TK6和WTK1细胞体外微核试验比较研究 被引量：2

1

作者 王怡净 张立实 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第8期869-871,共3页

目的:比较5种诱变剂诱导人类淋巴母细胞TK6和WTK1的微核反应。方法:用人的类淋巴母细胞TK6和WTK1进行体外微核试验,评价5种诱变剂的染色体损伤效应。结果:5种受试物均可诱导两种细胞微核率显著升高,但在大多数剂量和采样时间,受试物诱导... 目的:比较5种诱变剂诱导人类淋巴母细胞TK6和WTK1的微核反应。方法:用人的类淋巴母细胞TK6和WTK1进行体外微核试验,评价5种诱变剂的染色体损伤效应。结果:5种受试物均可诱导两种细胞微核率显著升高,但在大多数剂量和采样时间,受试物诱导的TK6细胞微核率均不同程度地高于WTK1细胞微核率。结论:TK6细胞对受试物诱导的染色体损伤更为敏感。 展开更多

关键词 TK6 wtk1 体外微核试验

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TK6和WTK1细胞对H_2O_2诱导的DNA损伤和修复能力的比较

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作者 张建清 张立实 王瑞淑 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期767-769,共3页

目的　探讨人的近二倍体类淋巴母细胞 TK6和 WTK1细胞的 DNA损伤和修复能力的差异和机制。方法　采用 2 5μmol/ L、5 0μmol/L、10 0μmol/L的 H2 O2 分别处理 TK6和 WTK1细胞 ,对两种细胞进行单细胞凝胶电泳 ,检测 TK6和 WTK1细胞的... 目的　探讨人的近二倍体类淋巴母细胞 TK6和 WTK1细胞的 DNA损伤和修复能力的差异和机制。方法　采用 2 5μmol/ L、5 0μmol/L、10 0μmol/L的 H2 O2 分别处理 TK6和 WTK1细胞 ,对两种细胞进行单细胞凝胶电泳 ,检测 TK6和 WTK1细胞的彗星细胞率和彗星细胞尾长以及 p5 3基因的蛋白表达。结果　 TK6细胞对 H2 O2 诱导的 DNA损伤具有较高的敏感性 ,具有更为快速有效的损伤后修复能力。在孵育 0 .5 h至 1h内两种细胞达最大有效修复。TK6细胞 P5 3蛋白本底水平明显低于 WTK1细胞 ,在 H2 O2 处理后 ,其表达水平明显增强。结论　 TK6细胞对 H2 O2 诱导的 DNA损伤更为敏感 ,损伤后的修复更为快速、有效。p5 3基因的表达水平的差异是两种细胞 DNA损伤和修复能力差异的重要机制。 展开更多

关键词 TK6 wtk1 DNA损伤 彗星细胞检测 修复 过氧化氢

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TK6和WTK1细胞tk位点突变敏感性的比较研究

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作者 张建清 张立实 王瑞淑 《卫生毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期71-73,共3页

目的　比较研究 2种起源于人类的tk+ - 杂合子细胞TK6和WTK1细胞对化合物———甲基磺酸甲酯(MMS)诱发tk位点突变的敏感性 ,为tk位点突变敏感细胞株的筛选提供实验依据。方法　用标准诱变剂MMS处理TK6和WTK1细胞 ,对培养物进一步作tk... 目的　比较研究 2种起源于人类的tk+ - 杂合子细胞TK6和WTK1细胞对化合物———甲基磺酸甲酯(MMS)诱发tk位点突变的敏感性 ,为tk位点突变敏感细胞株的筛选提供实验依据。方法　用标准诱变剂MMS处理TK6和WTK1细胞 ,对培养物进一步作tk位点突变测试 ,以及细胞p5 3基因蛋白表达水平的检测。结果　MMS可诱导TK6和WTK1细胞tk位点的突变 ,其诱发突变分别是自发突变的 2～ 7倍和 3～ 10倍。WTK1细胞对MMS的细胞毒作用具有较大的抗性。MMS的作用下 ,WTK1细胞的突变频率分别是TK6细胞的 15 7、19 0和 2 0 4倍。在tk位点诱发了 2种不同表型的突变集落 ,但以慢生长突变体为主。无论是自发突变还是MMS的诱发突变 ,WTK1细胞的突变频率均显著地高于TK6细胞。经MMS处理后 ,TK6细胞p5 3蛋白的表达水平增高更为明显。结论　WTK1细胞是更为敏感的tk基因突变试验检测细胞株。MMS诱发的突变有染色体畸变和基因突变 。 展开更多

关键词 TK6 wtkl细胞 tk位点 基因突变 甲基磺酸甲酯

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用L5178Y和WTK1细胞微核试验评价维生素C和叶绿酸钠钠的抗诱变性

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作者 吕晓华 张立实 等 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1997年第6期369-370,共2页

关键词 L5178Y wtk1 微核试验 维生素C 叶绿酸钠钠 抗诱变性

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tk基因突变的分子机制研究 被引量：5

5

作者 刘波 邓中平 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2005年第3期190-192,共3页

胸苷激酶(Thymidinekinase,tk)基因突变试验是对外源性化学物质进行遗传毒性检测的短期试验方法。该方法可检测出染色体tk位点的点突变、基因缺失以及染色体畸变等多种类型的遗传损伤。遗传毒性物质作用于tk位点产生大、小两种突变体,... 胸苷激酶(Thymidinekinase,tk)基因突变试验是对外源性化学物质进行遗传毒性检测的短期试验方法。该方法可检测出染色体tk位点的点突变、基因缺失以及染色体畸变等多种类型的遗传损伤。遗传毒性物质作用于tk位点产生大、小两种突变体,对应着不同的突变机制。杂合子丢失的产生机制和P53基因的作用机制是近年来研究的热点。 展开更多

关键词 TK基因 突变 L5178Y细胞 TK6细胞 wtk1细胞 P53基因

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甲基磺酸甲酯诱发WTK1细胞tk位点突变试验方法的建立 被引量：3

6

作者 张建清 张立实 王瑞淑 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2003年第2期116-119,共4页

目的 :建立WTK1细胞tk基因突变试验方法 ,为毒理学评价和机制的研究提供实验依据。 方法 :用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理WTK1细胞 ,检测tk位点突变率和细胞 p53基因蛋白表达水平的改变。 结果 :MMS可诱导WTK1细胞tk位点突变率增加 ... 目的 :建立WTK1细胞tk基因突变试验方法 ,为毒理学评价和机制的研究提供实验依据。 方法 :用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)处理WTK1细胞 ,检测tk位点突变率和细胞 p53基因蛋白表达水平的改变。 结果 :MMS可诱导WTK1细胞tk位点突变率增加 ,MMS的处理剂量达到10mg·L-1 时 ,tk位点突变率为985.2/106 个细胞 ,并有剂量反应关系。诱发突变率约是自发突变率3～10倍。在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落 ,即正常生长突变体(tk_NGmutant)和慢生长突变体(tk_SGmutant) ,但以慢生长突变体为主。MMS处理后 ,WTK1细胞P53蛋白的表达水平增高。 结论 :MMS可以诱发WTK1细胞tk位点的突变率增加 ,MMS处理细胞后 ,P53蛋白的表达水平增高 ,说明WTK1细胞的P53蛋白的功能尚未丧失。该方法的建立 ,为进一步开展tk基因突变试验 。 展开更多

关键词 wtk1细胞 TK基因 突变 甲基磺酸甲酯

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L5178Y和WTK1细胞微核试验在诱变测试中的应用 被引量：2

7

作者 吕晓华 张立实 王瑞淑 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1999年第3期140-143,共4页

系统比较了一组标准诱变剂诱导Ｌ５１７８Ｙ和ＷＴＫ１细胞的微核反应，结果表明，这两种细胞微核试验方法简便灵敏，有推广价值。两种细胞对受试物的反应各有特点，如同时应用于一个短测系统，可提高筛检诱变物的准确性。

关键词 微核试验 L5178Y细胞 wtk1细胞 诱变剂

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L5178Y和W TK1细胞微核试验在抗诱变测试中的应用 被引量：2

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作者 吕晓华 张立实 王瑞淑 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1999年第3期283-285,共3页

为了研究 Ｌ５１７８ Ｙ 和 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞应用于抗诱变测试系统的可靠性和有效性，按维生素 Ｃ（ Ｖｃ）和叶绿酸铜钠（ Ｃｈｌ）与丝裂霉素 Ｃ（ Ｍ Ｍ Ｃ）的加入顺序，分为同时处理、预处理和后处理三种处理方式，观察 Ｖｃ 和 ... 为了研究 Ｌ５１７８ Ｙ 和 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞应用于抗诱变测试系统的可靠性和有效性，按维生素 Ｃ（ Ｖｃ）和叶绿酸铜钠（ Ｃｈｌ）与丝裂霉素 Ｃ（ Ｍ Ｍ Ｃ）的加入顺序，分为同时处理、预处理和后处理三种处理方式，观察 Ｖｃ 和 Ｃｈｌ对 Ｍ Ｍ Ｃ诱导两种细胞微核的抑制作用。结果表明：① Ｖｃ 和 Ｃｈｌ本身无诱导两种细胞微核的作用；② Ｖｃ 与 Ｍ Ｍ Ｃ同时处理和预处理，能显著降低 Ｍ Ｍ Ｃ诱导的两种细胞微核率；③０．１２ｍ ｇ／ｍ ｌ Ｃｈｌ与 Ｍ Ｍ Ｃ同时处理和预处理，能显著降低 Ｍ Ｍ Ｃ诱导的两种细胞微核率，但０．０６ｍ ｇ／ｍ ｌ同时处理和预处理仅能显著降低 Ｍ Ｍ Ｃ诱导的 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞微核率。后处理方式对微核反应无抑制作用。该研究结果与 Ｖｃ 和 Ｃｈｌ在其它抗诱变试验中的结果基本一致，表明 Ｌ５１７８ Ｙ 和 Ｗ Ｔ Ｋ１ 细胞微核试验在抗诱变作用检测方面有较好的应用价值。 展开更多

关键词 L5178Y细胞 wtk1细胞 微核试验 膳食 抗诱变物质

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WTK1细胞tk基因突变的多重PCR分析 被引量：2

9

作者 王怡净 帅培强 张立实 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期790-793,共4页

目的探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点。方法用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析。结果三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频... 目的探讨WTK1细胞tk位点自发和诱发突变体的突变谱和突变热点。方法用甲磺酸甲酯、丝裂霉素C和叠氮钠染毒WTK1细胞后,筛选出tk基因突变集落,用多重PCR方法对WTK1细胞tk基因突变谱进行分析。结果三种受试物均能诱导WTK1细胞tk位点突变频率增高,且存在剂量-反应关系;所分析的突变体中绝大部分缺失tk基因外显子4和5-7。结论三种受试物对WTK1细胞均有致突变作用;tk位点的突变存在明显的突变热点。 展开更多

关键词 多重PCR wtk1细胞 TK基因突变

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WTK1细胞在tk位点突变和DNA损伤与修复中的应用

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作者 张建清 张立实 王瑞淑 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2004年第1期1-4,共4页

背景与目的:为WTK1细胞在遗传毒理学可同时应用于基因突变和DNA损伤的研究提供实验依据。材料与方法:分别用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)和过氧化氢(H2O2)处理WTK1细胞,采用tk基因突变试验和单细胞凝胶电泳技术(single Cell GelElectrop... 背景与目的:为WTK1细胞在遗传毒理学可同时应用于基因突变和DNA损伤的研究提供实验依据。材料与方法:分别用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)和过氧化氢(H2O2)处理WTK1细胞,采用tk基因突变试验和单细胞凝胶电泳技术(single Cell GelElectrophoresis,SCGE)对细胞的tk位点突变和过氧化氢诱发的DNA损伤情况进行检测。结果:甲基磺酸甲酯可诱发WTK1细胞tk位点的突变,以诱发染色体畸变为主。过氧化氢诱发了WTK1细胞DNA的损伤,并有剂量反应关系。随着修复孵育时间的延长,彗星细胞尾长和彗星细胞出现率明显下降,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:WTK1细胞可同时应用于tk基因突变和DNA损伤与修复的研究。采用该细胞株可对化合物进行基因突变和DNA损伤进行研究评价。 展开更多

关键词 wtk1细胞 tk位点 突变 DNA损伤 DNA修复

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一组标准诱变剂诱导TK6和WTK1细胞微核反应的比较

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作者 张立实 本间正充 等 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 1997年第6期352-352,共1页

关键词 诱变剂 TK6 wtk1 微核反应 标准靶细胞系

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