淫羊藿苷衍生物的制备及其雌激素样作用研究 被引量：42

1

作者 叶海涌 刘健 楼宜嘉 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2005年第2期131-136,共6页

目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)及其衍生物淫羊藿素(icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(desmethyli-caritin,DICT)的雌激素样作用及其相关的构效关系。方法ICA经纤维素酶水解成ICT,进一步在BBr3和CH2Cl2的体系中反应生成DICT;用不同浓度的化... 目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)及其衍生物淫羊藿素(icaritin,ICT)和去甲淫羊藿素(desmethyli-caritin,DICT)的雌激素样作用及其相关的构效关系。方法ICA经纤维素酶水解成ICT,进一步在BBr3和CH2Cl2的体系中反应生成DICT;用不同浓度的化合物与雌激素敏感性人乳腺癌细胞株MCF-7和T47D分别共培养6d和9d,MTT法检测其对细胞的促增殖率,以此评价化合物雌激素样作用的强弱。结果ICT、DICT促细胞增殖作用显著,10-6mol/L浓度时促MCF-7细胞增殖作用分别是雌二醇(10-9mol/L)的90.0%和94.0%(P<0.01);促T47D细胞增殖作用分别是雌二醇的65.6%,50.0%(P<0.01)。ICA未呈现促MCF-7细胞和T47D细胞增殖作用。ICT、DICT的促细胞增殖作用被10-7mol/L雌激素受体完全拮抗剂ICI182、780完全抑制。结论ICT和DICT具有促MCF-7细胞和T47D细胞增殖的雌激素样作用,而ICA未体现该作用。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 淫羊藿素 去甲淫羊藿素 MCF-7细胞 T47D细胞 植物雌激素

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芒柄花素的植物雌激素作用研究 被引量：27

2

作者 于杰 赵丕文 +3 位作者 牛建昭 王继峰 曹远奎 郝庆秀 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期3060-3064,共5页

目的：探讨芒柄花素的雌激素样作用及其可能机制。方法：选取当归、黄芪、红三叶草中含有的黄酮类物质之一——芒柄花素,利用ER阳性T47D细胞,检测其对细胞增殖速率、分裂增殖指数以及ER亚型表达的影响,评价芒柄花素的植物雌激素活性。... 目的：探讨芒柄花素的雌激素样作用及其可能机制。方法：选取当归、黄芪、红三叶草中含有的黄酮类物质之一——芒柄花素,利用ER阳性T47D细胞,检测其对细胞增殖速率、分裂增殖指数以及ER亚型表达的影响,评价芒柄花素的植物雌激素活性。结果：MTT增殖试验结果显示,1×10-71×10-6mol.L-1芒柄花素不能促进人乳腺癌细胞T47D的体外增殖;在ICI182,780抑制试验中,芒柄花素可能能够与ICI182,780协同作用抑制T47D细胞体外增殖;流式细胞术测定细胞周期结果显示,1×10-71×10-6mol.L-1芒柄花素对T47D细胞的分裂增殖指数没有影响;芒柄花素有增强T47D细胞ERα表达的作用（P〈0.05）。结论：芒柄花素能够在体外条件下增强T47D细胞ERα表达,具有植物雌激素样作用,但该物质不能促进T47D细胞的体外增殖。 展开更多

关键词 芒柄花素 植物雌激素 雌激素样作用 T47D细胞

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山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖和迁移的影响 被引量：16

3

作者 郭淳 龚永杰 +3 位作者 孙放 王璐 牛晓雨 胡秀华 《中医学报》 CAS 2017年第10期1832-1835,共4页

目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈... 目的:探讨山慈菇水煎剂对人乳腺癌T-47D细胞增殖、迁移的影响。方法:利用细胞培养技术对人乳腺癌T-47D细胞进行培养;利用MTT法比较不同浓度山慈菇水煎剂组和对照组对T-47D细胞生长增殖情况的影响;利用细胞划痕实验,检测不同浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞迁移的影响。结果:不同浓度的山慈菇水煎剂(50 g·L^(-1)、100 g·L^(-1)、200 g·L^(-1),400 g·L^(-1)、600 g·L^(-1)、800 g·L^(-1))对T-47D细胞的生长抑制率分别为-0.60%、-17.10%、-0.60%、65.08%、81.15%、82.80%,400~800 g·L^(-1)质量浓度山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D细胞的增殖有明显抑制作用;划痕实验结果显示200 g·L^(-1)、300g·L^(-1)山慈菇水煎剂作用24h和48h后,与对照组比较,乳腺癌T-47D细胞的划痕距离较大,划痕未见明显愈合,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定浓度的山慈菇水煎剂对T-47D细胞生长增殖具有抑制作用,低浓度(<200 g·L^(-1))的山慈菇水煎剂对T-47D细胞的生长增殖无影响,即无细胞毒性;高浓度(>200 g·L^(-1))的山慈菇水煎剂对乳腺癌T-47D的增殖有明显的抑制作用;一定浓度的山慈菇水煎剂可以抑制T-47D细胞的迁移运动。 展开更多

关键词 乳腺癌 肿瘤 T-47D细胞 山慈菇水煎剂 细胞增殖 细胞迁移

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四物汤治疗更年期综合征的作用机制研究 被引量：16

4

作者 陈悦 冯放 +3 位作者 裴育莹 俞舒丹 梁叶莺 赵丕文 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第8期799-801,804,共4页

目的观察四物汤对更年期模型SD大鼠的作用并探讨发挥作用的可能靶点和机制。方法将正常SD雌性大鼠40只按体质量均衡和随机的原则分为正常组、模型组、四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组。除正常组外,其余组均切除两侧卵... 目的观察四物汤对更年期模型SD大鼠的作用并探讨发挥作用的可能靶点和机制。方法将正常SD雌性大鼠40只按体质量均衡和随机的原则分为正常组、模型组、四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组。除正常组外,其余组均切除两侧卵巢造模。手术2周后,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组分别给予3,6,9 g/(kg·d)四物汤灌胃,均1次/d,持续6 d。第7天腹主动脉取血并分离血清,分离子宫并称质量,免疫组化法测定子宫组织雌激素受体ERα表达量;蛋白质免疫印记技术检测药物血清对T47D细胞雌激素受体ERα表达的影响。结果正常组大鼠的子宫系数与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),四物汤低剂量组、四物汤中剂量组、四物汤高剂量组的子宫系数与模型组比较差异均有统计学意义,且随着四物汤方剂浓度的升高,子宫系数有增大的趋势;大鼠子宫组织ERα表达模型组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),四物汤中剂量组和高剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01);四物汤低、中剂量组的含药血清能够明显提高T47D细胞ERα的表达水平(P均<0.01)。结论四物汤对更年期综合征有很好的治疗作用,并可提高靶细胞ERα的表达水平。 展开更多

关键词 四物汤 更年期综合征 子宫系数 T47D细胞 ERΑ

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丹参酮ⅡA抗乳腺癌T47D细胞增殖的GPER途径研究 被引量：13

5

作者 赵丕文 臧金凤 +2 位作者 陶仕英 陈梦 牛建昭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1458-1462,共5页

目的利用经典雌激素受体（estrogenic receptor,ER）和G蛋白偶联雌激素受体（G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER）阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA（TanshinoneIIA）对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPE... 目的利用经典雌激素受体（estrogenic receptor,ER）和G蛋白偶联雌激素受体（G protein-coupled estrogen recep-tor,GPER）阳性乳腺癌T47D细胞,探索丹参酮IIA（TanshinoneIIA）对细胞增殖活性的影响及其GPER介导与调节功能.方法以GPER激动剂G1和GPER拮抗剂G15为工具药干预,并应用GPERSiRNA转染构建GPER基因沉默的T47D细胞,利用MTT细胞增殖实验观察丹参酮IIA对T47D细胞增殖速率的影响及GPER的介导作用.利用Westernblot方法检测丹参酮IIA对T47D细胞GPER表达情况的影响.结果1×10^-5 mol·L^-1 ～1×10^-7 mol·L^-1丹参酮IIA能够明显抑制T47D细胞增殖,且该抑制作用可被G1拮抗,可被G15增强.丹参酮IIA作用于GPER基因沉默的T47D细胞,该细胞表现出更为明显的生长抑制效应.West-ernblot测定结果表明,1×10^-5 mol·L^-1和1×10^-6 mol·L^-1丹参酮IIA可使T47D细胞GPER蛋白表达明显降低.结论丹参酮IIA具有抑制乳腺癌T47D细胞增殖的作用,该抑制作用可经GPER途径介导;且丹参酮IIA具有对靶细胞GPER表达的调节功能. 展开更多

关键词 丹参酮IIA 乳腺癌 T47D细胞 细胞增殖 G蛋白偶联雌激素受体 雌激素受体 基因沉默

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人参皂苷-Rh_2对人乳腺癌T47D细胞的生长抑制作用及对Caspase-3表达的影响 被引量：8

6

作者 朱君荣 孙建国 +4 位作者 谢海棠 娄晟 陶宜富 肖大伟 王广基 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第6期630-634,共5页

目的:研究人参皂苷-Rh2(GS-Rh2)对雌激素依赖性人乳腺癌T47D细胞增殖和凋亡的影响,并对可能引起凋亡的机制做一初步探索。方法:采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的T47D细胞生长的抑制作用;用光学显微镜观察T47D细胞用药前后的形态学变... 目的:研究人参皂苷-Rh2(GS-Rh2)对雌激素依赖性人乳腺癌T47D细胞增殖和凋亡的影响,并对可能引起凋亡的机制做一初步探索。方法:采用MTT比色法观察GS-Rh2对体外培养的T47D细胞生长的抑制作用;用光学显微镜观察T47D细胞用药前后的形态学变化;应用流式细胞仪检测凋亡细胞和细胞周期变化以及Caspase-3表达的变化。结果:MTT比色法测定结果显示,T47D细胞经GS-Rh2作用后生长受抑制,呈剂量依赖性和时间依赖性,半数抑制浓度(IC50)为21.6μg/mL;光学显微镜显示T47D细胞经GS-Rh2作用后呈较明显的凋亡形态学改变;流式细胞仪检测证实,GS-Rh2能在一定浓度范围内诱导T47D细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G1期,并使Caspase-3表达增加。结论:GS-Rh2能抑制体外培养的T47D细胞增殖并诱导其凋亡。Caspase-3表达增加可能是GS-Rh2诱导T47D细胞凋亡的机制之一。 展开更多

关键词 人参皂苷-Rh2 T47D细胞 生长抑制 细胞 凋亡 CASPASE-3

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鼠尾草酚抗乳腺癌细胞增殖活性及其雌激素受体亚型介导和调节机制的研究 被引量：10

7

作者 赵丕文 David Yue-Wei LEE +4 位作者 Zhongze Ma 孙艳玲 陶仕英 臧金凤 牛建昭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期3344-3348,共5页

既往研究已经表明,鼠尾草酚(carnoso1)具有一定的抗乳腺癌效应,但其ER亚型特异性调节和介导机制与该物质抑制细胞增殖效应的相关性尚不清楚。该研究利用雌激素受体(ER)阳性乳腺癌T47D细胞观察鼠尾草酚对细胞增殖活性的影响及其雌激素受... 既往研究已经表明,鼠尾草酚(carnoso1)具有一定的抗乳腺癌效应,但其ER亚型特异性调节和介导机制与该物质抑制细胞增殖效应的相关性尚不清楚。该研究利用雌激素受体(ER)阳性乳腺癌T47D细胞观察鼠尾草酚对细胞增殖活性的影响及其雌激素受体α,卢亚型特异性介导和调节机制。以ERα和ERβ特异性拮抗剂MPP,PHTPP为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察鼠尾草酚对T47D细胞增殖的影响;检测T47D细胞增殖周期的变化。利用Western blot方法检测鼠尾草酚对T47D细胞ERα和ERβ表达情况的影响。研究发现,1×10^(-5)~1×10^(-7)mol·L^(-1)鼠尾草酚能够显著抑制T47D细胞增殖,该抑制作用可被ERα拮抗剂MPP增强、被ERβ拮抗剂PHTPP减弱;1×10^(-1),1×10^(-6)mol·L^(-1)鼠尾草酚可使T47D细胞增殖指数显著下降。Western blot检测结果显示1×10^(-5),1×10^(-6)mol·L^(-1)鼠尾草酚可使T47D细胞ERα和ERβ蛋白表达显著增加,并可明显提高ERα/ERβ。结果表明鼠尾草酚具有抑制ER阳性乳腺癌细胞增殖的作用,其效应是通过靶细胞雌激素受体,特别是ERβ途径实现的;同时,鼠尾草酚对靶细胞雌激素受体ERα和ERβ亚型的表达及其比例具有调节功能。 展开更多

关键词 鼠尾草酚 乳腺癌 T47D细胞 细胞增殖 细胞周期 雌激素受体

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淫羊藿素和脱水淫羊藿素对人类乳腺癌细胞T47D增殖和细胞周期的影响 被引量：9

8

作者 王大伟 邓秀兰 +2 位作者 牛建昭 王继峰 孙丽萍 《北京中医药》 2009年第8期637-640,共4页

目的探讨淫羊藿素和脱水淫羊藿素对人类乳腺癌细胞株T47D增殖和细胞周期的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定淫羊藿素和脱水淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D的细胞增殖作用,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780和雌激素受体ERβ激... 目的探讨淫羊藿素和脱水淫羊藿素对人类乳腺癌细胞株T47D增殖和细胞周期的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定淫羊藿素和脱水淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D的细胞增殖作用,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780和雌激素受体ERβ激动剂DPN为工具药来评价淫羊藿素和脱水淫羊藿素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系,流式细胞术对T47D细胞的增殖情况进行分析。结果淫羊藿素和脱水淫羊藿素在10-8～10-6范围内能促进T47D细胞的增殖,并将T47D细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数,且淫羊藿素和脱水淫羊藿素促进T47D细胞增殖作用被雌激素受体拮抗剂所拮抗。结论淫羊藿素和脱水淫羊藿素具有雌激素活性,此作用可能是通过雌激素受体(ER)介导的。 展开更多

关键词 乳腺癌细胞株T47D 脱水淫羊藿素 细胞增殖作用 细胞周期 雌激素受体拮抗剂 人类 雌激素受体ER T47D细胞

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刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响 被引量：8

9

作者 司玲玲 马俊 +3 位作者 任欢欢 任博雪 李德芳 郑秋生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期260-267,共8页

目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67... 目的研究刺槐素对乳腺癌T47D细胞增殖的影响,探究刺槐素雌激素样作用的主要介导受体。方法磺酰罗丹明B(SRB)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期的变化,q PCR检测雌激素受体-α(ERα)、雌激素受体-β(ERβ)、细胞增殖抗原标记物(Ki67)mRNA表达,Western blot法检测ERα、ERβ蛋白表达。结果刺槐素浓度为0.001~10μmol·L^(-1),能促进T47D细胞增殖,使S和G_2/M期的细胞比例明显增加,增殖指数升高,同时增加Ki67 mRNA的表达,此作用可被雌激素受体拮抗剂ICI 182.780所拮抗。刺槐素及17β-雌二醇(E2)均可上调ERα和ERβ的表达,刺槐素联合ERα受体拮抗剂(MPP)可逆转刺槐素的促增殖作用,使S和G_2/M期的细胞比例明显降低,减少Ki67mRNA的表达;但刺槐素联合ERβ受体拮抗剂(PHTPP)处理虽可抑制细胞增殖效应,使S和G_2/M期的细胞比例降低,减少Ki67 mRNA的表达,但作用不明显。结论刺槐素具有雌激素样作用,在0.001~10μmol·L^(-1)浓度范围内,可通过调节ERα受体表达来促进T47D细胞的增殖。 展开更多

关键词 刺槐素 雌激素 T47D细胞 雌激素Α受体 雌激素Β受体 雌激素样作用 细胞增殖

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黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳腺癌T47D细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响 被引量：7

10

作者 陈雪莲 姜浩 +2 位作者 曹建国 尹婵 肖集文 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第3期432-435,共4页

目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人乳腺癌(T47D)细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响。方法:体外培养T47D细胞,溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成的抑制作用;平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖生长能力的抑制作用;人乳腺... 目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(EVn-50)对人乳腺癌(T47D)细胞及其裸鼠移植瘤生长抑制的影响。方法:体外培养T47D细胞,溴化标记尿嘧啶(BrdU)掺入法测定细胞核酸合成的抑制作用;平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖生长能力的抑制作用;人乳腺癌T47D裸鼠移植瘤模型治疗实验,观察EVn-50在体内对T47D细胞生长抑制作用,HE染色观察乳腺癌组织和细胞形态改变。结果:EVn-50抑制体外培养T47D细胞核酸合成和生长,呈剂量依赖性;EVn-50对裸鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用,呈剂量和时间依赖性;EVn-5080mg/kg实验组对移植瘤的瘤重抑制率为51.4%(P<0.001);镜下观察EVn-5080mg/kg实验组肿瘤组织坏死组织较多,细胞异型性较少。结论:黄荆子乙酸乙酯提取物对人乳腺癌有生长抑制作用。 展开更多

关键词 乳腺癌 T47D细胞 黄荆子 移植瘤

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帕博西尼联合他莫昔芬对乳腺癌细胞T-47D的作用研究 被引量：2

11

作者 孙俊 廖林 贾毅敏 《重庆医学》 CAS 2023年第2期172-176,共5页

目的 探讨帕博西尼联合他莫昔芬对人乳腺癌细胞的影响及其相关作用机制。方法 将乳腺癌细胞T-47D随机分为对照组、帕博西尼组、他莫昔芬组、联合用药组。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,Western blot检测细... 目的 探讨帕博西尼联合他莫昔芬对人乳腺癌细胞的影响及其相关作用机制。方法 将乳腺癌细胞T-47D随机分为对照组、帕博西尼组、他莫昔芬组、联合用药组。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,Western blot检测细胞凋亡和周期相关蛋白表达,ELISA测定免疫抑制细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1)、白细胞介素10(IL-10)、程序性死亡配体1(PD-L1)水平。结果 联合用药组细胞抑制率明显高于单药组和对照组,具有协同作用。与对照组和单药组比较,联合用药组细胞凋亡更加明显,阻滞细胞于G1/S期,Bcl-2、cyclin D1、p-Rb蛋白表达降低及Bax、cleaved-caspase3蛋白表达升高,TGF-β1、IL-10、PD-L1水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 帕博西尼联合他莫昔芬可能通过阻滞T-47D细胞周期于G1/S期、促进细胞凋亡、下调免疫抑制细胞因子发挥协同抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 帕博西尼 他莫昔芬 T-47D细胞 乳腺癌

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双酚A等化学物对耗尽内源性雌激素诱导T47D细胞凋亡的影响 被引量：6

12

作者 余增丽 张立实 吴德生 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期395-397,F004,共4页

目的　在乳腺癌细胞株T4 7D细胞内采用雌激素耗尽的方法诱导其发生凋亡 ,然后观察对 壬基酚 (n 4 noniphenol,NP)、双酚A (bisphenolA ,BisA )和邻苯二甲酸酯二丁酯(dibutylphthalate ,DBP)对这种凋亡的影响 ,探讨环境雌激素是否能够... 目的　在乳腺癌细胞株T4 7D细胞内采用雌激素耗尽的方法诱导其发生凋亡 ,然后观察对 壬基酚 (n 4 noniphenol,NP)、双酚A (bisphenolA ,BisA )和邻苯二甲酸酯二丁酯(dibutylphthalate ,DBP)对这种凋亡的影响 ,探讨环境雌激素是否能够抑制雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡作用。方法　T4 7D细胞在达克尔培养液 (DMEM ,含 10 %小牛血清 )中进行常规传代培养 ,于实验前 4d将细胞用磷酸盐缓冲盐水洗涤后改为在无酚红DMEM培养 ,目的是耗尽细胞内源性雌激素。实验设溶剂对照、雌激素对照 (E2 )、抗雌激素他莫昔芬 (TAM)对照及 3个试验组 ,采用流式细胞术 ,琼脂糖凝胶电泳和HE染色镜检观察环境雌激素对雌激素耗尽所诱导的细胞凋亡的影响。结果　流式细胞仪分析结果表明 ,雌激素耗尽能够诱导T4 7D细胞发生凋亡 ,凋亡率为 34 5 % ,此时往培养液中分别加入 32× 10 -7mol/LNP和 32× 10 -7mol/LBisA ,对细胞处理 72h ,可显著抑制细胞凋亡作用 (凋亡率分别变为 2 0 1%和 16 5 % ) ;琼脂糖凝胶电泳显示 ,细胞凋亡特有的DNA ladder消逝 ;HE染色镜检表明 ,细胞出现活跃核分裂相。加入 5× 10 -7mol/LTAM可加重细胞的凋亡现象 (细胞凋亡率为 5 5 6 % )。结论　NP和BisA均可抑制雌激素耗尽所诱导的T4 7D细胞的凋亡作用 ; 展开更多

关键词 双酚A 化学物 内源性雌激素 T47D细胞 细胞凋亡 邻苯二甲酸酯二丁酯 乳腺癌

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FGF4在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用 被引量：4

13

作者 曲杰 魏依兰 +1 位作者 吕喜英 李青山 《山东医药》 CAS 2018年第27期30-34,共5页

目的观察成纤维生长因4(FGF4)在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用。方法取乳腺癌组织及癌旁正常组织各40例份,采用RT-PCR法检测FGF4 mRNA。培养正常乳腺细胞株MCF-10A、低转移乳腺癌细胞株T47D、高转移... 目的观察成纤维生长因4(FGF4)在乳腺癌组织中的表达变化及对乳腺癌细胞株增殖、迁移能力的调控作用。方法取乳腺癌组织及癌旁正常组织各40例份,采用RT-PCR法检测FGF4 mRNA。培养正常乳腺细胞株MCF-10A、低转移乳腺癌细胞株T47D、高转移乳腺癌细胞株MDA-MB-231,采用RT-PCR法检测FGF4 mRNA,Western blotting法检测FGF4蛋白。收集T47D,利用p CDNA3.1-FGF4构建过表达FGF4的T47D稳定细胞株T47DFGF4-oe,以只转染p CDNA3.1的细胞株T47D-NC作为作为阴性对照组;收集MDA-MB-231,利用RNA干扰技术敲除FGF4构建稳定表达FGF4-shRNA的细胞株MDA-MB-231-FGF4-si,以MDA-MB-231-NC作为阴性对照组;Western blotting法检测FGF4蛋白,MTT实验及划痕实验检测细胞增殖、迁移能力。结果乳腺癌组织中FGF4 mRNA表达高于癌旁组织(P<0.05)。CF-10A、T47D细胞FGF4 mRNA和蛋白灰度值均低于MDA-MB-231细胞,T47D细胞FGF4蛋白灰度值低于MDA-MB-231细胞(P均<0.05)。T47D-FGF4-oe细胞FGF4蛋白灰度值、增殖速度高于T47D-NC细胞,划痕距离小于T47D-NC细胞(P均<0.05)。MDA-MB-231-FGF4-si细胞FGF4蛋白灰度值、增殖速度低于MDA-MB-231-NC细胞,划痕距离大于MDA-MB-231-NC细胞(P均<0.05)。结论 FGF4在乳腺癌中显著高表达,并有促进乳腺癌细胞株增殖及转移的作用。 展开更多

关键词 成纤维生长因子4 乳腺癌 T47D细胞 MDA-MB-231细胞 细胞增殖能力 细胞迁移能力

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瘦素诱导乳腺癌细胞的凋亡抵抗及其分子机制 被引量：5

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作者 赵天锁 姜海平 +2 位作者 王秀超 任贺 郝继辉 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期651-654,共4页

目的观察瘦素对乳腺癌细胞凋亡的影响，并探讨其分子机制。方法采用TransAM酶联免疫吸附法（ELISA）检测瘦素对乳腺癌细胞T47D凋亡的影响，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞毒性，并测定T47D细胞caspase-9的活性。采用实时荧光定量... 目的观察瘦素对乳腺癌细胞凋亡的影响，并探讨其分子机制。方法采用TransAM酶联免疫吸附法（ELISA）检测瘦素对乳腺癌细胞T47D凋亡的影响，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞毒性，并测定T47D细胞caspase-9的活性。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western blot法测定瘦素对T47D细胞survivin mRNA和蛋白表达水平的影响。采用RNA干扰技术沉默信号转导和转录激活因子3（STAT3）基因，并采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot法测定瘦素对沉默STAT3基因后T47D细胞survivin mRNA和蛋白表达水平的影响。结果瘦素可以促进人乳腺癌细胞T47D的增殖，增殖抑制率为63．6％；减少多西他赛诱导的细胞凋亡，达31．9％。不同浓度瘦素均可促进T47D细胞survivin mRNA的表达，其中以10nmol／L时作用最明显。10nmol／L瘦素作用60min后，T47D细胞中survivin mRNA的表达量是瘦素作用前的4．6倍；作用2h后，T47D细胞中survivin蛋白的表达增强。将STA33小干扰RNA（siRNA）转入T47D细胞30min后，survivin mRNA表达的变化倍率为0．55±0．15。经瘦素处理后，STAT3 siRNA质粒转染组和空质粒对照组survivin mRNA表达的变化倍率分别为0．56±0．18和1．61±0．22。将STArl3siRNA转入Tg7D细胞后，survivin蛋白表达下降。经瘦素处理后，转染空质粒的细胞survivin蛋白的表达增加，而转入STAT3 siRNA的细胞survivin蛋白无明显变化。结论在乳腺癌T47D细胞中，瘦素／STAT3信号通路是上调survivin表达的有效途径。 展开更多

关键词 瘦素 T47D细胞 凋亡 SURVIVIN 信号转导和转录激活因子3

原文传递

干扰B7-H4表达通过下调E2F家族相关转录因子抑制乳腺癌细胞的增殖 被引量：3

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作者 陈昊川 郜赵伟 +3 位作者 龙敏 刘冲 董轲 张惠中 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期195-201,共7页

目的:探讨干扰B7-H4表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、周期以及相关下游分子表达的影响。方法:利用脂质体转染技术分别将特异性靶向B7-H4的siRNA(siB7-H4)及其阴性对照(siNC)转染至对数生长期的乳腺癌T47D和MCF-7细胞,分别命名为T47D-siB7-H... 目的:探讨干扰B7-H4表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡、周期以及相关下游分子表达的影响。方法:利用脂质体转染技术分别将特异性靶向B7-H4的siRNA(siB7-H4)及其阴性对照(siNC)转染至对数生长期的乳腺癌T47D和MCF-7细胞,分别命名为T47D-siB7-H4、T47D-siNC、MCF-7-siB7-H4和MCF-7-siNC组。用qPCR法和WB法验证siRNA干扰效果及其对细胞周期分子cyclin D1表达的影响,CCK-8法和FCM分别检测干扰B7-H4表达对T47D和MCF-7细胞增殖、周期和凋亡的影响,qPCR法检测B7-H4干扰对E2F家族相关转录因子表达的影响。结果:成功构建干扰B7-H4表达的乳腺癌T47D和MCF-7细胞。与T47D-siNC和MCF-7-siNC组相比,T47D-siB7-H4和MCF-7-siB7-H4组细胞中B7-H4 mRNA和蛋白表达水平均显著降低、细胞增殖能力显著降低(均P<0.01),并伴有G1/S期细胞周期阻滞以及cyclin D1表达下调(均P<0.01),但细胞凋亡率差异无统计学意义(均P>0.05)。与T47D-siNC相比,干扰B7-H4后T47D细胞中E2F1、E2F2、E2F7和E2F8 mRNA水平有不同程度的降低(均P<0.01);与MCF-7-siNC相比,干扰B7-H4后MCF-7细胞中E2F1、E2F2、E2F3、E2F7和E2F8 mRNA水平均有不同程度的降低(P<0.05或P<0.01)。结论:干扰乳腺癌细胞B7-H4表达可下调cyclin D1和E2F家族相关转录因子的表达,导致细胞周期阻滞并抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 乳腺癌 B7-H4 E2F家族 T47D细胞 MCF-7细胞 增殖 细胞周期

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羟基红花黄色素A对雌激素效应相关蛋白表达的影响 被引量：4

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作者 陈梦 赵丕文 +2 位作者 孙丽萍 武虹波 赵笛 《湖南中医药大学学报》 CAS 2017年第11期1218-1221,共4页

目的探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对雌激素效应相关蛋白表达的影响。方法培养雌激素受体阳性细胞T47D和特异性雌激素受体(estrogen receptor,ER)阴性细胞SK-BR-3,将1×10^(-7)mol/L^(-1)×10^(-9)mol/L... 目的探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对雌激素效应相关蛋白表达的影响。方法培养雌激素受体阳性细胞T47D和特异性雌激素受体(estrogen receptor,ER)阴性细胞SK-BR-3,将1×10^(-7)mol/L^(-1)×10^(-9)mol/L三种梯度浓度的HSYA作用于两种细胞,通过蛋白质免疫印迹法检测雌激素受体ERα及ERβ、细胞外调解蛋白激酶1/2(ERK1/2)及p-ERK1/2、孕激素受体(progesterone receptor,PR)、抑癌基因P27等蛋白的表达情况。结果与空白对照组相比,在T47D细胞中,高浓度的HSYA促进了ERα、ERβ、ERK1/2、p-ERK1/2、PR的表达,抑制了P27的表达(P<0.01);在SK-BR-3细胞中,HSYA显著抑制了ERK1/2的表达,但对p-ERK1/2的表达影响不明显(P>0.05)。结论 HSYA在细胞内影响雌激素效应相关蛋白的表达情况不同,可能是通过调节ER表达及激活ERK信号通路而发挥雌激素样作用。 展开更多

关键词 羟基红花黄色素A WESTERN BLOT T47D细胞 SK-BR-3细胞

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线粒体融合蛋白-2基因增强人乳腺癌T47D细胞对小白菊内酯的敏感性 被引量：3

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作者 邱梅清 佟仲生 +2 位作者 贾勇圣 刘晓东 陈悦 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期37-42,共6页

目的:探讨线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2,Mfn-2)基因表达对人乳腺癌T47D细胞对小白菊内酯敏感性的影响。方法:Real-time PCR检测不同乳腺癌细胞系(T47D、MDA-MB-231、MCF-7、MDA-MB-435及HCC38)中Mfn-2 mRNA的表达。LipofectamineTM200... 目的:探讨线粒体融合蛋白-2(mitofusin-2,Mfn-2)基因表达对人乳腺癌T47D细胞对小白菊内酯敏感性的影响。方法:Real-time PCR检测不同乳腺癌细胞系(T47D、MDA-MB-231、MCF-7、MDA-MB-435及HCC38)中Mfn-2 mRNA的表达。LipofectamineTM2000体外转染pEGFP和pEGFP-Mfn-2质粒至人乳腺癌T47D细胞,real-time PCR和Western blotting检测T47D细胞中Mfn-2 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测T47D细胞的增殖,流式细胞术检测T47D细胞凋亡率及线粒体膜电位。结果:与正常乳腺细胞相比,Mfn-2 mRNA在乳腺癌HCC38细胞系中高表达,在T47D等其他细胞系中均低表达。pEGFP-Mfn-2转染48 h后,T47D细胞中Mfn-2 mRNA和蛋白的表达均明显上调。与pEGFP转染组相比,pEGFP-Mfn-2转染组T47D细胞在小白菊内酯(0.05 mol/L)作用下的存活率明显降低[(47.93±2.21)%vs(56.93±2.05)%,P<0.05]。流式细胞术检测结果显示:50 mmol/L小白菊内酯作用下,pEGFP-Mfn-2转染组与pEGFP转染组相比,T47D细胞凋亡率升高[(71.2±2.1)%vs(38.8±2.6)%,P<0.05],而线粒体膜电位明显降低[(1.6±0.1)%vs(5.0±0.5)%,P<0.05]。结论:pEGFP-Mfn-2转染可增强T47D细胞对小白菊内酯的敏感性。 展开更多

关键词 乳腺癌 T47D细胞 线粒体融合蛋白-2 小白菊内酯 敏感性

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化疗药物对高表达SNCG的乳腺癌细胞株T47D的抑制作用的实验研究 被引量：3

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作者 何帮顺 潘玉琴 +3 位作者 瞿卫 立彦 王自正 王书奎 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期821-824,共4页

目的:探讨各种化疗药物对高表达γ突触核蛋白(SNCG)的乳腺癌T47D细胞株的抑制作用。方法:常规培养不表达及高表达SNCG的乳腺癌MCF-7及T47D细胞株,采用MTT法观察顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)... 目的:探讨各种化疗药物对高表达γ突触核蛋白(SNCG)的乳腺癌T47D细胞株的抑制作用。方法:常规培养不表达及高表达SNCG的乳腺癌MCF-7及T47D细胞株,采用MTT法观察顺铂(DDP)、阿霉素(ADM)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)、依立替康(CPT-11)对细胞的抑制作用,并用流式细胞术分析药物作用后的细胞周期变化及细胞凋亡。结果:作用60 h后,ADM、VCR、TAX及CPT-11对T47D细胞的抑制作用显著低于MCF-7细胞(P<0.01),而DDP、5-FU对T47D细胞的抑制作用与MCF-7细胞相比差异无显著性(P>0.05),且显著高于其他4种抗肿瘤药物(P<0.01)。药物作用T47D细胞60 h后,DDP、5-FU组的细胞增殖指数(PI)及Caspase-3表达均较对照组及其他4组差异有极显著性(P<0.01)。结论:DDP及5-FU对高表达SNCG的T47D细胞的抑制作用显著高于ADM、VCR、TAX及CPT-11,此可为临床对乳腺癌患者个体化治疗方案的选择提供体外实验依据。 展开更多

关键词 γ突触核蛋白 乳腺癌 T47D细胞 个体化治疗

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制首乌含药血清对人乳腺癌T-47D细胞增殖及ER表达的影响 被引量：2

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作者 朱璨 王嫣 +4 位作者 李尧锋 田敏 唐文超 杨长福 王和生 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第22期3062-3067,共6页

目的:研究制首乌含药血清对人乳腺癌T-47D细胞增殖及雌激素受体(ER)表达的影响,探讨其植物雌激素(PE)样作用。方法:将性未成熟SD大鼠随机分为空白组,戊酸雌二醇(Ev)组(阳性对照,0.12 mg/kg),制首乌低、高剂量组(0.75、3 g/kg,以生药量计... 目的:研究制首乌含药血清对人乳腺癌T-47D细胞增殖及雌激素受体(ER)表达的影响,探讨其植物雌激素(PE)样作用。方法:将性未成熟SD大鼠随机分为空白组,戊酸雌二醇(Ev)组(阳性对照,0.12 mg/kg),制首乌低、高剂量组(0.75、3 g/kg,以生药量计)以及制首乌低、高剂量+Ev联用组(剂量同各药单用组),每组10只。空白组大鼠灌胃等体积水,各给药组大鼠灌胃相应药物,早晚各1次,连续4 d。末次给药2 h后采血,制备空白血清和含药血清。将T-47D细胞随机分为空白组,Ev组,制首乌低、高剂量组以及制首乌低、高剂量+Ev联用组,分置于含20%空白或相应含药血清的培养基中培养,采用CCK-8法检测各组细胞的增殖率(PR),采用Western blotting法和逆转录-聚合酶链反应法检测ER-α、ER-β蛋白及其mRNA的表达情况。结果:与空白组比较,各给药组细胞的PR[各给药组(24 h),除制首乌高剂量+Ev联用组外的其余各给药组(48、72 h)]均显著升高;且制首乌高剂量组(72 h)显著高于Ev组,制首乌低剂量组+Ev联用组(72 h)显著高于同剂量制首乌单用组,而制首乌高剂量+Ev联用组(72 h)显著低于同剂量制首乌单用组(P<0.05或P<0.01)。Ev组、制首乌高剂量组和制首乌低剂量+Ev联用组细胞中ER-α蛋白,各给药组细胞中ER-αmRNA和ER-β蛋白以及Ev组、制首乌低剂量组和制首乌+Ev联用组细胞中ER-βmRNA的相对表达量均显著升高;Ev组细胞中ER-α蛋白及其mRNA的相对表达量均显著高于制首乌单用和联用组;Ev组细胞中ER-β蛋白及其mRNA的相对表达量均显著低于制首乌低剂量+Ev联用组,但ER-βmRNA的相对表达量显著高于制首乌单用组和制首乌高剂量+Ev联用组;制首乌低剂量+Ev联用组细胞中ER-α、ER-β蛋白及其mRNA以及制首乌高剂量+Ev联用组细胞中ER-βmRNA的相对表达量均显著高于同剂量制首乌单用组,而制首乌高剂量+Ev联用组细胞中ER-α蛋白及其mRNA相对表达量� 展开更多

关键词 制首乌 含药血清 T-47D细胞 细胞增殖 雌激素受体 植物雌激素样作用

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多烯紫杉醇对乳腺癌细胞T47D增殖与凋亡的影响及其机制研究 被引量：2

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作者 柳青 《四川生理科学杂志》 2015年第4期168-170,共3页

目的:观察多烯紫杉醇对人乳腺癌细胞T47D增殖与凋亡的影响及其机制研究。方法:用不同浓度(0、5、10、20nmol·L-1)多烯紫杉醇作用于人乳腺癌细胞T47D后,采用MTT法观察多烯紫杉醇对人乳腺癌细胞T47D增殖的影响,并使用流式细胞术及Hoe... 目的:观察多烯紫杉醇对人乳腺癌细胞T47D增殖与凋亡的影响及其机制研究。方法:用不同浓度(0、5、10、20nmol·L-1)多烯紫杉醇作用于人乳腺癌细胞T47D后,采用MTT法观察多烯紫杉醇对人乳腺癌细胞T47D增殖的影响,并使用流式细胞术及Hoechst33258染色检测多烯紫杉醇对T47D细胞凋亡的影响,采用RT-PCR检测T47D细胞bcl-2mRNA表达情况。结果:经多烯紫杉醇处理后,MTT结果显示T47D细胞生长抑制率显著上升(P<0.05),流式细胞术检测显示T47D细胞凋亡率显著升高(P<0.05),并且Hoechst33258染色检测T47D细胞呈凋亡状态。此外,RT-PCR检测T47D细胞bcl-2mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:多烯紫杉醇通过诱导凋亡能抑制人乳腺癌细胞T47D的增殖,这可能与其下调bcl-2mRNA表达有关。 展开更多

关键词 多烯紫杉醇 T47D细胞 增殖与凋亡 BCL-2MRNA

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