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胰腺癌中PcG相关蛋白RYBP的表达及临床意义 被引量:6
1
作者 罗伟 朱小年 谭盛葵 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期125-128,共4页
目的探讨Pc G相关蛋白RYBP在胰腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测51例胰腺癌及对应癌旁组织中RYBP的表达,分析其表达与胰腺癌临床病理特征的关系。Kaplan-Meier法分析RYBP表达与胰腺癌患者术后生存时间的关系。结果 RYB... 目的探讨Pc G相关蛋白RYBP在胰腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测51例胰腺癌及对应癌旁组织中RYBP的表达,分析其表达与胰腺癌临床病理特征的关系。Kaplan-Meier法分析RYBP表达与胰腺癌患者术后生存时间的关系。结果 RYBP在胰腺癌中的阳性率(31.4%,16/51)明显低于癌旁组织(66.7%,34/51),两者差异有统计学意义(P<0.05)。RYBP表达与患者性别、年龄、吸烟、饮酒、肿瘤数目、有无淋巴结转移和血清CA199水平无明显相关性(P>0.05),与肿瘤直径及肿瘤病理分级有相关性(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析显示RYBP阳性组患者的总生存率明显高于阴性组(P<0.05)。结论 Pc G相关蛋白RYBP在胰腺癌中低表达,RYBP表达降低可能与胰腺癌发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 rybp 细胞凋亡
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Variant PRC1 subunit RYBP/YAF2 forms condensate with RING1B and promotes H2AK119ub deposition
2
作者 Yanjiang Liu Gongcheng Hu +4 位作者 Shengxiong Yang Chenghong Yan Juehan Wang Guangjin Pan Hongjie Yao 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2024年第9期2036-2038,共3页
Dear Editor,Polycomb group(Pc G)proteins represent important roles in repressing gene expression throughout development.The Polycomb repressive complexes(PRCs)have been subdivided into two central protein complexes,PR... Dear Editor,Polycomb group(Pc G)proteins represent important roles in repressing gene expression throughout development.The Polycomb repressive complexes(PRCs)have been subdivided into two central protein complexes,PRC1 and PRC2.PRC1 catalyzes H2AK119ub and PRC2catalyzes H3K27me1/2/3(Fursova et al.,2019).PRC1 is further categorized as CBX-containing canonical PRC1(c PRC1)and RYBP/YAF2-containing variant PRC1(v PRC1)(Blackledge and Klose,2021). 展开更多
关键词 PRC1 RING1 rybp
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肝细胞癌中PcG相关蛋白RYBP的表达及临床意义 被引量:5
3
作者 闫萌 谭盛葵 +1 位作者 肖胜军 侯巧燕 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1294-1296,共3页
目的探讨PcG相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化法检测75例HCC及癌旁组织中RYBP的表达,分析其与HCC临床病理特征的关系。结果RYBP在HCC中表达明显低于癌旁组织... 目的探讨PcG相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化法检测75例HCC及癌旁组织中RYBP的表达,分析其与HCC临床病理特征的关系。结果RYBP在HCC中表达明显低于癌旁组织,阳性率分别为33.3%(25/73)、65.3%(49/73),RYBP表达与患者性别、年龄、病理分级、临床分期、肿瘤数目、淋巴结转移无明显相关性(P>0.05),与肿瘤直径及血清AFP水平有相关性(P<0.05)。结论 PcG相关蛋白RYBP表达降低可能与HCC密切相关。 展开更多
关键词 肝肿瘤 rybp 凋亡 免疫组织化学
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PcG相关蛋白RYBP 被引量:2
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作者 田硕 陈等 +1 位作者 陈虹 黄秉仁 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期827-831,共5页
30多年前在果蝇体内鉴定到了PcG(Polycomb group)蛋白复合体,它是通过染色质修饰调控靶基因转录的表达抑制因子,通过抑制同源异形基因(homeotic gene,Hox)的表达调控机体发育。其相关蛋白质RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)分布于... 30多年前在果蝇体内鉴定到了PcG(Polycomb group)蛋白复合体,它是通过染色质修饰调控靶基因转录的表达抑制因子,通过抑制同源异形基因(homeotic gene,Hox)的表达调控机体发育。其相关蛋白质RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)分布于细胞质和细胞核,参与调节基因转录、个体发育、细胞凋亡以及人类恶性肿瘤的发生等生物学过程。本文就RYBP的特性、作用机制及生物学功能进行综述。 展开更多
关键词 PcG蛋白复合体 rybp 转录抑制 细胞凋亡
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RYBP慢病毒表达载体的构建及对结肠癌细胞HCT116增殖的影响 被引量:2
5
作者 马雯 陈虹 +1 位作者 黄秉仁 陈等 《医学研究杂志》 2013年第9期37-41,共5页
目的构建RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP,包装慢病毒颗粒并感染结肠癌细胞HCT116,分析RYBP的表达及对HCT116细胞增殖的影响。方法用DNA克隆技术在慢病毒表达载体pWPI-IRES-EGFP序列中引入Flag标签及多个单酶切位点序列,改造后的载体命名为... 目的构建RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP,包装慢病毒颗粒并感染结肠癌细胞HCT116,分析RYBP的表达及对HCT116细胞增殖的影响。方法用DNA克隆技术在慢病毒表达载体pWPI-IRES-EGFP序列中引入Flag标签及多个单酶切位点序列,改造后的载体命名为pWPI-linker。采用反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)从肝癌SK-Hep-1细胞总RNA中扩增RYBP的全长开放阅读框序列,克隆入pWPI-linker载体中,得到pWPI-RYBP。利用人胚肾细胞HEK293T包装重组慢病毒颗粒,分析该慢病毒颗粒感染HCT116细胞的效率、RYBP蛋白的表达,用MTS方法分析RYBP过表达对HCT116细胞增殖的影响。结果用改造的pWPI-linker载体成功构建慢病毒表达载体pWPI-RYBP包装的慢病毒颗粒能高效感染HCT116细胞,表达出Flag-RYBP融合蛋白。MTS方法分析表明,RYBP的过表达抑制HCT116细胞的增殖,增殖抑制率达26.1%。结论改建的慢病毒表达载体pWPI-linker带有可供选择的多个单克隆位点和标签蛋白序列,为今后基于pWPI载体的克隆构建和表达蛋白质的分析提供了极大的便利;RYBP慢病毒表达载体pWPI-RYBP的构建为进一步研究RYBP的生物学功能及基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 rybp 慢病毒载体 HCT116 细胞增殖
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RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因预测 被引量:1
6
作者 李秋兰 王顺清 +3 位作者 张玉平 陈晓燕 谢健晋 吴亮亮 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第16期2620-2625,共6页
目的探讨RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因。方法利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立多批次RYBP基因稳定沉默的HL60细胞株及空载体对照组(NC);通过二代测序技术对不同批次干扰的上述3对细胞进行mRNA测序及miRNA测序,利用KEGG等生物信息学... 目的探讨RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因。方法利用慢病毒介导的RNA干扰技术,建立多批次RYBP基因稳定沉默的HL60细胞株及空载体对照组(NC);通过二代测序技术对不同批次干扰的上述3对细胞进行mRNA测序及miRNA测序,利用KEGG等生物信息学分析方法 ,预测靶基因。结果成功构建RYBP稳定沉默的HL60细胞株。二代测序筛选出明显差异的mRNA及miRNA(P<0.05)。Pathway显著性富集分析发现表达下调的基因与氨基酸合成,癌症转录调节紊乱,氨基酸代谢等相关的KEGG pathway有关,详见后述;沉默RYBP后,SPI1与hsa-miR-214-3p均表达降低(P<0.05)。结论RYBP介导白血病细胞凋亡的靶基因可能为:BBC3、BAI1、SESN2、CCNG2、JAK3、STAT4、SPI1、BCL6、CD11b和hsa-miR-214-3p。 展开更多
关键词 rybp 白血病 二代测序 靶基因
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RYBP通过激活PARP-1诱导Parthanatos增加食管鳞癌细胞对YM155的敏感性
7
作者 柯悦 李宇星 +6 位作者 师小博 郭伟 刘笑笑 王玉琛 阮琴利 潘纪元 杨晓平 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期233-237,256,共6页
目的研究RYBP通过激活PARP-1依赖的Parthanatos增加食管鳞癌细胞对YM155敏感性的作用。方法使用CCK-8实验和流式细胞实验分析YM155对过表达RYBP和对照组细胞的抑制率及细胞死亡百分比,使用Western blotting分析YM155处理细胞后Parthana... 目的研究RYBP通过激活PARP-1依赖的Parthanatos增加食管鳞癌细胞对YM155敏感性的作用。方法使用CCK-8实验和流式细胞实验分析YM155对过表达RYBP和对照组细胞的抑制率及细胞死亡百分比,使用Western blotting分析YM155处理细胞后Parthanatos相关蛋白质表达的变化。结果通过YM155处理后,过表达RYBP组的细胞抑制率及细胞死亡百分比明显高于对照组;过表达RYBP能明显激活PARP-1,并在YM155处理后,过表达组的PARP-1活化更为显著;YM155处理后,细胞核内PAR积累,AIF由线粒体进入细胞核,且在RYBP过表达组的上述效应更为显著。结论 RYBP能通过激活PARP-1/PAR/AIF介导的Parthanatos增加食管鳞癌细胞对YM155的敏感性。 展开更多
关键词 食管鳞癌 rybp PARP-1 YM155 Parthanatos
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RYBP在原发性肝细胞癌中表达的临床意义
8
作者 景兴科 蔡卫华 +2 位作者 黄秉仁 陈虹 陈等 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期399-405,共7页
目的:探讨PcG(polycomb group)相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中差异表达的临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测77例HCC癌组织及癌旁正常组织中RYBP的表达水平,分析其表达水平与HCC临床病理特征、患者5... 目的:探讨PcG(polycomb group)相关蛋白RYBP在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中差异表达的临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测77例HCC癌组织及癌旁正常组织中RYBP的表达水平,分析其表达水平与HCC临床病理特征、患者5年生存率及预后的关系。结果:RYBP在HCC癌组织中的表达水平明显低于癌旁正常组织(P<0.05)。HCC患者RYBP表达水平与HBsAg,ALT,谷氨酰转肽酶(glutamyl transpetidase,GGT)、III型前胶原、肿瘤大小、远处转移、肿瘤分化程度等临床指标明显相关(P<0.05)。Kaplan-Meier分析表明HCC癌组织中RYBP低表达患者无复发生存率(recurrence-free survival,RFS)和总体生存率(overall survival,OS)均明显低于RYBP高表达患者(P<0.05)。单因素Cox回归分析提示低龄和RYBP高表达是RFS的保护因素,而GGT、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度和肿瘤大小等指标是RFS的危险因素(P<0.05);RYBP高表达是OS的保护因素,但肿瘤个数,ALT,GGT,甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP),腹膜癌胚抗原(peritoneal carcinoembryonic antigen,pCEA),淋巴结转移,TNM分期和肿瘤大小是危险因素(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示年龄、GGT、淋巴结转移和TNM分期是RFS的独立危险因素(P<0.05),淋巴结转移和TNM分期是OS的独立危险因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析提示:与血清中AFP水平相比,肿瘤组织中RYBP的表达水平能更好地预测HCC患者的预后。结论:PcG相关蛋白RYBP在HCC组织中表达降低,影响HCC患者的预后,可能成为HCC治疗的新靶点。 展开更多
关键词 肝细胞癌 rybp 免疫组织化学 生存率
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RYBP在鼻咽癌组织中的表达及临床意义
9
作者 陈莹 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2022年第8期9-11,共3页
检测RYBP在鼻咽癌组织中的表达,并分析RYBP的表达与患者临床病理指标的关系。方法 通过免疫组织SP法检测RYBP 在鼻咽癌和鼻咽黏膜炎症组织中的表达,分析其与患者年龄、性别、TNM分期、淋巴结转移等的关系。结果 RYBP在鼻咽癌组织中的阳... 检测RYBP在鼻咽癌组织中的表达,并分析RYBP的表达与患者临床病理指标的关系。方法 通过免疫组织SP法检测RYBP 在鼻咽癌和鼻咽黏膜炎症组织中的表达,分析其与患者年龄、性别、TNM分期、淋巴结转移等的关系。结果 RYBP在鼻咽癌组织中的阳性表达率低于炎症组织(P0.05),其表达与病理指标之间无显著相关性(P>0.05)。结论 RYBP可能参与了鼻咽癌的进展过程,RYBP的分子功能值得进一步深入研究。 展开更多
关键词 rybp 检测 研究
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RYBP在恶性肿瘤发生发展过程中的作用
10
作者 景兴科 黄秉仁 +1 位作者 陈虹 陈等 《中华保健医学杂志》 2019年第1期86-88,共3页
多梳蛋白(polycomb group,PcG)是一种多细胞有机体的转录抑制因子,主要特征是通过形成多蛋白复合体,参与染色质修饰和靶基因的调控及转录。研究发现,PcG家族有多个核心成员在肿瘤中的表达与肿瘤发生、发展、侵袭、预后等高度相关。RYBP(... 多梳蛋白(polycomb group,PcG)是一种多细胞有机体的转录抑制因子,主要特征是通过形成多蛋白复合体,参与染色质修饰和靶基因的调控及转录。研究发现,PcG家族有多个核心成员在肿瘤中的表达与肿瘤发生、发展、侵袭、预后等高度相关。RYBP(Ring 1 and YY1 binding protein)是近年新识别的PcG家族成员之一,主要分布在脐带、胎盘、脑腺垂体和甲状腺组织的细胞核和细胞质中,其中以胎盘和淋巴组织里表达量最高[1]。RYBP的作用机制除了参与PcG抑制复合物1(PRC1)的组成和抑制转录功能外,还在胚胎发育、干细胞分化、细胞凋亡和恶性肿瘤发生发展中发挥重要作用[2-4]。目前RYBP在肿瘤领域的研究不多而且存在矛盾,作为新的候选抑癌基因,其临床意义有待阐明。 展开更多
关键词 rybp 肿瘤细胞 凋亡 抗肿瘤药物
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RYBP在急性白血病中的表达 被引量:7
11
作者 钟雯婷 王顺清 +2 位作者 张玉平 许艳丽 应逸 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第18期3301-3303,共3页
目的:观察RYBP(Ring1 and YY1-binding protein)在急性白血病中的表达情况,初步探索其在急性白血病中的临床意义。方法:应用蛋白质免疫印迹(western blot)技术分别检测急性单核细胞白血病细胞株SHI-1、急性早幼粒白血病细胞株HL-60、慢... 目的:观察RYBP(Ring1 and YY1-binding protein)在急性白血病中的表达情况,初步探索其在急性白血病中的临床意义。方法:应用蛋白质免疫印迹(western blot)技术分别检测急性单核细胞白血病细胞株SHI-1、急性早幼粒白血病细胞株HL-60、慢性粒细胞白血病细胞株K562、51例初治急性白血病(AL)患者、23例急性白血病完全缓解(ALCR)患者和21例对照(非恶性血液病)患者骨髓单个核细胞中RYBP的表达情况。结果:SHI-1、HL-60及K562细胞株RYBP表达均为强阳性;21例阴性对照中RYBP表达均为阴性。AL组RYBP表达阳性率为73%,ALCR组阳性率为13%,AL组RYBP表达阳性率及表达量比ALCR组及对照组明显增高(P<0.05)。结论:RYBP在急性白血病细胞中表达水平异常增高,提示RYBP可能与急性白血病密切相关。 展开更多
关键词 白血病 Ring1和YY1结合蛋白(rybp) 蛋白质免疫印迹
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家蚕RYBP基因的结构与表达模式分析及转基因干涉系统的建立 被引量:2
12
作者 张美蓉 徐汉福 +2 位作者 许平震 邓党军 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期623-629,共7页
多梳蛋白(polycomb group,PcG)是一类对生物有机体生长发育很重要的转录抑制因子,参与有机体的发育调控。Ring和YY1结合蛋白(Ring and YY1 binding protein,RYBP)是在小鼠(Mus musculus)和果蝇(Drosophila melanogaster)中推断的PcG蛋... 多梳蛋白(polycomb group,PcG)是一类对生物有机体生长发育很重要的转录抑制因子,参与有机体的发育调控。Ring和YY1结合蛋白(Ring and YY1 binding protein,RYBP)是在小鼠(Mus musculus)和果蝇(Drosophila melanogaster)中推断的PcG蛋白成员。基于生物信息学分析方法,设计引物克隆了家蚕的RYBP基因(BmRYBP);序列结构分析显示该基因有一个420 bp的完整ORF,由3个外显子和2个内含子组成,编码139个氨基酸,预测其蛋白质分子质量为15.4 kD,等电点为10.36,N端的20~44 aa有一个与蛋白间相互作用有关的锌指结构域(ZnF-RBZ);半定量RT-PCR分析显示,该基因在家蚕5龄3 d幼虫生殖腺中高水平转录;基于GAL4/UAS双元系统,构建了具有BmRYBP序列反向重复结构的转基因干涉表达载体,通过显微注射家蚕早期胚胎,获得了UAS系统的转基因家蚕后代,为研究BmRYBP在家蚕生长发育过程中行使的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 家蚕 rybp基因 结构 组织表达特征 GAL4/UAS系统 转基因干涉
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RYBP基因沉默对HL-60细胞对化疗药物敏感性的影响 被引量:2
13
作者 曾丽华 王顺清 +5 位作者 邓晖 张玉平 应逸 陈小卫 许士林 林秀梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1576-1581,共6页
目的:用RNA干扰技术探讨白血病HL-60细胞株RYBP基因沉默后对化疗药物敏感性的影响。方法:构建针对RYBP基因的shRNA干扰质粒并建立稳定沉默RYBP基因的白血病HL-60细胞株,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测确认RYBP基因在mRNA和蛋白... 目的:用RNA干扰技术探讨白血病HL-60细胞株RYBP基因沉默后对化疗药物敏感性的影响。方法:构建针对RYBP基因的shRNA干扰质粒并建立稳定沉默RYBP基因的白血病HL-60细胞株,通过实时荧光定量PCR和Western blot检测确认RYBP基因在mRNA和蛋白水平的沉默效果。然后用DNA ladder及Annexin V标记的流式细胞术检测各组HL-60细胞凋亡的情况,用CCK-8法检测各组HL-60细胞对化疗药物阿糖胞苷和柔红霉素的敏感性。结果:成功构建的RYBP shRNA慢病毒载体能够有效沉默HL-60中RYBP基因的表达。在没有加入化疗药物时RYBP shRNA组凋亡率低于空载体对照组(NC组)(P<0.05);用阿糖胞苷处理时RYBP shRNA组凋亡率和抑制率均低于NC组(P<0.05);用柔红霉素处理时RYBP shRNA组凋亡率虽然低于NC组,但是抑制率差异不明显。结论:HL-60细胞RYBP基因沉默能抑制细胞的凋亡,明显降低对阿糖胞苷的敏感性,但是对柔红霉素敏感性的改变不明显。 展开更多
关键词 rybp基因 HL-60细胞 SHRNA 阿糖胞苷 柔红霉素 药物敏感性
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牛Rybp基因的表达特性分析 被引量:2
14
作者 赵艳芳 张乐 +3 位作者 王亚宁 宁越 王洪宝 昝林森 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第5期8-15,29,共9页
【目的】研究牛Rybp基因时空表达图谱,为Rybp基因的功能研究奠定基础。【方法】利用实时定量PCR方法,检测Rybp基因在秦川牛16种组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、睾丸、腹膜脂肪、心包脂肪、背最长肌、里脊、大肠、小肠、瘤胃、网胃... 【目的】研究牛Rybp基因时空表达图谱,为Rybp基因的功能研究奠定基础。【方法】利用实时定量PCR方法,检测Rybp基因在秦川牛16种组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、睾丸、腹膜脂肪、心包脂肪、背最长肌、里脊、大肠、小肠、瘤胃、网胃、皱胃和瓣胃)、5个不同发育阶段(6,12,18,24和60月龄)肌肉、脂肪组织以及不同分化阶段(第0,2,4,6,8和10天)牛成肌细胞中的表达特性。【结果】Rybp基因在成年秦川牛睾丸组织中的表达量远远高于其他组织,是背最长肌的365倍,而在背最长肌、里脊、心脏等组织中的表达量相对较低。Rybp基因在60月龄肌肉组织中表达量是6月龄的7倍,在6,12,18,24月龄表达量呈微弱上升趋势,但差异不显著;Rybp基因在6,12,18,24月龄脂肪组织中的表达量分别是60月龄的8.5,6.5,5.6和2.1倍,差异达显著水平;Rybp基因在成肌细胞分化第2,4,6,8,10天的表达量分别是第0天的3.6,5.0,9.9,7.0和4.3倍。【结论】随着秦川牛年龄的增加,Rybp基因在肌肉组织中的表达水平逐渐升高,在脂肪组织中的表达水平显著下降;在不同分化阶段成肌细胞中,随着成肌细胞分化进程的推进,Rybp基因表达水平逐渐升高,而当分化减速后,Rybp基因表达水平逐渐降低。牛Rybp基因可能对牛肌细胞分化起抑制作用。 展开更多
关键词 rybp基因 实时荧光定量PCR 肌肉 脂肪 成肌细胞
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转录抑制因子RYBP的研究进展 被引量:2
15
作者 张美蓉 许平震 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期871-876,共6页
Pc G蛋白(polycomb group proteins)是多细胞有机体中一类重要的表观遗传抑制因子,其功能是维持细胞分化和个体生长发育过程中基因的正确表达。转录抑制因子RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)是Pc G蛋白家族成员,可以与Ring1A、YY1和... Pc G蛋白(polycomb group proteins)是多细胞有机体中一类重要的表观遗传抑制因子,其功能是维持细胞分化和个体生长发育过程中基因的正确表达。转录抑制因子RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)是Pc G蛋白家族成员,可以与Ring1A、YY1和M33等其他Pc G蛋白家族成员相互作用,通过形成蛋白质复合体的形式行使功能。本文简述RYBP基因在小鼠(Mus musculus)和果蝇(Drosophila melanogaster)等模式生物中的表达特征,综述RYBP在基因转录调控、干细胞分化、细胞凋亡和恶性肿瘤发生中的作用及其转录抑制机制,以期较为详细了解RYBP的研究进展,为鳞翅目昆虫家蚕(Bombyx mori)RYBP的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 PcG蛋白家族 rybp蛋白 转录抑制因子 细胞凋亡 肿瘤发生
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RYBP基因稳定沉默的HL-60细胞系的构建 被引量:1
16
作者 周家砚 邓晖 +4 位作者 王春丽 张玉平 应逸 许艳丽 王顺清 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2012年第10期577-580,共4页
目的利用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,建立RYBP基因稳定沉默的HL.60细胞系。方法设计针对RYBP基因的5条短发夹状RNA(shRNA)序列,构建RYBPshRNA慢病毒重组载体,分别包装成慢病毒颗粒,直接感染HL-60细胞,同时设空载体和阴性... 目的利用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术,建立RYBP基因稳定沉默的HL.60细胞系。方法设计针对RYBP基因的5条短发夹状RNA(shRNA)序列,构建RYBPshRNA慢病毒重组载体,分别包装成慢病毒颗粒,直接感染HL-60细胞,同时设空载体和阴性对照shRNA慢病毒对照组。通过观察绿色荧光蛋白表达以监测感染效率,经嘌呤霉素(终质量浓度8μg/ml)筛选出稳定感染细胞。Westernblot实验初步鉴定出蛋白水平最低的RYBPshRNA组,用实时定量聚合酶链反应(PCR)进一步检测该组细胞mRNA表达水平。结果慢病毒感染的HL-60细胞经嘌呤霉素筛选成功,与对照组比较,5条RYBPshRNA组细胞RYBP表达均有不同程度减低(P〈0.01),其中以shRNA2沉默效果最佳,且shRNA2组的RYBP基因mRNA水平降低了95%以上(P〈0.05)。结论慢病毒介导的shRNA2能高效、稳定地沉默RYBP基因的表达,成功构建了RYBP基因稳定沉默的HL-60细胞系。 展开更多
关键词 rybp基因 短发夹状RNA HL-60细胞 慢病毒属 RNA干扰
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