表皮生长因子受体反义重组腺病毒联合放射线对乳腺癌细胞的作用 被引量：5

1

作者 李运军 马林 +1 位作者 隋建丽 周平坤 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第2期108-111,共4页

目的　探讨表皮生长因子受体 (EGFR)反义重组腺病毒联合放射线对乳腺癌细胞的作用。方法　人EGFR的cDNA片段被反向亚克隆入E1/E3缺失的 5型腺病毒载体中而得到AdE5 ,EGFR反义RNA的表达由CMV启动子控制。进而研究其联合γ射线对人乳腺癌... 目的　探讨表皮生长因子受体 (EGFR)反义重组腺病毒联合放射线对乳腺癌细胞的作用。方法　人EGFR的cDNA片段被反向亚克隆入E1/E3缺失的 5型腺病毒载体中而得到AdE5 ,EGFR反义RNA的表达由CMV启动子控制。进而研究其联合γ射线对人乳腺癌细胞株MDA MB 2 31成克隆能力及细胞周期分布的影响。结果　MDA MB 2 31细胞被AdE5感染后 ,EGFR蛋白质的表达被强烈地抑制。AdE5感染后以γ射线照射细胞 ,成克隆能力被抑制。且这种作用与病毒量和照射剂量相关联。进而流式细胞仪分析显示 ,30 0pfu/细胞的AdE5感染可使MDA -MB- 2 31细胞摆脱对放射线抗拒的G0 +G1期 ,进入对放射线敏感的G2 +M期 ,从而使AdE5联合放射线表现为协同效应。结论　以腺病毒载体介导的EGFR反义RNA转导可有效地用于针对EGFR的反义治疗策略 ,提高放射线对乳腺癌细胞杀灭作用。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 腺病毒 放射线 乳腺癌 癌细胞 EGFR rna反义 乳腺肿瘤

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视黄酸依赖反义cyclin D1对HL-60细胞细胞周期素依赖性激酶的影响

2

作者 杨剑 糜漫天 +1 位作者 杨志祥 韦娜 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期329-332,共4页

目的　探讨视黄酸 (retinoicacid ,RA)及其诱导的反义 (anti sense,AS)cyclinD1对HL 6 0细胞的细胞周期素激酶CDK4的影响。方法　通过构建含有视黄酸反应元件 (retinoicacidresponseelement,RARE)的反义cyclinD1RNA表达载体 pCI neo/RAR... 目的　探讨视黄酸 (retinoicacid ,RA)及其诱导的反义 (anti sense,AS)cyclinD1对HL 6 0细胞的细胞周期素激酶CDK4的影响。方法　通过构建含有视黄酸反应元件 (retinoicacidresponseelement,RARE)的反义cyclinD1RNA表达载体 pCI neo/RARE3 TK/AscyclinD1,使反义cyclinD1的表达可受视黄酸诱导调控。以脂质体转染HL 6 0白血病细胞后 ,运用MTT比色法检测细胞增殖功能、NBT还原实验观测细胞分化状况 ,RT PCR以及western blot等方法观测视黄酸处理后CDK4的mRNA和蛋白表达水平的改变。结果　RA处理后 ,细胞生长显著减慢 ,分化能力明显增强 ,CDK4mRNA和蛋白表达水平均有所降低 ,其中 ,以反义cyclinD1转染细胞经RA处理后变化更为显著。结论　RA及其诱导的反义cyclinD1对HL 6 展开更多

关键词 视黄酸 细胞周期素D1 rna反义 细胞/分化 细胞周期素依赖性激酶

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p53反义RNA对人肺癌细胞表型和顺铂敏感性的影响

3

作者 汪蕙 李金照 等 《结核病与胸部肿瘤》 2001年第4期11-17,共7页

目的：研究外源P53反义RNA对有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系恶性表型和顺铂敏感性的影响。方法：构建反义P53cDNA真核细胞表达载体，PEGFP－P53（AS），经酶切图证明反向联结质粒，Lipofectin介质转染有P53基因248密码点突变的... 目的：研究外源P53反义RNA对有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系恶性表型和顺铂敏感性的影响。方法：构建反义P53cDNA真核细胞表达载体，PEGFP－P53（AS），经酶切图证明反向联结质粒，Lipofectin介质转染有P53基因248密码点突变的人肺癌细胞系801－D，经G418筛选获耐受克隆，稀释法建立单细胞克隆系，PCR检测外源基因，荧光显微镜检测细胞绿荧光蛋白表达，P53单抗免疫组化染色检测P53突变蛋白表达，体外集落形成，检测细胞恶性生长。流氏细胞仪检测细胞周期，MTTI地检测细胞对顺铂药物敏感性。结果：酶切图证明了P53－cDNA反向联结于质粒，构建了PEGFP－P53（AS），建立了转染单细胞克隆系PEGFP－P53（AS）－801D及空载细胞系PEGFP－801D。PCR检测外源P53基因和neo基因存在于转染细胞PEGFP－P53（AS－801D。荧光显微镜下发现胞浆有绿荧光蛋白表达，免疫组化染色P53突变蛋白801D细胞系为阳性，而PEGFP－P53（AS）－801为阴性，证明外源反义P53封闭转染细胞内源突变蛋白表达。与母系相比PEGFP－P53（AS）－801D集落形成抑制率为61％（P＜0．01），流氏细胞仪检测PEGFP－P53（AS）－801D细胞G1期细胞数明显增加，出现G1期阻止的表现，MTT检测PEGFP－P53（AS）－801D对顺铂比母系更为敏感。结论：有P53基因248密码点突变的801D细胞恶性增殖明显，对顺铂耐药，外源P53反义RNA可封闭突变蛋白表达，抑制801D细胞体外恶性增殖，增加对顺铂的药物敏感性，证明P53突变的恶笥表型可以被抑制或野生型P53功能可得到恢复。 展开更多

关键词 P53 rna反义 转染细胞 集落形成 裸鼠移植 肺癌 顺铂

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端粒酶RNA反义核酸联合其催化亚单位反义核酸对子宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用 被引量：6

4

作者 雷厉秀 陈忠东 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期42-46,共5页

目的　探讨端粒酶RNA反义核酸 (反义hTR)联合端粒酶RNA催化亚单位反义核酸(反义hTERT) ,对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及作用机理。方法　实验分为空白对照、脂质体对照、正义hTR、正义hTERT、反义hTR、反义hTERT及反义hTR +反义hTER... 目的　探讨端粒酶RNA反义核酸 (反义hTR)联合端粒酶RNA催化亚单位反义核酸(反义hTERT) ,对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及作用机理。方法　实验分为空白对照、脂质体对照、正义hTR、正义hTERT、反义hTR、反义hTERT及反义hTR +反义hTERT组。分别采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、PCR 端粒重复序列扩增 (TRAP) 酶联免疫吸附实验 (ELISA)、吖啶橙染色法、流式细胞术检测宫颈癌Hela细胞转染反义hTR和反义hTERT后细胞的增殖、端粒酶活性及细胞形态学、细胞凋亡和细胞周期阻滞的变化。结果　宫颈癌Hela细胞转染端粒酶反义核酸后 ,出现明显的细胞增殖抑制、端粒酶活性下降、细胞凋亡形态学改变、细胞凋亡率升高及细胞周期阻滞。反义hTR、反义hTERT组与空白对照、脂质体对照及正义hTR、正义hTERT组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 0 1)。Hela细胞转染反义核酸 (0 2 μmol/L) 3d后 ,反义hTR +反义hTERT组 ,细胞增殖抑制率、相对端粒酶活性 (相对于空白对照组 )、细胞凋亡率分别为 6 9 3%、19 6 %、2 8 6 % ,与反义hTR组和反义hTERT组比较 ,差异均有统计学意义 (P <0 0 1) ,Q值分别为 0 86 7、0 919、1 0 75。反义hTR +反义hTERT组G0 /G1期细胞比例增加。结论　端粒酶反义核酸能通过特异性抑制端粒酶活性。 展开更多

关键词 端粒酶rna反义核酸 催化亚单位反义核酸 子宫颈癌 HELA细胞 细胞生长

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基于分子结构的lncRNA分子功能的研究进展 被引量：2

5

作者 杨华 樊红 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2014年第1期99-102,共4页

研究表明,lncRNA以转录本的形式调控蛋白编码基因的表达,并参与染色质修饰、染色体沉默、基因组印迹以及转录激活等多种生物学过程。lncRNA的自身结构及所结合的靶点不同,其所具有的生物学功能亦不同。本综述将解析lncRNA的结构,包括RN... 研究表明,lncRNA以转录本的形式调控蛋白编码基因的表达,并参与染色质修饰、染色体沉默、基因组印迹以及转录激活等多种生物学过程。lncRNA的自身结构及所结合的靶点不同,其所具有的生物学功能亦不同。本综述将解析lncRNA的结构,包括RNA结构域、蛋白结构域、DNA结构域及模块结构,并分析其生物学功能;着重介绍几种新近的研究方法,包括染色质构象捕获(3C)、三维DNA的筛选和交联(3DDSL)、RNA反义纯化(RAP)。 展开更多

关键词 长链非编码rna 染色质构象捕获 三维DNA的筛选和交联 rna反义纯化 文献综述

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WD40编码的P53 RNA反义转录子基因和蛋白及其功能 被引量：2

6

作者 陆文昕 葛奕辰 +1 位作者 肖丽英 李燕 《国际口腔医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第2期244-248,共5页

WD40编码的P53 RNA反义转录子(WRAP53)基因有1α、1β和1γ三个起始外显子,1α与P53的第一外显子反向互补,其表达产物能稳定P53 RNA水平,从而促进P53蛋白表达,最终参与调控肿瘤的生物学行为;1β转录翻译生成的WRAP53蛋白,涉及细胞程序... WD40编码的P53 RNA反义转录子(WRAP53)基因有1α、1β和1γ三个起始外显子,1α与P53的第一外显子反向互补,其表达产物能稳定P53 RNA水平,从而促进P53蛋白表达,最终参与调控肿瘤的生物学行为;1β转录翻译生成的WRAP53蛋白,涉及细胞程序性死亡、周期调控以及蛋白酶降解和RNA代谢等多个重要生化过程。WRAP53蛋白主要通过与端粒酶复合体等多种组分结合参与端粒酶卡侯体(CB)的形成、端粒酶全酶的组装定位、端粒酶的运输,指导运动神经元生存蛋白定位至CB等。WRAP53基因在肿瘤细胞系和临床肿瘤样本中普遍高表达,且表达越高,肿瘤的预后越差。沉默WRAP53基因,可明显抑制肿瘤细胞的生长和成瘤能力。先天性角化不良综合征与端粒长度的缩短有关,WRAP53基因表达降低最终会导致端粒的缩短。 展开更多

关键词 WD40编码的P53 rna反义转录子 端粒酶卡侯体蛋白 端粒 蛋白质

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端粒酶RNA反义寡核苷酸对人肺癌细胞端粒酶活性和细胞增殖的影响

7

作者 何东苟 陈力排 《中国热带医学》 CAS 2003年第6期720-722,共3页

目的　观察脂质体介导的端粒酶RNA反义寡核苷 (ASODN)对人肺癌细胞系端粒酶活性的作用及其对癌细胞增殖的影响。　方法　合成与人类端粒酶RNA模板区碱基序列互补的ASOND ,并用阳离子脂质体转染剂DO SPER介导 ,作用于人肺癌细胞系 ,空白... 目的　观察脂质体介导的端粒酶RNA反义寡核苷 (ASODN)对人肺癌细胞系端粒酶活性的作用及其对癌细胞增殖的影响。　方法　合成与人类端粒酶RNA模板区碱基序列互补的ASOND ,并用阳离子脂质体转染剂DO SPER介导 ,作用于人肺癌细胞系 ,空白组和正义寡脱氧核苷酸 (SODN)作为对照。用以PCR为基础的端粒重复序列扩增法 (TRAP)结合ELISA方法检测肺癌细胞的端粒酶活性。台盼蓝拒染法细胞计数、噻唑蓝 (MTT)试验观察癌细胞增殖情况。　结果　脂质体介导的抗端粒酶ASODN对肺癌细胞的端粒酶活性具有抑制作用 ;细胞计数和MTT试验显示肺癌细胞增殖速度明显减慢。　结论　针对端粒酶模板区的ASODN可显著抑制端粒酶活性和肺癌细胞的增殖 。 展开更多

关键词 端粒酶 rna反义寡核苷酸 肺癌细胞 活性 细胞增殖 影响

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端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响

8

作者 周青 张桂荣 +2 位作者 李瑞武 孙长伏 卢利 《口腔医学》 CAS 2007年第12期639-642,共4页

目的探讨端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法反义寡核苷酸(AS-ONS)作用于Tca8113细胞;采用MTT法测定AS-ONS对Tca8113细胞的毒性;倒置相差显微镜观察细胞生长状况及形态学改变;透射电镜观察细胞... 目的探讨端粒酶RNA反义寡核苷酸对舌癌细胞系Tca8113细胞增殖和端粒酶活性的影响。方法反义寡核苷酸(AS-ONS)作用于Tca8113细胞;采用MTT法测定AS-ONS对Tca8113细胞的毒性;倒置相差显微镜观察细胞生长状况及形态学改变;透射电镜观察细胞超微结构;测定Tca8113细胞端粒酶活性。结果AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,其生长抑制随剂量的增加而增强,具有浓度依赖性;AS-ONS对于Tca8113细胞端粒酶活性抑制作用具有时间依赖性。不同浓度AS-ONS作用于Tca8113细胞,其细胞毒性作用较弱;在倒置显微镜下可见AS-ONS组随药物浓度增高,细胞生长出现抑制。透射电镜观察到AS-ONS组作用的细胞细胞膜破损,细胞核内染色质凝聚,边集,并穿过核膜溢入胞质中,胞质部分溶解,线粒体空胞变性;AS-ONS对端粒酶活性抑制效果非常明显。结论反义寡核苷酸AS-ONS可明显地抑制Tca8113细胞的生长,并具有剂量依赖性和时间依赖性;靶向于端粒酶RNA的反义寡核苷酸可明显地抑制Tca8113细胞端粒酶活性,细胞增殖受到明显抑制。 展开更多

关键词 舌癌细胞系Tca8113 端粒酶 端粒酶rna反义寡核苷酸

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一种改进的小非编码RNA cDNA文库构建方法

9

作者 杜光石 罗发涛 +2 位作者 肖燕 陈红军 吴传芳 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期653-657,共5页

本文使用RNA Antisense Purification(RAP)技术富集纯化sncRNA,有效去除了5S、5.8SrRNA.联合使用Tobacco Acid Pyrophosphatase(TAP)和RNA 5′Polyphosphatase处理sncRNA,将5′-端为非单磷酸结构的sncRNA转变成单磷酸结构,增加了文库覆... 本文使用RNA Antisense Purification(RAP)技术富集纯化sncRNA,有效去除了5S、5.8SrRNA.联合使用Tobacco Acid Pyrophosphatase(TAP)和RNA 5′Polyphosphatase处理sncRNA,将5′-端为非单磷酸结构的sncRNA转变成单磷酸结构,增加了文库覆盖率.在sncRNA3′-端添加poly(A)尾结构以及使用oligo(dT)16VN-adapter锚定引物进行逆转录,间接解决了sncRNA 3′-端接头定向连接问题,不再使用价格昂贵的腺苷化接头.改进后的sncRNA cDNA文库容量为3×105cfu,重组率为95%,且测序结果显示,获得的cDNA序列具有较好的完整性.使用这种成本低且行之有效的改进方法,为深入研究sncRNA奠定了基础. 展开更多

关键词 sncrna CDNA文库 POLY(A) rna反义链纯化(RAP)

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长链非编码RNA锌指蛋白反义链1靶向微小RNA-512-3p抑制肾癌细胞侵袭和转移 被引量：2

10

作者 王丹 白立刚 +4 位作者 袁亚光 程靖远 杨盛 张泽 冷远景 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1359-1363,共5页

目的探讨长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(lncRNAZFAS)靶向调控微小RNA-512-3p(miR-512-3p)表达及对透明细胞肾细胞癌(ccRCC)侵袭和迁移的影响。方法收集2019年2月至2020年4月我院泌尿外科接受肾癌根治术的ccRCC患者30例,获取肾癌及癌旁... 目的探讨长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(lncRNAZFAS)靶向调控微小RNA-512-3p(miR-512-3p)表达及对透明细胞肾细胞癌(ccRCC)侵袭和迁移的影响。方法收集2019年2月至2020年4月我院泌尿外科接受肾癌根治术的ccRCC患者30例,获取肾癌及癌旁组织标本。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测30个ccRCC癌肿组织和30个邻近非肿瘤正常组织中lncRNAZFAS和miR-512-3p和可能靶向miRNAs的表达水平。分别通过细胞计数盒(CCK-8)测定、细胞克隆试验、Transwell迁移和侵袭测定测定敲低lncRNAZFAS1对细胞增殖、细胞克隆、迁移和侵袭的影响。lncRNAZFAS1和miR-512-3p的相关性通过生物信息学软件RAIDv2.0和AnnoLnc预测进行分析。lncRNAZFAS1和miR-512-3p之间的相互作用通过荧光素酶报告基因检测验证。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK-q检验。结果RT-qPCR结果显示lncRNAZFAS1在ccRCC癌肿组织表达显著高于邻近非肿瘤组织(1.96±0.17比1.00±0.01,t=2.691,P<0.01),miR-512-3p在ccRCC癌肿组织表达显著低于邻近非肿瘤组织(0.67±0.06比1.00±0.01,t=1.319,P<0.05)。CCK-8结果显示,si-lncRNAZFAS1组细胞活性均低于空白组及si-NC组(0.43±0.09比0.96±0.08比0.98±0.05,F=3.759,P<0.05);细胞克隆试验结果显示,si-lncRNAZFAS1组肾癌细胞的克隆形成数显著低于空白组及si-NC组(52.4±8.2比100.2±5.4比99.6±4.3,F=7.924,P<0.05);Transwell侵袭和迁移结果显示,si-lncRNAZFAS1组穿越细胞数低于空白组及si-NC组(132.2±11.4比179.6±16.8比175.2±19.8,F=3.817,P<0.05),差异有统计学意义。双荧光素酶报告基因实验证实miR-512-3p被确定为ZFAS1的靶标。结论lncRNAZFAS1靶向miR-512-3p抑制ccRCC的生长和转移,lncRNA ZFAS1可能成为ccRCC的新治疗靶点。 展开更多

关键词 长链非编码rna锌指蛋白反义链1 微小rna-512-3p 肾癌 侵袭 迁移

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上皮性卵巢癌组织lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达与患者术后5年内生存的关系

11

作者 牛建华 段建英 +1 位作者 杨光 郭海滨 《中国计划生育和妇产科》 2024年第6期65-70,I0001,共7页

目的 探究上皮性卵巢癌(EOC)组织长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(lncRNA ZFAS1)、Notch1信使RNA(mRNA)表达水平与患者术后5年内生存的关系。方法 选取2015年3月至2018年7月在邯郸市人民医院接受手术治疗的96例EOC患者(EOC组),术中收集EO... 目的 探究上皮性卵巢癌(EOC)组织长链非编码RNA锌指蛋白反义链1(lncRNA ZFAS1)、Notch1信使RNA(mRNA)表达水平与患者术后5年内生存的关系。方法 选取2015年3月至2018年7月在邯郸市人民医院接受手术治疗的96例EOC患者(EOC组),术中收集EOC组织和癌旁正常卵巢组织。实时荧光定量PCR法测定组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平,对EOC患者术后随访5年,记录生存情况。比较癌旁正常卵巢组织和EOC组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平;比较生存组和死亡组临床病理特征及EOC组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平;分析EOC组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平的相关性及其与临床病理特征和患者术后5年生存的关系、影响EOC患者术后5年内生存的危险因素、EOC组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平对EOC患者术后5年内生存的预测效能。结果 与癌旁正常卵巢组织比较,EOC组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平升高(P<0.05);EOC组织中lncRNA ZFAS1和Notch1 mRNA表达水平呈正相关(P<0.05),两者表达水平与年龄、是否绝经、病理类型、肿瘤大小无关(P>0.05),与FIGO分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05);lncRNA ZFAS1高表达组、Notch1 mRNA高表达组5年总生存率分别低于lncRNA ZFAS1低表达组、Notch1 mRNA低表达组(P<0.05);生存组和死亡组年龄、是否绝经、病理类型、肿瘤大小差异无统计学意义(P>0.05),FIGO分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度差异有统计学意义(P<0.05);与生存组比较,死亡组EOC组织中lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA表达水平升高(P<0.05);FIGO分期Ⅲ~IV期、有淋巴结转移、肿瘤低分化、lncRNA ZFAS1高表达、Notch1 mRNA高表达均是影响EOC患者术后5年内生存的独立危险因素(P<0.05);lncRNA ZFAS1、Notch1 mRNA、二者联合预测EOC患者术后5年内生存的曲线下面积(AUC)分别为0.861、0.913、0.965;二者联合预测的AUC显著大于两项指标单独预测(P<0.05)。� 展开更多

关键词 上皮性卵巢癌 长链非编码rna锌指蛋白反义链1 Notch1信使rna 5年内生存

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CA724、miR-183、lncRNA ZFAS1在结肠癌患者血清中的表达及意义 被引量：1

12

作者 李瑞宏 董玉芳 张刘璐 《实用癌症杂志》 2023年第5期745-747,755,共4页

目的分析糖蛋白抗原724(CA724)、微小RNA-183(miR183)、长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)在结肠癌患者血清中的表达与意义。方法将103例结肠癌患者纳入观察组,同期体检的95例健康体检者纳入对照组。采集2组血液检测对比CA72... 目的分析糖蛋白抗原724(CA724)、微小RNA-183(miR183)、长链非编码RNA(lncRNA)锌指蛋白反义链1(ZFAS1)在结肠癌患者血清中的表达与意义。方法将103例结肠癌患者纳入观察组,同期体检的95例健康体检者纳入对照组。采集2组血液检测对比CA724、miR183、lncRNA ZFAS1差异;同时收集患者的年龄、性别等资料,分析CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表达与患者临床病理特征之间的关系。结果观察组血清CA724[(26.79±3.36)U/ml]、miR183相对表达量[(2.57±0.46)]、lncRNA ZFAS1相对表达量[(3.75±0.84)]均高于对照组[(5.20±1.05)U/ml、(1.05±0.21)、(1.23±0.39)],差异有统计学意义(P<0.05)。CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表达与结肠癌患者的年龄、性别、体重指数(BMI)、肿瘤大小无关,与患者的临床分期、淋巴结转移、分化程度有关(P<0.05)。结论CA724、miR183、lncRNA ZFAS1在结肠癌患者血清内呈高表达,其表达与患者临床分期、淋巴结转移、分化程度联系紧密,可能参与肿瘤的病情发展,临床需予以高度重视。 展开更多

关键词 结肠癌 糖蛋白抗原724 微小rna-183 长链非编码rna锌指蛋白反义链1 临床分期

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LncRNA ZFAS1靶向miR-373导致肝癌细胞顺铂耐药的机制研究 被引量：3

13

作者 余奎杨 刘攀 +2 位作者 张浩文 秦涛 胡明星 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第5期455-460,共6页

目的探究长链非编码RNA(LncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)靶向微小RNA(miR)-373导致肝癌细胞顺铂(DDP)耐药的机制。方法HepG2细胞设正常培养组、si-NC组、si-ZFAS1组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ZFAS1、miR-373表达水平。在si-N... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)靶向微小RNA(miR)-373导致肝癌细胞顺铂(DDP)耐药的机制。方法HepG2细胞设正常培养组、si-NC组、si-ZFAS1组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中ZFAS1、miR-373表达水平。在si-NC组、si-ZFAS1组基础上分别添加0、50、100、200、300μmol/L DDP处理细胞12 h,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell检测细胞侵袭情况,蛋白免疫印迹检测细胞中基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9蛋白表达水平。双荧光素酶验证ZFAS1与miR-373的靶向关系。在si-ZFAS1组基础上添加inhibitor miR-373,检测细胞中MMP2、MMP9蛋白表达水平。结果si-ZFAS1组细胞中ZFAS1表达水平均低于正常培养组和si-NC组,miR-373表达水平均高于正常培养组和si-NC组(P<0.05)。si-NC组和si-ZFAS1组经不同浓度顺铂处理后细胞增殖率、侵袭数量、侵袭蛋白MMP2、MMP9表达水平基本呈降低趋势;si-ZFAS1组上述指标分别低于其对应浓度的si-NC组(P<0.05)。Starbase分析发现,miR-373与ZFAS1存在互补的结合位点并经双荧光素酶验证。si-ZFAS1+inhibitor miR-373组细胞MMP2、MMP9蛋白表达水平高于si-ZFAS1组和si-ZFAS1+inhibitor NC组(P<0.05)。结论ZFAS1可能降低肝癌细胞DDP耐药,其机制可能与调控miR-373有关。 展开更多

关键词 肝肿瘤 顺铂 抗药性 肿瘤 rna 长链非编码 长链非编码rna锌指结构反义转录本1 微小rna-373

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卵巢癌患者血清LncRNA-MSC-AS1水平与临床病理特征及预后的关系

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作者 李翠娥 何晓丽 +3 位作者 何洁丽 陈贝 王燕 李晶 《河北医学》 CAS 2023年第5期767-772,共6页

目的::探究卵巢癌(OC)患者血清长链非编码RNA肌蛋白反义RNA 1(LncRNA-MSC-AS1)水平与临床病理特征及预后的关系。方法:选自2016年11月至2018年11月本院收治的106例OC患者,即为OC组,正常的健康体检者106人为对照组,采用实时荧光定量PCR(q... 目的::探究卵巢癌(OC)患者血清长链非编码RNA肌蛋白反义RNA 1(LncRNA-MSC-AS1)水平与临床病理特征及预后的关系。方法:选自2016年11月至2018年11月本院收治的106例OC患者,即为OC组,正常的健康体检者106人为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清中LncRNA-MSC-AS1的表达水平;Kaplan-Meier生存曲线分析LncRNA-MSC-AS1表达水平与OC患者术后3年生存情况的关系;Cox回归分析影响OC患者术后3年预后不良的危险因素。结果:LncRNA-MSC-AS1在OC组(0.75±0.08)中的表达量低于对照组(1.01±0.11)(t=19.681,P<0.05);OC患者中LncRNA-MSC-AS1表达水平与TNM分期、淋巴结转移、肿瘤直径、CA125相关(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线分析显示,LncRNA-MSC-AS1高表达组术后3年生存率71.15%(37/52)显著高于低表达组的生存率37.04%(20/54)。(Log rank χ^(2)=12.404,P<0.001);COX回归分析显示,TNM分期、肿瘤直径、CA125、LncRNA-MSC-AS1低表达是影响OC患者术后3年预后不良的危险因素(P<0.05)。结论:LncRNA-MSC-AS1在OC患者中呈低表达,与OC患者临床病理特征及预后有关,有望成为潜在的OC预后评估生物标志物。 展开更多

关键词 卵巢癌 长链非编码rna肌蛋白反义rna 1 临床病理特征 预后

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lncRNA ZFAS1通过miR-588/HMGA2轴促进肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移 被引量：3

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作者 韩建涛 谢兴旺 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期449-455,共7页

目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院... 目的:探讨长链非编码RNA锌指结构反义转录本1(lncRNA ZFAS1)调控miR-588/高迁移率蛋白A2(HMGA2)轴对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:qPCR、WB法检测80例肝癌组织及对应癌旁组织(2018年1月至2019年12月在武汉第三医院首义院区手术切除标本)及人正常肝LO2细胞和肝癌HepG2、Huh7、HCCLM3细胞中ZFAS1、miR-588及HMGA2表达水平;采用Kaplan-Meier进行患者生存曲线分析。将HepG2细胞分为空白组、si-NC组、si-ZFAS1组、si-ZFAS1+inhibitor NC组、si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组;qPCR检测各组HepG2细胞中ZFAS1、miR-588表达水平,WB法检测各组HepG2细胞中HMGA2蛋白表达;CCK-8法、Transwell和划痕实验分别检测各组HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力;双荧光素酶报告基因实验分别验证ZFAS1和miR-588、miR-588和HMGA2的靶向关系。用HepG2细胞移植瘤裸鼠模型检测敲减ZFAS1或/和miR-588对移植瘤生长的影响。结果:在肝癌组织和肝癌细胞中,ZFAS1、HMGA2呈高表达,miR-588呈低表达(均P<0.05);ZFAS1低表达患者2年生存率高于高表达组(P<0.05);与空白组比较,si-ZFAS1组ZFAS1、HMGA2表达水平显著降低,miR-588表达水平显著升高(均P<0.05)。与si-ZFAS1组比较,si-ZFAS1+miR-588 inhibitor组中ZFAS1表达水平无显著变化(P>0.05),HMGA2表达水平显著升高、miR-588表达水平显著降低(P<0.05);敲减ZFAS1可抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并抑制裸鼠体内移植瘤的生长(均P<0.05);ZFAS1靶向miR-588并抑制后者的表达,miR-588靶向HMGA2并抑制后者的表达;同时抑制ZFAS1和miR-588表达可逆转敲减ZFAS1对HepG2细胞增殖、侵袭与迁移能力及体内移植瘤生长的抑制作用(均P<0.05)。结论:敲减ZFAS1可通过促进miR-588表达来下调HMGA2表达,进而抑制肝癌HepG2细胞的增殖、侵袭与迁移能力。 展开更多

关键词 长链非编码rna锌指结构反义转录本1 miR-588 高迁移率蛋白A2 肝癌 增殖 迁移 侵袭

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LncRNA ZFAS1对NCI-H460细胞增殖、侵袭及化疗敏感性的影响 被引量：2

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作者 陈芹 曹达魁 +2 位作者 高景蓬 吴嘉晟 高军 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期2702-2706,共5页

目的研究LncRNA ZFAS1调控肺癌NCI-H460细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的作用机制。方法收集肺癌组织、癌旁正常组织、NCI-H460细胞和BEAS-2B细胞,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析LncRNA ZFAS1、miR-589-5p的表达量。miRc... 目的研究LncRNA ZFAS1调控肺癌NCI-H460细胞增殖、侵袭和化疗敏感性的作用机制。方法收集肺癌组织、癌旁正常组织、NCI-H460细胞和BEAS-2B细胞,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析LncRNA ZFAS1、miR-589-5p的表达量。miRcode软件预测LncRNA ZFAS1和miR-589-5p的结合位点,进一步通过双荧光素酶报告基因确定两者的相关性。以细胞计数法-8(CCK-8)实验检测NCI-H460细胞增殖活力,以Transwell实验检测细胞侵袭数目,以流式细胞仪检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK)通路蛋白表达。结果NCI-H460细胞(3.02±0.98)和肺癌组织(2.34±0.67)中LncRNA ZFAS1表达量明显升高(P<0.01),NCI-H460细胞(0.34±0.03)和肺癌组织(0.23±0.01)中miR-589-5p的表达量明显降低(P<0.01)。ZFAS1 siRNA和siRNA NC组细胞增殖活力分别为(37.52±2.58)%,(62.38±3.55)%,细胞侵袭数目分别为(32.50±4.52),(83.50±5.86)个,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。siRNA NC+8μg·mL^(-1)顺铂组、ZFAS1 siRNA+8μg·mL^(-1)顺铂组细胞凋亡率分别为(8.73±2.17)%,(20.06±1.85)%,差异有统计学意义(P<0.01)。LncRNA ZFAS1与miR-589-5p具有靶向结合位点。下调miR-589-5p激活了MAPK/ERK通路。inhibitor NC组、miR-589-5p inhibitor组、miR-589-5p inhibitor+U0126组细胞增殖活力分别为(63.18±3.39)%,(82.35±4.58)%,(60.27±3.93)%,细胞侵袭数目分别为(75.50±6.85),(135.50±5.83),(90.50±6.84)个,差异均有统计学意义(均P<0.01)。inhibitor NC+8μg·mL^(-1)顺铂组、miR-589-5p inhibitor+8μg·mL^(-1)顺铂组、miR-589-5p inhibitor+U0126+8μg·mL^(-1)顺铂组细胞增殖活力分别为(38.25±2.78)%,(75.45±4.28)%,(42.85±5.87)%,细胞凋亡率分别为(12.59±4.15)%,(5.26±2.48)%,(11.06±2.45)%,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论LncRNA ZFAS1在肺癌细胞中表达上调且通过miR-589-5p激活MAPK/ERK通路调控NCI-H460细胞增殖、侵袭及化疗敏感性。 展开更多

关键词 长链非编码rna锌指结构反义转录本1(Lncrna ZFAS1) 微小rna-589-5p(miR-589-5p) NCI-H460细胞 增殖

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lncRNA ZFAS1调节miR-136-5p/IGF1R轴对多囊卵巢综合征小鼠胰岛素抵抗的影响 被引量：1

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作者 余晓燕 杨惠林 王烈宏 《中国优生与遗传杂志》 2022年第8期1365-1370,共6页

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)调节miR-136-5p/胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)轴对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠胰岛素抵抗(IR)的影响。方法随机把C57BL/6J小鼠分为Ctrl组、PCOS组、Si-NC组、Si-ZFAS1组、antago... 目的探究长链非编码RNA(lncRNA)锌指结构反义转录本1(ZFAS1)调节miR-136-5p/胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)轴对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠胰岛素抵抗(IR)的影响。方法随机把C57BL/6J小鼠分为Ctrl组、PCOS组、Si-NC组、Si-ZFAS1组、antagomir-NC组、miR-136-5p antagomir组、miR-136-5p antagomir+Si-ZFAS1组,采用高脂饮食联合脱氢表雄酮建立PCOS小鼠模型(Ctrl组除外),检测性激素指标、糖代谢指标水平变化;H-E染色观察卵巢组织形态学特征;RT-qPCR检测卵巢组织ZFAS1、miR-136-5p表达水平;Western blot检测卵巢组织IGF1R蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因法(DLR)验证ZFAS1/miR-136-5p、miR-136-5p/IGF1R靶向关系。结果与Ctrl组比较,PCOS组小鼠性激素水平紊乱,卵巢呈多囊样改变,伴随明显胰岛素抵抗,同时卵巢组织中ZFAS1、IGF1R表达增加,miR-136-5p表达减少;下调ZFAS1表达后,PCOS小鼠上述症状明显改善,同时卵巢组织中miR-136-5p表达增加,IGF1R表达减少;下调miR-136-5p表达后,PCOS小鼠上述症状明显加重,同时卵巢组织中IGF1R表达增加;在下调ZFAS1表达的同时亦下调miR-136-5p表达,下调ZFAS1表达对PCOS小鼠的改善作用被削弱。DLR检测结果显示,ZFAS1与miR-136-5p,miR-136-5p与IGF1R存在靶向作用关系。结论ZFAS1在PCOS小鼠内呈高表达,抑制其表达可减轻PCOS小鼠卵巢多囊样改变及胰岛素抵抗,可能通过调节miR-136-5p/IGF1R轴而实现。 展开更多

关键词 长链非编码rna锌指结构反义转录本1 miR-136-5p/胰岛素样生长因子1受体轴 多囊卵巢综合征 胰岛素抵抗

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