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激素性股骨头坏死信号通路的研究进展 被引量：26
1
作者 卢非凡 张启栋 +1 位作者 王卫国 郭万首 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1017-1021,共5页
股骨头坏死是我国骨科的常见病和难治性疾病,近年来对激素性股骨头坏死的研究进展迅速。糖皮质激素的大量使用是导致股骨头坏死发生的重要原因之一,但是糖皮质激素导致股骨头坏死的具体机制尚未完全阐明。目前研究发现有许多信号通路与... 股骨头坏死是我国骨科的常见病和难治性疾病,近年来对激素性股骨头坏死的研究进展迅速。糖皮质激素的大量使用是导致股骨头坏死发生的重要原因之一,但是糖皮质激素导致股骨头坏死的具体机制尚未完全阐明。目前研究发现有许多信号通路与股骨头坏死的发生有着密切联系,包括TGF-β/Smad,Wnt/β-catenin,PI3k/Akt,TLR4,PPARγ,TNF-α-STAT1-Caspase-3等多条信号通路。这些信号通路通过促进骨细胞与成骨细胞的凋亡,促进骨髓间充质干细胞脂肪化,破坏成骨细胞与破骨细胞之间的平衡,影响股骨头血供等多方面参与股骨头坏死的发生和发展。本文综述股骨头坏死发生的信号通路与股骨头坏死之间的关系,为股骨头坏死进行预防和早期诊治提供帮助。 展开更多
关键词 股骨头坏死 信号通路 糖皮质激素 TGF-Β/SMAD WNT/Β-CATENIN
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桑杏清营汤对放射性肺炎肺组织TGF-β1表达的影响研究 被引量：8
2
作者 刘毅 由凤鸣 +1 位作者 严然 张晓丹 《云南中医中药杂志》 2017年第4期78-81,共4页
目的观察桑杏清营汤对放射性肺炎大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响,探讨成都中医药大学附属医院防治放射性肺炎的经验方桑杏清营汤对大鼠放射性肺炎(Radiation Pneumonitis,RP)的疗效及作用机制。方法将180只8周龄、体重约为280 g^300 g的... 目的观察桑杏清营汤对放射性肺炎大鼠肺组织中TGF-β1表达的影响,探讨成都中医药大学附属医院防治放射性肺炎的经验方桑杏清营汤对大鼠放射性肺炎(Radiation Pneumonitis,RP)的疗效及作用机制。方法将180只8周龄、体重约为280 g^300 g的SPF级雄性SD大鼠,随机分为空白对照组(空白组),照射模型组(模型组),西药治疗组(阳性组),中药预防组(预防组),中药治疗组(治疗组),每组36只。除外空白组均给予直线加速器6MV-X线,20 gy照射1次。除预防组于照射前4天开始灌服桑杏清营汤外,其余各组造模后第二天开始,空白组、模型组给予等容积的生理盐水灌胃,治疗组灌服桑杏清营汤,阳性组给予醋酸泼尼松混悬液,每日1次,5d/周。照射后第2、4、8、12周每组随机取9只。将右肺组织固定于福尔马林溶液中,石蜡包埋,切片,HE染色光镜下观察肺组织病理形态学变化,免疫组化法检测TGFβ1表达。结果光镜下模型对照组较正常组肺组织炎症细胞浸润、结构破坏明显,模型组与空白组大鼠比较肺组织TGF-β1的表达显著升高(P<0.01),提示造模成功;与桑杏清营汤相比,模型组肺组织TGF-β1的表达升高(P<0.05),其中桑杏清营汤预防组(P<0.01);结论桑杏清营汤防治放射性肺炎可能是通过抑制TGF-β1/Smad信号转导通路,从而抑制大鼠肺组织中TGF-β1的表达,延缓并减轻肺纤维化。 展开更多
关键词 放射性肺炎 桑杏清营汤 肺组织 TGFΒ1 TGF-β1/Smad通路
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穿心莲内酯对膜性肾病大鼠肾纤维化的影响及其机制研究 被引量：8
3
作者 周靖 郭洋洋 +2 位作者 陆春红 黄金杰 王丹 《中国医院用药评价与分析》 2022年第9期1075-1080,共6页
目的:探讨穿心莲内酯对膜性肾病(MN)大鼠的保护作用。方法:选取清洁级健康雄性SD大鼠80只,设为正常组、模型组、穿心莲内酯组(穿心莲内酯50 mg/kg)和贝那普利组(盐酸贝那普利10 mg/kg),每组20只。模型组、穿心莲内酯组和贝那普利组大鼠... 目的:探讨穿心莲内酯对膜性肾病(MN)大鼠的保护作用。方法:选取清洁级健康雄性SD大鼠80只,设为正常组、模型组、穿心莲内酯组(穿心莲内酯50 mg/kg)和贝那普利组(盐酸贝那普利10 mg/kg),每组20只。模型组、穿心莲内酯组和贝那普利组大鼠通过尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白建立MN大鼠模型。穿心莲内酯组、贝那普利组大鼠分别连续4周灌胃给药,1日1次;正常组和模型组大鼠连续4周灌胃给予0.9%氯化钠溶液,1日1次。采用生化分析法检测肾功能指标水平;通过苏木精-伊红染色、Masson染色行肾组织病理学检查,通过透射电子显微镜(TEM)观察肾组织超微结构变化;采用酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)含量;采用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平。结果:与模型组相比,穿心莲内酯组、贝那普利组大鼠肾组织病变和超微结构病变均明显减轻,其中穿心莲内酯组效果更为显著;24 h尿蛋白定量和肌酐(SCr)水平明显降低;TNF-α、IL-6和ICAM-1含量明显降低;Toll样受体4(TLR4),核因子κB(NF-κB),转化生长因子β1(TGF-β1),磷酸化Smad2、磷酸化Smad3,Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。且穿心莲内酯组大鼠上述指标水平明显优于贝那普利组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:穿心莲内酯对MN大鼠肾纤维化具有抑制作用,可能与抑制TLR4/NF-κB通路和TGF-β1/Smad通路,降低炎症反应和细胞外基质生成有关。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 膜性肾病 纤维化 TLR4/NF-κB通路 TGF-β1/Smad通路
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恩格列净保护2型糖尿病小鼠心肌损伤机制研究 被引量：4
4
作者 李曾一 王松 +2 位作者 籍胤玺 李杰玉 林玉玲 《心肺血管病杂志》 CAS 2023年第2期168-174,共7页
目的:基于调控转化生长因子β(TGF-β)/Smad通路和核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应序列元件(Nrf2/ARE)信号通路分析恩格列净(EM)对2型糖尿病(DM)小鼠心肌损伤的保护作用。方法:将KK-Ay小鼠随机分为DM组和EM组(10mg·kg^(-1)·... 目的:基于调控转化生长因子β(TGF-β)/Smad通路和核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应序列元件(Nrf2/ARE)信号通路分析恩格列净(EM)对2型糖尿病(DM)小鼠心肌损伤的保护作用。方法:将KK-Ay小鼠随机分为DM组和EM组(10mg·kg^(-1)·d^(-1)EM),每组30只,另取30只C57BL/6J小鼠为对照组。采用彩色多普勒测量心脏参数,半自动分析仪检测糖脂水平,分光光度计检测氧化应激指标水平,蛋白印迹法检测TGF-β/Smad通路和Nrf2/ARE信号通路相关蛋白。结果:与DM组比较,EM组心脏质量、FBG、非空腹血糖、空腹胰岛素、舒张末期室间隔厚度(IVSd)、心肌组织脂质氢过氧化物(LPO)、丙二醛(MDA)、TGF-β1(1.21±0.17)vs.(1.43±0.26)、I型胶原蛋白(CollagenⅠ)(0.93±0.18)vs.(1.71±0.23)、CollagenⅢ(1.37±0.0.21)vs.(1.96±0.34)、α-肌动蛋白(αSMA)(0.88±0.0.20)vs.(1.42±0.33)、磷酸化(p)Smad2/Smad2(0.24±0.04)vs.(0.61±0.08)及p-Smad3/Smad3(0.11±0.01)vs.(0.19±0.04)水平明显降低(P<0.05),HR、LVIDd、左心室心肌质量(LV mass)、左心室质量/体质量(LV mass/BW)、LVEF、左心室短轴缩短率(FS)、左心室面积改变分数(FAC)、E波与A波峰值流速比率(E/A)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、Nrf-2(1.23±0.28)vs.(0.72±0.16)、血红素加氧酶(HO-1)(1.08±0.36)vs.(0.68±0.19)和Smad7表达(1.39±0.33)vs.(0.65±0.07)明显升高(P<0.05)。结论:EM可能通过抑制TGF-β/Smad通路、激活Nrf2/ARE通路,减缓心肌氧化应激状态,改善DM小鼠心肌功能。 展开更多
关键词 恩格列净 转化生长因子-β/Smad通路 Nrf2/ARE信号通路 2型糖尿病 心肌损伤
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芪连扶正胶囊调控TGF-β/smad信号通路抑制肺癌转移的研究 被引量：8
5
作者 齐元富 李慧杰 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第11期2567-2569,共3页
目的:观察芪连扶正胶囊对TGF-β/smad通路相关分子表达的影响,探讨其相关机制。方法:体外培养肺癌A549细胞,制备芪连扶正胶囊含药血清,按实验分组干预,Western blotting检测TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4、Smad7的表达,RT-PCR检测TGF-... 目的:观察芪连扶正胶囊对TGF-β/smad通路相关分子表达的影响,探讨其相关机制。方法:体外培养肺癌A549细胞,制备芪连扶正胶囊含药血清,按实验分组干预,Western blotting检测TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4、Smad7的表达,RT-PCR检测TGF-β1 mRNA表达。结果:芪连扶正胶囊含药血清可上调TβRⅠ、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4表达,下调Smad7、TGF-β1mRNA在肺癌A549细胞中的表达,其中,各药组分子表达量除芪连扶正胶囊低剂量组外,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01),与化疗组相比,联合组及芪连扶正胶囊各组亦有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:芪连扶正胶囊含药血清可通过纠正TGF-β/smad通路紊乱发挥抗肺癌转移作用。 展开更多
关键词 芪连扶正胶囊 TGF-β/smad通路 肺癌 转移
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TGF-β1通过介导上皮-间叶转化促进甲状腺乳头状癌的侵袭和淋巴结转移 被引量：2
6
作者 李玲玉 彭戴君 +3 位作者 杨海生 朱绚丽 张雯雯 官兵 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期188-194,共7页
目的 探讨TGF-β1对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)侵袭和淋巴结转移的影响及其机制。方法 收集PTC的石蜡包埋标本,运用免疫组化染色对上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物及TGF-β/S... 目的 探讨TGF-β1对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)侵袭和淋巴结转移的影响及其机制。方法 收集PTC的石蜡包埋标本,运用免疫组化染色对上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关标志物及TGF-β/Smad信号通路蛋白进行检测。体外培养PTC细胞株BCPAP,添加诱导因子进行处理,分别通过CCK-8法和Transwell法检测细胞增殖和侵袭能力,采用qRT-PCR和Western blot法检测TGF-β/Smad信号通路和EMT标志物的表达。结果 PTC和淋巴结转移癌中上皮标志物E-cadherin表达减弱,间叶标志物vimentin表达增强(79.5%vs 81%)(P<0.05);PTC和淋巴结转移癌中TGF-β1(70.5%、76.9%)和Smad2/3(65.9%、69.2%)的阳性率升高(P<0.01)。体外细胞实验发现添加TGF-β1组与其余两组相比,Smad2(1.229±0.016)、Smad3(2.208±0.084)和p-Smad2/3(0.551±0.032)高表达(P<0.05);上皮标志物E-cadherin(0.525±0.029、0.254±0.009)表达降低;间叶标志物N-cadherin(1.590±0.166、0.404±0.018)和vimentin(1.974±0.194、0.473±0.062)表达升高(P<0.05)。添加抑制剂BMP7组,抑制型蛋白Smad7(1.729±0.084、1.106±0.088)表达升高(P<0.05)。结论 PTC及其淋巴结转移标本发生EMT,且TGF-β1和Smad2/3高表达;TGF-β1可通过TGF-β/Smad信号通路介导EMT,促进PTC的侵袭和淋巴结转移。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 乳头状癌 TGF-β/Smad通路 TGF-Β1 上皮-间叶转化 淋巴结转移
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A型肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/Smad通路和ERK通路表达的影响 被引量：7
7
作者 尚念胜 牛燕英 《中国美容医学》 CAS 2020年第5期104-109,共6页
目的:探讨A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Human keloid fibroblasts,HKF)生物学行为和TGF-β/Smad信号通路和ERK信号通路表达的影响。方法:在HKF培养过程中加入A型肉毒毒素进行干扰,观察A型肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/Sma... 目的:探讨A型肉毒毒素对人瘢痕疙瘩成纤维细胞(Human keloid fibroblasts,HKF)生物学行为和TGF-β/Smad信号通路和ERK信号通路表达的影响。方法:在HKF培养过程中加入A型肉毒毒素进行干扰,观察A型肉毒毒素对瘢痕疙瘩成纤维细胞TGF-β/Smad通路和ERK通路相关分子的变化及细胞增殖、侵袭、凋亡情况。结果:A型肉毒毒素可以抑制HKF增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,并且明显抑制Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、纤维连接蛋白、α-SMA和CTGF基因的表达水平,上调IFN-γ、TGF-β3基因的表达水平。上调Smad7基因和蛋白的表达,下调VEGF基因表达,明显抑制p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平,并且抑制P-ERK1/2蛋白表达。以上生物学变化均且呈药物浓度依赖性。结论:A型肉毒毒素可抑制HKF的增殖、侵袭、血管生成和胶原积累,这些效应与TGF-β/Smad和ERK1/2信号通路有关。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 A型肉毒毒素 人瘢痕疙瘩成纤维细胞 ERK信号通路 TGF-β/Smad通路 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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不同浓度红景天苷对成肌细胞体外分化的影响及机制初探 被引量：7
8
作者 罗维 张鹏 +2 位作者 艾磊 周越 陈晓萍 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2015年第9期50-57,共8页
研究目的:探讨不同浓度红景天苷对成肌细胞株C2C12体外分化的影响及可能机制,有望为成肌细胞增殖分化寻求更有效的外源调控物,以促进成肌细胞的移植和临床应用,同时为进一步开展红景天苷在体内骨骼肌损伤中的作用及机制研究奠定基础。... 研究目的:探讨不同浓度红景天苷对成肌细胞株C2C12体外分化的影响及可能机制,有望为成肌细胞增殖分化寻求更有效的外源调控物,以促进成肌细胞的移植和临床应用,同时为进一步开展红景天苷在体内骨骼肌损伤中的作用及机制研究奠定基础。研究方法:研究1:红景天苷对成肌细胞体外分化的影响:1)在C2C12中加入不同浓度红景天苷处理,在诱导成肌分化过程中,应用相差显微镜观察不同浓度红景天苷对C2C12分化过程中汇聚、融合和形成多核肌管的影响;2)应用免疫荧光组化方法,分析不同浓度红景天苷对C2C12成肌分化融合率的影响;3)应用real-time PCR和Western Blotting方法,检测红景天苷对C2C12成肌分化特异基因和蛋白表达的影响;研究2:红景天苷影响成肌细胞体外分化的机制初探:应用Western Blotting方法,检测红景天苷处理后C2C12成肌分化中TGF-β/Smad信号通路的变化。结果:50μg红景天苷处理:研究1:1)光镜观察结果从形态学上显示,红景天苷处理显著抑制C2C12细胞的融合和多核肌管的形成;2)免疫荧光检测结果表明Myosin-neonatal(E-MHC)阳性面积和myogenin阳性核均显著减少(P<0.05),显著抑制C2C12细胞分化过程中肌管形成,促进细胞增殖;3)real-time PCR和Western blotting检测结果表明,成肌分化特异因子MyoD和myogenin基因和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05),显著抑制C2C12细胞分化过程中细胞的融合和肌管的形成;研究2:Western blotting检测结果表明,红景天苷显著抑制C2C12细胞分化效应,伴有Smad2/Smad3磷酸化激活增加,尤其是Smad3激活水平显著增加(P<0.01);30μg红景天苷处理作用不显著(P>0.05)。结论:1)红景天苷能显著抑制骨骼肌成肌细胞体外成肌分化,并促进骨骼肌成肌细胞激活增殖,促进卫星细胞库储备增加。2)红景天苷对骨骼肌成肌细胞体外分化增殖的影响存在剂量依赖性,以50μg红景天苷干预能达到显� 展开更多
关键词 红景天苷 C2C12细胞 成肌分化 TGF-β/Smad通路
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蒿属香豆素对MCD饮食诱导的非酒精性脂肪性肝纤维化小鼠保护性作用的研究 被引量：7
9
作者 蔡菁 葛亚强 +1 位作者 许丽娟 陆华美 《陕西中医》 CAS 2021年第11期1511-1516,1521,共7页
目的:探讨中药茵陈蒿的主要成分蒿属香豆素对蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)诱导的非酒精性脂肪性肝纤维化小鼠的作用及分子机制。方法:采用MCD饲料喂养小鼠6周进行造模,将50只20 g左右的ICR雄性小鼠随机分为五组:空白对照组,模型组,丹酚酸B组(10 ... 目的:探讨中药茵陈蒿的主要成分蒿属香豆素对蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)诱导的非酒精性脂肪性肝纤维化小鼠的作用及分子机制。方法:采用MCD饲料喂养小鼠6周进行造模,将50只20 g左右的ICR雄性小鼠随机分为五组:空白对照组,模型组,丹酚酸B组(10 mg/kg),蒿属香豆素低剂量组(30 mg/kg),蒿属香豆素高剂量组(60 mg/kg)。造模后1周灌胃,5周后取小鼠肝脏组织和血清进行实验,对肝脏组织进行病理检查。通过试剂盒检测各组小鼠血清生化指标,比色法测肝脏组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。Western blot方法测小鼠肝脏组织液α-SMA,Ⅰ型胶原蛋白,E钙黏蛋白,波形蛋白、转化生长因子β1(TGF-β1)通路蛋白的表达。结果:不同剂量蒿属香豆素组和丹酚酸B组的NAS评分、MDA水平、α-SMA、Ⅰ型胶原、波形蛋白的表达明显降低,E钙黏蛋白、SOD水平显著增高(P<0.05),TGF-β1及p-Smad2/3的表达降低,Smad7的表达明显增高(P<0.05)。结论:蒿属香豆素能抑制TGF-β/Smad通路,有效改善肝脏脂质沉积,降低小鼠肝脏组织内氧化应激水平,逆转上皮间质转化,减轻纤维化。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪肝病 蒿属香豆素 氧化应激 上皮-间质转化 TGF-β/Smad通路 肝纤维化
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HMGB1在类青光眼引流阀植入术后瘢痕化中的作用机制 被引量：1
10
作者 刘思远 曹凡 +5 位作者 丁晶晶 王传喜 丁碧青 梁坤 蒋正轩 鲍宁 《国际眼科杂志》 2024年第1期18-23,共6页
目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)在类青光眼引流阀植入术后瘢痕组织中的动态表达,揭示HMGB1在青光眼术后瘢痕化中的作用及其可能的作用机制。方法:将60只新西兰大白兔随机分为空白对照组(n=20)、模型组(n=20,结膜囊下硅胶植入)、模型... 目的:探究高迁移率族蛋白1(HMGB1)在类青光眼引流阀植入术后瘢痕组织中的动态表达,揭示HMGB1在青光眼术后瘢痕化中的作用及其可能的作用机制。方法:将60只新西兰大白兔随机分为空白对照组(n=20)、模型组(n=20,结膜囊下硅胶植入)、模型给药组(n=20,硅胶植入联合5-氟尿嘧啶注射)。分别于术后4、8 wk取球结膜组织,采用HE染色和Masson染色检测结膜组织中成纤维细胞和胶原纤维增生及分布情况;免疫组织化学染色检测结膜组织中HMGB1、转化生长因子(TGF)-β1、Smad3、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布及变化情况;RT-PCR和Western blot检测结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白的表达。结果:HE染色和Masson染色结果显示,4、8 wk模型组较空白对照组结膜组织中炎症细胞、成纤维细胞及胶原纤维增生明显,而4、8 wk模型给药组结膜组织中成纤维细胞及胶原纤维增生相对于同时期模型组明显减少。免疫组织化学染色结果显示,4、8 wk模型组结膜组织中可见HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA蛋白表达,呈棕褐色染色,8 wk模型组染色更深,而4、8 wk模型给药组较同时期模型组阳性染色程度下降。4、8 wk模型组结膜组织中HE染色成纤维细胞数与免疫组织化学染色HMGB1的表达水平均呈正相关(r=0.602、0.703,均P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示,4、8 wk模型组结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著高于空白对照组(均P<0.05),4、8 wk模型给药组结膜组织中HMGB1、TGF-β1、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白表达量显著低于同时期模型组(均P<0.05)。模型组和模型给药组中HMGB1与TGF-β1、Smad3的mRNA表达水平具有正相关性(均P<0.05)。结论:类青光眼引流阀植入术后随时间延长HMGB1表达升高,HMGB1在青光眼术后具有致瘢痕形成的作用,并可能通过TGF-β/Smad信号通路参与瘢痕化的发生发展。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1(HMGB1) 青光眼引流阀植入术 瘢痕化 5-氟尿嘧啶 TGF-Β/SMAD信号通路
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基于TGF-β/Smad信号通路探讨蒙药大黄-3汤对慢性肾功能衰竭大鼠的肾脏保护作用 被引量：5
11
作者 昂格力玛 宝苏日高 孟永梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1099-1106,共8页
目的研究蒙药大黄-3汤对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)模型大鼠肾功能保护作用,并探讨其作用机制。方法SPF级SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用腺嘌呤灌胃法建立CRF模型。造模成功后随机分为模型,阳药,大黄-3汤低... 目的研究蒙药大黄-3汤对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)模型大鼠肾功能保护作用,并探讨其作用机制。方法SPF级SD大鼠随机分为正常组和造模组,造模组采用腺嘌呤灌胃法建立CRF模型。造模成功后随机分为模型,阳药,大黄-3汤低、中、高剂量组,并间隔给药共12周。生化检测CSF、BUN、Scr;HE和Masson染色观察肾组织病理变化;免疫组化检测肾组织PCNA和α-SMA的表达;RT-PCR检测肾组织CK18、Vimentin、TGF-β1、FN的mRNA表达;Western blot检测肾组织α-SMA、E-cadherin、PCNA、Smad2、Smad3的蛋白表达。TGF-β1诱导HMC异常增殖和HK-2间质转化并给予大黄-3汤含药血清治疗。CCK-8检测HMC增殖;RT-PCR法检测HK-2间质转化。结果与模型组比较,大黄-3汤治疗后,CRF大鼠BUN、Scr降低,肾组织纤维化相关蛋白及基因表达降低;大黄-3汤含药血清显著抑制HMC增殖及HK-2间质转化。结论大黄-3汤能改善CRF模型大鼠肾功能,其机制可能与抑制HMC增殖及HK-2间质转化的基础上可能通过调节TGF-β/Smad信号通路有关。 展开更多
关键词 蒙药 大黄-3汤 慢性肾功能衰竭 肾小球系膜细胞 肾小管上皮细胞 TGF-β/Smad通路
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海风藤对人肾小球系膜细胞TGF-β/Smad信号通路影响 被引量：6
12
作者 李爽 张君 张少卿 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2018年第12期33-36,共4页
目的:探讨海风藤对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/smad传导通路的影响。方法:培养人肾小球系膜细胞,分为正常组,模型组,海风藤高剂量(10mg/mL)、中剂量(1mg/mL)、低剂量(0.1mg/mL)组。经预实验筛选结果,采用10^-8 mol/L血... 目的:探讨海风藤对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞TGF-β/smad传导通路的影响。方法:培养人肾小球系膜细胞,分为正常组,模型组,海风藤高剂量(10mg/mL)、中剂量(1mg/mL)、低剂量(0.1mg/mL)组。经预实验筛选结果,采用10^-8 mol/L血管紧张素Ⅱ诱导模型组及海风藤各组人肾小球系膜细胞增殖,采用MTT法检测正常组、模型组及海风藤药液培养的经血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞于24、48、72h等时间点的细胞活性。收集培养48h时间点各组细胞,采用westem blot法及Real-time-PCR法分别检测smad2、3蛋白表达及TGF-β、smad7 mRNA的表达。结果:模型组与正常组比较,培养24、48、72h内,系膜细胞显著增殖;海风藤各组能够抑制其增殖;于48h时间点收集的系膜细胞中smad2、smad3含量及TGF-β mRNA的表达显著上升(P<0.05),smad7 mRNA的表达显著降低(P<0.05);海风藤高、中、低各组与模型组比较,均能逆转上述变化,但量-效依赖趋势并不显著。结论:血管紧张素Ⅱ能够有效刺激肾小球系膜细胞增殖,海风藤可能通过多靶点抑制TGF-β/Smad信号通路的传导,从而抑制延缓肾小球硬化。 展开更多
关键词 海风藤 人肾小球系膜细胞 TGF-β/Smad通路 血管紧张素Ⅱ
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减味寿胎丸介导妊娠特异性糖蛋白1治疗自然流产的机制 被引量：1
13
作者 周月希 杜鑫 +4 位作者 吕孝丽 余庆英 张慧敏 郜洁 罗颂平 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期1844-1848,共5页
目的:探讨减味寿胎丸治疗自然流产(SA)的作用机制。方法:收集SA及人工流产者的绒毛组织,Western Blot验证妊娠特异性糖蛋白1(PSG1)蛋白的表达。细胞实验选择HTR-8/SVneo滋养细胞,CCK-8检测不同浓度的减味寿胎丸对细胞的毒性。根据临床... 目的:探讨减味寿胎丸治疗自然流产(SA)的作用机制。方法:收集SA及人工流产者的绒毛组织,Western Blot验证妊娠特异性糖蛋白1(PSG1)蛋白的表达。细胞实验选择HTR-8/SVneo滋养细胞,CCK-8检测不同浓度的减味寿胎丸对细胞的毒性。根据临床绒毛组织验证结果构建滋养细胞SA疾病细胞模型,设置对照组、模型组、减味寿胎丸低剂量组(50μg/mL)、减味寿胎丸中剂量组(100μg/mL)、减味寿胎丸高剂量组(200μg/mL),划痕实验检测各组滋养细胞的迁移能力,transwell实验检测各组滋养细胞的侵袭能力。根据上述实验结果选出减味寿胎丸最佳作用浓度,Western Blot检测对照组、模型组、减味寿胎丸组PSG1、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)、Smad4蛋白的表达。结果:PSG1在SA绒毛组织中的表达低于人工流产者。50μg/mL和100μg/mL减味寿胎丸促进细胞增殖(P<0.01),而200μg/mL显示出一定的毒性(P<0.01)。低、中剂量减味寿胎丸细胞的迁移和侵袭能力较模型组改善,其中100μg/mL减味寿胎丸改善作用更为明显,而200μg/mL减味寿胎丸未能明显改善模型细胞的迁移能力。100μg/mL减味寿胎丸可显著提高模型细胞PSG1、TGF-β1、TRAP1和Smad4蛋白的表达(P<0.01)。结论:减味寿胎丸可以提高PSG1表达并上调TGF-β/Smad通路蛋白表达,提高滋养细胞的侵袭及迁移能力,发挥抵抗SA的作用。 展开更多
关键词 减味寿胎丸 自然流产 滋养细胞 妊娠特异性糖蛋白1 TGF-β/Smad通路 机制
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肾康注射液调节TGF-βⅠ型受体/Smad通路抑制肾纤维化的作用机制
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作者 崔天梦 黄更珍 +1 位作者 张莹莹 马跃荣 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第10期3355-3363,共9页
目的肾康注射液(Shenkang injection,SKI)作为一种中药静脉注射剂,已在临床用于治疗慢性肾病。本研究探讨SKI调节TGF-βⅠ型受体/Smad通路抑制肾纤维化的作用机制。方法在37℃环境中,使用10 ng·mL^(-1)TGF-β1处理人小管上皮细胞(H... 目的肾康注射液(Shenkang injection,SKI)作为一种中药静脉注射剂,已在临床用于治疗慢性肾病。本研究探讨SKI调节TGF-βⅠ型受体/Smad通路抑制肾纤维化的作用机制。方法在37℃环境中,使用10 ng·mL^(-1)TGF-β1处理人小管上皮细胞(Human kidney proximal tubular cell,HK-2)48 h,建立体外肾纤维化模型。用SKI处理细胞48 h后,通过显微镜观察细胞的形态;采用Western blot、RT-PCR和免疫荧光技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅲ型胶原(Collagen typeⅢ,COI-Ⅲ)、TGF-β1、Smad3、Smad7和TβR-Ⅰ蛋白和基因的表达变化。结果SKI能抑制肾纤维化相关蛋白和基因的表达,如α-SMA和COI-Ⅲ。SKI调控与TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达,通过下调TGF-β1、Smad3和TβR-Ⅰ蛋白,上调Smad7蛋白表达,延缓肾脏纤维化。结论SKI抑制肾纤维化,可能通过下调TβR-Ⅰ、调控TGF-β/Smad通路相关分子的表达。 展开更多
关键词 肾康注射液 肾纤维化 TβR-Ⅰ型受体 HK-2细胞 TGF-Β/SMAD信号通路
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水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞TGF-β/Smad通路及上皮-间质转化的影响 被引量：3
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作者 杨吉帆 张涛 李春梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1201-1206,共6页
目的:探讨水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞L2上皮-间质转化(EMT)影响及机制。方法:采用MTT法检测水蛭提取物对L2细胞活力的影响以筛选适合的作用浓度。将体外培养的L2细胞分为正常对照组、8 Gy(^(60)Coγ照射剂量)组和8 Gy+0.50... 目的:探讨水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞L2上皮-间质转化(EMT)影响及机制。方法:采用MTT法检测水蛭提取物对L2细胞活力的影响以筛选适合的作用浓度。将体外培养的L2细胞分为正常对照组、8 Gy(^(60)Coγ照射剂量)组和8 Gy+0.50 g/L水蛭提取物组和8 Gy+1.00 g/L水蛭提取物组,倒置显微镜观察L2细胞形态变化,免疫荧光法检测L2细胞中E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,RT-qPCR和Western blot检测E-cadherin、α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达,Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力。结果:与0 g/L相比,2.00和4.00 g/L水蛭提取物作用48 h后L2细胞存活率显著降低(P<0.05),0.125、0.25、0.50和1.00 g/L水蛭提取物对L2细胞存活率无明显毒性作用(P>0.05),因此选取0.50和1.00 g/L水蛭提取物进行后续实验。8 Gy^(60)Coγ照射后L2细胞由鹅卵形变为长梭形,给予0.50和1.00 g/L水蛭提取物后细胞上述形态变化逐渐恢复。与正常对照组相比,8 Gy^(60)Coγ照射后L2细胞E-cadherin荧光强度减弱,α-SMA荧光强度增强,E-cadherin表达显著降低,α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3表达显著升高,细胞迁移数和划痕愈合率显著升高(P<0.05);0.50和1.00 g/L水蛭提取物作用后可明显逆转8 Gy^(60)Coγ照射所引起的上述变化(P<0.05)。结论:水蛭提取物可抑制电离辐射诱导的肺泡上皮L2细胞EMT,其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路活化有关。 展开更多
关键词 电离辐射 水蛭提取物 肺泡上皮细胞 上皮-间质转化 TGF-β/Smad通路
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加味茵芍散对肝纤维化家兔TGF-β1、Smad2、Smad4 mRNA表达的影响 被引量：4
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作者 郑春素 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期2462-2464,共3页
目的:从加味茵芍散对肝纤维化家兔转化生长因子-β1(TGF-β1)、丝/苏氨酸激酶2(Smad2)、丝/苏氨酸激酶4(Smad4)mRNA表达的影响探讨该方对肝纤维化的可能作用机制。方法:按0.10mL/kg的用量腹腔注射CCl4诱导复制家兔肝纤维化模型,50只家... 目的:从加味茵芍散对肝纤维化家兔转化生长因子-β1(TGF-β1)、丝/苏氨酸激酶2(Smad2)、丝/苏氨酸激酶4(Smad4)mRNA表达的影响探讨该方对肝纤维化的可能作用机制。方法:按0.10mL/kg的用量腹腔注射CCl4诱导复制家兔肝纤维化模型,50只家兔随机分成模型组,秋水仙碱组,加味茵芍散高、中、低剂量组5组,每组10只,通过肝脏病理取材确定肝纤维化病变,同时实时定量逆转录一聚合酶链反应法检测TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA的表达。结果:与模型组相比,秋水仙碱组和加味茵芍散高、中、低剂量组家兔肝组织TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA表达明显减弱(P<0.05);加味茵芍散中、高剂量组与秋水仙碱组相比TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA的表达量显著降低(P<0.05)。结论:加味茵芍散能减轻纤维组织增生,可以下调TGF-β1、Smad2 mRNA、Smad4的表达。该方对CCl4诱导家兔肝纤维化模型具有一定保护作用、可以延缓肝纤维化的进展,其作用机制可能与调节TGF-β/Smad信号通路有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 信号通路 TGF-Β/SMAD 加味茵芍散
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IGHG1对急性髓系白血病THP-1细胞增殖、凋亡和侵袭的机制研究
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作者 李长美 金亚 +6 位作者 孙寅 刘建 姜道亮 张教国 杨瑞 杨勇 邱立 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期7-13,54,共8页
目的 探讨免疫球蛋白γ-1重链恒定区(immunoglobulin γ-1 heavy chain constant region,IGHG1)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)THP-1细胞中的表达以及调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad... 目的 探讨免疫球蛋白γ-1重链恒定区(immunoglobulin γ-1 heavy chain constant region,IGHG1)在急性髓系白血病(acute myeloid leukemia, AML)THP-1细胞中的表达以及调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad通路对细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 以9例AML患儿的骨髓标本、8例骨折患儿的骨髓标本、人骨髓基质细胞HS-5及人AML细胞THP-1、HL60为研究对象,Western blot检测IGHG1蛋白表达;将THP-1细胞分组为空白(细胞未经任何处理)、si-NC、si-IGHG1-1、si-IGHG1-2、si-IGHG1-3、TGF-β、si-IGHG1-1+TGF-β、si-IGHG1-1+TGF-β+LY364947(TGF-β/Smad通路抑制剂)组。CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术和Transwell实验分别测定细胞凋亡和侵袭;Western blot评估细胞中IGHG1、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达。结果 与骨折患儿骨髓比较,AML患儿骨髓中IGHG1蛋白((0.24±0.03)vs(0.87±0.12))表达水平显著升高(P<0.05);与HS-5细胞比较,THP-1、HL60细胞中IGHG1蛋白((0.89±0.14)(0.75±0.08)vs(0.21±0.02))表达升高(P<0.05);与空白组比较,si-IGHG1-1组THP-1细胞OD_(450)值(24、48、72 h)、侵袭细胞数目、TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率升高,TGF-β组对应指标呈相反变化(P<0.05);TGF-β逆转了沉默IGHG1对THP-1细胞增殖、凋亡和侵袭的影响;与si-IGHG1-1+TGF-β组比较,si-IGHG1-1+TGF-β+LY364947组TGF-β、p-Smad2、p-Smad3蛋白、OD_(450)值(24、48、72 h)及侵袭细胞数目显著降低,细胞凋亡率升高(P<0.05)。结论 IGHG1在AML细胞中高表达,沉默IGHG1可抑制AML细胞增殖及侵袭,并促进AML细胞凋亡,该机制可能与抑制TGF-β/Smad通路有关。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 免疫球蛋白γ-1重链恒定区 TGF-β/Smad通路 增殖 凋亡
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α-乳香酸灌胃对小鼠肾间质纤维化的防治作用及其机制探讨 被引量：4
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作者 柳敏娜 刘天龙 +3 位作者 刘利敏 杨振 段梦露 孙世仁 《山东医药》 CAS 2018年第7期18-22,共5页
目的观察α-乳香酸灌胃对小鼠肾间质纤维化的防治作用,并探讨其机制。方法雄性C57/BL小鼠52只,分为假手术组、模型组和乳香酸组。假手术组行单侧输尿管分离术,其余两组行单侧输尿管结扎术诱导肾间质纤维化。乳香酸组术后第1天开始给予α... 目的观察α-乳香酸灌胃对小鼠肾间质纤维化的防治作用,并探讨其机制。方法雄性C57/BL小鼠52只,分为假手术组、模型组和乳香酸组。假手术组行单侧输尿管分离术,其余两组行单侧输尿管结扎术诱导肾间质纤维化。乳香酸组术后第1天开始给予α-乳香酸60 mg/kg灌胃,连续21 d。将各组小鼠麻醉后取血液、肾脏组织。检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、丙二醛(MDA)和总超氧化物歧化酶(t-SOD);采用HE染色和MASSON染色观察各组小鼠肾脏组织病理变化;采用Western blotting法检测各组小鼠肾脏组织中的TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、α-SMA蛋白,采用q PCR法检测TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、α-SMA mRNA。培养HK-2细胞并分为对照组、实验1组、实验2组,实验1、2组下缺氧条件下培养48 h制作肾间质纤维化细胞模型。实验2组缺氧处理前加入25μg/m L的α-乳香酸。培养48 h后采用Western blotting法检测各组细胞中的TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、α-SMA蛋白。结果模型组小鼠血清BUN、Scr、MDA水平高于假手术组,SOD水平低于假手术组(P均<0.01)。乳香酸组小鼠血清BUN、Scr、MDA水平低于模型组,SOD水平高于模型组(P均<0.05)。肾脏组织病理观察结果显示,乳香酸组病理改变及肾小管间质纤维化程度较模型组明显减轻。模型组小鼠肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量高于假手术组,Smad7 mRNA及蛋白相对表达量低于假手术组;乳香酸组小鼠肾脏组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、α-SMA mRNA及蛋白相对表达量低于模型组,Smad7 mRNA及蛋白相对表达量高于模型组(P均<0.05)。实验1组细胞中TGF-β1、Smad2、Smad3、α-SMA相对表达量高于对照组,Smad7相对表达量低于对照组;实验2组TGF-β1、Smad2、Smad3、α-SMA相对表达量低于实验1组,Smad7相对表达量高于实验1组(P均<0.05)。结论α-乳香酸对小鼠肾间质纤维化有防治作用,作用机制可能与TGF 展开更多
关键词 肾纤维化 α-乳香酸 人肾小管上皮细胞 TGF-β/Smad通路
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Pirfenidone通过癌相关成纤维细胞抑制胆道肿瘤侵袭
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作者 魏亦成 王紫怡 +1 位作者 李炜 殷佩浩 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第6期975-981,988,共8页
目的探究吡非尼酮(PFD)通过癌相关成纤维细胞(CAF)抑制胆道肿瘤侵袭的相关机制。方法从胆道肿瘤患者的肿瘤组织中提取原代CAF,运用Western blot方法检测CAF的标志蛋白:波形蛋白(VIM),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),成纤维细胞激活蛋白(FAP... 目的探究吡非尼酮(PFD)通过癌相关成纤维细胞(CAF)抑制胆道肿瘤侵袭的相关机制。方法从胆道肿瘤患者的肿瘤组织中提取原代CAF,运用Western blot方法检测CAF的标志蛋白:波形蛋白(VIM),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),成纤维细胞激活蛋白(FAP)。鬼笔环肽实验显示成纤维细胞骨架功能。ELISA和Western blot实验验证正常成纤维细胞(NF)与CAF的TGF-β表达差异。通过CAF中加入PFD观察CAF的功能变化。ELISA,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot实验验证CAF的TGF-β表达变化。通过皮下瘤小鼠模型验证血清中TGF-β的变化。胶原收缩实验观察CAF胶原收缩功能的改变。明胶酶谱实验观察CAF的培养基中的MMP2、MMP9的变化。Western blot方法检测CAF中SMAD信号通路蛋白变化。结果CAF的相关标志蛋白VIM,α-SMA,FAP均高表达,且CAF的丝状肌动蛋白(F-actin)表达丰富。ELISA实验显示CAF的TGF-β表达增强。Western blot实验验证CAF的胶原功能更强。Western blot实验、PCR实验和相关现象实验说明PFD能抑制CAF的胶原生成和TGF-β表达。SMAD信号通路相关蛋白实验证明PFD能通过抑制TGF-β/SMAD信号通路从而影响肿瘤侵袭。结论癌症患者中提取的CAF的功能以胶原生成为主,而PFD通过TGF-β/SMAD信号通路抑制CAF的胶原产生和胶原重塑相关过程从而起到抑制肿瘤侵袭的作用。 展开更多
关键词 Pirfenidone 癌相关成纤维细胞 TGF-β/SMAD通路 胆囊癌 胆管癌 胶原收缩 侵袭
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5-氟尿嘧啶对驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响
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作者 朱春灏 张媛 +2 位作者 赵玉坤 曾维斌 王艳萍 《黑龙江动物繁殖》 2023年第2期1-6,共6页
试验旨在探讨5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)对体外培养的驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响,为5-FU抑制驴皮成纤维细胞的增殖及驴皮伤口愈合机制的研究提供理论依据。试验采用低(10,50μg/mL)、中(100,250,500μg/mL)、高浓度(1000,150... 试验旨在探讨5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)对体外培养的驴皮成纤维细胞增殖、凋亡的影响,为5-FU抑制驴皮成纤维细胞的增殖及驴皮伤口愈合机制的研究提供理论依据。试验采用低(10,50μg/mL)、中(100,250,500μg/mL)、高浓度(1000,1500,2000μg/mL)5-FU处理体外培养的驴皮成纤维细胞,用MTT法检测加药处理12,24,48,72,96 h的细胞增殖率,Caspase-3法检测加药处理0,4,8,24,48,72 h的细胞凋亡率,再通过RT-qPCR和ELISA检测添加不同浓度5-FU(10,100,1000μg/mL)对胶原蛋白合成相关基因表达及蛋白浓度的影响。结果表明:100μg/mL 5-FU处理成纤维细胞24 h增殖率开始显著降低(P<0.05),8 hCaspase-3活性显著升高(P<0.05);RT-qPCR结果显示,5-FU处理24 h可显著抑制胶原蛋白合成相关基因(TGF-β、Smad3、COL1A1、COL1A2、COL3A1)的表达(P<0.05),抑制程度呈剂量依赖性,但100μg/mL 5-FU处理后Smad7的表达量显著高于其他组(P<0.05);ELISA结果显示,100μg/mL 5-FU处理抑制TGF-β、COL1A1、COL3A1蛋白表达的效果最佳(P<0.05)。说明100μg/mL 5-FU处理24 h后,可在抑制体外培养的驴皮成纤维细胞过度增殖的同时,通过调控TGF-β/Smad信号通路,减少合成胶原蛋白相关基因的表达量和蛋白浓度。 展开更多
关键词 驴皮 成纤维细胞 5-氟尿嘧啶(5-FU) 胶原蛋白 TGF-β/Smad通路
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