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超声辅助酶提取-高效液相原子荧光测定抗癌类海洋中药中硒的形态 被引量:4
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作者 张颜 王一淳 +1 位作者 倪莹莹 叶明德 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期850-853,共4页
建立了高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱(HPLP-HG-AFS)联用技术测定抗癌类海洋中药中4种硒形态的方法。样品经超声辅助蛋白酶XIV提取,采用Hamilton PRP-X100阴离子交换柱(250 mm×4. 1 mm,10μm),以5 mmol/L(pH 4. 5)的柠檬酸... 建立了高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱(HPLP-HG-AFS)联用技术测定抗癌类海洋中药中4种硒形态的方法。样品经超声辅助蛋白酶XIV提取,采用Hamilton PRP-X100阴离子交换柱(250 mm×4. 1 mm,10μm),以5 mmol/L(pH 4. 5)的柠檬酸为流动相,在8 min内可分离4种硒形态:硒代胱氨酸(SeCys2),甲基-硒代半胱氨酸(Me SeCys),亚硒酸盐(Se(Ⅳ)),硒代蛋氨酸(SeMet)。检出限分别为1. 25,1. 03,0. 56,1. 85μg/L,相关系数均大于0. 9990,加标回收率范围为90. 7%~104. 5%。方法可满足海洋中药中硒形态的定量分析。 展开更多
关键词 超声辅助酶提取 高效液相色谱-原子荧光 抗癌 海洋中药 硒形态
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超声波-酶协同提取西藏猫乳总黄酮工艺及抗氧化活性
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作者 次仁德吉 岗尖俄日 +2 位作者 郑瑞 范成德 黄山 《北方园艺》 CAS 北大核心 2023年第14期86-96,共11页
以西藏猫乳茎枝为试材,采用超声波-酶协同法提取其中的总黄酮,通过单因素试验与响应面设计法对提取工艺进行优化,得到最佳工艺参数。在该基础上,将超声波-酶协同法与超声波法、酶解法进行比较,考察其抗氧化活性,以期为西藏猫乳的进一步... 以西藏猫乳茎枝为试材,采用超声波-酶协同法提取其中的总黄酮,通过单因素试验与响应面设计法对提取工艺进行优化,得到最佳工艺参数。在该基础上,将超声波-酶协同法与超声波法、酶解法进行比较,考察其抗氧化活性,以期为西藏猫乳的进一步开发利用提供参考依据。结果表明:超声波-酶协同提取西藏猫乳总黄酮最优条件为纤维素酶浓度0.31 mg·mL^(-1)、乙醇浓度53%、酶解pH 5.0、酶解时间2 h、酶解温度50℃、超声温度50℃、液料比40∶1 mL·g^(-1)、超声时间30 min,在该条件下,总黄酮提取量为17.01 mg·g^(-1),提取工艺稳定可靠。与超声波法和酶解法比较,超声波-酶协同提取总黄酮含量较高,且具有更好的DPPH·和ABTS+·清除能力。 展开更多
关键词 西藏猫乳 总黄酮 响应面优化 超声波-酶协同法 抗氧化
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超声波协同酶法提取黄山贡菊总黄酮及其抗氧化活性 被引量:1
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作者 史建俊 李伟伟 +2 位作者 王免 李秀秀 庄雪燕 《安徽农业科学》 CAS 2020年第24期174-177,180,共5页
[目的]黄山贡菊总黄酮(total flavonoids from Huangshan Gongju,HGTF)提取工艺优化和抗氧化活性测定。[方法]以HGTF提取率为指标,采用单因素和正交试验优化超声波协同酶法提取HGTF工艺。通过自由基清除试验评价HGTF的抗氧化活性。[结果... [目的]黄山贡菊总黄酮(total flavonoids from Huangshan Gongju,HGTF)提取工艺优化和抗氧化活性测定。[方法]以HGTF提取率为指标,采用单因素和正交试验优化超声波协同酶法提取HGTF工艺。通过自由基清除试验评价HGTF的抗氧化活性。[结果]HGTF的最佳提取条件为酶解时间20 min、复合酶质量分数0.1%、纤维素酶和果胶酶配比1∶1、乙醇浓度60%、料液比1∶20(g∶mL)、超声时间40 min、超声功率280 W、超声温度50℃,HGTF提取率为2.78%。抗氧化活性试验结果表明,HGTF溶液对DPPH·、·OH和O 2·-的清除率较高,分别为90.47%(0.05 mg/mL)、73.44%(0.10 mg/mL)和78.73%(0.10 mg/mL)。[结论]复合酶解后超声波提取HGTF条件温和、提取率高。该研究为HGTF的应用提供参考依据。 展开更多
关键词 黄山贡菊 总黄酮 超声波协同酶法 抗氧化活性
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超声波辅助酶法提取甜玉米穗轴黄酮及抑菌性检测 被引量:24
4
作者 刘晓飞 刘宁 +3 位作者 张娜 荆丽荣 于兹冰 马永强 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第20期79-82,共4页
以甜玉米穗轴为原料,利用超声波辅助纤维素酶法提取其中的黄酮类物质,考察纤维素酶作用的酶解时间、酶解温度、pH值以及酶用量对甜玉米穗轴中黄酮类物质提取效果的影响。结果表明:超声波辅助纤维素酶法提取黄酮类物质最佳工艺条件为:超... 以甜玉米穗轴为原料,利用超声波辅助纤维素酶法提取其中的黄酮类物质,考察纤维素酶作用的酶解时间、酶解温度、pH值以及酶用量对甜玉米穗轴中黄酮类物质提取效果的影响。结果表明:超声波辅助纤维素酶法提取黄酮类物质最佳工艺条件为:超声处理20 min后,酶解温度55℃、pH 4.8、纤维素酶用量0.008 g/2.0 g甜玉米穗轴、酶解时间1.5 h,此条件下甜玉米穗轴中黄酮类物质提取率0.318%。甜玉米穗轴中黄酮类物质对白葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有明显的抑制作用,最低抑菌质量浓度分别为0.5、0.25、2 mg/mL。 展开更多
关键词 甜玉米穗轴 黄酮 超声波辅助酶法 抑菌活性
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雪松松针多糖超声波酶法提取及其抗氧化性 被引量:20
5
作者 周思杰 张智红 +2 位作者 段久芳 蒋建新 朱莉伟 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期284-291,共8页
为优化雪松松针多糖超声波酶法的提取工艺,并研究多糖结构及其抗氧化性。通过响应面法分析确定最佳提取参数为:3. 0 g松针粉末,液料比20∶1(m L∶g),提取温度80℃,超声功率560 W,超声时间47 min,纤维素酶用量12 FPU/g原料,提取两次,多... 为优化雪松松针多糖超声波酶法的提取工艺,并研究多糖结构及其抗氧化性。通过响应面法分析确定最佳提取参数为:3. 0 g松针粉末,液料比20∶1(m L∶g),提取温度80℃,超声功率560 W,超声时间47 min,纤维素酶用量12 FPU/g原料,提取两次,多糖得率高达10. 39%。采用高效液相色谱、红外光谱和核磁共振光谱等对松针多糖进行了结构表征,松针多糖以β-糖苷键为主要连接方式,并由葡萄糖、果糖、阿拉伯糖和半乳糖等单糖组成。体外抗氧化性研究结果表明:松针粗多糖对羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)的清除能力远高于纯化多糖,呈现出良好的量效关系,粗多糖对·OH和DPPH·的半抑制浓度IC50分别为0. 47 g/L和0. 076 g/L。 展开更多
关键词 雪松松针 多糖 超声波酶法提取 响应面法 表征 抗氧化性
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超声辅助酶法提取中华鳖裙边胶原蛋白及其热稳定性能 被引量:17
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作者 邹烨 蔡盼盼 +3 位作者 王立 王道营 周涛 徐为民 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期254-259,共6页
以中华鳖裙边为原料,采用单因素试验探讨加酶量、超声时间、超声功率、料液比对胶原蛋白的影响,通过Box-Behnken响应面方法建立数学模型,求得最佳酶提工艺,比较常规酶提和超声辅助酶提胶原蛋白的热稳定性能。结果表明,在提取溶剂为乙酸(... 以中华鳖裙边为原料,采用单因素试验探讨加酶量、超声时间、超声功率、料液比对胶原蛋白的影响,通过Box-Behnken响应面方法建立数学模型,求得最佳酶提工艺,比较常规酶提和超声辅助酶提胶原蛋白的热稳定性能。结果表明,在提取溶剂为乙酸(0.5 mol/L)、料液比1∶20(g/m L)的条件下,采用超声酶提胶原蛋白的最佳工艺参数为加酶量0.8%、超声时间43 min、超声功率176 W,此条件下胶原蛋白得率为74.50%;差示扫描量热实验结果表明,超声酶提胶原蛋白的热稳定性显著优于常规酶提胶原蛋白。该研究可为中华鳖裙边胶原蛋白的精深加工及其应用提供一定科学依据。 展开更多
关键词 中华鳖裙边 超声辅助酶提优化 胶原蛋白 得率 热稳定性
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淫羊藿叶多糖工艺优化及抗氧化活性 被引量:17
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作者 谭莉 陈瑞战 +3 位作者 常清泉 陆娟 金辰光 殷薇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期255-263,共9页
探索和优化超声复合酶解提取淫羊藿叶粗多糖工艺。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化复合酶添加量,再采用Box-Behnken设计和响应面优化超声复合酶解提取工艺参数。结果显示:不同酶添加量对多糖提取得率的影响次序是:纤维素酶>... 探索和优化超声复合酶解提取淫羊藿叶粗多糖工艺。在单因素试验的基础上,通过正交试验优化复合酶添加量,再采用Box-Behnken设计和响应面优化超声复合酶解提取工艺参数。结果显示:不同酶添加量对多糖提取得率的影响次序是:纤维素酶>果胶酶>木瓜蛋白酶>α-淀粉酶,最佳复合酶(木瓜蛋白酶、果胶酶、纤维素酶和α-淀粉酶)的添加量分别为50、250、200、100 U/g;最佳提取条件为提取温度46.8℃、超声时间42.3 min、p H 4.3、超声功率311 W。在此实验条件下,粗多糖提取得率为5.98%,与模型预测值(6.2%)接近。粗多糖通过琼脂糖离子交换和葡聚糖分子筛凝胶柱色谱分离纯化,得到3个主要多糖组分(EPs-1、EPs-2、EPs-3),多糖组分采用DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除和铁离子还原能力实验进行了抗氧化活性评价。结果表明,超声复合酶提取作为一个高效和环保的提取技术,可以应用于从植物原料中提取活性成分;抗氧化活性实验显示3个多糖组分都具有显著的抗氧化活性,其活性呈添加量依赖关系。这些结果说明淫羊藿多糖可以探索作为潜在的抗氧剂应用于功能食品和药品。 展开更多
关键词 淫羊藿多糖 超声复合酶 响应面 抗氧化活性
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桑黄菌丝体的液体发酵培养及多糖提取和抗氧化活性测定 被引量:12
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作者 宋红志 王方芹 +2 位作者 王俊 盛晟 吴福安 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期700-710,共11页
为高效利用桑黄资源开发多糖类抗氧化剂,以菌丝体生物量为考核指标,对桑黄菌丝体的液体摇瓶发酵培养条件进行单因素试验,筛选出较佳的培养条件:以葡萄糖为碳源,大豆蛋白胨为氮源,发酵液p H为6,培养温度为30℃,摇瓶转速为140 r/min,接... 为高效利用桑黄资源开发多糖类抗氧化剂,以菌丝体生物量为考核指标,对桑黄菌丝体的液体摇瓶发酵培养条件进行单因素试验,筛选出较佳的培养条件:以葡萄糖为碳源,大豆蛋白胨为氮源,发酵液p H为6,培养温度为30℃,摇瓶转速为140 r/min,接种量(体积分数)为4%。采用超声波辅助复合酶法提取桑黄多糖,复合酶由3%纤维素酶(酶活力为1.0×10~4U/g)、2%木瓜蛋白酶(1.5×10~4U/g)和1.5%果胶酶(4.0×10~4U/g)组成,通过单因素试验优化提取工艺条件为料液质量浓度20 g/L、超声波功率300 W、处理温度50℃、处理时间45 min,在此条件下多糖得率可达10.867%。采用分光光度法测定6个来源菌株培养桑黄菌丝提取粗多糖的抗氧化活性,结果显示6种桑黄粗多糖样品均表现出较强的体外抗氧化活性,其中韩国来源菌株、中国金寨来源菌株的桑黄多糖对ABTS和DPPH自由基的清除能力最强,具有进一步开发为天然抗氧化剂和自由基清除剂的潜力。 展开更多
关键词 桑黄 发酵培养 多糖 超声波辅助复合酶法提取 抗氧化活性
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超声辅助复合酶法提取花椒多酚工艺及抗氧化作用研究 被引量:8
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作者 王孟 董林娟 赵重博 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2023年第3期56-63,共8页
以花椒为研究对象,选择复合酶加入量、料液比、酶解时间和酶解温度进行单因素实验,以单因素结果为参考,利用响应面法优化超声辅助复合酶法提取花椒多酚工艺,并对其DPPH自由基及ABTS自由基体外抗氧化活性进行研究。结果表明,花椒多酚最... 以花椒为研究对象,选择复合酶加入量、料液比、酶解时间和酶解温度进行单因素实验,以单因素结果为参考,利用响应面法优化超声辅助复合酶法提取花椒多酚工艺,并对其DPPH自由基及ABTS自由基体外抗氧化活性进行研究。结果表明,花椒多酚最佳提取工艺:超声功率180 W,溶液pH=5.0(磷酸盐缓冲液)时,复合酶用量1.28%,料液比1∶26(g/mL),酶解温度41℃,酶解时间31 min,此时,多酚得率为21.98%,与预测值接近,表示该提取方法可靠、可行。当花椒多酚浓度为0.8 mg/mL时,对DPPH、ABTS自由基均有较强的清除作用,且略小于VC的,说明其具有较强的抗氧化性。这为花椒药食两用资源开发、利用提供参考。 展开更多
关键词 花椒 多酚 响应面法 超声辅助复合酶法 抗氧化
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超声-水酶法对高品质薄壳山核桃油释放的影响 被引量:7
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作者 汪锦 应瑞峰 +1 位作者 王耀松 黄梅桂 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第18期177-182,共6页
超声-水酶法(ultrasonic-assisted enzymatic extraction,UAEE)是一种绿色、经济和高效的油脂提取方式。该文采用UAEE提取薄壳山核桃油,经优化的最优条件为:果胶酶添加量1%(质量分数)、酶解时间4 h、料液比1∶8(g∶mL)、超声功率300 W... 超声-水酶法(ultrasonic-assisted enzymatic extraction,UAEE)是一种绿色、经济和高效的油脂提取方式。该文采用UAEE提取薄壳山核桃油,经优化的最优条件为:果胶酶添加量1%(质量分数)、酶解时间4 h、料液比1∶8(g∶mL)、超声功率300 W、超声时间20 min时,油得率可达(73.9±0.78)%。通过透射和扫描电镜表征证实,薄壳山核桃油脂体的直径较大,超声处理产生的空化效应可促进酶与细胞壁的接触面积、加快细胞壁的溃解与油脂释放。通过与常用的机械压榨(mechanical pressing,MP)和超临界流体萃取(supercritical fluid extraction,SFE)提取的薄壳山核桃油比较,UAEE组油的不饱和脂肪酸含量达到90%以上,其中油酸含量为(68.6±0.79)%,显著高于MP组和SFE组;且UAEE组油的热裂解温度最高,表明具有更好的热稳定性。该研究可为高品质薄壳山核桃油的提取提供依据。 展开更多
关键词 薄壳山核桃油 超声-水酶法 脂肪酸组成 热稳定性
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火龙果果皮中水溶性膳食纤维的制备 被引量:7
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作者 牛春艳 郑思蒙 吴琼 《现代食品》 2020年第1期186-188,共3页
本文主要研究了超声波-酶法制备火龙果果皮中膳食纤维的工艺。通过单因素和正交试验,确定了最佳制备工艺条件。最佳制备条件为:纤维素酶用量0.6%,超声时间25 min,pH 5.0,酶解温度55℃。在此条件下,水溶性膳食纤维最佳得率是37.50%。
关键词 火龙果果皮 膳食纤维 超声波-酶法 制备
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柳蒿芽多糖的制备及抗氧化活性研究
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作者 季子琦 刘荣 樊梓鸾 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期235-246,共12页
目的:从柳蒿芽中分离、纯化多糖,对其抗氧化活性进行研究。方法:采用响应面法优化超声波辅助酶法提取柳蒿芽多糖的工艺条件。结果:最佳提取工艺为:超声功率300 W,料液比1∶30 g/mL,超声时间46 min,纤维素酶添加量2.0%,果胶酶添加量3.0%... 目的:从柳蒿芽中分离、纯化多糖,对其抗氧化活性进行研究。方法:采用响应面法优化超声波辅助酶法提取柳蒿芽多糖的工艺条件。结果:最佳提取工艺为:超声功率300 W,料液比1∶30 g/mL,超声时间46 min,纤维素酶添加量2.0%,果胶酶添加量3.0%,此条件下多糖得率为7.67%。采用DEAE-52层析柱分离、纯化共得到6个多糖组分。对AIP-2和AIP-3两个组分进行抗氧化活性的研究表明,不同质量浓度AIP-2和AIP-3处理对H_(2)O_(2)诱导的HepG2细胞氧化损伤均有较强的浓度依赖性保护作用。与模型组相比,高质量浓度AIP-2和AIP-3(50μg/mL)处理使细胞存活率提高了54.35%和60.26%,SOD活力提高了35.86%和38.98%,CAT活力提高了173.02%和205.42%,GSH-PX活力提高了50.24%和50.78%,MDA含量降低了46.13%和53.87%。结论:柳蒿芽多糖具有良好的抗氧化活性。 展开更多
关键词 柳蒿芽多糖 超声波辅助酶法提取 分离、纯化 HEPG2细胞 抗氧化
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响应面法优化刺玫果总黄酮超声辅助酶法提取工艺 被引量:4
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作者 孟永海 付敬菊 +3 位作者 牟景龙 邸金霖 孟祥瑛 翟春梅 《化学与生物工程》 CAS 2019年第12期21-28,共8页
以刺玫果总黄酮提取率为考核指标,采用单因素实验考察酶种类及用量、乙醇体积分数、溶液pH值、料液比、提取温度、提取时间、超声功率、超声温度、超声时间、提取方式等对提取效果的影响;在此基础上,采用响应面法优化刺玫果总黄酮的超... 以刺玫果总黄酮提取率为考核指标,采用单因素实验考察酶种类及用量、乙醇体积分数、溶液pH值、料液比、提取温度、提取时间、超声功率、超声温度、超声时间、提取方式等对提取效果的影响;在此基础上,采用响应面法优化刺玫果总黄酮的超声辅助酶法提取工艺,确定最优工艺条件为:纤维素酶用量15 mg·g^-1、乙醇体积分数60%、溶液pH值5、料液比1∶15(g∶mL)、提取温度50℃、提取时间2.0 h、超声功率450 W、超声温度50℃、超声时间40 min,在此条件下,刺玫果总黄酮提取率达到128.6 mg·g^-1。 展开更多
关键词 刺玫果 总黄酮 超声辅助酶法提取 单因素实验 响应面法
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超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白及其溶解特性 被引量:2
14
作者 李家柔 倪剑波 +4 位作者 何静怡 许惠雅 井璐楠 施文正 《渔业现代化》 CSCD 2022年第6期127-134,共8页
以罗非鱼皮为原料,探究了超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺及其溶解特性。采用超声功率、加酶量、超声时间作为单因素试验自变量,并进行响应面优化,求得使胶原蛋白得率最高的提取条件。将罗非鱼皮超声辅助酶法所得胶原蛋白(U... 以罗非鱼皮为原料,探究了超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺及其溶解特性。采用超声功率、加酶量、超声时间作为单因素试验自变量,并进行响应面优化,求得使胶原蛋白得率最高的提取条件。将罗非鱼皮超声辅助酶法所得胶原蛋白(Ultrasonic pepsin-soluble collagen,UPSC)和常规酶法所得胶原蛋白(Pepsin-soluble collagen,PSC)进行蛋白得率、紫外光谱及溶解特性分析比较。结果显示:最优提取工艺为超声功率165 W、超声时间26 min、加酶量1.67%,此条件下UPSC得率(62.26%)显著高于PSC(29.02%)。紫外光谱分析得到二者的最大吸收峰均在230 nm而不是280 nm处,符合Ι型胶原蛋白特征。在不同pH条件下,UPSC的相对溶解度几乎均高于PSC。研究表明:超声辅助酶法是一种高效、环保、简便的提取罗非鱼皮胶原蛋白的方法,适合工业化生产。本研究不但提供了超声辅助酶法提取罗非鱼皮胶原蛋白的最佳工艺,而且所得胶原蛋白得率高、相对溶解度较好,为其在食品加工方面的应用提供了依据。 展开更多
关键词 罗非鱼皮 超声辅助酶法优化 胶原蛋白 得率 相对溶解度
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Doehlert设计优化超声波辅助酶法提取河蚬多糖工艺研究 被引量:1
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作者 王文骏 廖宁波 刘东红 《中国食物与营养》 2013年第12期48-51,共4页
研究用超声波辅助酶法提取河蚬粗多糖,考察超声温度、超声时间、料液比、超声功率对多糖产量的影响,运用Doehlert matrix设计与响应曲面优化得到了最优条件下的最优产量。结果表明,超声波辅助酶法提取河蚬粗多糖最优工艺参数为超声温度8... 研究用超声波辅助酶法提取河蚬粗多糖,考察超声温度、超声时间、料液比、超声功率对多糖产量的影响,运用Doehlert matrix设计与响应曲面优化得到了最优条件下的最优产量。结果表明,超声波辅助酶法提取河蚬粗多糖最优工艺参数为超声温度82℃、超声时间35min、料液比37mL/g、超声功率270W,多糖产量达到42.7%。 展开更多
关键词 河蚬多糖 超声波辅助酶提取 Doehlert matrix设计
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空心莲子草多糖不同提取工艺的优化与比较
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作者 彭浩 王贤 +3 位作者 温晓鸣 秦宏伟 王晓强 宋文路 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2018年第7期7-15,共9页
优化并比较药食两用植物空心莲子草多糖(Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb polysaccharides,APPs)的超声波辅助法(utrasonic-assisted extraction,UAE)、酶法(enzymatic extraction,EE)、超声-酶协同法(ultrasonic-assisted en... 优化并比较药食两用植物空心莲子草多糖(Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb polysaccharides,APPs)的超声波辅助法(utrasonic-assisted extraction,UAE)、酶法(enzymatic extraction,EE)、超声-酶协同法(ultrasonic-assisted enzymatic extraction,UAE-EE)提取工艺。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken设计和响应面法优化3种提取工艺参数,并比较多糖提取率。结果表明:优化后的最佳提取条件依次为:超声波辅助法,液料比19∶1(mL/g)、超声时间39 min、超声功率165 W;酶法,液料比24∶1(mL/g)、纤维素酶量433 U/g、酶解温度54℃;超声-酶协同法,液料比24∶1(mL/g)、酶量471 U/g、超声时间为26 min。在3种工艺的最优条件下,多糖提取率分别为(5.19±0.16)%、(5.44±0.13)%、(5.82±0.21)%,与各自模型预测值5.29%、5.52%、5.64%接近,且按多糖提取率大小排列依次为超声-酶协同法>酶法>超声波辅助法。因此,采用超声-酶协同法制备空心莲子草多糖有利于提高产量,且安全、环保,便于进一步研究其生物学活性。 展开更多
关键词 空心莲子草多糖 超声波辅助法 酶法 超声-酶协同法 响应面 提取率
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