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柑桔溃疡病菌PCR快速检验检疫技术研究 被引量:32
1
作者 王中康 孙宪昀 +2 位作者 夏玉先 周常勇 殷幼平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期14-20,共7页
柑桔溃疡病是严重影响全世界柑桔生产的重大检疫性病害,根据柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri)新近公布的全基因组中独有的保守蛋白基因序列,设计筛选出一对种特异性引物(JYF5/JYR5),能专一地扩增检出柑桔组织表面所带溃... 柑桔溃疡病是严重影响全世界柑桔生产的重大检疫性病害,根据柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri)新近公布的全基因组中独有的保守蛋白基因序列,设计筛选出一对种特异性引物(JYF5/JYR5),能专一地扩增检出柑桔组织表面所带溃疡病菌的DNA靶带(413 bp)。而柑桔叶面附生的非致病性黄单胞菌、野油菜黄单胞菌近缘种以及健康柑桔样品都不能扩增;靶细菌DNA检测下限1.56 pg/μL,靶细菌悬浮液检测下限10 cfu/μL;在不同PCR仪及各种控温方式下都能稳定地扩增出特征性靶带。这一特异、准确的柑桔溃疡病菌PCR检验技术和研制的预包被固相化PCR检测试剂盒已开始用于我国非疫生产区建设中柑桔苗木、果实的病害检疫检验。 展开更多
关键词 柑桔 溃疡病菌 PCR检验 检疫技术
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柑橘溃疡病生防菌株CQBS03的鉴定及其培养特性研究 被引量:27
2
作者 陈力 王中康 +3 位作者 黄冠军 曹月青 夏玉先 殷幼平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期2537-2545,共9页
【目的】筛选鉴定柑橘溃疡病菌拮抗菌,研究其培养特性及拮抗物质的初步性质,为柑橘溃疡病的生物制剂研制奠定基础。【方法】利用对峙培养法筛选对柑橘溃疡病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通过对菌株形态、生理生化特征以及16SrDNA序列... 【目的】筛选鉴定柑橘溃疡病菌拮抗菌,研究其培养特性及拮抗物质的初步性质,为柑橘溃疡病的生物制剂研制奠定基础。【方法】利用对峙培养法筛选对柑橘溃疡病菌具有良好抑制作用的生防菌,并通过对菌株形态、生理生化特征以及16SrDNA序列分析鉴定其分类地位;以单因素试验和正交设计方法对影响CQBS03菌株抑菌活性物质产生的各种培养条件进行优化;利用硫酸铵沉淀获得抑菌物质粗提物并测定其对温度、蛋白酶及氯仿的敏感性。【结果】经鉴定CQBS03为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。CQBS03抑菌活性成分主要存在于培养液中,能被80%饱和度硫酸铵沉淀,最高可耐受的温度范围为60~70℃;活性成分在280nm处有最大吸收峰,分子量大于10kD,对蛋白酶K和胰蛋白酶稳定,而对氯仿部分敏感。培养特性研究表明,CQBS03最适培养基为YPG液体培养基,抑菌物质产生的最适培养条件为:pH8.0左右,28℃培养72h。【结论】枯草芽孢杆菌CQBS03所产生的抑菌物质主要成分是蛋白质,且属于外泌型蛋白;该抑菌蛋白对多种植物病原菌有抑菌作用,尤其对柑橘溃疡病菌抑菌活性高,稳定性好,是一株极具开发潜力的生防菌株。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 拮抗细菌 生物防治 柑橘溃疡病 抑菌蛋白
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柑桔溃疡病菌离体叶接种检验法的研究 被引量:21
3
作者 李云锋 李祥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期421-423,共3页
对柑桔溃疡菌的离体叶接种检验法进行了研究和技术规范。结果表明 ,离体叶接种法是一种效果直观可靠、操作简便易行的检验溃疡病菌的方法 ,其检测水平可达到 1.5 5× 10 3 -4 cfu/ml;其技术规范为 :供接种的柑桔品种应为甜橙类感病... 对柑桔溃疡菌的离体叶接种检验法进行了研究和技术规范。结果表明 ,离体叶接种法是一种效果直观可靠、操作简便易行的检验溃疡病菌的方法 ,其检测水平可达到 1.5 5× 10 3 -4 cfu/ml;其技术规范为 :供接种的柑桔品种应为甜橙类感病品种 (如脐橙 ) ,供接种的离体叶片以达到定型大小的新梢成叶最佳 ;采用针刺后滤纸片贴敷菌液接种 ,最适孵育温度为 2 8~ 32℃ ,最佳保湿方法为吸水纸保湿法。 展开更多
关键词 柑桔 溃疡病菌 离体叶接种 检测 致病性
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柑橘溃疡病检疫与防治 被引量:19
4
作者 黄幼玲 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期132-135,共4页
细菌性溃疡病是严重危害世界柑橘产业的重大检疫性病害之一,柑橘溃疡病引起落叶、枯枝和落果,溃疡病斑导致果品质量降低,影响外贸出口。世界各国长期以来对病害采取严格苗木检疫、疫区病树铲除、零星病害药剂防控的综合治理措施;新近美... 细菌性溃疡病是严重危害世界柑橘产业的重大检疫性病害之一,柑橘溃疡病引起落叶、枯枝和落果,溃疡病斑导致果品质量降低,影响外贸出口。世界各国长期以来对病害采取严格苗木检疫、疫区病树铲除、零星病害药剂防控的综合治理措施;新近美国农业部推出"柑橘健康种植行动计划";2007年7月中国农业部正式启动"柑橘非疫区建设和维护"项目,总体目标在于防控柑橘溃疡病的发生和传播,确保柑橘产业的安全。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 检疫检验 防治
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柑橘溃疡病菌的药剂筛选及抗药性分析 被引量:16
5
作者 陈雪凤 雷艳宜 +3 位作者 叶凎 丁钿 曾冬根 刘琼光 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期460-464,469,共6页
柑橘溃疡病是柑橘生产上重要细菌病害,药剂防治是其主要的防治措施.本文通过平板抑菌圈试验,测定了来自广东和江西等地的21个柑橘溃疡病细菌对8种化学药剂的敏感性.结果表明:叶枯唑1 000×、新植霉素2 800×、水合霉素1 300... 柑橘溃疡病是柑橘生产上重要细菌病害,药剂防治是其主要的防治措施.本文通过平板抑菌圈试验,测定了来自广东和江西等地的21个柑橘溃疡病细菌对8种化学药剂的敏感性.结果表明:叶枯唑1 000×、新植霉素2 800×、水合霉素1 300×等3种药剂对供试的21个柑橘溃疡病菌菌株均没有抑菌作用;链霉素、中生菌素、溃疡克星、氢氧化铜.锌和必备等5种药剂对溃疡病菌表现不同程度的抑菌作用,其中,链霉素的抑菌作用最强;部分溃疡病菌株对这5种药剂产生了不同程度的抗药性.田间试验结果表明,链霉素、中生菌素对溃疡病防治效果较好. 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 药剂 抗药性 化学防治
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矿物油增效助剂混用氢氧化铜防治柑橘溃疡病效果评价 被引量:14
6
作者 全金成 江一红 +1 位作者 陈腾土 谭炳林 《南方园艺》 2016年第5期29-32,共4页
在2016年8-9月甜橙秋梢期进行了矿物油农用增效助剂混用氢氧化铜防治柑橘溃疡病田间试验。结果表明,97%矿物油增效助剂(百农乐)300倍液+58.3%氢氧化铜水分散剂(志信2000)1000倍液、单独喷施58.3%氢氧化铜水分散剂1000倍液和... 在2016年8-9月甜橙秋梢期进行了矿物油农用增效助剂混用氢氧化铜防治柑橘溃疡病田间试验。结果表明,97%矿物油增效助剂(百农乐)300倍液+58.3%氢氧化铜水分散剂(志信2000)1000倍液、单独喷施58.3%氢氧化铜水分散剂1000倍液和空白对照区的病叶率、病情指数分别为13.05%、2.97,54.01%、16.8和46.09%、17.66。97%矿物油增效助剂300倍液+58.3%氢氧化铜水分散剂1000倍液和单独喷施58.3%氢氧化铜水分散剂1000倍液的防治效果分别为83.18%和4.87%。97%矿物油增效助剂可以显著提高氢氧化铜对柑橘溃疡病的防治效果,保护新梢免受病菌感染危害。 展开更多
关键词 矿物源农用增效助剂 氢氧化铜 柑橘溃疡病 防治效果 增效作用.
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柑橘病害生防放线菌的分离筛选及抑菌作用研究 被引量:13
7
作者 刘冰 黎园 +1 位作者 丁莎 宋水林 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期889-892,共4页
通过稀释法对从赣南柑橘园采集的土样进行微生物分离,获得细菌、真菌和放线菌共52株,其中真菌3株、细菌27株、放线菌22株。进一步通过皿内实验筛选到1株对柑橘炭疽病菌和溃疡病菌有较强抑制作用、且效果稳定的放线菌株ML27,对其进行抑... 通过稀释法对从赣南柑橘园采集的土样进行微生物分离,获得细菌、真菌和放线菌共52株,其中真菌3株、细菌27株、放线菌22株。进一步通过皿内实验筛选到1株对柑橘炭疽病菌和溃疡病菌有较强抑制作用、且效果稳定的放线菌株ML27,对其进行抑菌活性测定和抑菌机理初探。结果表明,该菌株对炭疽病菌的抑制率为72.15%,对溃疡病菌的抑菌圈为2.05 cm;其抑菌机理主要是对真菌的细胞壁产生影响,对细菌的菌体具有溶解作用。 展开更多
关键词 放线菌 柑橘炭疽病菌 柑橘溃疡病菌 拮抗作用
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柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法的建立 被引量:11
8
作者 张仑 殷幼平 +1 位作者 吴瑜佳 王中康 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期95-101,共7页
建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP和快速LAMP检测方法,使其能应用于基层检验检疫部门对病害的快速检测。利用柑橘溃疡病菌基因组特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化反应条件,建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP检测体系;在普通LAMP引物的基础上设... 建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP和快速LAMP检测方法,使其能应用于基层检验检疫部门对病害的快速检测。利用柑橘溃疡病菌基因组特有的保守区域设计LAMP引物,通过优化反应条件,建立柑橘溃疡病菌的普通LAMP检测体系;在普通LAMP引物的基础上设计一对环引物,建立柑橘溃疡病菌的快速LAMP检测体系,并以多种参比菌DNA以及健康柑橘叶片基因组DNA为模板对普通LAMP和快速LAMP检测体系的特异性进行了验证,利用柑橘溃疡病菌菌液和DNA溶液梯度稀释液对普通LAMP和快速LAMP检测体系的灵敏度进行了验证。普通LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25×104cfu和2.03×10-1 ng,快速LAMP检测体系菌体和DNA检测灵敏度分别达到了2.25cfu和2.03×10-5 ng。在特异性测试中,普通LAMP检测体系与快速LAMP检测体系均仅对柑橘溃疡病菌进行扩增,对非靶标菌和柑橘叶片基因组DNA不产生扩增,普通LAMP与快速LAMP检测体系特异性测试结果一致。快速LAMP检测体系在0.5h内就可以达到普通LAMP检测体系的扩增量,是普通LAMP检测体系反应时间的一半,大大提高了检测的效率;快速LAMP检测体系菌悬液和DNA检测灵敏度均比普通LAMP检测体系提高了10 000倍。成功地建立了柑橘溃疡病菌的普通LAMP及快速LAMP检测方法,为柑橘溃疡病菌的检测提供了一种新的简便、快速的检测手段。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 环介导等温扩增 LAMP 检疫
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3种杀菌剂对柑桔溃疡病菌的室内毒力测定 被引量:10
9
作者 姚廷山 周常勇 +4 位作者 胡军华 冉春 李鸿筠 刘浩强 肖田 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1026-1029,共4页
为筛选防治柑桔溃疡病的高效药剂,将23种常见商品杀菌剂分别稀释成200 mg/L,采用喷雾法进行室内抑菌试验,选择3种初筛抑菌效果较好的药剂进行室内毒力测定。结果表明,噻霉酮、农用链霉素、溴菌腈的抑菌效果较好,其EC50分别为46.59、86.1... 为筛选防治柑桔溃疡病的高效药剂,将23种常见商品杀菌剂分别稀释成200 mg/L,采用喷雾法进行室内抑菌试验,选择3种初筛抑菌效果较好的药剂进行室内毒力测定。结果表明,噻霉酮、农用链霉素、溴菌腈的抑菌效果较好,其EC50分别为46.59、86.18、102.91 mg/kg,噻霉酮的毒性最强。结合供试药剂有效成分和作用机理的比较,确定农用链霉素效果最佳。 展开更多
关键词 杀菌剂 柑桔溃疡病菌 毒力
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苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑制及机理研究 被引量:10
10
作者 廖石榴 尹维 +1 位作者 廖晓兰 张亚 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期544-550,共7页
通过测定苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑菌活性、菌液的OD600nm值、电导率、蛋白质含量、保护酶和呼吸代谢途径酶活性,探索苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑菌机理。结果表明:苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的室内平板... 通过测定苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑菌活性、菌液的OD600nm值、电导率、蛋白质含量、保护酶和呼吸代谢途径酶活性,探索苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的抑菌机理。结果表明:苋菜乙酸乙酯提取物对柑橘溃疡病菌的室内平板抑菌圈直径在15 mm以上,最低抑菌质量浓度MIC为3.68 mg/m L;苋菜乙酸乙酯提取物不仅延迟了病原菌进入对数生长期的时间,而且使其电导率增加了15%;苋菜乙酸乙酯提取物对过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)的酶活力的抑制率分别为78.43%、68.63%、63.14%、68.00%。扫描电镜观察发现,苋菜乙酸乙酯提取物使柑橘溃疡病菌的菌体细胞膜遭受损伤,菌体发生裂解;透射电镜观察发现,苋菜乙酸乙酯提取物使柑橘溃疡病菌的细胞壁和细胞膜结构受损,胞内空白面积增大,细胞质外泄,菌体裂解。 展开更多
关键词 苋菜 乙酸乙酯提取物 柑橘溃疡病菌 抑菌机理
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柑橘溃疡病生防细菌的分离鉴定 被引量:10
11
作者 陈娇梅 蔡学清 +1 位作者 邱思鑫 胡方平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2014年第7期1398-1403,共6页
为了从柑橘上获得能防治柑橘溃疡病的生防细菌,从福州3个地区的柑橘园采集不同柑橘品种的叶片、春稍和花,用稀释分离法分离得到84株细菌菌株,用平板抑菌圈法筛选获得11株对柑橘溃疡病菌具有拮抗作用的菌株;用离体叶片防效筛选获得39株... 为了从柑橘上获得能防治柑橘溃疡病的生防细菌,从福州3个地区的柑橘园采集不同柑橘品种的叶片、春稍和花,用稀释分离法分离得到84株细菌菌株,用平板抑菌圈法筛选获得11株对柑橘溃疡病菌具有拮抗作用的菌株;用离体叶片防效筛选获得39株对柑橘溃疡病具有50%以上防效的菌株,占菌株总数的46.4%。对3株防效显著的拮抗菌株YH1、YS5和NY20进一步进行防效测定,结果表明:菌株培养液的防治效果最好,菌体次之,代谢产物最差;对这3株细菌的β-1,4-葡聚糖酶、蛋白酶和β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶活性进行测定,结果表明酶活性的强弱与防病效果有一定的相关性。经过16S rDNA序列分析,革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢染色和生理生化测定,确定这3个菌株均属于芽孢杆菌属,其中菌株YH1鉴定为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病 拮抗菌 芽孢杆菌 生物防治
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两种植物病原黄单胞菌基因组中同义密码子使用的分析 被引量:5
12
作者 钱韦 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期97-106,共10页
根据已释放的基因组序列,对野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)和地毯草黄单胞菌柑桔致病变种(X.axonopodis pv.citri,Xac)的密码子使用进行了分析。相对同义密码子使用值(relative sy-nonymous c... 根据已释放的基因组序列,对野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)和地毯草黄单胞菌柑桔致病变种(X.axonopodis pv.citri,Xac)的密码子使用进行了分析。相对同义密码子使用值(relative sy-nonymous codon usage,RSCU)的计算表明,它们具有高度相似的密码子使用模式。2个基因组密码子第3位的GC含量(GC3s)平均达0.806±0.077(Xcc)和0.791±0.075(Xac),倾向于使用GC含量较高的密码子。对有效密码子数量和密码子适应指数的分析表明,Xcc与Xac基因组中,高表达基因具有较高的GC含量,倾向于使用少数种类的密码子,而低表达基因具有较高的AT含量,倾向于随机地使用密码子。对密码子使用绝对次数进行的对应分析也证明了上述结论。同时,计算也证明了基因在基因组中的位置不影响密码子使用的模式。因此,基因组的GC含量、基因的表达水平和基因的种类与起源是影响这2个基因组密码子使用的主要因素。 展开更多
关键词 植物病原 黄单胞菌 基因组 同义密码子 使用分析
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应用斑点免疫技术快速检测柑桔溃疡病菌 被引量:3
13
作者 王中康 罗怀海 +4 位作者 舒正义 沈俊 柏贤辉 谢忠友 樊升玉 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 1997年第6期529-532,共4页
应用改进的斑点免疫技术在国产微孔滤膜上检测柑桔溃疡病菌(Xan-thomonasaxonopodispv.citri)。结果表明,靶细菌检测下限为1×104细胞/ml,柑桔无症材料浸出液稀释(128倍)仍可检出。... 应用改进的斑点免疫技术在国产微孔滤膜上检测柑桔溃疡病菌(Xan-thomonasaxonopodispv.citri)。结果表明,靶细菌检测下限为1×104细胞/ml,柑桔无症材料浸出液稀释(128倍)仍可检出。经柑桔叶面腐生黄单胞及近缘细菌交叉吸收,提高了多克隆抗血清特异性,能有效地避免假阳性。3种HRP-标结结合物的效果为HRP-SpA>HRP-IgG(鼠抗兔)>HRP-IgG(羊抗兔)。封闭液采用TBS+0.1%曲拉通或0.5%吐温20,吐温80均可获得白色滤膜背景。对全国8省38县518个柑桔无症样品DIA检验结果,平均带菌率31.82%,符合实际病情。 展开更多
关键词 检测 柑桔 溃疡病菌 斑点免疫
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含肟酯/醚结构的枯茗醛衍生物合成及抑菌活性
14
作者 方成江 郭倩倩 +2 位作者 郭晴晴 龙雪 郑玉国 《化学研究与应用》 CAS 北大核心 2024年第2期270-276,共7页
以孜然精油的主要成分枯茗醛为原料,设计合成了系列含肟酯/醚结构的枯茗醛衍生物18个,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR和HRMS进行了结构表征;以地毯草黄单胞柑橘致病变种和水稻黄单胞菌为对象,采用浑浊度法对目标化合物的抑菌活性进行了评... 以孜然精油的主要成分枯茗醛为原料,设计合成了系列含肟酯/醚结构的枯茗醛衍生物18个,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR和HRMS进行了结构表征;以地毯草黄单胞柑橘致病变种和水稻黄单胞菌为对象,采用浑浊度法对目标化合物的抑菌活性进行了评估。抑菌活性测试结果表明:化合物(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(3-甲氧基苯甲酰基)肟(4i)在质量浓度50μg·mL^(-1)下对地毯草黄单胞柑橘致病变种的抑制率为3280%,优于对照药剂叶枯唑(1688%);目标化合物(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(苯甲酰基)肟(4d)、(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(4-三氟甲基苯甲酰基)肟(4h)和(Z)-4-异丙基苯甲醛-O-(3-甲氧基苯甲酰基)肟(4i)在质量浓度100μg·mL-1下对地毯草黄单胞柑橘致病变种的抑制率分别为60.3%、31.37%和33.30%,优于对照药剂叶枯唑的抑制率(45.82%)。 展开更多
关键词 枯茗醛 肟酯/醚 地毯草黄单胞柑橘致病变种 水稻黄单胞菌 抑菌活性
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湖南省柑橘溃疡病病菌生理生化特性初步研究 被引量:7
15
作者 刘鹏 易图永 +2 位作者 安然 肖启明 邓子牛 《中国植保导刊》 北大核心 2009年第6期5-8,共4页
通过对湖南省境内分离的10个柑橘溃疡病菌株进行8项生化特性和17项生理检测,发现10个菌株在硝酸盐还原、H2S生成、淀粉酶、氧化酶、过氧化氢酶等生化特征上完全相同,但对醋酸盐、D-果糖、α-半乳糖、蔗糖、鼠李糖等的利用能力上有差异... 通过对湖南省境内分离的10个柑橘溃疡病菌株进行8项生化特性和17项生理检测,发现10个菌株在硝酸盐还原、H2S生成、淀粉酶、氧化酶、过氧化氢酶等生化特征上完全相同,但对醋酸盐、D-果糖、α-半乳糖、蔗糖、鼠李糖等的利用能力上有差异。通过对生理检测差异性进行聚类分析,发现湖南省不同柑橘产区的A菌系间存在一定的差异性。 展开更多
关键词 柑橘溃疡病菌 生理生化测定
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PCR、DIA与致病性测定法检测柑桔溃疡病菌的比较 被引量:5
16
作者 王中康 夏玉先 +2 位作者 孙宪昀 周常勇 殷幼平 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1728-1732,共5页
依据柑桔溃疡病菌全基因组序列的独有保守区域设计筛选出的特异性引物对JYF5/JYR5,用于柑桔溃疡病菌的PCR检测,具有很好的检测特异性、灵敏度和稳定性。同时比较了PCR与DIA(斑点免疫结合技术)及传统的致病性测定法在检测灵敏度、稳定性... 依据柑桔溃疡病菌全基因组序列的独有保守区域设计筛选出的特异性引物对JYF5/JYR5,用于柑桔溃疡病菌的PCR检测,具有很好的检测特异性、灵敏度和稳定性。同时比较了PCR与DIA(斑点免疫结合技术)及传统的致病性测定法在检测灵敏度、稳定性及田间样品检出率等方面的差异。结果表明,PCR的检测灵敏度可达103~104cfu·ml-1(每个反应体积约10个细菌),明显高于DIA(104~105cfu·ml-1,每个样点约300个细菌);PCR、DIA和致病性测定法检测田间显症样品的检出率均可达到100%,而检测柑桔无症样品的检出率依次降低。此外,通过排除PCR抑制物质和在PCR反应体系中加入终浓度为15%的甘油,有效地降低了检测中存在的假阴性。 展开更多
关键词 PCR DIA 斑点免疫结合技术 致病性测定 柑桔 溃疡病 检测技术 地毯草黄单胞杆菌柑桔致病变种
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赣南脐橙溃疡病菌菌系分化初步研究 被引量:4
17
作者 郭青云 李坊贞 +3 位作者 方玮 Simon Rayner 陈玲 张慧琴 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期278-282,共5页
从赣南6县市分离得到22株脐橙溃疡病菌并对其进行25项生理生化试验,结果表明,在所测试的16项生理特征中有8项(果糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、柠檬酸盐、醋酸盐、耐盐性(1%~3%)和pH(5.0~8.0),反应结果相同,而在对蔗糖、木糖、肌醇、山... 从赣南6县市分离得到22株脐橙溃疡病菌并对其进行25项生理生化试验,结果表明,在所测试的16项生理特征中有8项(果糖、乳糖、麦芽糖、葡萄糖、柠檬酸盐、醋酸盐、耐盐性(1%~3%)和pH(5.0~8.0),反应结果相同,而在对蔗糖、木糖、肌醇、山梨醇、甘露醇等碳源利用上存在差异显著;在9项生化试验项目中除硝酸盐还原都为阳性外,而在尿素试验、V-P试验、甲基红试验、石蕊牛奶试验结果上也存在较大差异。利用最大距离法和Jaccard距离法对所分离的菌株进行聚类分析,发现不同地区来源的赣南脐橙溃疡病菌可以聚为一类,说明赣南脐橙溃疡病菌存在广泛的分化现象。 展开更多
关键词 溃疡病菌 赣南脐橙 分化
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柑橘溃疡病菌噬菌体的分离鉴定 被引量:4
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作者 肖逍 丁良 +5 位作者 丛郁 徐旭凌 乔欢 何四龙 许文建 徐天舜 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2349-2359,共11页
从中国9个地区采集柑橘溃疡病样本,并通过单菌落形态,PCR特异性引物和16S rDNA测序对地毯草黄单胞菌柑橘致病变种进行分离鉴定,获得17株目标菌。以地毯草黄单胞菌柑橘致病变种标准菌株ACCC 03526为宿主菌,采用双层平板法从南京市污水样... 从中国9个地区采集柑橘溃疡病样本,并通过单菌落形态,PCR特异性引物和16S rDNA测序对地毯草黄单胞菌柑橘致病变种进行分离鉴定,获得17株目标菌。以地毯草黄单胞菌柑橘致病变种标准菌株ACCC 03526为宿主菌,采用双层平板法从南京市污水样本中分离其噬菌体,获得1株地毯草黄单胞菌柑橘致病变种烈性噬菌体,命名为Xac-P9。通过透射电镜对噬菌体Xac-P9形态大小进行观察,结果显示Xac-P9头部直径约58 nm,属于有尾噬菌体目(Caudovirales),短尾噬菌体科(Podoviridae)。对Xac-P9的裂解谱、最佳感染复数、一步生长曲线、热稳定性、pH稳定性、紫外线敏感性及杀菌速率等生物学特性进行测定,结果表明,Xac-P9对17株来源不同的Xac菌株的裂解率为100%,裂解谱宽;最佳感染复数为0.001,此时所获噬菌体效价为6.6×109 PFU·mL^(-1);一步生长曲线表明:Xac-P9潜伏期为20 min,爆发时间为60 min,裂解量为132;Xac-P9在40~60℃条件下具有一定耐受性,在pH 3~13环境中具有活性,对紫外辐射不敏感;30 min对宿主菌ACCC 03526的杀菌率可达90%,150 min后可将宿主菌全部杀灭。 展开更多
关键词 柑橘 溃疡病 地毯草黄单胞菌柑橘致病变种 噬菌体 分离 鉴定 生物学特性
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Comparison of PCR, DIA and Pathogenicity Assay for Detection of Xanthomonas axonopodis pv.citri,the Causal Agent of Citrus Bacterial Canker Disease 被引量:1
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作者 WANGZhong-kang SUNXian-yun +2 位作者 YINYou-ping ZHOUChang-yong XIAYu-xian 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2004年第6期442-447,共6页
Polymerase chain reaction (PCR) approach based on newly designed primers, JYF5/JYR5, wasapplied for specific detection of Xanthomonas axonopodis pv.citri(Xac). The efficiencyand reliability of PCR method were compared... Polymerase chain reaction (PCR) approach based on newly designed primers, JYF5/JYR5, wasapplied for specific detection of Xanthomonas axonopodis pv.citri(Xac). The efficiencyand reliability of PCR method were compared with dot immunobinding assay (DIA) andclassical pathogenicity test techniques for detecting suspensions of pure cells of Xacand soaking sap of citrus tissues. Detection sensitivity of PCR was about 4.5 cells or1.56 pg target DNA per reaction which was higher than that of DIA (ca. 450 cells per dot).These three techniques (PCR assay, DIA and Pathogenecity test) could always detect Xacfrom symptomatic citrus samples. Different performances were obtained from citrusmaterials without symptoms, and the positive detection frequency was PCR, DIA andpathogenicity test. 展开更多
关键词 xanthomonas axonopodis pv.citri PCR DIA Pathogenicity test
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脐橙溃疡病综合防控技术规范 被引量:3
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作者 陈慈相 洪霓 +1 位作者 李保同 谢金招 《江西植保》 2010年第2期81-82,84,共3页
根据江西省赣南脐橙溃疡病的发生特点,对新老病区脐橙溃疡病提出了相应的综合治理对策。
关键词 溃疡病 脐橙 综合防治技术
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