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胞外高浓度ATP诱导SH-SY5Y细胞的自噬和凋亡 被引量:5
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作者 卢娜 白瑞樱 +4 位作者 魏林郁 李超堃 李新娟 赵红岗 李东亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1388-1393,共6页
目的:观察胞外高浓度ATP损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,探讨损伤中自噬和凋亡发生的规律和特点。方法:培养的SH-SY5Y细胞按照加入ATP的浓度和作用时间进行分组。CCK-8法检测细胞生存率,单丹磺酰戊二胺染色检测自噬空泡的变化,Hoe... 目的:观察胞外高浓度ATP损伤人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,探讨损伤中自噬和凋亡发生的规律和特点。方法:培养的SH-SY5Y细胞按照加入ATP的浓度和作用时间进行分组。CCK-8法检测细胞生存率,单丹磺酰戊二胺染色检测自噬空泡的变化,Hoechst 33258染色检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率变化,蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)的表达。结果:(1)与对照组相比,不同浓度(3、6、9、12、15 mmol/L)的ATP作用3 h均使SH-SY5Y细胞存活率明显降低,且呈剂量依赖性;不同作用时间(1、2、3、6 h)ATP(6 mmol/L)也可使SHSY5Y细胞存活率明显降低,3 h达高峰,呈时间依赖性。(2)ATP作用1 h时SH-SY5Y细胞自噬空泡显著增多(P<0.05),随时间延长,6 h时降到对照水平;ATP作用1 h时,LC3-Ⅱ表达显著增强(P<0.05),形成高峰,与自噬空泡增多的时点重合,2 h、3 h时LC3-Ⅱ表达水平逐渐减弱,6 h时降到对照水平。(3)与对照组相比,ATP作用3 h后细胞凋亡率达高峰(P<0.05),6 h时仍然保持在3 h的水平;cleaved caspase-3表达量同步增强(P<0.05),6 h时达高峰。结论:胞外高浓度ATP能够诱导SH-SY5Y细胞自噬和凋亡;自噬增强在前,凋亡高潮在后;随着ATP作用时间的延长,凋亡占主导地位。 展开更多
关键词 腺苷三磷酸 sh-sy5 Y细胞 自噬 细胞凋亡
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红景天苷对缺氧/缺糖损伤神经细胞的保护作用 被引量:72
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作者 张文生 朱陵群 +2 位作者 牛福玲 邓瑞春 马传香 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期459-462,共4页
目的 :以SH SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤为模型 ,观察红景天苷对神经细胞保护的作用。方法 :流式细胞术检测细胞凋亡百分率及细胞内 [Ca2 + ]i浓度 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率 ,用试剂盒显色法测定LDH的含量。结果 :缺氧 /... 目的 :以SH SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤为模型 ,观察红景天苷对神经细胞保护的作用。方法 :流式细胞术检测细胞凋亡百分率及细胞内 [Ca2 + ]i浓度 ,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率 ,用试剂盒显色法测定LDH的含量。结果 :缺氧 /缺糖损伤 2h可诱导神经细胞凋亡和坏死 ,分别为 18.5 9% (P <0 .0 1)和 4 .94 % (P <0 .0 1)。形态学观察也发现大量神经细胞染色质凝聚 ,核碎裂 ,凋亡小体产生 ,并显著增加细胞内 [Ca2 + ]i浓度和LDH的释放 ,分别为 8.4 6nmol·L-1(P <0 .0 1)和 16 .5 9% (P <0 .0 1) ,并随缺氧 /缺糖损伤时间的延长而明显增高 ;红景天苷 (1~ 3μmol·L-1)能显著降低神经细胞凋亡及坏死的百分率 ,降低细胞内 [Ca2 + ]i浓度 ,减少LDH的释放 ,其作用随剂量增加而作用增强。结论 :红景天苷具有抑制SH SY5Y细胞凋亡的作用 ,可对神经细胞起到保护作用 ,这种作用可能与其降低细胞内 [Ca2 + ]i浓度有关。 展开更多
关键词 红景天苷 缺氧损伤 缺糖损伤 神经细胞 sh-sy5Y
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SH-SY5Y human neuroblastoma cell line: in vitro cell model of dopaminergic neurons in Parkinson's disease 被引量:41
3
作者 XIE Hong-rong HU Lin-sen LI Guo-yi 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2010年第8期1086-1092,共7页
Objective To evaluate the human neuroblastoma SH-SY5Y cell line as an in vitro model of dopaminergic (DAergic) neurons for Parkinson's disease (PD) research and to determine the effect of differentiation on this ... Objective To evaluate the human neuroblastoma SH-SY5Y cell line as an in vitro model of dopaminergic (DAergic) neurons for Parkinson's disease (PD) research and to determine the effect of differentiation on this cell model. Date sources The data of this review were selected from the original reports and reviews related to SH-SY5Y cells published in Chinese and foreign journals (Pubmed 1973 to 2009). Study selection After searching the literature, 60 articles were selected to address this review. Results The SH-SY5Y cell line has become a popular cell model for PD research because this cell line posses many characteristics of DAergic neurons. For example, these cells express tyrosine hydroxylase and dopamine-13-hydroxylase, as well as the dopamine transporter. Moreover, this cell line can be differentiated into a functionally mature neuronal phenotype in the presence of various agents. Upon differentiation, SH-SY5Y cells stop proliferating and a constant cell number is subsequently maintained. However, different differentiating agents induce different neuronal phenotypes and biochemical changes. For example, retinoic acid induces differentiation toward a cholinergic neuronal phenotype and increases the susceptibility of SH-SY5Y cells to neurotoxins and neuroprotective agents, whereas treatment with retinoic acid followed by phorbol ester 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate results in a DAergic neuronal phenotype and decreases the susceptibility of cells to neurotoxins and neuroprotective agents. Some differentiating agents also alter kinetics of 1-methyl-4-phenyl-pyridinium (MPP~) uptake, making SH-SY5Y cells more similar to primary mesencephalic neurons. Conclusions Differentiated and undifferentiated SH-SY5Y cells have been widely used as a cell model of DAergic neurons for PD research. Some differentiating agents afford SH-SY5Y cells with more potential for studying neurotoxiclty and neuroprotection and are thus more relevant to experimental PD research. 展开更多
关键词 Parkinson's disease sh-sy5Y cells cell model DIFFERENTIATION dopaminergic neuron
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松果菊苷对TNFα诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量:34
4
作者 邓敏 赵金垣 +2 位作者 屠鹏飞 姜永 陈静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期169-174,共6页
 目的 探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法 用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变...  目的 探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法 用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变化,并用荧光酶标仪测定caspase 3的活性。结果 100μg·L-1 TNFα处理细胞 36h显著降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达37%;细胞内活性氧水平及caspase 3的活性升高;而线粒体膜电位却明显降低,红 /绿荧光强度的比值由正常的 5 97降低为 0 35左右。而预先给予 1, 10或者 100mg·L-1浓度的松果菊苷处理细胞 2h,可提高细胞存活率;并可有效抑制DNAladder的发生;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25 9%, 18 3% 和 8 2%;激光共聚焦显微镜结果显示松果菊苷可明显抑制细胞内活性氧产生;并可逐渐恢复线粒体的高能量状态;caspase 3的活性不断降低,并呈现了一定的剂量依赖性。结论 松果菊苷能抑制TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平,抑制caspase 3的活性和维持线粒体膜电位的高能状态有关。 展开更多
关键词 松果菊苷 细胞凋亡 TNFΑ sh-sy5Y细胞 线粒体 膜电位 活性氧 caspase-3
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黄芩黄酮对H_(2)O_(2)导致的神经细胞损伤的保护作用 被引量:25
5
作者 高中洪 黄开勋 徐辉碧 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期589-590,共2页
关键词 黄芩 黄酮 人成神经瘤细胞 过氧化氢
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丹参素对缺氧/缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响 被引量:21
6
作者 庞鹤 朱陵群 +3 位作者 张文生 王硕仁 牛福玲 崔巍 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期329-332,共4页
目的:观察丹参素对神经细胞SH-SY5Y缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位(MMP)和凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞分为5组:对照组、模型组、尼莫地平组及丹参素15、30mg/L组,给予相应处理后分别培养2、4、6、12h。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色实验检... 目的:观察丹参素对神经细胞SH-SY5Y缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位(MMP)和凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞分为5组:对照组、模型组、尼莫地平组及丹参素15、30mg/L组,给予相应处理后分别培养2、4、6、12h。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色实验检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果:缺氧/缺糖损伤2h,模型组的线粒体活性和MMP水平较对照组显著降低(P<0.01),并随缺氧/缺糖损伤时间的延长而变化越显著。而细胞凋亡和坏死的百分率均较对照组显著升高(P<0.01),形态学观察也发现染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多。丹参素能显著提高SH-SY5Y细胞线粒体膜电位和活性,降低细胞凋亡及坏死的百分率,其作用随剂量增加而作用增加。结论:丹参素可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生。 展开更多
关键词 丹参素 sh-sy5Y 线粒体膜电位 凋亡 缺氧/缺糖
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三七总皂苷抑制缺氧缺糖/复氧复糖诱导的SH-SY5Y细胞焦亡 被引量:27
7
作者 唐标 唐文静 +2 位作者 戴姿薇 佘旭 邓常清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1178-1184,共7页
目的:探讨三七总皂苷(PNS)对缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞焦亡的调控作用。方法:以OGD/R诱导构建体外缺血再灌注SH-SY5Y细胞模型,观察PNS对SH-SY5Y细胞活力(CCK-8法)及细胞膜通透性[表示为乳酸脱氢酶(LDH)漏出率和碘化丙... 目的:探讨三七总皂苷(PNS)对缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)诱导的SH-SY5Y细胞焦亡的调控作用。方法:以OGD/R诱导构建体外缺血再灌注SH-SY5Y细胞模型,观察PNS对SH-SY5Y细胞活力(CCK-8法)及细胞膜通透性[表示为乳酸脱氢酶(LDH)漏出率和碘化丙啶(PI)染色阳性细胞比例]的影响,分析PNS对细胞中gasdermin D(GSDMD)、GSDMD N端片段(GSDMD-N)、caspase-1和caspase-4蛋白水平变化以及白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18释放的影响。结果:OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞活力显著降低(P<0.01),LDH漏出率和PI染色阳性细胞比例显著升高(P<0.01),即细胞通透性增加;细胞内GSDMD、GSDMD-N、caspase-1及caspase-4蛋白水平显著升高,IL-1β和IL-18释放显著增加(P<0.01)。PNS干预可增强OGD/R抑制的SH-SY5Y细胞活力(P<0.01),降低LDH漏出率和PI染色阳性细胞比例(P<0.05或P<0.01),即降低细胞膜通透性;并降低细胞GSDMD、GSDMD-N、caspase-1及caspase-4蛋白水平(P<0.05或P<0.01),抑制IL-1β和IL-18释放(P<0.05或P<0.01)。结论:PNS可减轻OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其机制可能与抑制OGD/R诱导的细胞焦亡有关。 展开更多
关键词 三七总皂苷 缺氧缺糖/复氧复糖 sh-sy5Y细胞 细胞焦亡
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丹参素对缺氧/缺糖损伤神经细胞线粒体的保护作用 被引量:18
8
作者 张文生 朱陵群 +1 位作者 张丽慧 牛福玲 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期53-56,共4页
目的 观察丹参素对SH SY5Y细胞缺氧 缺糖损伤时胞浆内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞活性和线粒体膜电位的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体的保护作用及其可能的机理。方法 应用细胞培养、四唑盐比色实验 (MTT)检测细胞活力 ,流式细胞... 目的 观察丹参素对SH SY5Y细胞缺氧 缺糖损伤时胞浆内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞活性和线粒体膜电位的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体的保护作用及其可能的机理。方法 应用细胞培养、四唑盐比色实验 (MTT)检测细胞活力 ,流式细胞术检测细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。结果 SH SY5Y细胞缺氧 缺糖损伤 2h时 ,细胞内 [Ca2 + ]i明显增加 ,为 8 4 6nmol L(P <0 0 1) ,细胞凋亡率明显增高 ,为 18 5 9% (P <0 0 1) ,细胞内 [Ca2 + ]i的浓度 4h时达到高峰 ,为 9 89nmol L(P <0 0 1) ,而后呈下降趋势 ,细胞凋亡率随缺氧 缺糖损伤时间的延长而明显增高12h时达到 4 5 91% ,细胞经缺氧 缺糖处理 2h后 ,线粒体膜电位和细胞活性分别降低 2 9 17% (P<0 0 1)、38 80 % (P <0 0 1) ,随着缺氧 缺糖时间的延长线粒体膜电位和细胞活性进一步下降 ,12h时分别降低 5 6 72 % (P <0 0 1)、6 3 5 8% (P <0 0 1) ,丹参素能显著降低细胞内 [Ca2 + ]i,抑制细胞凋亡的发生 ,提高细胞活性和线粒体膜电位 ,与缺氧 缺糖组相比均有显著性差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 丹参素可抑制缺氧 缺糖损伤所致的线粒体膜电位的降低 ,从而具有稳定线粒体膜电位的作用 ,抑制细胞凋亡的发生 。 展开更多
关键词 丹参素 神经细胞 线粒体膜电位 缺氧/缺糖
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茯苓酸对TNF-α诱导SH-SY5Y细胞炎症氧化应激反应和凋亡的拮抗作用研究 被引量:26
9
作者 秦劭晨 王爱梅 李若瑜 《中国中医药科技》 CAS 2019年第6期854-858,共5页
目的:探讨茯苓酸对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导SH-SY5Y细胞炎症、氧化应激损伤和凋亡的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,用TNF-α诱导SH-SY5Y造模,将细胞分为正常组、模型组、茯苓酸组、依达拉奉组。采用噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞... 目的:探讨茯苓酸对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导SH-SY5Y细胞炎症、氧化应激损伤和凋亡的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,用TNF-α诱导SH-SY5Y造模,将细胞分为正常组、模型组、茯苓酸组、依达拉奉组。采用噻唑蓝比色(MTT)法检测细胞增殖能力,用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH),超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)、磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)和核因子E2相关因子2(nuclear Nrf2)的蛋白表达。结果:在50 mg/L浓度时,TNF-α对SH-SY5Y细胞有明显的抑制作用(P<0.01)。与模型组比较,茯苓酸组和依达拉奉组SH-SY5Y细胞的LDH、MDA和IL-6、IL-1β的含量及BAX,p-ERK和nuclear Nrf2的表达显著减少(P<0.05或P<0.01),而SOD含量和BCL-2表达显著增加(P<0.05或P<0.01)。结论:茯苓有效成分茯苓酸具有抑制TNF-α诱导SH-SY5Y的炎症和氧化应激损伤作用,可能是通过下调ERK/Nrf2信号通路的Nrf2进入细胞核达到抑制细胞凋亡的作用机制。 展开更多
关键词 茯苓酸 肿瘤坏死因子 sh-sy5Y细胞 炎症 氧化应激 ERK/Nfr2通路 凋亡 体外实验
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三七皂苷R_1对Aβ_(1-42)诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量:23
10
作者 马涛 辛文锋 +1 位作者 张文生 王永炎 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期303-307,共5页
目的:探讨三七皂苷R1对Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护机制。方法:MIT法检测细胞存活率;PI/Annexin V双染流式细胞术分析细胞凋亡率;Westernblot法检测细胞中Bax,Bcl-2的表达;ELISA法检测easpase-3,caspase-8及caspase-9的... 目的:探讨三七皂苷R1对Aβ1-42诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护机制。方法:MIT法检测细胞存活率;PI/Annexin V双染流式细胞术分析细胞凋亡率;Westernblot法检测细胞中Bax,Bcl-2的表达;ELISA法检测easpase-3,caspase-8及caspase-9的酶活性。结果:6.25,12.5,25,50,100nmol·L^-1的三七皂苷R1对Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞凋亡均有一定保护作用,并呈剂量依赖关系;PI/Annexin V双染流式细胞术检测结果表明Aβ1-42可诱导SH-SYSY细胞发生凋亡,6.25~100nmol·L^-1的三七皂苷R1可显著降低细胞凋亡率。Westernblot结果显示,6.25~100nmol·L^-1的三七皂苷R1可下调Bax表达,上调Bcl-2表达;ELISA分析显示不同剂量的三七皂苷R1可抑制Aβ1-42诱导的SH-SY5Y细胞caspase-3和caspase-9的激活,但对caspase-8的激活没有影响。结论:三七皂苷R1通过抑制线粒体相关的凋亡通路激活,减少Aβ1-42诱导的SH-SYSY细胞凋亡。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 三七皂苷R1 细胞凋亡 线粒体 sh-sy5Y细胞 AΒ1-42
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红景天甙对缺氧/缺糖损伤的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响 被引量:17
11
作者 张文生 朱陵群 +2 位作者 邓瑞春 牛福玲 田蓉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1218-1221,共4页
目的 :观察红景天甙对SH -SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤时细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位和活性的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体膜电位的影响。方法 :应用细胞培养 ,四唑盐比色实验 (MTT )检测细胞线粒体活性 ,流式细胞术... 目的 :观察红景天甙对SH -SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤时细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡率、细胞线粒体膜电位和活性的变化 ,探讨其对神经细胞线粒体膜电位的影响。方法 :应用细胞培养 ,四唑盐比色实验 (MTT )检测细胞线粒体活性 ,流式细胞术检测细胞内 [Ca2 + ]i、细胞凋亡百分率和线粒体膜电位。结果 :SH -SY5Y细胞缺氧 /缺糖损伤 2、4、6、12h后 ,细胞内 [Ca2 + ]i和细胞凋亡百分率明显高于对照组 ,均有显著差异 (P <0 0 1) ;细胞经缺氧 /缺糖处理后 ,线粒体膜电位和活性明显低于对照组 ,2h时分别为 2 9 17% (P <0 0 1) ,38 80 % (P <0 0 1) ,12h时分别为5 6 72 % (P <0 0 1) ,6 3 5 8% (P <0 0 1) ;红景天甙能显著降低细胞内 [Ca2 + ]i,抑制细胞凋亡的发生 ,提高线粒体膜电位和活性 ,与缺氧 /缺糖损伤组相比均有显著差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :红景天甙可抑制缺氧 /缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低 ,从而具有稳定线粒体膜电位的作用 ,抑制细胞凋亡的发生 。 展开更多
关键词 红景天甙 sh-sy5Y细胞 线粒体 膜电位 细胞凋亡 缺氧 低血糖症
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APP17肽对Aβ_(25-35)诱导神经细胞凋亡保护作用 被引量:19
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作者 蔡贞 姬志娟 +1 位作者 徐艳玲 盛树力 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期31-35,共5页
目的 通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ2 5 3 5诱发SH SY5Y细胞凋亡是否有保护作用 ,并对其保护作用机制作进一步的探讨。方法 选用细胞形态观察、半定量LM PCRDNAladderAssay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17... 目的 通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ2 5 3 5诱发SH SY5Y细胞凋亡是否有保护作用 ,并对其保护作用机制作进一步的探讨。方法 选用细胞形态观察、半定量LM PCRDNAladderAssay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17肽是否对Aβ2 5 3 5诱发SH SY5Y细胞凋亡有保护作用 ;通过测定细胞MTT代谢率 ,共聚焦显微镜观察Aβ2 5 3 5和APP17肽对细胞内过氧化物含量、线粒体膜电位的影响以及WesternBlotting观察细胞内凋亡诱导因子AIF及核转录因子NF κB的表达情况 ,探讨了APP17肽的保护作用机制。结果 APP17肽可以明显改善Aβ2 5 3 5造成的细胞形态损伤 ,显著降低细胞凋亡比率 ;与Aβ2 5 3 5损伤组相比 ,APP17肽预孵育能明显提高细胞MTT代谢率 ,稳定线粒体膜电位 ,减少AIF的表达 ;有效降低Aβ2 5 3 5引起的细胞内过氧化物含量增高 ;并且使具有神经保护作用的核转录因子NF κB表达增加。结论 APP17肽可以稳定线粒体功能、降低细胞内过氧化物含量 ,激活NF κB并使其持续表达 ,对Aβ2 5 3 5诱导的SH SY5Y细胞凋亡有比较明显的保护作用。 展开更多
关键词 AΒ25-35 APP17肽 sh-sy5Y细胞 线粒体 神经细胞 细胞凋亡 神经退行性疾病
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川芎对神经细胞保护作用活性成分的研究 被引量:20
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作者 王敏 姚明江 +4 位作者 刘建勋 吴昱杰 王攀 任钧国 范晓迪 《世界中西医结合杂志》 2021年第5期793-798,共6页
目的对川芎中主要的几种成分神经保护的活性进行研究。方法采用CCK-8法检测洋川芎内酯Ⅰ(SEI)、洋川芎内酯H(SEH)、洋川芎内酯A(SEA)、阿魏酸(FA)、藁本内酯(LIG)5种成分对SH-SY5Y细胞毒性;CCK-8法检测不同缺氧、复氧时间对细胞存活率... 目的对川芎中主要的几种成分神经保护的活性进行研究。方法采用CCK-8法检测洋川芎内酯Ⅰ(SEI)、洋川芎内酯H(SEH)、洋川芎内酯A(SEA)、阿魏酸(FA)、藁本内酯(LIG)5种成分对SH-SY5Y细胞毒性;CCK-8法检测不同缺氧、复氧时间对细胞存活率的影响,建立氧糖剥夺/复氧复糖(oxygen glucose deprivation-reoxygenation,OGD-R)为模型;分别检测化合物给药后对OGD-R损伤模型细胞存活率的影响、对缺氧液和复氧液中乳酸脱氢酶(LDH)释放的影响以及应用流式细胞术检测细胞内活性氧ROS的变化。结果SEI 100μmol/L、SEH 50μmol/L、SEA 200μmol/L、LIG 25μmol/L、FA 100μmol/L及以下浓度对细胞无明显毒性,可用于进一步实验研究;细胞缺氧缺糖2 h,复氧复糖24 h可作为神经保护药物活性筛选的条件;与模型组比较,SEI(50μmol/L)、FA(50、25μmol/L)、LIG(12.5、6.25μmol/L)均能显著抑制模型损伤细胞存活率的下降;SEI(50、25μmol/L)、FA(50μmol/L)、LIG(6.25μmol/L)均能显著降低LDH释放,FA 25μmol/L、LIG 12.5μmol/L对LDH无显著性影响;SEI(50、25μmol/L)、LIG(12.5、6.25μmol/L)均能降低细胞内ROS。结论SEI、LIG对细胞存活率、LDH活力、细胞内ROS均有改善作用,其中SEI对LDH抑制作用更明显且呈剂量依赖,SEI和LIG在神经保护中的药理作用需进一步研究。 展开更多
关键词 川芎 洋川芎内酯Ⅰ 藁本内酯 阿魏酸 氧糖剥夺 sh-sy5Y
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远志寡糖酯化合物的神经保护作用及初步构效关系研究 被引量:21
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作者 黄志雄 穆丽华 +2 位作者 赵海霞 封聚强 刘屏 《解放军药学学报》 CAS 2012年第5期377-380,384,共5页
目的研究远志中寡糖酯类化合物的神经保护作用和探讨化合物的初步构效关系。方法采用MTT法和BrdU标记法评价寡糖酯单体化合物对神经细胞的保护作用。结果在体外皮质酮诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤模型上,化合物tenifoliside A、tenuifolio... 目的研究远志中寡糖酯类化合物的神经保护作用和探讨化合物的初步构效关系。方法采用MTT法和BrdU标记法评价寡糖酯单体化合物对神经细胞的保护作用。结果在体外皮质酮诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤模型上,化合物tenifoliside A、tenuifoliose J、tenuifolioses A、1-o-(E)-Benzoyl-[3-o-(E)-Alphatolluyl]-β-D-fructofuranosy-(2→1)-[β-D-glu-copyranosyl-(1→2)]-α-D-gluc-opyranosid表现出了很好的神经保护作用,并呈一定的剂量依赖性。结论远志寡糖酯类化合物对皮质酮诱导损伤的SH-SY5Y神经细胞有保护作用,其保护作用强弱与化合物类型及其浓度,化合物的母核结构,取代基位置和取代基种类有关。 展开更多
关键词 远志 寡糖酯 shsy5Y细胞 神经保护 构效关系
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绿萼梅乙酸乙酯部位的化学成分研究 被引量:20
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作者 王灿灿 张伟 +3 位作者 吴德玲 许凤清 刘劲松 乔金为 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期347-351,共5页
利用多种色谱分离技术对绿萼梅乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,通过核磁共振、质谱和相关文献对其进行结构鉴定,从中共分离并鉴定出8个化合物,分别为isoquercitrin-6″-O-benzoate(1)、松脂醇(2)、柚皮素(3)、乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)... 利用多种色谱分离技术对绿萼梅乙酸乙酯萃取部位进行分离纯化,通过核磁共振、质谱和相关文献对其进行结构鉴定,从中共分离并鉴定出8个化合物,分别为isoquercitrin-6″-O-benzoate(1)、松脂醇(2)、柚皮素(3)、乙基-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、紫云英苷(5)、槲皮素(6)、金丝桃苷(7)、芦丁(8)。其中化合物1为新天然产物,化合物2~5均为首次从该植物中分离得到。对化合物1,3,5~8进行皮质酮诱导SH-SY5Y细胞的保护作用的筛选,MTT法测定结果显示以上化合物均能显著提高SH-SY5Y细胞的存活率。 展开更多
关键词 绿萼梅 化学成分 sh-sy5Y细胞
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雷帕霉素对不同肿瘤细胞Bax/Bcl-2和活性caspase-3表达的影响 被引量:19
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作者 刘郁东 郑启新 +3 位作者 吴宏斌 郭晓东 李景峰 郝少飞 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期138-143,163,共7页
目的:探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对不同肿瘤细胞Bax/Bcl-2和活性caspase-3表达的影响及其可能的机制。方法:采用RAPA处理肺腺癌A549细胞、人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞和人骨肉瘤MG63细胞后,MTT法检测细胞的相对增殖率,蛋白质印迹法检... 目的:探讨雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对不同肿瘤细胞Bax/Bcl-2和活性caspase-3表达的影响及其可能的机制。方法:采用RAPA处理肺腺癌A549细胞、人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞和人骨肉瘤MG63细胞后,MTT法检测细胞的相对增殖率,蛋白质印迹法检测细胞中Bcl-2、Bax和活性caspase-3的表达以及细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)和Akt活性的变化;RAPA联合ERK抑制剂U0126或PD98059以及联合Akt抑制剂wortmannin处理MG63和SH-SY5Y细胞后,分别用MTT法和蛋白质印迹法检测细胞的相对增殖率和Bcl-2、Bax、活性caspase-3的表达。结果:在A549细胞中,RAPA上调细胞Bax/Bcl-2和活性caspase-3的表达(P<0.05),细胞的相对增殖率下降(P<0.05)。在MG63细胞中,RAPA通过ERK上调Bcl-2和Bax的表达,Bax/Bcl-2和活性caspase-3的表达以及细胞的相对增殖率无明显变化;ERK抑制剂U0126或PD98059逆转RAPA导致的Bcl-2上调,联合RAPA作用后细胞中Bax/Bcl-2和活性caspase-3的表达上调(P<0.05),细胞的相对增殖率降低(P<0.05)。在SH-SY5Y细胞中,RAPA通过Akt上调Bcl-2的表达,Bax/Bcl-2降低(P<0.05),细胞的相对增殖率上升(P<0.05);Akt抑制剂wortmannin逆转RAPA导致的Bcl-2上调,联合RAPA作用后细胞中Bax/Bcl-2和活性caspase-3的表达上调(P<0.05),细胞的相对增殖率降低(P<0.05)。结论:RAPA在不同肿瘤细胞中可能通过调节不同的激酶影响Bax/Bcl-2和活性caspase-3的表达。 展开更多
关键词 肿瘤 实验性 雷帕霉素 凋亡调节蛋白质类 细胞外信号调节激酶类 细胞 A549 sh-sy5Y MG63
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类叶升麻苷抗鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤机制的研究 被引量:20
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作者 高燕 蒲小平 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期161-165,共5页
目的研究类叶升麻苷抗鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞损伤,对帕金森病相关蛋白Parkin、α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表达的影响,探讨类叶升麻苷抗细胞损伤的分子机制。方法化学比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehyd... 目的研究类叶升麻苷抗鱼藤酮致多巴胺能神经元SH-SY5Y细胞损伤,对帕金森病相关蛋白Parkin、α-突触核蛋白(α-Synuclein,α-Syn)表达的影响,探讨类叶升麻苷抗细胞损伤的分子机制。方法化学比色法测定细胞培养液乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,蛋白质印迹法(Western blot)检测Parkin、α-Syn的表达,免疫荧光法检测SH-SY5Y细胞α-Syn分布。结果①类叶升麻苷(10,20或40mg.L-1)可明显降低鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放;②0.5μmol.L-1的鱼藤酮处理SH-SY5Y细胞48h能引起Parkin蛋白的明显降解及α-Syn蛋白二聚体增加;③预先用类叶升麻苷(10,20或40mg.L-1)处理细胞,能够有效减少鱼藤酮诱导的Parkin蛋白的降解,呈浓度依赖性;并能够抑制鱼藤酮诱导的α-Syn蛋白二聚体增加及α-Syn阳性细胞数增加。结论类叶升麻苷对鱼藤酮致SH-SY5Y细胞损伤具有神经保护作用,其作用机制可能与减少Parkin蛋白的降解和抑制α-Syn蛋白的二聚体形成有关。 展开更多
关键词 类叶升麻苷 鱼藤酮 sh.sy5Y细胞 乳酸脱氢酶 PARKIN Α-突触核蛋白
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没食子酸酯对神经细胞的抗氧化保护作用研究 被引量:19
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作者 田伟 毕玉婷 +4 位作者 周启龙 薛艳红 仇敏 但飞君 刘士平 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1423-1427,共5页
神经细胞的氧化损伤是导致各种神经退行性疾病的重要原因之一,为探讨不同的没食子酸酯化合物对神经细胞抗氧化保护作用,本文比较了不同没食子酸酯化合物的细胞毒性,分析了不同浓度的没食子酸酯化合物在过氧化氢氧化胁迫下对神经细胞生... 神经细胞的氧化损伤是导致各种神经退行性疾病的重要原因之一,为探讨不同的没食子酸酯化合物对神经细胞抗氧化保护作用,本文比较了不同没食子酸酯化合物的细胞毒性,分析了不同浓度的没食子酸酯化合物在过氧化氢氧化胁迫下对神经细胞生长的影响,结果表明没食子酸乙酯、没食子酸正丙酯、没食子酸异戊酯都能有效提高经过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞的存活率,显示对神经细胞的氧化应激损伤具有一定保护作用。特别是从三峡特有濒危植物疏花水柏枝中分离到一种没食子酸甲酯类衍生物,3,4-二甲氧基-5-羟基苯甲酸甲酯,表现出比没食子酸正丙酯更好的抗氧化保护作用,说明其可以作为一种潜在的抗神经退行性疾病药物进行开发和利用。 展开更多
关键词 没食子酸酯 sh-sy5Y细胞 疏花水柏枝 过氧化氢 抗氧化保护作用
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胡椒碱的抗抑郁及神经保护作用研究 被引量:19
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作者 廖红波 刘屏 +2 位作者 胡园 王东晓 林辉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1562-1565,共4页
目的:观察胡椒碱的抗抑郁及细胞保护作用。方法:利用小鼠强制游泳实验、悬尾实验考察胡椒碱抗抑郁作用;采用皮质酮损伤SH-SY5Y神经细胞和分离培养新生大鼠海马神经前体细胞两种体外模型,测定细胞存活率(MTT法),观察胡椒碱对神经细胞增... 目的:观察胡椒碱的抗抑郁及细胞保护作用。方法:利用小鼠强制游泳实验、悬尾实验考察胡椒碱抗抑郁作用;采用皮质酮损伤SH-SY5Y神经细胞和分离培养新生大鼠海马神经前体细胞两种体外模型,测定细胞存活率(MTT法),观察胡椒碱对神经细胞增殖的影响,并初步探讨其抗抑郁的作用机制。结果:胡椒碱(10,20 mg.kg-1)给药后,能明显缩短小鼠在行为学实验中的不动状态时间,并且该作用随剂量增大效应逐渐降低;胡椒碱(1.4,7,35μmol.L-1)可对抗皮质酮对SH-SY5Y的损伤作用,且对所培养具有神经前体细胞特性的细胞,具有促进神经前体细胞增殖的作用。结论:胡椒碱具有较好的抗抑郁作用,其作用可能是通过调控神经干细胞的增殖、迁移和分化及对功能性神经再生的保护和促进作用实现的。 展开更多
关键词 胡椒碱 sh-sy5Y 悬尾 强迫游泳 抗抑郁 神经前体细胞
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黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用 被引量:14
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作者 朱陵群 李伟华 +3 位作者 王硕仁 牛福玲 崔巍 李澎涛 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期238-241,共4页
目的观察黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用,在细胞水平阐明黄芩苷治疗脑缺血-再灌注损伤的作用机制。方法选用SH-SY5Y神经细胞,采用缺氧-复氧结合缺糖-复糖的方法,对其进行攻击,模拟人体神经细胞的缺血-再灌注损伤,观察... 目的观察黄芩苷对神经细胞缺氧缺糖-再灌注损伤的保护作用,在细胞水平阐明黄芩苷治疗脑缺血-再灌注损伤的作用机制。方法选用SH-SY5Y神经细胞,采用缺氧-复氧结合缺糖-复糖的方法,对其进行攻击,模拟人体神经细胞的缺血-再灌注损伤,观察黄芩苷对此损伤的治疗作用。结果缺氧、缺糖8h结合复氧、复糖12h对神经细胞可造成明显损伤,导致SH-SY5Y细胞线粒体的活性下降,凋亡率明显上升;而黄芩苷可以显著减轻上述损伤。结论黄芩苷对缺氧、缺糖-再灌注损伤的神经细胞有保护作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 sh-sy5Y 缺氧缺糖-再灌注损伤
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