胰腺癌中TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的研究 被引量：3

1

作者 张丽辉 黄带发 许凤芝 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期91-93,共3页

目的:通过对TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的基因表达分析,了解两种受体的基因表达与胰腺癌的相关性。方法:对12例正常胰腺组织和35例胰腺癌标本进行ABC免疫组织化学染色分析,P<005有意义。结果:TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的阳性率分别为686%(24/... 目的:通过对TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的基因表达分析,了解两种受体的基因表达与胰腺癌的相关性。方法:对12例正常胰腺组织和35例胰腺癌标本进行ABC免疫组织化学染色分析,P<005有意义。结果:TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的阳性率分别为686%(24/35)和60%(21/35)两者均阳性为514%(18/35);并发现两种受体的基因表达与胰腺癌的分期有关(P<001),而TGFβⅡ受体与胰腺癌的分化程度有关(P<005)。结论:提示两种受体的表达与胰腺癌的发生有关,且对此癌的诊断有意义。 展开更多

关键词 tgfβⅠ受体 tgfβⅱ受体 胰腺癌

下载PDF 职称材料

胰腺癌中TGFβⅠ和TGFβⅡ受体研究 被引量：1

2

作者 张丽辉 许凤芝 刘大为 《中国肿瘤临床与康复》 1998年第6期21-22,共2页

目的通过对TGFTGFβⅠ和TGFβⅡ受体的基因表达分析,了解两种受体的基因表达与胰腺癌的相关性。方法对12例正常胰腺组织和35例胰腺癌标本进行ABC免疫组织化学染色分析,结果以P＜0.05有意义。结果TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的阳性率分别为68.... 目的通过对TGFTGFβⅠ和TGFβⅡ受体的基因表达分析,了解两种受体的基因表达与胰腺癌的相关性。方法对12例正常胰腺组织和35例胰腺癌标本进行ABC免疫组织化学染色分析,结果以P＜0.05有意义。结果TGFβⅠ和TGFβⅡ受体的阳性率分别为68.6％（24／35）和60％（21／35）两者均阳性为51.4（18／35）;并发现两种受体的基因表达与胰腺癌的分期有关（P＜0.01）,而TGFβⅡ受体与胰腺癌的分化程度有关（P＜0.05）。结论结果提示两种受体的表达与胰腺癌的发生有关,且对此癌的诊断有意义。 展开更多

关键词 tgfβⅠ受体 tgfβⅱ受体 胰腺癌

下载PDF 职称材料

封闭式负压引流技术治疗糖尿病足对创面组织中TGF-β_1及其受体表达的影响研究 被引量：40

3

作者 胡承浩 李东宇 +3 位作者 庞宗超 李惠斌 东野玉辉 吴佳妮 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1061-1065,共5页

目的探讨封闭式负压引流技术(vaccum sealing drainage,VSD)治疗糖尿病足后,创面组织中TGF-β_1及其Ⅱ型受体(typeⅡof TGF-β-receptor,TβRⅡ)表达的变化,分析VSD加快创面愈合的机制。方法将2012年5月—2016年5月收治的80例糖尿病足... 目的探讨封闭式负压引流技术(vaccum sealing drainage,VSD)治疗糖尿病足后,创面组织中TGF-β_1及其Ⅱ型受体(typeⅡof TGF-β-receptor,TβRⅡ)表达的变化,分析VSD加快创面愈合的机制。方法将2012年5月—2016年5月收治的80例糖尿病足患者纳入研究,随机分为两组(n=40)。采用相同基础治疗的同时,VSD组创面给予VSD治疗,对照组给予外用油纱换药治疗。两组患者性别、年龄、病程、体质量、足部溃疡面积以及Wagner分级比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。记录两组患者创基准备时间、住院时间;治疗前及治疗后7 d时取创面组织行免疫组织化学染色,计算TGF-β_1、TβRⅡ表达阳性指数。结果 VSD组患者经1~3次VSD治疗后行植皮术,平均2次;对照组患者经1~6次换药后行植皮术,平均4次。VSD组患者创基准备时间及住院时间均较对照组明显缩短,比较差异有统计学意义(t=–13.546,P=0.036;t=–12.831,P=0.041)。两组植皮均顺利成活,创面愈合良好。免疫组织化学染色示,治疗前VSD组TGF-β_1、TβRⅡ表达阳性指数分别为5.3±2.4、14.0±2.6,对照组分别为4.4±2.3、14.7±3.1,比较差异无统计学意义(t=1.137,P=0.263;t=1.231,P=0.409)。治疗7 d后,VSD组TGF-β_1、TβRⅡ表达阳性指数分别为34.3±2.9、41.7±3.7,对照组分别为5.8±2.0、18.1±2.5,比较差异有统计学意义(t=–35.615,P=0.003;t=23.725,P=0.002)。结论 VSD可提高糖尿病足创面组织中TGF-β_1、TβRⅡ的表达,促进肉芽组织生长,加快创面愈合。 展开更多

关键词 糖尿病足 封闭式负压引流技术 创面愈合 tgf-β1 tgf-βⅱ型受体

原文传递

TGF-β1和TGF-βⅡ型受体酵母表达载体构建 被引量：3

4

作者 左魁阳 陈梦茜 +4 位作者 韩瑞杰 王小花 孟娜娜 金秀东 刘海峰 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期926-929,共4页

目的克隆人转化生长因子β1(TGF-β1)和4个受体基因片段,构建酵母表达载体,为应用酵母双杂交筛选与TGF-β1相互作用的TβRⅡ区域提供技术支持。方法提取人血液中RNA,逆转录转为c DNA,PCR扩增TGF-β1和4个受体(TβRⅡ-A、TβRⅡ-B、TβR... 目的克隆人转化生长因子β1(TGF-β1)和4个受体基因片段,构建酵母表达载体,为应用酵母双杂交筛选与TGF-β1相互作用的TβRⅡ区域提供技术支持。方法提取人血液中RNA,逆转录转为c DNA,PCR扩增TGF-β1和4个受体(TβRⅡ-A、TβRⅡ-B、TβRⅡ-C、TβRⅡ-D)基因片段,双酶切后,分别插入酵母双杂交表达载体p GBKT7和p GADT7;经过PCR扩增、双酶切和DNA测序鉴定后,构建质粒p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡ-C和p GADT7-TβRⅡ-D。结果成功扩增TGF-β1基因(1 200 bp)和TβRⅡ-A(453bp)、TβRⅡ-B(366 bp)、TβRⅡ-C(276 bp)和TβRⅡ-D(165 bp)基因片段,经PCR、双酶切和DNA测序鉴定插入到酵母双杂交载体序列正确。结论成功构建p GBKT7-TGF-β1和p GADT7-TβRⅡ-A、p GADT7-TβRⅡ-B、p GADT7-TβRⅡC和p GADT7-TβRⅡ-D酵母双杂交表达载体。 展开更多

关键词 人转化生长因子β1(tgf-β1) tgfβⅱ型受体 质粒构建 酵母双杂交

原文传递

RNA干扰抑制TGF-βⅡ型受体的表达

5

作者 杜德伟 李端 +6 位作者 杨洁 吴学勤 李占亭 刘丽丽 杨峰 蒙军平 孙脊峰 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第1期43-45,83,共4页

目的:观察针对TGF-βRⅡ的干扰RNA对TGF-βRⅡ表达的抑制作用,探讨RNA干扰TGF-βRII的方法对肾间质纤维化的抑制作用。方法:PCR方法扩增TGF-βRⅡ的cDNA序列,将全长的TGF-βRⅡcDNA插入pcDNA3中,构建TGF-βRⅡ的真核表达载体,酶切、测... 目的:观察针对TGF-βRⅡ的干扰RNA对TGF-βRⅡ表达的抑制作用,探讨RNA干扰TGF-βRII的方法对肾间质纤维化的抑制作用。方法:PCR方法扩增TGF-βRⅡ的cDNA序列,将全长的TGF-βRⅡcDNA插入pcDNA3中,构建TGF-βRⅡ的真核表达载体,酶切、测序及间接免疫荧光鉴定;根据TGF-βRⅡ的设计针对TGF-βRⅡ的干扰RNA,构建针对TGF-βRⅡ的RNA干扰质粒pSUPER-TGF-βRⅡ并进行酶切及测序鉴定;脂质体介导针对TGF-βRⅡ的RNA干扰质粒和TGF-βRII的真核表达载体共转染293T细胞,western-blot检测293细胞内TGF-βRⅡ的表达。结果:pcDNA3-TGF-βRⅡ测序结果显示TGF-βRⅡ基因未发生突变。间接免疫荧光检测TGF-βRⅡ在293T细胞内的表达;测序显示RNA干扰质粒pSUPER-TGF-βRⅡ序列正确,RNA干扰质粒明显抑制293T细胞内TGF-βRⅡ的表达。结论:成功构建了TGF-βRⅡ的真核表达载体及针对TGF-βRⅡ的RNA干扰质粒,RNA干扰质粒能够抑制TGF-βRⅡ的表达,为进一步研究针对TGF-βRⅡ的RNA干扰对肾纤维化的预防及治疗作用提供有用工具。 展开更多

关键词 tgf-βⅱ型受体 真核表达 RNA干扰

原文传递

TGF-β Ⅱ型受体的RNA干扰抑制肾纤维化 被引量：1

6

作者 吴惠 杨洁 +5 位作者 李占亭 杨峰 刘丽丽 蒙军平 王莉 杜德伟 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第3期449-452,共4页

目的:研究针对TGF-βⅡ型受体的RNA干扰质粒对α-SMA表达的抑制作用,探讨RNA干扰TGF-βRII的方法对肾间质纤维化的抑制作用。方法:单侧结扎输尿管方法制备肾间质纤维化小鼠动物模型。分别经输尿管逆行注射a:RNA干扰质粒;b:错配对照质粒... 目的:研究针对TGF-βⅡ型受体的RNA干扰质粒对α-SMA表达的抑制作用,探讨RNA干扰TGF-βRII的方法对肾间质纤维化的抑制作用。方法:单侧结扎输尿管方法制备肾间质纤维化小鼠动物模型。分别经输尿管逆行注射a:RNA干扰质粒;b:错配对照质粒;c:空载体;d:生理盐水;e:正常对照。通过western-blot及免疫组织化学方法检测第3、5、10天后肾组织内TGF-βRⅡ、α-SMA,观察其对肾间质纤维化的抑制作用。结果:针对TGF-βRII的RNA干扰质粒,明显抑制肾组织内TGF-βRⅡ、α-SMA表达;几组对照未见相应作用。结论:针对TGF-βRⅡ的RNA干扰质粒,能够抑制肾间质纤维化的发生、发展,可能成为延缓肾功能减退的有效方法。 展开更多

关键词 tgf-βⅱ型受体 RNA干扰 肾纤维化

原文传递

截短型TGF-β Ⅱ型受体原核表达载体的构建 被引量：1

7

作者 刘洁婷 郭冉 +2 位作者 刘海峰 董凯 初彦辉 《牡丹江医学院学报》 2010年第1期8-11,共4页

目的:构建截短型TGF-β型受体,为TGF-βⅡ型受体的研究提供平台。方法:用定向克隆方法将tTGF-β基因插入载体PET-28a,原核表达,构建重组质粒tTGF-βRⅡB。结果:经酶切鉴定及DNA序列测定,重组质粒tTGF-βRⅡB序列及阅读框架正确。结论:... 目的:构建截短型TGF-β型受体,为TGF-βⅡ型受体的研究提供平台。方法:用定向克隆方法将tTGF-β基因插入载体PET-28a,原核表达,构建重组质粒tTGF-βRⅡB。结果:经酶切鉴定及DNA序列测定,重组质粒tTGF-βRⅡB序列及阅读框架正确。结论:成功地构建了PET-28a-tTGF-βRⅡB重组质粒。 展开更多

关键词 tgf-βⅱ型受体 原核表达 载体构建 序列分析

下载PDF 职称材料

转化生长因子-βⅡ型受体特异性短发夹状RNA真核表达质粒的构建及鉴定 被引量：1

8

作者 周昌宁 曹海宁 +5 位作者 陈浩 张彩萍 吕会增 郑宗珩 陈图峰 王晖 《实用医学杂志》 CAS 2008年第11期1874-1876,共3页

目的:针对转化生长因子-!(TGF-β)Ⅱ型受体基因的不同部位,构建不同TGF-βⅡ型受体特异性短发夹状RNA(shRNA)表达质粒载体,在转录后水平抑制TGF-βⅡ型受体的表达,对其克隆进行鉴定并挑选出抑制效率最高的克隆。方法:用DNA重组技术将针... 目的:针对转化生长因子-!(TGF-β)Ⅱ型受体基因的不同部位,构建不同TGF-βⅡ型受体特异性短发夹状RNA(shRNA)表达质粒载体,在转录后水平抑制TGF-βⅡ型受体的表达,对其克隆进行鉴定并挑选出抑制效率最高的克隆。方法:用DNA重组技术将针对人TGF-βⅡ型受体基因不同部位所设计的4对shRNA序列克隆到真核表达质粒pSilencerTM3.1-H1neovector中,构建TGF-βⅡ型受体shRNA表达载体pSilencerTM3.1-H1-TGF-βRⅡshRNA1、2、3、4。脂质体介导转染成人原代成纤维细胞,经G418筛选抑制TGF-βⅡ型受体表达的稳定细胞克隆。结果:3个TGF-βⅡ型受体shRNA表达载体pSilencerTM3.1-H1-TGF-βRⅡshRNA1、2、3经限制性酶切及序列分析证明基因插入正确。RT-PCR、Westernblotting均证实3种shRNA重组质粒中pSilencerTM3.1-H1-TGF-βRⅡshRNA2可明显降低细胞内TGF-βⅡ型受体mRNA峰度及TGF-βⅡ型受体蛋白表达。结论:成功构建了TGF-βⅡ型受体shRNA表达载体pSilencerTM3.1-H1-TGF-βRⅡshRNA1、2、3,并筛选出特异而高效的阻断TGF-βⅡ型受体表达的克隆。此实验结果为进一步研究TGF-βⅡ型受体蛋白分子的生物学功能及应用奠定了基础。 展开更多

关键词 瘢痕 SHRNA tgf-βⅱ型受体 转化生长因子

下载PDF 职称材料

TGF-βⅡ型受体mRNA及蛋白在人IgA肾病肾小管上皮的表达 被引量：1

9

作者 王子慧 于鼎 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2001年第2期138-141,共4页

为探讨转化生长因子 -β (TGF-β)在人 Ig A肾病肾小管间质纤维化中的作用 ,本文用原位杂交及免疫组织化学方法研究转化生长因子 -β 型受体 (TGF-βR ) m RNA和蛋白在肾小管上皮细胞的表达。结果表明 :TGF-βR m RNA定位于肾小管及集... 为探讨转化生长因子 -β (TGF-β)在人 Ig A肾病肾小管间质纤维化中的作用 ,本文用原位杂交及免疫组织化学方法研究转化生长因子 -β 型受体 (TGF-βR ) m RNA和蛋白在肾小管上皮细胞的表达。结果表明 :TGF-βR m RNA定位于肾小管及集合管上皮细胞。 TGF- βR 蛋白定位于肾小管及集合管上皮细胞的基底面、腔面及侧面 ,或呈与基底膜相垂直的基底部纵纹出现于一些细胞的胞质内。肾小球系膜细胞也可见 TGF- βR m RNA及蛋白表达 ,但不如肾小管明显。以上结果提示肾小管和集合管上皮细胞的受体可与 TGF- β特异性结合。 TGF- β则通过自分泌作用促进小管上皮细胞合成与分泌ECM。过多的 ECM在小管周围沉积 ;或 TGF-β抑制 ECM的降解 ,终将导致 Ig 展开更多

关键词 tgf-βⅱ型受体 MRNA 蛋白 肾小管上皮 表达 IGA肾病 免疫组织化学

下载PDF 职称材料

TGF对牙齿发育的调节

10

作者 徐彬 柏树令 《解剖科学进展》 CAS 2000年第3期235-236,共2页

在胚胎发育过程中 ,TGF- β 受体是 TGF- β调节牙齿形成通路的关键因素。TGF- β2 或 EGF表达不足时会严重影响牙齿的发育。TGF- β 受体失活改变了内源性 TGF- β信号系统对器官上皮细胞增生的负向调节效应 。

关键词 tgf调节 牙齿发育 反义寡核苷酸 tgf-βⅱ受体

下载PDF 职称材料

携带TGF-βⅡ型受体及NKG2D融合基因的NK-92细胞生物学特性研究

11

作者 王仲娟 林丹丹 +2 位作者 张胤晟 赵李祥 刘海燕 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期206-210,共5页

目的构建携带TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜区及NKG2D胞内段融合基因的NK-92细胞,并检测其生物学特性。方法通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段基因;利用PCR的方法将2段基因融合... 目的构建携带TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜区及NKG2D胞内段融合基因的NK-92细胞,并检测其生物学特性。方法通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段基因;利用PCR的方法将2段基因融合,并构建含有融合基因的慢病毒穿梭质粒;将该质粒与包装质粒共转染293T细胞,获得慢病毒颗粒并感染NK-92细胞系,筛选出稳定转染的NK-92细胞系;采用流式细胞术检测目的基因在转染后的NK-92细胞系中的表达,用CCK-8的方法检测24 h和48 h时NK-92-TN的存活能力,同时用Transwell的方法检测NK-92-TN的迁移能力。结果测序表明,成功获得了TGF-βRⅡ胞外段跨膜区与NKG2D胞内段的融合基因;获得了重组慢病毒;通过筛选得到了可稳定表达融合基因的NK-92细胞系,同时NK-92-TN的存活能力和迁移能力要明显优于对照组。结论成功建立表达TN的NK-92细胞系,并且发现NK-92-TN的存活能力和迁移能力明显优于对照组,从而为NK-92-TN细胞的体内生物学功能的研究工作奠定了基础。 展开更多

关键词 tgf-βⅱ型受体 NKG2D NK-92 存活 迁移

下载PDF 职称材料

泡球蚴囊液对大鼠肝细胞TGF-βⅡ型受体及Smads信号蛋白表达的影响

12

作者 王俊华 张雪 +7 位作者 李静 魏绪法 周晓涛 张传山 吕国栋 卢晓梅 温浩 林仁勇 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第5期340-343,共4页

目的观察泡球蚴(Em)囊液对Wistar大鼠肝细胞TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)及信号蛋白Smad2/3、Smad4及Smad7表达的影响。方法以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离,1×106接种于Ⅰ型胶原铺底35 mm培养皿,无血清培养... 目的观察泡球蚴(Em)囊液对Wistar大鼠肝细胞TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)及信号蛋白Smad2/3、Smad4及Smad7表达的影响。方法以Wistar大鼠作肝细胞供者,采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离,1×106接种于Ⅰ型胶原铺底35 mm培养皿,无血清培养20 h后,以泡球蚴囊液置换培养液培养2 h,提取蛋白,Western blot检测TGF-βⅡ型受体(TβRⅡ)、p-Smad2/3、Smad4及Smad7在肝细胞的表达。结果 Western blot显示,泡球蚴囊液处理2 h后,大鼠肝细胞内TβRⅡ、p-Smad2/3、Smad4及Smad7分别为4.71±0.73、2.37±0.34、2.08±0.23和0.19±0.05,对照组分别为1.55±0.21、0.42±0.09、0.37±0.07和0.59±0.12,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论泡球蚴囊液对大鼠肝细胞TβRⅡ、p-Smad2/3、Smad4蛋白表达均有上调作用,而对Smad7蛋白表达具有下调作用,提示泡球蚴侵染宿主过程中通过影响TGF-/βSmads信号通路而造成宿主肝损伤。 展开更多

关键词 泡球蚴 囊液 肝细胞 tgf-βⅱ型受体 SMADS

原文传递

截短型人转化生长因子βⅡ型受体胞外域的表达及活性分析

13

作者 韩瑞杰 王小花 +3 位作者 左魁阳 初彦辉 李桂芹 刘海峰 《广东医学》 CAS 2018年第8期1124-1128,共5页

目的构建截短型人转化生长因子βⅡ型受体胞外域(thTβRⅡ)原核表达载体,诱导表达纯化thTβRⅡ蛋白,并分析其生物学活性。方法以本实验室前期构建的TβRⅡ全长基因片段(p GEX-4T1-TβRⅡ)为模版,常规PCR扩增出带有Nde I和Bam HI酶切位点... 目的构建截短型人转化生长因子βⅡ型受体胞外域(thTβRⅡ)原核表达载体,诱导表达纯化thTβRⅡ蛋白,并分析其生物学活性。方法以本实验室前期构建的TβRⅡ全长基因片段(p GEX-4T1-TβRⅡ)为模版,常规PCR扩增出带有Nde I和Bam HI酶切位点的thTβRⅡ目的基因,并插入原核表达载体p ET28a,命名为p ET28a-thTβRⅡ。将经过PCR、双酶切和DNA测序正确的p ET28a-thTβRⅡ转化至大肠杆菌Rossta诱导表达,用Ni^(2+)亲和层析纯化获得高纯度thTβRⅡ目的蛋白,经SDS-PAGE进行纯度分析,MTT法观察其对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的人肝星状细胞LX-2增殖活性的影响,real-time RT-PCR及Western blot检测其对TGF-β1、纤连蛋白(FN)mRNA及FN、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达的影响。结果 p ET28a-thTβRⅡ原核表达载体构建成功,宿主菌Rossta/p ET28a-thTβRⅡ在37℃经0.8mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导5 h获得目的蛋白thTβRⅡ的大量表达,目的蛋白主要以包涵体的形式存在,通过Ni^(2+)亲和层析成功获得高纯度thTβRⅡ,SDS-PAGE鉴定分子量约为18.0 kD,MTT显示150μg/mL的重组蛋白thTβRⅡ能明显抑制活化的人肝星状细胞LX-2增殖,real-time RT-PCR及Western blot显示200μg/mL的重组蛋白thTβRⅡ其能显著减少TGFβ1、FNmRNA;FN、α-SMA蛋白的表达。结论成功构建thTβRⅡ原核表达载体,诱导表达纯化并获得高纯度重组蛋白thTβRⅡ,其能抑制活化的LX-2细胞增殖并具有抗纤维化作用,为进一步体内外功能研究打下基础。 展开更多

关键词 tgfβⅱ型受体 包涵体 纯化

下载PDF 职称材料

缺陷型TGF_1βⅡ型受体真核表达质粒载体的构建

14

作者 蒋就喜 蒋林彬 +3 位作者 向秋 李国坚 罗伟生 陆明深 《华夏医学》 2005年第6期893-895,共3页

目的:本实验旨在通过构建大鼠缺陷型TGF1βⅡ型受体的真核表达质粒载体,为研究大鼠肝组织因TGF1βⅡ型受体缺陷而阻断TGF1β的作用后,对人工免疫性大鼠的肝组织及其他组织的影响提供实验材料。方法:根据大鼠肝组织TGF1βⅡ型受体的基因... 目的:本实验旨在通过构建大鼠缺陷型TGF1βⅡ型受体的真核表达质粒载体,为研究大鼠肝组织因TGF1βⅡ型受体缺陷而阻断TGF1β的作用后,对人工免疫性大鼠的肝组织及其他组织的影响提供实验材料。方法:根据大鼠肝组织TGF1βⅡ型受体的基因序列,设计在特异的位置添加终止密码,在此序列两端加入特异的限制性内切酶的酶切位点,从而构建大鼠的缺陷型TGFβ1Ⅱ型受体基因序列,再利用基因重组技术,将其连接在真核表达质粒载体中,对此质粒载体进行酶切电泳鉴定和DNA测序加以验证。结果:运用分子生物学技术,成功获取突变体TGF1βⅡ型受体真核表达质粒载体,经过DNA测序鉴定,确认为实验预期所需。结论:TGF1βⅡ型受体真核表达质粒载体构建成功,其关键涉及基因片段及载体的选择。 展开更多

关键词 转化生长因子β1 tgfβ1ⅱ型受体 质粒 载体

下载PDF 职称材料

TGF-β_1Ⅱ型受体部分基因表达质粒对实验性大鼠肝纤维化的影响 被引量：23

15

作者 汪玲 胡国龄 +1 位作者 谭德明 刘双虎 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期168-171,共4页

目的　观察缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒在大白鼠体内阻断TGF β1 的作用后对免疫性大鼠肝纤维化的影响。方法　运用基因重组技术 ,构建人的含有细胞外结合区、跨膜区和少量细胞质区的缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体真核细胞表达质粒 ,经脂... 目的　观察缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒在大白鼠体内阻断TGF β1 的作用后对免疫性大鼠肝纤维化的影响。方法　运用基因重组技术 ,构建人的含有细胞外结合区、跨膜区和少量细胞质区的缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体真核细胞表达质粒 ,经脂质体包埋后 ,通过腹腔注射将其导入免疫性大鼠肝纤维化模型体内 ,观察其对大鼠肝纤维化的影响。结果　早期接受缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒治疗的大鼠 ,其血清透明质酸 (HA)、层黏连蛋白 (LN)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )、Ⅳ型胶原 (Ⅳ C)的水平均比模型组低 (P <0 .0 1) ,晚期组与模型组之间差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;在病理形态学的观察方面 ,早期、晚期运用缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒进行治疗 ,均可使大鼠肝纤维化程度较模型组减轻 (P <0 .0 1)。结论　在肝纤维化形成的早期应用缺陷型TGF β1 Ⅱ型受体表达质粒进行治疗可以预防肝纤维化的形成 ,而晚期应用只能阻止肝纤维化的进一步发展 。 展开更多

关键词 tgf-β1ⅱ型受体 基因表达质粒 大鼠 肝纤维化 影响 基因重组

原文传递

异补骨脂素对小鼠胚胎前成骨细胞TGF-β受体影响的实验研究 被引量：6

16

作者 塔娜 谭明生 +3 位作者 移平 蒋欣 杨峰 唐向盛 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第4期820-822,共3页

目的:探讨经不同浓度异补骨脂素干预对小鼠胚胎前成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、Ⅰ型骨胶原的表达、TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的影响以及与原发性骨质疏松症的关系。方法:细胞分为正常对照组与不同浓度异补骨脂素组。各组细胞采用MTT方法检测MC3T3... 目的:探讨经不同浓度异补骨脂素干预对小鼠胚胎前成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、Ⅰ型骨胶原的表达、TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的影响以及与原发性骨质疏松症的关系。方法:细胞分为正常对照组与不同浓度异补骨脂素组。各组细胞采用MTT方法检测MC3T3-E1细胞增殖情况,天狼星红染色法测定Ⅰ型骨胶原的表达,荧光素酶报告基因检测TGF-β1通路活性以及Western-Blot法检测TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的表达。结果:经不同浓度异补骨脂素刺激,可明显促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05);Ⅰ型胶原表达逐渐增强;荧光素酶报告基因检测显示TGF-β1通路活性明显增强;Western-Blot结果显示TGF-βⅠ、Ⅱ型受体表达明显增强。结论:异补骨脂素可促进小鼠胚胎前成骨细胞的增殖及Ⅰ型骨胶原表达,对原发性骨质疏松症具有治疗作用。其作用机制可能是通过激活TGF-β信号通路而发挥抗骨质疏松作用。 展开更多

关键词 骨质疏松症 报告基因 tgf-βⅠ、ⅱ型受体 Ⅰ型胶原

下载PDF 职称材料

可溶性TGF-β_1Ⅱ型受体逆转录病毒表达载体的构建 被引量：1

17

作者 高巍 周永兴 +1 位作者 张惠中 聂青和 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第6期760-765,共6页

目的:构建表达人TGF—β1Ⅱ型受体细胞外结合区和人IgG1 Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础. 方法:以RT—PCR方法扩增目的基因TβRⅡ-IgG1 Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEM—T—Easy,挑取阳性克... 目的:构建表达人TGF—β1Ⅱ型受体细胞外结合区和人IgG1 Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础. 方法:以RT—PCR方法扩增目的基因TβRⅡ-IgG1 Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEM—T—Easy,挑取阳性克隆酶切鉴定后测序;利用重组DNA 技术,将TβRⅡ-IgG1 Fc基因亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN中,重组质粒pL(TβRⅡ-IgG1 Fc)SN在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,测定病毒滴度. 结果:经测序、限制性酶切分析及PCR方法鉴定,载体插入基因序列、大小、位置均正确,并用PA317细胞进行包装、病毒滴度测定、筛选,建立具有较高滴度的感染性重组病毒产生细胞系. 结论:成功构建了重组质粒pL(TβRⅡ-IgG1 Fc)SN, 可望为肝纤维化的基因治疗提供有效途径. 展开更多

关键词 tgf-β1ⅱ型受体 逆转录病毒表达载体 逆转录病毒载体 可溶性 重组DNA技术 PA317细胞 PCR方法 病毒滴度测定 基因治疗 肝纤维化 TβRⅱ 重组质粒 人IgG1 PLXSN 脂质体介导 限制性酶切 构建表达 融合蛋白 目的基因 产物纯化

下载PDF 职称材料

TGF-β R Ⅱ真核表达载体及其RNA干扰质粒的构建及鉴定 被引量：2

18

作者 杜德伟 孙脊峰 +3 位作者 吴学勤 李端 杨洁 李占亭 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期367-370,共4页

目的构建含有TGF-βⅡ型受体(TGF-β R Ⅱ)的真核表达载体及针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒,并观察RNA干扰对TGF-β R Ⅱ表达的抑制作用。方法PCR方法扩增TGF-β R Ⅱ的cDNA序列,将全长的TGF-β R ⅡcDNA插入pcD-NA3.1中,构建TGF-β R ... 目的构建含有TGF-βⅡ型受体(TGF-β R Ⅱ)的真核表达载体及针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒,并观察RNA干扰对TGF-β R Ⅱ表达的抑制作用。方法PCR方法扩增TGF-β R Ⅱ的cDNA序列,将全长的TGF-β R ⅡcDNA插入pcD-NA3.1中,构建TGF-β R Ⅱ的真核表达载体pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ,并检测其在293T细胞中的表达。根据TGF-β R Ⅱ的基因序列,设计针对TGF-β R Ⅱ的干扰RNA,构建针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒pSUPER-TGF-β R Ⅱ。脂质体介导质粒pSUPER-TGF-β R Ⅱ和pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ共转染293T细胞,Western blot法检测RNA干扰质粒的生物活性。结果真核表达载体pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ和RNA干扰质粒pSUPER-TGF-β R Ⅱ经酶切鉴定构建正确,测序结果显示未发生基因突变。间接免疫荧光检测pcDNA3.1-TGF-β R Ⅱ转染的293T细胞,可见绿色荧光。针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒明显抑制293T细胞内TGF-β R Ⅱ的表达。结论已成功构建了TGF-β R Ⅱ的真核表达载体及针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰质粒,为进一步研究针对TGF-β R Ⅱ的RNA干扰对肾纤维化的预防及治疗作用奠定了基础。 展开更多

关键词 tgf-βRⅱ型受体 真核表达 RNA干扰 肾纤维化

下载PDF 职称材料

糖皮质激素对肿瘤细胞TGF-β1Ⅱ型受体的上调作用及其生物学意义

19

作者 李宗斌 卢建（指导老师） 《世界急危重病医学杂志》 2006年第3期1264-1266,共3页

【论文特点介绍】本文运用了多种分子生物学方法，以人前列腺癌PC-3细胞为细胞模型，研究了糖皮质激素对转化生长因子β（TGF-β）信号转导通路的影响及其与糖皮质激素抑制肿瘤细胞增殖的作用的关系．该研究对于阐述糖皮质激素抑制细胞... 【论文特点介绍】本文运用了多种分子生物学方法，以人前列腺癌PC-3细胞为细胞模型，研究了糖皮质激素对转化生长因子β（TGF-β）信号转导通路的影响及其与糖皮质激素抑制肿瘤细胞增殖的作用的关系．该研究对于阐述糖皮质激素抑制细胞增殖效应的信号通路具有重要的理论价值，对肿瘤的干预治疗具有潜在的研究意义。 展开更多

关键词 肿瘤细胞增殖 糖皮质激素 tgf-β1ⅱ型受体 生物学意义 上调作用 分子生物学方法 转化生长因子β PC-3细胞 信号转导通路 人前列腺癌

下载PDF 职称材料

TGFβ-Ⅱ受体mRNA在胰腺癌中的翻译水平 被引量：1

20

作者 张丽辉 许凤芝 于伟 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期178-178,共1页

近年来分子生物学研究表明，生长因子及其受体对胰腺癌细胞的生长行为有显著影响。生长因子受体（ＴＧＦβＲ）有３种亚型，我们用原位杂交技术分析了ＴＧＦβＲ－Ⅱ在人类胰腺癌中的表达、分布及定位和分子生物学与临床资料的相关性。... 近年来分子生物学研究表明，生长因子及其受体对胰腺癌细胞的生长行为有显著影响。生长因子受体（ＴＧＦβＲ）有３种亚型，我们用原位杂交技术分析了ＴＧＦβＲ－Ⅱ在人类胰腺癌中的表达、分布及定位和分子生物学与临床资料的相关性。１材料与方法正常人胰腺组织标本１０... 展开更多

关键词 胰腺癌 MRNA tgfβ-ⅱ受体

原文传递