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基于RhoA/ROCK通路探讨淫羊藿苷对肾病综合征大鼠的保护机制 被引量:17
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作者 王新斌 戴恩来 +2 位作者 薛国忠 吕娟 陈威辛 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期78-84,共7页
目的:研究淫羊藿苷对肾病综合征(NS)大鼠肾素同源蛋白A(RhoA)/Rho相关激酶(ROCK)通路的影响和保护机制。方法:实验对象为54只清洁级雄性SD大鼠,随机均分为正常组,模型组,RhoA抑制剂组(Rhosin,40 mg·kg^-1·d^-1)和淫羊藿苷低... 目的:研究淫羊藿苷对肾病综合征(NS)大鼠肾素同源蛋白A(RhoA)/Rho相关激酶(ROCK)通路的影响和保护机制。方法:实验对象为54只清洁级雄性SD大鼠,随机均分为正常组,模型组,RhoA抑制剂组(Rhosin,40 mg·kg^-1·d^-1)和淫羊藿苷低、中、高剂量组(30,60,120 mg·kg^-1·d^-1)。模型组大鼠尾静脉注射6.5 mg·kg^-1盐酸阿霉素给,诱导大鼠NS发生。造模后腹膜给药,正常组和模型组给予生理盐水2.5 mL·d^-1,抑制剂组和各剂量组分别给对应剂量的Rhosin和淫羊藿苷进行干预。试剂盒检测各组大鼠尿总蛋白(Alb),尿肌酐(Cre)水平,计算尿总蛋白/肌酐值(A/C);透射电镜(TEM)鉴定肾脏超微病理;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA水平和蛋白表达。结果:TEM结果显示,正常组基底膜完整,足突规整;模型组基底膜损坏严重,足突出现消失、融合严重;淫羊藿苷低剂量组基底膜损伤减轻,足突的数量和密度改善、融合明显;淫羊藿苷中剂量组和抑制剂组,基底膜增厚情况减轻,足突轻度融合;淫羊藿苷高剂量组基底膜结构较完整,足细胞较长、排列较紧密。与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白量、尿液中Cre,A/C,肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,抑制剂组和淫羊藿苷低、中、高剂量组24 h尿蛋白量,A/C和肾组织中RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,抑制剂组和淫羊藿苷高剂量组尿液中Cre明显降低(P<0.05)。与抑制剂组比较,淫羊藿苷高剂量组24 h尿蛋白量、尿液中Cre和肾组织RhoA蛋白水平明显降低(P<0.05);淫羊藿苷低剂量组24 h尿蛋白量、尿液中Cre,A/C和肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,淫羊藿苷中剂量组肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA水平明显升高(P<0.05)。与淫羊藿苷低剂量组比较,淫羊藿苷中、高剂量组尿液中Alb,A/C和肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水 展开更多
关键词 淫羊藿苷 肾病综合征 大鼠 肾素同源蛋白A(RhoA) Rho相关激酶1(rock1) rock2
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基于以方测证的肾阳虚哮喘大鼠模型建立与评价研究 被引量:14
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作者 郭春荣 施旻昱 +7 位作者 庄怡娴 赵杏 李福凤 邹璐 孙祝美 郑幼镭 王慧雯 陈丹 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期4715-4718,共4页
目的:建立并评价哮喘大鼠肾阳虚病证结合模型。方法:将SD大鼠随机分为正常组、哮喘模型组、肾阳虚哮喘模型组、肾阳虚哮喘+金匮肾气汤组(简称金匮肾气汤组)、肾阳虚哮喘+六味地黄汤组(简称六味地黄汤组)5组,每组10只。除正常组外,其余... 目的:建立并评价哮喘大鼠肾阳虚病证结合模型。方法:将SD大鼠随机分为正常组、哮喘模型组、肾阳虚哮喘模型组、肾阳虚哮喘+金匮肾气汤组(简称金匮肾气汤组)、肾阳虚哮喘+六味地黄汤组(简称六味地黄汤组)5组,每组10只。除正常组外,其余各组均利用卵蛋白诱发哮喘。肾阳虚哮喘模型组、金匮肾气汤组、六味地黄汤组灌胃地塞米松混悬液2周制作肾阳虚哮喘模型,2周后金匮肾气汤组、六味地黄汤组分别灌胃金匮肾气汤和六味地黄汤治疗。末次给药12h后处死大鼠取材固定,病理切片观察大鼠肺组织病理学变化,荧光免疫组化法测定大鼠肺支气管壁RhoA、Rock2蛋白表达。结果:病理切片显示正常组支气管管壁完整,无炎性渗出。哮喘模型组、肾阳虚哮喘模型组大鼠支气管壁塌陷,周围有大量炎性细胞渗出,且肾阳虚哮喘模型组的病理变化重于哮喘模型组;金匮肾气汤组支气管壁结构塌陷程度较肾阳虚哮喘组明显减轻,周围有少量炎性细胞渗出;六味地黄汤组的病变程度与肾阳虚哮喘模型组无明显差别。荧光免疫组化法显示RhoA、Rock2在各组大鼠支气管壁和肺泡壁均有表达;哮喘模型组RhoA、Rock2蛋白表达显著高于正常组(P﹤0.05),肾阳虚哮喘模型组明显高于哮喘模型组(P﹤0.05),金匮肾气汤组与肾阳虚哮喘模型组比较,RhoA、Rock2表达明显下降(P﹤0.05)。结论:基于以方测证的实验室指标的结果分析判定地塞米松灌胃结合卵蛋白诱发哮喘制造肾阳虚哮喘模型成功。 展开更多
关键词 慢性哮喘 肾阳虚 以方测证 RHOA rock2 模型
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Houshiheisan and its components promote axon regeneration after ischemic brain injury 被引量:14
3
作者 Yue Lu Flora Hsiang +5 位作者 Jia-Hui Chang Xiao-Quan Yao Hui Zhao Hai-Yan Zou Lei Wang Qiu-Xia Zhang 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第7期1195-1203,共9页
Houshiheisan,a classic prescription in traditional Chinese medicine,contains Flos Chrysanthemi,Radix Saposhnikoviae,Ramulus Cinnamomi,Rhizoma Chuanxiong,Radix et Rhizoma Asari,Radix Platycodonis,Rhizoma Atractylodis m... Houshiheisan,a classic prescription in traditional Chinese medicine,contains Flos Chrysanthemi,Radix Saposhnikoviae,Ramulus Cinnamomi,Rhizoma Chuanxiong,Radix et Rhizoma Asari,Radix Platycodonis,Rhizoma Atractylodis macrocephalae,Poria,Rhizoma Zingiberis,Radix Angelicae sinensis,Radix et Rhizoma Ginseng,Radix Scutellariae and Concha Ostreae.According to traditional Chinese medicine theory,Flos Chrysanthemi,Radix Saposhnikoviae,Ramulus Cinnamomi,Rhizoma Chuanxiong,Radix et Rhizoma Asari and Radix Platycodonis are wind-dispelling drugs;Rhizoma Atractylodis macrocephalae,Poria,Rhizoma Zingiberis,Radix Angelicae sinensis and Radix et Rhizoma Ginseng are deficiency-nourishing drugs.A large number of randomized controlled trials have shown that Houshiheisan is effective in treating stroke,but its mechanism of action is unknown.Axonal remodeling is an important mechanism in neural protection and regeneration.Therefore,this study explored the effect and mechanism of action of Houshiheisan on the repair of axons after cerebral ischemia.Rat models of focal cerebral ischemia were established by ligating the right middle cerebral artery.At 6 hours after model establishment,rats were intragastrically administered 10.5 g/kg Houshiheisan or 7.7 g/kg wind-dispelling drug or 2.59 g/kg deficiency-nourishing drug.These medicines were intragastrically administered as above every 24 hours for 7 consecutive days.Houshiheisan,and its wind-dispelling and deficiency-nourishing components reduced the neurological deficit score and ameliorated axon and neuron lesions after cerebral ischemia.Furthermore,Houshiheisan,and its wind-dispelling and deficiency-nourishing components decreased the expression of proteins that inhibit axonal remodeling:amyloid precursor protein,neurite outgrowth inhibitor protein A(Nogo-A),Rho family small GTPase A(Rho A) and Rho-associated kinase 2(Rock2),and increased the expression of growth associated protein-43,microtubule-associated protein-2,netrin-1,Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1(R 展开更多
关键词 nerve regeneration Houshiheisan wind-dispelling drug deficiency-nourishing drug cerebral ischemia Nogo-A/Rho A/rock2 signaling pathway axonal recovery Netrin-1/Rac1/Cdc42 signaling pathway neuroprotection neural regeneration
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三七总皂苷对局灶性脑缺血大鼠不同恢复时点神经重塑和突触重建的影响 被引量:14
4
作者 刘炜 刘丽星 +3 位作者 史晓伟 张晓萌 施怡 朱陵群 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1556-1559,共4页
目的:观察三七总皂苷(PNS)对局灶性脑缺血大鼠不同恢复时点Rho A、Rock2、Syp和PSD-95蛋白表达的影响,以探索PNS对神经重塑与突触重建的作用机制。方法:采用健康雄性SD大鼠,将其分为假手术组、手术组和Y27632组、PNS加Y27632组,对除假... 目的:观察三七总皂苷(PNS)对局灶性脑缺血大鼠不同恢复时点Rho A、Rock2、Syp和PSD-95蛋白表达的影响,以探索PNS对神经重塑与突触重建的作用机制。方法:采用健康雄性SD大鼠,将其分为假手术组、手术组和Y27632组、PNS加Y27632组,对除假手术组外所有动物采用Longa法建立大脑中动脉阻塞MCAO模型,再将手术组动物随机分为模型组、PNS组、尼莫地平组,每组均为6只,利用HE染色和免疫组化方法观察术后14d和28d大鼠皮层梗死周围区Rho A、Rock2、Syp和PSD-95蛋白表达及梗死周围区形态学变化。结果:MCAO术后14d和28d,均可见模型组大鼠Rho A和Rock2蛋白的表达升高(P<0.01),Syp和PSD-95蛋白表达下降(P<0.01);各用药组中Rho A和Rock2蛋白的表达(除28d尼莫地平组的Rock2外)均比模型组减少(P<0.05,P<0.01),术后Syp和PSD-95蛋白(除14d尼莫地平组的Syp外)与模型组相比增加(P<0.05,P<0.01)。结论:PNS可抑制脑梗死后Rho A和Rock2蛋白表达并促进Syp和PSD-95蛋白表达,从而促进神经重塑和突触重建。 展开更多
关键词 三七总皂苷 脑梗死 神经重塑 突触重建 RHOA Rho相关激酶2 突触素 突触后致密物质95
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血管紧张素1-7对大鼠肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响 被引量:9
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作者 英嵩崧 李旭 +2 位作者 黄茂梁 孟莹 张振书 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期732-733,737,共3页
目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素1-7(Ang1-7)对大鼠肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。方法采用HSC-T6细胞株,分别给予AngⅡ,Ang1-7,AngⅡ+Ang1-7,Ang1-7+A779 10μmol/L处理,逆转录聚合酶链反应检测Rock通路中Rock2(Rho... 目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素1-7(Ang1-7)对大鼠肝星状细胞α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。方法采用HSC-T6细胞株,分别给予AngⅡ,Ang1-7,AngⅡ+Ang1-7,Ang1-7+A779 10μmol/L处理,逆转录聚合酶链反应检测Rock通路中Rock2(Rhokinase 2)mRNA的表达。免疫印迹法检测α-平滑肌肌动蛋白的表达水平。结果AngⅡ处理组Rock2mRNA的表达显著增强,Ang1-7可抑制AngⅡ诱导的Rock2mRNA的表达。AngⅡ可诱导α-平滑肌肌动蛋白水平的变化,Ang1-7可抑制AngⅡ诱导的α-平滑肌肌动蛋白表达量。结论Ang1-7可抑制AngⅡ诱导的α-平滑肌肌动蛋白表达。 展开更多
关键词 血管紧张素 rock2 信号通路 肝星状细胞 Α-SMA
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虾青素对脑出血大鼠的神经保护作用及机制 被引量:7
6
作者 周子薇 郑晓梅 +2 位作者 先耀 涂婷 左清娇 《山东医药》 CAS 2020年第26期6-9,共4页
目的观察虾青素对脑出血大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制。方法将168只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、低剂量虾青素组、高剂量虾青素组各42只。模型对照组和低、高剂量虾青素组通过尾状核注入尾静脉自体血建立脑出血模型,... 目的观察虾青素对脑出血大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制。方法将168只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、低剂量虾青素组、高剂量虾青素组各42只。模型对照组和低、高剂量虾青素组通过尾状核注入尾静脉自体血建立脑出血模型,假手术组注射等量生理盐水。将每组根据灌胃时间不同分为1、3、7 d 3个亚组各14只,低剂量虾青素组、高剂量虾青素组分别给予虾青素20、40 mg/(kg·d)灌胃,假手术组、模型对照组分别给予等体积花生油溶剂灌胃。于灌胃1、3、7 d行神经功能评分后,采用ELISA法检测血清炎症因子TNF-α、IL-1β水平;用干湿重法测定脑组织含水量,伊文思蓝(EB)染色法检测血脑屏障通透性,免疫组化法检测脑组织ROCK2、Claudin5蛋白表达。结果与假手术组比较,模型对照组各时间点神经功能评分降低,血清TNF-α、IL-1β水平升高,脑组织含水量、EB含量增加,ROCK2蛋白表达增加,Claudin5蛋白表达降低(P均<0.05);与模型对照组比较,低剂量虾青素组、高剂量虾青素组大鼠各时间点神经功能评分均升高,血清TNF-α、IL-1β水平降低,脑组织含水量、EB含量降低,ROCK2蛋白表达降低,Claudin5蛋白表达增加(P均<0.05),高剂量虾青素组上述指标改善程度较低剂量组更为明显(P均<0.05)。结论虾青素可降低脑出血大鼠的血清炎症因子水平,改善血脑屏障通透性,减轻脑水肿,具有一定的神经保护作用,这可能通过抑制ROCK2表达、上调Claudin5蛋白表达来实现的。 展开更多
关键词 虾青素 脑出血 血脑屏障 rock2 Claudin5 大鼠
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三七总皂苷对缺糖缺氧/再灌注损伤SH-SY5Y细胞NgR1、ROCK2 mRNA和蛋白表达的影响 被引量:7
7
作者 张晓萌 娄利霞 +3 位作者 柴立民 刘炜 史晓伟 朱陵群 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第5期1124-1127,共4页
目的:研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对Nogo-NgR及其下游通路中NgR1和ROCK2 mRNA和蛋白的调控作用。方法:将SH-SY5Y细胞分为8组:正常组、模型组、维甲酸(retinoic acid,RA)组、三七总皂苷大(640 mg/L)、小(320 mg/L)... 目的:研究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)对Nogo-NgR及其下游通路中NgR1和ROCK2 mRNA和蛋白的调控作用。方法:将SH-SY5Y细胞分为8组:正常组、模型组、维甲酸(retinoic acid,RA)组、三七总皂苷大(640 mg/L)、小(320 mg/L)剂量组、Y27632组、Y27632+三七总皂苷大、小剂量组,采用缺糖缺氧方法建立SH-SY5Y细胞损伤模型。应用实时荧光定量PCR和Western blot检测SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤后NgR1、ROCK2 mRNA和蛋白表达特征及三七总皂苷对其影响。结果:模型组细胞中NgR1、ROCK2 mRNA和蛋白的表达较正常组显著升高(P<0.01);各给药组细胞中NgR1和ROCK2 mRNA水平较模型组均有较为显著的降低(P<0.01或P<0.05);Western blot结果显示Y27632+三七总皂苷大、小剂量组中NgR1表达水平较模型组有显著差异(P<0.01或P<0.05);Rock2在三七总皂苷大剂量组、Y27632组和Y27632+三七总皂苷大、小剂量组中,表达水平较模型组明显减少(P<0.01或P<0.05)。结论:三七总皂苷可能通过抑制NgR1、ROCK2 mRNA和蛋白在缺糖缺氧损伤SH-SY5Y细胞中的表达,进而促进轴突的生长和重塑。 展开更多
关键词 三七总皂苷 SH-SY5Y NgR1 rock2
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牛膝-白芍配伍对帕金森病小鼠神经炎症及RhoA/ROCK2信号通路的影响 被引量:5
8
作者 刘京 刘得水 +1 位作者 张英博 张晓杰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第21期50-57,共8页
目的:观察牛膝和白芍不同剂量对肝阳上亢证帕金森病小鼠神经炎症及多巴胺能神经元的保护作用,并探究其作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、牛膝-白芍低、中、高剂量组(3.25、6.5、13 g·kg-1)、司来吉兰组(0.01 g... 目的:观察牛膝和白芍不同剂量对肝阳上亢证帕金森病小鼠神经炎症及多巴胺能神经元的保护作用,并探究其作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、牛膝-白芍低、中、高剂量组(3.25、6.5、13 g·kg-1)、司来吉兰组(0.01 g·kg-1)。采用附子汤灌胃联合1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射的方法制备肝阳上亢证帕金森病模型。通过小鼠转棒实验和爬杆实验评估其行为学改变;蛋白免疫印迹法(Western blot)测定小鼠脑黑质中Ras同源基因家族蛋白A(RhoA)、Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶2(ROCK2)、肌球蛋白轻链1(MLC1)、α-突触核蛋白(α-synuclein)的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测脑黑质中RhoA、ROCK2、MLC1 mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)促炎细胞因子含量;透射电镜观察小鼠神经元超微结构变化。结果:与正常组比较,模型组跌落潜伏期显著缩短及爬杆时长显著增加(P<0.01),脑黑质内RhoA、ROCK2、MLC1、α-synuclein、TNF-α、IL-1β水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,牛膝-白芍低、中、高剂量组、司来吉兰组跌落潜伏期明显增加及爬杆时长明显降低(P<0.05,P<0.01),且ROCK2、MLC1、α-synuclein、TNF-α、IL-1β水平均降低(P<0.05)。电镜下与正常组比较,模型组神经元胞质内细胞器数量明显减少,线粒体肿胀且内质网形态异常,而牛膝-白芍高剂量组和司来吉兰组经元胞核结构完整,细胞轮廓清晰,内质网形态正常。结论:牛膝-白芍配伍改善肝阳上亢证PD小鼠运动能力,下调RhoA/ROCK2信号通路相关蛋白表达,抑制炎性因子表达,减轻多巴胺能神经元损伤,其机制可能与抑制脑内RhoA/ROCK2信号通路介导的神经炎症反应有关。 展开更多
关键词 帕金森病 肝阳上亢证 1-甲基-4-苯基-1 2 3 6-四氢吡啶(MPTP) 牛膝-白芍 Ras同源基因家族蛋白A(RhoA) Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(2 rock2) 神经炎症
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慢性脑缺血致认知功能障碍大鼠皮层ROCK2、MBS表达的变化 被引量:7
9
作者 王立波 莽靖 +4 位作者 刘晓阳 王晓明 何金婷 包晓群 徐忠信 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1320-1323,共4页
目的探讨Rho激酶(ROCK)2及下游底物肌球蛋白结合亚单位(MBS)在慢性脑缺血致认知功能障碍大鼠皮层中的表达变化及法舒地尔对其的影响。方法健康雄性Wistar大鼠54只,随机分为假手术组、缺血组和ROCK抑制剂(法舒地尔)组。各组再根据缺血时... 目的探讨Rho激酶(ROCK)2及下游底物肌球蛋白结合亚单位(MBS)在慢性脑缺血致认知功能障碍大鼠皮层中的表达变化及法舒地尔对其的影响。方法健康雄性Wistar大鼠54只,随机分为假手术组、缺血组和ROCK抑制剂(法舒地尔)组。各组再根据缺血时间分为3、6、9 w三组,每组6只。采用双侧颈总动脉永久性结扎(2VO)建立慢性脑缺血模型,Morris水迷宫检测学习记忆功能,RT-PCR和Western印迹检测ROCK2及其下游作用底物MBS的表达水平。结果与假手术组相比,模型组和法舒地尔组大鼠逃避潜伏期和游泳路径均明显延长(P<0.05);缺血3 w起,大鼠皮层ROCK2、MBS表达明显增高;法舒地尔干预后,大鼠逃避潜伏期和游泳距离缩短(大鼠学习记忆成绩不同程度改善),ROCK2、MBS表达水平均有不同程度降低,与模型组相比差异显著(P<0.05)。结论 ROCK2及其下游作用底物MBS参与大鼠慢性脑缺血致认知功能障碍,脑组织存在ROCK2表达上调与功能活化,ROCK抑制剂法舒地尔能够减轻神经功能损伤,从而改善学习记忆功能。 展开更多
关键词 慢性脑缺血 认知功能 rock2 MBS 法舒地尔
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基于miR-335/ROCK2轴探讨补肾启智方对OGD/R损伤HT22细胞焦亡与应激颗粒的影响
10
作者 傅晨 巩俐 +2 位作者 王翎沣 马承平 刘雪梅 《中医学报》 CAS 2024年第8期1583-1590,共8页
目的:探讨补肾启智方通过调控微小RNA-335(microRNA-335,miR-335)靶向Rho家族相关蛋白激酶2(Rho associated protein kinase 2,ROCK2)蛋白,对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤HT22细胞焦亡与应激颗... 目的:探讨补肾启智方通过调控微小RNA-335(microRNA-335,miR-335)靶向Rho家族相关蛋白激酶2(Rho associated protein kinase 2,ROCK2)蛋白,对氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤HT22细胞焦亡与应激颗粒的影响。方法:取对数生长期的HT22细胞,随机分为空白组、模型组、补肾启智方组、miR-335抑制组、空病毒对照组、补肾启智方+miR-335抑制组。除空白组外,其余各组细胞均建立OGD/R损伤模型。采用CCK-8法检测细胞存活率,qRT-PCR法检测细胞miR-335 mRNA表达水平,Western blot检测细胞ROCK2、T细胞胞内抗原1(T cell intracellular antigen 1,TIA1)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(c-Caspase-1)、消皮素D-N(gasdermin D-N,GSDMD-N)蛋白表达水平,ELISA法检测细胞上清液白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)水平。结果:与空白组比较,模型组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.05)。与模型组比较,补肾启智方组细胞存活率、miR-335 mRNA水平升高,miR-335抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.01)。与空病毒对照组比较,miR-335抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平降低(P<0.01)。与miR-335抑制组比较,补肾启智方+miR-335抑制组细胞存活率、miR-335 mRNA水平升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平升高,TIA1蛋白表达水平降低(P<0.01)。与模型组比较,补肾启智方组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平降低,TIA1蛋白表达水平升高,而miR-335抑制组细胞上述蛋白的表达趋势与之相反(P<0.05)。与空病毒对照组比较,miR-335抑制组细胞ROCK2、NLRP3、ASC、c-Caspase-1、GSDMD-N蛋白表达水平� 展开更多
关键词 补肾启智方 卒中后认知障碍 海马 氧糖剥夺/复氧 miR-335 rock2 NLRP3炎症小体 应激颗粒 细胞焦亡
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RhoC及其效应分子ROCK2在人喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义 被引量:4
11
作者 张俊波 石怀银 刘良发 《医学研究杂志》 2011年第12期73-76,共4页
目的探讨RhoC及其效应分子ROCK2在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达及临床意义。方法运用免疫组化技术检测50例LSCC标本RhoC和ROCK2蛋白的表达,并检测22例正常鳞状上皮中ROCK2蛋白的表达。结果 RhoC在不同... 目的探讨RhoC及其效应分子ROCK2在喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)中的表达及临床意义。方法运用免疫组化技术检测50例LSCC标本RhoC和ROCK2蛋白的表达,并检测22例正常鳞状上皮中ROCK2蛋白的表达。结果 RhoC在不同LSCC组织中的差异表达与相应患者的淋巴结转移(P=0.020)和临床分期相关(P=0.042);ROCK2在正常鳞状上皮与LSCC组织中的阳性表达率之间具有显著差异(P=0.039),而在不同LSCC组织中其差异表达仅与相应患者的肿瘤大小相关(P=0.045);将LSCC组织中RhoC和ROCK2的表达同时为阳性定义为RhoC-ROCK2通路阳性,发现这条通路在不同LSCC组织中的差异表达均与淋巴结转移相关(P=0.004),但与肿瘤大小无关(P=0.319)。结论 RhoC及其效应分子ROCK2的异常表达可能与LSCC的进展尤其是淋巴结转移的发生有关。 展开更多
关键词 喉鳞状细胞癌 RHOC rock2 淋巴结转移
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ROCK2干扰MKP1表达促进肝细胞癌侵袭和转移
12
作者 周玮 芦珊 +1 位作者 杜云艳 陈磊峰 《实用癌症杂志》 2023年第11期1741-1749,共9页
目的 探讨ROCK2是否通过调控MKP1表达影响肝癌细胞侵袭转移。方法 采用qRT-PCR及western blot方法以及CCK8和EDU实验,证实ROCK2是通过调控MKP1表达影响肝癌细胞侵袭转移。结果 MKP1在肝细胞癌(HCC)中的表达显著下调,并且MKP1是预后不良... 目的 探讨ROCK2是否通过调控MKP1表达影响肝癌细胞侵袭转移。方法 采用qRT-PCR及western blot方法以及CCK8和EDU实验,证实ROCK2是通过调控MKP1表达影响肝癌细胞侵袭转移。结果 MKP1在肝细胞癌(HCC)中的表达显著下调,并且MKP1是预后不良的独立预测因子。在体外和体内研究中,MKP1显著抑制HCC细胞的侵袭和转移。MKP1低表达与ROCK2表达有关,ROCK2在HCC中起着重要作用。数据表明MKP1在ROCK2介导的转移和侵袭中至关重要。ROCK2对MKP1的蛋白和转录水平调控不一致;ROCK2激活ERK1/2-ATF2信号传导,其导致MKP1的mRNA表达增加。ROCK2促进泛素通过激活ERK1/2介导MKP1的降解,从而促进HCC的转移。结论 ROCK2在HCC进展中干扰MKP1的蛋白和mRNA表达。MKP1可作为一种预测肿瘤侵袭转移的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 肝细胞癌 转移 泛素化 MKP1 rock2
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法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROCK2及TNF-α表达影响的研究
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作者 张建银 邬容光 +6 位作者 王强强 张淑红 马金秀 王艳 耑冰 陈乾 董辉 《宁夏医学杂志》 CAS 2023年第8期679-683,共5页
目的观察法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达的影响,探讨法舒地尔对血性心肌梗死(AMI)大鼠的心肌保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,使用随机数字表法,将其分为对照组、假手术组(sham组)、心肌... 目的观察法舒地尔对急性心肌梗死大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达的影响,探讨法舒地尔对血性心肌梗死(AMI)大鼠的心肌保护作用。方法健康成年雄性SD大鼠48只,使用随机数字表法,将其分为对照组、假手术组(sham组)、心肌梗死模型组(AMI组)及心肌梗死后尾静脉注射盐酸法舒地尔组(AMI+HF组)。盐酸法舒地尔溶液浓度为30 mg/100 mL,给药剂量为4 mg/kg,该组大鼠自模型建立成功后立即首次给药,完成首次给药后开始计时,以后每6 h尾静脉注射HF 1次;AMI组及AMI+HF组大鼠开胸并结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型。结扎成功6、24、48 h后无痛将其处死大鼠获取心肌组织;对照组大鼠不做处理,sham组大鼠开胸后,于大鼠冠状动脉穿线但不结扎冠状动脉(对照组及sham组大鼠每6 h尾静脉注射生理盐水1次),均无痛将其处死后获取心肌组织;使用Real-time PCR测定心肌组织中ROKC2 mRNA表达水平,使用蛋白质免疫印迹检测心肌组织中ROCK2及TNF-α蛋白表达水平。结果Sham组大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);在冠脉结扎6 h、24 h和48 h的时间点,AMI组大鼠、AMI+HF组大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达均高于sham组(P<0.05);在冠脉结扎6 h、24 h、48 h的时间点,AMI+HF组大鼠心肌组织中ROCK2 mRNA和蛋白及TNF-α蛋白表达均低于AMI组(P<0.05)。结论法舒地尔抑制AMI大鼠心肌组织中ROCK2表达,降低下游炎性因子TNF-α水平,这可能是法舒地尔具备保护心肌作用的机制之一。 展开更多
关键词 法舒地尔 急性心肌梗死 大鼠 rock2
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RhoA和ROCK2在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓中的表达 被引量:4
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作者 梁婵婵 王巧真 +4 位作者 蒋欣 刘金梦 徐进超 郑怡雯 王箐 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期29-34,共6页
目的:通过研究RhoA和ROCK2在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓内的表达变化以阐明Rho/ROCK信号通路在肌萎缩侧索硬化症(ALS)病程中的作用。方法:饲养SOD1-G93A转基因小鼠和同窝野生型小鼠至发病早期、中期和晚期,部分小鼠冰上剥离新鲜脊髓组织,... 目的:通过研究RhoA和ROCK2在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓内的表达变化以阐明Rho/ROCK信号通路在肌萎缩侧索硬化症(ALS)病程中的作用。方法:饲养SOD1-G93A转基因小鼠和同窝野生型小鼠至发病早期、中期和晚期,部分小鼠冰上剥离新鲜脊髓组织,利用RT-PCR方法检测RhoA和ROCK2 mRNA的表达,利用Western Blot方法检测RhoA和ROCK2蛋白的表达;部分小鼠行心脏灌注并剥离其脊髓组织制成冰冻切片,利用免疫组织化学染色方法检测RhoA和ROCK2蛋白的表达。结果:在SOD1-G93A鼠发病的早期、中期和晚期,转基因小鼠脊髓中RhoA和ROCK2的mRNA及蛋白表达均上调。免疫组织化学染色实验结果显示,野生型小鼠脊髓中RhoA和ROCK2弥散分布于胞质和突起中,阳性染色浅,SOD1-G93A转基因小鼠脊髓中RhoA和ROCK2阳性染色深,大量聚集在细胞膜及细胞质。结论:RhoA和ROCK2在SOD1-G93A转基因小鼠脊髓中异常高水平表达与ALS脊髓区病变密切相关,可能参与ALS疾病进程。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 脊髓 RHOA rock2 SOD1-G93A转基因小鼠
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Rock2和Wnt11在食管癌细胞系中的表达及意义 被引量:4
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作者 宁超 马遇庆 杜靖 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第1期10-13,共4页
目的早期食管癌临床症状常不明显,肿瘤标志物的深入研究对食管癌早期诊断极为重要。文中通过研究体外特定细胞株[Eca-109及人食管正常上皮细胞(HEEC)]中Rock2和Wnt11蛋白表达量,分析各蛋白的表达与食管癌的关系。方法培养Eca-109和HEEC... 目的早期食管癌临床症状常不明显,肿瘤标志物的深入研究对食管癌早期诊断极为重要。文中通过研究体外特定细胞株[Eca-109及人食管正常上皮细胞(HEEC)]中Rock2和Wnt11蛋白表达量,分析各蛋白的表达与食管癌的关系。方法培养Eca-109和HEEC细胞株,RT-q PCR和Western blot技术检测Rock2和Wnt11在细胞株中的表达水平。结果RT-q PCR检测结果显示,与HEEC相比,Eca-109中Rock2 mRNA、Wnt11 mRNA表达水平明显升高[(1.000±0.000)vs(4.955±0.539),(1.000±0.000)vs(2.925±0.230),P<0.01]。Western blot检测显示Rock2和Wnt11蛋白在Eca-109中的表达较HEEC均升高[(955.000±21.628)vs(778.844±102.193),(2 175.316±145.623)vs(1 312.233±50.734),P<0.05]。结论 Rock2和Wnt11表达增高可能是食管鳞状细胞癌转移的标志。 展开更多
关键词 食管癌细胞 rock2 Wnt11
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RhoA/ROCK信号在子宫腺肌病在位及异位内膜中的表达及其与临床特征的相关性 被引量:2
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作者 龚薇 胡花 +2 位作者 段迎春 江彩霞 程忠平 《中国妇幼保健》 CAS 2018年第10期2335-2341,共7页
目的探讨Rho GTP酶激活蛋白26(ARHGAP26)及RhoA/Rock信号蛋白在子宫腺肌病中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和Western-blotting方法分别检测ARHGAP26及RhoA、ROCK1、ROCK2信号蛋白在20例子宫腺肌病患者的在位内膜(EU)... 目的探讨Rho GTP酶激活蛋白26(ARHGAP26)及RhoA/Rock信号蛋白在子宫腺肌病中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR和Western-blotting方法分别检测ARHGAP26及RhoA、ROCK1、ROCK2信号蛋白在20例子宫腺肌病患者的在位内膜(EU)、异位内膜(EC)组织以及20例增生期放置宫内节育器女性的子宫内膜组织(对照组)中的表达情况。结果RT-PCR检测显示:RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA在各组中均有表达,在EC、EU组中表达均高于对照组(P<0.01),且EC组高于EU组(P<0.01);而ARHGAP26 mRNA在EC、EU组中表达低于对照组(P<0.01),但EC组与EU组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。蛋白质印迹检测显示:RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达在EC组、EU组中表达均高于对照组(P<0.01),且ROCK1在EC组中的表达高于EU组(P<0.05),但RhoA、ROCK2在EC组及EU组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);而ARHGAP26在EC、EU组中表达均低于对照组(P<0.01),但EC组与EU组之间差异无统计学意义(P>0.05)。按月经量分别将EU组和EC组分为月经量正常组及月经量过多组,月经量过多组RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA及蛋白表达高于月经量正常组(P<0.01);而ARHGAP26 mRNA表达则正好相反(P<0.01);再按痛经程度分别将EU组和EC组分为轻度、中度、重度痛经组,RhoA、ROCK1、ROCK2mRNA及蛋白表达在EU组和EC组的重度痛经组中较轻、中度痛经组明显升高(P<0.01);ARHGAP26表达则正好相反。结论子宫腺肌病EC/EU组RhoA/ROCK mRNA及蛋白均呈高表达,ARHGAP26呈低表达,并与子宫腺肌症的临床特征相关,ARHGAP26及RhoA/ROCK在子宫内膜中的表达可能与子宫腺肌病的发病机制存在一定相关性。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 RHOA rock1 rock2 ARHGAP26
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ROCK2-shRNA转染对VaD大鼠海马神经元的保护作用
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作者 向军军 秦红玲 +4 位作者 卢健锋 杨璧璘 邓秋媚 陈炜 胡跃强 《西部医学》 2023年第6期812-816,共5页
目的探讨不同滴度ROCK2-shRNA腺相关病毒(AAV9-ROCK2-shRNA)转染对血管性痴呆(VaD)大鼠海马神经元的保护作用。方法选取成年SPF级健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、PBS对照组、低滴度组、中滴度组、高滴度组(n=8)。采用双侧颈总动脉... 目的探讨不同滴度ROCK2-shRNA腺相关病毒(AAV9-ROCK2-shRNA)转染对血管性痴呆(VaD)大鼠海马神经元的保护作用。方法选取成年SPF级健康雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、PBS对照组、低滴度组、中滴度组、高滴度组(n=8)。采用双侧颈总动脉永久性结扎法制备VaD模型,将AAV9-ROCK2-shRNA按原液(高滴度)、2倍(中滴度)、10倍(低滴度)稀释后,采用脑立体定位术注射至大鼠海马组织周围。于1周及4周后,进行Morris水迷宫测试大鼠学习和记忆能力变化,并于第4周行为学观察后取材,采用HE与尼氏染色观察神经元形态、分布及数量变化,免疫组化检测IL-1β阳性细胞数,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白(GFP)的转染情况。结果与正常组比较,PBS对照组术后1周与4周逃避潜伏期延长、跨越平台次数显著减少,神经元损伤明显,尼氏小体显著减少,差异有统计学意义(均P<0.05);与PBS对照组比较,术后1周,低、中、高滴度组大鼠逃避潜伏期、跨越平台次数差异无统计学意义(均P>0.05);术后4周,低、中、高滴度组较PBS对照组逃避潜伏期时间缩短、跨越平台次数增加,神经元排列整齐、形态更规则,尼氏小体增多,IL-1β阳性细胞数明显减少(均P<0.05);与中滴度组比较,术后1周,低、高滴度组的潜伏期、跨越平台次数差异无统计学意义(均P>0.05);术后4周,低、高滴度组大鼠逃避潜伏期延长、跨越平台次数减少,海马神经元受损更严重,尼氏小体数减少,IL-1β阳性细胞数增多,GFP转染率显著降低(均P<0.05)。结论中滴度AAV9-ROCK2-shRNA能高效、稳定、低毒地转染大鼠海马组织,对VaD大鼠海马神经元保护作用最优。 展开更多
关键词 血管性痴呆 海马神经元 Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2 腺相关病毒
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基于Rho-ROCK信号转导通路研究竹沥对肝纤维化小鼠的作用 被引量:3
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作者 王玖恒 徐成军 +6 位作者 王晓宏 张小冰 刘青松 王云中 郑洋 赵铁建 段雪琳 《中国肝脏病杂志(电子版)》 CAS 2021年第4期38-45,共8页
目的探究竹沥对肝纤维化小鼠Ras同源基因-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Ras homologousgene-Rho-associatedcoiled-coilcontainingkinases,Rho-ROCK)信号转导通路的作用,分析竹沥抗肝纤维化的分子机制。方法将40只KM小鼠随机分为空白组、模... 目的探究竹沥对肝纤维化小鼠Ras同源基因-Rho相关螺旋卷曲蛋白激酶(Ras homologousgene-Rho-associatedcoiled-coilcontainingkinases,Rho-ROCK)信号转导通路的作用,分析竹沥抗肝纤维化的分子机制。方法将40只KM小鼠随机分为空白组、模型组、竹沥组和丹参酚酸B组,每组10只,模型组、竹沥组和丹参酚酸B组小鼠给予40%CCl4花生油混合液(剂量2μl/g),空白组给予等量生理盐水,腹腔注射,2次/周,连续8周。模型构建成功后,竹沥组以竹沥灌胃,每日1次,每次30 ml/100 g;丹参酚酸B组以丹参酚酸B溶液灌胃,每日1次,每次用量0.25 mg/100 g;其余2组给予等量生理盐水灌胃,持续4周。末次给药后对小鼠眼球取血并处死,采用HE染色观察肝组织病理并进行Ishak评分,采用γ放射免疫全自动双探头计数器检测肝纤维化指标,包括透明质酸、层粘连蛋白、Ⅲ型前胶原和Ⅳ型胶原,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测Rho A和ROCK2m RNA的相对表达量,采用Western blot检测Rho A和ROCK2蛋白的相对表达量。结果空白组、模型组、竹沥组和丹参酚酸B组小鼠Ishak评分分别为(0.40±0.05)分、(4.80±0.84)分、(3.20±0.45)分和(2.80±0.83)分,差异有统计学意义(F=34.807,P<0.001),其中空白组显著低于模型组、竹沥组和丹参酚酸B组(t=8.690,P<0.001;t=5.674,P<0.001;t=4.768,P=0.001),模型组显著高于竹沥组和丹参酚酸B组(t=3.016,P=0.017;t=3.922,P=0.004),竹沥组和丹参酚酸B组差异无统计学意义(t=0.809,P=0.464)。空白组小鼠肝纤维化指标均显著低于模型组、竹沥组和丹参酚酸B组[透明质酸:(26.14±2.69)μg/L vs(53.69±5.87)μg/L vs(37.21±3.04)μg/L vs(32.88±3.60)μg/L,层粘连蛋白:(120.37±15.57)μg/L vs(214.48±21.39)μg/L vs(162.54±19.22)μg/L vs(161.66±14.23)μg/L,Ⅲ型前胶原:(4.04±1.01)μg/L vs(11.70±3.09)μg/L vs(8.12±1.87)μg/L vs(7.80±1.72)μg/L,Ⅳ型胶原:(12.96±2.82)μg/L vs 展开更多
关键词 肝纤维化 竹沥 Rho A rock2
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血浆Rho激酶水平与急性冠脉综合征的关系 被引量:3
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作者 黄华星 柳茵 《医学研究杂志》 2013年第7期145-147,共3页
目的研究Rho激酶(ROCK2)在急性冠脉综合征(ACS)患者血浆中的活化情况,探讨Rho/Rho激酶与急性冠脉综合征的关系。方法选取2011年1月~2012年10月于青海大学附属医院心内科住院治疗诊断为急性心肌梗死的患者36人(A组),诊断为不稳定型心绞... 目的研究Rho激酶(ROCK2)在急性冠脉综合征(ACS)患者血浆中的活化情况,探讨Rho/Rho激酶与急性冠脉综合征的关系。方法选取2011年1月~2012年10月于青海大学附属医院心内科住院治疗诊断为急性心肌梗死的患者36人(A组),诊断为不稳定型心绞痛的患者31人(B组);选取同院同期体检中心健康体检者32人为对照组(C组),分别抽取各研究对象静脉血2ml置于EDTA管内,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定患者血浆中ROCK2的水平,所有研究对象均检测C反应蛋白及尿酸(结果由青海大学附属医院生化室提供)。结果 3组研究对象中A组和B组血浆中ROCK2含量显著高于C组血浆中ROCK2水平(P<0.05)。A组血浆中ROCK2水平较B组差异无统计学意义。3组研究对象中A组及B组患者CRP及尿酸均高于C组(P<0.05),ROCK2活性与CRP呈正相关(r=0.603,P<0.01);ROCK2活性与尿酸呈正相关(r=0.299,P<0.01)。结论 Rho激酶(ROCK2)在急性冠脉综合征患者血浆中水平增高,表明其参与急性冠脉综合征发展,并具有重要意义。 展开更多
关键词 急性冠脉综合征 rock2 C反应蛋白 尿酸
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RhoA/ROCK2信号通路在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中的临床意义 被引量:3
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作者 顾颖 张晔 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期386-390,共5页
目的:研究RhoA、ROCK2在宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌组织中的表达,探讨其与CIN疾病及宫颈癌进展的相关性。方法:应用免疫组化S-P法,检测10例宫颈炎、30例不同级别CIN、30例宫颈癌组织中RhoA、R... 目的:研究RhoA、ROCK2在宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈癌组织中的表达,探讨其与CIN疾病及宫颈癌进展的相关性。方法:应用免疫组化S-P法,检测10例宫颈炎、30例不同级别CIN、30例宫颈癌组织中RhoA、ROCK2蛋白的表达情况,分析比较其表达与临床病理特征的关系。结果:①RhoA、ROCK2蛋白在宫颈炎组织中的表达率均为0%,在CIN宫颈组织中的表达率分别为36.7%、30.0%,在宫颈癌组织中的表达率分别为83.3%、76.7%,两者在宫颈癌组织中的表达水平高于CIN及宫颈炎组织(P<0.01),从CIN进展为宫颈癌,二者的阳性表达率呈递增趋势。②RhoA、ROCK2蛋白表达与宫颈癌病理组织分级及淋巴结转移相关(P<0.05),与宫颈癌患者的年龄、临床分期无明显相关关系(P>0.05)。③RhoA、ROCK2蛋白二者表达水平呈正相关关系(P=0.005)。结论:RhoA、ROCK2蛋白的表达水平与CIN疾病及宫颈癌进展呈正相关,检测RhoA、ROCK对了解CIN及宫颈癌生物学行为和评估预后具有一定的临床价值。 展开更多
关键词 RHOA rock2 免疫组化 CIN 宫颈癌
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