文摘目的研究六价铬对雄激素受体(AR)转录活性的影响及其与小泛素类似修饰物特异性蛋白酶(SENP)家族分子的相关性。方法(1)293T细胞经K_(2)CrO_(4)0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0和16.0μmol·L^(-1)处理24 h,LNCa P细胞经K_(2)CrO_(4)0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,10.0和20.0μmol·L^(-1)处理24 h,用MTT法检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC_(50))值;(2)将带有荧光素酶报告基因的表达雄激素反应元件的质粒和表达AR的质粒共转染293T细胞,将带有荧光素酶报告基因的表达雄激素反应元件的质粒转染LNCa P细胞,分别用K_(2)CrO_(4)0.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0和16.0μmol·L^(-1)处理24 h,用双荧光素酶报告基因检测系统分析外源性和内源性AR的转录活性。(3)取对数生长期LNCa P细胞,以K_(2)CrO_(4)0.5,2.0和8.0μmol·L^(-1)处理24 h,用逆转录PCR法检测AR和SENP家族分子SENP1,SENP2,SENP3,SENP5,SENP6,SENP7和SENP8 m RNA水平,Western印迹法检测AR,SENP1和SENP3蛋白水平。结果(1)与细胞对照组相比,K_(2)CrO_(4)浓度≥1.0μmol·L^(-1)时293T细胞存活率显著降低(P<0.01),K_(2)CrO_(4)浓度≥2.0μmol·L^(-1)时LNCa P细胞存活率明显降低(P<0.01)。(2)与细胞对照组相比,K_(2)CrO_(4)浓度≥1.0μmol·L^(-1)时293T细胞中外源性AR的转录活性显著增强(P<0.05),K_(2)CrO_(4)4.0和8.0μmol·L^(-1)明显增强LNCa P细胞中内源性AR转录活性(P<0.05)。(3)与细胞对照组相比,K_(2)CrO_(4)0.5,2.0和8.0μmol·L^(-1)均不改变LNCa P细胞中AR m RNA和蛋白水平,而K_(2)CrO_(4)2.0和8.0μmol·L^(-1)组SENP1 m RNA水平显著增加(P<0.05),K_(2)CrO_(4)0.5,2.0和8.0μmol·L^(-1)组SENP3 m RNA水平显著增加(P<0.05)。与细胞对照组相比,K_(2)CrO_(4)8.0μmol·L^(-1)组SENP1蛋白水平显著增加(P<0.01),K_(2)CrO_(4)2.0和8.0μmol·L^(-1)组SENP3蛋白水平显著增加(P<0.05)。结论K_(2)CrO_(4)可能通过上调SENP1和SENP3表达而增强AR转录活性。
