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核酸适体的研究进展 被引量:11
1
作者 刘晓静 刘韧 +1 位作者 顾长国 朱旭东 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期374-378,共5页
关键词 靶目标 核酸 研究进展 寡核苷酸 配体 适体 RNA selex 系统进化 遗传信息
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丙型肝炎病毒NS3螺旋酶寡核苷酸适配子的筛选与鉴定 被引量:12
2
作者 詹林盛 卓海龙 +2 位作者 王会中 彭剑淳 王全立 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期245-250,共6页
为筛选和鉴定抗丙型肝炎病毒(HCV) NS3螺旋酶(NS3h) 的寡核苷酸适配子(aptamers). 利用SELEX技术,以HCV NS3h为靶分子,从体外合成的81 bp随机单链DNA文库中筛选与HCV NS3h特异结合的寡核苷酸适配子. 克隆测序后,进行了解离常数(Kd) 测定... 为筛选和鉴定抗丙型肝炎病毒(HCV) NS3螺旋酶(NS3h) 的寡核苷酸适配子(aptamers). 利用SELEX技术,以HCV NS3h为靶分子,从体外合成的81 bp随机单链DNA文库中筛选与HCV NS3h特异结合的寡核苷酸适配子. 克隆测序后,进行了解离常数(Kd) 测定和Clustal W软件包分析适配子一级结构. 经过8轮循环筛选,随机ssDNA库与HCV NS3h的结合率从0.45%上升到29.5%. 所有的一级结构没有共同的同源序列,但可分5个家族,其中4个家族具有共同的保守序列. 解离常数测定表明,寡核苷酸适配子H2与HCV NS3h特异结合的亲和力最高,Kd值为140 nmol/L. 适配子H2 (10 μmol/L)在体外对HCV NS3h的活性具有一定的抑制作用,抑制率达44%. 利用随机寡核苷酸文库获得了抗HCV NS3h的寡核苷酸适配子. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 NS3螺旋酶 selex 寡核苷酸适配子
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核酸适配体及其在生物医学研究中的应用 被引量:11
3
作者 满燕 吕雪飞 +2 位作者 张玉奎 庆宏 邓玉林 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期485-490,共6页
核酸适配体是经过指数富集配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选得到的能与金属离子、小分子、生物大分子,甚至整个细胞高专一性和亲和性结合的ssDNA或RNA分子。核酸适配体不仅具备... 核酸适配体是经过指数富集配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选得到的能与金属离子、小分子、生物大分子,甚至整个细胞高专一性和亲和性结合的ssDNA或RNA分子。核酸适配体不仅具备抗体分子的识别特性,凡是涉及抗体的诊断领域,几乎都可以用核酸适配体来代替,而且还具备自己独特的优异性能,所以对核酸适配体的研究引起了许多科学家的关注。本文介绍了核酸适配体及其相关筛选技术(SELEX),综述了核酸适配体近年来在治疗新药、药物运输、癌细胞检测、生物成像、生物标志物的发现、毒品检测、抗病毒等生物医学领域中的应用,最后对核酸适配体在生物医学上的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 核酸适配体 selex 生物医学 治疗 检测
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核酸适配体的体外筛选方法的最新研究进展 被引量:11
4
作者 李亚楠 赵洁 +3 位作者 张傲哲 谭琰 华茜 张子剑 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期78-82,共5页
核酸适配体是用配体指数富集系统进化技术(SELEX)在体外筛选得到的一小段寡核苷酸序列,能够选择性的与不同的靶标特异性的结合,包括蛋白质、小分子、有机物、金属离子、药物等,具有高亲和力和高特异性。这项技术的诸多优势,使其迅速得... 核酸适配体是用配体指数富集系统进化技术(SELEX)在体外筛选得到的一小段寡核苷酸序列,能够选择性的与不同的靶标特异性的结合,包括蛋白质、小分子、有机物、金属离子、药物等,具有高亲和力和高特异性。这项技术的诸多优势,使其迅速得到重视,核酸适配体在生物传感器、基因芯片、新药开发、纳米技术等诸多方面应用广泛。但是传统的SELEX方法操作繁琐,筛选周期长,需要几个月的时间才能筛选出与靶标具有高特异性的核酸适配体。随着SELEX的快速发展,近年来出现了很多新型的筛选方法,这些新的方法大大提高了筛选周期,极大的提高了筛选效率,拓展了核酸适配体的应用。总结介绍了近三年来出现的几种新型的核酸适配体的筛选方法,包括氧化石墨烯SELEX(Multiple GO-SELEX)、单壁碳纳米管辅助细胞SELEX(SWCNTs-assisted cell-SELEX)、基于芯片的细胞SELEX(on-chip Cell-SELEX)、序列构造SELEX(Sequence-constructive SELEX)、高保真SELEX(High-Fidelity SELEX),有助于人们进一步了解、认识核酸适配体筛选技术的发展现状,更好促进核酸适体在各个领域中的应用前景。 展开更多
关键词 核酸适配体 selex 筛选方法
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哈维氏弧菌适配子的SELEX筛选及其亲和特异性研究 被引量:11
5
作者 郑江 郝聚敏 +1 位作者 宋林生 刘瑞 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第7期704-711,共8页
哈维氏弧菌是水产养殖中的重要条件致病菌,对其进行快速、准确地检测和鉴定是相关病害防治的基础和关键.适配子具有亲和力高、特异性强、稳定性好等优点,在微生物的检测和鉴定方面呈现出广泛的应用前景.本研究以哈维氏弧菌为靶目标,采用... 哈维氏弧菌是水产养殖中的重要条件致病菌,对其进行快速、准确地检测和鉴定是相关病害防治的基础和关键.适配子具有亲和力高、特异性强、稳定性好等优点,在微生物的检测和鉴定方面呈现出广泛的应用前景.本研究以哈维氏弧菌为靶目标,采用SELEX技术,即指数级富集配体的系统进化技术,筛选其特异性适配子.经15轮筛选后,随机ssDNA文库的亲和力从3.51上升到58.95,提高了15.8倍.筛选出的适配子富集库经克隆、测序后得到52条不同序列,根据同源性将这些序列分成8个家族,其中第1和第2家族的适配子数量最多,超过总数的50%.通过深入分析,筛选出6个对哈维氏弧菌有显著亲和特异性(P<0.01)的高频适配子,其中5个高频适配子(S1、S25、S26、S27、S35)对哈维氏弧菌有较高的亲和力,相应的亲和常数Kd值分别为(32.6±7.1)、(45.3±10.1)、(24.7±5.8)、(34.8±5.6)、(12.9±4.0)nmol/L.本文还对高频适配子的产生机制及其应用价值进行了探讨.本文首次筛选出了对哈维氏弧菌具有较高亲和特异性的适配子,为后续利用适配子进行哈维氏弧菌的检测和鉴定奠定了基础. 展开更多
关键词 哈维氏弧菌 适配子 亲和力 亲和常数 selex
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小分子靶标核酸适配体研究进展 被引量:13
6
作者 王红旗 张玲 +4 位作者 刘冬梅 王敏 葛艳静 周玲 刘继红 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期790-798,共9页
核酸适配体是能够与靶分子高亲和力、高特异性结合的单链寡核苷酸。目前,在生物传感、疾病诊断和治疗等方面,以核酸适配体作为分子识别元件已经开发了许多具有应用可行性的各种检测方法。尽管核酸适配体具有这些方面的应用可能性,但是... 核酸适配体是能够与靶分子高亲和力、高特异性结合的单链寡核苷酸。目前,在生物传感、疾病诊断和治疗等方面,以核酸适配体作为分子识别元件已经开发了许多具有应用可行性的各种检测方法。尽管核酸适配体具有这些方面的应用可能性,但是目前能够结合小分子的核酸适配体非常少。小分子具有多种多样的生物功能以及临床、商业价值,因此针对小分子靶标展开研究,开发新型、实用的分子识别探针用于检测这些小分子具有重要的研究意义。作者主要介绍了针对小分子靶标核酸适配体开发所面临的技术挑战,以及在生物传感和食品安全应用方面所存在的机遇。 展开更多
关键词 核酸适配体 小分子 食品安全 生物传感 指数富集配基系统进化技术
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核酸适配体及其在食品安全领域中的应用研究进展 被引量:13
7
作者 张辉 叶华 +1 位作者 吴世嘉 王周平 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2016年第10期194-199,共6页
文章对适配体的本质、作用机理、特点等进行了介绍,同时从固定对象及库的构成角度分类介绍了四大类适配体筛选技术,最后,就适配体在食品安全领域中的应用现状和发展方向作一总结和展望。
关键词 核酸适配体 筛选技术 食品安全检测 进展
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SELEX法筛选炭疽芽孢杆菌芽孢适配子的研究 被引量:8
8
作者 甄蓓 宋亚军 +4 位作者 郭兆彪 王津 张敏丽 俞守义 杨瑞馥 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2001年第2期111-114,共4页
目的 :利用SELEX(systemevolutionofligandsbyexponentialenrichment)体外筛选技术 ,寻找能与炭疽芽孢杆菌芽孢特异结合的寡核苷酸适配子 (aptamer)。方法 :体外合成长度为 78个核苷酸的随机DNA库 ,通过SELEX技术 ,以炭疽芽孢杆菌疫苗株... 目的 :利用SELEX(systemevolutionofligandsbyexponentialenrichment)体外筛选技术 ,寻找能与炭疽芽孢杆菌芽孢特异结合的寡核苷酸适配子 (aptamer)。方法 :体外合成长度为 78个核苷酸的随机DNA库 ,通过SELEX技术 ,以炭疽芽孢杆菌疫苗株A .16R的芽孢为靶标进行 15轮的筛选 ,利用生物素 亲和素显色系统判断寡核苷酸与芽孢的结合活性。结果 :随着筛选轮数的增加 ,PCR扩增电泳条带逐渐单纯 ,寡核苷酸与芽孢结合后显色 ,D值提高了 9倍以上 ,D值随适配子结合量的增加而递增。结论 :已初步筛选到与炭疽芽孢具有亲和力的适配子。 展开更多
关键词 selex 芽孢杆菌 炭疽 牙孢 适配子
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慢性髓细胞性白血病K562细胞适体的筛选与鉴定 被引量:9
9
作者 刘玲玲 韩跃武 +4 位作者 祝凯华 李真真 韩亚萍 路艳 王春霞 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第13期1157-1160,共4页
目的:筛选并鉴定出慢性髓细胞性白血病(CML)K562细胞的寡核苷酸适体.方法:体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库,以正常人血液中提取的中性粒细胞为反筛细胞,利用指数富集的配基系... 目的:筛选并鉴定出慢性髓细胞性白血病(CML)K562细胞的寡核苷酸适体.方法:体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA(ssDNA)文库,采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库,以正常人血液中提取的中性粒细胞为反筛细胞,利用指数富集的配基系统进化(SELEX)技术筛选出与CMLK562细胞特异结合的适体.将筛选得到的适体回收纯化后连接pGEM-T质粒载体,经蓝白筛选后,随机挑选24个克隆子进行序列测定.采用荧光标记引物法检测ssDNA文库与K562细胞的亲和力,并用Clustal 2.05和DNA sis V2.5软件对适体序列进行一级结构同源性分析和二级结构预测.结果:经过13轮循环筛选,CML K562细胞适体的A值从0.12上升到1.25,至第13轮A值无明显增高.一级结构分析无同源序列,但可分为6个家族,其中5个家族各自具有保守序列,家族6无保守序列.二级结构分析表明,适体形成的茎环、凸环结构可能是与K562细胞特异性结合的结构基础.结论:利用SELEX技术成功筛选出高亲和性的CML K562细胞适体. 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 K562细胞 selex 适体
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基于核酸适配体传感器检测食品致病菌的研究进展 被引量:10
10
作者 王琦 颜春蕾 +2 位作者 高洪伟 吴薇 杨庆利 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期245-258,共14页
核酸适配体是可以识别并与靶标分子结合的单链DNA或RNA分子。由于适配体具有良好的特异性、稳定性、选择性、易于修饰和亲和力高等特点,在病原检测和其他小分子识别方面具有很大的潜力。综述了适配体的筛选技术以及适配体应用技术,包括... 核酸适配体是可以识别并与靶标分子结合的单链DNA或RNA分子。由于适配体具有良好的特异性、稳定性、选择性、易于修饰和亲和力高等特点,在病原检测和其他小分子识别方面具有很大的潜力。综述了适配体的筛选技术以及适配体应用技术,包括比色法、可见光谱法、荧光法、电化学法、表面增强拉曼法和胶体金试纸条法等在食源性致病菌检测中的应用。目前适配体传感器在检测食品致病菌领域取得了显著进展。然而核酸适配体应用方面的挑战和缺陷仍需克服。 展开更多
关键词 适配体 食品安全 快速检测 selex 大肠杆菌 沙门氏菌
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河豚毒素DNA适配子的筛选与结构分析 被引量:9
11
作者 邵碧英 高兴 +3 位作者 杨方 陈文炳 缪婷玉 彭娟 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期137-143,共7页
人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和... 人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和二级结构,并测定克隆子与河豚毒素的亲和力。结果表明:与河豚毒素结合力高的DNA适配子经过10轮筛选后得到富集,成功筛选到最高亲和力的DNA适配子G10。 展开更多
关键词 河豚毒素 适配子 selex 诱变PCR
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SELEX技术及寡核苷酸适配体的近期研究进展 被引量:11
12
作者 郭磊 《国际药学研究杂志》 CAS 2010年第4期249-256,共8页
指数富集的配体系统进化(SELEX)技术是一类具备蓬勃发展前景的体外筛选技术,在生物学、药学及化学领域已引起广泛关注。本文即针对2004年以来SELEX技术的发展特点,主要介绍两类新型SELEX策略,即毛细管电泳-SELEX和针对复杂靶标的SELEX方... 指数富集的配体系统进化(SELEX)技术是一类具备蓬勃发展前景的体外筛选技术,在生物学、药学及化学领域已引起广泛关注。本文即针对2004年以来SELEX技术的发展特点,主要介绍两类新型SELEX策略,即毛细管电泳-SELEX和针对复杂靶标的SELEX方法,并简要总结了寡核苷酸适配体在生物医学和药学相关方面的最新应用进展。 展开更多
关键词 指数富集的配体系统进化 寡核苷酸适配体 肿瘤靶向 生物医学 药物学
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SELEX法体外筛选胃癌细胞适配子方法的建立 被引量:10
13
作者 李真真 韩跃武 +3 位作者 刘玲玲 韩亚萍 路艳 王春霞 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期42-46,共5页
目的:建立SELEX技术筛选胃癌细胞SGC-7901适配子的方法,并初步鉴定获得的SGC-7901细胞适配子。方法:体外合成全长88bp中间含52bp随机序列的ssDNA文库,通过优化PCR扩增条件,利用地高辛-抗地高辛抗体-碱性磷酸酶系统测定亲和力,经SELEX反... 目的:建立SELEX技术筛选胃癌细胞SGC-7901适配子的方法,并初步鉴定获得的SGC-7901细胞适配子。方法:体外合成全长88bp中间含52bp随机序列的ssDNA文库,通过优化PCR扩增条件,利用地高辛-抗地高辛抗体-碱性磷酸酶系统测定亲和力,经SELEX反复筛选获得胃癌SGC-7901细胞的特异性适配子。将最后一轮筛选产物克隆、测序并用相关软件分析适配子序列的一级结构和二级结构。结果:经12轮SELEX筛选,ssDNA文库与SGC-7901细胞的亲和力由0.16上升至1.14,表明特异性适配子得到逐步富集。22个克隆子测序,有4个序列完全一致,二级结构预测茎环可能是适配子与胃癌细胞作用的结构基础。结论:成功建立了SELEX技术体外筛选胃癌细胞SGC-7901高亲和性适配子的方法。 展开更多
关键词 胃癌细胞 selex 适配子 随机ssDNA文库
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SELEX技术筛选毒死蜱单链DNA适体 被引量:8
14
作者 雷兆静 张存政 +3 位作者 刘媛 王丽 胡秋辉 刘贤进 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第1期198-203,共6页
试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过M... 试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过MFOLD分析软件对亲和力较高的适体进行二级结构预测和结合位点分析。结果表明,经过15轮筛选后,DNA文库的筛选效率达到44.00%;最终获得9条ssDNA适体,其中适体N23对毒死蜱具有最高的亲和力,其结合活性显著高于N23与水胺硫磷、丙溴磷、氧化乐果的结合活性;二级结构表明茎环结构可能是毒死蜱与适体相互作用的结构基础。 展开更多
关键词 适体 selex 荧光 毒死蜱
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筛选环孢霉素A适体的SELEX技术的建立(英文) 被引量:10
15
作者 李卫滨 兰小鹏 +1 位作者 杨湘越 周长邵 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期829-834,共6页
体外合成一个全长78个核苷酸,中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,以环孢霉素A(CsA)为靶目标,以磁珠作为筛选介质,利用生物素-链酶抗生物素-辣根过氧化物酶系统,检测每轮ssDN... 体外合成一个全长78个核苷酸,中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术,以环孢霉素A(CsA)为靶目标,以磁珠作为筛选介质,利用生物素-链酶抗生物素-辣根过氧化物酶系统,检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选并鉴定CsA特异性的适体.经过11轮的筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势.将第10轮筛选产物克隆测序并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.随机挑选的19个克隆适体,根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主,这可能是适体与CsA作用的部位.CsA特异性的适体将用于酶联法、免疫荧光法等对CsA进行检测. 展开更多
关键词 环孢霉素A 适体 随机ssDNA文库
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SELEX技术及近年研究进展 被引量:10
16
作者 詹少兵 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期573-577,共5页
指数富集配体系统进化技术(Systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)是近20年来出现的一种新型体外筛选技术。该技术将文库技术与筛选技术相结合,从核酸文库中筛选出的一段核酸分子:配基-适配子(aptamer);适... 指数富集配体系统进化技术(Systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)是近20年来出现的一种新型体外筛选技术。该技术将文库技术与筛选技术相结合,从核酸文库中筛选出的一段核酸分子:配基-适配子(aptamer);适配子与抗体类似,可以与相应靶物质特异性结合。SELEX技术筛选适配子的技术有快速的进步,而适配子也被应用到医学生物学等各个方面。在HIV等病毒学研究与治疗方面,SELEX的应用也有了可观的进展,多种病毒的相关适配子被筛选出来,为病毒相关疾病的防治提供了新的方向。本文主要就近三年来的SELEX技术发展状况及在应用上的发展进行简要综述。 展开更多
关键词 指数富集的配体系统进化 适配子
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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)核酸适配体的筛选及其结合蛋白的分离鉴定 被引量:5
17
作者 郑江 刘慧敏 +5 位作者 黄力行 林筱钧 彭雪云 江兴龙 周建传 汤学敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第1期250-261,共12页
目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖中的重要条件致病菌,每年给水产养殖业造成巨大的经济损失,研究其致病机制、对其进行快速的检测鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体因其高亲和力、高特异性等多种优点,在微生物的靶标... 目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖中的重要条件致病菌,每年给水产养殖业造成巨大的经济损失,研究其致病机制、对其进行快速的检测鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体因其高亲和力、高特异性等多种优点,在微生物的靶标分析、检测鉴定以及致病机制等多个领域都呈现出较好的应用潜力。因此,筛选鳗弧菌的核酸适配体,利用核酸适配体对鳗弧菌相关位点进行分析鉴定,不仅能为鳗弧菌的检测鉴定提供一个新的手段,对于探索鳗弧菌相关位点在其病害防治中的作用也具有重要意义。方法以鳗弧菌为靶目标,采用每轮测序的SELEX筛选方法,从高频序列中筛选鳗弧菌的核酸适配体;采用单链DNA浓度法测定核酸适配体的亲和力,研究核酸适配体对鳗弧菌的亲和特异性;采用Origin软件、选择反比例函数(Hyperbola函数)进行非线性拟合,获得核酸适配体的亲和常数(K_(d))和最大亲和力(A_(m));采用磁分离技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化出核酸适配体H5的结合蛋白,通过质谱对该蛋白质进行分析鉴定,并利用Prabi、Phyre2、Psortb 3.0等在线网站分析该结合蛋白的空间结构及其亚细胞位置。结果建立了以高频序列为基础的快速筛选核酸适配体的方法,采用该方法筛选出了一系列对鳗弧菌有较好亲和特异性的核酸适配体(H1、H5、H6、H12、H25、H26、H28、H33、H38和H42),测定了其中6个核酸适配体(H1、H5、H25、H26、H33、H38)的K_(d)和A_(m),相应的K_(d)值分别为(78.77±10.99)、(180.65±23.01)、(121.14±21.43)、(276.42±51.23)、(89.24±10.84)、(167.12±23.73)nmol/L,A_(m)值分别为(229.42±8.35)、(891.04±50.14)、(647.20±41.51)、(720.85±75.35)、(510.65±33.89)、(576.06±38.73)nmol/L。核酸适配体H5的结合蛋白为鳗弧菌中的丙酮酸脱氢酶E1组分,该蛋白质主要位于细胞质中,α螺旋和β折叠结构构成了其主要骨架,环状的无规� 展开更多
关键词 核酸适配体 鳗弧菌 高频序列 亲和常数 最大亲和力 结合蛋白 selex 丙酮酸脱氢酶
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应用核酸适配子检测细胞因子的新方法-ELONA法 被引量:7
18
作者 严馨蕊 高绪文 +1 位作者 姚立红 张智清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期679-682,共4页
以人肿瘤坏死因子 (Humantumornecrosisfactor,hTNF α)特异性的核酸适配子为检测分子建立了酶联寡聚核苷酸吸附试验 (Enzyme linkedOligonucleotideassay ,ELONA)方法 ,用于hTNF α的检测。通过SELEX(SystematicEvolutionofLigandsbyEx... 以人肿瘤坏死因子 (Humantumornecrosisfactor,hTNF α)特异性的核酸适配子为检测分子建立了酶联寡聚核苷酸吸附试验 (Enzyme linkedOligonucleotideassay ,ELONA)方法 ,用于hTNF α的检测。通过SELEX(SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichment)方法从随机RNA库中筛选到与hTNF α特异结合的RNA适配子。根据其序列 ,用体外转录方法合成生物素标记的RNA适配子 ,并对其进行了氨基修饰以增加其稳定性。以hTNF α的单克隆抗体为捕获分子 ,生物素标记的hTNF α特异性RNA适配子为检测分子建立了ELONA方法 ,并对这种检测方法的灵敏度、精密度和准确度等进行了分析。同时用ELONA和ELISA方法检测了正常人血清中的hTNF α水平 ,并对检测结果进行比较。结果显示 ,ELONA方法的灵敏度为 10 0pg mL ,具有较好的精密度和准确度。ELONA法的检测结果与ELISA法检测结果基本一致。该方法适用于血清。 展开更多
关键词 人肿瘤坏死因子 核酸适配子 细胞因子 酶联寡聚核苷酸吸附试验 生物素标记
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Selection and identification of a novel ssDNA aptamer targeting human skeletal muscle 被引量:4
19
作者 Shuming Sun Han Liu +9 位作者 Yan Hu Yanpeng Wang Mingri Zhao Yijun Yuan Yafei Han Yingying Jing Jin Cui Xiaoxiang Ren Xiao Chen Jiacan Su 《Bioactive Materials》 SCIE CSCD 2023年第2期166-178,共13页
Skeletal muscle disorders have posed great threats to health.Selective delivery of drugs and oligonucleotides to skeletal muscle is challenging.Aptamers can improve targeting efficacy.In this study,for the first time,... Skeletal muscle disorders have posed great threats to health.Selective delivery of drugs and oligonucleotides to skeletal muscle is challenging.Aptamers can improve targeting efficacy.In this study,for the first time,the human skeletal muscle-specific ssDNA aptamers(HSM01,etc.)were selected and identified with Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment(SELEX).The HSM01 ssDNA aptamer preferentially interacted with human skeletal muscle cells in vitro.The in vivo study using tree shrews showed that the HSM01 ssDNA aptamer specifically targeted human skeletal muscle cells.Furthermore,the ability of HSM01 ssDNA aptamer to target skeletal muscle cells was not affected by the formation of a disulfide bond with nanoliposomes in vitro or in vivo,suggesting a potential new approach for targeted drug delivery to skeletal muscles via liposomes.Therefore,this newly identified ssDNA aptamer and nanoliposome modification could be used for the treatment of human skeletal muscle diseases. 展开更多
关键词 APTAMER selex Human skeletal muscle Target delivery NANOLIPOSOMES
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两种富集方法相结合对蓖麻毒素进行SELEX筛选研究 被引量:6
20
作者 唐吉军 谢剑炜 +1 位作者 邵宁生 沈晓书 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第1期35-37,共3页
为了获得能特异识别具有细胞毒性的蓖麻毒素蛋白寡核苷酸适配子 ,体外构建了含 4 0个随机序列全长 87nt的随机ssDNA文库 ,采用指数富集配基的系统进化 (SELEX)技术方法 ,结合微孔板和亲和树脂两种分离、富集方法 ,经过数轮筛选 ,文库与... 为了获得能特异识别具有细胞毒性的蓖麻毒素蛋白寡核苷酸适配子 ,体外构建了含 4 0个随机序列全长 87nt的随机ssDNA文库 ,采用指数富集配基的系统进化 (SELEX)技术方法 ,结合微孔板和亲和树脂两种分离、富集方法 ,经过数轮筛选 ,文库与蓖麻毒素的结合率达到了 38.5 %。结果表明 ,以亲和树脂为分离介质进行筛选 。 展开更多
关键词 指数富集配基的系统进化 蓖麻毒素 随机ssDNA文库 适配子
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