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TEM1表达与胃癌患者新辅助化疗疗效相关性研究 被引量:2
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作者 唐君霞 戴滋瀛 +3 位作者 潘婷婷 陈永林 周永宁 关泉林 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期173-177,共5页
目的:检测胃癌组织中P53、人表皮生长因子受体2(HER-2)、肿瘤内皮标记物1(TEM1)的表达情况,结合新辅助化疗后临床疗效进行相关性分析,探讨其作为新辅助化疗疗效生物学标志物的可能性。方法:选取2015年5月至2017年5月于兰州大学第一医院... 目的:检测胃癌组织中P53、人表皮生长因子受体2(HER-2)、肿瘤内皮标记物1(TEM1)的表达情况,结合新辅助化疗后临床疗效进行相关性分析,探讨其作为新辅助化疗疗效生物学标志物的可能性。方法:选取2015年5月至2017年5月于兰州大学第一医院就诊以氟尿嘧啶为基础行新辅助化疗的63例胃癌患者,对新辅助化疗前的胃癌标本行免疫组织化学法检测P53、HER-2、TEM1的表达情况,通过影像学评估新辅助化疗疗效,分析各肿瘤指标与新辅助化疗疗效之间的关系。结果:63例进展期胃癌患者新辅助化疗后总有效率为69.8%,其中完全缓解(complete response,CR)2例,部分缓解(partial response,PR)7例,疾病稳定(stable disease,SD)35例,疾病进展(progressive disease,PD)19例;单因素分析结果显示TEM1阳性、T分期较高的患者新辅助化疗疗效较差(均P<0.05);病变部位、分化程度、病灶大小、P53(P=0.488)阳性及HER-2(P=0.106)阳性表达与胃癌新辅助化疗疗效无相关。多因素分析结果显示TEM1阳性、T分期高可能是进展期胃癌患者新辅助化疗疗效差的预测因素。结论:TEM1作为肿瘤基质的标志物,其阳性表达可能成为预测胃癌新辅助化疗疗效差的重要分子生物学指标。 展开更多
关键词 胃癌 新辅助化疗 tem1 敏感性 预测指标
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Ki-67、TEM1及ERCC1表达与胃癌新辅助化疗效果的相关性分析
2
作者 陈德志 陈巧辉 +4 位作者 林升禄 罗丽云 林冠 王佳坤 林光锬 《河北医药》 CAS 2023年第23期3550-3553,3558,共5页
目的分析Ki-67、TEM1及ERCC1表达与胃癌新辅助化疗效果的相关性。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月就诊并行胃癌新辅助化疗的112例胃腺癌患者为研究对象,收集患者临床病历资料,采用免疫组化技术检测胃镜活检和手术病理中Ki-67、TEM1... 目的分析Ki-67、TEM1及ERCC1表达与胃癌新辅助化疗效果的相关性。方法回顾性分析2018年1月至2022年12月就诊并行胃癌新辅助化疗的112例胃腺癌患者为研究对象,收集患者临床病历资料,采用免疫组化技术检测胃镜活检和手术病理中Ki-67、TEM1及ERCC1的表达,分析与胃癌新辅助化疗效果相关的影响因素。结果胃癌新辅助化疗病理完全缓解16例(14.29%),有效68例(60.71%),无效44例(39.29%)。单因素分析:新辅助化疗有效率分别与T分期、临床分期、Ki-67表达、Ki-67变化、TEM1表达、ERCC1表达明显相关(P<0.05),病理完全缓解率分别与T分期、Ki-67表达、ERCC1表达明显相关(P<0.05)。多元Logistic回归分析:Ki-67表达、Ki-67变化、TEM1表达、ERCC1表达均是新辅助化疗有效的独立影响因素(P<0.05),Ki-67表达、ERCC1表达均是病理完全缓解的独立影响因素(P<0.05)。结论Ki-67、TEM1及ERCC1表达均是胃癌新辅助化疗效果的独立分子生物学预测因子,对胃癌新辅助化疗长期预后的判断具有一定的指导价值。 展开更多
关键词 胃癌 新辅助化疗 KI-67 tem1 ERCC1
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TEM1mRNA在非小细胞肺癌中的表达及临床意义(英文) 被引量:1
3
作者 徐丽娟 于壮 +4 位作者 张永春 陈丹 杨堃 侯宪鹏 刘冰 《现代生物医学进展》 CAS 2012年第15期2904-2908,共5页
目的:揭示TEM1其与非小细胞肺癌侵袭和转移的可能关系,为靶向治疗提供理想的药物作用靶点。方法:实时荧光定量PCR方法检测56例非小细胞肺癌肿瘤组织及癌旁组织中TEM1 mRNA表达水平,分析其在不同组中的表达差异。结果:TEM1在56例非小细... 目的:揭示TEM1其与非小细胞肺癌侵袭和转移的可能关系,为靶向治疗提供理想的药物作用靶点。方法:实时荧光定量PCR方法检测56例非小细胞肺癌肿瘤组织及癌旁组织中TEM1 mRNA表达水平,分析其在不同组中的表达差异。结果:TEM1在56例非小细胞肺癌组织中都有表达。TEM1表达水平在肿瘤组织中比癌旁组织表达高,并且其表达水平与淋巴结转移及肿瘤分期密切相关(P<0.05),但与患者的病理类型,年龄及性别无关(P>0.05)。结论:TEM1表达水平与非小细胞肺癌分期密切相关,表明其可能是一个参与非小细胞肺癌侵袭及转移有价值的分子标记物。TEM1可能成为潜在的基因治疗靶点。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 tem1 血管发生 实时荧光定量PCR
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靶向重组Aif-T18融合蛋白对TEM1阳性肿瘤细胞的杀伤作用的研究
4
作者 邓侃 陈廷涛 彭颖征 《井冈山大学学报(自然科学版)》 2021年第1期43-48,共6页
验证Aif-T18融合蛋白对肿瘤内皮细胞标志分子1(TEM1)阳性肿瘤细胞的杀伤作用。采用基因工程技术方法构建重组质粒pIRES-TEM1-EGFP,转染TEM1阴性表达细胞MS1,经G418筛选得到TEM1阳性细胞株(MS1-TEM1);通过构建重组质粒pET302-Aif和pET302... 验证Aif-T18融合蛋白对肿瘤内皮细胞标志分子1(TEM1)阳性肿瘤细胞的杀伤作用。采用基因工程技术方法构建重组质粒pIRES-TEM1-EGFP,转染TEM1阴性表达细胞MS1,经G418筛选得到TEM1阳性细胞株(MS1-TEM1);通过构建重组质粒pET302-Aif和pET302-Aif-T18,转化至表达宿主菌BL21中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导菌体得到所需的目的蛋白,采用流式细胞仪和MTT技术检测融合蛋白对MS1和MS1-TEM1细胞的亲和力和特异性杀伤的效果。本研究中,主要利用单链抗体scFvT18选择性携带凋亡诱导因子AIF,靶向抑杀TEM1阳性细胞,从而为Aif-T18融合蛋白在肿瘤治疗中的开发应用提供实验依据。 展开更多
关键词 tem1 单链抗体 AIF
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VNP20009“双靶向性”系统在肿瘤治疗中的应用研究
5
作者 彭颖征 邓侃 《中国卫生标准管理》 2020年第23期141-144,共4页
目的探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009/单链抗体"双靶向性"系统在肿瘤治疗中的应用价值。方法本研究拟将前期筛选得到的、可特异性靶向卵巢癌标识分子TEM1的单链抗体scFv-78与人源化毒素DNAseⅠ共同构建入鼠伤寒沙门氏菌穿梭质... 目的探讨减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009/单链抗体"双靶向性"系统在肿瘤治疗中的应用价值。方法本研究拟将前期筛选得到的、可特异性靶向卵巢癌标识分子TEM1的单链抗体scFv-78与人源化毒素DNAseⅠ共同构建入鼠伤寒沙门氏菌穿梭质粒pET302中,在VNP20009中表达该蛋白并通过细胞实验评价该治疗系统对肿瘤的靶向效果。结果构建了pET302-Gala-DNAseⅠ-78、pET302-GalaSV40-DNAseⅠ-78、pET302-Gala-M9-DNAseⅠ-78和pET302-Gala-BIF-DNAseⅠ-78一系列表达质粒,通过West blot验证为目的蛋白,该蛋白能彻底降解溶液中的DNA,且特异性与MS1-TEM1细胞相结合。结论将融合蛋白与减毒鼠伤寒沙门氏菌VNP20009相结合,可达到"双靶向"的目的。为肿瘤的靶向治疗提供了新的思路和研究模式。 展开更多
关键词 双靶向 tem1 单链抗体 DNAseⅠ VNP20009 肿瘤
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人内皮唾液酸蛋白改良双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:3
6
作者 邓桂花 张雯佳 +3 位作者 梁少聪 曾磊 伍菲凡 袁小澎 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期127-132,共6页
为建立肿瘤内皮标志物1(tumor endothelial marker 1,TEM 1)ELISA检测方法,依据TEM 1基因胞外区片段序列及原核表达载体pMAL-p5x多克隆位点设计引物,采用PCR技术从含TEM 1全长基因载体中扩增目的片段,将双酶切的目的基因和载体经胶回收... 为建立肿瘤内皮标志物1(tumor endothelial marker 1,TEM 1)ELISA检测方法,依据TEM 1基因胞外区片段序列及原核表达载体pMAL-p5x多克隆位点设计引物,采用PCR技术从含TEM 1全长基因载体中扩增目的片段,将双酶切的目的基因和载体经胶回收连接后插入表达载体并经测序鉴定,在转入宿主菌后用IPTG诱导目的蛋白表达,用分离纯化后的目的蛋白分别免疫鼠和兔以制备多克隆抗体并用ELISA和流式细胞术对抗体进行鉴定,采用兔抗TEM1为捕获抗体、鼠抗TEM 1为检测抗体建立双抗体夹心ELISA检测方法,棋盘滴定法探索各抗体最佳工作浓度,倍比稀释TEM 1,检测建立方法的灵敏度。成功构建的重组表达质粒pMAL-p5x-hCD248,经纯化复性后获得目的蛋白,免疫后获得兔多抗抗体效价为1∶1 024 000、鼠多抗抗体1∶512 000,棋盘法确定捕获抗体、检测抗体及酶标抗体最佳浓度分别为1∶500、1∶16 000和1∶20 000,经检测证实该方法测定下限为18.31ng/mL;检测50例恶性肿瘤患者与50例健康人血清TEM 1含量,发现差异无统计学意义。 展开更多
关键词 tem 1/内皮唾液酸蛋白/CD248 双抗体夹心 ELISA法 肿瘤抗原
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抗人肿瘤内皮标志物1 ( TEM1)抗体的表达及活性鉴定 被引量:1
7
作者 张玲玲 吴介恒 +7 位作者 韩东晖 杨发 郑国旭 席文锦 郭张燕 杨安钢 秦卫军 温伟红 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1129-1133,共5页
目的构建抗人肿瘤内皮标志物1(TEM1)全抗体IgG78的真核表达载体,进行表达纯化后鉴定其生物学活性。方法利用PCR分别从单链抗体ScFv78中扩增TEM1抗体的轻、重链可变区基因,并克隆入带有小鼠抗体恒定区的真核表达载体Bichim-L,瞬时转染HEK... 目的构建抗人肿瘤内皮标志物1(TEM1)全抗体IgG78的真核表达载体,进行表达纯化后鉴定其生物学活性。方法利用PCR分别从单链抗体ScFv78中扩增TEM1抗体的轻、重链可变区基因,并克隆入带有小鼠抗体恒定区的真核表达载体Bichim-L,瞬时转染HEK293F细胞,表达产物用蛋白G亲和层析柱进行纯化,所得蛋白用SDS-PAGE和Western blot法进行鉴定,采用流式细胞术和活细胞ELISA检测该抗体与TEM1阳性细胞的结合特异性及亲和力。结果成功构建了TEM1全抗体IgG78的真核表达载体,并在HEK293F细胞中表达。SDS-PAGE和Western blot法证实目的蛋白符合预期大小,流式细胞术及细胞ELISA结果显示该抗体可特异性结合TEM1阳性肿瘤细胞,且有较高的亲和力。结论成功获得了一株具有良好结合特异性和较高亲和力的TEM1抗体。 展开更多
关键词 肿瘤内皮标志物1(tem1) CD248 抗体 HEK293F细胞 真核表达
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基于β-内酰胺酶构建大肠杆菌体内Aβ42聚集抑制剂筛选体系
8
作者 赵文平 贾龙刚 +1 位作者 路福平 刘夫锋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第19期17-24,共8页
淀粉样β蛋白(Aβ)的错误折叠和聚集是导致阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的主要原因,开发Aβ聚集抑制剂对于缓解和治疗AD至关重要。根据TEM1-β-内酰胺酶(TEM1-β-lactamase,βlac)的结构特征及Aβ42的聚集特性,利用分子生物... 淀粉样β蛋白(Aβ)的错误折叠和聚集是导致阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)的主要原因,开发Aβ聚集抑制剂对于缓解和治疗AD至关重要。根据TEM1-β-内酰胺酶(TEM1-β-lactamase,βlac)的结构特征及Aβ42的聚集特性,利用分子生物学方法将Aβ42插入到βlac 196-197氨基酸残基之间,构建了BL21-βlac-Aβ42重组菌株。利用已知Aβ42聚集抑制剂,分别通过斑点滴定实验、平板涂布实验和菌体浓度变化检测实验进行了验证。结果显示,添加已知Aβ42抑制剂后,BL21-βlac-Aβ42菌株在特定氨苄青霉素(ampicillin, Amp)浓度条件下生长状况得到改善,允许微生物细胞生长的最大细胞稀释倍数增大,证明该融合体系能应用于大肠杆菌体内筛选Aβ42聚集抑制剂。该研究实现了淀粉样蛋白聚集抑制剂在微生物体内的高通量筛选,为开发新型抗Aβ聚集药物奠定了基础。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淀粉样β蛋白42 (Aβ42) tem1-β-内酰胺酶(βlac) 融合蛋白表达 聚集抑制剂 大肠杆菌体内筛选系统
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CTX-M-3超广谱-和TEM-1广谱β-内酰胺酶基因同时存在于大肠埃希菌 被引量:14
9
作者 孙景勇 倪语星 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第S1期79-81,共3页
目的 分析我院大肠埃希菌临床分离株中超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。方法用NCCLS表型确证试验确定临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌 ,用Etest检测其MIC值 ,分别用TEM、SHV和CTX M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。... 目的 分析我院大肠埃希菌临床分离株中超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。方法用NCCLS表型确证试验确定临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌 ,用Etest检测其MIC值 ,分别用TEM、SHV和CTX M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 我院大部分产ESBLs的大肠埃希菌体外对头孢噻肟耐药而对头孢他啶敏感。这些菌株以TEM和CTX M引物的PCR扩增结果均出现阳性条带 ,而SHV引物的PCR均无条带产生 ,测序发现阳性条带分别为TEM 1和CTX M 3基因序列。结论 发现CTX M 3型ESBL和TEM 1广谱 β 展开更多
关键词 大肠埃希菌 超广谱Β-内酰胺酶 CTX-M-3 tem-1
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淋球菌对头孢克肟等6种抗生素敏感性及耐药质粒分型研究 被引量:13
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作者 吴兴中 郑和平 +10 位作者 李燕娃 黄澍杰 陈少楠 郭炽星 黄进梅 覃晓琳 薛耀华 曾维英 蓝银苑 李奕歆 唐三梅 《皮肤性病诊疗学杂志》 2012年第6期352-355,358,共5页
目的:检测2011年广东省广州、佛山、江门、肇庆四市临床分离的淋球菌流行株对青霉素、四环素、环丙沙星、头孢克肟、头孢曲松和大观霉素等6种抗生素的敏感性,对质粒介导的产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)和四环素高水平耐药淋球菌(TRNG)进行... 目的:检测2011年广东省广州、佛山、江门、肇庆四市临床分离的淋球菌流行株对青霉素、四环素、环丙沙星、头孢克肟、头孢曲松和大观霉素等6种抗生素的敏感性,对质粒介导的产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)和四环素高水平耐药淋球菌(TRNG)进行耐药质粒TEM-1和tetM基因分型。方法:采用琼脂稀释法测定菌株对6种抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),判断敏感性按WHO西太区淋球菌耐药性监测统一标准,其中头孢克肟敏感性试验和判断标准按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)判断。用纸片酸度法检测产β-内酰胺酶淋球菌(PPNG)菌株,多重PCR方法鉴定β-内酰胺酶质粒并进行TEM-1和TRNG tetM基因分型。结果:来自四市429株淋球菌中检出青霉素耐药364株(84.8%),四环素和环丙沙星耐药株(率)分别为389株(90.7%)和418株(97.4%),未发现对大观霉素、头孢克肟和头孢曲松耐药菌株,但头孢曲松低敏率达到34.0%(146/429),头孢克肟低敏只有1株(0.2%)。青霉素、四环素和环丙沙星的MIC50及MIC90均已超过耐药标准。检出PPNG株156株(36.4%),TRNG株201株(46.9%)。耐药质粒TEM-1基因分型以亚洲型为主(94.9%,148/156),只有8株携带非洲型质粒;tetM基因分型均为荷兰型。结论:四市淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星耐药率较高,对大观霉素、头孢克肟和头孢曲松的敏感性较高,TEM-1基因质粒分型以亚洲型为主,tetM基因分型均为荷兰型。 展开更多
关键词 奈瑟氏球菌 淋病 微生物敏感性试验 tem-1
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肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型分析 被引量:12
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作者 陈淑贞 石蓉林 +2 位作者 姚芬 蔡应木 钱元恕 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2006年第4期236-239,共4页
目的分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLs肺炎克雷伯菌的MIC,分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果83株... 目的分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLs肺炎克雷伯菌的MIC,分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果83株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,产TEM型75株,SHV型41株,CTX-M型25株,OXA型9株。其中,同时产3种酶有13株,占15.7%;同时产2种酶有59株,占71.1%;仅11株产单1种酶,占13.2%。而9株同时产TEM、SHV和CTX-M型,测序结果为CTX-M-3,TEM-1及多种SHV型(SHV-12、SHV-28)。药敏结果表明,同时产2或3种酶的菌株比产单1种酶的菌株耐药性更严重。结论所分离产ESBLs肺炎克雷伯菌主要为TEM、SHV、CTX-M、OXA型,且同时存在产2~3种酶,应引起临床高度重视。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 超广谱Β内酰胺酶 tem-1 CTX-M-3 SHV
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肺炎克雷伯氏菌K99-1029中的ESBLs基因型分析 被引量:11
12
作者 熊自忠 朱德妹 +1 位作者 汪复 张婴元 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期96-100,共5页
目的 了解华山医院临床分离的肺炎克雷伯氏菌K99 10 2 9菌株产生的超广谱 β 内酰胺酶(ESBLs)的基因型。方法 编码框以外设计引物、PCR扩增K99 10 2 9转移接合子中的ESBLs全编码基因 ,克隆入pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序... 目的 了解华山医院临床分离的肺炎克雷伯氏菌K99 10 2 9菌株产生的超广谱 β 内酰胺酶(ESBLs)的基因型。方法 编码框以外设计引物、PCR扩增K99 10 2 9转移接合子中的ESBLs全编码基因 ,克隆入pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序分析其基因型。结果 K99 10 2 9转移接合子所产生的三种酶编码基因序列分别与GenBank中TEM 1、SHV 12、CTX M 3编码基因序列的同源性为 10 0 % ;产SHV 12或CTX M 3克隆菌株对多数 β 内酰胺类抗生素耐药 ,SHV 12和CTX M 3对多数 β 内酰胺类抗生素具有水解作用 ,CTX M 3对头孢噻肟的水解能力明显强于头孢他啶 ;产TEM 1克隆菌株仅对青霉素类耐药 ,TEM 1对青霉素类有明显的水解作用。结论 临床分离的肺炎克雷伯氏菌K 99 10 2 9菌株同时产生TEM 1、SHV 12、CTX M 3型酶 ,可导致对大多数的 β 内酰胺类抗生素产生耐药性。 展开更多
关键词 ESBLS 基因型 肺炎克雷伯氏菌 医院 超广谱Β-内酰胺酶 抗生素
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Prognostic values of tumor endothelial markers in patients with colorectal cancer 被引量:7
13
作者 KA Rmali MCA Puntis WG Jiang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第9期1283-1286,共4页
AIM: Tumor endothelial markers (TEMs) are a newly discovered family of endothelial markers associated with tumor specificangiogenesis. This study sought to examine the levels of expression (qualitatively and quantitat... AIM: Tumor endothelial markers (TEMs) are a newly discovered family of endothelial markers associated with tumor specificangiogenesis. This study sought to examine the levels of expression (qualitatively and quantitatively)for TEMs in human colon cancer.METHODS: Human colorectal cancer tissues (n = 48)and normal background tissues (n = 31) were obtained after surgery. RNA was extracted from frozen sections for gene amplification. The expression of TEMs (TEM-1to TEM-8) was assessed using RT-PCR and their transcript levels were determined using real-time-quantitative PCR(Q-RT-PCR).RESULTS: TEM-1 (P = 0.01), TEM-7 (P = 0.04), TEM-7R(P= 0.03), TEM-8 (P = 0.001) significantly raised in colon cancer tissues compared with the levels detected in normal background tissues. The expressions of TEM-2 and TEM-6were found to be not significantly different between tumor tissues and normal tissues (P>0.05). Patients who had cancer penetrating into and through the muscularis propria of the bowel wall and developed nodal involvement(Dukes C) exhibited significantly higher levels of TEM -8compared to patients who were node negative (P<0.05).TEM-7 and TEM-7R showed high level of transcripts in Dukes C, but they were not statistically significant.CONCLUSION: The level of the expression of TEM-1,TEM-7, TEM-7R and TEM-8 (but not TEM-2 and TEM-6)were associated with both nodal involvement and disease progression, and may therefore, have a prognostic value in colorectal cancer. 展开更多
关键词 Colon cancer ANGIOGENESIS Tumor endothelial markers Dukes stages
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革兰阴性杆菌超广谱β-内酰胺酶基因型研究 被引量:3
14
作者 侯晓娜 杨婧 +3 位作者 傅炜昕 何丽 高洪福 王月 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1180-1182,共3页
目的 分析革兰阴性杆菌中超广谱 β-内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。 方法 采用双纸片协同法筛选ES BLs菌 ,用纸片扩散法检测其药敏结果 ,分别用TEM、SHV和CTX -M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 大部分产ESBLs菌对头... 目的 分析革兰阴性杆菌中超广谱 β-内酰胺酶 (ESBLs)的基因型。 方法 采用双纸片协同法筛选ES BLs菌 ,用纸片扩散法检测其药敏结果 ,分别用TEM、SHV和CTX -M通用引物进行PCR扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 大部分产ESBLs菌对头孢噻肟耐药 ,而对头孢他啶敏感 ,少部分对两者都耐药 ,这些菌株前者以CTX-M引物的PCR扩增结果 ,主要为CTX -M - 3,还检出CTX -M - 12、CTX -M - 14 ;后者以SHV引物的PCR扩增结果 ,主要为SHV - 12 ,还检出SHV - 4 0、SHV - 33和SHV - 5型。TEM引物扩增结果全部为TEM - 1型广谱酶。结论 革兰阴性杆菌中ESBLs主要是CTX -M - 3型 ,6 2 9%的菌同时存在 2~ 3种酶。 展开更多
关键词 革兰阴性杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 CTX-M-3 SHV-12 tem-1
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珠海地区淋球菌耐药性监测及耐药质粒分型 被引量:4
15
作者 沈守星 刘小凤 +2 位作者 魏秋姣 吴兴中 覃晓琳 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2017年第5期301-305,共5页
目的 监测珠海地区2015-2016年淋球菌临床分离株对常用抗菌药物的敏感性,了解质粒介导的TEM-1和tetM基因分子流行情况.方法 用琼脂稀释法测定淋球菌对7种抗菌药物(青霉素、四环素、环丙沙星、头孢克肟、大观霉素和阿奇霉素)的最低抑... 目的 监测珠海地区2015-2016年淋球菌临床分离株对常用抗菌药物的敏感性,了解质粒介导的TEM-1和tetM基因分子流行情况.方法 用琼脂稀释法测定淋球菌对7种抗菌药物(青霉素、四环素、环丙沙星、头孢克肟、大观霉素和阿奇霉素)的最低抑菌浓度(MIC).采用纸片酸度法测定产青霉素酶淋球菌(PPNG),PCR方法分别扩增TIEM-1和tetM耐药质粒基因片段,电泳分析其耐药质粒型别.结果 93株淋球菌中检出PPNG共26株(27.96%)、耐四环素淋球菌(TRNG)24株(25.81%).93株淋球菌对青霉素、四环素、环丙沙星、阿奇霉素的耐药率分别40.86%、75.27%、100.00%、7.53%,青霉素低敏率为51.61%;未发现对大观霉素、头孢曲松、头孢克肟耐药菌株,但对头孢克肟的低敏率达到30.11%.耐药质粒分型结果PPNG亚洲型15株(57.69%),非洲型11株(42.31%),未检出多伦多/里约型;TRNG荷兰型23株(95.83%),美国型1株(4.17%).结论 珠海地区淋球菌对四环素、环丙沙星、青霉素耐药率较高,但对头孢曲松和大观霉素敏感率高,可作为治疗淋病的首选药物;PPNG以亚洲型和非洲型为主,TRNG以荷兰型为主,偶见美国型. 展开更多
关键词 奈瑟球菌 淋病 耐药性 tem-1 tetM
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利用交叉组装噬菌体示踪水环境中人源粪便来源的耐药细菌
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作者 段连瑞 段宇婧 +3 位作者 李镇镇 苗泽丰 佘慧 杨涛 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期100-111,共12页
人类粪便中的耐药细菌(antibiotic resistant bacteria,ARB)及其携带的耐药基因(antibiotic resistance genes,ARGs)可以通过城市污水处理系统排放进入当地水环境,因此,快速准确地探明水环境中粪便污染及ARB情况对于保护生态系统和居民... 人类粪便中的耐药细菌(antibiotic resistant bacteria,ARB)及其携带的耐药基因(antibiotic resistance genes,ARGs)可以通过城市污水处理系统排放进入当地水环境,因此,快速准确地探明水环境中粪便污染及ARB情况对于保护生态系统和居民健康具有重要意义。本研究借助噬菌体crAssphage作为新型人类粪便污染特异性指示标记,采集太原市健康人群粪便、晋阳湖、汾河水库、自来水和污水处理厂的样品,首先采用实时荧光定量PCR技术检测样品中人类粪便污染指示标记crAssphage、细菌核糖体16S rRNA基因与耐药基因bla TEM-1的存在情况;其次针对各类样品进行细菌分离培养与鉴定,完成样品中bla TEM-1耐药菌株及多重耐药细菌的筛选;最后通过构建系统发育树分析菌株的进化关系,探究不同环境介质中细菌之间的相互影响。结果显示crAssphage在晋阳湖、汾河水库和污水处理厂样品中被检出,证明太原市区水环境存在人类粪便污染。本研究共分离鉴定出254株细菌,氨苄青霉素耐药细菌占比最高(74.41%),环丙沙星耐药细菌占比最低(1.97%);耐药基因bla TEM-1在各类样品的菌株中都有检出(22.83%),多重耐药细菌共有79株(31.10%)。进化关系分析表明人体肠道与水环境中的耐药细菌具有亲缘关系。上述结果表明太原市水环境受到人类粪便污染的影响,并且可能促进了ARGs和ARB的传播扩散,对人体健康产生威胁。该研究为评估太原市水环境粪便污染情况及ARB分布提供基础数据,为水环境监测保护给出科学依据。 展开更多
关键词 人类粪便污染 bla tem-1 crAssphage 多重耐药菌 系统发育树
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TEM型β内酰胺酶的特征及其研究进展 被引量:4
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作者 王瑶 徐英春 陈民钧 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期224-226,共3页
TEM型B内酰胺酶是目前世界上最为流行且种类最多的质粒编码丝氨酸蛋白酶,其中TEM-1是革兰阴性菌中最常见的B内酰胺酶,约90%对青霉素耐药的大肠埃希菌都产生TEM-1。除肠杆菌科菌外,近年来TEM-10在葡萄牙的克吕沃尔菌属、TEM-21在美... TEM型B内酰胺酶是目前世界上最为流行且种类最多的质粒编码丝氨酸蛋白酶,其中TEM-1是革兰阴性菌中最常见的B内酰胺酶,约90%对青霉素耐药的大肠埃希菌都产生TEM-1。除肠杆菌科菌外,近年来TEM-10在葡萄牙的克吕沃尔菌属、TEM-21在美国的绿脓假单胞菌、TEM-52在韩国的宋内志贺菌HJ、TEM-52、TEM-63、TEM-131在韩国和南非的非伤寒沙门菌中也有报道。截止2006年1月30日,Bush和Jacoby在Lahey网站(http://www.lahy.org/studies/webt.htm)上已公布了150种TEM型β内酰胺酶,其中2000-2006年就发现了70多种。 展开更多
关键词 Β内酰胺酶 tem tem-1 丝氨酸蛋白酶 绿脓假单胞菌 非伤寒沙门菌 革兰阴性菌 大肠埃希菌
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检出产VIM-2及OXA-56和TEM-1的弗氏柠檬酸杆菌 被引量:3
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作者 宁明哲 沈翰 +3 位作者 周万青 张之烽 张葵 童明庆 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期82-84,共3页
碳青霉烯类抗生素是临床治疗肠杆菌科细菌尤其是产超广谱β内酰胺酶(extended spectrum beta lactamase,ESBL)及AmpC酶等多重耐药菌株引起感染的最有效的抗菌药物之一。近年来,随着碳青霉烯酶的出现,给肠杆菌科细菌的治疗带来一定... 碳青霉烯类抗生素是临床治疗肠杆菌科细菌尤其是产超广谱β内酰胺酶(extended spectrum beta lactamase,ESBL)及AmpC酶等多重耐药菌株引起感染的最有效的抗菌药物之一。近年来,随着碳青霉烯酶的出现,给肠杆菌科细菌的治疗带来一定困难。 展开更多
关键词 弗氏柠檬酸杆菌 tem-1 VIM-2 产超广谱Β内酰胺酶 碳青霉烯类抗生素 肠杆菌科细菌 多重耐药菌株 临床治疗
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广州南沙湿地公园候鸟源肠杆菌科耐药性及产超广谱β-内酰胺酶基因监测调查 被引量:2
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作者 林贤广 李铁钢 +1 位作者 夏云 刘艳慧 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期679-689,共11页
[背景]耐药基因可通过水平转移在环境、动物和人体间发生转移,而远距离传播则主要通过候鸟的迁徙。耐药基因可通过水平转移和候鸟迁徙跨地区传播至禽畜和人类,引起公共卫生问题。[目的]分离广州南沙湿地公园候鸟粪便中肠杆菌科细菌,并... [背景]耐药基因可通过水平转移在环境、动物和人体间发生转移,而远距离传播则主要通过候鸟的迁徙。耐药基因可通过水平转移和候鸟迁徙跨地区传播至禽畜和人类,引起公共卫生问题。[目的]分离广州南沙湿地公园候鸟粪便中肠杆菌科细菌,并鉴定菌种类别,研究其对常见抗生素的耐药性及携带的主要超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum beta-lactamase,ESBL)耐药基因,评估广州南沙湿地公园候鸟储存、携带耐药菌和耐药基因的风险。[方法]2019年1月-12月,采集广州南沙湿地公园候鸟粪便样本393份,并进行细菌分离、培养和鉴定。使用药敏检测板对细菌进行耐药性检测。PCR扩增待测细菌的blaCTX-M、blaTEM和blaSHV耐药基因,测序并进行BLAST比对。[结果]检出肠杆菌科细菌59株(检出率为15.01%),主要优势菌为成团泛菌(36株,占肠杆菌科细菌61.02%)。肠杆菌科细菌的耐药率达89.83%,对头孢唑啉、磺胺异噁唑和氨苄西林耐药率分别为81.36%、52.54%和44.07%,多重耐药率达55.93%。另外检出7株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌。测序结果显示,所有粪便样本中检出23株细菌携带blaTEM-1耐药基因(5.85%)。[结论]广州南沙湿地公园候鸟粪便中肠杆菌科细菌种类复杂,多重耐药率较高,而且有储存耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的风险,具有重要的公共卫生意义。 展开更多
关键词 候鸟 肠杆菌科 耐药性 耐药基因 tem-1
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TEM-1型β内酰胺酶的原核表达纯化及活性验证 被引量:1
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作者 李静 徐建余 +5 位作者 宁年智 刘传杰 黄洁 刘雪超 李涛 王慧 《生物技术通讯》 CAS 2017年第3期319-323,共5页
目的:产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一,该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素,其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构建、... 目的:产β-内酰胺酶是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等对β内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一,该酶能水解青霉素、头孢菌素、碳青酶烯类等多种抗生素,其中TEM型是发现最早且种类最多的β内酰胺酶。探讨TEM-1型β内酰胺酶原核表达载体的构建、酶的纯化及活性验证。方法:利用PCR技术,以大肠杆菌全基因组为模板钓取TEM-1基因,构建p ET22b(+)-TEM-1表达质粒,经测序鉴定后,转入大肠杆菌Transetta(DE3),IPTG诱导表达、亲和纯化,并通过抗生素水解实验验证其酶活性。结果:构建了可溶性表达TEM-1的工程菌,通过亲和纯化最终获得纯度达90%以上的TEM-1型β内酰胺酶,该酶可水解氨苄西林。结论:获得了对氨苄西林具有水解活性的TEM-1型β内酰胺酶,并对其进行了酶动力学参数检测,验证其抗生素水解特性,有利于对临床抗生素的合理应用做出指导。 展开更多
关键词 tem-1 Β内酰胺酶 表达 纯化 酶动力学
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