远志寡糖酯化合物的神经保护作用及初步构效关系研究 被引量：21

1

作者 黄志雄 穆丽华 +2 位作者 赵海霞 封聚强 刘屏 《解放军药学学报》 CAS 2012年第5期377-380,384,共5页

目的研究远志中寡糖酯类化合物的神经保护作用和探讨化合物的初步构效关系。方法采用MTT法和BrdU标记法评价寡糖酯单体化合物对神经细胞的保护作用。结果在体外皮质酮诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤模型上,化合物tenifoliside A、tenuifolio... 目的研究远志中寡糖酯类化合物的神经保护作用和探讨化合物的初步构效关系。方法采用MTT法和BrdU标记法评价寡糖酯单体化合物对神经细胞的保护作用。结果在体外皮质酮诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤模型上,化合物tenifoliside A、tenuifoliose J、tenuifolioses A、1-o-(E)-Benzoyl-[3-o-(E)-Alphatolluyl]-β-D-fructofuranosy-(2→1)-[β-D-glu-copyranosyl-(1→2)]-α-D-gluc-opyranosid表现出了很好的神经保护作用,并呈一定的剂量依赖性。结论远志寡糖酯类化合物对皮质酮诱导损伤的SH-SY5Y神经细胞有保护作用,其保护作用强弱与化合物类型及其浓度,化合物的母核结构,取代基位置和取代基种类有关。 展开更多

关键词 远志 寡糖酯 sh—SY5Y细胞 神经保护 构效关系

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重组人酸性成纤维细胞生长因子对神经细胞损伤的保护作用 被引量：10

2

作者 曹定国 周汝滨 +2 位作者 廖霞 陈小平 李校堃 《广东医学院学报》 2007年第2期126-128,共3页

目的建立谷氨酸损伤模型并探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对谷氨酸损伤神经细胞的干预作用。方法利用流式细胞仪观察rhaFGF对正常培养的神经细胞细胞周期的影响,建立细胞损伤模型,将实验分空白组、模型组和rhaFGF保护组,通... 目的建立谷氨酸损伤模型并探讨重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对谷氨酸损伤神经细胞的干预作用。方法利用流式细胞仪观察rhaFGF对正常培养的神经细胞细胞周期的影响,建立细胞损伤模型,将实验分空白组、模型组和rhaFGF保护组,通过形态观察以及MTT法检测各实验组的细胞活力。结果rhaFGF能促进DNA的合成,谷氨酸对细胞损伤程度随浓度的增大而增大,rhaFGF能够拮抗谷氨酸的神经毒。结论rhaFGF能促进神经细胞生长同时拮抗谷氨酸兴奋性毒性而发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 酸性成纤维细胞生长因子 sh-SY5Y细胞 谷氨酸 细胞活力

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西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量：8

3

作者 胡胜全 余惠旻 +3 位作者 刘塔斯 杨大坚 陈新滋 何翠君 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1373-1377,共5页

目的:探究在以SH-SY5Y细胞作为神经元代表,β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默症(Alzheimer′s Disease,AD)体外细胞模型中,西洋参水提物(water extracts of American Ginseng,WEAG)对神经元的保护作用。方法:流式细胞仪(FCM)... 目的:探究在以SH-SY5Y细胞作为神经元代表,β淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导凋亡的阿尔茨海默症(Alzheimer′s Disease,AD)体外细胞模型中,西洋参水提物(water extracts of American Ginseng,WEAG)对神经元的保护作用。方法:流式细胞仪(FCM)检测确定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞凋亡的最佳浓度和时间,以及WEAG抗凋亡的浓度,MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258染色观察细胞形态的变化。结果:50μmol/L Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72 h后,细胞变圆,聚集,Hoechst33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光,FCM检测凋亡率达(37.30±0.69)%,与对照组(1.56±0.80)%比较,差异具有显著性意义(P<0.05)。而Aβ25-35和不同浓度的WEAG(0.5、1、5 mg/ml)同时孵育后,细胞形态明显改善,MTT值显著高于Aβ25-35处理组(P<0.01),凋亡率分别降低到(16.71±1.08)%、(10.52±2.11)%和(3.39±1.65)%,与Aβ25-35损伤组(37.30±0.69)%相比,差异具有统计学意义(p<0.05),并呈现出剂量依赖关系。结论:西洋参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。 展开更多

关键词 sh-SY5Y细胞 AΒ25-35 西洋参水提物 细胞凋亡

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中药对Aβ_(25-35)损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：6

4

作者 胡海燕 金国琴 +3 位作者 张学礼 许言午 夏花英 郑静 《上海中医药大学学报》 CAS 2013年第5期77-81,共5页

目的:研究阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)治疗常用中药熟地黄、黄芪等几种单味药及中药复方左归丸对β淀粉样蛋白(Aβ)产生及聚集的影响,以探讨中药对AD的保护作用。方法:用Aβ25-35对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞进行损伤,制备AD细... 目的:研究阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)治疗常用中药熟地黄、黄芪等几种单味药及中药复方左归丸对β淀粉样蛋白(Aβ)产生及聚集的影响,以探讨中药对AD的保护作用。方法:用Aβ25-35对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞进行损伤,制备AD细胞模型。采用刚果红染色、MTT法检测熟地黄、黄芪、石菖蒲等中药对Aβ聚集的影响;Real-time PCR方法观察这几种中药的药物血清对细胞的β淀粉样蛋白前体(APP)基因、β-分泌酶、γ-分泌酶表达的影响。结果:刚果红染色结果显示,山茱萸、黄芪、当归和左归丸可以抑制Aβ25-35聚合,形成长的淀粉样原纤维;熟地黄、山茱萸、黄芪、当归、左归丸对Aβ所致细胞的损伤均有保护作用,并呈现剂量依赖关系;低浓度的石菖蒲及远志能够保护细胞,但高浓度的石菖蒲和远志对细胞无保护作用。实时定量PCR结果显示,熟地黄、黄芪、左归丸对APP、β-分泌酶及γ-分泌酶的mRNA表达均有不同程度的抑制;当归能抑制β-分泌酶mRNA的表达。结论:熟地黄、山茱萸、黄芪、当归等中药及左归丸对Aβ损伤的神经细胞均有保护作用,其可能是通过抑制APP、β-分泌酶及γ-分泌酶mRNA的表达,从而减少Aβ的产生及聚集、降低Aβ的沉积,以达到防治AD的作用。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 中药 Β淀粉样蛋白 sh—SY5Y细胞 保护作用

原文传递

蕨麻醇提取物对缺氧诱发的神经母细胞瘤细胞损伤效应的拮抗作用 被引量：5

5

作者 黄菲 高宏生 +2 位作者 何文彤 唐琼琳 李素平 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1066-1069,F0003,共5页

目的探讨蕨麻醇提取物对硫代硫酸钠(Na2S2O4)诱发的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞株缺氧损伤的拮抗作用。方法取处于生长对数期的SH-SY5Y细胞,分别设空白对照(D-Hank液)组、缺氧模型(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组及1、0.25、0.062 5 g/L蕨麻... 目的探讨蕨麻醇提取物对硫代硫酸钠(Na2S2O4)诱发的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞株缺氧损伤的拮抗作用。方法取处于生长对数期的SH-SY5Y细胞,分别设空白对照(D-Hank液)组、缺氧模型(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组及1、0.25、0.062 5 g/L蕨麻醇提取物拮抗缺氧(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组,于5%CO2、37℃孵育4 h后,采用MTT试验检测细胞活性,测定上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力,采用悬浮芯片蛋白法测定细胞内单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平7种细胞因子水平。结果与空白对照组比较,缺氧模型组和各剂量蕨麻醇提取物拮抗缺氧组SH-SY5Y细胞活性下降,LDH外漏量和空泡细胞率增大,MCP-1、IL-1β、IFN-γ和TNF-α水平升高,VEGF、IL-6和IL-10含量下降。与缺氧模型组比较,各剂量蕨麻醇提取物拮抗缺氧组细胞活性升高,LDH外漏量和空泡细胞率减少,细胞因子水平发生逆转,其中,MCP-1、IL-6、IFN-γ的改变以1 g/L组最为明显,IL-1β、IL-10、TNF-α、VEGF的变化以0.062 5 g/L组明显。结论蕨麻醇提取物可拮抗连二亚硫酸钠所致SH-SY5Y细胞缺氧损伤效应。 展开更多

关键词 蕨麻醇提取物 硫代硫酸钠 人神经母细胞瘤细胞株 乳酸脱氢酶 缺氧 细胞因子

原文传递

绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用研究 被引量：3

6

作者 杨海玉 刘勇 +3 位作者 胡建新 文丽丹 巢海潮 曾红 《临床与病理杂志》 2016年第12期1900-1904,共5页

目的：体外观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用，初步探讨EGCG治疗酒精性痴呆（alcohol-associated dementia，AAD）的可行性。方法：以SH-SY5Y神经元细胞为... 目的：体外观察绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）对酒精诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用，初步探讨EGCG治疗酒精性痴呆（alcohol-associated dementia，AAD）的可行性。方法：以SH-SY5Y神经元细胞为实验对象，酒精组给予100 mol/L酒精37℃培养24 h， EGCG＋酒精组在其培养液中同时加入不同浓度的EGCG（1~100μmol/L）及100 mol/L酒精，37℃培养24 h；另设相同浓度的EGCG对照组（EGCG组）及空白对照组（对照组）。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活率，以Annexin-V APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡及光镜下观察细胞形态。结果：MTT结果证实EGCG（25~100μmol/L）作用24 h后可明显促进SH-SY5Y细胞存活，并呈浓度依赖关系（P〈0.001）。流式检测及细胞形态观察结果证实酒精组细胞凋亡率（21.82%±1.27%），明显高于对照组（4.90%±0.80%）（P〈0.001）及EGCG组（7.82%±0.68%）（P〈0.001）；EGCG（100μmol/L）＋酒精组细胞凋亡率（10.81%±0.31%），明显低于酒精组（P〈0.001）。结论：EGCG可抑制酒精诱导SH-SY5Y细胞凋亡发生并促进细胞存活，提示EGCG对于AAD治疗具有潜在价值。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 sh—SY5Y细胞 凋亡 酒精性痴呆

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纳米SiO_2对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡诱导作用及其机制 被引量：3

7

作者 杨艳艳 金明华 +7 位作者 李艳博 李阳 王佳慧 郑彤 王思惠 迟翔宇 张宇佳 孙志伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期249-254,I0002,共7页

目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和周期的影响,阐明其作用机制。方法:选取不同浓度粒径为90nm的SiO2颗粒作用于SH-SY5Y细胞,分别为0、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000mg·L-1 SiO2组,其中0mg... 目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和周期的影响,阐明其作用机制。方法:选取不同浓度粒径为90nm的SiO2颗粒作用于SH-SY5Y细胞,分别为0、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000mg·L-1 SiO2组,其中0mg·L-1组为对照组。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率;采用AO/EB染色和AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期百分比和细胞中活性氧(ROS)水平。结果:MTT检测,6.250、12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞存活率低于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞存活率低于3.125mg·L-1 SiO2组(P<0.05)。AO/EB染色和Annexin V-FITC/PI法检测,6.250、12.500、25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组细胞凋亡率高于3.125mg·L-1 SiO2组(P<0.05)。FCM检测,3.125、6.250、12.500、25.000和50.000mg·L-1 SiO2组细胞中ROS水平高于对照组(P<0.05)。25.000和50.000 mg·L-1 SiO2组G0/G1期细胞百分比低于3.125mg·L-1SiO2组和对照组(P<0.05),50.000 mg·L-1 SiO2组G2/M期细胞百分比高于对照组(P<0.05)。结论:纳米SiO2可降低SH-SY5Y细胞的活力,诱导细胞凋亡,增加细胞中ROS水平,可干扰细胞周期进程,对SH-SY5Y细胞的增殖具有抑制作用。 展开更多

关键词 纳米二氧化硅 sh—SY5Y细胞 细胞周期 细胞凋亡

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阿魏酸钠生物学活性——对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量：2

8

作者 赵航 许元鸿 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第3期65-68,共4页

探讨阿魏酸钠对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。分别通过葡萄糖培养液,以及具有阶梯阿魏酸钠含量的葡萄糖混合培养液进行SH-SY5Y细胞培养,持续时间为48 h。对其中细胞的存活率使用MTT比色法检测;通过Hoe... 探讨阿魏酸钠对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。分别通过葡萄糖培养液,以及具有阶梯阿魏酸钠含量的葡萄糖混合培养液进行SH-SY5Y细胞培养,持续时间为48 h。对其中细胞的存活率使用MTT比色法检测;通过Hoechst33258染色观察细胞核形态改变;细胞凋亡率引入流式细胞仪进行测验;离心获得细胞上清液后,使用对其中含有的8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHd G)组分使用酶联免疫吸附法检测。结果显示阿魏酸钠保护组细胞存活率明显升高,细胞核形态明显改善,组细胞早期凋亡率、上清液中8-OHd G的分泌量均明显降低。结果可见,阿魏酸钠对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与阿魏酸钠的抗氧化作用有关。 展开更多

关键词 8-羟基脱氧鸟苷酸 细胞凋亡 高糖 阿魏酸钠 sh—SY5Y细胞

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左金方与反左金方抗MPP^+诱导SH-SY5Y细胞凋亡作用的对比研究 被引量：2

9

作者 方玲子 周红祖 余惠旻 《中南药学》 CAS 2015年第7期708-712,共5页

目的研究左金方和反左金方水提物对四氢吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP+致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予左金方和反左金方水提物干预。应用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡... 目的研究左金方和反左金方水提物对四氢吡啶离子(MPP+)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法体外培养SH-SY5Y细胞,建立MPP+致SH-SY5Y细胞凋亡的模型,同时给予左金方和反左金方水提物干预。应用MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hochest染色观察凋亡细胞形态学的改变。结果0.5 mmol·L-1 MPP+作用于SH-SY5Y细胞60 h可诱导细胞凋亡,细胞存活率降低至(50.87±2.31)%,凋亡率增加至(43.38±1.49)%,Hochest 33258染色可见明显的颗粒状和固缩状荧光。左金方和反左金方水提物与0.5 mmol·L-1 MPP+同时处理SH-SY5Y细胞后,能够明显改变细胞的凋亡学特性,当药物浓度增加到2.0 mg·m L-1时,细胞存活率分别升高至(63.16±1.89)%和(75.19±1.97)%,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);其凋亡率由模型组的(43.38±1.49)%分别降低到(20.17±1.43)%和(9.41±1.27)%(P<0.01),反左金方(热性)抗凋亡的作用更强。结论左金方(寒性)和反左金方(热性)均能对抗由MPP+诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡,而反左金方(热性)抗凋亡作用更强,中药药性不同,其抗凋亡作用亦不同。 展开更多

关键词 sh-SY5Y细胞 四氢吡啶离子 左金方 反左金方 热性 寒性 凋亡

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2,2’,4,4’-四溴联苯醚对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡及p53蛋白表达的影响 被引量：1

10

作者 李晋 匡刚 +2 位作者 赵国栋 夏涛 王爱国 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期219-221,共3页

目的研究PBDE-47对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡和p53蛋白表达的影响。方法用低、中、高剂量(0、0.5、2.5、5μg/ml)的PBDE-47对体外培养的SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后采用流式细胞术检测细胞周期构成比和细胞凋亡率,用Westernb... 目的研究PBDE-47对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞周期、凋亡和p53蛋白表达的影响。方法用低、中、高剂量(0、0.5、2.5、5μg/ml)的PBDE-47对体外培养的SH-SY5Y细胞进行染毒,24h后采用流式细胞术检测细胞周期构成比和细胞凋亡率,用Westernblot检测p53蛋白的表达水平。结果与对照组相比,低、中、高剂量染毒组G0/G1期细胞数均明显增加,S期细胞数均明显减少(P<0.001)。与对照组相比,高剂量染毒组细胞凋亡率明显升高(P<0.001),中、高剂量染毒组p53蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论 PBDE-47可导致SH-SY5Y细胞在G0/G1期发生阻滞及细胞凋亡,并诱导p53蛋白表达增加,PBDE-47导致的细胞周期阻滞与凋亡可能与p53蛋白表达水平增加有关。 展开更多

关键词 2 2’ 4 4’-四溴联苯醚 sh.SY5Y细胞 细胞周期 细胞凋亡 P53蛋白

原文传递

白藜芦醇对SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞增殖的影响研究 被引量：1

11

作者 张海利 祁晓影 +5 位作者 周骏驰 郅倩倩 刘伟佳 秦靖怡 孙雅萍 刘爽 《滨州医学院学报》 2017年第3期161-164,共4页

目的观察不同浓度白藜芦醇及不同作用时间对SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞生长的影响,并对其增殖进行初步研究。方法用MTT方法观察不同浓度(12.5、25、50、100)μmol/L白藜芦醇作用20h、30h、40h后SY5Y细胞存活的数量。用增殖仪器观察不同... 目的观察不同浓度白藜芦醇及不同作用时间对SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞生长的影响,并对其增殖进行初步研究。方法用MTT方法观察不同浓度(12.5、25、50、100)μmol/L白藜芦醇作用20h、30h、40h后SY5Y细胞存活的数量。用增殖仪器观察不同浓度(32、63、125)μmol/L白藜芦醇作用40h内SH-SY5Y细胞数量变化情况。用显微镜观察不同浓度药物作用20h、30h、40h时的细胞状态。结果 MTT结果显示白藜芦醇对SY5Y细胞的抑制率随着药物浓度的增加而增加,并且每个浓度的抑制率在作用40h最大,P值小于0.05,具有统计学意义。增殖仪器显示白藜芦醇能够抑制该细胞的增殖,并且随着白藜芦醇浓度的增加,抑制细胞增殖的作用越明显。药物作用细胞后显微镜观察可看出,白藜芦醇作用的细胞密度变小,变圆、变亮。随着白藜芦醇浓度的增加,抑制细胞增殖的作用越明显。结论白藜芦醇对SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞的增殖具有抑制作用。 展开更多

关键词 白藜芦醇 sh-SY5Y 细胞增殖 浓度 时间

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内质网应激在罗哌卡因诱导SH-SY5Y细胞凋亡中的作用 被引量：1

12

作者 冯亮群 《中国药业》 CAS 2015年第17期13-15,共3页

目的探讨内质网应激在罗哌卡因诱导SH-SY5Y细胞凋亡中的作用。方法罗哌卡因组采用3 mmol/L罗哌卡因处理SH-SY5Y细胞,阻断组采用10μmol/L SB203580及3 mmol/L罗哌卡因处理SH-SY5Y细胞。分析各组细胞增殖活性、凋亡,活性氧簇(ROS)及p38M... 目的探讨内质网应激在罗哌卡因诱导SH-SY5Y细胞凋亡中的作用。方法罗哌卡因组采用3 mmol/L罗哌卡因处理SH-SY5Y细胞,阻断组采用10μmol/L SB203580及3 mmol/L罗哌卡因处理SH-SY5Y细胞。分析各组细胞增殖活性、凋亡,活性氧簇(ROS)及p38MAPK水平。结果与对照组比较,细胞存活率罗哌卡因组显著降低(t=5.29,P<0.05),阻断组较罗哌卡因组显著升高,但显著低于对照组(t=3.18,t=4.96,P<0.05);罗哌卡因组细胞凋亡率较对照组及阻断组显著升高(F=125.16,P<0.05);罗哌卡因组细胞内的ROS水平显著升高(P<0.05),阻断组ROS水平较对照组高(P<0.05)但显著低于罗哌卡因组(P<0.05);各组p38MAPK水平差异无统计学意义(P>0.05),罗哌卡因组p-p38MAPK显著升高,阻断后表达水平降低(P<0.05)。结论罗哌卡因处理SH-SY5Y细胞能诱发细胞内ROS的蓄积,抑制细胞增殖活性,促进凋亡,p38MAPK通路的激活在诱导凋亡的过程中有重要作用。 展开更多

关键词 活性氧簇 罗哌卡因 sh-SY5Y 细胞凋亡

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APP5肽类似物165对链脲佐菌素损伤SH-SY5Y细胞的保护作用 被引量：1

13

作者 崔艳君 王蓬文 +3 位作者 张景艳 王蓉 盛树力 田金洲 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期619-621,共3页

目的探讨体外APP5肽类似物165(下称P165)对链脲佐菌素(STZ)损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法STZ0.8mmol/L作用于SH-SY5Y细胞的损伤模型。通过测定噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酸(LDH)漏出率,瑞氏染色观察细胞形态,Western blot检测相关... 目的探讨体外APP5肽类似物165(下称P165)对链脲佐菌素(STZ)损伤SH-SY5Y细胞的保护作用。方法STZ0.8mmol/L作用于SH-SY5Y细胞的损伤模型。通过测定噻唑蓝(MTT)代谢率、乳酸脱氢酸(LDH)漏出率,瑞氏染色观察细胞形态,Western blot检测相关蛋白,观察P165的保护作用。结果与正常对照组细胞的MTT代谢率(1.00±0.01)和LDH漏出率(201.56±47.54)比较,STZ损伤组细胞MTT代谢率降低(0.84±0.01),LDH漏出率升高(317.83±76.95),差异有统计学意义(P<0.05),细胞胞体面积缩小,胰岛素信号通路相关蛋白IRS-1、PI3K表达减少;P16530μmol/L组细胞MTT代谢率升高(0.91±0.01),LDH漏出率降低(228.53±35.65),细胞形态恢复正常,胰岛素信号通路相关蛋白IRS-1、PI3K表达恢复正常。结论体外STZ与SH-SY5Y细胞共孵育,可能影响胰岛素/胰岛素受体信号转导系统对细胞的促生长作用,而P165可能通过激活该信号通路逆转这种损伤,可作为一种神经营养因子起到保护作用。 展开更多

关键词 APP5肽类似物165 链脲佐菌素 sh-SY5Y细胞 胰岛素信号通路

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miRNA-449对SH-SY5Y细胞增殖活性的抑制作用

14

作者 王丹 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期512-517,522,共7页

目的寻找并验证miRNA-449的靶基因,探讨miRNA-449调控SH-SY5Y细胞增殖活性的分子机制。方法检测神经母细胞瘤及其癌旁组织中的miRNA-449及NOTCH1蛋白的表达并分析其相关性;生物信息学预测miRNA-449与NOTCH1基因3'UTR区的结合靶位,... 目的寻找并验证miRNA-449的靶基因,探讨miRNA-449调控SH-SY5Y细胞增殖活性的分子机制。方法检测神经母细胞瘤及其癌旁组织中的miRNA-449及NOTCH1蛋白的表达并分析其相关性;生物信息学预测miRNA-449与NOTCH1基因3'UTR区的结合靶位,并通过荧光素酶报告基因法进行验证;化学合成miRNA-449模拟物、miRNA-449抑制剂及miRNA-449错义序列,经脂质体转染至SH-SY5Y细胞,转染后48 h,real-time PCR检测细胞中miRNA-449表达,Western blotting检测细胞中NOTCH1蛋白表达;转染后24、48和72 h,CCK-8法检测肿瘤细胞增殖活性。结果与癌旁组织比较,肿瘤组织中miRNA-449表达明显升高,NOTCH1蛋白表达则明显降低,差异均有统计学意义(P=0.002和P=0.021)。miRNA-449在NOTCH1基因3'UTR区存在结合位点5'-CACTGCC-3',并且通过结合位点对NOTCH1基因表达进行负调控。miRNA-449模拟物转染SH-SY5Y细胞,明显抑制细胞内NOTCH1蛋白表达(P=0.006);而miRNA-449抑制剂转染细胞后可明显增强胞内NOTCH1蛋白表达(P=0.018)。在48和72 h时间点,miRNA-449模拟物可明显抑制SH-SY5Y细胞增殖活性,而miRNA-449抑制剂则使细胞增殖活性进一步增强。结论 miRNA-449可以通过抑制其靶基因NOTCH1表达抑制SH-SY5Y细胞增殖活性。 展开更多

关键词 mi RNA-449 sh-SY5Y细胞 荧光素酶 NOTCH1 细胞活性

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低浓度活性氧对多巴胺能神经元增殖的影响

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作者 蒲蜀湘 饶从磊 +4 位作者 梁兵 袁芳 吴培基 杨宁 高聪 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2013年第2期117-119,共3页

目的 探讨低浓度活性氧对多巴胺能神经元增殖的影响.方法 实验组分别用低浓度（10、20和30 μmol/L）过氧化氢（H2O2）干预人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 24 h,对照组加入等体积培养基.应用MTT法检测各组细胞活性;比色法测定各组细胞乳酸... 目的 探讨低浓度活性氧对多巴胺能神经元增殖的影响.方法 实验组分别用低浓度（10、20和30 μmol/L）过氧化氢（H2O2）干预人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y 24 h,对照组加入等体积培养基.应用MTT法检测各组细胞活性;比色法测定各组细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放率.结果 低浓度H2O2干预SH-SY5Y细胞24 h后,10 μmol/L H2O2组、20 μmol/L H2O2组和30 μmol/L H2O2组吸光度A570值分别为1.011 2±0.015 3、1.119 1±0.035 3和1.027 1±0.035 2,与对照组（0.959 0±0.034 7）比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;10、20和30 μmol/L H2O2组之间两两比较,差异均有统计学意义（F=18.727,P＜0.05）,其中20 μmol/L H2O2组促进SH-SY5Y细胞增殖效果最为明显.10、20和30 μmol/L H2O2组LDH释放率分别为（26.00±1.09）％、（24.62±0.77）％、（25.88±0.95）％,与对照组LDH释放率（27.86±1.31）％相比,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）;10、20和30 μmol/L H2O2组之间两两比较,差异无统计学意义（F=3.254,P=0.074）.结论 低浓度活性氧可能对多巴胺能神经元的增殖有促进作用. 展开更多

关键词 帕金森病 活性氧 过氧化氢 多巴胺能神经元 sh-SY5Y细胞 细胞增殖

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稳定沉默Beclin1的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系的构建

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作者 魏传杰 肖双 +3 位作者 江岚 谭琰 黄波 龙鼎新 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期1085-1089,共5页

为了构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体,并建立Beclin1稳定沉默的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系,将合成的shRNA片段连接pGenesil-1质粒,构建成重组质粒pGenesil-1-Beclin1,转化其至感受态大肠杆菌JM109,挑取阳性克隆进行双酶切和DNA测序鉴... 为了构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体,并建立Beclin1稳定沉默的人成神经瘤SH-SY5Y细胞系,将合成的shRNA片段连接pGenesil-1质粒,构建成重组质粒pGenesil-1-Beclin1,转化其至感受态大肠杆菌JM109,挑取阳性克隆进行双酶切和DNA测序鉴定。常规培养SH-SY5Y细胞,将重组质粒pGenesil-1-Beclin1和空白对照质粒pGenesil-1转染SH-SY5Y细胞,G418抗性筛选,在荧光显微镜下挑取单细胞克隆并扩大培养至稳定细胞株,经RT-PCR和Western blot检测Beclin1基因的表达。经酶切和DNA测序鉴定重组真核表达载体构建正确,成功筛选出两株细胞系。和对照组转染pGenesil-1的细胞系相比,转染pGenesil-1-Beclin1细胞系的Beclin1mRNA表达下降71.28%±1.45%(P<0.05),Beclin1蛋白表达下降75.50%±2.63%(P<0.05)。提示已经成功构建pGenesil-1-Beclin1真核表达载体并建立了Beclin1基因稳定沉默的SH-SY5Y细胞系,为研究Beclin1功能提供了细胞模型。 展开更多

关键词 JM109 sh-SY5Y pGenesil-1-Beclin1 G418筛选 细胞克隆

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过表达脑红蛋白对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用及其机制

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作者 杨军 张雄 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第3期241-246,共6页

目的观察过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42(Amyloid-beta 1-42,Aβ_(1-42))诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用,并探讨其机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,经Aβ_(1-42)预处理后转染质粒p EGFP-NGB及空载... 目的观察过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42(Amyloid-beta 1-42,Aβ_(1-42))诱导SH-SY5Y细胞线粒体损伤的保护作用,并探讨其机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,经Aβ_(1-42)预处理后转染质粒p EGFP-NGB及空载体p EGFP-N1,同时设空白对照组(未转染)。MTT法、流式细胞术及JC-1染色法分别检测过表达NGB对Aβ_(1-42)诱导损伤的SH-SY5Y细胞存活率、细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,采用相应试剂盒检测细胞内半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3)、caspase 9、ATP及细胞色素C(cytochrome C,cyto C)氧化酶活性;Western blot法检测细胞中cyto C、凋亡蛋白酶激活因子-1(apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1)、caspase 3及caspase 9蛋白的表达水平。结果过表达NGB可显著提高Aβ_(1-42)诱导损伤SH-SY5Y细胞的存活率(P<0.001)及细胞中cyto C氧化酶、ATP的活性(P<0.01);可显著抑制损伤细胞的凋亡(P<0.05)、线粒体膜电位的降低(P<0.001)及细胞中caspase 3、caspase 9的活性(P<0.01);可明显降低损伤细胞内cyto C、Apaf-1、caspase 3及caspase 9蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 NGB可显著抑制Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞损伤,促进其增殖,其机制可能与NGB恢复线粒体功能及抑制cyto C触发细胞凋亡密切相关。 展开更多

关键词 脑红蛋白 水溶性β-淀粉样蛋白片段1-42 sh-SY5Y细胞 线粒体 细胞损伤

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牛磺酸对Aβ_(1-40)诱导人神经母细胞瘤细胞毒性保护作用

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作者 李凤晓 王蕾 +1 位作者 高胜梅 石艳茜 《青岛大学医学院学报》 CAS 2013年第4期299-302,共4页

目的探讨牛磺酸对Aβ1-40诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞毒性的保护作用及其机制。方法用不同浓度(0.8、8.0、20.0mmol.L-1)牛磺酸预处理SH-SY5Y细胞(牛磺酸组)及不用其处理SH-SY5Y细胞(A1-40模型组),同时加入终浓度为20.0μmol.L-1的... 目的探讨牛磺酸对Aβ1-40诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞毒性的保护作用及其机制。方法用不同浓度(0.8、8.0、20.0mmol.L-1)牛磺酸预处理SH-SY5Y细胞(牛磺酸组)及不用其处理SH-SY5Y细胞(A1-40模型组),同时加入终浓度为20.0μmol.L-1的Aβ1-40,继续培养24h。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率,Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡,流式细胞技术检测细胞线粒体膜电位的变化。结果与A1-40模型组比较,3个浓度牛磺酸处理组细胞存活率明显增高(F=4.16,q=3.05～9.68,P<0.05、0.01);与0.8mmol.L-1牛磺酸组相比,8.0、20.0mmol.L-1牛磺酸组细胞存活率增高(q=4.97～6.63,P<0.01)。Ho-echst33258荧光染色显示,3个浓度牛磺酸组细胞的细胞核呈现均匀的淡蓝色荧光。流式细胞技术检测显示,与A1-40模型组比较,3个浓度牛磺酸组线粒体膜电位均升高(F=17.64,q=4.04～8.72,P<0.05、0.01);与0.8mmol.L-1牛磺酸组相比,8.0、20.0mmol.L-1牛磺酸组线粒体膜电位升高(q=3.48～4.69,P<0.05)。结论牛磺酸对Aβ1-40诱导的SH-SY5Y细胞毒性有明显的保护作用,其机制可能与稳定线粒体膜电位而拮抗细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 牛磺酸 sh-SY5Y细胞 Β淀粉样肽 线粒体 膜电位

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五味子乙素对谷氨酸诱导SH-SY5Y细胞损伤的保护作用及其机制 被引量：8

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作者 杨擎 隋欣 +10 位作者 王宝森 于智莘 朱凯 律广富 王建玮 闫文昊 张慧媛 林嘉楠 刘英娜 李娜 曲晓波 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期80-84,共5页

目的:探讨五味子乙素(SchB)对谷氨酸(Glu)致人神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的保护作用,阐明其对ATR信号通路的影响。方法:将处于对数生长期的SH-SY5Y细胞分为对照组、DMSO组、模型组、SchB1组、SchB2组和SchB3组。对照组SH-SY5Y细胞不... 目的:探讨五味子乙素(SchB)对谷氨酸(Glu)致人神经母瘤细胞SH-SY5Y细胞损伤的保护作用,阐明其对ATR信号通路的影响。方法:将处于对数生长期的SH-SY5Y细胞分为对照组、DMSO组、模型组、SchB1组、SchB2组和SchB3组。对照组SH-SY5Y细胞不做任何处理;DMSO组SH-SY5Y细胞用17mmol·L^(-1) DMSO作用24h;模型组SH-SY5Y细胞用20 mmol·L^(-1) Glu孵育24h造成细胞损伤模型;SchB1、SchB2和SchB3组采用0.05、0.10和1.00μmol·L^(-1)浓度SchB预处理SH-SY5Y细胞24h后再用Glu(20mmol·L^(-1))继续孵育24h。MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting法检测ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达情况。结果:MTT法检测,与模型组比较,SchB1、SchB2和SchB3组细胞存活率明显升高(P<0.05或P<0.01),且SchB2组细胞存活率最高,故选取SchB2组作为SchB组进行后续实验。细胞周期检测,与对照组比较,模型组G0/G1期细胞所占百分比降低(P<0.05),S期和G2/M期细胞所占百分比升高(P<0.05);与模型组比较,SchB组G0/G1期细胞所占百分比升高(P<0.05),S期和G2/M期细胞所占百分比降低(P<0.05)。Western blotting法检测,与对照组比较,模型组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,SchB组细胞中ATR、p-CHK1、p-Cdc25c和P53蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论:SchB对Glu致SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用,其机制可能与下调ATR信号通路、减少细胞周期阻滞有关。 展开更多

关键词 五味子乙素 ATR信号通路 sh-SY5Y细胞 谷氨酸

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海康灵含药血清在体外对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用 被引量：5

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作者 孙向红 刘洪玲 耿美玉 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第19期1465-1468,共4页

目的观察海康灵含药血清(HKL-serum)对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞过氧化氢(H2O2)损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,检测HKL-serum对SH-S... 目的观察海康灵含药血清(HKL-serum)对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞过氧化氢(H2O2)损伤模型。通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法)、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,检测HKL-serum对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用。结果同造模组比较,10%,15%HKL-serum能减轻H2O2引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率,减少LDH的释放量。结论结果显示,HKL-serum对SH-SY5Y神经细胞损伤具有明显的保护作用。 展开更多

关键词 海康灵 H2O2 sh—sysy神经细胞

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