甘草酸二铵对颅脑损伤大鼠神经元活性、脑组织病理及YAP1蛋白的影响

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作者 骆昌云 代永龙 谭正芳 《国际神经病学神经外科学杂志》 2024年第2期18-22,共5页

目的探讨甘草酸二铵(DG)对颅脑损伤大鼠神经元活性、脑组织病理及YES关联蛋白1(YAP1)蛋白的研究。方法将44只SD大鼠随机分为4组,每组11只,健康组、外伤组(颅脑外伤模型)、依达组(颅脑外伤模型给予依达拉奉干预)、甘草组(颅脑外伤模型给... 目的探讨甘草酸二铵(DG)对颅脑损伤大鼠神经元活性、脑组织病理及YES关联蛋白1(YAP1)蛋白的研究。方法将44只SD大鼠随机分为4组,每组11只,健康组、外伤组(颅脑外伤模型)、依达组(颅脑外伤模型给予依达拉奉干预)、甘草组(颅脑外伤模型给予DG干预)。采用Zea Longa法(5分)检测各组大鼠神经功能;用酶联免疫法测定血清白介素-6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用HE染色观察脑组织神经细胞形态学变化;TUNEL法检测各组大鼠海马组织神经细胞凋亡;免疫印迹检测海马组织YAP1、磷酸化YAP1(p-YAP1)、大肿瘤抑制基因1(Lats1)及磷酸化Lats1(p-Lats1)蛋白表达水平。结果与健康组相比,外伤组神经功能评分,IL-6、TNF-α、IL-1β,神经细胞凋亡、YAP1、p-YAP1、Lats1、p-Lats1均升高(P<0.05);与外伤组相比,依达组及甘草组以上指标均降低(P<0.05),依达组和甘草组比较,以上指标差异无统计学意义(P>0.05);与健康组相比,外伤组大鼠海马组织结构紊乱,神经元数目减少,细胞核深染,细胞膜部分消失,依达组和甘草组神经元排列比外伤组整齐有序,肿胀程度减轻,细胞核较清晰。结论甘草酸二铵对颅脑损伤的治疗具有一定积极作用,且与依达拉奉治疗相关相当,其机制可能与改善神经功能、调节炎症因子变化及相关蛋白表达相关。 展开更多

关键词 颅脑损伤 甘草酸二铵 神经元活性 脑组织病理 yap1蛋白

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蒲公英萜醇通过Hippo及Wnt通路影响胃癌细胞增殖及转移的研究 被引量：4

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作者 孙玉成 刘晓巍 片光哲 《延边大学医学学报》 CAS 2021年第1期9-12,共4页

[目的]探讨蒲公英萜醇对胃癌细胞增殖及转移的影响及其机制.[方法]体外培养胃癌AGS细胞,分为对照组和实验组,对照组加入PBS,实验组分别加入10、20、40μmol/L蒲公英萜醇.利用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实... [目的]探讨蒲公英萜醇对胃癌细胞增殖及转移的影响及其机制.[方法]体外培养胃癌AGS细胞,分为对照组和实验组,对照组加入PBS,实验组分别加入10、20、40μmol/L蒲公英萜醇.利用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,蛋白印迹法检测Hippo及Wnt通路核心转录共激活因子YAP1及β-catenin表达.[结果]蒲公英萜醇对体外培养的AGS细胞活力具有抑制作用,实验组各浓度蒲公英萜醇均可促进AGS细胞凋亡,抑制AGS细胞迁移,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);实验组YAP1及β-catenin蛋白表达均被下调,且呈浓度依赖性,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).[结论]蒲公英萜醇具有抗胃癌作用,影响胃癌细胞增殖及迁移的机制认为可能是通过Hippo及Wnt两条信号通路来实现的. 展开更多

关键词 蒲公英萜醇 胃癌 yap1蛋白 Β-连环蛋白

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不同浓度维替泊芬对鼻咽癌细胞株CNE1增殖、侵袭、凋亡的影响及其机制 被引量：2

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作者 陈嵘 郑斯明 +1 位作者 苏年华 左可军 《山东医药》 CAS 2019年第36期32-36,共5页

目的观察不同浓度维替泊芬对鼻咽癌细胞株CNE1增殖、侵袭、凋亡、细胞周期的影响,并探讨及其机制。方法取对数生长期CNE1细胞分为实验组和对照组,实验组分别加入1、2、4μmol/L的维替泊芬,记为A、B、C组,对照组加入等量培养基。采用CCK-... 目的观察不同浓度维替泊芬对鼻咽癌细胞株CNE1增殖、侵袭、凋亡、细胞周期的影响,并探讨及其机制。方法取对数生长期CNE1细胞分为实验组和对照组,实验组分别加入1、2、4μmol/L的维替泊芬,记为A、B、C组,对照组加入等量培养基。采用CCK-8法测算各组细胞存活率(以细胞存活率表示细胞增殖能力),采用细胞克隆形成实验测算细胞克隆形成个数(以细胞克隆形成个数表示细胞克隆形成能力),采用Transwell小室侵袭实验测算侵袭细胞数(以侵袭细胞数表示细胞侵袭能力),采用流式细胞术测算各组细胞凋亡率及各细胞周期细胞百分比,采用实时荧光定量PCR法检测B组及对照组细胞中YAP1、TEAD、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、B细胞瘤-2(Bcl-2)、细胞周期素D1(CyclinD1)、髓细胞组织增生蛋白(MYC)、Axl mRNA,采用Western Blotting法检测B组及对照组细胞中YAP1、TEAD、caspase-3、Bcl-2、CyclinD1、MYC、Axl蛋白。结果A、B、C及对照组细胞培养24 h时细胞存活率分别为85.27%±0.63%、74.18%±1.01%、57.67%±0.92%、100.00%±0.42%,组间相比,P均<0.05;A、B、C及对照组细胞培养48 h时细胞存活率分别为70.35%±0.61%、59.33%±1.27%、41.39%±0.46%、100.00%±0.85%,组间相比,P均<0.05;A、B、C组细胞在培养48 h时的细胞存活率,与24 h时相比,P均<0.05。A、B、C及对照组细胞克隆形成个数分别为183.67±12.92、118.67±10.50、47.33±5.31、253.67±8.18个,组间相比,P均<0.05。A、B、C及对照组细胞侵袭细胞数分别为44.67±2.87、28.67±4.11、16.67±3.68、56.67±5.31个,组间相比,P均<0.05。A、B、C及对照组细胞凋亡率分别为14.52%±1.03%、26.56%±2.10%、38.64%±1.42%、5.31%±0.77%,组间相比,P均<0.05。A组G2/M、S、G0/G1期细胞分别为15.46%±1.74%、42.37%±2.69%、42.17%±1.73%,B组G2/M、S、G0/G1期细胞分别为8.39%±0.77%、34.48%±0.57%、57.13%±0.39%,C组G2/M、S、G0/G1期细胞分别为3.82%±1.89%、26.16%± 展开更多

关键词 维替泊芬 鼻咽癌 yap1蛋白 细胞增殖 细胞侵袭 细胞凋亡 细胞周期

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miR-590-5p通过靶向抑制YAP1的表达抑制A375恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移 被引量：7

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作者 王丽娟 史圣甲 +4 位作者 周艳 穆欣 韩丹 葛睿 牟宽厚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期326-330,336,共6页

目的探索miR-590-5p在A375恶性黑素瘤细胞中的表达及其对A375细胞侵袭和迁移能力的影响和机制。方法应用实时定量PCR技术检测A375细胞与人正常黑素细胞中miR-590-5p的表达水平;应用TranswellTM实验和划痕实验检测miR-590-5p对A375细胞... 目的探索miR-590-5p在A375恶性黑素瘤细胞中的表达及其对A375细胞侵袭和迁移能力的影响和机制。方法应用实时定量PCR技术检测A375细胞与人正常黑素细胞中miR-590-5p的表达水平;应用TranswellTM实验和划痕实验检测miR-590-5p对A375细胞侵袭和迁移的影响;应用荧光素酶报告基因实验明确yes相关蛋白(YAP1)是否为miR-590-5p的直接靶分子;应用实时定量PCR及Western blot法检测miR-590-5p对YAP1表达水平的影响。结果 miR-590-5p在A375细胞中的表达水平显著低于正常黑素细胞;与对照(miR-590-5p-NC)组相比,miR-590-5p mimcs组细胞侵袭和迁移能力均受到显著抑制;YAP1为miR-590-5p的直接靶分子;与miR-590-5p-NC组相比,miR-590-5p mimcs组细胞中YAP1 mRNA及蛋白的表达均受到抑制。结论 miR-590-5p在A375细胞中低表达,并通过靶向抑制YAP1的表达调控A375细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多

关键词 miR-590-5p yap1 侵袭 迁移 恶性黑素瘤

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Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进人视网膜微血管内皮细胞的血管生成 被引量：3

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作者 梁晓茜 陈王灵 陈运信 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第2期94-98,共5页

目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24... 目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24 h,GsMTx4+VP组用GsMTx4联合Yap1的拮抗剂VP(4μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h,GsMTx4+Stattic组则用GsMTx4联合STAT3的拮抗剂Stattic(1.5μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h。CCK-8法检测各组hRMECs的增殖能力。小管形成实验观察各组hRMECs的血管生成能力,记录小管分支数。qRT-PCR和Western blot检测对照组和GsMTx4组hRMECs中Piezo、Yap1、STAT3 mRNA和蛋白的表达水平。使用免疫共沉淀技术检测各组hRMECs中Yap1和STAT3的结合作用。结果与对照组相比,GsMTx4组hRMECs的增殖率和小管分支数均明显增加(均为P<0.05),Piezo蛋白表达下调,而Yap1、STAT3蛋白表达均上调,且Yap1和STAT3的结合作用明显增加(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs中Yap1和STAT3的蛋白表达均下调,且Yap1和STAT3的结合作用减弱(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs增殖率和小管分支数均降低(均为P<0.05)。结论Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进hRMECs的血管生成。 展开更多

关键词 Piezo拮抗剂GsMTx4 yap1/STAT3信号通路 人视网膜微血管内皮细胞 血管生成

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亚低温上调冷休克蛋白RBM3表达减轻肾脏缺血-再灌注损伤 被引量：4

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作者 宋克芹 肖琦 +1 位作者 肖建生 罗凯锋 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期571-578,共8页

目的探讨亚低温对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的作用,以及RNA结合基序蛋白3(RBM3)及其下游效应分子在这一过程中的表达情况。方法健康SD雄性大鼠18只,随机分为正常对照(NC)组、IRI组和亚低温预处理(MHP)组,每组6只。通过检测血清肌酐水平... 目的探讨亚低温对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的作用,以及RNA结合基序蛋白3(RBM3)及其下游效应分子在这一过程中的表达情况。方法健康SD雄性大鼠18只,随机分为正常对照(NC)组、IRI组和亚低温预处理(MHP)组,每组6只。通过检测血清肌酐水平评价肾功能,苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织损伤情况,蛋白质印迹法检测肾脏组织的RBM3、Yes相关蛋白1(YAP1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量,免疫组织化学染色进一步检测RBM3及YAP1蛋白的表达情况,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肾脏组织细胞凋亡情况,通过测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性检测肾脏组织氧化应激水平。结果与NC组相比较,IRI组和MHP组血清肌酐水平、肾脏组织病理损伤评分均升高,RBM3、YAP1和Nrf2蛋白表达水平均升高,Bcl-2/Bax比值均降低,细胞凋亡率均升高,MDA含量均升高,SOD活性均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与IRI组相比较,MHP组血清肌酐水平、肾脏组织病理损伤评分均降低,RBM3、YAP1和Nrf2蛋白表达水平均升高,Bcl-2/Bax比值升高,细胞凋亡率降低,MDA含量降低,SOD 活性升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 亚低温对肾脏IRI 具有保护作用,可减轻IRI 所致细胞凋亡和氧化应激损伤,其机制可能为亚低温上调RBM3 及其下游效应分子YAP1 和Nrf2 的表达水平。 展开更多

关键词 亚低温 RNA结合基序蛋白3(RBM3) Yes相关蛋白1(yap1) 核因子E2相关因子2(Nrf2) 肾移植 缺血-再灌注损伤 氧化应激 丙二醛(MDA) 超氧化物歧化酶(SOD)

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Yes相关蛋白1在乳腺癌中的表达及临床意义 被引量：3

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作者 李瑞平 曾铮 +2 位作者 赵敏 魏艳华 施中元 《解剖学研究》 CAS 2016年第6期468-470,474+512,共5页

目的探讨yes相关蛋白1(YAP1)在正常乳腺组织及乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学Envision法检测133例乳腺浸润性导管癌,37例乳腺导管原位癌及47例癌旁组织中YAP1的表达。结果 (1)YAP1在乳腺癌旁组织中的阳性率(81%)明... 目的探讨yes相关蛋白1(YAP1)在正常乳腺组织及乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学Envision法检测133例乳腺浸润性导管癌,37例乳腺导管原位癌及47例癌旁组织中YAP1的表达。结果 (1)YAP1在乳腺癌旁组织中的阳性率(81%)明显高于乳腺癌组织中的阳性率(46%)(P<0.05);(2)YAP1在乳腺导管原位癌中的阳性率为43%,与乳腺浸润性导管癌之间的差异无统计学意义(P=0.925);(3)YAP1阳性表达与患者年龄、肿瘤大小及淋巴结转移转移无关,而与乳腺癌的分子分型有关(P<0.05)。结论在乳腺癌中YAP1可能作为抑癌基因发挥作用,YAP1的表达对乳腺癌的治疗有一定意义。 展开更多

关键词 yes相关蛋白1(yap1) 乳腺癌 免疫组织化学

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YAP1在稽留流产绒毛中的表达及对JAR细胞生物学行为的影响 被引量：2

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作者 王华倩 余亚君 +2 位作者 张涛 潘海滔 何尧 《绍兴文理学院学报》 2022年第8期69-74,共6页

目的:探讨YAP1蛋白对人胚绒毛癌细胞(JAR)增殖、迁移与侵袭能力的调控作用及其与稽留流产发病的可能机制.方法:收集2018年7月在绍兴市妇幼保健院确诊为稽留流产的患者4例为实验组,选取同期自愿要求行人工流产的正常早孕妇女4例为对照组... 目的:探讨YAP1蛋白对人胚绒毛癌细胞(JAR)增殖、迁移与侵袭能力的调控作用及其与稽留流产发病的可能机制.方法:收集2018年7月在绍兴市妇幼保健院确诊为稽留流产的患者4例为实验组,选取同期自愿要求行人工流产的正常早孕妇女4例为对照组,通过RT-qPCR和Western Blot验证稽留流产绒毛组织中YAP1的表达水平.用siRNA干扰下调JAR细胞中YAP1的表达(si-YAP1),采用RTCA监测其增殖、迁移和侵袭能力的变化.Western Blot法分析YAP1蛋白表达下调后的细胞中凋亡相关蛋白、胚胎植入相关蛋白表达.结果:与对照组比较,YAP1在稽留流产患者绒毛组织中的表达上调;YAP1表达降低显著抑制了JAR细胞增殖、迁移和侵袭能力,凋亡相关蛋白BAX表达上调,胚胎植入相关蛋白PI3K和Akt表达下调,IRS1表达上调.结论:YAP1的异常表达很可能通过调控凋亡发生和影响胚胎植入相关信号通路来参与稽留流产的发病过程. 展开更多

关键词 yap1 稽留流产 滋养细胞 凋亡 胚胎植入

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Yapl蛋白在前列腺癌中的表达及其临床病理学意义 被引量：3

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作者 胡晓勇 徐月敏 +2 位作者 乔勇 俞建军 陈杰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期280-281,F0003,F0004,共4页

目的探讨Yapl蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测Yapl在35例前列腺癌组织和16例良性前列腺增生组织中的表达，用平均吸光度值（积分吸光度／面积，IA／area）代表阳性细胞的表达水平；并探讨Yapl与... 目的探讨Yapl蛋白在前列腺癌中的表达及临床病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测Yapl在35例前列腺癌组织和16例良性前列腺增生组织中的表达，用平均吸光度值（积分吸光度／面积，IA／area）代表阳性细胞的表达水平；并探讨Yapl与前列腺癌临床病理参数之间的关系。结果Yapl在良性前列腺增生组的表达水平（IA／area=0．1867±0．0753）明显高于前列腺癌组（IA／area=0．0782-4-0．0614），两组差异有统计学意义（P〈0．01，F=16．942）；Yapl蛋白主要表达在细胞质。Yapl蛋白表达程度与前列腺癌的Gleason评分无明显相关（P〉0．05），但Yapl在Gleason7分组（IA／area=0．0548±0．0441）的表达强度高于Gleason9分组（IA／area=0．1296-4-0．0957）（P〈0．05）。结论前列腺癌中Yapl蛋白低表达可能与前列腺的发生、发展有关。 展开更多

关键词 yap1 前列腺癌 免疫组织化学

原文传递

miR-375下调YAP1对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：2

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作者 夏阳 李静喆 +2 位作者 马守成 苏飞 段玲 《中国肿瘤临床与康复》 2020年第9期1028-1032,共5页

目的探讨miR-375靶向调控Yes相关蛋白(YAP)的表达对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法选取2018年1月至2019年6月间兰州市第一人民医院收治的行手术切除的37例结直肠癌患者的癌组织及对应的癌旁组织标本、人结直肠癌细胞系HCT116、... 目的探讨miR-375靶向调控Yes相关蛋白(YAP)的表达对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法选取2018年1月至2019年6月间兰州市第一人民医院收治的行手术切除的37例结直肠癌患者的癌组织及对应的癌旁组织标本、人结直肠癌细胞系HCT116、NCI-H716、HRC-99和正常结直肠上皮细胞系FHC,采用RT-qPCR分析比较结直肠癌组织与对应癌旁组织及结直肠癌细胞系与FHC细胞中miR-375的表达水平。在细胞系水平,应用CCK-8实验、Transwell迁移实验检测过表达miR-375对结直肠癌细胞增殖及迁移能力的影响,应用Western blot检测过表达miR-375的HCT116细胞中YAP1的表达变化。结果在结直肠癌组织中,miR-375的相对表达量低于癌旁组织,YAP1的相对表达量高于癌旁组织。在所有检测结直肠癌细胞系中,HCT116细胞中miR-375的表达水平最低,过表达miR-375后,HCT116细胞的增殖、迁移能力减弱,YAP1表达水平降低。数据库分析显示,YAP1可能是miR-375下游调控的靶基因,且二者在结直肠癌中的表达呈负相关。结论miR-375可能通过抑制YAP1的表达在结直肠癌中发挥抑癌作用。 展开更多

关键词 miR-375 yap1 结直肠肿瘤 结直肠癌细胞系 增殖 迁移

原文传递

饥饿微环境激活YAP1蛋白调控自噬促进膀胱癌细胞的增殖

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作者 李庭浩 童行 +5 位作者 曹洪豪 刘旭东 朱俊龙 秦子家 尹思文 何卫阳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第23期2542-2551,共10页

目的探究饥饿微环境下膀胱癌细胞恶性增殖能力的变化及其机制。方法将膀胱癌T24细胞分为2组,正常组:细胞正常培养,饥饿组:细胞采用不含血清的HBSS处理6 h模拟癌细胞饥饿微环境;分别予以自噬抑制剂氯喹(CQ)或siRNA敲减YAP1基因,观察自噬... 目的探究饥饿微环境下膀胱癌细胞恶性增殖能力的变化及其机制。方法将膀胱癌T24细胞分为2组,正常组:细胞正常培养,饥饿组:细胞采用不含血清的HBSS处理6 h模拟癌细胞饥饿微环境;分别予以自噬抑制剂氯喹(CQ)或siRNA敲减YAP1基因,观察自噬水平变化以及增殖能力的改变。同时以YAP1及自噬相关基因LC3B表达量构建风险预测模型,分析二者表达量与临床预后的相关性。结果CCK-8及克隆形成实验显示饥饿诱导后膀胱癌细胞增殖能力显著增加(P<0.01),且增殖能力的改变是通过增加细胞周期由G_(1)期进入S期,而两组细胞凋亡差异无统计学意义。Western blot及免疫荧光检测P62蛋白降解程度及LC3-Ⅱ/Ⅰ比值,结果显示饥饿可诱导膀胱癌细胞自噬水平上调(P<0.05),而采用CQ阻断自噬流后膀胱癌细胞增殖能力不再受饥饿影响。YAP1蛋白在饥饿诱导后可出现过表达及磷酸化水平的下降(P<0.01),而抑制自噬不影响这一结果。利用siRNA干扰YAP1的表达后膀胱癌细胞自噬水平受到明显抑制,同时增殖能力下降(P<0.05)。生物信息学分析发现YAP1在恶性程度高的膀胱癌患者癌组织中表达水平更高,且YAP1与LC3B基因表达水平越高的患者预后更差。结论饥饿诱导膀胱癌细胞YAP1的过表达,通过增强自噬水平促进膀胱癌细胞恶性增殖,且YAP1与自噬在膀胱癌发展过程中起到相互协同的促癌作用。 展开更多

关键词 膀胱癌 自噬 yap1 细胞增殖 肿瘤微环境

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