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偶数阶W(4,n)的κ-边优美的图标号
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作者 刘晓姗 马宁 《数学的实践与认识》 北大核心 2015年第13期112-116,共5页
设k是一个非负整数,G是一个p点q边图.如果将G的边用k,k+1,k+2,…,k+q-1进行标号,而顶点标号模p运算后各不相同,那么称图G是后一边优美的.记EGI(G)是所有满足G是k-边优美的k的集合,称EGI(G)是G的边优美指标集.主要是研究n为偶数时W(4,n)... 设k是一个非负整数,G是一个p点q边图.如果将G的边用k,k+1,k+2,…,k+q-1进行标号,而顶点标号模p运算后各不相同,那么称图G是后一边优美的.记EGI(G)是所有满足G是k-边优美的k的集合,称EGI(G)是G的边优美指标集.主要是研究n为偶数时W(4,n)的边优美指标集. 展开更多
关键词 k-边优美 边优美指标集 w(4 n)图
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楚钱三考
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作者 罗运环 《江汉考古》 北大核心 1995年第3期64-74,58,共12页
楚钱三考罗运环楚钱三考罗运环越散。方,人乍备。开究奖q金中叫的。项新计好u改。焚7司会中是我。9的A备和天用‘’一分表金一木星赁中,主要有金部一个务所h行。伸。《极大并下有对人,叶夫有“科企”、“。各分’.“穿全”.“’广... 楚钱三考罗运环楚钱三考罗运环越散。方,人乍备。开究奖q金中叫的。项新计好u改。焚7司会中是我。9的A备和天用‘’一分表金一木星赁中,主要有金部一个务所h行。伸。《极大并下有对人,叶夫有“科企”、“。各分’.“穿全”.“’广〔’、‘部排’“《齐全”。。。冷‘... 展开更多
关键词 “复” 奖金 起源 轴承 长时期 叶片 成人 w-4 木星 方义
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早熟西瓜新品种──W-4
3
作者 李子云 俞正旺 《中国西瓜甜瓜》 1994年第3期5-6,共2页
W-4是中国农科院郑州果树研究所西瓜二倍体育种课题组育成的高产、优质、早熟西瓜新品种。全生育期85天,果实发育期25-28天。果实椭圆形,绿皮上带网纹,大红瓤.汁多爽口,中心可溶性固形物含量11%-12%,品质极佳。... W-4是中国农科院郑州果树研究所西瓜二倍体育种课题组育成的高产、优质、早熟西瓜新品种。全生育期85天,果实发育期25-28天。果实椭圆形,绿皮上带网纹,大红瓤.汁多爽口,中心可溶性固形物含量11%-12%,品质极佳。单瓜重5-6kg,单产4000kg/666.7m2。适合全国各地种植。 展开更多
关键词 西瓜 w-4 栽培 早熟性
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剁辣椒发酵过程中菌群与有机酸变化规律分析 被引量:27
4
作者 叶陵 王晶晶 +5 位作者 王蓉蓉 李勇 刘成国 蒋立文 邓放明 周辉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期116-121,共6页
以自然发酵为对照,以植物乳杆菌W-4进行剁辣椒纯种发酵。研究结果表明:在发酵过程中,接种发酵能使乳酸菌快速成为优势菌,较快地降低剁辣椒的p H值。接种发酵具有较高数量的菌落总数和乳酸菌,酵母菌在自然发酵和接种发酵中数量相当,变化... 以自然发酵为对照,以植物乳杆菌W-4进行剁辣椒纯种发酵。研究结果表明:在发酵过程中,接种发酵能使乳酸菌快速成为优势菌,较快地降低剁辣椒的p H值。接种发酵具有较高数量的菌落总数和乳酸菌,酵母菌在自然发酵和接种发酵中数量相当,变化趋势基本一致,而大肠菌群只在发酵前期出现,而后消失。有机酸测定结果表明接种发酵具有较高含量的乳酸,而自然发酵具有较高含量的柠檬酸和苹果酸,而乙酸只在自然发酵的前期出现。 展开更多
关键词 植物乳杆菌w-4 剁辣椒 菌群 有机酸
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猪带绦虫六钩蚴45W-4B重组蛋白的免疫原性研究 被引量:14
5
作者 王福梅 骆学农 +2 位作者 景志忠 岳城 才学鹏 《中国兽医寄生虫病》 CAS 2006年第3期1-5,共5页
目的观察猪带绦虫六钩蚴45 W-4B抗原对仔猪的免疫保护作用。方法用IPTG诱导表达融合蛋白GST-45W-4B,用GST柱进行纯化,以Montan ide ISA 206为佐剂制成疫苗免疫仔猪。间接ELISA检测仔猪血清抗45W-4B IgG抗体水平,MTT法进行外周血淋巴细... 目的观察猪带绦虫六钩蚴45 W-4B抗原对仔猪的免疫保护作用。方法用IPTG诱导表达融合蛋白GST-45W-4B,用GST柱进行纯化,以Montan ide ISA 206为佐剂制成疫苗免疫仔猪。间接ELISA检测仔猪血清抗45W-4B IgG抗体水平,MTT法进行外周血淋巴细胞殖试验。免疫1个月后全部实验组经口攻击感染25000枚/头猪带绦虫虫卵,攻虫3个月后剖检,计算减虫率及保护率。结果免疫组注射疫苗的第2周起,抗体为阳性,45W-4B组持续升高至第8周,淋巴细胞增殖明显高于未免疫感染组。用该抗原制备的疫苗获得了95%的减虫率和33%的保护率。结论该抗原对猪囊尾蚴病具有很好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 猪带绦虫 六钩蚴 45w-4B重组蛋白 免疫原性
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猪带绦虫45W-4BX和TSOL18的高效表达及免疫效果研究 被引量:13
6
作者 骆学农 郑亚东 +7 位作者 胡志敏 丁军涛 张少华 侯俊玲 窦永喜 郭爱疆 景志忠 才学鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期212-217,共6页
RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆入pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗... RT-PCR扩增45W-4B和TSOL18基因,PCR截去45W-4B基因的N端信号肽和C端疏水氨基酸序列形成45W-4BX。将45W-4BX和TSOL18 PCR产物分别亚克隆入pGEX-4T-1,用IPTG诱导表达,取产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪,用25 000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染,ELISA检测各组的抗体水平,90 d后剖检计算各组的减虫率。结果表明,45W-4BX和TSOL18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达,并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15 d血清抗体即为阳性,30 d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88%以上,与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45W-4BX和TSOL18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 TAENIA solium TSOL18 45w-4BX VACCINE protective EFFICACY
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猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗的构建及鉴定 被引量:13
7
作者 周必英 刘美辰 贺莉芳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期289-292,298,共5页
目的构建和鉴定猪带绦虫重组双歧杆菌(Bb)(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗。方法用疏水甘氨酸接头连接TSO45W-4B和TSOL18编码基因,通过全基因合成方法合成猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因。将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿... 目的构建和鉴定猪带绦虫重组双歧杆菌(Bb)(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗。方法用疏水甘氨酸接头连接TSO45W-4B和TSOL18编码基因,通过全基因合成方法合成猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因。将该融合基因定向克隆到大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18。电穿孔法将该质粒导入Bb,构建猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗,从具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提质粒进行酶切、PCR和测序鉴定。结果全基因合成789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段。从具有氨苄青霉素抗性的rBb中抽提质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切得到4 944bp的pGEX-1λT载体片段和789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段,与预期结果相符;以该重组质粒为模板进行PCR扩增得到789bp的TSO45W-4B-TSOL18融合基因片段,经测序基因片段为789bp,与预期大小相符。结论成功构建了猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B-TSOL18)疫苗,为该疫苗的表达及免疫原性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猪带绦虫 重组Bb(pGEX-TSO45w-4B-TSOL18)疫苗 构建 鉴定
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猪带绦虫TSO45W-4B基因的克隆、表达和抗体制备 被引量:10
8
作者 周必英 周泠 +2 位作者 刘美辰 刘晖 张曦 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期372-375,共4页
目的克隆、表达猪带绦虫TSO45W-4B基因,以重组蛋白TSO45W-4B免疫兔制备抗体。方法全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B抗原编码基因,定向克隆至pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B。转化至大肠埃希菌ArcticExpress(DE3)后,异丙基-β... 目的克隆、表达猪带绦虫TSO45W-4B基因,以重组蛋白TSO45W-4B免疫兔制备抗体。方法全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B抗原编码基因,定向克隆至pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B。转化至大肠埃希菌ArcticExpress(DE3)后,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达情况。表达产物经谷胱甘肽-S-转移酶(GST)亲和层析柱纯化后,免疫新西兰大白兔,制备抗血清。GST亲和层析柱纯化获得血清中抗体后,ELISA测定抗体效价,蛋白质印迹法(Western blotting)鉴定抗体特异性。结果酶切和测序结果表明,重组质粒pGEX-TSO45W-4B构建成功。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白相对分子质量(M r)约为40 000,经GST亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白。ELISA结果显示,抗体的效价为1∶512 000。Western blotting分析结果显示,该抗体能与纯化的重组蛋白发生特异性反应,在约M r40 000处出现一条带,与预期大小一致。结论猪带绦虫TSO45W-4B基因能在大肠埃希菌中表达,制备了TSO45W-4B重组蛋白和兔抗血清。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSO45w-4B 表达 纯化 抗体
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猪带绦虫TS045W-4B—TSOL18融合基因在大肠埃希菌ArcticExpress(DE3)中的表达、纯化和兔抗血清的制备 被引量:10
9
作者 周泠 周必英 +2 位作者 刘美辰 刘晖 贺莉芳 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期619-624,共6页
目的构建猪带绦虫pGEX—TS045W-4B-TSOL18重组质粒,纯化重组融合蛋白及制备兔抗重组蛋白血清。方法用疏水甘氨酸接头(Gly,Ser),连接TS045W-4B和TSOL18编码基因,通过全基因合成猪带绦虫TS045W-4B—TSOL18融合基因。将融合基因定向... 目的构建猪带绦虫pGEX—TS045W-4B-TSOL18重组质粒,纯化重组融合蛋白及制备兔抗重组蛋白血清。方法用疏水甘氨酸接头(Gly,Ser),连接TS045W-4B和TSOL18编码基因,通过全基因合成猪带绦虫TS045W-4B—TSOL18融合基因。将融合基因定向克隆到pGEX—1λT表达载体上,构建重组质粒pGEX—TS045W-4B—TSOL18,再用重组质粒转化大肠埃希菌(E.col)ArcticExpress(DE3)。用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS—PAGE)分析表达情况,亲和层析纯化获得重组融合蛋白。用纯化的重组蛋白按0.5mg/只与弗氏完全佐剂(CFA)混合,于兔后腿肌肉及背部皮下多点免疫注射;2周后再用相同剂量的重组蛋白与弗氏不完全佐剂(IFA)混合加强免疫,此后每隔10d按第2次免疫法重复加强免疫,第4次免疫后6d,采集兔心脏血并分离血清,立即纯化及制备抗血清。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗血清的效价,采用蛋白印迹(Western blot)法鉴定抗血清的特异性。结果全基因合成的TS045W-4B—TSOL18融合基因片段长度为789bp。酶切证实pGEX—TS045W-4B—TSOL18重组质粒成功构建,测序结果获得的基因片段大小为789bp,与预期大小相符。SDS—PAGE分析和亲和层析后显示,重组质粒在转化E.col ArcticExpress(DE3)后,获得了相对分子质量约为55×10。的重组融合蛋白,纯度为85%。EUSA测定兔抗血清的效价为1:512000,Westernblot证实抗血清能与重组融合蛋白发生特异性反应,在相对分子质量约为55×10^3处出现1条与预期大小-致的特异性条带。结论成功地构建猪带绦虫重组质粒pGEX—TS045W-4B—TSOL18及制备了高纯度的TS045W-4B—TSOL18重组融合蛋白和高滴度的兔抗重组蛋白血清。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TS045w-4B—TSOL18编码基因 重组融合蛋白 抗血清
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猪带绦虫不同阶段45W-4BX和18kD基因联合表达及保护性分析 被引量:7
10
作者 骆学农 郑亚东 +4 位作者 窦永喜 郭爱疆 侯俊琳 景志忠 才学鹏 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期385-390,共6页
【目的】获得不同发育阶段基因联合表达的具有良好免疫保护性的重组抗原,为研制高效的猪囊虫基因工程疫苗奠定基础。【方法】PCR扩增截去45W-4B基因的信号肽和C端17个疏水氨基酸序列,经BamH I和EcoR I酶切后与表达载体pGEX-4T-1连接转化... 【目的】获得不同发育阶段基因联合表达的具有良好免疫保护性的重组抗原,为研制高效的猪囊虫基因工程疫苗奠定基础。【方法】PCR扩增截去45W-4B基因的信号肽和C端17个疏水氨基酸序列,经BamH I和EcoR I酶切后与表达载体pGEX-4T-1连接转化BL21感受态细胞,酶切及PCR扩增鉴定阳性克隆。测序正确的质粒经EcoR I和Not I酶切处理后与截去信号肽的18 kD基因连接,构建双基因融合表达载体pGEX-4BX/18。用IPTG诱导的表达产物,进行SDS-PAGE电泳、Western blot分析活性。分别用300μg重组GST-4BX、GST-4BX/18蛋白免疫猪,间接ELISA测定抗体水平。感染后90 d剖检计算各组的减虫率,比较评价重组抗原的免疫保护性。【结果】4BX/18 kD在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物为50 kD的融合蛋白,并能被人囊虫和感染初期的猪囊虫阳性血清所识别。重组抗原免疫猪后45 d抗体达到峰值,联合表达重组抗原的减虫率为97%,GST-4BX免疫组的减虫率为95%。【结论】重组抗原4BX和4BX/18kD均具有较好的免疫保护效果,有望利用它们研制出抗猪囊尾蚴病的高效疫苗。 展开更多
关键词 猪带绦虫 45w-4BX 18kD 联合表达 免疫保护性分析
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Microstructure and properties of ultra-fine tungsten heavy alloys prepared by mechanical alloying and electric current activated sintering 被引量:10
11
作者 李小强 辛红伟 +1 位作者 胡可 李元元 《Transactions of Nonferrous Metals Society of China》 SCIE EI CAS CSCD 2010年第3期443-449,共7页
The microstructure and properties of the 93W-4Ni-2Co-1Fe(mass fraction,%) tungsten heavy alloys prepared by mechanical alloying and electric current activated sintering from mixed elemental powders were investigated.A... The microstructure and properties of the 93W-4Ni-2Co-1Fe(mass fraction,%) tungsten heavy alloys prepared by mechanical alloying and electric current activated sintering from mixed elemental powders were investigated.After 15 h milling,the average W grain size in the powders is decreased to 120 nm.For the powders milled for 15 h,the density,hardness and transverse rupture strength of the alloys sintered only by an intensive pulse electric current are the maximum.When the total sintering time keeps constant,the properties of the sintered alloys can be obviously improved by optimizing the sintering time of pulse-and constant-currents.A bulk ultrafine alloy with an average W grain size of about 340 nm can be obtained by sintering 15 h-milled powders in a total sintering time of 6 min.The corresponding sintered density,hardness and transverse rupture strength reach 16.78 g /cm3,HRA84.3 and 968 MPa,respectively. 展开更多
关键词 93w-4Ni-2Co-1Fe alloy mechanical alloying electric current activated sintering
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猪带绦虫六钩蚴45W-4BX的高效表达、纯化及活性分析 被引量:5
12
作者 骆学农 郑亚东 +3 位作者 吴旭刚 窦永喜 景志忠 才学鹏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期47-50,共4页
截去猪带绦虫六钩蚴45W-4B基因的N端信号肽和C端17个疏水氨基酸序列形成45W-4BX。设计特异性表达引物,PCR扩增目的片段,经BamH和EcoR酶切后与表达载体pGEX-4T-1连接转化BL21感受态细胞。用酶切及PCR扩增鉴定阳性克隆,测序证明阅读框是... 截去猪带绦虫六钩蚴45W-4B基因的N端信号肽和C端17个疏水氨基酸序列形成45W-4BX。设计特异性表达引物,PCR扩增目的片段,经BamH和EcoR酶切后与表达载体pGEX-4T-1连接转化BL21感受态细胞。用酶切及PCR扩增鉴定阳性克隆,测序证明阅读框是否正确。用IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE电泳,Western blot分析其活性。包涵体经纯化、透析复性后作为包被抗原检测囊虫猪和囊虫病人血清中的4B抗体。结果表明,截断的4BX(351bp)基因在大肠杆菌中获得高效表达,表达产物为相对分子质量40000的融合蛋白,并能被囊虫病人血清所识别。ELISA检测表明,囊虫病人血清中含有高滴度的4B抗体,所以45W-4BX的表达产物有可能作为候选抗原用于囊虫病的诊断和免疫预防。 展开更多
关键词 猪带绦虫六钩蚴 45w-4BX基因 表达 活性分析
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猪带绦虫TSO45W-4BX与猪CD58分子在大肠埃希菌中的联合表达 被引量:7
13
作者 骆学农 郑亚东 +3 位作者 窦永喜 侯俊琳 景志忠 才学鹏 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期285-289,共5页
目的以猪CD58为分子佐剂,将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达,寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗。方法分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板,PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因,将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4... 目的以猪CD58为分子佐剂,将CD58基因与猪带绦虫疫苗候选抗原基因TSO45W-4BX联合表达,寻找新型抗猪囊尾蚴疫苗。方法分别以重组质粒pGEM-4B和pGEM-CD58为模板,PCR扩增猪带绦虫TSO45W-4BX基因和猪CD58基因,将TSO45W-4BX与酶切处理的pGEX-4T-1定向连接,转化大肠埃希菌JM109,重组质粒经鉴定正确后,在其下游酶切插入CD58基因,PCR扩增和测序证明阅读框正确后,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE))和蛋白质印迹法(Westernblotting)分析表达产物的免疫活性。结果pGEX-4BX和pGEX-4BX/CD58分别表达Mr41000和Mr69000的融合蛋白,pGEX-4BX表达产物主要以可溶性形式存在,而pGEX-4BX/CD58却以包涵体形式存在,但两者都能被囊尾蚴病患者血清识别。结论TSO45W-4BX与CD58基因联合表达,TSO45W-4BX仍具有免疫活性。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TS045w-4BX CD58 联合表达
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猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗诱导仔猪保护力及其免疫机制研究 被引量:7
14
作者 江楠 刘美辰 +4 位作者 周泠 杨凤娇 贾启 王灵军 周必英 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第10期900-904,共5页
目的构建猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗,研究该疫苗诱导仔猪产生的保护力及其免疫机制。方法以猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗1×1011 CFU灌胃免疫40日龄健康仔猪,同时设空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组,每组4头。每两... 目的构建猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗,研究该疫苗诱导仔猪产生的保护力及其免疫机制。方法以猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗1×1011 CFU灌胃免疫40日龄健康仔猪,同时设空载体对照组和双歧杆菌液体培养基(MRS)对照组,每组4头。每两周免疫1次,共免疫2次。于末次免疫后4周,用猪带绦虫卵进行攻击感染,攻击感染后3个月解剖猪体,摘取囊尾蚴,计算减蚴率;前腔静脉取血,分离血清和制备外周血淋巴细胞(PBMC)。酶联免疫吸附试验(ELISA法)检测血清IgG、IgG1、IgG2a水平和PBMC培养上清液中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测PBMC增殖情况。结果猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗免疫仔猪获得71.36%的保护力;与空载体对照组和MRS对照组比较,血清IgG和IgG2a水平显著升高(F=95.055、650.293,P<0.05),IgG1水平显著降低(F=78.422,P<0.05);加抗原刺激时,PBMC增殖水平显著升高(F=107.019,P<0.05);PBMC培养上清液中IL-2和IFN-γ水平显著升高(F=229.668、2251.690,P<0.05),IL-4和IL-10水平显著降低(F=274.832、1168.768,P<0.05)。结论猪带绦虫重组Bb-TSO45W-4B疫苗能够诱导仔猪产生一定的保护力,其中Th1型免疫应答在其诱导的保护性免疫机制中起重要作用。 展开更多
关键词 猪带绦虫 重组Bb-TSO45w-4B疫苗 保护力 免疫机制 仔猪
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猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因在长双歧杆菌中的表达 被引量:6
15
作者 周必英 刘美辰 杨凤娇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期889-892,共4页
目的在成功构建猪带绦虫大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18的基础上,研究猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因在长双歧杆菌中的表达情况。方法将猪带绦虫大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18电转化入... 目的在成功构建猪带绦虫大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18的基础上,研究猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因在长双歧杆菌中的表达情况。方法将猪带绦虫大肠杆菌-双歧杆菌穿梭表达质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18电转化入长双歧杆菌,IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot分析表达情况。结果酶切、PCR和测序证实,重组质粒pGEX-TSO45W-4B-TSOL18成功转入长双歧杆菌。SDS-PAGE显示,重组蛋白相对分子质量(Mr)约为55kD,与预期结果相一致。Western blot显示,重组蛋白能被兔抗血清、囊虫病猪血清和囊虫病患者血清所识别。结论猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18融合基因能够在长双歧杆菌中获得表达,表达的重组蛋白具有特异的抗原性。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSO45w-4B-TSOL18融合基因 长双歧杆菌 表达
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W-4Re-0.27HfC合金的1500~1700℃拉伸蠕变性能及损伤机理 被引量:1
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作者 王琛瑞 董帝 +5 位作者 应雯清 张超 王承阳 李玫 孙尚玥 张程煜 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3600-3607,共8页
研究了粉末冶金制备的W-4Re-0.27Hf C合金的拉伸蠕变行为,测试环境为真空,蠕变温度为1500~1700℃,蠕变应力为40~60MPa。采用SEM、EBSD和TEM观察其微观组织,表征晶粒、位错等在蠕变过程中的演变规律。结果表明,W-4Re-0.27HfC合金的稳态... 研究了粉末冶金制备的W-4Re-0.27Hf C合金的拉伸蠕变行为,测试环境为真空,蠕变温度为1500~1700℃,蠕变应力为40~60MPa。采用SEM、EBSD和TEM观察其微观组织,表征晶粒、位错等在蠕变过程中的演变规律。结果表明,W-4Re-0.27HfC合金的稳态蠕变速率范围为1×10^(-7)~5×10^(-6)s^(-1),较纯钨(W)低1~2个数量级。W-4Re-0.27HfC合金抗蠕变性能优于纯W主要原因是弥散分布的HfC颗粒钉扎位错和Re取代W原子产生晶格畸变阻碍位错运动,降低位错迁移率。蠕变温度为1500℃时,W-4Re-0.27HfC的蠕变机制以原子扩散和晶界滑动为主,伴随有位错滑移。随着温度升高,位错攀移成为主要蠕变机制。HfC颗粒塞积位错,导致HfC/基体界面结合变差,HfC颗粒剥落出现孔洞,合金蠕变性能下降。 展开更多
关键词 w-4Re-0.27HfC合金 蠕变性能 固溶强化 弥散强化 蠕变机制
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猪带绦虫45W-4B基因在家蚕细胞中的表达 被引量:5
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作者 余招锋 才学鹏 +3 位作者 张志芳 于三科 陈寅 林旭瑷 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期527-530,共4页
猪带绦虫45W基因已被认为是预防猪囊虫病的基因工程疫苗候选基因之一。其中4B基因是45W基因家族中高度保守的一个成员(以下称45W-4B)。本试验将重组于pGEM-3Z载体上的4B基因转载到pVL1393转移载体中,通过鉴定获得重组质粒pVL1393-4B,然... 猪带绦虫45W基因已被认为是预防猪囊虫病的基因工程疫苗候选基因之一。其中4B基因是45W基因家族中高度保守的一个成员(以下称45W-4B)。本试验将重组于pGEM-3Z载体上的4B基因转载到pVL1393转移载体中,通过鉴定获得重组质粒pVL1393-4B,然后将重组质粒与BmNPV病毒共转染,筛选出重组BmNPV-4B重组病毒,用该重组病毒感染Bm细胞,收集细胞上清,SDS-PAGE电泳鉴定表达蛋白,并经Westernblot检测表明该蛋白能识别囊虫病人(猪)阳性血清,45W-4B蛋白的成功表达对进一步研究45W蛋白的结构和功能以及开发高效猪囊虫基因工程疫苗打下了基础。 展开更多
关键词 猪囊虫 45w-4B基因 家蚕 表达
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猪带绦虫重组双歧杆菌(pGEX-TSO45W-4B)疫苗构建及鉴定 被引量:5
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作者 周必英 刘美辰 贺莉芳 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期591-595,共5页
目的 构建和鉴定猪带绦虫重组双歧杆菌(Bb)(pGEX-TSO45W-4B)疫苗.方法 通过全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B基因,预期该基因中的片段长度为351 bp.将该基因定向克隆到大肠埃希菌-Bb穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B... 目的 构建和鉴定猪带绦虫重组双歧杆菌(Bb)(pGEX-TSO45W-4B)疫苗.方法 通过全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B基因,预期该基因中的片段长度为351 bp.将该基因定向克隆到大肠埃希菌-Bb穿梭表达载体pGEX-1λT中,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B,电穿孔法将该质粒导入长双歧杆菌,构建猪带绦虫重组Bb(pGEX-TSO45W-4B)疫苗,通过酶切、PCR和测序进行鉴定,证实猪带绦虫重组Bb (pGEX-TSO45W-4B)疫苗中含有片段长度为351 bp的基因.结果 全基因合成351 bp的TSO45W-4B基因片段.酶切、PCR和测序鉴定证明猪带绦虫重组Bb (pGEX-TSO45W-4B)疫苗构建成功,均获得了351 bp基因片段.结论 成功构建了猪带绦虫重组Bb (pGEX-TSO45W-4B)疫苗,为该疫苗的表达及免疫原性研究奠定了基础. 展开更多
关键词 猪带绦虫 重组Bb (pGEX-TSO45w-4B)疫苗 构建 鉴定
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猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18重组蛋白疫苗免疫小鼠诱导的免疫应答 被引量:5
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作者 肖红利 申万文 +3 位作者 高健安 石林江 张又心 周必英 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第2期159-164,共6页
目的观察猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18重组蛋白疫苗免疫小鼠诱导产生的体液和细胞免疫应答。方法将SPF级昆明小鼠60只随机分为3组,每组20只,分别为重组蛋白疫苗组和重组蛋白疫苗加弗氏佐剂组和生理盐水对照组。采用多点皮下注射法免疫3次,... 目的观察猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18重组蛋白疫苗免疫小鼠诱导产生的体液和细胞免疫应答。方法将SPF级昆明小鼠60只随机分为3组,每组20只,分别为重组蛋白疫苗组和重组蛋白疫苗加弗氏佐剂组和生理盐水对照组。采用多点皮下注射法免疫3次,间隔2周。于免疫后0、2、4、6、8周摘眼球取血,分离血清,采用ELISA法检测小鼠血清IgG与IgG2a水平;无菌取脾,制备脾细胞悬液,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测脾细胞增殖水平,采用ELISA法检测小鼠脾细胞经特异性抗原刺激后产生IL-2和IL-4的能力。结果与0周时及生理盐水对照组相比,免疫小鼠血清IgG水平在免疫后2-8周升高,F值分别为20.108、235.886、209.012、49.058,6周时达较高水平,IgG2a水平在免疫后2-8周升高,F值分别为80.214、76.540、152.314、82.561,6周时达较高水平,脾细胞增殖水平在免疫后2-8周升高,F值分别为21.643、56.982、225.880、151.682,6周时达较高水平,小鼠脾细胞经特异性抗原刺激后产生的IL-2水平在免疫后2-8周升高,F值分别为16.699、25.967、77.133、34.662,6周时达较高水平,IL-4水平在免疫后2-8周升高,F值分别为26.087、147.353、130.654、62.807,6周时达较高水平,与0周时及生理盐水对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.05);免疫后2-8周重组蛋白疫苗加弗氏佐剂组与重组蛋白疫苗组比较上述指标差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论猪带绦虫TSO45W-4B-TSOL18重组蛋白疫苗免疫可诱导小鼠产生体液和细胞免疫应答,免疫效果以重组蛋白疫苗加弗氏佐剂组较好。 展开更多
关键词 猪带绦虫 TSO45w-4B-TSOL18重组蛋白疫苗 免疫应答 小鼠
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W-40%Cu热加工摩擦因子与换热系数测定 被引量:5
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作者 李达人 刘祖岩 +1 位作者 于洋 王尔德 《粉末冶金技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期178-181,211,共5页
对W-40%Cu(质量分数)粉末烧结材料在热加工数值模拟过程中需要确定的坯料与模具间的界面摩擦因子,以及与空气、模具间的换热系数进行了测定。摩擦因子直接通过圆环镦粗实验来确定。采用DEFORM软件对坯料传热过程中温度的变化进行了模拟... 对W-40%Cu(质量分数)粉末烧结材料在热加工数值模拟过程中需要确定的坯料与模具间的界面摩擦因子,以及与空气、模具间的换热系数进行了测定。摩擦因子直接通过圆环镦粗实验来确定。采用DEFORM软件对坯料传热过程中温度的变化进行了模拟,并将模拟得到的温度变化曲线与实际传热实验中获得的温度变化曲线相比较,确定了坯料在不同条件下的换热系数。结果显示,坯料在无润滑时与模具间摩擦因子为0.36,在石墨油润滑时为0.11;与空气自然对流换热系数取0.021N/(s.mm.℃),与模具无润滑剂接触时换热系数取0.11N/(s.mm.℃);加石墨油润滑且接触应力很小时取0.62N/(s.mm.℃),随着接触面应力从0.06MPa增大到90MPa,换热系数逐渐从3.4N/(s.mm.℃)增加到11N/(s.mm.℃)。 展开更多
关键词 w-40%Cu粉末烧结材料 摩擦因子 换热系数 数值模拟
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