目的评价长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)对肝癌患者预后的影响。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of science、中国知网、万方医学与维普数据库,检索时间均从建库至2...目的评价长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)对肝癌患者预后的影响。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of science、中国知网、万方医学与维普数据库,检索时间均从建库至2023年2月,收集ACSL4表达对肝癌患者预后影响的队列研究。文献的筛选过程由2名评估员自主完成。将纳入的研究依据纽卡斯尔-渥太华质量评价量表(Newcastle Ottawa Scale,NOS)进行质量评估,提取文献中肝癌患者的临床病理特征、研究的结局指标及HR(95%CI)等相关数据。运用Stata17.0MP软件对文献数据进行统计分析,采用漏斗图与Egger’s检验探讨偏倚风险。结果共纳入6项队列试验(890例肝癌患者)。Meta分析表明,与ACSL4低表达组患者相比,ACSL4高表达组肝癌患者总生存期(overall survival,OS)较短(HR=1.274,95%CI:1.141~1.422,P<0.001);肝癌患者中,男性ACSL4高表达(OR=1.12,95%CI:1.008~1.224,P<0.05)。Egger’s检验表明研究间存在发表偏倚的可能性较小(P=0.055)。ACSL4表达水平与年龄、肿瘤分期、肿瘤大小和肿瘤包膜是否完整以及是否合并肝硬化的相关性无统计学意义(P均>0.05)。结论ACSL4高表达与肝癌患者较短OS的相关性具有统计学意义,但仍需要更多的高质量临床研究进行验证。展开更多
目的探讨酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA syntbetase long chain family member 4,ACSL4)在七氟醚(sevoflurane,Sev)诱导的神经元细胞损伤中的作用及机制。方法以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为研究对象,分别设置对照组(二甲基亚...目的探讨酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA syntbetase long chain family member 4,ACSL4)在七氟醚(sevoflurane,Sev)诱导的神经元细胞损伤中的作用及机制。方法以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为研究对象,分别设置对照组(二甲基亚砜,10μmol/L)、Sev组和Sev+铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1,10μmol/L)组,采用CCK-8法检测细胞活性。体外构建4.1%Sev暴露的术后认知功能障碍模型,按照转染类别分为Ctrol组、Sev组、Sev+si-NC组、Sev+si-ACSL4组和Sev+si-ACSL4+compound C组。采用比色法检测各组细胞中丙二醛(malonaldehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和Fe2+含量;2’,7’-二氯荧光素二乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测活性氧水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ACSL4,谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测ACSL4,GPX4,腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、磷酸化(phosphorylated,p)-AMPK,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin)mTOR和p-mTOR蛋白表达。结果CCK-8结果显示,Sev组细胞活力(0.41±0.11)较对照组(0.98±0.07)明显降低,Sev+Fer-1组细胞活力(0.83±0.09)较Sev组显著升高,差异具有统计学意义(t=7.572,5.118,均P<0.01)。Sev组细胞中Fe2+,MDA,4-HNE,ROS水平和p-AMPK/AMPK比率以及ACSL4的mRNA和蛋白表达高于Ctrol组(t=5.900,7.421,4.795,13.517,10.825,9.945,11.334),GSH,p-mTOR/mTOR比率以及SLC7A11,GPX4的mRNA和蛋白表达低于Ctrol组(t=20.438,3.551,11.460,12.211,6.845,8.287),差异具有统计学意义(均P<0.05)。Sev+siACSL4组Fe2+,MDA,4-HNE,ROS水平和p-AMPK/AMPK比率以及ACSL4的mRNA和蛋白表达低于Sev+siNC组(t=3.818,3.164,3.054,4.465,13.088,7.918,9.737),细胞活力、GSH含量、p-mTOR/mTOR比率以及SLC7A11,GPX4的蛋白表达高于Sev+si-NC组(t=2.912,7.248,7.574,20.092,5.915),差异�展开更多
文摘目的评价长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)对肝癌患者预后的影响。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of science、中国知网、万方医学与维普数据库,检索时间均从建库至2023年2月,收集ACSL4表达对肝癌患者预后影响的队列研究。文献的筛选过程由2名评估员自主完成。将纳入的研究依据纽卡斯尔-渥太华质量评价量表(Newcastle Ottawa Scale,NOS)进行质量评估,提取文献中肝癌患者的临床病理特征、研究的结局指标及HR(95%CI)等相关数据。运用Stata17.0MP软件对文献数据进行统计分析,采用漏斗图与Egger’s检验探讨偏倚风险。结果共纳入6项队列试验(890例肝癌患者)。Meta分析表明,与ACSL4低表达组患者相比,ACSL4高表达组肝癌患者总生存期(overall survival,OS)较短(HR=1.274,95%CI:1.141~1.422,P<0.001);肝癌患者中,男性ACSL4高表达(OR=1.12,95%CI:1.008~1.224,P<0.05)。Egger’s检验表明研究间存在发表偏倚的可能性较小(P=0.055)。ACSL4表达水平与年龄、肿瘤分期、肿瘤大小和肿瘤包膜是否完整以及是否合并肝硬化的相关性无统计学意义(P均>0.05)。结论ACSL4高表达与肝癌患者较短OS的相关性具有统计学意义,但仍需要更多的高质量临床研究进行验证。
文摘目的探讨酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA syntbetase long chain family member 4,ACSL4)在七氟醚(sevoflurane,Sev)诱导的神经元细胞损伤中的作用及机制。方法以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为研究对象,分别设置对照组(二甲基亚砜,10μmol/L)、Sev组和Sev+铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1,10μmol/L)组,采用CCK-8法检测细胞活性。体外构建4.1%Sev暴露的术后认知功能障碍模型,按照转染类别分为Ctrol组、Sev组、Sev+si-NC组、Sev+si-ACSL4组和Sev+si-ACSL4+compound C组。采用比色法检测各组细胞中丙二醛(malonaldehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和Fe2+含量;2’,7’-二氯荧光素二乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测活性氧水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ACSL4,谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测ACSL4,GPX4,腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、磷酸化(phosphorylated,p)-AMPK,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin)mTOR和p-mTOR蛋白表达。结果CCK-8结果显示,Sev组细胞活力(0.41±0.11)较对照组(0.98±0.07)明显降低,Sev+Fer-1组细胞活力(0.83±0.09)较Sev组显著升高,差异具有统计学意义(t=7.572,5.118,均P<0.01)。Sev组细胞中Fe2+,MDA,4-HNE,ROS水平和p-AMPK/AMPK比率以及ACSL4的mRNA和蛋白表达高于Ctrol组(t=5.900,7.421,4.795,13.517,10.825,9.945,11.334),GSH,p-mTOR/mTOR比率以及SLC7A11,GPX4的mRNA和蛋白表达低于Ctrol组(t=20.438,3.551,11.460,12.211,6.845,8.287),差异具有统计学意义(均P<0.05)。Sev+siACSL4组Fe2+,MDA,4-HNE,ROS水平和p-AMPK/AMPK比率以及ACSL4的mRNA和蛋白表达低于Sev+siNC组(t=3.818,3.164,3.054,4.465,13.088,7.918,9.737),细胞活力、GSH含量、p-mTOR/mTOR比率以及SLC7A11,GPX4的蛋白表达高于Sev+si-NC组(t=2.912,7.248,7.574,20.092,5.915),差异�
文摘目的探究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)毒力因子Rv1983刺激巨噬细胞释放的外泌体对Mtb感染的影响及潜在作用机制。方法超速离心法提取Mtb Rv1983蛋白刺激巨噬细胞分泌的外泌体,并与未感染巨噬细胞共培养,碘化丙啶染色法检测对巨噬细胞活力影响,脂质过氧化荧光探针法检测脂质活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,比色法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和亚铁离子(Fe2+)浓度,Western blot检测外泌体中酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4)蛋白表达情况。提取Mtb Rv1983刺激ACSL4干扰后的巨噬细胞分泌的外泌体,并与未感染巨噬细胞共培养,流式细胞术和Western blot检测对巨噬细胞极化的影响。平板集落试验、吞噬溶酶体共定位试验分析对巨噬细胞吞噬杀伤能力影响。结果与对照组相比,Rv1983诱导巨噬细胞释放的外泌体可促进未感染巨噬细胞发生铁死亡,表现为细胞内脂质ROS、MDA和Fe2+水平升高,而它们被铁死亡抑制剂Fer-1显著抑制。Rv1983诱导巨噬细胞释放ACSL4高表达的外泌体。干扰巨噬细胞ACSL4后,经Rv1983刺激所产生的外泌体中ACSL4降低,诱导未感染巨噬细胞铁死亡明显减少。Rv1983诱导巨噬细胞释放的外泌体可诱导巨噬细胞向M2型极化,表现为CD206和Arg1表达升高,巨噬细胞吞噬杀伤能力减弱,而干扰ACSL4后分离的外泌体或Fer-1与Rv1983诱导巨噬细胞释放的外泌体联合处理则减少了巨噬细胞向M2型极化,巨噬细胞吞噬杀伤能力增强。结论Mtb Rv1983蛋白刺激巨噬细胞释放的外泌体中ACSL4表达上调诱导未感染巨噬细胞铁死亡,引起巨噬细胞M2极化,吞噬杀伤能力减弱,促进Mtb的感染。
