MTT法检测转染后CRL1623细胞活性的改变;qPCR检测凋亡相关基因的表达;用稳转的CRL1623细胞建立舌鳞癌细胞裸鼠移植瘤模型,体内观察IL-18过表达对移植瘤生长的影响。结果:过表达的IL-18可以诱导CRL1623细胞凋亡。与对照组相比,实验组IL-18的表达量上调,caspase 3、7和9的表达量增加并被活化,IFN-γ和细胞色素C的mRNA表达量上调。与对照组裸鼠相比,实验组裸鼠移植瘤的生长受到了抑制(P<0.05)。结论:IL-18能够通过启动经典的凋亡途径诱导舌鳞癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 白介素18 舌鳞状细胞癌 基因表达 细胞凋亡 移植瘤模型

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兔动脉内膜损伤后增生内膜中c-myc、c-fos和p53基因表达与细胞凋亡的研究

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作者 冷静 姚玉宇 +2 位作者 彭韬 尹航 黄峻 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期258-260,F002,共4页

目的探讨动脉内膜损伤后内膜增殖灶中平滑肌细胞凋亡现象及其相关调控基因的表达.方法取血管内膜损伤后4小时、24小时、7天、14天、28天、3个月、4个月时的兔动脉进行光镜、电镜检查、原位细胞凋亡标记实验(TUNEL)以及c-fos、c-myc、p53... 目的探讨动脉内膜损伤后内膜增殖灶中平滑肌细胞凋亡现象及其相关调控基因的表达.方法取血管内膜损伤后4小时、24小时、7天、14天、28天、3个月、4个月时的兔动脉进行光镜、电镜检查、原位细胞凋亡标记实验(TUNEL)以及c-fos、c-myc、p53mRNA原位杂交实验.结果电镜观察到凋亡细胞早期的表现;7～120天内膜中细胞凋亡的发生率仅为1%～2%左右;原位杂交显示7天组c-fos、c-myc呈阳性表达,以后表达强度逐渐下降直至转阴,与内膜细胞增殖动力学变化的趋势一致,p53仅在7天组有弱阳性表达.结论动脉内膜损伤后增殖灶中细胞凋亡的作用非常微弱,在内膜增殖的形成中不是主要的影响因素.c-fos、c-myc、p53基因的表达与内膜中平滑肌细胞增殖动力学和细胞凋亡的变化趋势相吻合. 展开更多

关键词 动脉内膜损伤 增生内膜 C-MYC C-FOS P53 基因表达 细胞凋亡 实验研究

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