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乙酰木聚糖酯酶研究进展 被引量：2
1
作者 吴红丽 薛勇 +2 位作者 刘健 甘礼惠 龙敏南 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期102-110,共9页
半纤维素是一类丰富可再生而又亟待开发利用的生物质资源,将半纤维素降解为糖类进而生产木糖醇及其它化学品是利用生物质资源的关键一步。乙酰木聚糖酯酶是降解半纤维素的一个重要酶,它能够水解乙酰化木聚糖中的木糖残基上的2位和3位的... 半纤维素是一类丰富可再生而又亟待开发利用的生物质资源,将半纤维素降解为糖类进而生产木糖醇及其它化学品是利用生物质资源的关键一步。乙酰木聚糖酯酶是降解半纤维素的一个重要酶,它能够水解乙酰化木聚糖中的木糖残基上的2位和3位的O乙酰基,在工业、农业及食品业具有广阔的应用前景。综述了乙酰木聚糖酯酶的分类、酶学性质、催化机制、基因克隆和协同酶解等方面的研究进展,同时对该研究进行了展望。 展开更多
关键词 乙酰木聚糖酯酶 酶学性质 催化机制 协同酶解
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枯草芽胞杆菌乙酰木聚糖酯酶的鉴定及诱导剂对酯酶活力的影响 被引量：2
2
作者 田倩倩 宋萍 +3 位作者 陈晨 林明 江凌 李霜 《生物加工过程》 CAS CSCD 2013年第1期60-64,共5页
以枯草芽胞杆菌CICC 20034为研究对象,对其分泌的高相对分子质量酯酶进行鉴定,并考察诱导剂对其活力的影响。结果表明:枯草芽胞杆菌CICC 20034可分泌一种相对分子质量为1.07×105的酯酶,经蛋白质质谱鉴定为乙酰木聚糖酯酶,单体分相... 以枯草芽胞杆菌CICC 20034为研究对象,对其分泌的高相对分子质量酯酶进行鉴定,并考察诱导剂对其活力的影响。结果表明:枯草芽胞杆菌CICC 20034可分泌一种相对分子质量为1.07×105的酯酶,经蛋白质质谱鉴定为乙酰木聚糖酯酶,单体分相对子质量为3.56×104。在发酵培养基中添加乙酸乙酯和木糖可以显著的促进乙酰木聚糖酯酶的活力,而三丁酸甘油酯和大分子诱导剂——木聚糖、玉米芯粉和壳聚糖对酯酶的活力几乎无促进作用。枯草芽胞杆菌CICC 20034以乙酸乙酯为诱导剂时最高比酶活为0.62 U/mL,为已知报道的野生细菌乙酰木聚糖酯酶的最高酯酶活力。 展开更多
关键词 乙酰木聚糖酯酶 枯草芽胞杆菌 诱导剂
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植物根际芽胞杆菌菌种资源采集及其具有过水解催化活性水解酶基因的克隆 被引量：1
3
作者 王倩 李欢 +5 位作者 郑琳 贾文敬 黄建忠 李欣 董思圳 舒正玉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期76-87,共12页
[背景]芽胞杆菌源枯草杆菌蛋白酶(subtilisin carlsberg)、乙酰基木聚糖酯酶(acetyl xylan esterase)和头孢菌素乙酰水解酶(cephalosporin acetyl hydrolase)具有较高的过水解催化活性,有商业开发价值。[目的]挖掘芽胞杆菌菌株中具有过... [背景]芽胞杆菌源枯草杆菌蛋白酶(subtilisin carlsberg)、乙酰基木聚糖酯酶(acetyl xylan esterase)和头孢菌素乙酰水解酶(cephalosporin acetyl hydrolase)具有较高的过水解催化活性,有商业开发价值。[目的]挖掘芽胞杆菌菌株中具有过水解酶催化活性的水解酶蛋白基因,为后续制备过水解酶及酶法合成过氧乙酸奠定基础。[方法]利用定向筛选培养基,从植物根际及纳豆产品中筛选产蛋白酶芽胞杆菌候选菌株,并利用RFLP及16S rRNA基因对其进行鉴定。从蛋白酶高产芽胞杆菌菌株中克隆枯草杆菌蛋白酶、乙酰木聚糖醋酶和头孢菌素乙酰水解酶的全长基因。[结果]从植物根际土壤及纳豆产品中共分离到85个候选菌株,RFLP及16S rRNA基因鉴定结果表明候选菌株均为芽胞杆菌,分别属于Bacillus subtilis、Bacillus cereus、Bacillus pumilus和Bacillus megaterium四个类群。从B.subtilis NSYT-3克隆的枯草杆菌蛋白酶基因编码的多肽链全长381个氨基酸,从B.pumilus OSLJ-3克隆得到的乙酰基木聚糖酯酶基因编码的多肽链全长320个氨基酸,从B.subtilis NSYT-3克隆的头孢菌素乙酰水解酶基因编码的多肽链全长318个氨基酸,3D结构模拟表明这3个酶蛋白均具有α/β水解酶折叠家族蛋白结构特点。[结论]芽胞杆菌源具过水解催化活性水解酶基因的克隆,为后续开发酶法合成过氧乙酸工艺奠定了基础。 展开更多
关键词 根际细菌 芽胞杆菌 过水解催化活性 枯草杆菌蛋白酶 乙酰木聚糖酯酶 头孢菌素乙酰水解酶
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灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 被引量：1
4
作者 刘伟娜 梁迪 +4 位作者 王晓宇 玉王宁 厚凌宇 金一 谢响明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期153-159,共7页
根据Gen Bank数据库中已报道的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)全基因组序列,分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物;利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因,并构建原核表达载体p ET28a-Sgraxe,经IPTG诱... 根据Gen Bank数据库中已报道的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)全基因组序列,分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物;利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因,并构建原核表达载体p ET28a-Sgraxe,经IPTG诱导表达重组Sgr Axe,Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白。结果显示,克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因axe,其序列全长1 008 bp,编码336个氨基酸。SDS-PAGE检测带有p ET28a-Sgraxe转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 k D,与理论值相符。纯化的重组Sgr Axe酶学性质表明,该酶最适反应温度为50℃,最适p H8.0,热稳定性较强,p H作用范围广;金属离子对酶均表现为抑制作用,尤其是Zn2+严重抑制酶活力;重组酶特征的分析揭示了其在工业中潜在的应用价值。 展开更多
关键词 灰色链霉菌 乙酰木聚糖酯酶 原核表达 纯化 酶学性质
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乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究 被引量：1
5
作者 朱天地 殷欣 +2 位作者 邬敏辰 何瑶 唐存多 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1084-1089,共6页
乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖的O-乙酰基,消除木聚糖酶水解木聚糖时该基团产生的空间阻碍作用。以宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）E001菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增了乙酰木聚糖酯酶成熟肽的编码基因（Auaxe）,并构... 乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖的O-乙酰基,消除木聚糖酶水解木聚糖时该基团产生的空间阻碍作用。以宇佐美曲霉（Aspergillus usamii）E001菌株的总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增了乙酰木聚糖酯酶成熟肽的编码基因（Auaxe）,并构建了重组表达质粒p PIC9K^M-Auaxe,SalⅠ线性化后电转入毕赤酵母（Pichia pastoris）GS115中,经G418抗性筛选及甲醇诱导表达72 h,获得了重组乙酰木聚糖酯酶（reAuAxe）,其酶活性为35.6 U/m L。发酵液经纯化获得电泳纯reAuAxe,其表观相对分子质量约为3.4×10^4,比酶活性为390.5 U/mg。纯化后reAuAxe的最适反应温度为50℃,在45℃及以下稳定;其最适反应pH为6.0,在pH 4.5-7.0范围内稳定;所测的多数金属离子及EDTA对其酶活性影响不大。 展开更多
关键词 宇佐美曲霉 乙酰木聚糖酯酶 基因克隆 表达 酶学性质
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利用具有过水解活性的乙酰基木聚糖酯酶催化制备过氧乙酸
6
作者 袁琪 陶惟一 +1 位作者 羊亚平 李霜 《生物加工过程》 CAS 2020年第5期567-571,共5页
以甘油三乙酸酯和H2O2为底物,利用来源枯草芽孢杆菌的乙酰木聚糖酯酶(AXE)游离酶和固定化酶催化过水解反应制备过氧乙酸(PAA),并以化学法制备的过氧乙酸为对照组进行性质比较。结果表明:游离酶用量(酶蛋白)为1.0 g/L,可得到11.6 g/L的... 以甘油三乙酸酯和H2O2为底物,利用来源枯草芽孢杆菌的乙酰木聚糖酯酶(AXE)游离酶和固定化酶催化过水解反应制备过氧乙酸(PAA),并以化学法制备的过氧乙酸为对照组进行性质比较。结果表明:游离酶用量(酶蛋白)为1.0 g/L,可得到11.6 g/L的过氧乙酸,对甘油三乙酸酯的转化率为16.7%;游离酶用量(酶蛋白)为75 mg/L,过氧乙酸质量浓度可达3.5 g/L,对甘油三乙酸酯的转化率为15.3%;固定化酶用量(树脂量)为50 g/L,可得3.6 g/L的过氧乙酸。低浓度过氧乙酸比高浓度过氧乙酸更稳定。将对照组和酶法制备过氧乙酸的质量浓度均设置为3.5 g/L,其pH分别为1.98和4.45;对照组使铜片形成重度腐蚀,对碳钢有轻度腐蚀性,对不锈钢和铝基本无腐蚀;酶法制备的过氧乙酸对上述4种金属均无腐蚀。 展开更多
关键词 过氧乙酸 乙酰木聚糖酯酶 固定化酶 过水解活性
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一种包含双纤维素结合域的新型生物纸张增强剂
7
作者 郑斐 石翛然 +2 位作者 吴咪佳 汪晶 丁少军 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期61-65,共5页
将两个来源于草菇乙酰木聚糖酯酶的家族I的纤维素结合域(CBD)融合到一起形成重组蛋白,并将该功能性纤维素吸附重组蛋白在大肠杆菌中进行表达,利用该重组蛋白处理What-man滤纸后检测滤纸的机械性能。检测发现经纯化的重组蛋白处理后的滤... 将两个来源于草菇乙酰木聚糖酯酶的家族I的纤维素结合域(CBD)融合到一起形成重组蛋白,并将该功能性纤维素吸附重组蛋白在大肠杆菌中进行表达,利用该重组蛋白处理What-man滤纸后检测滤纸的机械性能。检测发现经纯化的重组蛋白处理后的滤纸其机械性能都有所提高,其中抗张强度提高了10%,耐破度提高了8.7%,耐折度提高了30%。该研究表明CBD在纤维及造纸工业等方面具有巨大的潜在应用价值。 展开更多
关键词 乙酰木聚糖酯酶 纤维素结合域 机械性能 纸张增强剂
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草菇乙酰木聚糖酯酶的生物信息学分析
8
作者 赵妍 陈明杰 王孟兰 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2015年第2期53-58,共6页
以草菇(Volvariella volvacea)乙酰木聚糖酯酶AXE、AXEII为研究对象,采用生物信息学方法对其核苷酸及编码的蛋白氨基酸序列、组成成分、信号肽、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质三级结构等进行预测和分析,并构建了乙酰木聚糖酯酶蛋... 以草菇(Volvariella volvacea)乙酰木聚糖酯酶AXE、AXEII为研究对象,采用生物信息学方法对其核苷酸及编码的蛋白氨基酸序列、组成成分、信号肽、跨膜结构域、疏水性/亲水性、蛋白质三级结构等进行预测和分析,并构建了乙酰木聚糖酯酶蛋白家族的系统进化树。结果表明,草菇的AXE蛋白由349个氨基酸残基组成,编码蛋白质的分子量为37.55 ku,等电点为8.58,属稳定性蛋白质。AXEII由253个氨基酸残基组成,编码蛋白质的分子量为27.70 ku,等电点为5.82,属稳定性蛋白质。两者均为亲水性蛋白,存在信号肽,AXE与AXEII的潜在磷酸化位点总数分别为15个和11个。草菇的AXE与灰盖鬼伞(Coprinopsis cinerea)亲缘关系较近,AXEII与裂褶菌(Schizophyllum commune)亲缘关系较近。 展开更多
关键词 草菇 乙酰木聚糖酯酶 生物信息学
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白色链霉菌乙酰木聚糖酯酶基因的克隆及生物信息学分析 被引量：1
9
作者 汪文静 吴慧君 +4 位作者 王晓宇 杨颖 厚凌宇 郑瑞珠 谢响明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期122-128,共7页
乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖中的O-乙酰取代基团,消除该基团对木聚糖酶水解的空间阻碍作用,增强木聚糖酶对木聚糖的亲和力和降解能力。以白色链霉菌基因组为模板,利用简并PCR和TAIL-PCR扩增获得长约741 bp阅读框片段,编码247个... 乙酰木聚糖酯酶可以水解乙酰化木聚糖中的O-乙酰取代基团,消除该基团对木聚糖酶水解的空间阻碍作用,增强木聚糖酶对木聚糖的亲和力和降解能力。以白色链霉菌基因组为模板,利用简并PCR和TAIL-PCR扩增获得长约741 bp阅读框片段,编码247个氨基酸。生物信息学分析表明,该多肽片段具有AXE1家族蛋白保守区域;与已知的乙酰木聚糖酯酶蛋白C端区相比,相似性较高,二级和三级结构空间排布特点极为相似;初步判定该多肽片段为白色链霉菌乙酰木聚糖酯酶的C端区域。 展开更多
关键词 白色链霉菌 乙酰木聚糖酯酶 基因克隆 生物信息学
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