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ZNF230基因突变筛查及其与无精症的相关性分析(英文) 被引量：3
1
作者 董景涛 张思仲 +7 位作者 马用信 杨开选 黄明孔 孙岩 何国平 李亚 张炜 彭艳 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期258-260,共3页
目的探讨ZNF230基因与无精症的关系。方法应用变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography,DHPLC)对99例无精症患者与115名健康对照者基因组DNA中ZNF230基因全部6个外显子进行突变筛查。结果检测到ZNF230基因第6... 目的探讨ZNF230基因与无精症的关系。方法应用变性高效液相色谱(denaturinghighperformanceliquidchromatography,DHPLC)对99例无精症患者与115名健康对照者基因组DNA中ZNF230基因全部6个外显子进行突变筛查。结果检测到ZNF230基因第6外显子A316G碱基转换;无精症组与健康对照组之间等位基因频率和基因型频率均差异存在统计学意义(分别为P<0.01和P<0.05);无精症组内GG和GA基因型亚组血清卵泡刺激素水平明显高于AA基因型亚组(P<0.05)。结论ZNF230基因不但可能和无精症相关,而且可能与血清FSH水平有一定相关性。 展开更多
关键词 znf230 基因突变 无精症 卵泡刺激素 基因型 基因频率
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生精相关基因Znf230在小鼠睾丸及精子中的表达和定位研究
2
作者 宋红霞 张思仲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1552-1555,共4页
目的:应用小鼠Znf230多克隆抗血清,对Znf230在小鼠睾丸及精子中的表达及定位进行研究。方法:用RT-PCR分析、Western blot检测、免疫组织化学和免疫荧光染色方法研究Znf230在小鼠不同发育阶段睾丸组织及精子中的表达及亚细胞定位情况。结... 目的:应用小鼠Znf230多克隆抗血清,对Znf230在小鼠睾丸及精子中的表达及定位进行研究。方法:用RT-PCR分析、Western blot检测、免疫组织化学和免疫荧光染色方法研究Znf230在小鼠不同发育阶段睾丸组织及精子中的表达及亚细胞定位情况。结果:小鼠从出生到成年的发育过程中,Znf230的表达水平基本上是稳定的。小鼠出生6 d和12 d时,该蛋白在精原细胞核中表达,从出生18 d到精子发育成熟这个阶段,该蛋白转移到圆形精子细胞、延长精子细胞和精子中表达,具体定位于顶体区域和精子的尾部。结论:Znf230可能在小鼠生精过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 znf230 表达 定位 生精相关基因
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Znf230多克隆抗体的制备及其在小鼠组织中的表达
3
作者 宋红霞 张思仲 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期2145-2147,共3页
目的通过获得小鼠Znf230多克隆抗体,对Znf230在小鼠组织中的表达及定位进行研究。方法扩增小鼠Znf230基因与原核表达载体pGEX-5X-3重组,诱导得到GST-Znf230融合蛋白,纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot和免疫组织... 目的通过获得小鼠Znf230多克隆抗体,对Znf230在小鼠组织中的表达及定位进行研究。方法扩增小鼠Znf230基因与原核表达载体pGEX-5X-3重组,诱导得到GST-Znf230融合蛋白,纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot和免疫组织化学方法研究Znf230在小鼠组织中的表达及定位情况。结果 Znf230多克隆抗体具有较高的特异性,Znf230在小鼠多种组织中均有表达,在脾脏和脑组织中表达量较高,该蛋白在肝细胞、脾细胞、肺支气管上皮细胞细胞核中表达,在肾小管上皮细胞的细胞质中表达,在睾丸组织精子细胞的顶体系统表达。结论成功获得小鼠Znf230多克隆抗体,证实Znf230在小鼠多种组织中表达,它可在肝细胞、脾细胞、肺支气管上皮细胞核及肾小管上皮细胞质中表达,也可在精子细胞的顶体系统表达。 展开更多
关键词 znf230 表达 定位 多克隆抗体
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ZNF230/荧光蛋白融合基因表达载体的构建及其在Cos细胞中的表达与定位 被引量：4
4
作者 许文明 张思仲 +4 位作者 邱为民 何国平 刘运强 马用信 孙岩 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期451-454,共4页
为了用绿色荧光蛋白标记观察人类无精症相关基因ZNF230在Cos7细胞中的蛋白质表达及定位,用PCR方法扩增得到突变的人和小鼠mt ZNF230和mt znf230基因,使其3′端的终止密码TGA突变为TGG,并装入T 载体,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达... 为了用绿色荧光蛋白标记观察人类无精症相关基因ZNF230在Cos7细胞中的蛋白质表达及定位,用PCR方法扩增得到突变的人和小鼠mt ZNF230和mt znf230基因,使其3′端的终止密码TGA突变为TGG,并装入T 载体,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP N1的绿色荧光蛋白(greenfluorescenceprotein,GFP)基因融合,构建了ZNF230—荧光蛋白融合基因表达载体。然后经真核表达质粒-脂质体介导,导入Cos7细胞系。荧光显微镜观察显示:在空白载体pEGFP N1转染的Cos细胞中荧光布满整个细胞,而在转染阳性载体pEGFP ZNF230和pEGFP znf230的Cos细胞中荧光主要聚集在细胞核中。表明转染的Cos细胞系能高效表达人ZNF230和小鼠znf230蛋白,ZNF230基因表达的蛋白定位于细胞核内。 展开更多
关键词 znf230基因 绿色荧光蛋白 基因表达定位 COS细胞
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小鼠Znf230基因启动子与LacZ报告基因融合载体的构建及其在细胞中的表达 被引量：3
5
作者 刘运强 陶大昌 +1 位作者 张思仲 马用信 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期420-424,共5页
通过PCR扩增和限制性内切酶酶切克隆,获得1990bp的小鼠Znf230基因上游序列,经序列测定和P-Match软件分析,发现该段序列中可能含有2个CAAT-box、若干个性别决定因子Sry、Sox5、Sox30,以及数个参与胚胎期器官发生的基因HoxA3、Pax2、En1... 通过PCR扩增和限制性内切酶酶切克隆,获得1990bp的小鼠Znf230基因上游序列,经序列测定和P-Match软件分析,发现该段序列中可能含有2个CAAT-box、若干个性别决定因子Sry、Sox5、Sox30,以及数个参与胚胎期器官发生的基因HoxA3、Pax2、En1等的结合位点.为了研究此段序列的调控功能,构建了该段序列与LacZ基因融合的表达载体pMZnf230pro-LacZ.然后通过转染HeLa和NIH3T3细胞,发现pMZnf230pro-LacZ载体在两种细胞中都表达β-半乳糖苷酶,说明此段序列具有启动子功能. 展开更多
关键词 小鼠znf230基因 启动子 调控因子 表达栽体
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ZNF230基因多态性与无精症相关性研究 被引量：1
6
作者 董景涛 杨开选 +1 位作者 彭远慧 曾苏 《四川医学》 CAS 2005年第4期F002-F002,480,共2页
目的　研究ZNF2 3 0基因多态性与无精症的相关性。方法　通过变性高效液相色谱(denaturinghighperfor manceliquidchromatography ,DHPLC)对60例无精症患者ZNF2 3 0基因全部外显子进行筛查,并与71名正常人进行对照研究。结果　发现ZNF2 ... 目的　研究ZNF2 3 0基因多态性与无精症的相关性。方法　通过变性高效液相色谱(denaturinghighperfor manceliquidchromatography ,DHPLC)对60例无精症患者ZNF2 3 0基因全部外显子进行筛查,并与71名正常人进行对照研究。结果　发现ZNF2 3 0基因第2外显子C164T碱基转换并首次报告其频率;无精症组与正常对照组之间基因型频率和等位基因频率均存在显著性差异(分别为P =0 .0 19和P =0 .0 3 3 )。结论　ZNF2 3 0基因可能与无精症相关。 展开更多
关键词 znf230基因 无精症 高效液相色谱
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