四君子汤对慢性肾脏病-蛋白质能量消耗模型小鼠的改善作用及机制研究 被引量：6

1

作者 许烨 李志明 远方 《中国药房》 CAS 北大核心 2020年第19期2358-2364,共7页

目的:研究四君子汤对慢性肾脏病-蛋白质能量消耗(CKD-PEW)模型小鼠骨骼肌萎缩的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将80只小鼠随机分为假手术组(n=10)和造模组(n=70)。造模组小鼠采用切除5/6肾联合低蛋白(4%酪蛋白)饮食法建立CKD-... 目的:研究四君子汤对慢性肾脏病-蛋白质能量消耗(CKD-PEW)模型小鼠骨骼肌萎缩的改善作用,并探讨其可能的作用机制。方法:将80只小鼠随机分为假手术组(n=10)和造模组(n=70)。造模组小鼠采用切除5/6肾联合低蛋白(4%酪蛋白)饮食法建立CKD-PEW模型。将造模成功的50只小鼠随机分为模型组,四君子汤低、中、高剂量组[2.34、4.68、9.36 g/(kg·d),以生药量计]和复方α-酮酸片组[阳性对照,1 g/(kg·d)],每组10只。各给药组小鼠灌胃相应药物,假手术组和模型组小鼠灌胃等体积生理盐水,每天1次,连续灌胃14 d。末次给药后,称定小鼠体质量、左侧胫骨前肌(TA)湿质量,并测定TA横截面积;检测小鼠TA蛋白合成与分解代谢情况;采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测小鼠TA中B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及胱天蛋白酶3(Caspase-3)mRNA表达水平;采用Western blotting法检测小鼠TA中肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)、肌环指蛋白1(MuRF-1)、Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)、磷酸化肿瘤抑制基因(p-PTEN)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组小鼠的体质量、TA湿质量、TA蛋白合成代谢能力以及PI3K、p-Akt蛋白表达水平显著降低(P<0.05),TA横截面积显著减小(P<0.05),TA蛋白分解代谢能力、Bax/Bcl-2比值、Caspase-3 mRNA表达水平和Atrogin-1、MuRF-1、ROCK1、p-PTEN蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,四君子汤中、高剂量组和复方α-酮酸片组小鼠上述指标均显著改善(P<0.05)。结论:四君子汤能够增加CKD-PEW模型小鼠体质量,抑制其骨骼肌萎缩;其机制可能与调控ROCK1/PTEN/Akt信号通路,抑制Atrogin-1和MuRF-1表达有关。 展开更多

关键词 四君子汤 慢性肾脏病 蛋白质能量消耗 rho相关蛋白激酶1 磷酸化肿瘤抑制基因 磷脂酰肌醇-3-激酶 蛋白激酶B 小鼠

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ROCK1基因敲除对乳腺癌细胞系迁移及侵袭的影响 被引量：3

2

作者 王晓杰 滕宇 +3 位作者 顾勐 王子宇 赵晓婷 岳文涛 《癌变．畸变．突变》 CAS 2019年第3期193-197,202,共6页

目的:通过成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas9)系统在MCF-7乳腺癌细胞系中构建Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)基因敲除模型,研究ROCK1 敲除对乳腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法:设计并合成靶向ROCK1 的向导RNA(sgRNA)寡核苷酸序列... 目的:通过成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas9)系统在MCF-7乳腺癌细胞系中构建Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)基因敲除模型,研究ROCK1 敲除对乳腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法:设计并合成靶向ROCK1 的向导RNA(sgRNA)寡核苷酸序列,长度为20 bp,构建到CRISPR单载体慢病毒上,感染并筛选稳定细胞株,采用划痕实验和Transwell实验分别检测细胞迁移和侵袭能力。结果:目的sgRNA寡核苷酸双链成功插入酶切后的GV392质粒载体中且测序正确;经Western blot鉴定ROCK1 敲除的细胞株构建成功;ROCK1 基因敲除后,与对照组细胞相比,其蛋白表达缺失。划痕实验结果显示ROCK1 敲除细胞株24 h划痕愈合度为(60.600±0.047)%,对照组细胞划痕愈合度为(80.404±0.018)%,差异有统计学意义(P=0.003)。Transwell实验结果显示ROCK1 敲除细胞株在24 h的迁移细胞数为(271.3±5.0)个,对照组的迁移细胞数为(448.3±5.5)个;48 h的迁移细胞数在实验组和对照组分别为(1.7±2.9)个和(298.3±5.7)个,差异有统计学意义(P=0.000)。结论:ROCK1 基因敲除可明显抑制乳腺癌细胞的迁移及侵袭能力,提示ROCK1 基因在乳腺癌侵袭和转移中可能发挥重要作用。 展开更多

关键词 rho相关蛋白激酶1 CRISPR/Cas9 迁移 侵袭

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miR-221对结核分枝杆菌感染巨噬细胞后炎性因子表达的影响 被引量：3

3

作者 何宝明 柏莹 李艳琴 《中国医药导报》 CAS 2018年第24期14-17,29,共5页

目的探讨microRNA-221(miR-221)对结核分枝杆菌感染巨噬细胞后炎症因子水平的影响。方法用qRT-PCR检测结核分枝杆菌感染后巨噬细胞中miR-221的表达;用miR-221模拟物和miR-221抑制物转染结核分枝杆菌感染的巨噬细胞,采用酶联免疫吸附测定... 目的探讨microRNA-221(miR-221)对结核分枝杆菌感染巨噬细胞后炎症因子水平的影响。方法用qRT-PCR检测结核分枝杆菌感染后巨噬细胞中miR-221的表达;用miR-221模拟物和miR-221抑制物转染结核分枝杆菌感染的巨噬细胞,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法和Griess法分别检测炎症因子表达和NO分泌;双荧光素酶报告基因、q RT-PCR和Western blot法检测miR-221和Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)的靶向关系。结果 miR-221在结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中低表达;miR-221模拟物上调巨噬细胞miR-221的表达水平,抑制巨噬细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和NO的分泌;miR-221抑制物下调巨噬细胞miR-221的表达水平,促进巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和NO的分泌;miR-221可作用于ROCK1的3′UTR,并抑制其表达(P<0.05)。结论 miR-221通过靶向抑制ROCK1的表达抑制结核分枝杆菌感染巨噬细胞后的炎症因子的表达。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 单核巨噬细胞 MicroRNA-221 rho相关蛋白激酶1 炎症因子

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Rho相关蛋白激酶1在胶质瘤组织的表达及其临床意义 被引量：1

4

作者 宋振宇 刘献志 +4 位作者 周国胜 马斯奇 罗文正 吴力新 郭孟果 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期543-545,共3页

目的探讨Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)在胶质瘤组织的表达及临床意义。方法采用Western blot检测ROCK1在脑胶质瘤蛋白表达水平,以乘积极限法(Kaplan-Meier)分析ROCK1与脑胶质瘤患者临床特征的关系;以小干扰RNA(siRNA)抑制人神经胶质细胞瘤U... 目的探讨Rho相关蛋白激酶1(ROCK1)在胶质瘤组织的表达及临床意义。方法采用Western blot检测ROCK1在脑胶质瘤蛋白表达水平,以乘积极限法(Kaplan-Meier)分析ROCK1与脑胶质瘤患者临床特征的关系;以小干扰RNA(siRNA)抑制人神经胶质细胞瘤U251的ROCK1的表达,Transwell迁移实验测定U251细胞迁移侵袭能力,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测U251细胞增殖能力。结果免疫印迹结果表明ROCK1在脑胶质瘤组织中高表达。ROCK1的表达与胶质瘤患者性别、年龄和肿瘤大小无明显相关(P>0.05),而ROCK1表达与世界卫生组织(WHO)胶质瘤分级明显相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示ROCK1高表达组为13.00±2.04,ROCK1低表达组为25.00±6.98,ROCK1高表达ROCK1的患者预后较差(P<0.01)。Transwell迁移实验结果显示si-ROCK1组跨膜的细胞数量减少45%~50%,表明ROCK1促进肿瘤细胞侵袭;CCK-8法结果显示si-ROCK1组比对照组减少约56个克隆细胞,表明ROCK1促进胶质瘤细胞增殖。结论ROCK1在胶质瘤患者中高表达,与胶质瘤发生、发展和转移明显相关。 展开更多

关键词 rho相关蛋白激酶1 胶质瘤 侵袭 增殖

原文传递

miR-146a通过抑制ROCK1基因的表达促进去势抵抗性前列腺癌细胞的凋亡 被引量：8

5

作者 蒋亮 刘春辉 +1 位作者 许斌 陈明 《东南大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期357-360,共4页

目的:探讨mi RNA-146a对激素非依赖前列腺癌细胞DU145、PC3凋亡的影响极其作用机制。方法:通过Hoechst染色方法观察高表达mi RNA-146a对前列腺癌细胞凋亡的影响。通过免疫印迹法(Western blot)观察高表达mi RNA-146a对cleave-caspase 3... 目的:探讨mi RNA-146a对激素非依赖前列腺癌细胞DU145、PC3凋亡的影响极其作用机制。方法:通过Hoechst染色方法观察高表达mi RNA-146a对前列腺癌细胞凋亡的影响。通过免疫印迹法(Western blot)观察高表达mi RNA-146a对cleave-caspase 3表达的影响。构建ROCK1 3'UTR报告基因质粒,合成mi RNA-146a minics,分别共转染DU145、PC3两种前列腺癌细胞,采用荧光素酶报告基因(Luciferase)实验检测mi R-146a是否与ROCK1相结合,采用免疫印迹法(Western blot)检测mi R-146a干扰后ROCK1蛋白量的表达。结果:Hoechst染色显示,转染mi RNA 146a后可以促进DU145和PC3的凋亡。高表达mi R-146a后cleave-caspase 3表达增加。Luciferase及Western blot显示,mi R-146a通过与靶基因ROCK1 3'UTR的结合抑制ROCK1的表达。结论:ROCK1是mi R-146a的靶基因,mi R-146a通过抑制ROCK1基因的表达促进前列腺细胞的凋亡。 展开更多

关键词 前列腺癌 rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 细胞凋亡

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右美托咪定对结肠癌模型大鼠的治疗作用及对RhoA/ROCK1信号通路的影响 被引量：4

6

作者 张哲哲 齐超 +2 位作者 张晓玲 张孟田 刘红曼 《中国医院用药评价与分析》 2022年第2期188-192,共5页

目的:探讨右美托咪定对结肠癌模型大鼠的治疗作用及对Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)信号通路的影响。方法:通过1,2-二甲肼诱导建立结肠癌大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,右美托咪定低(25μg/kg)、中... 目的:探讨右美托咪定对结肠癌模型大鼠的治疗作用及对Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)信号通路的影响。方法:通过1,2-二甲肼诱导建立结肠癌大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组,右美托咪定低(25μg/kg)、中(50μg/kg)和高(100μg/kg)剂量组,每组6只。另取6只未造模大鼠作为正常组。各组大鼠给予相应药物处理4周,观察大鼠的一般状况;检测大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)水平;解剖观察肿瘤的生长和分布情况;采用苏木精-伊红染色观察病理学变化;检测正常结肠组织和结肠癌组织中RhoA和ROCK1蛋白表达水平。结果:正常组大鼠体重随时间增长,结肠组织结构正常,无炎症细胞浸润;模型组大鼠体重增长缓慢,肛门红肿溃破、大便稀溏,结肠上可见突出肿瘤组织,结肠组织结构异常,炎症细胞浸润程度严重;右美托咪定低、中和高剂量组大鼠体重均高于模型组,肠壁糜烂出血情况有不同程度的减轻,结肠组织结构相比于模型组较为完整,炎症细胞浸润程度有所降低。相较于正常组,模型组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平以及结肠癌组织RhoA和ROCK1蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);相较于模型组,右美托咪定低、中和高剂量组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平以及结肠癌组织RhoA和ROCK1蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:右美托咪定对结肠癌大鼠具有一定的治疗作用,可能与其抑制RhoA/ROCK1通路有关。 展开更多

关键词 右美托咪定 结肠癌大鼠 Ras同源基因家族成员A rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1

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沉默Ras同源物家族成员C对唾液腺腺样囊性癌增殖、侵袭和迁移的影响

7

作者 于汶源 赵鹏 +6 位作者 邵禹 徐勇 徐进 谢磊 于承浩 何秋萍 陈正岗 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期723-734,共12页

目的探讨沉默Ras同源物家族成员C(RhoC)对唾液腺腺样囊性癌(SACC)增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响及其分子机制。方法选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织各27例,... 目的探讨沉默Ras同源物家族成员C(RhoC)对唾液腺腺样囊性癌(SACC)增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化(EMT)的影响及其分子机制。方法选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织各27例,通过蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫组织化学法检测RhoC的表达水平。针对RhoC基因序列设计3条小干扰RNA(siRNA),转染至SACC-LM和SACC-83细胞系中并评估转染效率。通过Western blot比较RhoC、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(ROCK1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、扭曲家族bHLH转录因子1(TWIST1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平。CCK-8实验、流式细胞术、Transwell侵袭实验、伤口愈合实验分别检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的差异。生物信息学方法预测RhoC可能的上游微小RNA(miRNA)及其在SACC中的表达情况,双荧光素酶报告基因实验验证二者的结合位点。结果RhoC在SACC中的表达显著上升(P<0.05)。沉默RhoC后,实验组ROCK1、p-p38MAPK、TWIST1、N-cadherin、Vimentin的表达显著下降,E-cadherin的表达显著上升(P<0.05);p38MAPK的表达无明显差异(P>0.05);细胞增殖、侵袭和迁移能力显著下降,凋亡率显著上升(P<0.05)。miR-138-5p在SACC中低表达,miR-138-5p micmic可以显著下调转染RhoC野生型质粒后293T细胞的荧光素酶活性(P<0.05)。结论RhoC在SACC中高表达,沉默RhoC可能靶向下游ROCK1/p38MAPK/TWIST1信号通路从而抑制SACC的增殖、侵袭、迁移和EMT,同时促进其凋亡。miR-138-5p在SACC中低表达,是RhoC潜在的上游基因,二者可能存在结合位点。 展开更多

关键词 唾液腺腺样囊性癌 Ras同源物家族成员C rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 上皮-间充质转化 miR-138-5p

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中耳胆脂瘤中Rock 1和Rock 2的表达研究

8

作者 宋少鹏 马秀岚 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期45-48,共4页

目的探讨Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(Rho-associated coiled coil-containing protein kinase 1,Rock1)和Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)在胆脂瘤发生过程中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测27例中耳胆脂瘤标本(病例组)和20例外... 目的探讨Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(Rho-associated coiled coil-containing protein kinase 1,Rock1)和Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)在胆脂瘤发生过程中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测27例中耳胆脂瘤标本(病例组)和20例外耳道皮肤组织标本(对照组)中Rock1和Rock 2的表达。结果 Rock1蛋白阳性表达定位于细胞质,其在中耳胆脂瘤上皮中阳性表达率为77.78%(21/27),高于对照组外耳道皮肤的25.0%(5/20),差异有统计学意义(P<0.05);Rock 2蛋白阳性表达主要定位于细胞质,其在中耳胆脂瘤上皮的阳性表达率为25.93%(7/27),低于对照组外耳道皮肤的90.0%(18/20),差异有统计学意义(P<0.05);在中耳胆脂瘤上皮组织中,Rock 1和Rock 2蛋白的表达呈负相关(r=-0.497,P=0.008<0.05)。结论中耳胆脂瘤上皮中Rock1高表达和Rock2的低表达可能在中耳胆脂瘤角质细胞的分化过程中起重要作用。 展开更多

关键词 胆脂瘤 rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2 细胞分化

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Rho相关的卷曲蛋白激酶1参与β淀粉样蛋白介导的大鼠原代神经元损伤 被引量：1

9

作者 胡勇博 任汝静 王刚 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1013-1018,共6页

目的·探讨Rho相关的卷曲蛋白激酶1(Rho-associated coiled coil protein kinase 1,ROCK1)是否参与了β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)引起大鼠海马神经元损伤的过程。方法·用Aβ40寡聚肽处理大鼠海马原代神经元,建立神经... 目的·探讨Rho相关的卷曲蛋白激酶1(Rho-associated coiled coil protein kinase 1,ROCK1)是否参与了β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)引起大鼠海马神经元损伤的过程。方法·用Aβ40寡聚肽处理大鼠海马原代神经元,建立神经元损伤模型。利用免疫印迹法检测ROCK1蛋白表达水平,试剂盒检测ROCK1激酶活性,激光共聚焦显微镜检测荧光染料Fluo-8AM标记的细胞内钙离子负荷,TUNEL染色检测细胞凋亡情况。加入ROCK1抑制剂Y-27632,观察其对Aβ40效应的影响。结果·10μmol/L Aβ40寡聚肽能引起神经元内钙超载,ROCK1蛋白表达增加和活性升高,以及细胞凋亡比例升高;而Y-27632能对抗Aβ40引起的这些效应。结论·ROCK1参与了Aβ40诱导的神经元内钙超载及神经毒性的产生,而ROCK1抑制剂能拮抗Aβ毒性效应。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 rho相关的卷曲蛋白激酶1 Β淀粉样蛋白 钙超载

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极低频电磁场对人胚胎眼巩膜成纤维细胞中ROCK1及COL1A1表达的调控作用

10

作者 牛宗镇 朱煌 +2 位作者 蔡晓静 王洁 冯婕妤 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期640-644,共5页

目的观察极低频电磁场(ELF-EMFs)对人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)中Rho相关的卷曲蛋白激酶1(ROCK1)及Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)表达的影响。方法 HFSFs体外培养和传代后以0.2 mT、50 Hz电磁场辐射24 h(暴露组),设立未行电磁场辐射的HF... 目的观察极低频电磁场(ELF-EMFs)对人胚胎眼巩膜成纤维细胞(HFSFs)中Rho相关的卷曲蛋白激酶1(ROCK1)及Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)表达的影响。方法 HFSFs体外培养和传代后以0.2 mT、50 Hz电磁场辐射24 h(暴露组),设立未行电磁场辐射的HFSFs作为对照组。Real-Time PCR检测ROCK1和COL1A1 mRNA的表达,Western blotting检测ROCK1和COL1A1蛋白的表达。结果 Real-Time PCR检测结果显示:与对照组相比,暴露组HFSFs中ROCK1 mRNA的表达显著上调(t=3.006,P=0.039 7),而COL1A1mRNA的表达显著下调(t=4.225,P=0.013 4)。Western blotting检测发现,暴露组HFSFs中ROCK1蛋白的表达升高,COL1A1蛋白的表达降低。结论 ELF-EMFs对HFSFs中ROCK1和COL1A1的表达具有调控作用,并因此使巩膜重塑,进而导致近视的发生和发展。 展开更多

关键词 极低频电磁场 人胚胎眼巩膜成纤维细胞 rho相关的卷曲蛋白激酶1 Ⅰ型胶原蛋白

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miR-153-3p靶向下调Rho相关螺旋蛋白激酶1(ROCK1)基因抑制乳腺癌细胞增殖及迁移 被引量：7

11

作者 孙蕾 王华 +1 位作者 姜珏 毕学苑 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期138-144,共7页

目的探究miR-153-3p调节乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法利用生物信息学软件检索预测miR-153-3p的候选靶基因;采用双荧光素酶报告实验分析miR-153-3p与候选基因的靶向关系;应用实时荧光定量PCR和Western blot法检测miR-15... 目的探究miR-153-3p调节乳腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法利用生物信息学软件检索预测miR-153-3p的候选靶基因;采用双荧光素酶报告实验分析miR-153-3p与候选基因的靶向关系;应用实时荧光定量PCR和Western blot法检测miR-153-3p对MDA-MB-231细胞mRNA和蛋白质表达水平的影响;通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,并以TranswellTM检测细胞的迁移和侵袭能力。结果软件预测显示miR-153-3p与Rho相关螺旋蛋白激酶1(ROCK1)有连续的结合区域;共转染miR-153-3p模拟物(miR-153-3p mimics)与ROCK1野生型报告载体的细胞相对荧光素酶活性降低;转染hsa-miR-153-3p-mimics后,MDA-MB-231细胞的miR-153-3p表达水平显著增高,且ROCK1蛋白的表达量明显降低。与对照组相比,转染组MDA-MB-231细胞的增殖、迁移和侵袭能力均减弱。结论miR-153-3p通过靶向下调ROCK1的表达来抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多

关键词 乳腺癌细胞 miR-153-3p rho相关螺旋蛋白激酶1(ROCK1) 细胞增殖 细胞迁移

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麦冬皂苷B调节Rho A/ROCK1信号通路对胃荷瘤大鼠肿瘤生长的抑制作用

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作者 徐明星 李子银 姜红梅 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期2180-2187,共8页

目的 探讨麦冬皂苷B(ophiopogonin B,OP-B)对胃荷瘤大鼠肿瘤生长的影响及其作用机制。方法 将66只体质量为180~200 g的6周龄SPF级SD大鼠(雌雄各半)按随机数字表法分为模型组,OP-B低、中、高剂量组,激活剂组,每组10只。采用原位移植Walke... 目的 探讨麦冬皂苷B(ophiopogonin B,OP-B)对胃荷瘤大鼠肿瘤生长的影响及其作用机制。方法 将66只体质量为180~200 g的6周龄SPF级SD大鼠(雌雄各半)按随机数字表法分为模型组,OP-B低、中、高剂量组,激活剂组,每组10只。采用原位移植Walker-256肿瘤组织建立胃荷瘤模型,OP-B低、中、高剂量组大鼠分别灌胃17.5、35、70 mg/kg的OP-B并腹腔注射等量生理盐水,激活剂组灌胃70 mg/kg的OP-B并腹腔注射1 mg/kg的Rho A/ROCK1信号通路激活剂溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA),模型组灌胃和腹腔注射等量的生理盐水;记录移植瘤质量及体积,计算抑瘤率;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察肿瘤组织形态;原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling, TUNEL)染色检测肿瘤组织细胞凋亡;免疫组织化学染色检测肿瘤组织细胞核增殖抗原67(proliferating cell nuclear antigen, Ki-67)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Cleaved Caspase-3)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)法检测Ras同源基因家族蛋白A(Ras homologous gene family member A,Rho A)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(Rho-associated coiled-coil forming protein kinase1,ROCK1)的表达;Western blot检测Rho A、ROCK1蛋白表达。结果 与模型组比较,OP-B低、中、高剂量组肿瘤质量和体积、Ki-67阳性率及Rho A、ROCK1 mRNA和蛋白表达显著降低,抑瘤率、肿瘤细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3阳性率显著升高(P<0.05);与OP-B高剂量组比较,激活剂组肿瘤质量和体积、Ki-67阳性率及Rho A、ROCK1 mRNA和蛋白表达显著升高,抑瘤率、肿瘤细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3阳性率显著降低(P<0.05)。结论 OP-B可能通过抑制Rho A/ROCK1信号通路的激活,抑制胃荷瘤大鼠肿瘤生长。 展开更多

关键词 胃癌 麦冬皂苷B Ras同源基因家族蛋白A/rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1信号通路 增殖 凋亡

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白芍总苷调节RhoA/ROCK1信号通路对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响

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作者 姜卫星 索成云 王亚博 《现代药物与临床》 CAS 2024年第6期1375-1383,共9页

目的 探讨白芍总苷通过调节Ras同源基因家族成员A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(RhoA/ROCK1)信号通路对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响。方法 通过阻断肝动脉和门静脉1 h建立肝缺血再灌注损伤大鼠模型,设假手术组、模型组、白芍总苷(100 mg/kg... 目的 探讨白芍总苷通过调节Ras同源基因家族成员A/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1(RhoA/ROCK1)信号通路对大鼠肝缺血再灌注损伤的影响。方法 通过阻断肝动脉和门静脉1 h建立肝缺血再灌注损伤大鼠模型,设假手术组、模型组、白芍总苷(100 mg/kg)组、白芍总苷+Rhosin(100 mg/kg+40 mg/kg)组和白芍总苷+LPA(100 mg/kg+1 mg/kg)组,每组8只。连续治疗6周后,检测各组大鼠血清肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)];HE、TUNEL染色法观察肝组织病理改变和细胞凋亡,并计算肝损伤评分和凋亡指数(AI);分光光度法检测肝组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量],ELISA检测炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]含量;通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测肝组织中RhoA、ROCK1、核因子-κB p65(NF-κB p65)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化型半胱氨酸蛋白酶-3(C-Caspase-3)m RNA和蛋白表达。结果 与模型组比较,白芍总苷组和白芍总苷+Rhosin组血清ALT、AST、TBiL水平显著降低(P<0.05);肝组织病理改变和细胞凋亡状况均明显改善,肝损伤评分和细胞AI均显著降低(P<0.05);SOD、CAT活性显著升高,MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低(P<0.05);RhoA、ROCK1、NF-κB p65、Bax、C-Caspase-3m RNA和蛋白表达均显著降低,Bcl-2m RNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05)。与白芍总苷组相比,Rhosin可显著增强白芍总苷对模型大鼠肝功能、肝组织病变、细胞凋亡、氧化应激、炎症及RhoA/ROCK1信号通路相关m RNA和蛋白表达的作用;LPA则显著逆转了上述调控作用。结论 白芍总苷可能通过抑制RhoA/ROCK1信号通路,减轻氧化应激、炎症和细胞凋亡,从而对大鼠肝缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。 展开更多

关键词 白芍总苷 肝缺血再灌注 Ras同源基因家族成员A/rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1信号通路 凋亡 氧化应激

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