三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞凋亡的影响 被引量：43

1

作者 汪珍 冯健 +2 位作者 王晓华 茅文亭 丁钢强 《浙江中医药大学学报》 CAS 2008年第3期321-322,324,共3页

[目的]观察三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞凋亡的作用,初步探讨其可能的机制。[方法]采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物RKO细胞的影响;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bid,Bax,Bcl-2和Bcl-XL的表达改变。[结果... [目的]观察三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞凋亡的作用,初步探讨其可能的机制。[方法]采用体外细胞培养技术,用MTT法观察三叶青提取物RKO细胞的影响;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bid,Bax,Bcl-2和Bcl-XL的表达改变。[结果]三叶青提取物能显著地抑制人结肠癌细胞系RKO细胞的生长,并且具有浓度依赖性,且细胞有明显的凋亡特征性改变,并能下调Bcl-XL、上调Bid来诱导凋亡。[结论]三叶青提取物具有对人结肠癌细胞系RKO细胞抗增殖和诱导凋亡的作用,且呈剂量依赖性。 展开更多

关键词 三叶青提取物 rko细胞 凋亡

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粉背南蛇藤中新三萜化合物对RKO细胞体外抗癌作用的研究 被引量：14

2

作者 毛建山 王奎武 +1 位作者 郑树 潘远江 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第17期1450-1453,共4页

目的：探讨粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对人结肠癌细胞系RKO细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法：采用MTT法检测齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对体外培养人结肠癌细胞系RKO细胞的增殖抑制作用，通过AO／EB... 目的：探讨粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对人结肠癌细胞系RKO细胞的体外增殖抑制作用和诱导凋亡作用。方法：采用MTT法检测齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对体外培养人结肠癌细胞系RKO细胞的增殖抑制作用，通过AO／EB双染色荧光显微镜、HE染色光学显微镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对RKO细胞的诱导凋亡作用及对细胞周期的影响。结果：齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇对RKO细胞生长抑制作用具有剂量依赖性和时间依赖性，作用48h时IC50为（12．20±0．79）μg·mL^-1；AO／EB双染色、HE染色可见典型的肿瘤细胞凋亡改变；10μg·mL^-1的三萜处理RKO细胞48h即可出现明显的DNA梯带、流式细胞仪可检测到亚二倍体峰，在10-20μg·mL^-1内具有明显的量-效作用关系；并可见RKO细胞G0-G1期、G2-M期的细胞明显减少，而S期细胞无变化。结论：粉背南蛇藤中新的三萜齐墩果-12-烯-3β，6α-二醇能抑制人结肠癌细胞系RKO细胞增殖和诱导凋亡。 展开更多

关键词 齐墩果-12-烯-3β 6α-二醇 粉背南蛇藤 抗肿瘤 细胞凋亡 rko细胞

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lncRNA PVT1在结直肠癌组织和细胞中的表达及其对顺铂化疗敏感性的影响及机制 被引量：12

3

作者 熊万成 郗玉玲 +2 位作者 平贯芳 王二辉 赫鹏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期743-750,共8页

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)顺铂(cisplatin,DDP)化疗敏感性的调控作用及其机制。方法:收集2006年4月至2011年3月新乡医学院... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation 1,PVT1)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)顺铂(cisplatin,DDP)化疗敏感性的调控作用及其机制。方法:收集2006年4月至2011年3月新乡医学院第一附属医院112例接受手术切除、经病理确诊CRC患者的癌及癌旁组织标本,从中分别选择各30例顺铂敏感、顺铂耐药癌及癌旁组织;人CRC细胞系HT29、SW480、HCT116、RKO和LoVo与正常结肠上皮细胞株NCM460,构建顺铂耐药LoVo/DDP及RKO/DDP细胞。用脂质体2000分别将siPVT1和siNC、LV-PVT1和LV-NC转染或感染LoVo和RKO细胞或者LoVo/DDP及RKO/DDP细胞。qPCR检测CRC组织及细胞中lncRNA PVT1的表达水平。CCK-8法、流式细胞术、WB实验分别检测敲降PVT1或过表达PVT1对CRC细胞的增殖、凋亡及凋亡相关蛋白的表达影响。构建无胸腺裸鼠CRC皮下移植动物模型,观察对移植瘤体细胞生长及顺铂耐药的影响。结果:PVT1 m RNA在CRC组织及细胞中lncRNA PVT1高表达,其表达水平与顺铂耐药呈正相关。敲除PVT1后,显著降低顺铂耐药的CRC细胞的增殖能力并促进其凋亡(P<0.05或P<0.01)、降低耐药相关分子MDR1和MRP1及抗凋亡相关分子Bcl-2的表达而增加了促凋亡相关分子Bax和活化的caspase-3的表达。过表达PVT1后,则促进细胞增殖并减少其凋亡(P<0.05或P<0.01)。体内实验表明,在CRC细胞中过表达PVT1促进顺铂耐药的形成(P<0.05)。结论:敲降lncRNA PVT1表达可显著抑制CRC耐药细胞株的增殖并促进其凋亡,过表达PVT1可明显促进CRC细胞和动物移植瘤体的生长。PVT1通过抑制MDR1和MRP1的表达,调控内源性凋亡通路,进而增强CRC细胞对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 浆细胞瘤转化迁移基因1 结直肠癌 rko细胞 LOVO细胞 顺铂耐药 LoVo/DDP细胞 rko/DDP细胞 增殖 凋亡

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山柰酚调控PI3K/Akt/mTOR通路诱导人结直肠癌RKO细胞自噬 被引量：11

4

作者 顾超 王恺纯 +2 位作者 徐勤芬 刘微 胡道德 《中南药学》 CAS 2020年第10期1668-1673,共6页

目的研究山柰酚对人结直肠癌RKO细胞增殖和自噬的影响及其诱导自噬的作用机制。方法CCK-8法检测山柰酚溶液处理RKO细胞24 h和48 h后的细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测山柰酚对RKO细胞周期的影响;TUNEL染色检测山柰酚对... 目的研究山柰酚对人结直肠癌RKO细胞增殖和自噬的影响及其诱导自噬的作用机制。方法CCK-8法检测山柰酚溶液处理RKO细胞24 h和48 h后的细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测山柰酚对RKO细胞周期的影响;TUNEL染色检测山柰酚对RKO细胞凋亡的影响;MDC荧光染色检测山柰酚对RKO细胞自噬的影响;Western blot检测山柰酚处理RKO细胞后自噬相关蛋白Beclin1和LC3及信号通路蛋白PI3K、Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达水平。结果山柰酚处理RKO细胞24 h和48 h后的IC50分别为(41.52±1.09)、(25.07±0.81)mg·L^-1。山柰酚能阻滞RKO细胞周期停留在G0/G1期。TUNEL染色实验显示山柰酚可诱导RKO细胞凋亡,且呈现浓度依赖性。MDC荧光染色结果表明,山柰酚诱导RKO细胞自噬体的形成,而自噬抑制剂3-MA可抑制山柰酚诱导RKO细胞自噬体的形成。Western blot结果显示,在山柰酚的作用下,RKO细胞中自噬标志蛋白Beclin1表达水平上升、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低;而3-MA抑制山柰酚引起的Beclin1蛋白表达水平上升和LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低。信号通路蛋白研究表明,山柰酚显著降低PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达,而Akt和mTOR蛋白表达量无明显变化。结论山柰酚可抑制人结直肠癌RKO细胞增殖并诱导其凋亡,同时可能通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导RKO细胞自噬。 展开更多

关键词 山柰酚 结直肠癌 rko细胞 自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路

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羊栖菜多糖体外诱导人大肠癌细胞凋亡 被引量：10

5

作者 陈金星 胡昔城 +1 位作者 杨维 钱健 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第2期153-159,共7页

目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人大肠癌lovo细胞和RKO细胞增殖的作用及其意义。方法MTT法检测SFPS在体外抑制大肠癌细胞增殖的抑制率;扫描电镜、透射电镜和流式细胞术鉴定细胞凋亡。结果SFPS对lovo细胞和RKO细胞具有显著的生长抑制作用,... 目的研究羊栖菜多糖(SFPS)对人大肠癌lovo细胞和RKO细胞增殖的作用及其意义。方法MTT法检测SFPS在体外抑制大肠癌细胞增殖的抑制率;扫描电镜、透射电镜和流式细胞术鉴定细胞凋亡。结果SFPS对lovo细胞和RKO细胞具有显著的生长抑制作用,并在一定范围内呈量效关系。电镜下可见细胞膜表面微绒毛减少、染色质固缩、边集,凋亡小体形成。流式细胞术结果显示,G0/G1期的细胞比例有不同程度的增高,相应的S期细胞比例显著下降(P<0.01);而lovo细胞的细胞周期时相比例无明显改变。结论SFPS在体外能够显著诱导lovo和RKO细胞凋亡,这可能是SFPS抑制人大肠癌细胞增殖的机制之一。 展开更多

关键词 羊栖菜多糖 LOVO细胞 rko细胞 凋亡

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槲皮素对结肠癌的抑癌机制研究 被引量：8

6

作者 王冲 谭赛男 +2 位作者 陆彩玲 姚楠 马旭 《山西医科大学学报》 CAS 2009年第6期504-507,575,共5页

目的探讨槲皮素对结肠癌细胞系RKO中P53蛋白以及其下游基因Gadd45a表达的影响。方法采用免疫细胞化学的方法检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的P53蛋白表达的变化,采用RT-PCR与Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的Ga... 目的探讨槲皮素对结肠癌细胞系RKO中P53蛋白以及其下游基因Gadd45a表达的影响。方法采用免疫细胞化学的方法检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的P53蛋白表达的变化,采用RT-PCR与Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于RKO细胞后的Gadd45amRNA和蛋白表达的变化。此外,采用Western Blot技术检测不同浓度槲皮素作用于EC109细胞后的Gadd45a蛋白表达的变化。结果槲皮素作用于RKO细胞后,细胞的P53表达增高,Gadd45amRNA和蛋白表达水平逐渐增高,并且呈现出一定浓度依赖性。另外,槲皮素作用于EC109细胞后,Gadd45a蛋白表达水平逐渐增高,也呈现出一定浓度依赖性。结论槲皮素可能通过上调P53依赖途径中p53基因表达使Gadd45a表达增高,由此介入了对肿瘤发生发展的抑制。 展开更多

关键词 槲皮素 rko细胞 P53 GADD45A

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佩兰乙醇提取物对结肠癌RKO细胞的抑制作用研究 被引量：8

7

作者 姜念 宋长伟 +3 位作者 魏凌凯 喻昌燕 秦颖 刘云 《中国民族民间医药》 2018年第16期32-35,共4页

目的:研究佩兰乙醇提取物对结肠癌RKO细胞的体外抗肿瘤作用。方法:SRB法检测细胞的生长抑制率;倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫印迹法检测结肠癌RKO细胞中Bcl-2蛋白、Cleaved Caspase-3蛋白的表达情况。结果:佩兰乙醇提取物在3μg/m ... 目的:研究佩兰乙醇提取物对结肠癌RKO细胞的体外抗肿瘤作用。方法:SRB法检测细胞的生长抑制率;倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫印迹法检测结肠癌RKO细胞中Bcl-2蛋白、Cleaved Caspase-3蛋白的表达情况。结果:佩兰乙醇提取物在3μg/m L时对结肠癌RKO细胞已具有抑制生长作用,而且随着浓度的增加其抑制率也逐渐升高,到20μg/m L浓度时表现为完全抑制。形态学观察结果显示佩兰乙醇提取物处理后结肠癌RKO细胞后,细胞明显皱缩变圆。免疫印迹法检测到佩兰乙醇提取物能降低结肠癌RKO细胞中Bcl-2的表达、增加Cleaved caspase-3的表达。结论:佩兰乙醇提取物对结肠癌RKO细胞具有抑制生长、促进凋亡的作用。 展开更多

关键词 佩兰乙醇提取物 结肠癌 rko细胞 凋亡 BCL-2 Cleaved CASPASE-3

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双氢青蒿素通过调控MAPK/PI3K/Akt信号通路抗结直肠癌作用研究

8

作者 徐嘉若 贾丰菁 +1 位作者 陈佳靓 姚广涛 《上海中医药大学学报》 CAS 2024年第2期83-92,共10页

目的:探讨双氢青蒿素(DHA)在体内对人结直肠癌(RKO)细胞的抗癌活性及体外机制。方法:将40只SPF级雄性裸鼠建立RKO荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组及DHA高剂量(200 mg/kg)、低剂量(100 mg/kg)组,每组10只;对比各组裸鼠体质量、肿瘤... 目的:探讨双氢青蒿素(DHA)在体内对人结直肠癌(RKO)细胞的抗癌活性及体外机制。方法:将40只SPF级雄性裸鼠建立RKO荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组及DHA高剂量(200 mg/kg)、低剂量(100 mg/kg)组,每组10只;对比各组裸鼠体质量、肿瘤体积、肿瘤质量、抑瘤率、血清肿瘤坏死因子(TNF-α)水平等;苏木素-伊红(HE)染色观察各组裸鼠肿瘤组织病理学变化;噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(25、50、100μmol/L)DHA干预0、24、48、72 h内对RKO细胞增殖的影响;流式细胞仪、Hoechst 33258检测(0、50、95、150μmol/L)DHA干预48 h后对RKO细胞周期和细胞凋亡的影响;划痕实验观察95μmol/L DHA干预对细胞迁移能力的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测DHA对细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA表达水平的影响;蛋白质印迹法(Western blot)检测DHA对细胞内Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax以及p38-丝裂原活化蛋白激酶(p38-MAPK)、p-p38-MAPK、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、基质金属蛋白酶(MMP-9)等表达水平的影响。结果:200 mg/kg DHA显著降低肿瘤体积和质量,降低血清TNF-α水平,抑瘤率为41.45%;DHA可随浓度的增加而增强对RKO细胞增殖的抑制作用;(50、95、150μmol/L)DHA阻滞RKO细胞周期在G2/M期,且促进RKO细胞凋亡作用随DHA浓度增加而增强;95μmol/L DHA干预12、24 h后可显著降低RKO细胞迁移能力(P<0.01);95μmol/L DHA可显著上调RKO细胞内Caspase-3、Caspase-9mRNA表达水平(P<0.01)以及Bax/Bcl-2 mRNA表达比值(P<0.05);95μmol/L DHA可增加RKO细胞内剪切型Caspase-9(cleaved-Caspase-9)/Caspase-9、Bax/Bcl-2蛋白表达(P<0.01),同时降低MMP-9、p-P38 MAPK、p-PI3K、p-Akt及Akt蛋白表达水平(P<0.01)。结论:DHA有较好的抑制结直肠癌作用,其机制可能为抑制MAPK/PI3K/Akt信号通路,触发RKO细胞内源性凋亡,阻止其增殖� 展开更多

关键词 双氢青蒿素 结直肠癌 rko细胞 细胞凋亡 MAPK/PI3K/Akt信号通路

原文传递

MTA对NCM460和结肠癌RKO细胞增殖和凋亡的影响 被引量：4

9

作者 张青松 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第5期468-469,共2页

目的:探讨甲基硫代腺苷(MTA)对NCM460和结肠癌RKO细胞增殖和凋亡的作用.方法:采用MTT比色技术、Hoechst33258染色技术检测MTA对NCM460和RKO细胞增殖和凋亡的影响.结果:MTA对结肠癌RKO细胞具有明显的抑制增殖和促进凋亡的作用,该作用强... 目的:探讨甲基硫代腺苷(MTA)对NCM460和结肠癌RKO细胞增殖和凋亡的作用.方法:采用MTT比色技术、Hoechst33258染色技术检测MTA对NCM460和RKO细胞增殖和凋亡的影响.结果:MTA对结肠癌RKO细胞具有明显的抑制增殖和促进凋亡的作用,该作用强于对结肠正常上皮细胞NCM460细胞的增殖和凋亡的影响.结论:MTA对RKO细胞具有明显的抗肿瘤活性,对NCM460细胞的毒性较低. 展开更多

关键词 甲基硫代腺苷 结肠/细胞学 rko细胞 结肠肿瘤 细胞凋亡 增殖

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特异性激活G蛋白偶联雌激素受体通过活性氧途径调控结直肠癌细胞迁移 被引量：1

10

作者 刘巧 刘小东 +1 位作者 张兵钱 谭娇 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期868-873,共6页

目的:探讨特异性激活G蛋白偶联雌激素受体(GPER)对结直肠癌(CRC)细胞迁移的作用及其可能的机制。方法:体外培养CRC细胞RKO和SW480,使用0.5或1.0μmol/L的GPER特异性激活剂(G-1)处理CRC细胞,采用CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检... 目的:探讨特异性激活G蛋白偶联雌激素受体(GPER)对结直肠癌(CRC)细胞迁移的作用及其可能的机制。方法:体外培养CRC细胞RKO和SW480,使用0.5或1.0μmol/L的GPER特异性激活剂(G-1)处理CRC细胞,采用CCK-8法、划痕实验和Transwell实验分别检测G-1对CRC细胞增殖、迁移的影响。用q PCR和WB法分别检测G-1及G-1+活性氧(ROS)清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)处理对RKO细胞E-钙黏素(E-Cad)、纤连蛋白(FN)m RNA和蛋白表达的影响,用流式细胞术检测RKO细胞中ROS的水平。结果:经G-1处理后RKO和SW480细胞的迁移能力均明显减弱(均P<0.05),能显著上调细胞中E-cad m RNA及蛋白表达、下调FN m RNA及蛋白表达(均P<0.05)。G-1处理能刺激RKO细胞ROS水平上升,在NAC的作用下,由G-1引起的E-cad、FN蛋白表达变化被部分逆转。结论:特异性激活GPER通过上调ROS水平抑制EMT进程,进而抑制CRC细胞的迁移。 展开更多

关键词 G蛋白偶联雌激素受体 活性氧 结直肠癌 rko细胞 SW480细胞 迁移 上皮间质转化

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miR-143-3p通过靶向EZH2调控结肠癌RKO细胞增殖、迁移和侵袭 被引量：5

11

作者 冯曜宇 张承磊 +3 位作者 张世超 侯丽娟 吴秀灵 罗华友 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期735-741,共7页

目的:探讨miR-143-3p通过靶向果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)调控结肠癌RKO细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。方法:选用2015年3月至2017年7月昆明医科大学第一附属医院手术切除的40例结肠癌患者的癌及... 目的:探讨miR-143-3p通过靶向果蝇zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)调控结肠癌RKO细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制。方法:选用2015年3月至2017年7月昆明医科大学第一附属医院手术切除的40例结肠癌患者的癌及癌旁组织标本,以及结肠癌细胞系COLO320、RKO、CL-11和正常肠黏膜细胞株NCM460,用qPCR法检测结肠癌组织和细胞系中miR-143-3p的表达水平。分别将miR-143-3p mimics、miR-143-3p inhibitor、EZH2 shRNA及阴性对照质粒转染进RKO细胞,用CCK-8法、Transwell小室法分别检测miR-143-3p/EZH2分子轴对RKO细胞增殖、迁移和侵袭的影响,用Western blotting检测RKO细胞中EZH2蛋白的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证miR-143-3p和EZH2的靶向关系。结果:miR-143-3p在结肠癌组织和细胞系中均低表达(均P<0.01)。过表达miR-143-3p显著抑制RKO细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-143-3p靶向EZH2。同时敲降miR-143-3p和EZH2可逆转敲降EZH2对RKO细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用。结论:miR-143-3p通过靶向EZH2并下调其表达水平进而抑制结肠癌细胞的增殖、迁移与侵袭。 展开更多

关键词 miR-143-3p 果蝇zeste基因增强子同源物2 结肠癌 rko细胞 增殖 迁移 侵袭

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呋喃二烯酮对结直肠癌RKO细胞的促凋亡作用 被引量：3

12

作者 江莹 密玉帅 +2 位作者 王小琴 顾超 胡道德 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期223-228,共6页

目的 研究呋喃二烯酮对人结直肠癌RKO细胞凋亡的影响。方法 将不同浓度的呋喃二烯酮溶液(50、100、200、300、400μmol·L^(-1))加入体外培养的RKO细胞中,处理24、48、72 h后,通过CCK-8法检测RKO细胞的活性;用DAPI染色和Annexin V... 目的 研究呋喃二烯酮对人结直肠癌RKO细胞凋亡的影响。方法 将不同浓度的呋喃二烯酮溶液(50、100、200、300、400μmol·L^(-1))加入体外培养的RKO细胞中,处理24、48、72 h后,通过CCK-8法检测RKO细胞的活性;用DAPI染色和Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测药物处理过后细胞凋亡情况;Western blotting检测RKO细胞Bcl-2、Bcl-xl、Bax、凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素C、第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂(Smac/DIABLO)及存活素的蛋白表达情况。结果 呋喃二烯酮处理后24、48、72 h呋喃二烯酮对RKO细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(248.13±5.79)、(154.26±4.87)和(117.40±5.14)μmol·L^(-1),对RKO细胞的毒性呈现时间依赖性。流式细胞术检测显示细胞凋亡率随药物浓度的增加而明显增加。不同浓度呋喃二烯酮作用于RKO细胞后,细胞活性明显受到抑制,且随着呋喃二烯酮浓度的上升,细胞活性显著降低(P<0.05)。呋喃二烯酮能够显著降低线粒体凋亡通路的相关蛋白Bcl-2、Bcl-xl和存活素的表达,升高Bax、AIF、Smac/DIABLO和细胞色素C的含量。结论 呋喃二烯酮能抑制RKO细胞增殖、诱导细胞凋亡,激活细胞内线粒体凋亡途径通路可能是其作用机制之一。 展开更多

关键词 呋喃二烯酮 结直肠肿瘤 rko细胞 细胞凋亡 线粒体通路

原文传递

Sphk1基因对间充质干细胞诱导结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响 被引量：3

13

作者 伍文红 刘诗权 +4 位作者 符振华 覃蒙斌 徐春燕 朱丽叶 黄杰安 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期221-228,共8页

目的:探讨鞘氨醇激酶1(sphigosine kinase 1,SphK1)基因下调对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)诱导的结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响。方法:采用MSC条件培养液(MSC-CM)和对照培养液(Control-CM)分别干预RKO细胞,CCK-8法检测细... 目的:探讨鞘氨醇激酶1(sphigosine kinase 1,SphK1)基因下调对间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)诱导的结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响。方法:采用MSC条件培养液(MSC-CM)和对照培养液(Control-CM)分别干预RKO细胞,CCK-8法检测细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的迁移能力,Western blotting法检测Ki-67抗原(Ki-67)、MMP-2/9、肿瘤干细胞标志物CD44和CD133蛋白的表达。用慢病毒shRNA载体转染RKO细胞抑制SphK1的表达,观察抑制SphK1的表达对MSC-CM诱导的RKO细胞增殖、迁移以及MMP-2/9、CD44和CD133蛋白表达的影响。结果:MSC-CM可时间依赖性促进RKO细胞的增殖(P<0.05),并明显增强细胞的迁移能力(P<0.01)和细胞中Ki-67、MMP-2/9、CD44和CD133蛋白的表达(均P<0.05或P<0.01)。慢病毒shRNA转染明显抑制RKO细胞SphK1的表达,抑制SphK1的表达可显著抑制MSC-CM对RKO细胞增殖和迁移的促进作用(均P<0.05或P<0.01),且明显抑制MSC-CM诱导的Ki-67、MMP-2/9、CD44和CD133蛋白的表达。结论:MSC-CM可促进RKO细胞的增殖和迁移,下调SphK1可通过抑制MMP-2/9、CD44和CD133的表达逆转MSC-CM诱导的细胞增殖和迁移。 展开更多

关键词 鞘氨醇激酶1基因 间充质干细胞 结肠癌 rko细胞 增殖 迁移

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香加皮宝藿苷-Ⅰ抑制结肠癌细胞株SW480和RKO的恶性表型及其作用机制 被引量：2

14

作者 王晓华 李晓亚 +1 位作者 白函瑜 霍炳杰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期228-234,共7页

目的:探讨香加皮宝藿苷-Ⅰ对人结肠癌细胞株SW480和RKO增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响,并对其机制进行初步的探讨。方法:用不同质量浓度(0、5、10、20μg/ml)的香加皮宝藿苷-Ⅰ溶液分别处理结肠癌细胞株SW480和RKO,采用MTT法检测细胞的... 目的:探讨香加皮宝藿苷-Ⅰ对人结肠癌细胞株SW480和RKO增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响,并对其机制进行初步的探讨。方法:用不同质量浓度(0、5、10、20μg/ml)的香加皮宝藿苷-Ⅰ溶液分别处理结肠癌细胞株SW480和RKO,采用MTT法检测细胞的增殖情况,通过细胞克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,通过Transwell方法检测细胞的迁移和侵袭能力,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。通过Western blotting检测C-PARP、Bcl-2与caspase-3蛋白的表达水平,通过RNA-seq检测分析香加皮宝藿苷-Ⅰ对SW480细胞转录组的影响及其可能影响的信号通路。结果:香加皮宝藿苷-Ⅰ能抑制SW480和RKO细胞的增殖、侵袭和迁移,并且能够诱导细胞凋亡和阻滞于细胞G0/G1期。香加皮宝藿苷-Ⅰ处理可上调SW480和RKO细胞株中C-PARP与caspase-3蛋白的表达水平、下调Bcl-2蛋白的表达水平;RNA-seq数据分析显示,SW480细胞DNA复制及ERBB信号通路等相关基因的转录都受到香加皮宝藿苷-Ⅰ的影响。结论:香加皮宝藿苷-Ⅰ通过影响凋亡相关蛋白的表达、细胞DNA复制和ERBB信号通路来诱导细胞凋亡和细胞G0/G1期阻滞,进而抑制人结肠癌细胞株SW480和RKO的恶性表型。 展开更多

关键词 结肠癌 SW480细胞 rko细胞 宝藿苷-Ⅰ 恶性表型 DNA复制 ERBB通路

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泛素连接酶三基序蛋白21对结直肠癌鞘氨醇激酶2的调控作用及其机制

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作者 肖明超 孟昭源 +3 位作者 赵姣姣 方文硕 蔺吉春 马蕾娜 《精准医学杂志》 2022年第4期294-299,共6页

目的探讨泛素连接酶三基序蛋白21(TRIM21)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中鞘氨醇激酶2(SphK2)的调控作用及机制。方法将转染Flag-SphK2的PLC/RPF/5细胞分为a、b、c、d、e组,分别采用表皮生长因子刺激、葡萄糖饥饿处理、过氧化氢刺... 目的探讨泛素连接酶三基序蛋白21(TRIM21)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中鞘氨醇激酶2(SphK2)的调控作用及机制。方法将转染Flag-SphK2的PLC/RPF/5细胞分为a、b、c、d、e组,分别采用表皮生长因子刺激、葡萄糖饥饿处理、过氧化氢刺激、缺氧处理、转化生长因子-β刺激,通过质谱鉴定与SphK2互作的蛋白。将HEK-293T细胞分为f、g、h、i、j、k、l、m、n、o组,f~k组分别转染Flag-SphK2、Flag-SphK2+HA-TRIM21质粒、Flag-SphK2、Flag-SphK2+His-Ubquitin、Flag-SphK2+His-Ubquitin+1μg HA-TRIM21质粒、Flag-SphK2+His-Ubquitin+4μg HA-TRIM21质粒,l~o组分别分别转染HA-TRIM21质粒0、0.3、0.6、0.9μg,f~g组进行免疫共沉淀实验鉴定SphK2与TRIM21蛋白的相互作用情况,h~k组进行体内泛素化实验鉴定TRIM21对SphK2泛素化水平的影响,l~o组进行Western-blot实验检测TRIM21过表达对SphK2蛋白水平的影响。将His-TRIM21、GST-SphK2蛋白混合液分为p、q组,分别加入琼脂糖珠、谷胱甘肽琼脂糖珠,进行蛋白体外结合实验鉴定SphK2与TRIM21蛋白的相互作用情况。将EP管分为r、s、t三组,每组分别加入GST-SphK2+E1/E2/Ub、GST-SphK2+His-TRIM21、GST-SphK2+His-TRIM21+E1/E2/Ub蛋白,进行体外泛素化实验鉴定TRIM21对SphK2泛素化水平的影响。将RKO细胞分为u、v、w、x四组,各组分别感染LV-sgTRIM21-1、LV-sgTRIM21-2、LV-sgTRIM21-3、LV-sgControl慢病毒,采用Western-blot实验检测TRIM21敲除对RKO细胞SphK2蛋白水平及半衰期的影响,采用CCK-8实验检测TRIM21敲除对RKO细胞5-氟尿嘧啶(5-Fu)敏感性的影响。结果质谱分析、免疫共沉淀和蛋白质体外结合实验显示TRIM21与SphK2存在蛋白互作。体内、体外泛素化实验确定TRIM21介导SphK2发生多聚泛素化。在HEK-293T细胞中,TRIM21的外源过表达导致SphK2蛋白水平上调(F=196.22,P<0.05)。与x组相比,TRIM21敲除的RKO细胞系中SphK2蛋白表达水平降低、SphK2蛋白半衰期缩短、对5-Fu的敏感性增加( 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 泛素连接酶 鞘氨醇激酶2 泛素化 HEK-293T细胞 PLC/RPF/5细胞 rko细胞 体外研究

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索拉非尼对人RKO结肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响

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作者 刘蒙蒙 倪谦枝 +5 位作者 李晶晶 谢东 陈天伟 高振军 黄继英 庄一心 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第3期433-437,共5页

目的研究索拉非尼对人RKO肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法将人肠癌RKO细胞给予不同浓度(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L)的索拉非尼处理,MTT法检测索拉非尼对RKO细胞增殖的抑制作用,确定半数抑制浓度(IC_(50)),设为实验... 目的研究索拉非尼对人RKO肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响。方法将人肠癌RKO细胞给予不同浓度(0.5、1.0、5.0、10.0、20.0、40.0μmol/L)的索拉非尼处理,MTT法检测索拉非尼对RKO细胞增殖的抑制作用,确定半数抑制浓度(IC_(50)),设为实验组。对照组为二甲基亚砜处理。针对两组细胞,通过细胞克隆形成平板法检测增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化,同时通过Western blot法检测细胞内凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8和PARP的表达水平。结果索拉非尼对RKO细胞增殖有抑制作用,并呈浓度依赖关系,索拉非尼对RKO细胞株作用的IC_(50)为10.0μmol/L。与对照组比较,索拉非尼(10.0μmol/L)可以抑制RKO细胞克隆形成能力(P<0.001),并提高细胞凋亡率[(32.53±6.64)%vs(4.47±2.09)%,(P<0.01)],影响细胞周期(P<0.01),促进凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8和PARP的表达水平(P<0.05)。结论索拉非尼具有抑制人肠癌RKO细胞的增殖能力,其机制可能和促进RKO细胞凋亡、影响细胞周期有关。 展开更多

关键词 索拉非尼 rko细胞 细胞周期 细胞凋亡

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信号转导与转录活化因子6过表达和抑制表达对结肠癌RKO细胞增殖及迁移的影响

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作者 杨青青 李晓云 +3 位作者 陈健 彭翼飞 马文丽 郑文岭 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期668-674,共7页

目的:分别构建信号转导与转录活化因子6(signal transducer and activator of transcription6,STAT6)过表达及RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,研究STAT6基因表达对人结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响。方法:以人胚肾HEK293FT细... 目的:分别构建信号转导与转录活化因子6(signal transducer and activator of transcription6,STAT6)过表达及RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,研究STAT6基因表达对人结肠癌RKO细胞增殖和迁移的影响。方法:以人胚肾HEK293FT细胞cDNA为模板,PCR扩增STAT6基因的完整开放阅读框(open reading frame,ORF)片段,化学合成针对STAT6基因的RNAi靶向单链片段,通过pLVTHm慢病毒载体三质粒包装系统对以上2种片段进行慢病毒颗粒包装;再用病毒感染结肠癌RKO细胞,获得稳定表达STAT6-ORF和STAT6-RNAi的细胞株。RT-PCR和蛋白质印迹法检测稳定感染细胞株中STAT6基因的表达情况,CCK8法检测细胞活性的变化,Transwell实验检测细胞迁移能力的变化。结果:成功构建STAT6-ORF和STAT6-RNAi慢病毒表达载体,并获得稳定表达STAT6的相应RKO细胞株。与对照组细胞相比,STAT6-ORF转染组细胞的增殖速度加快不明显(P=0.609),细胞迁移能力显著增强(P<0.01);而STAT6-RNAi转染组的细胞活性显著降低(P<0.001),迁移能力显著下降(P<0.01)。结论:STAT6可能是促进结肠癌细胞增殖和迁移的重要转录因子。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 STAT6转录因子 基因表达 RNA干扰 细胞增殖 细胞迁移分析 rko细胞

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三叶青提取物对人结肠癌细胞系PKO细胞VEGF和HIF—1α蛋白表达的影响 被引量：2

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作者 汪珍 王晓华 茅文亭 《中国基层医药》 CAS 2009年第6期1020-1021,共2页

目的观察三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞VEGF和HIF-1α蛋白表达的影响，初步探讨其可能的机制。方法采用体外细胞培养技术，用西部印迹法和免疫组化法观察三叶青提取物对RKO细胞的VEGF和HIF-1α蛋白表达改变。结果三叶青提取物能... 目的观察三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞VEGF和HIF-1α蛋白表达的影响，初步探讨其可能的机制。方法采用体外细胞培养技术，用西部印迹法和免疫组化法观察三叶青提取物对RKO细胞的VEGF和HIF-1α蛋白表达改变。结果三叶青提取物能在CoCl2（150μM）模拟低氧时显著上调RKO细胞HIF-1α蛋白表达，并上调HIF-1的主要靶基因VEGF的蛋白表达水平。结论三叶青提取物对人结肠癌细胞系RKO细胞有抑制肿瘤血管形成的抗增殖作用。 展开更多

关键词 三叶青提取物 rko细胞 VEGF HIF-1Α

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叶绿酸铜钠对RKO肠癌细胞系生物学行为的影响 被引量：1

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作者 刘建 郑树 +3 位作者 邹璎 毛捷鸿 张磊 董琦 《肿瘤学杂志》 CAS 2011年第12期889-892,共4页

[目的]研究叶绿酸铜钠(CHL)体外抑制RKO肠癌细胞系的作用及机制。[方法]不同浓度CHL作用于RKO细胞,倒置显微镜下观察形态学变化;流式细胞仪观察CHL对RKO肠癌细胞凋亡的诱导作用;免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素D1(Cy-clin... [目的]研究叶绿酸铜钠(CHL)体外抑制RKO肠癌细胞系的作用及机制。[方法]不同浓度CHL作用于RKO细胞,倒置显微镜下观察形态学变化;流式细胞仪观察CHL对RKO肠癌细胞凋亡的诱导作用;免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素D1(Cy-clin D1)、环氧化酶-2(COX-2)的表达。[结果]CHL对RKO细胞有增殖抑制作用,24h IC50值为0.523±0.061mg/ml,48h IC50值为0.314±0.058mg/ml。随着CHL浓度的增高,RKO细胞抑制率明显上升;CHL能诱导RKO细胞G1期阻滞、降低S期,从而抑制肿瘤细胞增殖。CHL对RKO细胞凋亡未见明显影响。CHL能减少RKO细胞PCNA和COX-2蛋白表达,并具有一定的浓度依赖性。[结论]CHL能明显抑制RKO大肠癌细胞的生长,并且呈一定的浓度和剂量效应,抑制作用可能与PCNA、COX-2表达下调及细胞G1期阻滞有关。 展开更多

关键词 叶绿酸铜钠 结肠肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 rko细胞

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lncRNA ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞RKO增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响

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作者 侯歌 张家杰 +5 位作者 肖陈虎 宋锐 黄洋洋 袁金金 柴婷 刘宗文 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2021年第4期485-492,共8页

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响及作用机制。方法:选取25例结直肠癌组织和对应的癌旁组织,采用qRT-PCR法检测组织中ZSWIM8-AS1和miR-15b表达水平。体外培养结直肠癌细胞RKO... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)ZSWIM8-AS1对结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移和放射敏感性的影响及作用机制。方法:选取25例结直肠癌组织和对应的癌旁组织,采用qRT-PCR法检测组织中ZSWIM8-AS1和miR-15b表达水平。体外培养结直肠癌细胞RKO,双荧光素酶报告基因实验验证ZSWIM8-AS1和miR-15b调控关系。分组培养RKO细胞(pcDNA组、pcDNA-ZSWIM8-AS1组、anti-miR-NC组、anti-miR-15b组、pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-NC组和pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-15b组),采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞存活率,双染法检测各组细胞凋亡率,Transwell小室检测各组细胞迁移,克隆形成实验检测各组细胞放射敏感性,Western blot法检测各组细胞中Ki-67、Cleaved Caspase-3、N-cadherin、E-cadherin的蛋白表达水平。结果:与癌旁组织比较,结直肠癌组织中ZSWIM8-AS1表达降低(P<0.001),miR-15b表达升高(P<0.001)。ZSWIM8-AS1在RKO细胞中负调控miR-15b表达。与pcDNA组或anti-miR-NC组比较,pcDNA-ZSWIM8-AS1组和anti-miR-15b组细胞存活率、迁移数及Ki-67和N-cadherin蛋白表达均降低(P均<0.001),凋亡率及Cleaved Caspase-3和E-cadherin蛋白表达升高(P均<0.001),增敏比分别为1.747、1.977。与pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-NC组比较,pcDNA-ZSWIM8-AS1+miR-15b组细胞存活率、迁移数及Ki-67和N-cadherin蛋白表达升高(P均<0.001),凋亡率及Cleaved Caspase-3和E-cadherin蛋白表达降低(P均<0.001),增敏比为0.645。结论:ZSWIM8-AS1在结直肠癌组织中表达降低,上调其表达可通过靶向负调控miR-15b抑制结直肠癌细胞RKO增殖和迁移,并促进细胞凋亡和对放射线的敏感性。 展开更多

关键词 结直肠癌 ZSWIM8-AS1 miR-15b 放射敏感性 rko细胞

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