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中南地区金黄色葡萄球菌流行病学及耐药性研究 被引量:3
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作者 刘彩林 陈中举 +8 位作者 孙自镛 曹伟 冯羡菊 王山梅 曾吉 邹明祥 汪明 孙明月 侯红艳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期410-415,共6页
目的研究中南地区2011年6月至2012年5月金黄色葡萄球菌的耐药情况及基因型分布。方法采用琼脂稀释法检测金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),多重PCR方法对MRSA菌株进行SCCmec(staphylococcalcassettechromosome... 目的研究中南地区2011年6月至2012年5月金黄色葡萄球菌的耐药情况及基因型分布。方法采用琼脂稀释法检测金黄色葡萄球菌对临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),多重PCR方法对MRSA菌株进行SCCmec(staphylococcalcassettechromosomemec)和agr(accessorygeneregulator)分型。用MHAST(含有5μg/ml替考拉宁的M—H琼脂)初筛hVISA(heterogeneousvall-comycin—intermediateStapylococcusaarells)菌株,MHAST初筛阳性的菌株用金标准PAP/AUC法(popu—lationanalysisprofile/areaunderthecurve)进行确证。结果352株金黄色葡萄球菌主要分离自血液标本(40.1%)和分泌物标本(24.7%),其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)118株,检出率为33.5%。MRSA菌株对头孢菌素类、氨基糖苷类、β-内酰胺类、氟喹诺酮类、利福平、克林霉素、红霉素和四环素等抗菌药物耐药率均显著高于MSSA,差异有统计学意义(P〈0.05)。MRSA对氯霉素和甲氧苄啶/磺胺甲嗯唑耐药率较低,分别为10.2%和7.4%,未发现万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺、达托霉素及替加环素耐药的菌株。118株MRSA中共检测出hVISA20株,检出率为16.9%。MRSA菌株主要为SCCmecⅢ型,占80.5%;其次是Ⅳ型占8.5%。agr分型主要为agr.1型,占81.4%;其次为agr-2型,占15.3%。结论中南地区金黄色葡萄球菌耐药现象严重,MRSA基因型主要为SCCmecllI型和agr-1型,hVISA流行率极高,达16.9%,应引起临床高度重视,合理使用抗菌药物尤其是糖肽类药物,以避免VISA和VRSA(vancomycin—resistantStapylococcusattreus)株的产生,致使临床治疗失败。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 HVISA SCCMEC
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破壁方法对金葡球菌细胞结合青霉素酶活力的影响 被引量:1
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作者 陈建华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期349-353,共5页
采用酶法、超声波法、冻融法对金葡球菌破壁,OD54nm值表明:酶法破壁效果最好,超声波法次之。而冻融法有利于金葡球菌细胞结合青霉素酶溶出,超声波法、酶法处理,细胞结合青霉素酶部分失活。0.1%TritonX-100对... 采用酶法、超声波法、冻融法对金葡球菌破壁,OD54nm值表明:酶法破壁效果最好,超声波法次之。而冻融法有利于金葡球菌细胞结合青霉素酶溶出,超声波法、酶法处理,细胞结合青霉素酶部分失活。0.1%TritonX-100对破壁后细胞结合青霉素酶具有增溶作用。 展开更多
关键词 金葡球菌 酶裂解法 细胞结合 青霉素酶 破壁法
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金黄葡萄球菌ClfA活性基因的克隆及原核表达 被引量:1
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作者 尹荣兰 张乃生 +4 位作者 张艳晶 杨正涛 刘辉 杨琦 刘珊 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期38-40,共3页
目的克隆金黄葡萄球菌表面蛋白凝集因子A(ClfA)活性基因,并进行原核表达。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ClfA(221-550)活性基因,克隆入载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-ClfA(221-550),转化感受态大肠杆菌B... 目的克隆金黄葡萄球菌表面蛋白凝集因子A(ClfA)活性基因,并进行原核表达。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增ClfA(221-550)活性基因,克隆入载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pET28a-ClfA(221-550),转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果PCR扩增出987bp的目的基因片段,重组表达质粒经双酶切证明构建正确。表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约36000处可见目的条带,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的36.76%,且具有良好的反应原性。结论已成功克隆了金黄葡萄球菌ClfA活性基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达了目的蛋白。 展开更多
关键词 金黄葡萄球菌 表面蛋白凝集因子A 活性基因 克隆 原核表达
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医护人员与健康体检人员携带的金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因的检测 被引量:1
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作者 叶慧芬 曾俊韶 覃文周 《中国消毒学杂志》 CAS 2019年第10期748-750,共3页
目的研究医护人员携带的金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因及其人群分布情况,为防控感染提供参考。方法采用细菌分离鉴定和聚合酶链反应(PCR)方法,对部分医护人员和健康体检人群鼻前庭棉拭子标本进行检测与分析。结果从110份医护人员标本中检... 目的研究医护人员携带的金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因及其人群分布情况,为防控感染提供参考。方法采用细菌分离鉴定和聚合酶链反应(PCR)方法,对部分医护人员和健康体检人群鼻前庭棉拭子标本进行检测与分析。结果从110份医护人员标本中检出金黄色葡萄球菌41株,检出率为37. 3%;从336名体检人员中,分离出金黄色葡萄球菌84株,检出率为25. 0%,医护人员金黄色葡萄球菌检出率明显高于体检人员(P=0. 01,P <0. 05)。41株医护人员携带的金黄色葡萄球菌检出6株携带qac G,H基因或J基因,携带率为14. 63%;84株健康体检人员携带的金黄色葡萄球菌检出3株携带qac G,H或J基因,携带率为3. 67%,医护人员携带含耐消毒剂基因的金黄色葡萄球菌明显高于体检人员(P=0. 012,P <0. 05)。所有凝固酶阴性葡萄球菌中并未检测出耐消毒剂基因。结论医护人员携带的金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因携带率高于健康志愿者,提示医院环境内消毒剂的广泛应用可能会诱导金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因的表达。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 耐消毒剂基因 医护人员
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两株对万古霉素敏感性减低金黄色葡萄球菌的透射电镜下超微结构观察 被引量:3
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作者 张晨 朱海平 +2 位作者 金凤玲 孙虹佳 姚立琼 《现代检验医学杂志》 CAS 2020年第4期109-112,共4页
目的对前期课题筛选出的万古霉素中介金黄色葡萄球菌(vancomycin intermediate Stapylococcus aureus,VISA)及异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycin resistant Stapylococcus aureus,hetero-VISA)进行透射电镜下的... 目的对前期课题筛选出的万古霉素中介金黄色葡萄球菌(vancomycin intermediate Stapylococcus aureus,VISA)及异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌(heterogeneous vancomycin resistant Stapylococcus aureus,hetero-VISA)进行透射电镜下的超微结构观察。方法用KB法、琼脂稀释法和E-test法、菌谱分析法对分离出的VISA和h-VISA进行确认,并用透射电镜法对其进行超微结构观察。结果检测到的VISA和h-VISA经透射电镜观察发现菌株较标准菌株细胞壁增厚,细胞表面粗糙。结论VISA和h-VISA等万古霉素敏感性减低金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药很可能是由于细菌细胞壁增厚所引起的。 展开更多
关键词 万古霉素耐药 万古霉素中介金黄色葡萄球菌 异质性耐万古霉素金黄色葡萄球菌 超微结构
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万古霉素琼脂平板对异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌筛查价值的Meta分析 被引量:4
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作者 蔡淑梅 朱海平 +1 位作者 乔秀梅 金凤玲 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期213-216,224,共5页
目的评价6mg/m L万古霉素平板筛查异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的准确性和特异性。方法计算机检索The Cochrane Library、Pub Med、ISI Web of Knowledge、中文期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、万方数据库,并用辅助手工检索,... 目的评价6mg/m L万古霉素平板筛查异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的准确性和特异性。方法计算机检索The Cochrane Library、Pub Med、ISI Web of Knowledge、中文期刊全文数据库、中文科技期刊数据库、万方数据库,并用辅助手工检索,2名评价员严格根据纳入排除标准收集6mg/m L万古霉素平板筛查异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的文献数据。依据QUADAS质量评价标准评价纳入文献的质量后,用Meta-Disc 1.4软件进行Meta分析。结果最后4篇文献纳入分析,包含873例受试者。4篇文献异质性检验I2大于50%,P<0.05,提示各研究结果间具有统计学异质性,采用随机效应模型进行Meta分析,Meta分析结果显示:万古霉素平板筛查万古霉素不敏感的金黄色葡萄球菌合并敏感性、特异性、阳性预测值、阴性似然比、诊断似然比、阳性预测值、阴性预测值和SROC曲线下面积分别为0.20[95%CI(0.14,0.27)]、0.98[95%CI(097,0.99)]、8.76[95%CI(4.11,18.66)]、0.86[95%CI(0.73,1.02)]、10.74[95%CI(4.66,24.76)]、0.595[95%CI(0.399,0.765)]、0.821[95%CI(0.790,0.849]和0.9044。结论 6mg/m L万古霉素平板筛查万古霉素不敏感菌具有高特异性,但敏感性和诊断准确性都相对较低,建议在临床上使用可联合其它试验筛查,提高其敏感性。 展开更多
关键词 万古霉素平板 异质性万古霉素耐药金黄色葡萄球菌 菌群谱型分析-曲线下面积 META分析
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金黄葡萄球菌肠毒素C3基因的克隆及原核表达 被引量:4
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作者 王敏 曹虹 +2 位作者 李先平 郑荣 吴翔 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期256-260,共5页
目的克隆并原核表达金黄葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)基因。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增SEC3基因中编码成熟蛋白的基因片段,克隆至pET-32a(+)表达载体,构建重组表达质粒SEC3-pET-32a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产... 目的克隆并原核表达金黄葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)基因。方法以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增SEC3基因中编码成熟蛋白的基因片段,克隆至pET-32a(+)表达载体,构建重组表达质粒SEC3-pET-32a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果经PCR扩增获得720bp的SEC3基因;重组表达质粒构建正确;表达产物的相对分子质量约为43000,为可溶性表达;纯化的重组蛋白具有良好的反应原性。结论已成功克隆并原核表达了SEC3基因,为单克隆抗体和诊断试剂的制备及SEC3抗毒素的研制提供了材料。 展开更多
关键词 金黄葡萄球菌 肠毒素C3 克隆 原核表达
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异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌的分离及检测方法的建立 被引量:2
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作者 张晨 金凤玲 +3 位作者 朱海平 姚立琼 陈保锦 元淑巧 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第13期1551-1553,共3页
目的了解异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(h-VISA)的分离情况,并筛选简便可行的h-VISA的检测方法。方法采用琼脂稀释法和E-test法对分离出的113株金黄色葡萄球菌进行检测,筛选出的可疑h-VISA用菌谱分析法进行确认,并对文献推荐的几种... 目的了解异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(h-VISA)的分离情况,并筛选简便可行的h-VISA的检测方法。方法采用琼脂稀释法和E-test法对分离出的113株金黄色葡萄球菌进行检测,筛选出的可疑h-VISA用菌谱分析法进行确认,并对文献推荐的几种方法的筛选效果进行比较。结果检测到1株万古霉素的MIC为3μg/mL和2株MIC为4μg/mL的MR-SA,为万古霉素敏感性减低的金黄色葡萄球菌,其中1株MIC为4μg/mL的MRSA经菌谱分析法证实为h-VISA,本次113株实验菌株h-VISA的检出率为0.88%。结论通过实验证实K-B法并不是检测h-VISA的理想方法,而菌谱分析法则较为有效,分离率为8.3%,且在本实验中灵敏度可达10-8。本院分离的MRSA中已出现万古霉素敏感性减低菌株,并分离出1株h-VISA,可见,MRSA对万古霉素的异质性中介耐药不容忽视,应引起国内医学界的广泛重视。 展开更多
关键词 葡萄球菌 金黄色 万古霉素 异质性耐药 菌谱分析法
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