嗜铬粒蛋白A衍生多肽在心血管领域研究进展 被引量：6

1

作者 陈长源 白明 张钲 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期82-85,共4页

嗜铬粒蛋白A是颗粒蛋白家族中的一员,研究发现其N-末端及C-末端水解可产生多种具有生物学活性的衍生多肽,其中vasostatin及catestatin在心血管领域中的作用及机制是研究重点。近年来发现新的嗜铬粒蛋白A——serpinin及VIF,在心血管领域... 嗜铬粒蛋白A是颗粒蛋白家族中的一员,研究发现其N-末端及C-末端水解可产生多种具有生物学活性的衍生多肽,其中vasostatin及catestatin在心血管领域中的作用及机制是研究重点。近年来发现新的嗜铬粒蛋白A——serpinin及VIF,在心血管领域分别发挥不同的生物学效应,表明嗜铬粒蛋白A衍生多肽在心血管领域的重要性及未来广阔的临床应用前景。 展开更多

关键词 嗜铬粒蛋白A vasostatin CATESTATIN serpinin 心血管

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表达血管抑制因子的腺相关病毒载体的构建及其体内外活性 被引量：8

2

作者 刁勇 马健 +2 位作者 李欣燕 孙学英 许瑞安 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1949-1954,共6页

血管抑制因子(Vasostatin,VAS),为集钙蛋白N-末端180个氨基酸大小的蛋白,是一种内源性血管生成抑制因子,对多种肿瘤的生长具有很强的抑制作用。近期有研究显示,VAS可以促进神经内分泌肿瘤的恶化,提醒研究人员在开发该抗肿瘤药物时必须... 血管抑制因子(Vasostatin,VAS),为集钙蛋白N-末端180个氨基酸大小的蛋白,是一种内源性血管生成抑制因子,对多种肿瘤的生长具有很强的抑制作用。近期有研究显示,VAS可以促进神经内分泌肿瘤的恶化,提醒研究人员在开发该抗肿瘤药物时必须非常谨慎。将VAS cDNA插入腺相关病毒-2表达质粒pAAV-2,采用无辅助病毒参与的三质粒共转染法制备rAAV-VAS病毒。体外分别转染小鼠胰内皮细胞MS1和结肠癌细胞HCT-116,MTT法测定对细胞生长的影响,Western blotting方法检测VAS的表达。采用小鼠皮下移植瘤模型,验证VAS的表达对肿瘤生长、新生血管密度、以及细胞增殖的作用。结果证明构建的rAAV-VAS病毒载体,能抑制小鼠胰内皮细胞的生长,转染HCT-116后能有效表达VAS蛋白,但HCT-116的体外生长不受影响。瘤体注射rAAV-VAS后,HCT-116移植瘤在小鼠体内的生长速度明显减缓,肿瘤新生血管密度明显降低。结果显示,rAAV-VAS可以抑制HCT-116移植瘤的新生血管形成,但对其细胞增殖无明显作用。 展开更多

关键词 血管抑制因子 结肠肿瘤 血管生成 基因药物 腺相关病毒

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人vasostatin的克隆、表达、纯化及活性检测 被引量：4

3

作者 李永红 王军志 +1 位作者 饶春明 张翊 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期447-452,共6页

从成人肝脏cDNA文库中 ,PCR扩增得到人vasostatin基因编码区序列 ,将此序列插入原核表达载体pQE3 0进行表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)测定表明产物以包涵体形式存在 ,表达量占菌体总蛋白量的 5 0 %以上 .包涵体洗涤后溶于 8m... 从成人肝脏cDNA文库中 ,PCR扩增得到人vasostatin基因编码区序列 ,将此序列插入原核表达载体pQE3 0进行表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)测定表明产物以包涵体形式存在 ,表达量占菌体总蛋白量的 5 0 %以上 .包涵体洗涤后溶于 8mol/L尿素溶液 ,在变性条件下通过镍 氨三乙酸 (Ni NTA)金属螯合亲和层析柱进行纯化后 ,再经透析进行复性 .N端氨基酸序列、分子质量、等电点等理化指标的测定结果与理论值相符 .用内皮细胞增殖试验、内皮细胞迁移试验以及鸡胚尿囊膜血管生成试验等方法进行活性检测 ,证实复性的表达产物具有抑制内皮细胞增殖和迁移。 展开更多

关键词 人vosostatin基因 克隆 表达 纯化 活性检测 生物学活性 抗癌药物 血管生成抑制因子

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Vasostatin重组腺病毒的构建和体外表达的研究 被引量：1

4

作者 丁振宇 杨莉 +3 位作者 田聆 刘芬 肖飞 魏于全 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期460-462,469,共4页

目的　构建 vasostatin重组腺病毒表达载体 ,并进行体外表达研究。方法　根据 Gen Bank中提供的钙网蛋白序列 ,设计并合成引物 ,以人骨骼肌 c DNA文库为模板用 PCR扩增出人 vasostatin基因 ,将其克隆入 T载体。经酶切及测序鉴定后亚克... 目的　构建 vasostatin重组腺病毒表达载体 ,并进行体外表达研究。方法　根据 Gen Bank中提供的钙网蛋白序列 ,设计并合成引物 ,以人骨骼肌 c DNA文库为模板用 PCR扩增出人 vasostatin基因 ,将其克隆入 T载体。经酶切及测序鉴定后亚克隆至穿梭载体 ,与经过限制酶处理的骨架腺病毒载体 DNA- TPC复合物共转染 2 93细胞。用 Western blot检测体外表达。结果　 PCR扩增出约 5 90 bp产物 ,测序结果与文献报道一致。用 PCR及Western blot证实重组腺病毒构建成功 ,能有效的表达出 vasostatin蛋白。结论　 vasostatin重组腺病毒载体能有效的在体外表达出 展开更多

关键词 vasostatin 腺病毒 基因治疗

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真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Vasostatin的构建及其在293T细胞中的表达 被引量：1

5

作者 刘建巨 吴雅臻 +3 位作者 李辉南 吴荒 刘茂雄 刘殊 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第2期153-154,158,共3页

目的构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Vasostatin并检测其在真核细胞内的表达水平。方法将带有信号肽的Vasostatin基因片段克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染293T细胞,通过Westernb... 目的构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Vasostatin并检测其在真核细胞内的表达水平。方法将带有信号肽的Vasostatin基因片段克隆至pcDNA3.1(+)真核表达载体上,经酶切鉴定及测序分析证明构建成功后,以脂质体介导法转染293T细胞,通过Westernblot法,检测其在293T细胞内的表达水平。结果所构建的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Va-sostatin转染293T细胞后,在其裂解的上清液中,检测到目的基因的表达。结论已成功构建了pcDNA3.1(+)-Vasostatin表达载体,并在真核细胞中表达了目的蛋白。 展开更多

关键词 vasostatin 293T细胞 基因克隆 真核表达

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Vasostatin与肿瘤血管生成

6

作者 刘军 袁耀宗 《国际消化病杂志》 CAS 2008年第5期430-432,共3页

血管生成在肿瘤生长和转移的过程中具有重要作用,涉及一系列血管生成、抑制因子的表达和调控。内源性血管抑制因子vasostatin具有显著的抑制内皮细胞增殖和血管生成的功能,已有研究显示va-sostatin单独应用或联合其他治疗对多种恶性肿... 血管生成在肿瘤生长和转移的过程中具有重要作用,涉及一系列血管生成、抑制因子的表达和调控。内源性血管抑制因子vasostatin具有显著的抑制内皮细胞增殖和血管生成的功能,已有研究显示va-sostatin单独应用或联合其他治疗对多种恶性肿瘤有较好的治疗效果。其作用机制可能与vasostatin与层黏连蛋白(Laminin)结合,阻止由bFGF等引起的内皮细胞增生等作用有关。进一步研究vasostatin对肿瘤血管生成的抑制作用及其机制,有助于临床寻找新的有效分子靶向药物。 展开更多

关键词 肿瘤 血管生成 vasostatin

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生物发光显像技术对血管生成抑制因子vasostatin在肿瘤细胞PC3中活性监测

7

作者 胡洁淼 邱飞婵 +5 位作者 阴彬 龚燕华 袁建刚 强伯勤 王世真 彭小忠 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期312-317,I0003,共7页

目的应用非侵入性活体显像技术研究血管生成抑制因子vasostatin。方法采用融合表达方案,将治疗基因vasostatin和报告基因fluc偶联构建融合表达载体,使表达的融合蛋白中两个蛋白互相不干扰,并有天然的特性。结果将稳定表达FLuc阳性对照和... 目的应用非侵入性活体显像技术研究血管生成抑制因子vasostatin。方法采用融合表达方案,将治疗基因vasostatin和报告基因fluc偶联构建融合表达载体,使表达的融合蛋白中两个蛋白互相不干扰,并有天然的特性。结果将稳定表达FLuc阳性对照和V10FL融合蛋白的PC3细胞进行体外生物发光显像。用稳定表达Fluc的PC3细胞构建荷瘤模型,用生物发光显像能检测到肿瘤的发生。结论可应用非侵入性活体显像技术进行体内和体外基因表达的检测与监控。 展开更多

关键词 生物发光显像 vasostatin 血管生成

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Vasostatin基因抑制裸鼠种植性肝癌血管生成的实验研究

8

作者 邹方 修鹏 +1 位作者 徐宗珍 李杰 《中国现代普通外科进展》 CAS 2010年第2期89-92,共4页

目的:探讨人血管内皮抑制素Vasostatin基因对裸鼠种植性肝癌生长及肿瘤新生血管生成和细胞凋亡的影响。方法:建立裸鼠肝癌种植瘤模型,采用Vasostatin基因质粒(VAS组)及空壳质粒(对照组)进行瘤体内电转染,观察治疗后肿瘤生长情况,计算肿... 目的:探讨人血管内皮抑制素Vasostatin基因对裸鼠种植性肝癌生长及肿瘤新生血管生成和细胞凋亡的影响。方法:建立裸鼠肝癌种植瘤模型,采用Vasostatin基因质粒(VAS组)及空壳质粒(对照组)进行瘤体内电转染,观察治疗后肿瘤生长情况,计算肿瘤体积及抑瘤率,应用免疫组织化学技术检测肿瘤微血管密度变化,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:VAS组抑瘤率为31.73%。对照组、VAS组肿瘤质量分别为(1.23±0.82)g和(0.81±0.62)g;微血管密度分别为18.26±1.72和5.62±0.59;肿瘤细胞凋亡指数分别为6.25±1.32和16.48±0.96,2组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:人血管内皮抑制素Vasostatin基因对裸鼠种植性肝癌生长具有明显的抑制作用,可促进肿瘤细胞的凋亡,进而影响肿瘤生长。 展开更多

关键词 vasostatin 肝肿瘤 血管生成 细胞凋亡 基因治疗 小鼠 裸

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血管抑制因子对脉络膜新生血管抑制作用的实验研究

9

作者 李沭岩 吴雅臻 张磊 《中华眼外伤职业眼病杂志》 2015年第10期739-743,共5页

目的：探讨重组人血管抑制因子（ vasostatin）抑制激光诱导的小鼠脉络膜新生血管形成（CNV）的作用。方法 C57BL/6J成年小鼠30只（30只眼）,均用右眼,通过Nd： YAG激光眼底光凝诱导小鼠形成脉络膜新生血管,随机分为对照组、低剂量组和... 目的：探讨重组人血管抑制因子（ vasostatin）抑制激光诱导的小鼠脉络膜新生血管形成（CNV）的作用。方法 C57BL/6J成年小鼠30只（30只眼）,均用右眼,通过Nd： YAG激光眼底光凝诱导小鼠形成脉络膜新生血管,随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组各10只小鼠。在眼底Nd：YAG激光光凝后立即分别给予A组（对照组）每只小鼠球后注射10μl生理盐水；B组（低剂量组）各组每只小鼠球后注射血管抑制因子10μl（2μg/μl）；C组（高剂量组）注射10μl（4μg/μl）。在光凝后7 d及14 d通过荧光素眼底血管造影（ FFA）评价CNV的发生率。结果治疗组在光凝后7 d及14 d CNV发生率及各光凝斑荧光素渗漏程度均比对照组轻。光凝后7 d,A组脉络膜新生血管的发生率为68%,B组和C组脉络膜新生血管的发生率分别为56%、48%,与A组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。光凝后14 d,A组脉络膜新生血管的发生率为72%,B组和C组脉络膜新生血管的发生率分别为50%、38%,与A组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论血管抑制因子可以有效抑制激光诱导的小鼠实验性CNV。通过Nd：YAG激光照射脉络膜损伤成功地诱导了小鼠CNV模型,这种CNV模型制作方法可用于CNV的发病机制及治疗方法的研究。 展开更多

关键词 脉络膜 新生血管形成 血管抑制因子( vasostatin) 疾病模型 小鼠

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vasostatin在毕赤酵母中的表达及其抗血管生成的研究

10

作者 林玉丽 华子春 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2011年第5期692-695,共4页

目的:用酵母表达系统表达具有生物活性的vasostatin,并检测其抗血管生成活性。方法:将vasostatin基因克隆入酵母诱导型表达载体pPIC9K中,经过SacⅠ线性化、电转化毕赤酵母蛋白酶缺陷菌株Pichiapastoris KM17、筛选阳性克隆、PCR鉴定和DN... 目的:用酵母表达系统表达具有生物活性的vasostatin,并检测其抗血管生成活性。方法:将vasostatin基因克隆入酵母诱导型表达载体pPIC9K中,经过SacⅠ线性化、电转化毕赤酵母蛋白酶缺陷菌株Pichiapastoris KM17、筛选阳性克隆、PCR鉴定和DNA序列分析,获得了vasostatin基因重组到酵母染色体中的阳性重组子,阳性重组子经甲醇诱导和分离纯化,获得了重组vasostatin蛋白,CAM实验检测重组蛋白抑制血管新生活性。结果:酵母表达的重组vasostatin产量达12 mg.L-1,CAM实验表明重组vasostatin能够显著抑制新生血管生成。结论:酵母表达系统能高效表达具有抑制新生血管生成活性的重组vasostatin蛋白。 展开更多

关键词 毕赤酵母菌株KM17 血管生成抑制剂 vasostatin 基因表达 蛋白纯化

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重组人血管抑制因子Vasostatin对视网膜血管内皮细胞增殖的影响 被引量：1

11

作者 李光宇 范斌 +3 位作者 徐立 吴雅臻 何立洁 吴家祥 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期351-354,共4页

目的　探讨重组人血管抑制因子Vasostatin对体外培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)增殖的影响。方法　以bFGF刺激增殖 ,体外培养恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)至 4代 ,分别加入不同质量浓度的重组人Vasostatin蛋白 ,并采用MT... 目的　探讨重组人血管抑制因子Vasostatin对体外培养的恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)增殖的影响。方法　以bFGF刺激增殖 ,体外培养恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)至 4代 ,分别加入不同质量浓度的重组人Vasostatin蛋白 ,并采用MTT法、3 H TdR法检测 2、4、6d时其对血管内皮细胞增殖抑制的作用 ,同时利用流式细胞仪对重组人Vasostatin蛋白是否诱导细胞凋亡进行了探讨。结果　MTT法、3 H TdR两种方法均显示重组人Vasostatin蛋白以质量浓度依赖的方式抑制bFGF刺激的恒河猴视网膜血管内皮细胞 (RF/6A)的增殖。流式细胞仪检测显示加入重组人Vasostatin蛋白后 ,G0 /G1期无明显的亚二倍体核形峰出现 ,其不是通过诱导细胞凋亡的方式来抑制细胞增殖的。结论　重组人Vasostatin蛋白在体外具有抑制bFGF诱导的血管内皮细胞增殖的作用 ,其有可能成为一种有效的血管新生抑制剂。 展开更多

关键词 血管抑制因子 恒河猴视网膜血管内皮细胞(RF/6A) 新生血管 钙网蛋白

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酵母双杂交技术筛查与vasostatin相互作用的蛋白质

12

作者 赵阳 饶春明 +2 位作者 黄鹤 甘一如 王军志 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第3期254-258,共5页

目的:通过酵母双杂交技术筛查与血管生长抑制因子vasostatin相互作用的蛋白质,为进一步阐明其抑制血管生成作用的分子机制奠定基础。方法:应用第3代酵母双杂交系统,构建vasostatin诱饵质粒,经过表达和自激活验证后筛选预转化的人内皮细... 目的:通过酵母双杂交技术筛查与血管生长抑制因子vasostatin相互作用的蛋白质,为进一步阐明其抑制血管生成作用的分子机制奠定基础。方法:应用第3代酵母双杂交系统,构建vasostatin诱饵质粒,经过表达和自激活验证后筛选预转化的人内皮细胞cDNA方库。将在四缺培养基中筛选得到的阳性克隆提取酵母质粒转化大肠杆菌,进行限制性酶切和测序,寻找可能与vastotatin具有相互作用的蛋白序列。结果:经过酵母双杂交共获得21个克隆,经过验证,有3个阳性克隆;经过NCBI的BIAST进行同源性分析,它们的核酸和蛋白序列与已知基因高度同源,它们分别为层黏连蛋白α5(7547～8112)和整合素αV(1257～1820、316～878)片段,均为重要的配体结合部位。Vasostatin蛋白通过与该区域结合,影响FAK、VEGF和bFGF等的信号通路,抑制血管生成。结论:酵母双杂交筛选获得的层黏连蛋白和整合素蛋白的3个蛋白片段,它们与肿瘤内血管内皮细胞增殖和迁移等密切相关。 展开更多

关键词 酵母双杂交 vasostatin 基因功能

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人血管抑制因子Vasostatin短片段(120-180 aa)的克隆、表达及功能研究 被引量：2

13

作者 李光宇 范斌 +1 位作者 吴雅臻 吴家祥 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第3期179-182,共4页

目的:利用基因工程技术,克隆并表达人血管抑制因子Vasostatin120-180aa功能区片段,探讨其对鸡胚绒毛尿囊膜新 生血管抑制的作用。方法:采用PCR技术扩增人血管抑制因子Vasostatin120-180aa功能区基因,并利用pQE30原核表达系统诱 导表达Va... 目的:利用基因工程技术,克隆并表达人血管抑制因子Vasostatin120-180aa功能区片段,探讨其对鸡胚绒毛尿囊膜新 生血管抑制的作用。方法:采用PCR技术扩增人血管抑制因子Vasostatin120-180aa功能区基因,并利用pQE30原核表达系统诱 导表达Vasostatin120-180aa,经镍金属螯合层析法纯化,通过鸡胚绒毛尿囊膜实验验证其抑制新生血管生成的作用。结果:PCR 扩增出了长度为180 bp的Vasostatin120-180aa功能区基因,后经pQE30原核表达系统表达并纯化出Vasostatin120-180aa,SDS-PAGE 显现一条约8 kD的阳性条带,Vasostatin120-180aa可显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的生成。结论:原核表达的Vasosta- tin120-180aa功能区片段具有生物学活性,可明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管的生成,在一定范围内呈量效依赖性。 展开更多

关键词 人血 新生血管 鸡胚绒毛尿囊膜 抑制因子 原核表达系统 克隆 基因 诱导表达 功能研究

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重组人血管抑制因子Vasostatin抑制兔角膜新生血管的研究 被引量：2

14

作者 吴雅臻 李光宇 范斌 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期252-254,共3页

目的探讨重组人血管抑制因子(Vasostatin)对于碱烧伤诱导的家兔角膜新生血管的抑制作用。方法采用1mol/LNaOH溶液烧伤家兔角膜,建立碱烧伤诱导的家兔角膜新生血管的动物模型;将家兔分为A、B、C、D4组,每组10只眼。伤后24h后分别给予1... 目的探讨重组人血管抑制因子(Vasostatin)对于碱烧伤诱导的家兔角膜新生血管的抑制作用。方法采用1mol/LNaOH溶液烧伤家兔角膜,建立碱烧伤诱导的家兔角膜新生血管的动物模型;将家兔分为A、B、C、D4组,每组10只眼。伤后24h后分别给予1×PBS缓冲液,25、50、100μg/mLVasostatin球结膜下注射,2次/周,共4周。测量各时间点角膜新生血管的生长面积,并在伤后28d处死动物,取其角膜行Ⅷ因子相关抗原的免疫组织化学染色,观察血管的生长情况。结果各时间点角膜新生血管的面积,B组、C组及D组均低于A组(P<0.05),C组及D组均低于B组(P<0.05),C组与D组相比,差异无显著性(P>0.05)。结论重组人Vasostatin蛋白可有效抑制角膜新生血管的形成。 展开更多

关键词 血管抑制因子 碱烧伤 角膜新生血管 Ⅷ因子相关抗原

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以MMP酶切位点为连接臂构建Vasostatin和TRAIL的融合蛋白及其生物学活性分析 被引量：1

15

作者 郭爱云 王梁华 +3 位作者 孙铭娟 焦豫良 任娜 焦炳华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期925-930,共6页

以基质金属蛋白酶(MMP)酶切位点(PLGLWA)为连接臂,采用重组PCR技术获得血管形成抑制素(vasostatin,V)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL,T)的融合蛋白质编码序列,将该融合编码序列插入原核表达载体pMAL-c2中,重组质粒转化大肠杆菌BL... 以基质金属蛋白酶(MMP)酶切位点(PLGLWA)为连接臂,采用重组PCR技术获得血管形成抑制素(vasostatin,V)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL,T)的融合蛋白质编码序列,将该融合编码序列插入原核表达载体pMAL-c2中,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,分别得到MBP-VT和MBP-TV融合蛋白,Amylose Resin亲和层析柱纯化.初步纯化的融合蛋白MBP-VT在体外内皮细胞增殖抑制实验、肿瘤细胞凋亡诱导实验中显示了明显的活性,而MBP-TV的作用不明显;体外酶切实验和培养肿瘤细胞上清酶切融合蛋白的免疫印迹分析,证实融合蛋白MBP-VT皆能被正确酶切.上述结果表明成功表达了融合蛋白VT,该融合蛋白具有双重抗肿瘤活性,并可在肿瘤高表达的MMP作用下裂解为V和T. 展开更多

关键词 血管形成抑制素 TRAIL 融合表达 基质金属蛋白酶(MMP)酶切位点 体外酶切

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人血管抑制因子的原核表达、纯化及活性研究

16

作者 范斌 吴雅臻 +4 位作者 李光宇 徐立 张晓光 段秀梅 谭岩 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期570-573,共4页

目的 :利用大肠杆菌表达系统表达人血管抑制因子 ,并利用镍金属螯合层析法进行纯化 ,探讨其抑制血管内皮细胞增殖的活性。方法 :采用RT PCR技术从人肝脏组织中获取人血管抑制因子的cDNA ,将其克隆至原核表达载体pQE30中进行IPTG诱导表... 目的 :利用大肠杆菌表达系统表达人血管抑制因子 ,并利用镍金属螯合层析法进行纯化 ,探讨其抑制血管内皮细胞增殖的活性。方法 :采用RT PCR技术从人肝脏组织中获取人血管抑制因子的cDNA ,将其克隆至原核表达载体pQE30中进行IPTG诱导表达。表达产物经SDS PAGE分析 ,并利用镍金属螯合层析法进行纯化。3H TdR法检测纯化的血管抑制因子对血管内皮细胞增殖的抑制作用。结果 :利用pQE30表达载体表达的含 6个组氨酸尾的vasostatin蛋白 ,在SDS PAGE上表现出一条约 2 1kD的阳性条带 ,经镍金属螯合层析纯化后的蛋白经肽指纹图谱分析鉴定为目的蛋白 ,在体外可抑制人脐静脉血管内皮细胞的增殖。结论 :人血管抑制因子可在大肠杆菌中以包涵体形式高水平表达 ,并具有抑制血管内皮细胞增殖的活性。 展开更多

关键词 人血管抑制因子 原核 表达 纯化 活性 镍金属螯合层析

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人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的真核表达、纯化及活性鉴定 被引量：1

17

作者 刘建巨 王建文 宋娅莉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第10期725-728,740,共5页

目的利用毕赤酵母表达系统表达人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa),经纯化后,观察其抑制血管内皮细胞增殖的活性。方法采用PCR技术扩增出人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的全长cDNA序列,将其克隆至真核表达载体pPIC9K中,转化... 目的利用毕赤酵母表达系统表达人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa),经纯化后,观察其抑制血管内皮细胞增殖的活性。方法采用PCR技术扩增出人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)的全长cDNA序列,将其克隆至真核表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母KM71,以甲醇诱导表达,并进行Western blot检测及金属螯合层析纯化。采用MTT法检测纯化的血管抑制因子对血管内皮细胞增殖的抑制作用。结果重组表达质粒pPIC9K-Vasostatin(120～180aa)经菌落PCR、酶切和测序鉴定,证明构建正确。经Western blot检测可见一条特异条带,纯化后的蛋白纯度达88.76%,浓度为300μg/ml,在体外可抑制人脐静脉血管内皮细胞ECV304的增殖。结论人血管抑制因子Vasostatin(120～180aa)可在毕赤酵母中以分泌形式表达,并具有抑制血管内皮细胞增殖的活性。 展开更多

关键词 血管抑制因子 真核表达 金属螯合层析 血管内皮细胞 活性

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人血管生成抑制素抑瘤研究进展

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作者 孟程程 赵晓芳 李招发 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期856-858,共3页

肿瘤的发展和转移需要新生血管的形成。人血管生成抑制素是近年发现的能够专一性抑制血管内皮细胞的内皮抑制因子。大量研究表明,在体外用血管生成抑制素处理血管内皮细胞可以抑制新生血管的形成,在体内单独使用血管生成抑制素,或者将... 肿瘤的发展和转移需要新生血管的形成。人血管生成抑制素是近年发现的能够专一性抑制血管内皮细胞的内皮抑制因子。大量研究表明,在体外用血管生成抑制素处理血管内皮细胞可以抑制新生血管的形成,在体内单独使用血管生成抑制素,或者将血管生成抑制素与其他物质如基质金属蛋白酶、尿激酶联合处理荷瘤小鼠,可以降低小鼠体内肿瘤组织新生血管密度,抑制肿瘤的生长和肿瘤细胞的迁移。简要综述了血管生成抑制素抑制肿瘤生长和转移及其作用机理。 展开更多

关键词 血管生成抑制素 血管生成 肿瘤抑制

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慢性心力衰竭患者血清尿酸、N末端B型利钠肽原、血管形成抑制素-2与左心室射血分数的相关性 被引量：16

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作者 张丽伟 《实用临床医药杂志》 CAS 2020年第12期29-31,共3页

目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清尿酸(UA)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、血管形成抑制素-2(VS-2)水平与左心室射血分数(LVEF)的相关性。方法将160例CHF患者根据纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级标准分为Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ... 目的探讨慢性心力衰竭(CHF)患者血清尿酸(UA)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、血管形成抑制素-2(VS-2)水平与左心室射血分数(LVEF)的相关性。方法将160例CHF患者根据纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级标准分为Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组,每组40例。比较4组血清UA、NT-proBNP、VS-2、LVEF水平,分析血清UA、NT-proBNP、VS-2水平与LVEF的相关性。结果Ⅰ级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组血清NT-proBNP、UA水平呈上升趋势,VS-2、LVEF水平呈下降趋势,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,患者血清VS-2与LVEF呈显著正相关(r=0.664,P=0.001),血清NT-proBNP、UA水平与LVEF呈显著负相关(r=-0.645、-0.518,P=0.002、0.005)。结论血清UA、NT-proBNP、VS-2水平可有效反映CHF患者心功能和疾病进展状况,且与LVEF具有显著相关性。 展开更多

关键词 慢性心力衰竭 血管形成抑制素-2 N末端B型利钠肽原 尿酸 左心室射血分数

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丹参川芎嗪注射液对急性脑梗死患者的治疗作用及血清vasostatin-2、sICAM-1水平的影响 被引量：15

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作者 林翔东 吴红星 邵爱民 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第21期3079-3081,共3页

目的研究丹参川芎嗪注射液对急性脑梗死(ACI)患者的治疗作用及对血清血管抑制因子[vasostatin-2(VS-2)]、可溶性细胞间黏附分子(s ICAM-1)水平的影响。方法将86例ACI患者随机分为2组,对照组43例给予常规治疗,治疗组43例给予常规治疗加... 目的研究丹参川芎嗪注射液对急性脑梗死(ACI)患者的治疗作用及对血清血管抑制因子[vasostatin-2(VS-2)]、可溶性细胞间黏附分子(s ICAM-1)水平的影响。方法将86例ACI患者随机分为2组,对照组43例给予常规治疗,治疗组43例给予常规治疗加丹参川芎嗪注射液。采用酶联免疫吸附(ELISA)法分别于入院后第1 d,治疗后第3 d、第7 d、第14 d测定VS-2、s ICAM-1水平,同时应用美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)标准对2组患者神经功能缺损程度进行评分。结果与对照组比较,治疗组第3 d、第7 d、第14 d血清VS-2水平升高显著(P<0.05),血清s ICAM-1水平明显下降(P<0.05)。治疗后,与对照组NIHSS评分比较,治疗后第14 d下降显著(P<0.05)。结论丹参川芎嗪注射液对ACI患者的治疗效果可能与血清VS-2水平升高和s ICAM-1水平降低的作用有关。 展开更多

关键词 丹参川芎嗪 急性脑梗死 血清血管抑制因子-2 可溶性细胞间黏附分子

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