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生长素诱导的蛋白降解技术在线虫精子发生中的应用
1
作者 陈新艳 张琦 +5 位作者 陈联万 王宁 马肖静 单进 赵艳梅 苗龙 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2022年第8期1247-1260,共14页
SAC-1/h SAC1(suppressor of actin mutations 1-like protein,SAC1)是一种广泛表达于多种组织的PI4P磷酸酶,也是一种对线虫发育的各个阶段都至关重要的PI(phosphoinositide)信号调控因子.为了研究其在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis eleg... SAC-1/h SAC1(suppressor of actin mutations 1-like protein,SAC1)是一种广泛表达于多种组织的PI4P磷酸酶,也是一种对线虫发育的各个阶段都至关重要的PI(phosphoinositide)信号调控因子.为了研究其在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)精子发生过程中的具体功能,采用生长素诱导蛋白降解(auxin-induced protein degradation,AID)的方法,在精子发育过程中对SAC-1进行时间-空间降解.本研究首先利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,在SAC-1 N端融合Degron-GFP标签,使用生殖腺特异性表达启动子sun-1驱动植物特有的F-box蛋白TIR1表达,构建SAC-1蛋白在生殖腺组织特异性降解的AID虫系.然后通过精子体外激活以及Mito Tracker标记的精子体内运动实验,检测精子的运动能力,分析精子激活时胞内膜细胞器(membranous organelles,MOs)与质膜的融合情况以及线虫的生育能力.结果表明,SAC-1在生殖腺细胞的特异性降解影响精子激活的运动能力,具体表现为激活精子的伪足变短,融合的MOs数量降低,线虫育性明显下降.综上,本研究成功构建了生长素诱导的SAC-1组织特异性降解虫系,并表明SAC-1在生殖腺细胞的缺失影响精子细胞的激活及运动,为进一步研究包括SAC-1在内的广泛性表达的多功能蛋白在精子发生过程中的调控功能提供了新的思路和技术. 展开更多
关键词 AID技术 组织特异性敲除 sac-1 精子活化 秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)
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磷脂酰肌醇磷酸酶Sac1功能研究进展 被引量：1
2
作者 陈红 胡曼东 +3 位作者 陈芳艳 赵静雅 李定辰 韩黎 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2022年第6期1195-1201,共7页
磷脂酰肌醇磷酸酶(phosphatidylinositol phosphatases,PIPases)Sac1是细胞内磷脂酰肌醇磷酸(phosphatidylinositol phosphates,PIPs)代谢途径中一类重要磷酸酶,可以使磷脂酰肌醇-4-磷酸去磷酸化,同时参与肌醇代谢、肌动蛋白细胞骨架重... 磷脂酰肌醇磷酸酶(phosphatidylinositol phosphatases,PIPases)Sac1是细胞内磷脂酰肌醇磷酸(phosphatidylinositol phosphates,PIPs)代谢途径中一类重要磷酸酶,可以使磷脂酰肌醇-4-磷酸去磷酸化,同时参与肌醇代谢、肌动蛋白细胞骨架重排、ATP转运等一系列细胞功能。该文对磷脂酰肌醇磷酸酶Sac1的结构、功能及其在哺乳动物细胞、酵母细胞和其他真核细胞中的功能研究最新发现进行了综述。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇 磷脂酰肌醇磷酸酶 sac1 真菌
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酿酒酵母细胞基因组中与转录因子Rim101亚细胞定位相关的磷酸酶和激酶基因的筛选 被引量：1
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作者 张艳 王頔 +1 位作者 赵运英 蒋伶活 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2016年第5期9-14,共6页
Rim101是一个具有锌指结构的转录因子,在调控酿酒酵母细胞耐受碱性和高盐环境、钙离子稳态、细胞分裂以及硒毒性方面起作用。前人研究结果显示,细胞周期依赖性激酶基因PHO85的缺失,导致Rim101蛋白在细胞核内积累。为了探索Rim101亚细胞... Rim101是一个具有锌指结构的转录因子,在调控酿酒酵母细胞耐受碱性和高盐环境、钙离子稳态、细胞分裂以及硒毒性方面起作用。前人研究结果显示,细胞周期依赖性激酶基因PHO85的缺失,导致Rim101蛋白在细胞核内积累。为了探索Rim101亚细胞定位的新调节因子,通过荧光显微镜技术对酿酒酵母细胞基因组中编码磷酸酶的73个非必需基因缺失株和编码激酶的139个非必需基因缺失株进行了筛选,发现编码磷脂酰肌醇磷酸(Ptd Ins P)的磷酸酶Sac1调控Rim101的亚细胞定位。 展开更多
关键词 RIM101 sac1 磷酸酶 激酶
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磷脂酰肌醇-4-磷酸酯代谢酶及抑制剂研究进展
4
作者 李艳平 李晨 《中国药业》 CAS 2022年第19期117-123,共7页
目的了解磷脂酰肌醇-4-磷酸酯(PI4P)代谢酶及抑制剂的研究进展,为PI4P信号通路相关靶点药物的研发提供参考。方法对作用于PI4P的6种代谢酶的基本情况、对疾病的影响及典型抑制剂的应用进行总结,并分析现有研究中仍待解决的问题,探讨PI4... 目的了解磷脂酰肌醇-4-磷酸酯(PI4P)代谢酶及抑制剂的研究进展,为PI4P信号通路相关靶点药物的研发提供参考。方法对作用于PI4P的6种代谢酶的基本情况、对疾病的影响及典型抑制剂的应用进行总结,并分析现有研究中仍待解决的问题,探讨PI4P代谢酶及抑制剂作为相关疾病治疗靶点的可能性。结果PI4P是一种膜甘油磷脂,由磷脂酰肌醇(PtdIns)4位羟基磷酸化生成;是高尔基体膜的关键功能成分,在囊泡运输和信号传导中不可或缺。尽管对PI4P的生理作用已有深入研究,但对PI4P的代谢调控知之甚少。PI4P代谢酶在肿瘤方面的研究较多,发现磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)高表达与多种肿瘤的恶化有关,目前已有4种PI3K抑制剂作为抗肿瘤药物被批准上市。结论PI4P代谢酶除了能调控肿瘤的进展外,还参与炎症激活、病毒及疟疾感染、阿尔茨海默病等临床常见疾病的发生与发展,但相关研究多停留在基础实验阶段,相关抑制剂可能是治疗上述疾病的有效方法。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇-4-磷酸酯 磷脂酰肌醇-4-激酶 磷脂酰肌醇磷酸酶1 磷脂酰肌醇-4-磷酸-5-激酶 磷酸肌醇5-磷酸酶 磷脂酰肌醇-3-激酶 磷酸酶和张力蛋白同源物
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犬贾第虫MM/Sac-C/1基因的克隆及序列分析 被引量：2
5
作者 赵永军 战洪波 +1 位作者 王亮 康桂英 《内蒙古民族大学学报（自然科学版）》 2016年第4期311-316,272,共7页
利用PCR技术从犬贾第虫滋养中扩增出了2004bp大小的MM/Sac-C/1基因,构建了p MD-MM/Sac-C/1克隆载体,并进行了序列测定,利用计算机对该序列进行了核苷酸同源性比较.结果表明,与GeneBank登陆的蓝氏贾第虫WB株AF236019序列比较,其同源性为9... 利用PCR技术从犬贾第虫滋养中扩增出了2004bp大小的MM/Sac-C/1基因,构建了p MD-MM/Sac-C/1克隆载体,并进行了序列测定,利用计算机对该序列进行了核苷酸同源性比较.结果表明,与GeneBank登陆的蓝氏贾第虫WB株AF236019序列比较,其同源性为98%,蛋白质同源性比较结果显示,与蓝氏贾第虫WB株表面抗原的同源性为90%,获得了犬贾第虫MM/Sac-C/1基因. 展开更多
关键词 犬贾第虫 MM/sac-C/1基因 克隆及序列分析
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