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二至天癸颗粒和右归丸对肾虚小鼠卵细胞Snrpn和Peg1/Mest甲基化状态的影响 被引量:4
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作者 连方 王瑞霞 +3 位作者 王利红 孙振高 石垒 吴海萃 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2013年第18期1580-1584,共5页
目的探讨二至天癸颗粒和右归丸改善体外受精-胚胎移植结局的疗效机制。方法将175只雌性小鼠随机分为正常组(生理盐水0.5ml灌胃)、肾阴虚模型组(甲状腺片按300mg/kg灌胃,连用10天)、肾阴虚治疗组(造模同时每天予二至天癸颗粒0.5ml灌胃)... 目的探讨二至天癸颗粒和右归丸改善体外受精-胚胎移植结局的疗效机制。方法将175只雌性小鼠随机分为正常组(生理盐水0.5ml灌胃)、肾阴虚模型组(甲状腺片按300mg/kg灌胃,连用10天)、肾阴虚治疗组(造模同时每天予二至天癸颗粒0.5ml灌胃)、肾阳虚模型组(氢化可的松注射液按25mg/kg肌肉注射,连用10天)、肾阳虚治疗组(造模同时每天予右归丸0.5ml灌胃),每组35只。实验至第11天进行超排卵,每组30只小鼠取卵,观察卵细胞印迹基因Snrpn和Peg1/Mest甲基化状态,另5只雌鼠和5只雄鼠合笼后取受精卵,观察受精卵数目、卵裂率、成胚率。结果正常组小鼠卵细胞Snrpn和Peg1/Mest基因完全甲基化;肾阴虚、肾阳虚模型组小鼠卵细胞Snrpn和Peg1/Mest基因发生了明显的去甲基化;肾阴虚、肾阳虚治疗组小鼠卵细胞Snrpn和Peg1/Mest基因的去甲基化状态得到了部分纠正。肾阴虚、肾阳虚模型组受精卵数目、卵裂率、囊胚形成率明显低于正常组(P<0.05),肾阴虚、肾阳虚治疗组受精卵数目、卵裂率、囊胚形成率均高于相应的模型组(P<0.05)。结论肾虚可致卵细胞印迹基因Snrpn和Peg1/Mest发生异常去甲基化,二至天癸颗粒和右归丸可防止印迹丢失的发生,改善肾虚小鼠的卵裂率、囊胚形成率,从而发挥补肾治疗不孕症作用。 展开更多
关键词 二至天癸颗粒 右归丸 卵细胞 DNA甲基化 snrpn Peg1 Mest
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印记基因SNRPN、NDN和UBE3A在初生仔猪及胎盘中的表达谱分析 被引量:1
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作者 杨永升 黄琛琛 蒋曹德 《安徽农业科学》 CAS 2013年第7期2844-2847,共4页
[目的]分析印记基因SNRPN、NDN和UBE3A在初生仔猪中的表达情况,从而探讨它们和猪生长发育的关系。[方法]采用荧光定量PCR方法,检测SNRPN、NDN、UBE3A基因在出生3 d仔猪的13种组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉、大脑、垂体、小肠、胃、膀... [目的]分析印记基因SNRPN、NDN和UBE3A在初生仔猪中的表达情况,从而探讨它们和猪生长发育的关系。[方法]采用荧光定量PCR方法,检测SNRPN、NDN、UBE3A基因在出生3 d仔猪的13种组织(心、肝、脾、肺、肾、肌肉、大脑、垂体、小肠、胃、膀胱、脂肪、下丘脑)及不同时期的胎盘中的表达水平。[结果]SNRPN、NDN、UBE3A基因在13种组织中都有表达,SNRPN和NDN基因在下丘脑中表达量极显著(P<0.01)高于其他被测组织,UBE3A基因在肺、小肠和下丘脑中的表达量显著(P<0.05)高于其他被测组织,SNRPN基因在下丘脑中的表达量极显著(P<0.01)高于NDN、UBE3A基因,在梅山猪和杜洛克猪不同时期胎盘中稳定表达。[结论]SNRPN、NDN和UBE3A基因都在下丘脑中高表达,对神经系统的生长发育有重要的影响;同时该研究为这3种基因在猪中的功能研究提供了基础。 展开更多
关键词 荧光定量 snrpn NDN UBE3A 表达
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人SNRPN基因在果蝇S2细胞中的功能研究
3
作者 于骏 武云浩 +3 位作者 何辉 李志然 付杨博 陈霞 《交通医学》 2021年第5期437-440,F0002,共5页
目的:构建人SNRPN(hSNRPN)基因过表达质粒,观察在果蝇S2细胞中的作用,为男性不育症的功能保守性研究提供重要工具。方法:构建pUAS-HA-hSNRPN质粒,利用Ub-GAL4质粒在果蝇S2细胞中驱动pUAS-HA-hSNRPN的表达。采用Western blot和免疫荧光... 目的:构建人SNRPN(hSNRPN)基因过表达质粒,观察在果蝇S2细胞中的作用,为男性不育症的功能保守性研究提供重要工具。方法:构建pUAS-HA-hSNRPN质粒,利用Ub-GAL4质粒在果蝇S2细胞中驱动pUAS-HA-hSNRPN的表达。采用Western blot和免疫荧光染色观察HA-hSNRPN融合蛋白的表达情况。通过免疫荧光染色和qRT-PCR检测hSNRPN基因对果蝇RNA剪接体亚基表达水平的影响。结果:本实验成功构建了pUAS-HA-hSNRPN过表达质粒,并利用Ub-GAL4在果蝇S2细胞中驱动HA-hSNRPN融合蛋白的表达。Western blot检测和免疫荧光染色结果均显示HA-hSNRPN融合蛋白在果蝇S2细胞中成功表达。免疫荧光染色结果显示,在果蝇S2细胞中异位表达hSNRPN基因可下调U2A蛋白。qRT-PCR结果提示,异位表达hSNRPN基因可下调果蝇RNA剪接体关键因子的表达水平。结论:本研究成功实现了HA-hSNRPN融合蛋白在果蝇S2细胞中的表达,hSNRPN可竞争性抑制果蝇RNA剪接体亚基的表达水平。 展开更多
关键词 snrpn 果蝇S2细胞 U2A 剪接体 UAS-Gal4
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印记基因H19和SNRPN CpG位点甲基化状态与精液参数的关联研究
4
作者 彭红莉 胡海翔 +7 位作者 王友信 沈传运 马春晓 张杰 赵飞飞 高晴 刘姣男 宋曼殳 《中国性科学》 2018年第1期70-75,共6页
目的:分析印记基因H19和SNRPN印记控制区的各Cp G位点甲基化状态与男性精液参数的关联。方法:选取2014年4至9月于空军总医院男科就诊的符合纳入排除标准的205例男性为研究对象,采用焦磷酸测序法定量分析H19和SNRPN基因的各Cp G位点的甲... 目的:分析印记基因H19和SNRPN印记控制区的各Cp G位点甲基化状态与男性精液参数的关联。方法:选取2014年4至9月于空军总医院男科就诊的符合纳入排除标准的205例男性为研究对象,采用焦磷酸测序法定量分析H19和SNRPN基因的各Cp G位点的甲基化状态,采用典型相关分析印记基因H19和SNRPN的各Cp G位点的甲基化水平与精液参数两组变量的整体相关性。结果:H19基因的Cp G2和Cp G3甲基化水平与精子密度和精子活动力的相关性具统计学意义;SNRPN基因的Cp G5、Cp G6、Cp G7甲基化水平与精子正常形态率的相关性具统计学意义。结论:印记基因H19和SNRPN印记控制区特定Cp G位点甲基化状态与精液参数有关联。 展开更多
关键词 印记基因 H19 snrpn CpG位点 DNA甲基化 精液参数
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Effects of Vitrification on the Imprinted Gene Snrpn in Neonatal Placental Tissue
5
作者 Jian-Feng Yao Yan-Fang Huang +6 位作者 Rong-Fu Huang Su-Xia Lin Cai-Qiong Guo Cheng-Zhou Hua Pei-Ya Wu Ji-Feng Hu You-Zhu Li 《Reproductive and Developmental Medicine》 CSCD 2020年第1期25-31,共7页
Objective:To investigate the effects of vitrification on the expression of the imprinted gene Snrpn in neonatal placental tissue.Methods:Neonatal placental tissue was collected from women with natural pregnancy(contro... Objective:To investigate the effects of vitrification on the expression of the imprinted gene Snrpn in neonatal placental tissue.Methods:Neonatal placental tissue was collected from women with natural pregnancy(control group)and from women in assisted reproductive technology(ART)pregnancy group,following fresh and vitrified embryo transfer(fresh group and vitrified group,respectively).Snrpn mRNA expression and SNRPN protein levels in placental tissue from these three groups were assessed by real-time reverse transcription polymerase chain reaction and Western blot,respectively.DNA methylation in the Snrpn promoter region was analyzed by bisulfite-pyrosequencing.Results:The expression of Snrpn mRNA and SNRPN protein was found to be higher in placental tissue from the fresh and vitrified ART groups,compared to the control group.There was no significant difference in SNRPN gene or protein expression between the fresh and vitrified groups.DNA methylation at the Snrpn promoter region was not significantly different between these three groups.Conclusions:Human ART may alter the transcriptional expression and protein levels of the imprinted gene Snrpn.However,compared to other ART methods,vitrification may not aggravate or reduce this effect.Moreover,the altered expression of Snrpn is likely not directly related to DNA methylation of the Snrpn promoter region. 展开更多
关键词 Assisted Reproductive Technology Polymerase Chain Reaction snrpn VITRIFICATION Western Blot
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犏牛及其亲本睾丸组织中印记基因SNRPN DMR甲基化与mRNA表达差异研究 被引量:13
6
作者 潘增祥 刘振山 +4 位作者 李隐侠 于莎莉 李明桂 谢庄 李齐发 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第22期4709-4716,共8页
【目的】研究犏牛与黄牛、牦牛睾丸组织SNRPN基因DMR甲基化状态、mRNA表达水平的差异,为揭示犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】根据黄牛SNRPN基因序列设计引物,通过克隆测序获得牦牛SNRPN基因5'端序列,采用亚硫酸氢钠... 【目的】研究犏牛与黄牛、牦牛睾丸组织SNRPN基因DMR甲基化状态、mRNA表达水平的差异,为揭示犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】根据黄牛SNRPN基因序列设计引物,通过克隆测序获得牦牛SNRPN基因5'端序列,采用亚硫酸氢钠测序法检测犏牛及其亲本睾丸组织中SNRPN基因5'端DMR的甲基化状态,并采用Real-time PCR检测犏牛及其亲本睾丸组织中SNRPN基因的表达水平。【结果】牦牛SNRPN基因5'端序列长为1137bp,与黄牛的同源性达98.2%;生物信息学分析发现含有YY1和SP1等甲基化敏感位点。犏牛SNRPN基因DMR的甲基化水平(42.22%)极显著高于黄牛(21.08%)和牦牛(20.81%)(P<0.01)。黄牛和牦牛睾丸组织中SNRPN基因mRNA表达水平高于犏牛,但未达到显著水平(P>0.05)。【结论】犏牛睾丸组织SNRPN基因DMR的甲基化水平极显著高于黄牛和牦牛,且mRNA表达水平低于黄牛和牦牛,说明犏牛SNRPN基因可能是通过DMR区的高甲基化抑制其mRNA表达来阻滞精子发生减数分裂过程。 展开更多
关键词 犏牛 snrpn基因 甲基化 表达水平
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Prader-Willi综合征四例报道(附临床及遗传学诊断) 被引量:4
7
作者 张豫文 洪洁 +3 位作者 贾慧英 戈岩 李小英 宁光 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1123-1128,共6页
目的观察并分析4例Prader Willi综合征(PWS)患者的临床特征及分子遗传基础。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS PCR)以及荧光原位杂交(FISH)技术对4例临床诊断为PWS的患者进行SNRPN基因的分析研究。结果 3例患者MS-PCR结果均提示缺... 目的观察并分析4例Prader Willi综合征(PWS)患者的临床特征及分子遗传基础。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MS PCR)以及荧光原位杂交(FISH)技术对4例临床诊断为PWS的患者进行SNRPN基因的分析研究。结果 3例患者MS-PCR结果均提示缺乏父源的相关片段,而仅母源DNA,即第15号染色体母源单亲二体(matUPD15),FISH检测提示该3例患者SNRPN基因片段不存在微小缺失。另1例患者MS-PCR结果正常;但FISH检测发现1个不平衡移位46,XX,t(7;15)。结论父源15q11-13特异区带缺失及matUPD15亦与我国PWS患者致病的分子病理缺陷有关。临床开展相关的细胞分子遗传学实验诊断对PWS的临床诊断以及分子遗传基础的分析都具有积极的作用。 展开更多
关键词 PRADER-WILLI综合征 snrpn基因 基因印记 单亲二体性 甲基化特异性聚合酶链反应 荧光原位杂交
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印迹基因Snrpn在人类卵母细胞及植入前胚胎mRNA表达 被引量:3
8
作者 马玲 李蓉 +3 位作者 卢丽华 贺蓉 郝桂琴 林秋华 《临床和实验医学杂志》 2007年第5期1-4,共4页
目的了解印迹基因Snrpn在人类卵母细胞和植入前胚胎的表达,以分析Snrpn基因表达对人类卵母细胞和早期胚胎发育的影响。方法采用单细胞巢式逆转录多聚酶链式反应(Single Cell Nested RT-PCR)方法,检测人类卵子和植入前各个阶段胚胎的印... 目的了解印迹基因Snrpn在人类卵母细胞和植入前胚胎的表达,以分析Snrpn基因表达对人类卵母细胞和早期胚胎发育的影响。方法采用单细胞巢式逆转录多聚酶链式反应(Single Cell Nested RT-PCR)方法,检测人类卵子和植入前各个阶段胚胎的印迹基因Snrpn mRNA表达情况。结果Snrpn在人类卵母细胞GV、MI、MII和植入前胚胎2、4、6、8细胞期都有表达,单卵母细胞扩增成功率为87.5%,单个胚胎为75.8%,平均扩增成功率为79.1%。单个卵母细胞和单个卵裂球扩增成功率无显著性差异(P>0.05),但单卵母细胞较单个卵裂球高。结论建立了比较稳定、可靠的单细胞巢式RT-PCR技术检测基因表达。印迹基因Snrpn在人类卵细胞和植入前胚胎的表达对卵子生长和胚胎发育有着重要意义。 展开更多
关键词 印迹基因 snrpn人类卵母细胞植入前胚胎 单细胞巢式RT—PCR
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玻璃化冷冻对体外受精-胚胎移植出生子代胎盘印记基因Snrpn表达的影响 被引量:2
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作者 姚建凤 黄燕芳 +5 位作者 黄荣富 林素霞 郭彩琼 吴培雅 李友筑 胡继芬 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期97-102,共6页
目的探讨玻璃化冷冻技术对出生子代胎盘组织印记基因Snrpn表达的影响。方法收集2015年3月1日—2017年10月31日期间在泉州市妇幼保健院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕患者分娩后的胎盘组织,按移植胚胎是否冻融分... 目的探讨玻璃化冷冻技术对出生子代胎盘组织印记基因Snrpn表达的影响。方法收集2015年3月1日—2017年10月31日期间在泉州市妇幼保健院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕患者分娩后的胎盘组织,按移植胚胎是否冻融分为新鲜周期组和玻璃化冷冻组;收集同期正常妊娠妇女分娩后的胎盘组织作为对照组。运用Real-time RT-PCR和Western blotting分别检测胎盘组织中印记基因 Snrpn表达水平。结果与正常对照组相比,新鲜周期组和玻璃化冷冻组胎盘组织Snrpn mRNA水平和SNRPN蛋白质水平均表达升高,差异有统计学意义(mRNA:P均<0.001;蛋白质:P=0.008,P=0.005),但新鲜周期组和玻璃化冷冻组组间差异均无统计学意义(P=0.212,P=0.286)。结论IVF一定程度上影响了胎盘组织Snrpn基因的表达,而玻璃化冷冻技术本身可能并不加重或减轻这种影响。 展开更多
关键词 受精 体外 胚胎移植 玻璃化冷冻 snrpn基因
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应用甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增和甲基化特异性PCR检测Prader-Willi综合征 被引量:2
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作者 欧展辉 梁雄 孙筱放 《中国优生与遗传杂志》 2012年第7期22-24,共3页
目的比较甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增和甲基化特异性PCR两种方法检测Prader–Willi综合征。方法应用细胞遗传学、甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增和甲基化特异性PCR方法检测1个Prader–Willi综合征家系。结果甲基化特异性... 目的比较甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增和甲基化特异性PCR两种方法检测Prader–Willi综合征。方法应用细胞遗传学、甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增和甲基化特异性PCR方法检测1个Prader–Willi综合征家系。结果甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增和甲基化特异性PCR方法均能对患者进行检测,为缺失型致病,而其父母未见异常。结论甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增方法检测Prader–Willi综合征比甲基化特异性PCR方法提供更多的致病信息。 展开更多
关键词 甲基化特异性多重连接依赖性探针扩增 甲基化特异性PCR Prader–Willi综合征 snrpn基因
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小儿Prader-Willi综合征1例报告——附临床及遗传学诊断 被引量:4
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作者 李秀蓉 谭跃球 +2 位作者 郭青 李麓芸 卢光琇 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2000年第4期297-299,共3页
利用染色体高分辨显带、SNRPN基因甲基化PCR及Southern杂交确诊了 1例Prader-Willi综合征 (PWS)患者。该患儿具有PWS典型症状并伴有糖尿病。通过报道这一病例及复习文献资料 ,分析PWS的临床特征 ,简要讨论其发病机制及遗传学诊断方法。
关键词 PRADER-WILLI综合征 snrpn基因 遗传学诊断
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印记基因的产生、调控机制及相关疾病的研究进展
12
作者 陈梁国 陆莉 《医学综述》 CAS 2022年第22期4401-4408,共8页
印记基因广泛存在于哺乳动物中,其有序调节并表达对正常胚胎及出生后个体的生长发育至关重要。印记基因的维持、擦除和重建主要通过以DNA甲基化为主的表观遗传修饰实现。印记基因簇的常见调控模型为绝缘子模型和长链非编码RNA模型。印... 印记基因广泛存在于哺乳动物中,其有序调节并表达对正常胚胎及出生后个体的生长发育至关重要。印记基因的维持、擦除和重建主要通过以DNA甲基化为主的表观遗传修饰实现。印记基因簇的常见调控模型为绝缘子模型和长链非编码RNA模型。印记基因的表达紊乱与人类多种疾病密切相关,Igf2/H19紊乱会导致Beckwith-Wiedemann综合征或Silver-Russell综合征;Snurf-Snrpn紊乱会导致Angelman综合征或Prader-Willi综合征;Igf2r/Airn、Kcnq1/Kcnqlot1和Dlk1-Dio3的紊乱与肿瘤、中枢神经系统退行性疾病等相关。研究印记基因对于阐明相关疾病发病机制和发现治疗靶点具有重要意义。 展开更多
关键词 印记基因 印记控制区 Igf2/H19 Snurf-snrpn
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一例Prader-Willi综合征的临床及表观遗传学研究
13
作者 沈春芳 洪洁 +3 位作者 叶蕾 徐敏 李小英 宁光 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期451-453,共3页
目的分析Pradet-Willi综合征(PWS)的临床及表观遗传学特征。方法应用重硫酸盐测序法对一例临床高度疑似PWS的患者及其父母的15q11-q13印迹中心SNRPN基因alpha外显子的10个CpG位点的甲基化情况进行分析。结果患者SNRPN基因位点的10个CpG... 目的分析Pradet-Willi综合征(PWS)的临床及表观遗传学特征。方法应用重硫酸盐测序法对一例临床高度疑似PWS的患者及其父母的15q11-q13印迹中心SNRPN基因alpha外显子的10个CpG位点的甲基化情况进行分析。结果患者SNRPN基因位点的10个CpG位点完全甲基化,而其父母则是部分甲基化。结论SNRPN基因位点的DNA甲基化异常可能是该PWS患者的分子遗传缺陷。 展开更多
关键词 Prader—Willi综合征 snrpn基因 基因组印迹 DNA甲基化
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SCNT牛胚胎中PWS/AS基因簇母源印记控制区甲基化模式研究
14
作者 王巍 方东辉 +5 位作者 付茂忠 甘佳 唐慧 石溢 王淮 易军 《中国草食动物科学》 CAS 2018年第3期7-10,共4页
为揭示牛核移植胚胎(SCNT)异常甲基化模式,选择配子期、S期、2-cell、8-cell和桑葚胚5个发育阶段的早期牛核移植胚胎作为试验组,以相应阶段的体外受精胚胎(IVF)作为对照,对核移植胚胎中呈母源印记的PWS/AS基因簇ICR区进行BSP测序,分析了... 为揭示牛核移植胚胎(SCNT)异常甲基化模式,选择配子期、S期、2-cell、8-cell和桑葚胚5个发育阶段的早期牛核移植胚胎作为试验组,以相应阶段的体外受精胚胎(IVF)作为对照,对核移植胚胎中呈母源印记的PWS/AS基因簇ICR区进行BSP测序,分析了SCNT和IVF胚胎不同发育时期SNRPN启动子区域甲基化水平的总体变化模式,并对该区域内的5个甲基化位点分别进行比较,筛选敏感位点。结果表明:SCNT胚胎PWS-IC甲基化水平,各期均无显著性差异(P>0.05),一直维持在较高水平;SCNT胚胎二细胞期PWS-IC甲基化水平极显著低于同期的IVF胚胎(P<0.01);该区域第1个和第5个甲基化位点是去甲基化抑制机制的易感位点。因此,PWS-IC区域甲基化模式改变,导致了SCNT胚胎母源DNA的高甲基化,推测与SCNT胚胎发生过早甲基化重建相关。研究结果可为提高SCNT胚胎克隆成功效率提供理论借鉴。 展开更多
关键词 甲基化 印记基因 snrpn基因 启动子
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Prader-Willi综合征三例报道及文献复习
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作者 付留俊 焦月江 +1 位作者 袁园 姜宏卫 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第B12期474-476,共3页
Prader-Willi综合征(PWS)是一种罕见的肥胖综合征,其发病率约为1/25 000,主要临床表现有多食、肥胖、身材矮小、发育迟缓、新生儿肌低张力、性腺功能低下及生长激素缺乏。本文报道3例PWS,并复习相关文献,以提高临床医生对PWS的认识。
关键词 PRADER-WILLI综合征 snrpn基因 病例报告
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人类卵母细胞及植入前胚胎中印迹基因Snrpn mRNA的表达 被引量:2
16
作者 马玲 李蓉 +1 位作者 周亮 钟凯 《生殖医学杂志》 CAS 2007年第2期111-114,共4页
关键词 印迹基因 snrpn基因 人类卵母细胞 植入前胚胎 单细胞
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