棒状链霉菌甘油耐受量与克拉维酸合成的关系 被引量：9

1

作者 李丹丹 黄喜桂 +1 位作者 林文良 程元荣 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期14-15,共2页

在克拉维酸产生菌的菌种选育过程中，应用甘油耐受量作为选择压力能有效地除去低效价菌株，提高高产变株的检出率，较传统筛选法优越。试验表明，甘油耐受量高的菌株克拉维酸效价也高。在高甘油含量（１１％）的甘油－精氨酸琼脂（ＡＧ... 在克拉维酸产生菌的菌种选育过程中，应用甘油耐受量作为选择压力能有效地除去低效价菌株，提高高产变株的检出率，较传统筛选法优越。试验表明，甘油耐受量高的菌株克拉维酸效价也高。在高甘油含量（１１％）的甘油－精氨酸琼脂（ＡＧＳ）平板挑取的菌株基本上无负变株，与对照菌株相比，有的菌侏效价提高２０％～３０％。耐甘油量低（６％）的变株，其效价比对照菌株降低了９５％。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸 生物合成 甘油

下载PDF 职称材料

产克拉维酸的棒状链霉菌突变株的选育 被引量：6

2

作者 王艳萍 张永生 +1 位作者 张阳 左志晗 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期9-12,共4页

以棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus),B71为出发菌株,通过紫外线诱变育种,采用琼脂块法初筛和摇瓶发酵复筛,选育出2株甘油耐受性正向突变株S.clavuligerus B71—14和S.clavuligerus B71-49,在摇瓶条件下,其克拉维酸产量与出发菌株S... 以棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus),B71为出发菌株,通过紫外线诱变育种,采用琼脂块法初筛和摇瓶发酵复筛,选育出2株甘油耐受性正向突变株S.clavuligerus B71—14和S.clavuligerus B71-49,在摇瓶条件下,其克拉维酸产量与出发菌株S.davuligerus B71相比,分别提高了90.6%和88.8%,并具有良好的遗传稳定性。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 紫外诱变 耐甘油 克拉维酸

下载PDF 职称材料

棒状链霉菌原生质体再生和克拉维酸产量变化的研究 被引量：3

3

作者 陈春福 柯永忠 +3 位作者 罗朗 朱薇玲 徐欣 毛振玛 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期94-96,共3页

在棒状链霉菌菌种选育过程中，采用原生质体形成与再生，结合物理和化学诱变处理，得到产克拉维酸稳定性好、产量高的菌株。试验结果表明，改进后的方法原生质体形成率达到１０￣６／ｍｌ数量级。原生质体再生后的菌株，对物理及化学诱... 在棒状链霉菌菌种选育过程中，采用原生质体形成与再生，结合物理和化学诱变处理，得到产克拉维酸稳定性好、产量高的菌株。试验结果表明，改进后的方法原生质体形成率达到１０￣６／ｍｌ数量级。原生质体再生后的菌株，对物理及化学诱变剂的敏感性增加，与再生前对照菌株相比，同剂量死亡率增加了１％～３５％。对未经过原生质体形成与再生的菌株用ＥＭＳ、ＵＶ、ＮＴＧ诱变处理所得到的１７１３只斜面和经再生后的菌株用同样诱变剂处理所得到的１２３０只斜面进行发酵试验。经效价测定表明，产量突变株的频率分布向正向移动，正变菌株出现频率较未再生突变株高２４．０６％，且出现了１．４６％较对照高一倍以上的在未再生诱变株中没有出现过的高产株，菌株稳定性提高，小菌落突变率由３１％降低到８％，而抗生素产量提高到原来的３２６％，斜面的保藏时间明显延长，传代后Ｆ＿３效价保持在９０％以上。 展开更多

关键词 原生质体 再生 棒状链霉菌 菌种选育 克拉维酸

下载PDF 职称材料

克拉维酸产生菌的改良 被引量：5

4

作者 孟勇 王忠彦 官家发 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期614-617,共4页

以棒状链霉菌Streptomyces clavu ligerus CCRC11518(ATCC27064)为出发菌,采用经典物理和化学诱变剂处理的微生物诱变技术和现代理性化筛选方法,通过筛选抗终产物结构类似物舒巴坦钠突变株、底物甘油耐受型突变株、营养缺陷型突变株,最... 以棒状链霉菌Streptomyces clavu ligerus CCRC11518(ATCC27064)为出发菌,采用经典物理和化学诱变剂处理的微生物诱变技术和现代理性化筛选方法,通过筛选抗终产物结构类似物舒巴坦钠突变株、底物甘油耐受型突变株、营养缺陷型突变株,最后获得一株克拉维酸高产突变株III50,其克拉维酸摇瓶产量为834.8μg/mL,是出发菌株产量(282.4μg/mL)的2.96倍.该突变株在琼脂斜面培养基上连续转接传代8代,克拉维酸的产量保持稳定. 展开更多

关键词 克拉维酸 棒状链霉菌 菌种改良 理性化筛选

下载PDF 职称材料

壳聚糖酶产生菌Sireptomyces clavuligerus sp.P_1最适发酵条件研究 被引量：2

5

作者 黄磊 吕淑霞 +2 位作者 刘可杰 于晓丹 解婷婷 《园艺与种苗》 CAS 2012年第5期39-41,共3页

[目的]确定菌株P1产酶的最适发酵条件。[方法]在不同发酵条件下测定培养液中的壳聚糖酶活力。[结果]菌株P1的最适发酵条件为发酵时间12h,摇床转数140r/min,装瓶量为50mL/250mL,发酵温度为30℃,接种量为2%,pH为6。[结论]该研究为壳聚糖... [目的]确定菌株P1产酶的最适发酵条件。[方法]在不同发酵条件下测定培养液中的壳聚糖酶活力。[结果]菌株P1的最适发酵条件为发酵时间12h,摇床转数140r/min,装瓶量为50mL/250mL,发酵温度为30℃,接种量为2%,pH为6。[结论]该研究为壳聚糖酶工业化生产提供了理论依据。 展开更多

关键词 壳聚糖酶 streptomyces clavuligerus 发酵条件 壳寡糖

下载PDF 职称材料

克拉维酸高产菌的选育 被引量：3

6

作者 孟勇 王忠彦 +3 位作者 苗艳芳 胡承 张国华 官家发 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期557-560,共4页

在克拉维酸高产菌的选育过程中,应用解除终产物结构类似物作为选择压力,能有效地除去低效价菌株,提高高产菌株的检出率,较传统筛选法优越.试验表明,以带棒链霉菌Strep tomycesclavuligerusCCRC11518(效价为382.4×10-6g/mL)为出发菌... 在克拉维酸高产菌的选育过程中,应用解除终产物结构类似物作为选择压力,能有效地除去低效价菌株,提高高产菌株的检出率,较传统筛选法优越.试验表明,以带棒链霉菌Strep tomycesclavuligerusCCRC11518(效价为382.4×10-6g/mL)为出发菌,经紫外线诱变,筛选到一株抗20×10-3g/mL的舒巴坦钠突变株my51,my51菌株产克拉维酸的效价达到834.7×10-6g/mL,比出发菌提高了1.18倍.该菌株连续传代7代,克拉维酸的效价保持稳定. 展开更多

关键词 克拉维酸 带棒链霉菌 选育

下载PDF 职称材料

棒状链霉菌中lat基因的突变及其对克拉维酸产量的影响 被引量：3

7

作者 王艳萍 崔艳艳 +2 位作者 左志晗 郭金体 张阳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期1-4,共4页

以棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus NRRL3585的染色体为模板扩增得到1条1.77kb的lat基因片段,并将其用于构建重组质粒pKCLES。将pKCLES由E.coli ET12567接合转移至S.clavuligerus中。重组质粒pKCLES与S.clavuligerus染色体中野生型... 以棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus NRRL3585的染色体为模板扩增得到1条1.77kb的lat基因片段,并将其用于构建重组质粒pKCLES。将pKCLES由E.coli ET12567接合转移至S.clavuligerus中。重组质粒pKCLES与S.clavuligerus染色体中野生型lat基因发生同源交换,从而获得了带有阿泊拉抗性的突变菌株。对S.clavuligerus NRRL3585以及lat突变菌株的基因组进行PCR验证,且测定了这2种菌株的产头酶素C的能力。结果均表明,突变菌株中的lat基因中插入了含有阿泊拉抗性的pKC1139片段而遭到了破坏。另外,以HPLC法测定了这2种菌株在不同培养时间(72h和96h)下的克拉维酸的产量,结果显示,lat突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的2.3倍。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸 lat基因 基因突变

下载PDF 职称材料

克拉维酸产生菌的诱变育种 被引量：3

8

作者 孙荣勋 韩斌 +2 位作者 赵海 范成英 官家发 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期684-687,共4页

以克拉维酸产生菌棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus CCRC11518 III50为出发菌株,比较各种物理和化学诱变剂处理对其克拉维酸生物合成的影响,确定亚硝基胍为棒状链霉菌诱变育种的诱变剂及其处理剂量为2mgmL-1、40min.经亚硝基胍处理4... 以克拉维酸产生菌棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus CCRC11518 III50为出发菌株,比较各种物理和化学诱变剂处理对其克拉维酸生物合成的影响,确定亚硝基胍为棒状链霉菌诱变育种的诱变剂及其处理剂量为2mgmL-1、40min.经亚硝基胍处理40min(处理浓度为2mgmL-1)后,采用新颖理性化筛选方法,通过筛选自身代谢产物抗性突变株、克拉维酸抗性突变株和链霉素抗性突变株,最终得到一株克拉维酸高产菌VI118,其克拉维酸产量较出发菌株提高了67.9%.该高产突变株在琼脂斜面培养基上连续传接10代,克拉维酸产量保持稳定. 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸 理性化筛选 菌种改良

下载PDF 职称材料

棒状链霉菌中lat基因的置换与克拉维酸的选择性生产 被引量：3

9

作者 舒杨 何建勇 +2 位作者 田威 张怡轩 张寒丽 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期62-66,共5页

目的提高棒状链霉菌的克拉维酸生产能力 ,去除副产物头霉素C。方法将安普霉素抗性基因片段插入到 4 7kb的lat pcbAB基因片段中 ,采用接合转移方法对棒状链霉菌中头霉素C生物合成的关键基因lat基因进行了置换。结果与结论经PCR验证 ,染... 目的提高棒状链霉菌的克拉维酸生产能力 ,去除副产物头霉素C。方法将安普霉素抗性基因片段插入到 4 7kb的lat pcbAB基因片段中 ,采用接合转移方法对棒状链霉菌中头霉素C生物合成的关键基因lat基因进行了置换。结果与结论经PCR验证 ,染色体上正常的lat pcbAB基因被插入失活的基因所替代。对重组菌株的发酵产物进行HPLC检测 ,发现所有的重组菌株均不再合成头霉素C ,并且重组菌株C35 85 lat ::apr、C2 5 1 lat::apr和C16 6 lat::apr的克拉维酸产量较出发菌株分别提高了 2 6 7 6 8%、4 3 6 9%和 35 0 5 %。结果表明基因插入失活是去除多余组分 。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 基因置换 高效液相色谱法 克拉维酸 头霉素C

下载PDF 职称材料

lat基因的失活在提高棒状链霉菌棒酸产量中的应用 被引量：2

10

作者 左志晗 张阳 +1 位作者 郭金体 王艳萍 《天津科技大学学报》 CAS 2007年第4期15-19,共5页

利用lat基因突变的重组质粒pKCLHS对紫外诱变的克拉维酸(Clavulanic acid)高产菌株Streptomyces clavuligerusB71-14的lat基因进行了插入失活,对获得的基因突变子进行了PCR验证、菌体生长测定、发酵特征测定,并对发酵液中的克拉维酸进... 利用lat基因突变的重组质粒pKCLHS对紫外诱变的克拉维酸(Clavulanic acid)高产菌株Streptomyces clavuligerusB71-14的lat基因进行了插入失活,对获得的基因突变子进行了PCR验证、菌体生长测定、发酵特征测定,并对发酵液中的克拉维酸进行了初步提取和含量测定.结果表明,突变菌株的lat基因中插入了含有阿泊拉抗性的基因片段,突变菌株的生长速度与原始菌株无明显变化l,at突变菌株的克拉维酸产量最高能达到其原始菌株的1.11～1.29倍,产头霉素C的能力显著降低. 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸 lat基因 基因突变

下载PDF 职称材料

原生质体融合法提高棒状链霉菌的克拉维酸产量 被引量：1

11

作者 左志晗 张阳 王艳萍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期53-56,60,共5页

采用原生质体融合技术,将克拉维酸生产菌——棒状链霉菌甘油耐受性突变株B71-14和舒巴坦钠耐受性突变株B71-50进行了原生质体融合。以2种抗性为选择标记,筛选融合子。从形态上与2亲本菌株不同的98株融合子中发现了1株融合子F-11,既有甘... 采用原生质体融合技术,将克拉维酸生产菌——棒状链霉菌甘油耐受性突变株B71-14和舒巴坦钠耐受性突变株B71-50进行了原生质体融合。以2种抗性为选择标记,筛选融合子。从形态上与2亲本菌株不同的98株融合子中发现了1株融合子F-11,既有甘油抗性又有舒巴坦钠的抗性,其克拉维酸产量为742.71 mg/L,是亲本菌株B71-14(538.20 mg/L)的1.38倍,是亲本菌株B71-50(479.91 mg/L)的1.55倍。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 原生质体融合 克拉维酸 甘油耐受性 舒巴坦钠耐受性

下载PDF 职称材料

棒状链霉菌lat基因的中断对棒酸产量的影响 被引量：2

12

作者 王永华 荆琛峰 +2 位作者 陶美凤 杨博 徐安龙 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期500-503,共4页

从棒状链霉菌中克隆1.8kb的lat基因片段,构建了基因置换质粒pXAL1和pXAL2。运用接合转移方法把中断载体导入棒状链霉菌中进行lat的中断,得到1株接合转移子AmrThios,命名为XAL863。通过Southern杂交分析及赖氨酸转氨酶活性测定,证明此菌... 从棒状链霉菌中克隆1.8kb的lat基因片段,构建了基因置换质粒pXAL1和pXAL2。运用接合转移方法把中断载体导入棒状链霉菌中进行lat的中断,得到1株接合转移子AmrThios,命名为XAL863。通过Southern杂交分析及赖氨酸转氨酶活性测定,证明此菌株的lat基因被中断。通过发酵培养,HPLC方法检测棒酸含量,发现棒酸产量明显提高,约为原产量的1.8倍。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 棒酸 lat 基因中断

下载PDF 职称材料

转录组分析棒状链霉菌F613-1高产克拉维酸的分子基础 被引量：2

13

作者 覃荣活 付加芳 +2 位作者 宗工理 王志宇 曹广祥 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期235-243,共9页

旨在探究S.clavuligerus工业菌株高产克拉维酸(CA)的分子基础。采用转录组高通量测序,对比标准菌株和高产CA的工业菌株F613-1之间的基因转录水平差异,结合菌株表型差异进行综合分析。结果表型比较显示,F613-1在固体培养基中生长速度、... 旨在探究S.clavuligerus工业菌株高产克拉维酸(CA)的分子基础。采用转录组高通量测序,对比标准菌株和高产CA的工业菌株F613-1之间的基因转录水平差异,结合菌株表型差异进行综合分析。结果表型比较显示,F613-1在固体培养基中生长速度、气生菌丝形态、孢子形成等方面与标准菌株存在差异。液体摇瓶培养中,菌体生长速度无明显变化,但F613-1的糖消耗量显著降低,同时CA产量比ATCC27064提高约11.7倍。转录组分析显示,F613-1中CA基因簇及其途径特异性调控基因的表达量显著升高,其副产物全霉素基因簇的表达量显著下降;CA合成原料精氨酸和3-磷酸甘油醛代谢相关基因的转录水平发生显著变化,精氨酸合成代谢基因上调,而3-磷酸甘油醛分解代谢基因下调;ABC转运系统中80多个基因的转录水平也发生明显变化,其中42个显著上调,38个显著下调。工业生产菌株高产克拉维酸的主要原因是CA基因簇及其调控基因表达量的升高、相关副产物基因簇的沉默及CA合成原料精氨酸和3-磷酸甘油醛的积累。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 工业菌株 转录组 克拉维酸

下载PDF 职称材料

棒状链霉菌蛋白质样品提取方法及双向凝胶电泳条件的优化 被引量：1

14

作者 王美龙 王永红 +3 位作者 银鹏 张嗣良 冯涛 夏月兰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期609-616,共8页

针对基于工业用复合培养基的棒状链霉菌（Streptomyces clavuligerus）发酵液杂质含量高特性，对蛋白质样品制备、第一向等电聚焦和第二向SDS．PAGE电泳相关的主要实验条件进行了研究和优化。所得最适条件为：采用液氮研磨方法破碎细胞... 针对基于工业用复合培养基的棒状链霉菌（Streptomyces clavuligerus）发酵液杂质含量高特性，对蛋白质样品制备、第一向等电聚焦和第二向SDS．PAGE电泳相关的主要实验条件进行了研究和优化。所得最适条件为：采用液氮研磨方法破碎细胞，用10％的TCA／丙酮沉淀法除盐，用含有7mol／L尿素，2mol／L硫脲，2％CHAPS，20mmol／L DTT，0．5％IPG缓冲液（pH3～10）的溶胀液重悬蛋白，应用pH梯度为4—7，长度为24cm的固定化胶条进行第一向等电聚焦，浓度为12．5％的聚丙烯酰胺凝胶进行第二向SDS—PAGE，考马斯亮蓝R-250染色，上样量为600μg。对获得的双向电泳图像运用Image Master 2D Platinum软件进行分析表明成功建立了重复性好的基于复合培养基的棒状链霉菌蛋白质样品制备和双向电泳方法，为工业规模克拉维酸发酵过程蛋白质组研究奠定了基础。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 双向电泳 蛋白质组学

下载PDF 职称材料

棒状链霉菌产克拉维酸发酵培养基优化 被引量：1

15

作者 冯涛 苗瑞春 +6 位作者 李雄 王雁 杨波 曹斌 刘新山 王永红 储炬 《化学与生物工程》 CAS 2019年第11期12-15,25,共5页

以克拉维酸生产菌株Streptomyces clavuligerus K6为研究对象,考察了不同氮源对克拉维酸产量的影响,并通过二水平析因实验、快速爬坡实验和响应面法对发酵培养基碳源进行优化。确定最佳氮源为大豆蛋白,最佳发酵培养基碳、氮源配方为:甘... 以克拉维酸生产菌株Streptomyces clavuligerus K6为研究对象,考察了不同氮源对克拉维酸产量的影响,并通过二水平析因实验、快速爬坡实验和响应面法对发酵培养基碳源进行优化。确定最佳氮源为大豆蛋白,最佳发酵培养基碳、氮源配方为:甘油18.19 g·L^-1、糊精11.22 g·L^-1、三油酸甘油酯30.80 g·L^-1、大豆蛋白粉40 g·L^-1。在此发酵培养基配方下,克拉维酸产量可达5220 mg·L^-1,较出发配方提高58.1%。 展开更多

关键词 克拉维酸 发酵 棒状链霉菌 响应面法

下载PDF 职称材料

无机盐MgCl_2和微量金属离子Zn^(2+)对克拉维酸产量的影响 被引量：1

16

作者 王艳萍 郭金体 +1 位作者 张阳 左志晗 《天津科技大学学报》 CAS 2008年第1期13-16,共4页

对本实验室UV诱变获得的棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus B71-14在优化培养基配方的基础上,考察不同微量金属离子对克拉维酸发酵产量的影响,确定Zn2+对其发酵产量有比较明显的促进作用.进一步考察不同添加浓度MgCl2和Zn2+对克拉维... 对本实验室UV诱变获得的棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus B71-14在优化培养基配方的基础上,考察不同微量金属离子对克拉维酸发酵产量的影响,确定Zn2+对其发酵产量有比较明显的促进作用.进一步考察不同添加浓度MgCl2和Zn2+对克拉维酸合成趋势的影响,确定在本实验发酵培养基中MgCl2和Zn2+的最佳添加量分别为1.5,g/L和00.5,g/L最佳添加浓度,并在最适添加浓度下考察其对发酵代谢过程参数的影响,其最高产量与不添加相比分别提高了457.6%和631.0%. 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸 MGCL2 ZN^2+

下载PDF 职称材料

PCR-Targeting体系构建棒状链霉菌基因突变株 被引量：1

17

作者 左志晗 郑津辉 +1 位作者 赵海龙 李玉珊 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期12-16,共5页

棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)可产生多种β-内酰胺类化合物,其中包括克拉维酸。利用聚合酶链式反应(PCR)-Targeting体系构建棒状链霉菌突变株是获得克拉维酸高产菌株的又一可行方法。采用该体系对棒状链霉菌的lat基因进行了敲... 棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)可产生多种β-内酰胺类化合物,其中包括克拉维酸。利用聚合酶链式反应(PCR)-Targeting体系构建棒状链霉菌突变株是获得克拉维酸高产菌株的又一可行方法。采用该体系对棒状链霉菌的lat基因进行了敲除,获得了没有抗性标记的lat基因被敲除的突变株S.clavuligerus lat::scar,其克拉维酸产量是出发菌株的2.8倍。由于最终构建的突变株没有抗性标记,因此可以将该方法应用于突变棒状链霉菌的其他基因,实现用一种抗性标记突变同一菌株不同基因的目的,为链霉菌的基因突变提供了又一种有效的方法。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 PCR-寻靶 突变 克拉维酸

下载PDF 职称材料

应用原生质体融合技术选育克拉维酸高产菌株

18

作者 张阳 张恺 +1 位作者 郭金体 王艳萍 《天津科技大学学报》 CAS 2008年第3期21-25,共5页

采用棒状链霉菌种内原生质体融合技术,选育克拉维酸高产菌株.该实验选用舒巴坦钠耐受性高产菌株Streptomyces clavuligerus B71-3-10和甘油耐受性高产菌株Streptomyces clavuligerus B71-14为亲株,优化了原生质体制备条件和融合条件,最... 采用棒状链霉菌种内原生质体融合技术,选育克拉维酸高产菌株.该实验选用舒巴坦钠耐受性高产菌株Streptomyces clavuligerus B71-3-10和甘油耐受性高产菌株Streptomyces clavuligerus B71-14为亲株,优化了原生质体制备条件和融合条件,最终得到遗传稳定性良好的融合子F14.该融合子的克拉维酸产量提高到650.35 mg/L,分别比亲株S.clavuligerus B71-3-10和S.clavuligerus B17-14的克拉维酸产量高36.77%和20.84%.将原生质体融合技术应用到棒状链霉菌克拉维酸高产菌株的选育中,证明了其可行性、高效性及成效显著性. 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸高产菌株 原生质体融合

下载PDF 职称材料

转录水平分析转速对克拉维酸发酵产量的影响机制

19

作者 宋道平 康妮 +5 位作者 张佩佩 宗工理 王世立 张堃钰 曹广祥 付加芳 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期150-156,共7页

搅拌转速影响克拉维酸发酵水平,旨在研究搅拌转速影响棒状链霉菌F613-1克拉维酸(CA)生物合成的分子机制。采用转录组高通量测序,对比不同转速发酵条件之间的基因转录水平差异,分析克拉维酸代谢途径相关基因的转录水平变化。摇瓶发酵结... 搅拌转速影响克拉维酸发酵水平,旨在研究搅拌转速影响棒状链霉菌F613-1克拉维酸(CA)生物合成的分子机制。采用转录组高通量测序,对比不同转速发酵条件之间的基因转录水平差异,分析克拉维酸代谢途径相关基因的转录水平变化。摇瓶发酵结果显示,高转速条件下F613-1的CA产量比低转速条件显著提高,发酵周期缩短。转录组分析显示,高转速条件下F613-1中CA合成基因簇中基因表达量无显著变化,但CA合成前体物质精氨酸和3-磷酸甘油醛代谢相关基因的转录水平发生显著变化,精氨酸合成基因簇中基因表达量明显升高,甘油代谢转化为3-磷酸甘油醛的基因表达量显著提高。因此,棒状链霉菌在高转速发酵条件下CA合成速度增加的主要原因是CA合成前体物质精氨酸和3-磷酸甘油醛的代谢活性增强和前体物质积累。 展开更多

关键词 棒状链霉菌 克拉维酸 转速 转录组

下载PDF 职称材料

增加cmcJ基因表达盒拷贝数对转化头孢菌素C效率的影响

20

作者 黄娟娟 郭兆霞 +3 位作者 李继安 刘伟 邵雷 陈代杰 《工业微生物》 CAS CSCD 2013年第3期38-43,共6页

研究表明利用棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus(ATCC27064)的粗酶液能够在头孢菌素C的7位添加一个甲氧基,得到的7α-甲氧基头孢菌素C,可以作为头霉素类抗生素的半合成前体。本研究首先构建含有棒状链霉菌中cmcJ基因的重组质粒pHJJ-2... 研究表明利用棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus(ATCC27064)的粗酶液能够在头孢菌素C的7位添加一个甲氧基,得到的7α-甲氧基头孢菌素C,可以作为头霉素类抗生素的半合成前体。本研究首先构建含有棒状链霉菌中cmcJ基因的重组质粒pHJJ-2,再通过属间接合转移的方法将该基因片段导入棒状链霉菌中,得到cmcJ基因表达盒增加的棒状链霉菌重组突变株。结果表明,重组突变株将头孢菌素C转化为羟基化头孢菌素C的转化率,从野生型菌株的57.0%提高到重组突变株的67.4%;甲氧基头孢菌素C的转化率由野生型的43.1%提高到重组突变株的51.9%。 展开更多

关键词 头孢菌素C 生物转化 棒状链霉菌 基因重组

下载PDF 职称材料