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猪主要组织相容性复合体研究进展 被引量:12
1
作者 冯磊 赵德 高凤山 《生命科学》 CSCD 2012年第7期686-690,共5页
主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)分子首先作为主要组织相容性抗原被发现,进而以此命名。随着其抗原结合分子及T细胞信使生物学功能本质的揭示,关于MHC结构与功能的研究就进入了一个崭新时代,并在这一领域... 主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC)分子首先作为主要组织相容性抗原被发现,进而以此命名。随着其抗原结合分子及T细胞信使生物学功能本质的揭示,关于MHC结构与功能的研究就进入了一个崭新时代,并在这一领域中取得了许多可喜的成果。论述了近年来猪MHC(SLA)结构与功能方面的研究进展,包括SLA的分类及多态性、SLA分子结构特点、SLA分子功能及SLA分子相关领域的最新研究进展。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体 猪白细胞抗原 结构 功能
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猪白细胞抗原复合体Ⅰ类和Ⅱ类研究进展 被引量:4
2
作者 莫斯科 房永祥 +1 位作者 冯海燕 景志忠 《生物技术通讯》 CAS 2009年第6期895-900,共6页
猪主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原复合体(SLA),是猪基因组中基因密度最高的区域之一,也是多态性最高的区域。许多研究表明SLA在抗原提呈及免疫调节等方面起着重要的作用,其基因及基因组学研究在以猪为替代模型的人-猪器官移植、... 猪主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原复合体(SLA),是猪基因组中基因密度最高的区域之一,也是多态性最高的区域。许多研究表明SLA在抗原提呈及免疫调节等方面起着重要的作用,其基因及基因组学研究在以猪为替代模型的人-猪器官移植、癌症、变态反应、猪的生产数量性状及对感染性疾病的应答、疫苗研制等方面都是热点。我们就目前Ⅰ类和Ⅱ类SLA分子功能基因多态性及与机体免疫水平、抗病育种和生产性状的相关性作一综述。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 多态性 抗病育种 免疫水平
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烟台黑猪SLA-2-YTH原核表达载体的构建及表达 被引量:4
3
作者 姜巍 董宋鹏 +3 位作者 李子彬 姜龙 冯磊 高凤山 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期85-89,共5页
为构建烟台黑猪SLA-2-YTH基因原核表达载体,本研究设计引物PCR扩增SLA-2-YTH胞外区,将其克隆至pMD?19-T Simple载体,筛选阳性克隆。阳性克隆经酶切后,进一步与表达载体pET-28a(+)连接,转化BL21(Rosseta)感受态细胞并进行诱导表达,SDS-P... 为构建烟台黑猪SLA-2-YTH基因原核表达载体,本研究设计引物PCR扩增SLA-2-YTH胞外区,将其克隆至pMD?19-T Simple载体,筛选阳性克隆。阳性克隆经酶切后,进一步与表达载体pET-28a(+)连接,转化BL21(Rosseta)感受态细胞并进行诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示,SLA-2-YTH胞外区亚克隆大小为834bp,酶切鉴定证实其成功插入pET-28a(+)表达载体。SDS-PAGE结果显示,SLA-2-YTH基因导入宿主菌后成功表达,蛋白大小约31.0ku,与预期结果相符,优化后蛋白相对表达量达25%以上。本研究成功构建了烟台黑猪SLA-2-YTH原核表达载体,获得了表达蛋白,为今后进一步的结构和功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 烟台黑猪 猪白细胞抗原 原核表达 载体
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实验用SPF大白猪和长白猪SLAⅡ类基因多态性研究 被引量:3
4
作者 江新杰 权金强 +4 位作者 李昌文 路小野 陈洪岩 杨春文 高彩霞 《中国实验动物学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期404-413,共10页
目的研究实验用SPF大白猪和长白猪SLA II类基因的多态性。方法分别采集15头SPF大白猪和22头长白猪抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增DQB1、DRB1和DQA基因并进行测序,分析获得的SLA II类等位基因序列多态性。结果 ... 目的研究实验用SPF大白猪和长白猪SLA II类基因的多态性。方法分别采集15头SPF大白猪和22头长白猪抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,反转录后RT-PCR扩增DQB1、DRB1和DQA基因并进行测序,分析获得的SLA II类等位基因序列多态性。结果 3个基因共获得25个等位基因,包括8个DQB1,10个DRB1和7个DQA,全部获得ISAG SLA命名委员会的官方命名,其中3个等位基因首次提交完整序列,命名为DQB1*02:12(KU754590)、DQB1*02:03(KU754591)和DRB1*06:07(KU754601),3个DQA等位基因为新发现等位基因。SPF大白猪和长白猪DQB1等位基因与外源性抗原结合的15个氨基酸中,共有5个氨基酸具有高度保守性;DRB1等位基因的16个外源性抗原识别位点中,仅1个位点高度保守;DQA等位基因19个抗原结合位点中,有11个高度保守。SLA II类基因氨基酸序列分子进化树表明,3个基因分别聚为两大类,与国外Yucatan小型猪具有较近的亲缘关系,而与其他猪种未表现明显遗传距离相隔。结论成功鉴定了大白猪和长白猪的25个SLA II类等位基因,发现其具有较为丰富的多态性,所获得SLA II类等位基因在其他品种猪也广泛分布,具有多样性,这一研究结果对大白猪和长白猪发展为经典实验动物模型具有重要作用。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 SPF大白猪 SPF长白猪 SLA II类等位基因 多态性
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人工接种猪瘟病毒对猪外周血白细胞的影响 被引量:2
5
作者 周远成 王琴 +6 位作者 范学政 徐璐 徐志文 郭万柱 刘俊 陈蕾 汤波 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期303-308,共6页
为研究CSFV强毒感染对猪外周血白细胞的影响,本研究用猪瘟病毒石门株(CSFV SM)感染60日龄仔猪后,分析外周血中CSFV核酸载量动态变化、白细胞亚群变化和白细胞SLAⅠ和SLAⅡDR分子的表达情况。实验结果显示:实验仔猪经CSFV感染后48小... 为研究CSFV强毒感染对猪外周血白细胞的影响,本研究用猪瘟病毒石门株(CSFV SM)感染60日龄仔猪后,分析外周血中CSFV核酸载量动态变化、白细胞亚群变化和白细胞SLAⅠ和SLAⅡDR分子的表达情况。实验结果显示:实验仔猪经CSFV感染后48小时体温升高并可以在血液中检测到CSFV核酸,核酸载量持续升高,在感染后6日(DPI)达到最大值,为2 DPI时核酸载量的104.84±0.98倍;WBC、LYM、PLT数量持续降低,WBC在1DPI和2DPI分别降至65.87%和50.00%,LYM在1~3DPI分别降至70.68%、47.88%和23.29%,PLT数量持续降低,6DPI时仅为初始值的34.59%;NK、γδT、Tc、Th、CD3+CD4+CD8+和CD3-CD4-CD8-淋巴细胞在感染后均不同程度的减少,其中NK细胞在1DPI时减少78.49%,而后变化与1DPI比较差异不显著,γδT、Tc、CD3-CD4-CD8-、CD3+CD4+CD8+在3DPI时分别降至41.74%、43.83%、15.87%和32.96%,Th细胞在感染后持续下降,在6DPI时减少至42.95%;感染后淋巴细胞中表达SLAⅠ分子的细胞数量显著下降,其中CD3-SLAⅠ+细胞含量在1DPI和2DPI分别降至23.07%和15.38%,CD3+SLAⅠ+细胞在2DPI时降至39.19%,表达SLAⅠ分子的粒细胞数量持续升高,在3DPI时由1DPI的92.20%升高至98.30%;粒细胞中SLAⅡ+细胞数量在3DPI时达到最大值,52.76%的粒细胞表达SALⅡ分子,在4DPI时下降至12.54%,在5DPI时仅存4.06%。本研究结果揭示CSFVSM株感染能够通过抑制宿主的早期非特异抗病毒免疫而逃避宿主免疫监视,从而导致免疫抑制发生。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 外周血白细胞 猪白细胞表面抗原
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建立猪MHCⅠ类抗原特异性人T细胞系的探讨 被引量:1
6
作者 唐军 张冬青 +4 位作者 沈佰华 周洪 周芸 柳子星 周光炎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期337-339,共3页
目的 建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法 以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR... 目的 建立间接识别中国版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系的方法 ,以进一步研究SLAⅠ类分子的间接识别在猪→人异种细胞性排斥中的作用。方法 以E·coli中表达并纯化的SLAⅠ类分子P1为抗原 ,体外反复刺激健康人PBMC ,3H TdR掺入法筛选特异性增殖的T细胞 ,FACS作表型初步分析。结果 初步测定健康人外周血版纳猪SLAⅠ类P1分子特异性T细胞反应频率约 6 .67× 1 0 - 7,所建 4个T细胞系表型均为TCRαβ+ ,其中 3株以CD4+ 为主 ,1株以CD8+ 为主。结论 利用E .coli表达的纯蛋白抗原可建立间接识别版纳猪SLAⅠ类P1分子的特异性人T细胞系。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 基因表达 T细胞系 间接识别 器官移植 急性细胞性排斥
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用于异种移植的新型基因改造猪的培育 被引量:1
7
作者 李倩坤 王盈 +9 位作者 张曼玲 杨海元 程俊霖 赵丽华 任子健 陈凤娇 万振昆 张纬 李荣凤 戴一凡 《中华移植杂志(电子版)》 CAS 2014年第2期33-38,共6页
目的培育用于异种移植的新型基因改造猪,在α-Gal基因敲除以及膜辅蛋白CD46、血栓调节蛋白(TM)基因转入的基础上,进一步将Ⅱ类反式激活因子基因N端缺失显性负向(CⅡTA-DN)基因转入猪胎儿成纤维细胞,以抑制猪白细胞抗原(SLA)Ⅱ类分子的... 目的培育用于异种移植的新型基因改造猪,在α-Gal基因敲除以及膜辅蛋白CD46、血栓调节蛋白(TM)基因转入的基础上,进一步将Ⅱ类反式激活因子基因N端缺失显性负向(CⅡTA-DN)基因转入猪胎儿成纤维细胞,以抑制猪白细胞抗原(SLA)Ⅱ类分子的表达。方法设计合成博来霉素(Zeocin)抗性基因片段,并将其与含有CⅡTA-DN基因的pST205载体连接,构建置于人Tie2增强子和CMVβ-actin启动子下游的pNMU105/CⅡTA-DN表达载体,将线性化的pNMU105通过脂质体转染法转入已经敲除了α-Gal并转入CD46、TM基因的猪胎儿成纤维细胞181B(DKO/CD46/TM)。Zeocin抗性筛选转染pNMU105质粒的181B细胞,PCR方法检测CⅡTA-DN基因在181B细胞中的转入,获得阳性单克隆并进行核移植,得到DKO/CD46/TM/CⅡTA-DN转基因猪。取仔猪的耳缘组织裂解后进行基因鉴定。结果成功设计Zeocin抗性基因片段并构建pNMU105/CⅡTA-DN表达载体,经过质粒转染和Zeocin抗性药物筛选获得多株阳性单克隆,顺利通过核移植得到转基因猪。仔猪耳缘组织经PCR鉴定,在592 bp位置检测到预期条带,证明均为CⅡTA-DN转基因阳性。结论通过新型基因改造猪的培育,在抑制超急性排斥反应和补体反应、降低凝血和人CD4+T细胞免疫反应的理论基础上进行了转基因模型猪的构建,为异种移植中更加有效地减少免疫损伤、提高移植器官的存活做出了新的尝试。 展开更多
关键词 Ⅱ类反式激活因子 显性抑制基因 猪白细胞抗原 异种移植 转基 因猪
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人外周血T细胞系间接识别SLAⅠ类分子引起的异种细胞增殖反应
8
作者 唐军 周芸 +3 位作者 柳子星 张勇 王胜旺 周光炎 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期536-539,共4页
目的 确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法 用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细... 目的 确认猪→人异种移植中存在针对猪白细胞抗原 (swineleukocyteantigen ,SLA)Ⅰ类分子的间接识别而引起的急性细胞性排斥。方法 用纯化的中国版纳猪SLAⅠ类P1基因工程蛋白为抗原 ,体外反复刺激健康人外周血T细胞 ,建立P1特异性T细胞系。观察抗原特异性CD4 + T细胞系在自身APC存在下对版纳猪外周血单个核细胞与软骨细胞的反应性 ,以及HLA DR单抗与氯喹的阻断作用。结果 建立 10株SLAⅠ类P1抗原特异性T细胞系 ,其中 8株以TCRαβ+ CD4 + 为主要表型 ,将其合并使用。该CD4 + P1特异性T细胞系在自身APC存在下对相同品系版纳猪PBMC与软骨细胞均产生显著增殖反应。经抗人HLA DR单抗与氯喹处理均能明显阻断其增殖反应。结论 健康人外周血T细胞可通过间接识别SLAⅠ类抗原对版纳猪细胞产生明显应答。 展开更多
关键词 异种移植 猪白细胞抗原 T淋巴细胞 异种排斥反应 间接识别
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GGTA1^(-/-)五指山小型猪SLAI类基因分子特征及与HLA相似性分析
9
作者 蒋应弟 曾国敏 +4 位作者 石宁宁 李西睿 纪慧丽 潘登科 滚双宝 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期375-380,共6页
目的明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(GGTA1-/-)的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。方法采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLA I类基因... 目的明晰α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除(GGTA1-/-)的五指山小型猪SLA经典I类基因分子结构特征及其与人HLA的相似性,对研究异种器官移植细胞性排斥反应具有重要意义。方法采集6头祖代GGTA1-/-五指山小型猪耳组织,利用RT-PCR对SLA I类基因(SLA-1、SLA-3、SLA-2)扩增、克隆及测序,对序列进行BLAST分析,并采用生物信息学方法对SLA I类基因分子结构特征及其与人HLA的同源性进行分析。结果测序分析表明,共获得6条等位基因序列,其中4条为已公布的等位基因(SLA-1*0703、SLA-2*1102、SLA-3*0401、SLA-3*0403),另2条为新等位基因(SLA-1*0401wz01、SLA-2*11wz01)。五指山小型猪与人HLA同源性为70.5%~72.1%。SLA-1*0401wz01、SLA-1*0703、SLA-2*11wz01、SLA-2*1102和SLA-3*0401的CD8+分子识别的关键结合域与人HLA氨基酸序列比对,均仅在位点225、228处发生了突变(T→S、T→M),其他位点高度保守。SLA-2*11wz01和SLA-2*1102与人HLA I类基因NK细胞抑制性受体(killer inhibitory receptor,KIR)结合区氨基酸同源性较高,在NKTA-1亚型结合域内仅有1个氨基酸差异,而在NKTA-2和NKTA-3亚型结合域内有2个氨基酸差异。结论从免疫细胞介导的异种排斥反应角度出发,GGTA1-/-五指山小型猪SLA I类基因氨基酸序列与人HLA高度相似,可作为未来猪-人异种器官移植的良好供体之一。 展开更多
关键词 GGTA1-/- 五指山小型猪 SLA 异种移植 免疫排斥
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中国猪种DQA新等位基因的克隆和分析 被引量:11
10
作者 陈福祥 谢晋 +2 位作者 张勇 沈佰华 周光炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期111-116,共6页
目的 :克隆和序列分析中国猪种DQA基因cDNA ,为猪异种器官移植的免疫识别机理的研究提供基础。方法 :采用RT PCR方法扩增广西巴马猪 (GXP)、贵州香猪 (GZP)及云南小耳猪 (YNP)DQA基因cDNA ,克隆入测序载体 ,然后进行测序及其序列分析。... 目的 :克隆和序列分析中国猪种DQA基因cDNA ,为猪异种器官移植的免疫识别机理的研究提供基础。方法 :采用RT PCR方法扩增广西巴马猪 (GXP)、贵州香猪 (GZP)及云南小耳猪 (YNP)DQA基因cDNA ,克隆入测序载体 ,然后进行测序及其序列分析。结果 :获得具有阅读框架的 3个结构和已有序列不同的DQA新等位基因 (GXPDQA、GZPDQA和YNPDQA) ,基因序列号分别为AY10 2 4 73,AY10 2 4 74和AY10 2 4 75 ,其长度分别为 76 5、76 8和 76 8个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,分别编码2 5 4、2 5 5和 2 5 5个氨基酸残基。结论 :发现了 3个猪DQA新等位基因 ,同时发现中国猪种DQA基因及其推导的氨基酸与人相应基因的同源性明显高于小鼠。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原DQA 主要组织相容性复合体 异种移植
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中国猪种SLA-DR基因的克隆及序列分析 被引量:5
11
作者 陈福祥 谢晋 周光炎 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期157-162,共6页
为探讨SLA DR基因结构及其在猪 人异种器官移植中的作用 ,本研究采用RT PCR扩增三个中国猪种SLA DRcDNA ,然后克隆入测序载体 ,进行双向测序 ,获得了具有完整阅读框架的三个结构和已有序列不同的新DRB等位基因 ,其长度为80 1个核苷酸 ,... 为探讨SLA DR基因结构及其在猪 人异种器官移植中的作用 ,本研究采用RT PCR扩增三个中国猪种SLA DRcDNA ,然后克隆入测序载体 ,进行双向测序 ,获得了具有完整阅读框架的三个结构和已有序列不同的新DRB等位基因 ,其长度为80 1个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 6 6个氨基酸残基 ;三个中国猪种DRA基因和已报告的NIH小型猪DRA基因结构相同 ,其长度均为 75 9个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 5 2个氨基酸残基。分析还揭示 ,(1)中国猪种SLA DR基因及其推导的氨基酸序列与人相应基因的同源性明显高于小鼠I E基因 ;(2 )中国猪DR分子 (DRα链和β链 )存在和人CD4分子相结合的HLA同源序列 ,但个别关键氨基酸残基发生改变 ,其改变幅度明显低于小鼠I E分子。人 猪MHC显示较高的同源性 ,在分子水平为人体T细胞同时采用直接和间接方式识别猪SLA这一免疫学现象提供了依据。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体 SLA-DR基因 异种移植
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中国猪种DQB新等位基因的克隆和分析 被引量:8
12
作者 陈福祥 谢晋 +1 位作者 张勇 周光炎 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期93-98,共6页
克隆和序列分析中国猪种DQB基因cDNA ,为猪异种器官移植的免疫识别机制的研究提供基础。采用RT PCR方法扩增猪DQB基因cDNA ,克隆入测序载体 ,然后进行测序及其序列分析。结果获得具有阅读框架的三个结构和已有序列不同的DQB新等位基因 ... 克隆和序列分析中国猪种DQB基因cDNA ,为猪异种器官移植的免疫识别机制的研究提供基础。采用RT PCR方法扩增猪DQB基因cDNA ,克隆入测序载体 ,然后进行测序及其序列分析。结果获得具有阅读框架的三个结构和已有序列不同的DQB新等位基因 ,基因序列号分别为AY10 2 4 76、AY10 2 4 77和AY10 2 4 78,其长度为 786个核苷酸 ,除末端终止密码外 ,编码 2 6 1个氨基酸残基。发现了三个猪DQB新等位基因 。 展开更多
关键词 等位基因 克隆 DQB基因 异种器官移植 免疫识别机制 RT-PCR 排斥反应
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湖南沙子岭猪SLA-DR基因克隆及生物信息学分析 被引量:8
13
作者 唐医亚 邢晓为 +2 位作者 薛立群 黄生强 王维 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1491-1496,共6页
为了克隆湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,分析SLA基因特性和抗原多态性,评价湖南沙子岭猪在异种移植中的应用前景奠定基础。应用RT-PCR分别扩增湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,鉴定后克隆到PUCm-T载体并进行测序,用NCBI中的BLAST... 为了克隆湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,分析SLA基因特性和抗原多态性,评价湖南沙子岭猪在异种移植中的应用前景奠定基础。应用RT-PCR分别扩增湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,鉴定后克隆到PUCm-T载体并进行测序,用NCBI中的BLAST和ExPASY中相关软件进行生物信息学分析。得到的湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB基因特异性基因片段,大小分别为1 177 bp和909 bp。生物信息学分析发现,所扩增的SLA-DRA和SLA-DRB基因片段均包含完整的开放阅读框,分别编码252和266个氨基酸残基。将湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB基因在GenBank登录,登录号分别为EF143987和EF143988。同源性分析发现,湖南沙子岭猪SLA-DRA和SLA-DRB与人类相应的DRA、DRB相比,核苷酸序列同源性分别为83%和83%,编码氨基酸同源性分别为83%和79%。与GenBank登录的其他猪种相比,SLA-DRA基因同源性最高可达100%,而SLA-DRB基因具有多态性。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 沙子岭猪 基因克隆 异种移植
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湖南大围子猪SLA-DR基因克隆及其生物信息学分析 被引量:5
14
作者 王燕 邢晓为 +3 位作者 薛立群 黄生强 吴晓丽 王维 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期770-773,共4页
目的:研究湖南大围子猪SLA-DR基因特性,评价该猪种在异种器官移植中是否具有应用前景。方法:应用RT-PCR扩增大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,插入pUCM-T载体,双向测序,用NCBI中的BLAST和ExPASY软件进行生物信息学分析。结果:大围子猪SLA-... 目的:研究湖南大围子猪SLA-DR基因特性,评价该猪种在异种器官移植中是否具有应用前景。方法:应用RT-PCR扩增大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,插入pUCM-T载体,双向测序,用NCBI中的BLAST和ExPASY软件进行生物信息学分析。结果:大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因扩增片段大小分别为1177bp和909bp,均包含完整的开放阅读框,分别编码252和266个氨基酸残基。生物信息学分析结果表明,大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB与人类相应的DRA、DRB相比,氨基酸同源性分别为82%和73%。SLADRα链与人CD4分子结合部位介于第124至136位氨基酸,大围子猪SLA-DRA在该结合区域与人类相应的DRA存在两个氨基酸差异,即:第127位(lle→Val),第136位(Ser→Thr);SLADRβ链与人CD4分子结合部位位于第134至148位氨基酸,大围子猪SLA-DRB在该结合区域与人类相应的DRB相比氨基酸序列完全相同。与国际GenBank已登录的许多猪种相比,SLA-DRA基因同源性高达100%,而SLA-DRB基因在各猪种之间具有很高的多态性。结论:克隆湖南大围子猪SLA-DRA和SLA-DRB基因,该基因与人类相应的HLA-DRA和HLA-DRB基因高度同源,提示该猪种有望作为异种移植的候选供体。 展开更多
关键词 SLA-DR基因 湖南大围子猪 基因克隆 异种移植
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甘肃合作猪白细胞抗原经典Ⅱ类分子DR基因克隆及生物信息学分析 被引量:4
15
作者 莫斯科 房永祥 +1 位作者 冯海燕 景志忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1662-1668,共7页
为了克隆甘肃合作猪白细胞抗原(SLA)DRA和DRB基因,分析SLA-DR基因特性和抗原多态性,首次研究了甘肃合作猪在异种移植等研究领域中的应用前景。应用RT-PCR分别扩增合作猪SLA-DRA和SLA-DRB基因并进行测序,将所获得基因序列登录GenBank(登... 为了克隆甘肃合作猪白细胞抗原(SLA)DRA和DRB基因,分析SLA-DR基因特性和抗原多态性,首次研究了甘肃合作猪在异种移植等研究领域中的应用前景。应用RT-PCR分别扩增合作猪SLA-DRA和SLA-DRB基因并进行测序,将所获得基因序列登录GenBank(登录号分别为FJ905823和FJ9058258),再用NCBI中的BLAST和ExPASy等相关软件进行生物信息学分析。发现在猪-人异种移植中,近亲繁殖的合作猪种在与人类主要组织相容性复合体遗传基因水平相似性方面有一定优势,也可作为备选猪种对相关基因进行必要的修饰和改造。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原 合作猪 RT-PCR 生物信息学
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猪SLA免疫学相关研究进展 被引量:3
16
作者 奚衍洋 赵云蛟 钱爱东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第3期70-72,共3页
主要组织相容性复合体(MHC)是一类编码细胞表面糖蛋白的异质二聚体,在脊椎动物中分布广泛,由于具有能够参与免疫应答诱导和调节的特性,使其成为现代免疫学相关研究的热点之一。猪的主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原(SLA),位于第7... 主要组织相容性复合体(MHC)是一类编码细胞表面糖蛋白的异质二聚体,在脊椎动物中分布广泛,由于具有能够参与免疫应答诱导和调节的特性,使其成为现代免疫学相关研究的热点之一。猪的主要组织相容性复合体又称猪白细胞抗原(SLA),位于第7号染色体并横跨着丝粒,分为Ⅰ类基因、Ⅱ类基因和Ⅲ类基因,它不仅参与移植排斥反应而且在多种免疫应答反应中起到调节作用。文章围绕SLA基因介绍了其免疫抗病现状、在细胞亚群上的表达、对猪免疫生产的影响、参与病原体调控机制及相关T淋巴细胞抗原表位分析等免疫相关研究进展。最后展望了作为抗病遗传标记物的SLA基因在免疫学方面的研究发展方向,认为应该着力探究SLA等位基因和单倍型在控制免疫相关反应时起到的调控作用、确定特异性抗原表位、鉴定关键的免疫细胞亚群和确切的SLA基因座,并对猪基因组序列和基因组学及蛋白组学工具进行更新改良,从而对SLA基因调节的新型免疫相关途径的开发起到指导作用。 展开更多
关键词 主要组织相容性复合体(MHC) 猪白细胞抗原(SLA) 基因 感染 免疫 抗病性
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Analysis of porcine MHC expression profile 被引量:2
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作者 JIANGFanbo CHENChen +2 位作者 DENGYajun YUJun HUSongnian 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2005年第9期880-890,共11页
The porcine major histocompatibility complex (MHC, also named swine leukocyte antigen, SLA) is associ- ated not only with immune responsibility and disease suscep- tibility, but also with some reproductive and product... The porcine major histocompatibility complex (MHC, also named swine leukocyte antigen, SLA) is associ- ated not only with immune responsibility and disease suscep- tibility, but also with some reproductive and productive traits such as growth rate and carcass composition. As yet system- atical research on SLA expression profile is not reported. In order to illustrate SLA expression comprehensively and deepen our understanding of its function, we outlined the expression profile of SLA in 51 tissues of Landrace by ana- lyzing a large amount of ESTs produced by “Sino-Danish Porcine Genome Project”. In addition, we also compared the expression profile of SLA in several tissues from different development stages and from another breed (Erhualian). The result shows: (i) classical SLA genes are highly expressed in immune tissues and middle part of intestine; (ii) although SLA-3 is an SLA Ia gene, its expression abundance and pat- tern are quite different from those of the other two SLA Ia genes. The same phenomenon is seen in HLA-C expression, suggesting that the two genes may function similarly and undergo convergent evolution; (iii) except in jejunum, the antigen presenting genes are more highly expressed in breed Erhualian than in Landrace. The difference might associate with the higher resistance to bad conditions (including pathogens) of Erhualian and higher growth rates of Land- race. 展开更多
关键词 组织适合性联合体 MHC 白细胞抗原 免疫特性
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猪SLA-1体外表达及其结合多肽的筛选 被引量:1
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作者 巴利民 王振豹 +3 位作者 齐鹏 汪明 肖进 喻长远 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期32-35,共4页
本文将猪群中表达频率较高的SLA-1*1301胞外区及SLA-β2 m基因序列片段合成后连接到pET21a(+)原核表达载体上,构建出pET21a-SLA-1*1301和pET21a-SLA-β2m重组表达质粒。通过IPTG诱导大肠杆菌刺激产生大量的相关目标产物,再将所获得的质... 本文将猪群中表达频率较高的SLA-1*1301胞外区及SLA-β2 m基因序列片段合成后连接到pET21a(+)原核表达载体上,构建出pET21a-SLA-1*1301和pET21a-SLA-β2m重组表达质粒。通过IPTG诱导大肠杆菌刺激产生大量的相关目标产物,再将所获得的质量比较高的SLA-1*1301胞外区表达蛋白、SLA-β2m蛋白分别与6条软件预测的口蹄疫细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位多肽进行蛋白复性和纯化,通过蛋白纯化仪分析,结果显示,其中4条预测口蹄疫CTL表位多肽可以形成稳定的SLA I-β2m-表位多肽复合体,表明该4条多肽可能为口蹄疫的CTL表位肽,对将来开发细胞免疫疫苗和相关免疫增强剂有重要的指导意义。 展开更多
关键词 SLA-1 口蹄疫 CTL表位
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猪5个群体SLA微卫星遗传多样性 被引量:1
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作者 于辉 刘荣辉 +3 位作者 李华 左启祯 李岩 吴珍芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1427-1433,共7页
文章旨在比较广东地方猪、华南野猪(S.s.chirodontus)和引入品种白细胞抗原复合体(Swine leukocyteantigen complex,SLA)的遗传多样性,为猪的抗病选育提供理论依据。在SLA区域内选取18个多态性丰富的微卫星(SLA-MS),分别对皮特兰、杜洛... 文章旨在比较广东地方猪、华南野猪(S.s.chirodontus)和引入品种白细胞抗原复合体(Swine leukocyteantigen complex,SLA)的遗传多样性,为猪的抗病选育提供理论依据。在SLA区域内选取18个多态性丰富的微卫星(SLA-MS),分别对皮特兰、杜洛克、大花白、蓝塘猪以及华南野猪进行遗传分型。结果表明,SLA不同区域平均遗传多样性高低依次为SLAⅡ(He=0.628,PIC=0.581)>SLAⅠ(He=0.530,PIC=0.474)>SLAⅢ(He=0.526,PIC=0.458);5个群体间分子多样性指数(MDI)依次为华南野猪(0.716)>蓝塘猪(0.614)>大花白(0.559)>皮特兰(0.550)>杜洛克(0.507)。总体看来,SLA-MS的遗传多样性高低依次为华南野猪>广东地方猪>引入品种。基于Garza-Williamson指数(GWI)分析,杜洛克和大花白相较于华南野猪瓶颈效应严重;遗传距离分析表明蓝塘猪和华南野猪首先聚为一类,然后与大花白聚为一大类,而皮特兰和杜洛克则单独聚为一支。文章为广东地方猪种质资源的保护、抗病选育和配套系的生产提供了理论基础。 展开更多
关键词 猪白细胞抗原复合体 微卫星 遗传多样性
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猪肾上皮细胞SLA-1基因的克隆及分子结构特征分析
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作者 王宝宝 金行 +2 位作者 鲜钰涵 冯宏盛 高凤山 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第5期1671-1678,共8页
【目的】利用猪肾上皮细胞15(PK15)建立系统的猪白细胞抗原1(SLA-1)抗原表位筛选系统。【方法】提取PK15细胞总RNA,设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增SLA-1基因(SLA-1*PK15),将该基因克隆到pMD18-T载体上,并进行双酶切及测序鉴定;利用D... 【目的】利用猪肾上皮细胞15(PK15)建立系统的猪白细胞抗原1(SLA-1)抗原表位筛选系统。【方法】提取PK15细胞总RNA,设计特异性引物,应用RT-PCR方法扩增SLA-1基因(SLA-1*PK15),将该基因克隆到pMD18-T载体上,并进行双酶切及测序鉴定;利用DNAMAN 5.2.2、Mega 5.0、Multalin及同源建模进行系统进化树、二级结构、三级结构分析。【结果】RT-PCR扩增获得约1400 bp条带,质粒提取和酶切鉴定结果表明SLA-1成功插入pMD18-T载体;测序结果证实该基因共1419 bp,其中2-1087 bp为编码区,共编码361个氨基酸,信号肽为21个氨基酸,符合SLA-1基因特征。进化树分析结果显示,SLA-1*PK15与SLA-1*wxd(中国梅山猪)和SLA-1*0401(中国巴马小型猪)进化关系最近,而与SLA-1*lr02(丹麦长白猪)及SLA-1*0509(中国西藏野猪)进化关系较远。胞外区氨基酸比较分析表明,PK15细胞SLA-1基因与其他SLA-1基因胞外区主要变异位点存在于α1区和α2区,α3区的变异位点较少,无特征性氨基酸变异位点。PK15细胞SLA-1蛋白的二级结构主要以α-螺旋和β-折叠为主。同源建模结果显示,SLA-1蛋白具有SLA classⅠ典型的三级结构,α1区和α2区构成抗原多肽结合区。【结论】SLA-1基因稳定存在于PK15细胞,PK15细胞具有作为SLA-1抗原表位筛选系统的潜在应用价值。 展开更多
关键词 猪肾上皮细胞15(PK15) 猪白细胞抗原1(SLA-1) 克隆 生物信息学分析 同源模建
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