目的 探索Wnt7a在骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化中的作用和机制.方法 分离和培养人BMSCs,使用lipo2000在BMSCs中转染干扰Wnt7a和mock寡核苷酸序列,3d后通过Westen Blot 分析寡核苷酸干扰序列siRNA-Wnt7a的干扰效果.诱导培养10d后通...目的 探索Wnt7a在骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化中的作用和机制.方法 分离和培养人BMSCs,使用lipo2000在BMSCs中转染干扰Wnt7a和mock寡核苷酸序列,3d后通过Westen Blot 分析寡核苷酸干扰序列siRNA-Wnt7a的干扰效果.诱导培养10d后通过Westen Blot分析BMSCs细胞沉默Wnt7a对骨标志蛋白osteocalcin和骨调控蛋白Runx2表达的影响.诱导培养2周后通过Alizarin S Red染色检测在BMSCs中沉默Wnt7a对骨诱导的影响.结果 在BMSCs中转染寡核苷酸干扰序列Wnt7a和mock 对照序列,3d后Western Blot结果显示寡核苷酸干扰序列Wnt7a可明显降低BMSCs中Wnt7a的表达.诱导培养10d后通过Western Blot试验发现沉默Wnt7a后骨分化标志蛋白osteocalcin表达降低;同时检测到诱导培养10d后,BMSCs沉默Wnt7a组Runx2表达降低.诱导培养2周后通过Alizarin S Red染色显示骨形成受阻.结论 Wnt7a在BMSCs成骨分化中通过激活骨调控蛋白Runx2促进骨分化标志蛋白osteocalcin,在BMSCs成骨形成中扮演着重要角色.展开更多
文摘目的 探索Wnt7a在骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨分化中的作用和机制.方法 分离和培养人BMSCs,使用lipo2000在BMSCs中转染干扰Wnt7a和mock寡核苷酸序列,3d后通过Westen Blot 分析寡核苷酸干扰序列siRNA-Wnt7a的干扰效果.诱导培养10d后通过Westen Blot分析BMSCs细胞沉默Wnt7a对骨标志蛋白osteocalcin和骨调控蛋白Runx2表达的影响.诱导培养2周后通过Alizarin S Red染色检测在BMSCs中沉默Wnt7a对骨诱导的影响.结果 在BMSCs中转染寡核苷酸干扰序列Wnt7a和mock 对照序列,3d后Western Blot结果显示寡核苷酸干扰序列Wnt7a可明显降低BMSCs中Wnt7a的表达.诱导培养10d后通过Western Blot试验发现沉默Wnt7a后骨分化标志蛋白osteocalcin表达降低;同时检测到诱导培养10d后,BMSCs沉默Wnt7a组Runx2表达降低.诱导培养2周后通过Alizarin S Red染色显示骨形成受阻.结论 Wnt7a在BMSCs成骨分化中通过激活骨调控蛋白Runx2促进骨分化标志蛋白osteocalcin,在BMSCs成骨形成中扮演着重要角色.
