目的:探讨吡格列酮对THP-1源性巨噬细胞ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)及B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响及可能作用机制。方法:Real time PCR及Western-blot检测不同浓度吡格列酮(1,10,20,30μmol/L)作...目的:探讨吡格列酮对THP-1源性巨噬细胞ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)及B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响及可能作用机制。方法:Real time PCR及Western-blot检测不同浓度吡格列酮(1,10,20,30μmol/L)作用24h,THP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白的表达。使用过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)特异性拮抗剂GW9662(2μmol/L)阻断吡格列酮(10μmol/L),24h后检测THP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白的表达。结果:吡格列酮可浓度依赖性增高24hTHP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白的表达,GW9662可显著抑制吡格列酮诱导的THP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白表达的增高(P<0.05)。结论:吡格列酮激动PPARγ上调THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出调节蛋白ABCA1,ABCG1及SR-BⅠ基因的表达。展开更多
目的通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型，观察ApoAI对THP—l源性泡沫细胞ApoE分泌的影响，探讨ApoAI与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响。方法采用聚乙二醇-6000（PEG-6000）沉淀法制备人血浆HDL，再利用...目的通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型，观察ApoAI对THP—l源性泡沫细胞ApoE分泌的影响，探讨ApoAI与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响。方法采用聚乙二醇-6000（PEG-6000）沉淀法制备人血浆HDL，再利用凝胶过滤柱层析法分离ApoA I；佛波酯（PMA）诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞，氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，OXLDL）使分化后THP-1细胞荷脂，建立动脉粥样硬化细胞模型；ELISA检测不同浓度ApoAI（0，5，10，15，25ug／m1）及不同孵育时间（0．3，6，12，24h），THP—1源性泡沫细胞ApoE的分泌；RT—PCR检测细胞ApoEmRNA的表达情况。结果ApoAI增加THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌量；且ApoE蛋白质的分泌随着ApoAI孵育时间增加而增加，在24hApoE的分泌量达最大；在剂量试验中，ApoE的分泌量随着ApoAI剂量的增加有增加趋势，ApoAI浓度为25μmol／L时，ApoE分泌量最大；而却oE基因的表达不受ApoAI的影响。结论-定浓度的ApoAI促进THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌，且具有时间及剂量依赖性。而在基因水平上，ApoAI对ApoEmRNA表达没有影响。展开更多
文摘目的:探讨吡格列酮对THP-1源性巨噬细胞ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)、ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)及B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响及可能作用机制。方法:Real time PCR及Western-blot检测不同浓度吡格列酮(1,10,20,30μmol/L)作用24h,THP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白的表达。使用过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(PPARγ)特异性拮抗剂GW9662(2μmol/L)阻断吡格列酮(10μmol/L),24h后检测THP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白的表达。结果:吡格列酮可浓度依赖性增高24hTHP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白的表达,GW9662可显著抑制吡格列酮诱导的THP-1源性巨噬细胞ABCA1,ABCG1及SR-BⅠmRNA和蛋白表达的增高(P<0.05)。结论:吡格列酮激动PPARγ上调THP-1源性巨噬细胞胆固醇流出调节蛋白ABCA1,ABCG1及SR-BⅠ基因的表达。
文摘目的通过建立动脉粥样硬化损伤部位细胞模型，观察ApoAI对THP—l源性泡沫细胞ApoE分泌的影响，探讨ApoAI与ApoE之间是否存在相互关系以及这种关系对动脉粥样硬化的影响。方法采用聚乙二醇-6000（PEG-6000）沉淀法制备人血浆HDL，再利用凝胶过滤柱层析法分离ApoA I；佛波酯（PMA）诱导THP-1单核细胞分化为巨噬细胞，氧化型低密度脂蛋白（oxidized low density lipoprotein，OXLDL）使分化后THP-1细胞荷脂，建立动脉粥样硬化细胞模型；ELISA检测不同浓度ApoAI（0，5，10，15，25ug／m1）及不同孵育时间（0．3，6，12，24h），THP—1源性泡沫细胞ApoE的分泌；RT—PCR检测细胞ApoEmRNA的表达情况。结果ApoAI增加THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌量；且ApoE蛋白质的分泌随着ApoAI孵育时间增加而增加，在24hApoE的分泌量达最大；在剂量试验中，ApoE的分泌量随着ApoAI剂量的增加有增加趋势，ApoAI浓度为25μmol／L时，ApoE分泌量最大；而却oE基因的表达不受ApoAI的影响。结论-定浓度的ApoAI促进THP-1源性泡沫细胞ApoE的分泌，且具有时间及剂量依赖性。而在基因水平上，ApoAI对ApoEmRNA表达没有影响。
