茶多糖-茶多酚对小鼠肠道氧化应激的改善与作用机制 被引量：7

1

作者 韦铮 贺燕 +2 位作者 黄先智 沈以红 丁晓雯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第11期149-155,共7页

目的:探究茶多糖-茶多酚混合功能成分(tea extract rich in polysaccharides and polyphenols,TEPP)是否能够改善D-半乳糖诱导的小鼠肠道氧化应激反应,同时探究其抗氧化机制。方法:小鼠腹腔注射质量分数10%D-半乳糖8周建立氧化应激模型... 目的:探究茶多糖-茶多酚混合功能成分(tea extract rich in polysaccharides and polyphenols,TEPP)是否能够改善D-半乳糖诱导的小鼠肠道氧化应激反应,同时探究其抗氧化机制。方法:小鼠腹腔注射质量分数10%D-半乳糖8周建立氧化应激模型,造模成功后,正常组与模型组灌胃蒸馏水,阳性组灌胃200 mg/kg m_(b)还原型谷胱甘肽,TEPP低、中、高剂量组分别灌胃40、100、250 mg/kg m_(b)的TEPP,茶多酚组灌胃50 mg/kg m_(b)的茶多酚。用酶联免疫吸附试验试剂盒检测各组小鼠肠组织的总抗氧化能力、活性氧质量浓度、谷胱甘肽还原酶活力、血红素加氧酶活力,通过实时荧光定量聚合酶链式反应法(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)检测各组肠组织Toll样受体4(toll-like receptors,TLR4)、p38、核因子NF-E2相关因子(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)、谷胱甘肽还原酶、血红素加氧酶的mRNA表达量。结果:与模型组相比,TEPP高剂量组的总抗氧化能力上升了约2.2倍,谷胱甘肽还原酶、血红素加氧酶活力分别上升了2.8、1.7倍,活性氧浓度降低了72.8%,TLR4、p38的mRNA表达量分别降低了39.1%、82.4%,Nrf2、谷胱甘肽还原酶、血红素加氧酶的mRNA表达量分别升高了83.6%、8.3倍、96.3%,这些指标变化都与模型组存在显著差异(P<0.05)。结论:TEPP能够通过TLR4/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)/Nrf2通路改善D-半乳糖诱导的小鼠肠道的氧化应激反应。 展开更多

关键词 茶多糖-茶多酚混合功能成分 肠道氧化应激 抗氧化 tlr4/p38 MApK/Nrf2通路

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木丹颗粒对糖尿病周围神经病变大鼠TLR4相关通路的调控作用研究 被引量：5

2

作者 周密 姚伟洁 《西部中医药》 2021年第10期52-56,共5页

目的:探讨木丹颗粒对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)蛋白相关通路的调控作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和高糖组,高糖组制备糖尿病模型,并分... 目的:探讨木丹颗粒对糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)大鼠坐骨神经Toll样受体4(toll-like receptor-4,TLR4)蛋白相关通路的调控作用。方法:将SD雄性大鼠随机分为空白对照组和高糖组,高糖组制备糖尿病模型,并分为模型组,α-硫辛酸组和木丹颗粒组,给予相应药物干预12周后,收集大鼠腹主动脉血制备血清,采用酶联免疫吸附剂法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)含量,收集坐骨神经用于RT-PCR法、免疫荧光化学法和Western blot法测定Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38 MAPK)的mRNA和蛋白表达,电镜下观察大鼠主骨神经髓鞘结构形态。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠神经传导速度(nerve conduction velocity,NCV)显著降低(P<0.05),鼠尾热痛阈值(thermal pain threshold,TPT)显著升高(P<0.05),坐骨神经出现脱髓鞘现象;血清中炎症因子TNF-α和IL-6含量显著升高(P<0.05),坐骨神经中TLR4、MyD88、NF-κB和p38 MAPK的mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,木丹颗粒组大鼠NCV显著升高(P<0.05),TPT显著降低(P<0.05);脱髓鞘现象显著改善;血清中炎症因子TNF-α和IL-6含量显著降低(P<0.05),坐骨神经中TLR4、MyD88、NF-κB和p38 MAPK的mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论:木丹颗粒能够通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路和TLR4/p38 MAPK通路改善炎症反应,改善周围神经功能的损伤,从而防治DPN。 展开更多

关键词 糖尿病周围神经病变 木丹颗粒 tlr4/MyD88/NF-κB通路 tlr4/p38 MApK通路 动物实验

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黄芪甲苷介导TLR4-p38 MAPK信号通路在幼鼠急性肺损伤中的研究 被引量：6

3

作者 王茜 万静 +3 位作者 谭扬茗 罗丹丹 熊海英 姜红 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期106-112,共7页

目的探究黄芪甲苷介导TLR4-p38 MAPK信号通路在幼鼠急性肺损伤模型中的作用。方法以7日龄SD新生仔鼠为实验对象,利用脂多糖构建幼鼠急性肺损伤模型,以地塞米松为阳性药对照,每只幼鼠腹腔注射10 m L/kg黄芪甲苷,造模后12 h和24 h观察肺... 目的探究黄芪甲苷介导TLR4-p38 MAPK信号通路在幼鼠急性肺损伤模型中的作用。方法以7日龄SD新生仔鼠为实验对象,利用脂多糖构建幼鼠急性肺损伤模型,以地塞米松为阳性药对照,每只幼鼠腹腔注射10 m L/kg黄芪甲苷,造模后12 h和24 h观察肺组织病变,检测TLR4、p-p38蛋白和mRNA表达量,TNF-α、IL-6、IL-12炎症因子的mRNA表达量变化。结果模型组在建模后12 h呈现肺出血,大量肺泡萎陷,24 h呈现肺水肿,肺泡间隔明显增宽。和模型组相比,黄芪甲苷组肺组织的病变明显减轻。另外,蛋白检测结果表明,与模型组比较,黄芪甲苷组TLR4、p-p38蛋白表达量明显降低(P<0. 05,P<0. 001) q-PCR结果表明,与模型组比较,黄芪甲苷组TLR4 mRNA相对表达量均有明显的降低,并且和模型组有显著性差异(P<0. 05)。TNF-α、IL-6、IL-12各炎症因子均有下降的趋势,其中IL-12相对表达量和模型组有显著性差异(P<0. 05)。结论黄芪甲苷通过抑制TLR4-p38MAPK信号通路,在幼鼠急性肺损伤模型中起重要作用。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 急性肺损伤模型 tlr4-p38 MApKs信号通路 炎症因子

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麝香安诃痔疮膏皮肤刺激及痔相近模型动物实验研究

4

作者 朱星昊 仁青加 +4 位作者 卓嘎 李闪闪 吴宗耀 苗明三 齐冬梅 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1114-1121,共8页

目的探讨麝香安诃痔疮膏的急性毒性、刺激性及通过TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路对痔相近模型大鼠的影响。方法将16只新西兰家兔随机分为正常皮肤痔疮膏组、正常皮肤对照组、破损皮肤痔疮膏组和破损皮肤对照组,每组4只。两组痔疮膏给药... 目的探讨麝香安诃痔疮膏的急性毒性、刺激性及通过TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路对痔相近模型大鼠的影响。方法将16只新西兰家兔随机分为正常皮肤痔疮膏组、正常皮肤对照组、破损皮肤痔疮膏组和破损皮肤对照组,每组4只。两组痔疮膏给药组家兔脱毛区均匀涂抹麝香安诃痔疮膏(1 g/mL)20 g,两组对照组家兔背部脱毛区均匀涂抹等体积溶媒(甘油、羊毛脂与水的混合物),每天1次,连续14 d。另取40只大鼠随机分为正常组、模型组、马应龙组、痔疮膏组,每组10只。每天涂抹1次,连续14 d。用药后通过苏木素-伊红(HE)染色法等观察家兔局部皮肤急性毒性和刺激性安全状况。对痔相近大鼠肛周组织原位拍照,观察麝香安诃痔疮膏的疗效,并用游标卡尺测量溃疡长、宽,计算溃疡面积,使用qRT-PCR检测大鼠肛周组织中TLR4、p38 MAPK和NF-κB mRNA的表达情况。结果对家兔皮肤急性毒性及刺激性作用,与正常皮肤对照组及破损皮肤对照组比较,正常皮肤痔疮膏组家兔体重无明显变化;与破损皮肤对照组比较,麝香安诃痔疮膏对破损皮肤家兔用药1、24、48、72 h刺激性评价积分均值分别为1.5、1、0.5和0.25,无明显皮肤刺激性。对痔相近大鼠的影响,与模型组比较,痔疮膏组大鼠在经14 d给药后症状明显减轻;大鼠溃疡面积均明显减少,具有统计学意义(P<0.05);TLR4、p38 MAPK、NF-κB mRNA水平显著降低,具有统计学意义(P<0.05)。结论麝香安诃痔疮膏对家兔皮肤的急性毒性、刺激性较小,是一种安全的外用药膏,在对痔相近大鼠的治疗中取得了较好的疗效,其作用机制可能与抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路相关。 展开更多

关键词 麝香安诃痔疮膏 皮肤刺激 痔相近模型 tlr4/p38 MApK/NF-κB信号通路

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基于网络药理学与分子对接探讨桔梗汤治疗慢性咽炎的作用机制

5

作者 苏文涛 韩玉欣 +4 位作者 王慧 何荣旺 申胜 何旭东 何金彪 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1876-1885,共10页

目的基于网络药理学与分子对接技术,预测桔梗汤干预慢性咽炎的关键靶点及作用通路,并通过动物实验验证预测结果。方法建立乙型溶血性链球菌诱导的慢性咽炎大鼠模型,探究桔梗汤对慢性咽炎大鼠血清炎症因子及咽部组织病理变化的影响。使... 目的基于网络药理学与分子对接技术,预测桔梗汤干预慢性咽炎的关键靶点及作用通路,并通过动物实验验证预测结果。方法建立乙型溶血性链球菌诱导的慢性咽炎大鼠模型,探究桔梗汤对慢性咽炎大鼠血清炎症因子及咽部组织病理变化的影响。使用人类在线孟德尔遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)、DrugBank和GeneCards数据库筛选慢性咽炎关键靶点;UHPLC-QE-MS分析桔梗汤化学成分,结合中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Database and Analysis Platform,TCMSP)和SwisstargetPredicition数据库确认成分作用靶点。使用STRING平台构建关键靶点蛋白互作网络;通过注释、可视化和综合发现数据库(Database for Annotation,Visualization and Integrated Discovery,DAVID)对关键靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)分析和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路富集分析;通过AutoDock Tools 1.5.6软件对有效成分及核心靶点进行分子对接;Western Blot法验证预测结果。结果体内实验显示,桔梗汤可有效降低慢性咽炎大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、ICAM-1、MCP1水平(P<0.05),并逆转咽部组织病理损伤。得到94个桔梗汤主要活性成分,协同作用于311个靶点,参与外源性刺激反应、药物反应、蛋白酪氨酸激酶活性等生物学过程,调控PI3K/AKT、MAPK、Ras等信号通路;分子对接结果显示关键靶点与有效成分间均有较强的结合能力;Western Blot显示桔梗汤可显著降低TLR4蛋白表达及P38 MAPK磷酸化水平。结论桔梗汤通过调控TLR4/P38 MAPK信号通路降低血清炎症因子及逆转咽部组织病理变化从而治疗慢性咽炎。 展开更多

关键词 桔梗汤 慢性咽炎 炎症 网络药理学 分子对接 tlr4/p38 MApK信号通路 大鼠

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大黄蛰虫胶囊对糖尿病大鼠视网膜炎症的抑制作用 被引量：2

6

作者 范胜男 李宝花 +1 位作者 宫先旭 郭承伟 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1482-1487,共6页

目的探讨大黄蛰虫胶囊抑制糖尿病大鼠视网膜炎症的作用机制。方法随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只均采用链佐脲菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型组及大黄蛰虫胶囊低、中、高剂量组(0.17、0.34、0.68 g/... 目的探讨大黄蛰虫胶囊抑制糖尿病大鼠视网膜炎症的作用机制。方法随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只均采用链佐脲菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型组及大黄蛰虫胶囊低、中、高剂量组(0.17、0.34、0.68 g/kg),给予相应药物干预。第1个月每2周记录大鼠体质量及空腹血糖,随后每4周记录1次。给药12周后,HE染色观察视网膜病理学改变,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6水平,RT-qPCR法检测视网膜组织VEGF、NF-κB、p38 MAPK mRNA表达,Western blot法检测视网膜组织TLR4、p-p38 MAPK、p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达。结果空白组大鼠体质量随实验周期延长保持正常增长,空腹血糖维持在正常水平;模型组大鼠体质量增长缓慢,造模4周后,体质量逐渐下降,空腹血糖持续保持在较高水平。与空白组比较,模型组大鼠视网膜可观察到明显病理性损伤,血清TNF-α、IL-6水平、视网膜VEGF mRNA表达及TLR4、NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,大黄蛰虫胶囊各剂量组均可改善视网膜病理损伤,抑制血清TNF-α、IL-6水平、视网膜VEGF mRNA表达及TLR4、NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达(P<0.05,P<0.01),且中剂量组作用优于高、低剂量组(P<0.05,P<0.01)。结论大黄蛰虫胶囊可减轻糖尿病大鼠视网膜病理损伤,其可能是通过抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路发挥抗炎作用。 展开更多

关键词 大黄蛰虫胶囊 糖尿病视网膜病变 促炎因子 tlr4/p38 MApK/NF-κB信号通路

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益肾通癃汤通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌作用机制研究 被引量：1

7

作者 涂雅玲 刘德果 +2 位作者 羊羡 李博 陈其华 《Digital Chinese Medicine》 CSCD 2023年第1期86-96,共11页

目的探讨益肾通癃汤(YSTLD)通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌的作用机制。方法借助miRNA芯片技术检测YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后的miRNA表达谱的变化,筛选miRNA芯片结果中差异显著的miRNA,并通过实时荧... 目的探讨益肾通癃汤(YSTLD)通过上调miR-145-5p抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路抗前列腺癌的作用机制。方法借助miRNA芯片技术检测YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后的miRNA表达谱的变化,筛选miRNA芯片结果中差异显著的miRNA,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)进行验证。慢病毒转染miR-145-5p入前列腺癌PC-3细胞,CCK8法及划痕实验检测miR-145-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖与迁移作用;qRT-PCR法及Wstern blot法检测miR-145-5p对TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路及凋亡相关基因caspase3、TNF-α、Bax、Bcl-2表达的影响;qRT-PCR及Wstern blot法检测YSTLD含药血清对miR-145-5p、TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路及凋亡相关基因caspase3、TNF-α、Bax、Bcl-2表达的影响。结果miRNA基因芯片检测发现YSTLD处理前列腺癌PC-3细胞后存在35种miRNA表达水平与对照组存在显著差异,其中以miR-145-5p差异最为显著,同时qRT-PCR验证发现YSTLD处理的PC-3细胞中的miR-145-5p水平显著高于DMSO对照组(P<0.05)。慢病毒转染miR-145-5p入前列腺癌PC-3细胞后,发现miR-145-5p能抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移。过表达miR-145-5p可上调前列腺癌PC-3细胞caspase3、TNF-α及Bax mRNA表达水平,下调p38 MAPK、p65 NF-κB及Bcl-2的mRNA表达水平(P<0.05),同时上调前列腺癌PC-3细胞caspase3蛋白表达水平,下调TLR4、p38 MAPK、p65 NF-κB的蛋白表达水平(P<0.05);YSTLD含药血清在干预前列腺癌PC-3细胞后,可上调前列腺癌PC-3细胞caspase3、TNF-α及Bax mRNA表达水平,下调p38 MAPK、p65 NF-κB、Bcl-2、TRAF1的mRNA表达水平(P<0.05),同时上调前列腺癌PC-3细胞caspase3蛋白表达水平,下调TLR4、p38 MARK、p65 NF-κB、TRAF1的蛋白表达水平(P<0.05)。结论YSTLD可通过上调miR-145-5p的表达水平,抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路促进前列腺癌PC-3细胞凋亡,这可能是YSTLD抗前列腺癌的重要机制。 展开更多

关键词 前列腺癌 益肾通癃汤 基因芯片技术 miR-145-5p tlr4/p38 MApK/NF-κB信号通路

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TLR_4/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用 被引量：11

8

作者 蒋伟 张弦 周爱玲 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第6期571-576,共6页

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用及其机制,为神经退行性疾病(ND)的发病机制与防治研究提供新的实验依据。方法:采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元,免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度。用TLR4配... 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)/P38/JNK信号通路在海马神经元凋亡中的作用及其机制,为神经退行性疾病(ND)的发病机制与防治研究提供新的实验依据。方法:采用体外培养7 d的新生大鼠海马神经元,免疫荧光双标法鉴定海马神经元纯度。用TLR4配体脂多糖(LPS)或TLR4抗体预处理海马神经元,以激活或阻断TLR4的作用。实验1设正常对照组、LPS组及TLR4抗体+LPS组;免疫荧光法检测P-P38,P-JNK的表达。实验2分为6组:正常对照组,LPS组,TLR4抗体+LPS组,SB202190(抑制P38)+LPS组,SP600125(抑制JNK)+LPS组,PD98059(抑制ERK)+LPS组;分别用TLR4抗体、P38、JNK及ERK的抑制剂预处理海马神经元后再给以LPS刺激24 h,Western blot法检测Bcl-2,Bax,Active-caspase-3的表达变化;流式细胞术检测海马神经元凋亡率。结果:LPS组海马神经元P-P38、P-JNK的表达明显高于正常对照组(P<0.01),TLR4抗体+LPS组P-P38,P-JNK表达显著低于LPS组(P<0.01)。与正常对照组相比,LPS组海马神经元Bcl-2/Bax表达减少、Active-caspase-3表达增加,海马神经元凋亡率增加(P<0.01)。而TLR4抗体+LPS组、SB202190+LPS组、SP600125+LPS组Bcl-2/Bax显著高于LPS组、Active caspase-3显著低于LPS组(P<0.01),海马神经元凋亡率显著低于LPS组(P<0.05,P<0.01)。PD98059+LPS组与LPS组海马神经元凋亡率无明显差异。结论:1海马神经元中有TLR4介导的P38/JNK信号通路。2海马神经元TLR4激活后,P-P38、P-JNK表达增加,使Bcl-2/Bax的比例降低和Active-caspase-3表达增加,从而促进海马神经元的凋亡。海马神经元凋亡过程中有TLR4介导的P38/JNK信号通路的参与。 展开更多

关键词 海马神经元 tlr4/p38/JNK信号通路 BCL-2/BAX 凋亡蛋白酶-3 细胞凋亡 脂多糖

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疏肝健脾方药含药血清对LPS刺激下大鼠肝细胞炎症损伤及TLR4/p38MAPK信号通路影响的研究 被引量：10

9

作者 龚享文 杨钦河 +6 位作者 闫海震 张玉佩 梁荫基 刘益臻 张金文 林春梅 李媛媛 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期4027-4033,共7页

目的： 研究疏肝健脾方药含药血清对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激下大鼠肝细胞炎症反应及TLR4（Toll样受体-4）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38MAPK）信号通路的影响。 方法： 体外培养... 目的： 研究疏肝健脾方药含药血清对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）刺激下大鼠肝细胞炎症反应及TLR4（Toll样受体-4）/p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38MAPK）信号通路的影响。 方法： 体外培养并鉴定SD大鼠肝细胞，制备疏肝健脾方药含药血清，对肝细胞进行疏肝健脾方药、p38MAPK抑制剂等药物干预，酶联免疫法（ELISA）检测细胞上清液中白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的表达，Western blot检测 TLR4，p38MAPK，p-p38MAPK蛋白的表达。 结果： 可提取大鼠疏肝健脾方药含药或空白血清约2～3 mL，大鼠获得纯化后肝细胞1.5×10^8～2.0×10^8个，Typan blue染色测定细胞活力均在95%以上，免疫荧光法鉴定确定提取的为肝细胞。肝细胞培养上清的检测： LPS组较空白血清组IL-6，TNF-α水平均有显著升高（P〈0.01）。与LPS组比较，药物干预组IL-6，TNF-α表达水平呈显著降低（P〈0.01）。肝细胞的蛋白检测：与空白血清组比较，LPS组的p38MAPK，p-p38MAPK，TLR4蛋白表达均有显著升高（P〈0.01）；与LPS组比较，SB239063能显著下调p38MAPK的蛋白表达水平（P〈0.01），疏肝健脾组亦有下调，但无显著差异；疏肝健脾组，SB239063组的p-p38MAPK的蛋白表达水平均下调显著（P〈0.01）；TLR4蛋白表达水平以疏肝健脾组下调具有显著性差异（P〈0.01），SB239063组下调无显著统计学差异。 结论： 疏肝健脾方药可能通过TLR4/p38MAPK信号通路调控大鼠肝细胞炎症损伤，含药血清可能是其重要的作用途径之一。 展开更多

关键词 疏肝健脾方药 肝细胞 炎症损伤 tlr4/p38MApK信号通路 血清药理学

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疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的影响 被引量：10

10

作者 李媛媛 杨钦河 +9 位作者 张金文 龚享文 王观龙 梁荫基 张玉佩 王洪 金玲 何毅芳 邓远军 林春梅 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期6649-6653,共5页

目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的干预作用,从炎症角度揭示疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制。方法选用SPF级SD大鼠120只,随机分为8组。采用高脂饲料喂养建立大鼠NASH模型,26 w后对肝... 目的探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK信号通路的干预作用,从炎症角度揭示疏肝健脾方药抗大鼠NASH的作用机制。方法选用SPF级SD大鼠120只,随机分为8组。采用高脂饲料喂养建立大鼠NASH模型,26 w后对肝组织进行HE染色,油红O染色,全自动生化分析肝功血脂改变,ELISA检测血清白介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量;采用离体循环灌注Ⅳ型胶原酶法分离肝细胞,流式细胞术(FCM)对肝细胞纯度进行活性和纯度鉴定。荧光定量PCR检测肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达量;Western印迹法检测肝细胞蛋白TLR4、p38MAPK及磷酸化蛋白p38MAPK表达水平。结果 26 w高脂饮食成功建立了NASH大鼠模型,HE染色和油红O染色证实大鼠模型存在典型的NASH病理改变。与正常组比较,模型组血清IL-1、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组IL-1、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05,P<0.01),健脾高剂量组IL-1、IL-6含量降低有统计学差异(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠肝细胞TLR4、p38MAPK mRNA表达及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著增加(P<0.01);各用药组与模型组比较,合方高、低剂量组,健脾高剂量组TLR4、p38MAPK mRNA蛋白及磷酸化蛋白p38MAPK表达量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论疏肝健脾方药能够降低NASH大鼠血清炎症因子水平,改善NASH大鼠肝脏的病理变化,TLR4/p38MAPK可能是疏肝健脾方药发挥抗NASH作用的药物靶点。 展开更多

关键词 疏肝健脾方药 NASH 肝细胞 tlr4/p38MApK信号通路

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氧化苦参碱联合复方茵陈颗粒对大鼠肝BRL-3A细胞凋亡的抑制作用及其机制 被引量：9

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作者 张弦 蒋伟 +2 位作者 蒋道荣 张彬 朱雪娟 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期366-369,共4页

目的:探讨氧化苦参碱(OMT)联合复方茵陈颗粒(FYK)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肝BRL-3A细胞凋亡的抑制作用及其机制,为该联合用药抑制肝细胞凋亡提供更多的实验依据。方法:采用LPS诱导大鼠肝BRL-3A细胞建立细胞凋亡模型。应用CCK-8法测定BRL... 目的:探讨氧化苦参碱(OMT)联合复方茵陈颗粒(FYK)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肝BRL-3A细胞凋亡的抑制作用及其机制,为该联合用药抑制肝细胞凋亡提供更多的实验依据。方法:采用LPS诱导大鼠肝BRL-3A细胞建立细胞凋亡模型。应用CCK-8法测定BRL-3A细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测BRL-3A细胞中TLR4、P38、P-P38、JNK及P-JNK蛋白的表达;RT-q PCR法检测BRL-3A细胞中Bax、Bcl-2及Caspase-3 m RNA的表达。结果:CCK-8法结果显示,OMT可以减弱由LPS引起的细胞活力降低(P<0.05),OMT+FYK-M+LPS组及OMT+FYK-H+LPS组细胞活力高于OMT组(P<0.05);OMT预处理后细胞凋亡率低于LPS组(P<0.05),OMT+FYK-M+LPS组及OMT+FYK-H+LPS组细胞凋亡率低于OMT组(P<0.05)。Western blot结果显示,LPS组TLR4、P-P38/P38、P-JNK/JNK的表达较正常组增加(P<0.05);OMT可以下调TLR4、P-P38/P38、P-JNK/JNK的表达(P<0.01,P<0.05),OMT+FYK-M+LPS组及OMT+FYK-H+LPS组TLR4、P-P38/P38低于OMT组(P<0.05)。OMT+FYK-H+LPS组P-JNK/JNK低于OMT组(P<0.05)。RT-q PCR结果显示:LPS组Bax/Bcl-2及Caspase-3 m RNA表达较正常组明显增高(P<0.01)。OMT能够降低Bax/Bcl-2及Caspase-3 m RNA的水平(P<0.05)。OMT+FYK-M+LPS组、OMT+FYK-H+LPS组Bax/Bcl-2及Caspase-3 m RNA表达低于OMT组(P<0.05,P<0.01)。结论:OMT联合FYK预处理可通过TLR4/P38/JNK信号通路抑制BRL-3A细胞凋亡。 展开更多

关键词 肝衰竭 tlr4/p38/JNK 细胞凋亡 氧化苦参碱 复方茵陈颗粒

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小檗碱调控TLR4/p38MAPK通路促进脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复 被引量：2

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作者 冯慧聪 高娜娜 宋小峰 《锦州医科大学学报》 CAS 2024年第3期19-24,共6页

目的 观察小檗碱对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用并探索其作用机制。方法 SD大鼠45只,随机分为假手术组(sham)、模型组(MCAO/R)、小檗碱治疗组(Ber)。通过线栓法建立脑缺血再灌注模型。Ber组给药剂量为140 mg/kg。给药28 d后应用Z... 目的 观察小檗碱对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用并探索其作用机制。方法 SD大鼠45只,随机分为假手术组(sham)、模型组(MCAO/R)、小檗碱治疗组(Ber)。通过线栓法建立脑缺血再灌注模型。Ber组给药剂量为140 mg/kg。给药28 d后应用Zea-longa评分和旋转棒实验评估大鼠神经功能。给药24 h后通过TTC染色观察并统计梗死面积。给药24 h后取材大鼠脑组织,应用免疫荧光染色观察白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)的表达,应用免疫酶联吸附实验(enzyme linked immunosorbent assa, ELISA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin 10,IL-10)的含量,通过Western Blot方法检测各组脑组织中TLR4、P-p38MAPK、p38MAPK蛋白含量。结果 Zea-longa评分和旋转棒实验结果证明小檗碱显著改善脑缺血再灌注损伤大鼠的运动能力。TTC染色结果表明小檗碱减少梗死面积。免疫荧光染色和ELISA实验结果证实小檗碱能够减少缺血损伤脑组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6的含量,增加抗炎因子IL-10的含量。Western Blot结果提示小檗碱影响TLR4/p38MAPK通路蛋白的表达。结论 小檗碱通过TLR4/p38MAPK信号通路抑制MCAO/R大鼠脑组织中炎症因子的分泌,促进缺血再灌注大鼠神经功能恢复。 展开更多

关键词 小檗碱 脑缺血再灌注 tlr4/p38MApK信号通路 炎症因子

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FGF21对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK通路的影响 被引量：4

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作者 车兴影 韩继武 《医学研究杂志》 2018年第5期130-135,共6页

目的探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对谷氨酸钠(MSG)诱导非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞炎症及TLR4/p38MAPK信号通路的影响。方法新生SD大鼠随机分成正常对照组、MSG组和FGF21组(n=10)。MSG组和FGF21组大鼠于生后第2、4、6、8、10天皮下注... 目的探讨成纤维细胞生长因子21(FGF21)对谷氨酸钠(MSG)诱导非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞炎症及TLR4/p38MAPK信号通路的影响。方法新生SD大鼠随机分成正常对照组、MSG组和FGF21组(n=10)。MSG组和FGF21组大鼠于生后第2、4、6、8、10天皮下注射MSG 4g/(kg·d)喂养至13周,FGF21组大鼠腹腔注射FGF21 1mg/(kg·d)32天。HE染色分析肝脏病理学改变;观察肝重、肝功能;qRT-PCR和Western blot法检测肝组织IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK表达情况。结果与正常对照组比较,MSG组大鼠肝细胞发生脂肪变性伴炎性细胞浸润,肝重、ALT、AST、ALP水平升高(P<0.01),肝细胞IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK mRNA表达增加(P<0.01),TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达升高(P<0.01);与MSG组比较,FGF21组大鼠肝细胞脂泡和炎性细胞减少,肝重、ALT、AST、ALP降低(P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05),IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK mRNA表达下降(P<0.01),TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白水平降低(P<0.01)。结论 FGF21可能通过调节TLR4/p38MAPK信号转导通路,抑制NAFLD炎性反应。 展开更多

关键词 成纤维细胞生长因子21 非酒精性脂肪性肝病 tlr4/p38MApK信号通路

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基于TLR4/p38MAPK/AP-1信号通路探讨心痛泰对兔动脉粥样硬化和血管重构的影响 被引量：4

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作者 易琼 李雅 +4 位作者 郭志华 刘梨 张建影 任欣 齐婧 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期3878-3884,共7页

目的:基于TLR4/p38MAPK/AP-1信号通路探讨心痛泰对兔动脉粥样硬化和血管重构的影响。方法:日本大耳白兔120只随机分为空白组,模型组,心痛泰低、中、高剂量组和瑞舒伐他汀组。采用前瞻性实验研究,造模的同时给予药物灌胃。8周后取胸主动... 目的:基于TLR4/p38MAPK/AP-1信号通路探讨心痛泰对兔动脉粥样硬化和血管重构的影响。方法:日本大耳白兔120只随机分为空白组,模型组,心痛泰低、中、高剂量组和瑞舒伐他汀组。采用前瞻性实验研究,造模的同时给予药物灌胃。8周后取胸主动脉,免疫组化法测定白介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1);Masson染色观察胶原分解和平滑肌纤维;测定胸主动脉最大内膜厚度(MIT)、最小管腔直径(MLD)、管腔面积(LA)、内弹力膜围绕面积(IELa)、外弹力膜围绕面积(EELa),计算内膜面积(IA)、中膜面积(MA)、管腔狭窄百分比(LS);Western Blot法测定胸主动脉组织Toll样受体-4(TLR4)、丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、转录激活因子(AP-1)的蛋白表达。结果:与模型组比较,心痛泰各剂量组、瑞舒伐他汀组IL-8、MCP-1、MMP-9含量显著降低(P<0.01),TIMP-1含量显著升高(P<0.05,P<0.01),TLR4、p38MAPK、AP-1的蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01);与心痛泰低剂量组比较,心痛泰高剂量组及瑞舒伐他汀组IL-8、MCP-1、MMP-9显著降低(P<0.01),TIMP-1升高(P<0.01),TLR4、p38MAPK、AP-1的蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,心痛泰各剂量组、瑞舒伐他汀组的IA、MA、LS均显著降低(P<0.01)。与心痛泰低剂量组比较,心痛泰中、高剂量组和瑞舒伐他汀组的IA、MA、LS均显著降低(P<0.01)。Masson染色显示,模型组管壁变薄,胶原分解增多,平滑肌纤维排列紊乱,管腔直径扩大,管腔内血栓形成;与模型组比较,心痛泰各剂量组和瑞舒伐他汀组动脉管壁胶原纤维分解减少,平滑肌细胞排列较为整齐,管腔、管壁结构有所改善。结论:心痛泰可能是通过调控TLR4/p38MAPK/AP-1信号通路及下游的细胞因子,减少血管胶原分解、抑制纤维细胞增生,改善动脉粥样硬化和血管重构。 展开更多

关键词 心痛泰 动脉粥样硬化 血管重构 tlr4/p38MApK/Ap-1信号通路

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小金丸治疗大鼠阴茎纤维化的作用及其机制研究

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作者 徐渊明 陈少峰 +3 位作者 赵丰 孙远 李重 耿强 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2024年第6期782-786,共5页

目的:研究小金丸对大鼠阴茎硬结症模型阴茎海绵体内Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、基质金属蛋白酶(MMP)1的表达调节及对大鼠阴茎纤维化作用的可能机制。方法:将雄性SD大鼠18只随机分为3组:对照组、模型组、小金丸治... 目的:研究小金丸对大鼠阴茎硬结症模型阴茎海绵体内Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、基质金属蛋白酶(MMP)1的表达调节及对大鼠阴茎纤维化作用的可能机制。方法:将雄性SD大鼠18只随机分为3组:对照组、模型组、小金丸治疗组;对照组阴茎海绵体白膜下注射生理盐水,饲养6周后双蒸水灌胃;模型组、小金丸治疗组阴茎海绵体白膜下注TGF-β1(转化生长因子-β1),饲养6周后用小金丸灌胃;模型组大鼠与小金丸治疗组等量双蒸水灌胃;3组灌胃处理4周后处死,留取大鼠阴茎组织。采用HE染色观察阴茎海绵体纤维化程度;PCR和Western Blot检测TLR4-p38MAPK-MMP1通路RNA和蛋白表达情况。结果:病理组织学HE染色发现,模型组比对照组纤维化明显增加;小金丸治疗组与模型组相比纤维化明显减少。对照组和小金丸治疗组的TLR4-p38MAPK-MMP1 RNA表达量及TLR4-p38MAPK-MMP1蛋白表达明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:阴茎硬结症大鼠模型阴茎海绵体内纤维化明显,TLR4-p38MAPK-MMP1表达增加;小金丸治疗后,纤维化明显改善,TLR4-p38MAPK-MMP1表达减少。小金丸治疗阴茎硬结症与TLR4-p38MAPK-MMP1介导的抗纤维化作用有关。 展开更多

关键词 阴茎硬结症 小金丸 tlr4-p38MApK-MMp1信号通路 大鼠 抗纤维化

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TLR4-P38MAPK信号通路在LPS诱导BV2细胞中的表达及意义 被引量：3

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作者 吴非 罗涛 +1 位作者 郭远瑾 梅元武 《中国实用神经疾病杂志》 2013年第11期7-9,共3页

目的观察LPS诱导小胶质细胞后信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)的表达及意义。方法体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组、LPS诱导组(LPS刺激12h及24h)及SB203580干预组(LPS+SB203580诱导12h及24h),应用ELISA法检测各组TNF... 目的观察LPS诱导小胶质细胞后信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)的表达及意义。方法体外培养BV2小胶质细胞,分为对照组、LPS诱导组(LPS刺激12h及24h)及SB203580干预组(LPS+SB203580诱导12h及24h),应用ELISA法检测各组TNF-α、IL-6水平,RT-PCR法检测各组TLR4mRNA和p38MAPK mRNA的表达变化。结果 LPS诱导组细胞分泌TNF-α、IL-6水平显著提高,诱导24h后细胞上清液含量分别为(513.67±14.05)pg/mg和(396.84±15.41)pg/mg。给予SB203580抑制剂后TLR4mRNA和p38MAPK mRNA表达明显减弱,细胞分泌TNF-α、IL-6含量表达与感染组比较也明显降低。结论 LPS刺激小胶质细胞可引起TLR4-p38MAPK信号通路的活化并释放炎性细胞因子,而SB203580则对其有明显的抑制作用,证明TLR4-p38MAPK信号通路与小胶质细胞的炎性活化密切相关。 展开更多

关键词 tlr4-p38MApK信号通路 小胶质细胞 LpS SB203580

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细菌性脑炎模型信号通路样受体4-p38蛋白激酶信号途径的表达及意义 被引量：2

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作者 吴非 罗涛 +1 位作者 郭远瑾 梅元武 《中国医刊》 CAS 2013年第7期43-45,共3页

目的观察信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)在小鼠细菌性脑炎模型中的表达及意义。方法将BABL/c小鼠30只随机分为正常组、细菌性脑炎模型组、SB203580(p38MAPK抑制剂)干预组,分别按干预后3、7天各分两组。正常组侧脑室注... 目的观察信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)在小鼠细菌性脑炎模型中的表达及意义。方法将BABL/c小鼠30只随机分为正常组、细菌性脑炎模型组、SB203580(p38MAPK抑制剂)干预组,分别按干预后3、7天各分两组。正常组侧脑室注入生理盐水,模型组侧脑室给予脂多糖(LPS);干预组在给予LPS后即在腹腔注射SB203580。检测脑组织TLR4mRNA和p38MAPKmRNA的表达变化,测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的含量。结果与正常组比较,LPS刺激后小鼠脑组织TLR4 mRNA和p38MAPKmRNA表达迅速升高,其相应的脑组织TNF-α、IL-6含量表达也升高,第7天的含量分别为(65.95±8.82)Pg/mg和(70.75±8.65)pg/mg。给予SB203580抑制剂后TLR4mRNA和p38MAPKmRNA表达明显减弱,其相应的脑组织TNF-α、IL-6含量表达与感染组比较也明显降低。结论LPS刺激小鼠脑组织可引起TLR4-p38 MAPK信号通路的活化并释放炎性细胞因子,而SB203580则对其有明显的抑制作用,证明细菌性脑炎与TLR4-p38MAPK信号通路密切相关。 展开更多

关键词 细菌性脑炎 tlr4一p38 MApK信号通路 SB203580

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TLR4-p38MAPK信号通路在金黄色葡萄球菌感染人巨噬细胞系U937过程中的表达及意义 被引量：2

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作者 王佳贺 岳冬梅 何平 《实用药物与临床》 CAS 2014年第11期1371-1373,共3页

目的观察金黄色葡萄球菌感染人巨噬细胞系U937细胞后信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)的表达及意义。方法体外培养人巨噬细胞系U937细胞,感染0、30、60和90 min时收集细胞,应用Western blot法检测各组TLR4和p38MAPK蛋白... 目的观察金黄色葡萄球菌感染人巨噬细胞系U937细胞后信号通路Toll样受体4(TLR4)-p38蛋白激酶(p38MAPK)的表达及意义。方法体外培养人巨噬细胞系U937细胞,感染0、30、60和90 min时收集细胞,应用Western blot法检测各组TLR4和p38MAPK蛋白表达的变化;在另一实验中,分为对照组、金黄色葡萄球菌感染60 min组及p38MAPK抑制剂SB203580 5 mg/m L干预组、SB203580 10 mg/m L干预组,应用Western blot法检测各组TLR4和p38MAPK蛋白表达的变化。结果随着感染时间的延长,TLR4和p38MAPK蛋白的表达逐渐增加;给予SB203580抑制剂后,TLR4和p38MAPK蛋白的表达明显减弱。结论金黄色葡萄球菌感染U937细胞可引起TLR4-p38MAPK信号通路的活化,而SB203580对其有明显的抑制作用,证明TLR4-p38MAPK信号通路与金黄色葡萄球菌感染U937细胞密切相关。 展开更多

关键词 tlr4一p38MApK信号通路 U937细胞 金黄色葡萄球菌 SB203580

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心痛泰抑制动脉粥样硬化兔炎症反应的作用机理研究 被引量：2

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作者 张建影 李雅 +3 位作者 郭志华 易琼 任欣 刘梨 《中国中医急症》 2018年第9期1508-1513,共6页

目的观察心痛泰对动脉粥样硬化兔Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、髓过氧化物酶(MPO)、Ras基因家族成员A(Rho A)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响,探讨心痛泰治疗动脉粥样硬化的可能作用机制。方法采用高脂... 目的观察心痛泰对动脉粥样硬化兔Toll样受体4(TLR4)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、髓过氧化物酶(MPO)、Ras基因家族成员A(Rho A)、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)表达的影响,探讨心痛泰治疗动脉粥样硬化的可能作用机制。方法采用高脂饲料喂养联合免疫损伤建立兔动脉粥样硬化模型,分别予生理盐水、瑞舒伐他汀、心痛泰高、中、低剂量进行干预,采用Western blotting、RT-PCR检测胸主动脉TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A、e NOS蛋白及m RNA的表达水平。结果与空白组比较,模型组TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A蛋白、m RNA的表达均升高,e NOS蛋白、m RNA的表达降低,差异有显著统计学意义(P<0.01);与模型组比较,心痛泰低剂量组MPO蛋白、MPO m RNA、Rho A蛋白、m RNA、p38MAPK m RNA表达均降低,e NOS蛋白、e NOS m RNA表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,心痛泰中剂量组p38MAPK、MPO、Rho A蛋白、m RNA及TLR4 m RNA表达均降低,e NOS蛋白、m RNA表达均升高,差异有显著统计学意义(P<0.05);与模型组比较,心痛泰高剂量组TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A蛋白、m RNA的表达均降低,e NOS蛋白、e NOS m RNA的表达均上升,差异有显著统计学意义(P<0.01);阳性组与心痛泰高剂量组比较,TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A、e NOS蛋白及其m RNA的表达虽有差异,但均无统计学意义(P>0.05)。结论心痛泰可能通过降低TLR4、p38 MAPK、MPO、Rho A蛋白及其m RNA的表达,上调e NOS蛋白、e NOS m RNA的表达,抑制血管内炎症,保护主动脉血管内皮,达到治疗动脉粥样硬化的目的 。 展开更多

关键词 心痛泰 动脉粥样硬化 Toll样受体4 p38丝裂原活化蛋白激酶 髓过氧化物酶 Ras基因家族成员A 内皮型一氧化氮合酶1

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热休克蛋白在大鼠慢性吗啡镇痛耐受中的作用及机制 被引量：1

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作者 赵彦芬 赵峰 +1 位作者 刘鹏森 毛轲 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1242-1247,共6页

目的探讨热休克蛋白60(HSP60)在慢性吗啡镇痛耐受中的作用及机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、吗啡组(n=10)、siRNA-阴性对照(siRNA-NC)+吗啡组(n=10)、siRNA-HSP60+吗啡组(n=10)与脂多糖(LPS)+siRNA-HSP60+吗啡组(n=10)... 目的探讨热休克蛋白60(HSP60)在慢性吗啡镇痛耐受中的作用及机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=10)、吗啡组(n=10)、siRNA-阴性对照(siRNA-NC)+吗啡组(n=10)、siRNA-HSP60+吗啡组(n=10)与脂多糖(LPS)+siRNA-HSP60+吗啡组(n=10)。对照组和吗啡组分别于鞘内注射10μl生理盐水和吗啡;siRNA-NC+吗啡组和siRNA-HSP60+吗啡组分别给予10μl siRNA-NC和siRNA-HSP60,然后鞘内注射吗啡;LPS+siRNA-HSP60+吗啡组给予10μl siRNA-HSP60和LPS,然后鞘内注射吗啡。各组均连续处理7 d。采用RT-PCR和Western blotting检测大鼠脊髓组织中HSP60的mRNA和蛋白表达水平;采用水浴甩尾法观察沉默HSP60对疼痛耐受的影响;免疫荧光染色法检测脊髓小胶质细胞标志物OX-42的表达;RT-PCR法检测大鼠脊髓组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;Western blotting检测大鼠脊髓组织中Toll样受体4(TLR4)和磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)的表达水平。结果鞘内注射siRNA-HSP60可显著下调吗啡诱导的HSP60的表达(P<0.05)。与对照组相比,吗啡组大鼠对疼痛的耐受度降低(P<0.05),HSP60缺失可增强大鼠对疼痛的耐受(P<0.05)。与siRNA-NC+吗啡组比较,siRNA-HSP60+吗啡组大鼠脊髓组织中OX-42阳性细胞数以及IL-1β、TNF-αmRNA的表达显著下调(P<0.05),TLR4和p-p38MAPK的表达水平降低(P<0.05),而LPS处理可上调TLR4和p-p38MAPK的表达(P<0.05),并能逆转HSP60缺失对吗啡耐受的作用(P<0.05)。结论HSP60缺失通过抑制小胶质细胞的活化及炎症反应改善吗啡耐受的形成,其机制可能与抑制TLR4-p38MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 热休克蛋白60 tlr4-p38MApK 吗啡镇痛耐受

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